CULTIVO DE TEJIDOS, 2

Autor: COFAN PUJOL MONTSERRAT.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: HOSPITAL CLINIC I PROVINCIAL DE BARCELONA .

Resumen: HIPOTESIS: ES POSIBLE QUE LA LESION MUSCULAR ESQUELETICA INDUCIDA POR ETANOL PUEDA ESTAR MEDIDA POR UNA ALTERACION DE LOS PROCESOS DE TRANSDUCCION DE SEÑALES CELULARES Y DE EXCITACION-CONTRACCION CALCIO-DEPENDIENTES. OBJETIVOS: DETERMINAR LA CONCENTRACION CITOSOLICA BASAL DE ION CALCIO EN CULTIVOS DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS TANTO ANIMALES (RATA) COMO HUMANOS, EN DISTINTAS CIRCUNSTANCIAS: A) EN SITUACION BASAL; B) EN LA EXPOSICION AGUDA A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE ETANOL; C) EN LA EXPOSICION A UNA DOSIS DE ETANOL 100 MM A DIFERENTES INTERVALOS DE TIEMPO; D) EN LA SUPRESION AGUDA DE ETANOL EN CULTIVOS PREVIAMENTE EXPUESTOS A UNA DOSIS DE ETANOL 100 MM Y E) EN LA EXPOSICION CRONICA A UNA DOSIS DE ETANOL 40 MM EN CULTIVOS DE CELULAS ANIMALES. METODOLOGIA: 1) OBTENCION DE CULTIVOS PRIMARIOS DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS, TANTO ANIMALES (RATA ADULTA) COMO HUMANAS (BIOPSIA QUIRURGICA DE VASTO EXTERNO); 2) DETERMINACION DE LA DOSIS TOXICA LIMITE DE EXPOSICION A ETANOL Y 3) DESCRIPCION DE LOS CAMBIOS MORFOLOGICOS Y DE LA VIABILIDAD CELULAR INDUCIDOS POR LA EXPOSICION AGUDA A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE ETANOL. PARA LA DETERMINACION DE LA CONCENTRACION CITOSOLICA DEL ION CALCIO SE EMPLEO LA ESPECTROFLUORIMETRIA CON EL INDICADOR FLUORESCENTE FURA-2/AM. RESULTADOS: 1) LA EXPOSICION AGUDA A ETANOL DE CELULAS MUSCULARES ESQUELETICAS EN CULTIVO PROVOCA UNA DISMINUCION SIGNIFICATIVA DE LA CONCENTRACION CITOSOLICA BASAL IONICA DE CALCIO DE FORMA DOSIS-DEPENDIENTE EN EL RANGO DE EXPOSICION A ETANOL 20-200 MM. 2) EL TIEMPO DE EXPOSICION A UNA DOSIS CONSTANTE DE ETANOL 100MM TAMBIEN INFLUENCIA EN LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO. 3) LA SUPRESION BRUSCA DEL ETANOL DEL MEDIO PROVOCA UN PICO TRANSITORIO DE ELEVACION EN LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO. 4) LA CONCENTRACION CITOSOLICA DE CALCIO EN LAS CELULAS DE RATA EN CULTIVO EXPUESTAS A ETANOL 40 MM DURANTE 15 DIAS ES SIMILAR A LA DE UN GRUPO CONTROL NO EXPUESTO A ETANOL. 5) AL EXPONER DE FORMA AGUDA CELULAS EN CULTIVO A DIFERENTES DOSIS DE ETANOL, SE PRODUCEN CAMBIOS MORFOLOGICOS EN MICROSCOPIA OPTICA, DE TIPO CITOLITICO, QUE SE RELACIONAN CON LA DOSIS DE ETANOL DEL MEDIO. 6) LOS RESULTADOS EN EL MODELO HUMANO SON SIMILARES A LOS DEL MODELO ANIMAL. ESTOS HECHOS PUEDEN TENER RELEVANCIA PATOGENICA EN LA MIOPATIA ALCOHOLICA.

