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HEMICLONING TECHNOLOGY IN THE RABBIT . Autor: ESCRIBÁ PÉREZ M. JOSE. Año: 1999. Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA
. Centro de lectura: INGENIEROS AGRÓNOMOS. Centro de realización: ESCUELA TÉCNICA
SUPERIOR DE INGENIEROS AGRÓNOMOS.
Resumen: La criopreservación de la información genética procedente
exclusivamente de las hembras de mamífero es de notable interés en diversas áreas: reproducción aistida, mejora genetica y selección, así como en la conservación de la biodiversidad.
De entre las posibles estrategias teóricas para lograr esto: criopreservación de oocitos o de céluas somáticas, la criopreservación de embriones partenognotas fue puesta a punto y evaluada favorablemente para conejo, por cuanto se obtuvo
descendencia viables a apartir de partenogenota.
Brevemente,la tecnología de hemiclonación supone la obtención de un embrión partenogenota haplide a partir de la activación artificial de un oocito MII, su cripreservación y su posterior combinación en un ambiente cigótico pre-activado que
únicamente conserva el por núcleo macho. Por esta metodología, queda reconstituida la dotación diploide heteroparental, imprescindible para obtener descendencia a partir de tales partenogenotas.
Para la obtención de descendencia viable sólo resta la transferencia de los diploides así reconstituidos a hembras receptoras por la técnica de transferencia de embriones.
En esta tesis se logró obtener por primera vez, en una especie diferente a ratón, embriones preimplantatorios partenogenotas haploides.
El desarrollo partenogenota haploide obtenido a 32 horas de cultivo, alcanzó el estadio de mórula de 32 células (20% por oocito recuperado). Tales embriones fueron individualmente criopreservados por un procedimiento de equilibrio. Su
descongelación y posterior desagregación por un proceso químico, permitió contabilizar el número real de células haplides donantes disponibles por embrión partenogenota desagregado (32,5). Empleando un 25% de las mismas, se reconstruyó la dotación
diploide hetroparental por transplante nuclear según la metodología antes descrita.
Los embriones deiplides reconstituidos se desarrollaron in vitro con niveles elevados de eficacia (69% a mórula/blastocisto e incluso a blastocisto escapado: 44%).
La plena validación de la tecnología de hemiclonación requiere de la evaluación de la capacidad de desarrollo a término de los embriones reconstruidos experimentalemente, lo que se realizó por tranferencia embrionaria bilateral doble. A 27,5
días post-transferencia, se obtuvieron por cesárea, descendencia viable (20% por embrión experimental transferido). De un embrión partenogenota, la descendencia se redujo a un único individuo, de tres de ellos se obtuvieron dos descendientes e
incluso de uno, se lelgarona obtener tres hemiclones vivos, habiéndose comprobado por cruzamientos no emparentados que los 8 indiviudos que sobrevivieron a la edad reproductiva (4 machos/ 4 hembras) era fértiles.
En conclusió, las 4 etapas clave de la tecnología de hemiclonación han sido cubiertas exitosamente, la eficacia alcanzada en cada etapa ha supuesto que la tecnología de hemiclonación pueda y aplicarse, en nuestro contexto, para la fundación de
nuevas líneas de conejo. ESTUDIO ECOGRAFICO DEL CUERPO LUTEO Y SU RELACION CON LA CAPACIDAD DE PRODUCCIÓN DE PROGESTERONA EN
EL GANADO VACUNO. DIAGNÓSTICO PRECOZ DE GESTACIÓN POR ECOGRAFÍA DEL CUERPO LUTEO. Autor: ALEGRE
GUTIERREZ BEATRIZ. Año: 1999. Universidad: LEON. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA DE LA UNIVERSIDAD DE LEÓN.
Resumen: Se
estudia la evolución de las características ecográficas de las estructuras ováricas, con especial referencia a los cuerpos lúteos de vacas cíclicas y vacas en los primeros 21 días de gestación, siguiendo su evolución estructual y ecogénica, todo
ello relacionado con su capacidad de producción de progesterona mediante su determinación en plasma.
Así mismo, se estudia la eficacia de la ecografía del cuerpo lúteo a los 21 días tras la inseminación como método precoz de diagnóstico de gestación en la vaca.
La prevalencia encontrada de los cuerpos lúteos cavitarios, en vacas frisonas no gestantes, es cuatro veces superiro a la prevalencia encontrada en vacas gestantes, (18,36% vs 4,5%). En ambos casos, la presencia de la cavidad luteal,
independientemente de su tamaño, no afecta a la capacidad funcional, toda vez que los niveles de progesterona en sangre son similares.
Las vacas gestantes tienen un area y un volumen luteal superior a las vacas no gestantes a partir del día 7 tras la inseminación, a excepción del día 14 en que los valores son prácticamente iguales. A partir de este momento, en las vacas que no
quedaron a gestantes se observa una velocidad de disminución importante, mientras que los valores correspondientes a las vacas que comienzan una gestación se estabilizan, llegando a ser, en ambos casos y en ambos parámetros ecográficos, las
diferencias altamente signficativas entre las vacas gestantes y no gestantes, los días 21 y 22 tras la inseminación.
Las concentraciones de progesterona plasmática son similares en ambos tipos de vacas -gestantes y no gestantes-, hasta el día trece tras la inseminación, a partir de este momento, se hace muy superiores en las vacas gestantes, a excepción del
día 15. En todo caso las diferencias son significativas a favor de las gestantes los días 14,16,18 y 19, muy significativas el día 20 y altamente significativas los días 21 y 22.
Teniendo en cuenta las características ecográficas del cuerpo lúteo su tamaño y volumen sirven como diagnóstico de gestación precoz el día 21 postinseminación.
ESTUDIO SOBRE LA ESTRUCTURA Y FUNCIÓN DE LA MUCOSA OVIDUCTAL Y EL MESOTELIO PERITONEAL DE LA
VACA . Autor: YANIZ PÉREZ DE ALBENIZ JESÚS. Año: 1999. Universidad: LLEIDA. Centro de lectura: INGENIEROS
AGRÓNOMOS. Centro de realización: UNIVERSITAT DE LLEIDA.
Resumen: El objetivo general de esta tesis fue realizar un estudio anatómico de la mucosaoviductal y mesotelio peritoneal en la vaca,y evaluar su repercusión en el transporte espermático tras la inseminacion
intrauterian e intraperitoneal. El infundíbulo oviductal presenta un lado amplio y un lado estrecho. La mucosa del lado amplio posee un sistema de cordones interconectados de escasa altura que convergen distalmente formando los pliegues primarios.
Los pliegues de la lado estrecho emergen repetidamente desde el borde libre y se fusionan hacia elorificio abdominal. Hay pliegues a lo largo de la luz del oviducto. Las áreas entre los pliegues muestran una organización muy compleja a lo largo de
la luz del oviducto bovino. Los espacios entre pliegues están ocupados por pliegues secundarios pequeños e interconectados que se unen para formar un sistema de saculaciones. En el infundíbulo, estos fondos de saco se abren hacia el ovario,mientras
que los fondos de saco presentes en el istmo caudal en la unión útero-tubárica se abren hacia el útero. Se observarón cambios cíclicos, reginales e interregionales marcados en el epitelio de los oviductos estudiados.
Las características superficiales de las células mesoteliales que cubren el tracto reproductor y ligamentos accesorios se examinaron en vacas cíclicas mediante microscopía electrónica de barrido y análisis de imágenes. En la cara externa del
infundíbulo, la mucosa oviductal sobrepasa el margen libre, formando una banda continua que mide entre 0,25 y 1 cm de anchura. Este epiteliooviductal muestra variaciones cíclicas con una predominancia de células ciliadas durante la fase folicular.
Por otro lado, las células mesoteliales se encuentran cubiertas por microvellosidades. La superficie peritoneal en el útero y mesometrio tienen una mayor densidad y longitud de microvellosidades y una menor área celular superficial que el oviducto y
estructuras adyacentes.Tras la inseminación intraperitoneal de dos vacas se encontraron numerosos espermatozoides unidos a las superficies mesoteliales. Estos resultados indican que hay variaciones regionales en la superficie serosa que cubre el
genital de la vaca y sus ligamentos asociados.
Finalmente se describen los resultados de un estudio sobre la eficiencia del transporte retrógrado de espermatozoides tras la inseminación intraperitoneal. Para ello utilizaron espermatozoides vivos y muertos a diferentes concentraciones y se
evaluó la cantidad de espermatozoides en muestras de moco a las 2,6,12 t 24 horas tras la inseminación. Treinta y seis vacas se inseminaron intraperitonealmente con 30,45 y 90 millones de espermatozoides. Cuatro vacas se inseminaron con 90 millones
espermatozoides en el útero y sirvieron de grupo control Todas las vacas se insiminaron, hacia el final de estro. Tras la inseminación intrauterina, el número de espermatozoides disminuyó, pero se recogieron espermatozoides mótiles o inmóviles en
todas las vacas. En las vacas inseminadas intraperitonealmente con 90 millones de espermatozoides, se recuperaron espermatozoides del cérvix entre las 6 y 24 horas. Se recogió un mayor número de espermatozoides cuando se inseminó con espermatozoides
muertos que con espermatozoides vivos. Solamente se recogieron espermatozoides inmóviles tras la inseminación intraperitoneal tanto con espermatozoides vivos como con muertos. Nuestros resultados muestran que, tras la inseminación intraperitoneal,
hay un transporte pasivo de espermatozoides cerca de la ovulación desde la cavidad peritoneal hacia el tracto genital, y sugieren uan mayor retención espermática dentro del tractogenital cuando se utilizaron espermatozoides vivos que cuando se
utilizaron espermatozoides muertos. CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD OVARICA ANUAL Y LA DINAMICA FOLICULAR EN OVEJAS DE RAZA
RIPOLLESA. Autor: GIBBONS ALEJANDRO EDUARDO. Año: 1998. Universidad: ZARAGOZA. Centro de lectura: VETERINARIA
.
Resumen: Se
proporciona información de referencia sobre la actividad reproductiva anual y se caracteriza la dinámica folicular en época de actividad cíclica estral y durante el anestro de las ovejas de raza Ripollesa. La actividad estral durante el verano y
otoño fue elevada (ovejas cíclica, 833,8%), siendo mínima (39%) para el primer semestre del año. La tasa de ovulación presentó una amplia variación mensual, con valores mínimo en primavera y máximo en el verano (1.1-1..6 cuerpos lúteos por oveja
respectivamente) La dinámica folicular en el anestro se caracteriza por una mayor presencia folicular. A nivel individual, durante los dos períodos estudiados, se observaron diferencias significativas en la presencia folicular, indicando la
importancia de los factores intrínsicos de cada individuo en la dinámica folicular. Una tasa de atresia elevada, una reducción en el número de folículos menores en crecimiento y un considerable tamaño folicular preovulatorio caracterizan a la raza
Ripollesa como de baja a media prolificidad. Se presenta en la fase folicular un incremento rápido del tamaño folicular que se traduce en un aumento del número de folículos mayores en crecimiento y una redución del número de folículos menores en
crecimiento. Los folículos destinados a ovular pueden presentar un crecimiento rápido terminal post luteólisis o bien alcanzar un diametro preovulatorio hacia el final de la fase luteal y mantener su viabilidad (latencia folicular) hasta el momento
de la ovulación. El día de la emergencia del folículo preovulatorio fue al azar y no se observo un modelo o patrón de crecimiento folicular ovulatorio. La presencia y emergencia folicular continua caracterizan la ausencia de crecimiento y
dominancia folicular en el anestro y en la fase luteal. La técnica de modelos y observaciones laparoscópicas permite un seguimiento controlado, exhaustivo y real de la dinámica folicular en el ovino. ANALISIS OBJETIVO DE LA MOTILIDAD ESPERMATICA: EVALUACION DE LOS ESPERMATOZOIDES DE VERRACO Y SU
RELACION CON LA FERTILIDAD. Autor: BLANCO PALAU OLGA M.. Año: 1998. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: La incorporación de la metodología CASA
(Computer-Assisted Sperm Analysis) en el estudio de la motilidad de los espermatozoides de las especies domésticas permite evaluar la relación que existe entre los parámetros de motilidad y los parámetros de fertilidad. Sin embargo, antes de
realizar estos estudios, es necesario comprobar la exactitud del sistema, así como normalizar los valores de motilidad para las diferentes especies. El objetivo genérico de este estudio ha sido evaluar la exactitud de un sistema de análisis de la
motilidad espermática asistida por ordenador (Sperm Class Analyzer: SCA), así como conocer los parámetros de motilidad en espermatozoides de cerdo diluidos, conservados y tratados para fecundación in vitro. Finalmente, realizamos un estudio de campo
para evaluar la relación entre los parámetros de motilidad obtenidos mediante el sistema SCA y la fertilidad referida a tasa de concepción y prolificidad. En el primer bloque experimental se estudió la exactitud y la repetibilidad del SCA, así como
la relación entre los resultados obtenidos con este sistema y la observación directa mediante microscopía de contraste de fases. Inicialmente se evaluó si el programa de clasificación de categorías (estático, móvil, lento, medio, rápido y rápido
progresivo) era similar a la clasificación que se podía hacer subjetivamente por un evaluador experimentado mediante un sistema de reproducción en televisión de imágenes grabadas. Los resultados presentaron pequeñas diferencias en el análisis. Es de
destacar que el sistema SCA incorporó como espermatozoides al análisis elementos de la muestra que no lo eran, aunque el porcentaje de estos elementos en la muestra fue bajo, no alterando los resultados globales. Asimismo, el 3'5% de los
espermatozoides no fueron reconocidos por el sistema de análisis automático, además de clasificar alguna trayectoria de forma errónea. Tras comprobar el error intrínseco del sistema se evaluó que el sistema computaba como móviles solamente aquellos
espermatozoides que presentaban movimiento. Para ello se utilizó un modelo con espermatozoides muertos obtenidos mediante un sistema seriado de congelación-descongelación rápida y su adición, en proporciones del 25%, 50% y 75%, a muestras de
espermatozoides móviles. No existieron diferencias significativas (P>0,05) entre los porcentajes de espermatozoides observados y esperados para las diferentes categorías. A continuación, se evaluó si el porcentaje de motilidad estimado
subjetivamente mediante microscopía de contraste de fases era similar al obtenido de forma automática mediante el SCA. Los resultados obtenidos demostraron una correlación significativa (P70%, 50%-70% y
FECUNDACION IN VITRO EN GANADO BOVINO: ALTERNATIVAS DE CULTIVO Y CONGELACION DE EMBRIONES.
Autor: DIAZ DIAZ ELENA. Año: 1998. Universidad: LEON. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: Se estudia la
aplicación de la técnica de fecundación in vitro tanto en ovocitos procedentes de ovarios de matadero como en ovocitos obtenidos por punción transvaginal guiada ecográficamente
Los estudios de lavado muestran que no existe influencia de dichos medios en los porcentajes de blastocistos obtenidos a los siete días de cultivo. En la maduración el medio compuesto por TCM-199 bicarbonato suplementado con 10% de FCS, lul/ml
de 17 beta estradiol y 20 ml/ml de FSH fue el que proporcionó mayores tasas de división. En la etapa de cultivo el medio químico SOF permitió obtener mayores porcentajes de blastocistos que el sistema de cocultivo con células VERO. Los estudios de
congelación realizados parecen demostrar la existencia de un efecto del medio de cultivo sobre la supervivencia embrionaria. La calidad de los ovocitos obtenidos mediante OPU fue inferior a la de los recuperados mediante punción de ovarios de
matadero, por lo que se utilizaron sistemas de maduración alternativos, observándose mejores resultados con el sistema de cocultivo. VALORACION DE LAS TECNICAS DE SUPEROVULACION Y TRANSFERENCIA DE BLASTOCITOS (MOET) EN OVEJAS
SEGUREÑAS MENORES DE 10 MESES, VIRGENES Y EN PERIODO DE ANESTRO ESTACIONARIO. Autor: CARACUEL
GARCIA ANGEL MANUEL. Año: 1998. Universidad: CORDOBA. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: 64 ovejas de raza Segureña, 21 donantes (todas menores
de 10 meses) y 43 receptoras, se sincronizaron con esponjas vaginales (40 mg FGA) durante 12 días. A las receptoras se les aplicó 400 U.I. de EcG el día que se retiró el tratamiento de progrstánenos.
La superovulación se realizó en las donantes con 8 inyecciones de 0,75 ml de Ovagen los días 10, 11, 12 y 13 desde la colocación de las esponjas, con un intervalo de 12 horas. A las 60 h. de la retirada de las esponjas se realizó la
espermatización manual intrauterina, vía laparoscópica, de las donantes con 100 millones de espermatozodes. A las 96 h. se realizó el lavado de los cuernos uterinos, vía laparoscópica, transfiriendose dos blastocitos por receptora en fresco. El 98%
de las receptoras salieron a celo, en un intervalo de 32,1+3,01 h. y el grado de asincronia entre donante-receptora no fue mayor de 5 horas. La tasa de ovulación fue de 7,66+1,00 CL, con una eficacia de lavado del 76,65%+5,54. La valoración de los
blastocitos, según la escala de Ball y cols. (1992) fue de 2,27+0,05 en cuanto a los viables; siendo 6 los blastocitos obtenidos de media por donante, de los cuales 4,53 era viables (76,1%). El número de gestaciones conseguido fue del 65,11% y la
viabilidad embrionaria del 47,67%. Se obtuvieron 2,1+0,47 corderos por donante tratada y 0,95+0,12 corderos nacidos/receptora. PRODUCCION Y CONGELACION SEMINAL EN LA VARIEDAD MAJORERA DE LA AGRUPACION CAPRINA CANARIA.
Autor: CABRERA MARTIN FERNANDO. Año: 1998. Universidad: LAS PALMAS DE GRAN CANARIA. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: Se recogió semen a 7
machos de la variedad Majorera de la Agrupación Caprina Canaria (A.C.C.) durante 14 meses consecutivos, y congeló el obtenido durante tres épocas distintas a lo largo del año para estudiar posibles diferencias estacionales en la calidad del
eyaculado y su congelabilidad. No se observó diferencia atribuible al efecto de la estación en el caso de la producción seminal, pero si en el de la concentración espermática, con valores mínimos durante el otoño y máximos durante la primavera.
En cuanto a la congelabilidad del semen, se valoró la efectividad del "lavado" de los espermatozoides antes de la dilución, y la de 4 diluyentes, 3 a base de Tris con difrentes concentraciones de yema de huevo (1,5%,6% y 12%) y uno de leche. El
"lavado" mejoraba la calidad del semen diluido en Tris con un 1,5% de yema de huevo, pero no la del diluido en Tris con un 12% de yema; este último diluyente se mostró como el más efectivo de los cuatro para la congelación del semen, y se apreció
mejor calidad en el semen congelado durante el invierno. RESPUESTA DEL SEMEN CONGELADO DE VERRACO EN LA FECUNDACION IN VITRO. Autor: CORDOVA IZQUIERDO ALEJANDRO. Año: 1998. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: El objeto del
presente trabajo fue determinar la respuesta del semen congelado de verraco en la fecundación in vitro, teniendo en cuenta parámetros no analizados como fase previa a la congelación, temperatura final a la congelación en el interior de las pajuelas,
estado de la cronomatina nuclear espermática y capacidad de conservación a 15 grados C del semen descongelado. Se encontró que en la fase previa a la congelación, disminuyeron los porcentajes analizados de penetración total, monospermia y de
polispermia. Los mejores porcentajes de fecundación se obtuvieron a la temperatura final de 15 grados C. Las pajuelas de 5 ml. mostraron mejores resultados de fecundación. Los mejores resultados de fecundación a 15 grados C durante cinco horas fue
para semen descongelado de pajuelas de 5 ml. La congelación y descongelación incrementó el grado de condensación de la cromatina espermática a la vez que disminuyó la capacidad fecundante de los espermatozoides descongelados.
EMBRIONES CAPRINOS PRODUCIDOS IN VITRO: ESTUDIO CITOGENETICO Y ULTRAESTRUCTURAL DE OVOCITOS
MADURADOS Y FECUNDADOS IN VITRO. Autor: VILLAMEDIANA MONREAL PATRICIA. Año: 1998. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: El
objetivo de la tesis ha sido estudiar las transformaciones producidas en la Zona Pélucida después de la Maduración in vitro, así como las anomalías cromosómicas de los ovocitos y de los embriones de 2 y 4 células provinientes de ovocitos de cabras
adultas y prepúberes madurados, fecundados y cultivados in vitro. Para esta tesis se han realizado tres estudios: Estudio 1: Cambios en la superficie de la Zona Pelúcida después de la MIV de ovocitos caprino Estudio 2: Evaluación citogenética de
ovocitos de cabra madurados in vitro.
Estudio 3: Análisis citogenético de embriones de 2 y 4 células derivados de ovocitos de cabra fecundados in vitro. Los resultados obtenidos son: a) la superficie de la ZP de los ovocitos MIV presentan características ultraestructurales similares
a la de los ovocitos ovulados y no existen diferencias en los cambios de la ZP de los ovocitos de cabras adultas y prepúberes. b) Los ovocitos MIV presentan un alto porcentaje que alcanzan la Metafase II.
No hay diferencias entre ovocitos de adultas y prepúberes. Sin embargo se ha observado mayor incidencia de Metafase II diploides en ovocitos de prepúberes que de adultas.
c) El estudio citogenñetico de los embriones de 2 y 4 células revela una alta incidencia de embriones haploides, con independencia del macho y de la edad de la hembra donante de ovocitos. ESTUDIO SOBRE LA RESISTENCIA AL ESTRES OSMOTICO DE ESPERMATOZOIDES PORCINOS Y EQUINOS.
Autor: CAIZA DE LA CUEVA FRANCISCO. Año: 1997. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION ANIMAL..
Resumen: Determinar la resistencia de los espermatozoides de cerdo y equino a
medios anisoosmóticos, con el objeto de valorar los tests hipoosmóticos en el análisis seminal equino. La resistencia de los espermatozoides a los cambios de osmolaridad, para profundizar en los conocimientos de los mecanismos de resistencia a la
congelación y descongelación, intentando establecer un test predictivo de la capacidad de supervivencia al proceso de crioconservación basado en la resistencia osmótica.
Se utilizaron muestras de semen equino y porcino (varias razas). Los medios de incubación tenían como base glicerina, glucosa, NaCl, ovabaina amiloide.
Los resultados nos indican que existe una correlación directa entre los cambios de osmolaridad, tiempo, temperatura y medios de incubación. Se establece que las reacciones varían entre las especies y entre eyaculados, concluyendo en forma
general que los medios anisoosmóticos alteran la respuesta de los espermatozoides. No se aconseja una prueba basada en el estrés osmótico para predecir la congelabilidad de una muestra de semen. ESTUDIO DE DIFERENTES MEDIOS DE CULTIVO PARA LA MADURACION IN VITRO DE OVOCITOS OVINOS PROCEDENTES
DE OVARIOS DE MATADERO. Autor: ECHEGARAY ARTAJO ARANTXA. Año: 1997. Universidad: ZARAGOZA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO:
PATOLOGIA ANIMAL-REPRODUCCION ANIMAL.
Resumen: El objetivo del presente trabajo experimental, ha sido
fijar un protocolo que permitiera la producción de embriones de cordera in vitro. Se comprobó que las corderas prepuberes de 3 meses de edad, se pueden considerar como donadoras de ovocitos para la producción de embriones in vitro, presentando una
baja competencia de desarrollo, traduciendose en bajos porcentajes de maduración in vitro., esta competencia se ve elevada incubando previamente los complejos cumulus-ovocitos en un medio con altas concentraciones de 17-b-estradiol(12,5 ugr/ml).
Así mismo se estudia el efecto de diferentes suplementos séricos y hormonales añadidos al medio de maduración. El medio M199 suplementado con un 10% de suero fetal, resulta un medio claramente insuficiente para la MIV de ovocitos de cordera. La
adición de un 10% de suero de oveja adulta ofrece los mejores resultados de viabilidad, junto con el medio suplementado con un 10% de suero fetal y 1UI de hCG.
La adición de la hormona, junto con el suero de oveja adulta no parece ofrecer ninguna ventaja, a la vista de los resultados.
La incubación en medio M199 más 17-Bestradiol, en periodos de tiempo de una hora y cinco horas, permite observar cambios a nivel del nucleo del ovocito, observandose una mayor presencia de nucleolos en ambos casos en relación a aquellos ovocitos
no sometidos a incubación. INFLUENCIA DE LA CANTIDAD Y CALIDAD DEL ALIMENTO SOBRE LAS PERDIDAS EMBRIONARIAS Y LA
ESTACIONALIDAD SEXUAL EN GANADO OVINO: REGULACION HORMONAL, OPOIIDEA Y CATECOLAMINERGICA. Autor: LOZANO CANTIN JOSE M.. Año: 1997. Universidad: ZARAGOZA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL Y CIENCIA DE LOS ALIMENTOS PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION ANIMAL.
Resumen: La Tesis Doctoral se planteó con dos objetivos
principales:
- Estudiar el efecto de la subnutrición sobre el desarrollo y mortalidad embrionaria antes de la implantación, así como el papel de la progesterona tanto a nivel local (venas ovárica y uterina), como a nivel periférico (vena yugular), como en su
distribución endometrial. Con este fin se plantearon dos experimentos en los que los principales resultados fueron el menor desarrollo embrionario observado en ovejas subnutridas el día 8 tras la cubrición en el primer experimento, relacionado sin
duda con el menor contenido endometrial de progesterona observado en ovejas subnutridas el día 5 tras los celos en el segundo. En el segundo experimento se utilizaron ovejas cíclicas pero vacías para evitar la posible influencia del embrión sobre la
secreción y distribución de progesterona. Ni la síntesis de progesterona por el cuerpo lúteo in vitro, ni la secreción local o periférica de progesterona presentaron relación con el efecto de la nutrición sobre el desarrollo embrionario. Los dos
experimentos mostraron que la medición de la concentración periférica de progesterona es insuficiente en el estudio de la mortalidad embrionaria.
- El segundo objetivo fue estudiar el efecto de la subnutrición sobre la secreción de LH al inicio y al final del anoestro estacionario y en el primer mes del anoestro postparto. Asímismo, se estudió la implicación de diversos neurotransmisores
en la inhibición de la secreción de LH durante estos periodos y el posible papel de los mismos en el efecto de la nutrición. Durante el anoestro estacionario, la subnutrición produjo en ovejas OVX+E2 un descenso en la concentración media de LH,
quizás por una mayor sensibilidad a la retroacción negativa del estradiol. La infusión de naloxona indujo un incremento de la pulsatilidad de LH al inicio y final del anoestro, demostrando la implicación de los opioideos endógenos en la inhibición
de la secreción de LH a lo largo de todo el anoestro estacionario en la Rasa Aragonesa, siendo diferente este resultadoal observado con otras razas más estacionales. La infusión de pimozide incrementó la pulsatilidad de LH sobre todo al inicio del
anoestro estacionario, lo que demuestra la implicación del sistema dopaminérgico en la inhibición de la secreción de LH en una situación de fotorrefractariedad a días cortos. Además, la dopamina parece controlar al menos en parte el efecto de la
alimentación sobre la secreción de LH al inicio del anoestro estacionario.
El cuarto experimento demostró que los opioideos endógenos controlan la secreción de LH en el primer mes tras el parto en ovejas paridas en época de actividad sexual (30 de diciembre). Además la subnutrición alargó el periodo postparto y provocó
que las ovejas subnutridas solaparan el anoestro postparto con el anoestro estacionario. INFLUENCIA FOLICULAR SOBRE LA PENETRABILIDAD Y CAPACIDAD DE MADURACION IN VITRO DE LOS OVOCITOS
PORCINOS INMADUROS. Autor: LUCAS ARJONA XIOMARA. Año: 1997. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: VETERINARIA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA ANIMAL (REPRODUCCION Y OBSTETRICIA) PROGRAMA DE DOCTORADO:
REPRODUCCION ANIMAL.
Resumen: Los ovocitos normalmente utilizados en las distintas
técnicas de FIV en la especie porcina proceden de ovarios de hembras sacrificadas en el matadero, constituyendo una población de ovocitos muy heterogenea en su tamaño, calidad y en el estadio nuclear en que se encuentran.
Esta heterogeneidad afecta significativamente a los resultados de dichas técnicas, habiéndose demostrado la influencia del tamaño del ovocito sobre los resultados del test hPIV y sobre la capacidad de maduración nuclear de los ovocitos sometidos
a técnicas de MIV. Sin embargo, pese a que el tamaño de los folículos antrales diseccionados o aspirados para la obtención de estos ovocitos es muy variable entre laboratorios, hasta el momento nadie a estudiado la influencia de dicho tamaño sobre
la penetrabilidad de los ovocitos inmaduros ni sobre la capacidad de maduración citoplasmática de los ovocitos. Por ello se ha estudiado en primer lugar la relación existente entre el tamaño del ovocito y el tamaño del folicular de procedencia
durante los estadios antrales de la foliculogénesis ya que apenas existe bibliografía referente a ello. En segundo lugar se determinó la influencia del tamaño folicular sobre la viabilidad y penetrabilidad de ovocitos inmaduros sometidos a un test
hPIV, evaluando si las diferencias en penetrabilidad encontradas pudieran deberse a posibles modificaciones en el espesor y/o composición glicoproteica de la zona pelúdica de los ovocitos. En tercer lugar se determinó la influencia del tamaño
folicular sobre la capacidad de maduración in vitro de los ovocitos y por último la influencia de este parámetro sobre la heterogeneidad nuclear de los ovocitos inmaduros ya que esta podría ser una de las causas principales de uno de los problemas
más frecuentes en la FIV porcina como es la polispermia.
Así en este trabajo se ha concluido: 1) que el método morfológico normalmente utilizado para la selección de folículos es un método rápido y eficaz para detectar folículos atrésicos; 2) pese a existir una elevada correlación entre el diámetro
máximo folicular y el diámetro del ovocito porcino excluyendo la zona pelúdica (r: 0'69;p APORTACIONES AL ESTUDIO DE LA INSEMINACION ARTIFICIAL CUNICOLA: ESTACIONALIDAD Y CONSERVACION
SEMINAL. Autor: MARTINEZ MIRO SILVIA. Año: 1997. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: VETERINARIA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: REPRODUCCION ANIMAL
.
Resumen: Dada la importancia que en los últimos años está adquiriendo la
Inseminación artificial cunícola e intentando aportar nuevos conocimientos para favorecer el desarrollo de la misma, los objetivos del siguiente trabajo han sido, en primer lugar, conocer en que medida el patrón estacional de las características de
los eyaculados, en lo que a parámetros de producción seminal y calidad espermática se refiere, puede estar influenciado por el fotoperiodo natural del sureste español, y, en segundo lugar, adecuar un diluyente que permita mantener la viabilidad y
fertilidad del semen diluido y conservado en refrigeración a 15-18 C durante, al menos, 48 h. Así mismo hemos estudiado en que medida la estación del año condiciona la fecundidad, fertilidad y prolificidad de las conejas.
Para la primera experiencia se seleccionaron al azar 15 machos híbridos, de los cuales 7 se alojaron bajo condiciones de fotoperiodo natural características del sudeste español y 8 se mantuvieron bajo fotoperiodo constante de 16 h luz/día. En un
total de 844 eyaculados se evaluó la producción seminal (volumen seminal, cantidad de gel, concentración y producción espermática) y la calidad espermática (porcentaje de espermatozoides mótiles, calidad de movimiento, porcentajes de espermatozoides
con membrana plasmática íntegra, con el acrosoma normal y de morfoanomalías), observándose que en el sureste español mantener a los animales bajo un fotoperiodo constante de días largos no supone ventaja alguna en lo que a producción seminal se
refiere. Además, la producción seminal de los conejos mantenidos bajo el fotoperiodo natural se mantuvo constante a lo largo de todo el año y la calidad espérmatica, aunque no se vio afectada por las condiciones del fotoperiodo si lo estuvo por las
altas temperaturas del verano. En la segunda experiencia, inicialmente se evaluó la calidad espermática del semen diluido en 7 diluyentes (Dilap 2000R. Conills AR, Conills BR; Tris-glucosa I y II, Modena y BTS) y conservado en refrigeración a 15-18
C hasta 72 h. Aunque la calidad espermática mostró una tendencia similar en todos los diluyentes, hasta las 48 h de refrigeración ésta fue mejor en el semen diluido en Trisglucosa. A continuación, y con semen diluido en un diluyente Tris-glucosa y
conservado durante 0,24 y 48 h en refrigeración a 15- 18 C procedente de 30 machos, se inseminaron 4.105 conejas de distintos estados reproductivos (nulíparas, primíparas, lactantes y retrasadas). Tras las inseminaciones observamos que, mientras el
tiempo de conservación del semen no influyó sobre los parámetros reproductivos evaluados (fecundidad, fertilidad y prolificidad), la fecundidad y fertilidad sí estaban significativamente influenciadas por el estado reproductivo de la coneja,
observándose los mejores resultados en las nulíparas y lactantes y los peores en las primíparas. En cuanto al efecto de la estación del año, si bien la fecundidad y la fertilidad no se vieron influenciadas por las condiciones medioambientales del
sureste español, la prolificidad, dependiendo del estado reproductivo puede verse afectada por las altas temperaturas del verano. PREDICCION DE LA FERTILIDAD IN VIVO DE LOS EYACULADOS DE VERRACO MEDIANTE PARAMETROS RUTINARIOS DE
CONTRASTACION SEMINAL, PRUEBAS BIOQUIMICAS Y EL TEST HOMOLOGO DE PENETRACION IN VITRO. Autor: GADEA MATEOS JOAQUIN JERONIMO. Año: 1996. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: REPRODUCCION ANIMAL.
Resumen: EL OBJETIVO DEL PRESENTE ESTUDIO HA SIDO EVALUAR LA
RELACION ENTRE LOS PARAMETROS DE LA CALIDAD SEMINAL Y LA CAPACIDAD DE PENETRACION IN VITRO DE OVOCITOS HOMOLOGOS (PIVH) CON LOS RESULTADOS IN VIVO DE FERTILIDAD Y PROLIFICIDAD TRAS LA INSEMINACION DE 300 REPRODUCTORAS.NO SE ENCONTRARON DIFERENCIAS
SIGNIFICATIVAS PARA LOS VALORES DE VOLUMEN, CONCENTRACION, TINCION VITAL Y PARAMETROS BIOQUIMICOS (CONTENIDO DE ATP, CALCIO, SODIO, POTASIO, MAGNESIO Y ZINC) ENTRE LOS TRES GRUPOS DE FERTILIDAD. SIN EMBARGO, SE ENCONTRARON DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS
(P CULTIVO DE EMBRIONES CAPRINOS PRODUCIDOS IN VITRO. Autor: IZQUIERDO TUGAS M. DOLORES. Año: 1996. Universidad: AUTONOMA DE
BARCELONA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA Y PRODUCCION ANIMALES PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION ANIMAL.
Resumen: EL OBJETIVO DE ESTE ESTUDIO FUE DETERMINAR LAS CONDICIONES MAS
IDONEAS PARA LA FECUNDACION (FIV) Y EL CULTIVO IN VITRO (CIV) DE EMBRIONES PROCEDENTES DEOVOCIOS DE CABRAS PREPUBERES MADURADOS IN VITRO (MIV). PARA EL PROTOCOLO DE FIV SE COMPARARON DISTINTOS MEDIOS (TALP, MDM, M199) Y SUSTANCIAS ESTIMULANTES DE LA
MOTILIDAD ESPERMATICA (CAFEINA, PHE). RESPECTO AL CIV, SE COMPARARON 2 TIPOS DE CO-CULTIVO (CELULAS DEL CUMULUS, CELULAS EL EPITELIO OVIDUCTAL), VARIOS MEDIOS DE CO-CULTIVO (CZB, MSOF,HAM'S F10, TCM199), EL EFECTO DEL SUERO DE CABRA EN CELO EN EL
MEDIO DE CULTIVO Y EL USO DE MEDIO ACONDICIONADO MEDIANTE CELULAS OVIDUCTALES. ADEMAS, SE COMPARO EL DESARROLLO DE LOS EMBRIONES CULTIVADOS IN VITRO CON EL DE EMBRIONES CULTIVADOS IN VIVO EN OVIDUCTOS DE CONEJAS Y LA MIV/FIV/CIV DE LOS OVOCITOS DE
CABRAS PREPUBERES CON LOS DE CABRAS ADULTAS. LOS RESULTADOS DE ESTE ESTUDIO INDICARON QUE, EN NUESTRAS CONDICIONES, EL MEJOR PROTOCOLO PARA LA FIV ES EL USO DE MEDIO MDM PARA EL TRATAMIENTO DEL SEMEN Y EL TALP PARA LA FECUNDACION, NO SIENDO
NECESARIO NI EL USO DE CAFEINA NI DE PHE.
RESPECTO AL CIV, LOS MEJORES RESULTADOS FUERON OBTENIDOS AL UTILIZAR TCM199 CON CELULAS OVIDUCTALES Y SIN SUERO.
LOS EMBRIONES DE PREPUBER SE DESARROLLARON DE MANERA SIMILAR IN VITRO E IN VIVO Y NO HUBIERON DIFERENCIAS ENTRE LA MIV/FIV/CIV DE LOS OVOCITOS DE PREPUBER Y LOS DE ADULTA. ESTUDIO EPIDEMIOLOGICO DE FACTORES QUE AFECTAN A LA FERTILIDAD EN GANADO VACUNO LECHERO.
Autor: LABERNIA DESCARREGA JORDI. Año: 1996. Universidad: LLEIDA. Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION ANIMAL.
Resumen: EL OBJETIVO DE LA PRESENTE TESIS FUE ESTUDIAR EL EFECTO
DE UNA SERIE DE VARIABLES Y DE SUS INTERACCIONES SOBRE LOS PARAMETROS REPRODUCTIVOS DE VARIAS EXPLOTACIONES DE GANADO VACUNO LECHERO. SE TUVIERON EN ESPECIAL CONSIDERACION DETERMINADAS PRACTICAS DE MANEJO (CONTROL DE LA INVOLUCION UTERINA, INTERVALO
PARTO-INSEMINACION Y DIAGNOSTICO DE GESTACION), DISFUNCIONES REPRODUCTIVAS (PUERPERALES, EN PERIODO POTENCIALMENTE FERTIL Y DURANTE LA GESTACION) Y LAS VARIACIONES METEOROLOGICAS. LOS RESULTADOS DEL PRESENTE ESTUDIO MUESTRAN QUE LA ESTACION DEL
PARTO INFLUYO SOBRE LAS INTERACCIONES ENTRE LAS DISFUNCIONES REPRODUCTIVAS PREVIAS A LA GESTACION EN LA VACA, DE MODO QUE UN AMBIENTE FRIO EN LA EPOCA DE PARTO DISMINUYO LOS EFECTOS NEGATIVOS SUBSIGUIENTES DE DICHAS DISFUNCIONES, ESPECIALMENTE EN
ANIMALES DE MAYOR EDAD. EN ANIMALES GESTANTES, LAS VACAS QUE HABIAN DESARROLLADO PREVIAMENTE ALGUNA GESTACION A TERMINO PRESENTARON MAYOR PROBABILIDAD DE SUFRIR UNA PERDIDA FETAL QUE LAS NULIPARAS. EN ANIMALES PRIMIGESTANTES (NOVILLAS) NO SE OBSERVO
EFECTO DE LA PRACTICA DEL DIAGNOSTICO DE GESTACION POR PALPACION RECTAL SOBRE LA PERDIDA DE GESTACION. SIN EMBARGO, EN VACAS GESTANTES QUE YA HABIAN DESARROLLADO GESTACIONES PREVIAS A TERMINO, EL RIESGO DE PERDIDA DE GESTACION SE INCREMENTO A MEDIDA
QUE DISMINUIA EL INTERVALO ENTRE LA INSEMINACION FERTIL Y EL DIAGNOSTICO DE GESTACION. POR OTRA PARTE, EN VACAS GESTANTES INSEMINADAS EN OTOÑO SE DETECTO MENOR INCIDENCIA DE PERDIDA FETAL QUE EN LAS INSEMINADAS EN OTRAS ESTACIONES. FINALMENTE, EN
VACAS EN LACTACION, DISFUNCIONES REPRODUCTIVAS PREVIAS A LA CONCEPCION TALES COMO QUISTES OVARICOS, ENDOMETRITIS Y SINDROME DE VACA REPETIDORA NO INFLUYERON SOBRE LA INCIDENCIA DE PERDIDAS FETALES EN LA SUBSIGUIENTE GESTACION. EN CAMBIO, LA
RETENCION DE PLACENTA Y LA PIOMETRA INCREMENTARON EL RIESGO DE PERDIDA DE GESTACION. DESARROLLO TECNOLOGICO DE LA INSEMINACION ARTIFICIAL EN CUNICULTURA INDUSTRIAL. Autor: LOPEZ LOPEZ FRANCISCO JAVIER. Año: 1996. Universidad: POLITECNICA DE MADRID. Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION ANIMAL.
Resumen: EN LA TESIS DOCTORAL TITULADA "DESARROLLO TECNOLOGICO DE LA
INSEMINACION ARTIFICIAL EN CUNICULTURA INDUSTRIAL" SE HA REALIZADO UN PROFUNDO ESTUDIO SOBRE EL COMPORTAMIENTO Y RESULTADOS QUE PROPORCIONA EL DILUYENTE MA 24, DESARROLLADO EN EL DEPARTAMENTO DE PRODUCCION ANIMAL DE LA UNIVERSIDAD POLITECNICA DE
MADRID, UTILIZADO PARA CONSERVAR EL SEMEN DE CONEJO DURANTE PERIODOS DE TIEMPO PROLONGADOS.
EL TIEMPO DE UTILIZACION OPTIMO DEL DILUYENTE MA 24 SE SITUA EN TORNO A LAS 0-48 HORAS. LA TEMPERATURA MAS ADECUADA PARA CONSERVAR EL SEMEN 24 HORAS EN EL DILUYENTE MA 24 SE SITUA EN EL INTERVALO 17-19.C, TANTO PARA LOS PARAMETROS REPRODUCTIVOS,
COMO PARA MANTENER LA NORMALIDAD ACROSOMICA Y NO INCREMENTAR LAS MORFOANOMALIAS ESTRUCTURALES DE LOS ESPERMATOZOIDES. EN CUANTO A LA CONCENTRACION ESPERMATICA OPTIMA TRAS ESTUDIAR LOS INTERVALOS COMPRENDIDOS ENTRE 8 Y 64 MILLONES DE ESPERMATOZOIDES
POR DOSIS DE INSEMINACION, PODEMOS CONCLUIR QUE LA CIFRA DE 25 MILLONES DE ESPERMATOZOIDES POR DOSIS SON SUFICIENTES PARA ASEGURAR UNOS BUENOS RESULTADOS REPRODUCTIVOS, TANTO AL UTILIZAR EL SEMEN EN FRESCO O REFRIGERADO DURANTE 24 HORAS.
POR ULTIMO, SE ESTUDIARON ALGUNAS TECNICAS DE MANEJO DE MACHOS REPRODUCTORES CON EL FIN DE AUMENTAR LA PRODUCCION DE SEMEN, TAL COMO EL AGRUPAMIENTO DE MACHOS REPRODUCTORES ADULTOS EN LOTES DE TRES ANIMALES, PROVOCANDO SU EXCITACION Y LOGRANDO
DE ESTA MANERA UN INCREMENTO EN LA PRODUCCION GLOBAL DE SEMEN. INFLUENCIA DE LA CICLICIDAD SEXUAL ESTACIONAL SOBRE LA RESPUESTA AL EFECTO MACHO EN LA CABRA
MURCIANO-GRANADINA. Autor: MARTINEZ SANCHEZ TEODORO. Año: 1996. Universidad: LEON. Centro de lectura: VETERINARIA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA ANIMAL-SANIDAD ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: PRINCIPIOS Y
TECNICAS FUNDAMENTALES EN SANIDAD ANIMAL.
Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HACE UN ESTUDIO Y UNA EVALUACION DE LA
CICLICIDAD ESTRAL DE LA CABRA MURCIANO-GRANADINA EN CADA ESTACION, INTENTANDO DETERMINAR, EN NUESTRAS LATITUDES, CUAL ES SU PERIODO DE ANESTRO ESTACIONAL, Y CUAL ES SU ESTACIONALIDAD SEXUAL.
ASI MISMO, INTENTAMOS COMPROBAR CUAL ES LA EFICACIA DEL EFECTO MACHO COMO METODO DE INDUCCION Y SINCRONIZACION DE CELO EN ESTA RAZA, Y LOS POSTERIORES RESULTADOS REPRODUCTIVOS QUE CONSIGUE. TAMBIEN ANALIZAMOS LA EXACTITUD, SENSIBILIDAD Y
ESPECIFICIDAD DE LA TECNICA ELISA COMO METODO DE DIAGNOSTICO PRECOZ DE GESTACION, EN ESTA RAZA, A LOS 20 DIAS DE LAS CUBRICIONES. DE ACUERDO CON LOS DATOS OBTENIDOS, HEMOS OBSERVADO QUE ANESTRO ESTACIONAL ES MUY SUAVE, Y SE PRODUCE DURANTE EL
VERANO.
EL EFECTO MACHO CONSIGUE, EN TODAS LAS ESTACIONES, Y SIN INFLUIR LA CICLICIDAD PREVIA, UNA ADECUADA SINCRONIZACION DE CELOS, Y UNA MUY BUENA INDUCCION DE ESTOS, OBTENIENDO CICLICIDADES PROXIMAS AL 100% DURANTE TODO EL AÑO. EL NUMERO DE CABRAS
QUE LLEVAN A TERMINO SU GESTACION ES ELEVADO EN TODAS LAS ESTACIONES, PERO SENSIBLEMENTE MAS ALTO EN OTOÑO, ESTACION EN LA CUAL LAS CABRAS NO GESTANTES EN EL CELO INDUCIDO PRESENTAN, EN EL SIGUIENTE CELO, UN INDICE MUY ALTO DE FERTILIDAD, ES DECIR
NO REGRESAN A ANESTRO ESTACIONAL. HEMOS COMPROBADO QUE LA CICLICIDAD ESTRAL PREVIA A LA INTRODUCCION DE LOS MACHOS INFLUYE, SIGNIFICATIVAMENTE Y DE FORMA POSITIVA, EN LA POSTERIOR FERTILIDAD OBTENIDA EN TODAS LAS ESTACIONES, EXCEPTO EN EL VERANO.
LOS VALORES DE PROLIFICIDAD Y SEX-RATIO HAN SIDO MUY SIMILARES A LO LARGO DE TODO EL AÑO, NO ENCONTRANDO INFLUENCIA ESTACIONAL. LA DURACION DE LA GESTACION HA SIDO APRECIABLEMENTE MAS LARGA EN LAS CABRAS CUBIERTAS DURANTE EL OTOÑO, Y LA MAS CORTA EN
LAS CUBIERTAS EN VERANO. EL DIAGNOSTICO PRECOZ DE GESTACION SE REALIZO MEDIANTE LA TECNICA ELISA, QUE SE HA MANIFESTADO COMO UNA PRUEBA DE MUCHA SENSIBILIDAD Y CON BUENOS PRONOSTICOS EN CUANTO A LOS RESULTADOS POSITIVOS, PERO CON POCA
ESPECIFICIDAD.
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