Autor: FROTA CHAGAS CARVALHO JULITA M..
Año: 1996.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: RECURSOS FITOGENETICOS.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE ESTUDIO LA APLICACION DE TECNICAS DE CULTIVO IN VITRO, EMBRIOGENESIS SOMATICA Y MICROESTAQUILLADO, EN LA MULTIPLICACION DE LOS CULTIVARES PRECOCE 1, PRECOCE 2, 4M, 5M Y COKER 312 DE LA ESPECIE GOSSYPIUM HIRSUTUM.ADEMAS, MEDIANTE TECNICAS HISTOLOGICAS SE HA SEGUIDO LA EVOLUCION DE LOS PROCESOS MORFOGENICOS QUE TIENEN LUGAR DESDE LA INDUCCION EMBRIOGENICA HASTA EL DESARROLLO DE LOS EMBRIOIDES EN LOS CULTIVARES QUE MANIFESTARON ESTA RESPUESTA, DE MANERA QUE SE HA PODIDO CORRELACIONAR LOS CAMBIOS MACROMORFOLOGICOS E HISTOLOGICOS OBSERVADOS EN LOS CALLOS.LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE TANTO LA CALLOGENESIS COMO LA INDUCCION DE EMBRIOIDES VARIAN EN FUNCION DEL GENOTIPO. TAMBIEN SE HAN ENCONTRADO DIFERENCIAS EN LA INDUCCION DE LOS CALLOS DEPENDIENDO DEL TIPO DE EXPLANTO PRIMARIO UTILIZADO. SE ESTUDIO EL EFECTO DE VARIOS FACTORES (FUENTE DE CARBONO, TIPO DE SOLIDIFICANTE Y CONCENTRACION DE TIAMINA) SOBRE EL DESARROLLO DE CALLO EMBRIOGENICO. DE LOS FACTORES ESTUDIADOS EL QUE MAS INFLUYE ES LA FUENTE DE CARBONO, PERO LA CONCENTRACION DE TIAMINA Y EL SOLIDIFICANTE TAMBIEN AFECTAN EN LA FASE DE INDUCCION DE CALLO CON ASPECTO EMBRIOGENICO. PARA LA INDUCCION Y PROLIFERACION DE LOS CALLOS SE ENSAYARON VARIAS CONCENTRACIONES Y COMBINACIONES DE 2,4D Y 2IP EN LOS MEDIOS DE CULTIVO. SE FORMARON CALLOS DE ASPECTO EMBRIOGENICO EN MEDIOS CON UNA BAJA CONCENTRACION DE 2,4D (0.1 MGL-1), NO AFECTANDO LA CONCENTRACION DE 2IP ESE ASPECTO. LA INDUCCION DE CALLOS EMBRIOGENICOS Y PRODUCCION DE EMBRIOIDES SOLO OCURRIO CUANDO LOS CALLOS FUERON TRANSFERIDO AL MEDIO MB5 CON Y SIN GLUTAMINA. EN LOS ESTUDIOS COMPARATIVOS ENTRE LOS CINCO CULTIVARES DE G. HIRSUTUM EN CUANTO A LA INDUCCION DE EMBRIOGENESIS SOMATICA, SOLO MANIFESTARON RESPUESTA EMBRIOGENICA LOS CULTIVARES PRECOCE 2 Y COKER 312, HABIENDO VARIACION ENTRE ELLOS DENTRO DE LOS PROTOCOLOS ESTUDIADOS. LA GERMINACION DE LOS EMBRIOIDES OCURRIO EN MEDIO LIQUIDO Y/O SOLIDO DE STEWART Y HSU (1997) SUPLEMENTADO CON 0.1 MGL-1 DE AIA. PARA LA MICROPROPAGACION DE ALGODON A TRAVES DE MICROESTAQUILLADO SE ENSAYARON DISTINTAS CONCENTRACIONES DE REGULADORES DE CRECIMIENTO EN MEDIO MS SUPLEMENTADO CON MGCL2 (MEDIO MMG). LA ELONGACION DE LAS YEMAS SE PRODUJO DE FORMA SATISFACTORIA EN MEDIO MMG SIN REGULADORES DE CRECIMIENTO. SE ESTUDIO EL EFECTO DE LA FUENTE DE CARBONO, DEL AGENTE SOLIDIFICANTE Y TIPOS DE YEMAS, SOBRE EL DESARROLLO DE LAS MISMAS Y SOBRE LA PRODUCCION DE RAICES EN MEDIO MMG SIN REGULADORES DE CRECIMIENTO. EN LOS TRES TIPOS DE EXPLANTOS UTILIZADOS, EL MEDIO CON GLUCOSA Y GELRITE DIO LUGAR A UN NUMERO DE NUDOS Y DE RACIES SUPERIOR O IGUAL QUE LOS DE OTROS MEDIOS. LA INMERSION DE LA BASE DE LOS TALLOS EN CONCENTRACIONES ALTAS DE AIA ANTES DE LA ACLIMITACION FAVORECIO EL DESARROLLO DEL SISTEMA RADICAL.

Autor: GISBERT DOMENECH CARMINA.
Año: 1996.
Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: DE BIOTECNOLOGIA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE DESCRIBEN LOS EXPERIMENTOS QUE HAN PERMITIDO OBTENER UNA COLECCION DE PLANTAS TRANSFENICAS DE LA ESPECIE SILVESTRE LYCOPERSICON PENNELLII PE-47 QUE EXPRESAN LOS GENES MARCADORES NPTII Y UIDA Y AQUELLOS NECESARIOS PARA LA OBTENCION DE TRES COLECCIONES DE PLANTAS TRANSGENICAS DETOMATE CULTIVADO (CULTIVA P73) CON LOS GENES DE HALOTOLERANCIA HALL1 Y HAL2 (DE LEVADURA) Y GEN TSW12 DE TOMATE. PARA CONSEGUIR ESTE SEGUNDO OBJETIVO SE HA DESARROLLADO UN PROTOCOLO DE TRANSFORMACION GENETICA QUE HA PERMITIDO LA OBTENCION DE PLANTAS TRANSGENICAS EN TRES CULTIVARES DE TOMATE DE DIFERENTE APTITDU MORFOGENETICA. LA COLECCION DE PLANTAS TRANSFENICAS DE L. PENNELLII SERA DE GRAN UTILIDAD PARA ABORDAR FUTUROS EXPERIMENTOS DE FUSION DE PROTOPLASTOS CON L.ESCULETUM PUESTO QUE LOS GENES INTRODUCIDOS FACILITARAN LA SELECCION Y CARACTERIZACION DEL MATERIL HIBRIDO. LAS COLECCIONES DE PLANTAS TRANSGENICAS DE CULTIVAR DE TOMATE P73 CON LOS GENES DE HALOTOLERANCIA DEMUESTRAN LA REPETIBILIDAD DEL PROTOCOLO DE TRANSFORMACION DESARROLLADO Y PROPORCIONAN UN MATERIAL QUE PERMITIRA EVALUAR EL POSIBLE EFECTOS DE LOS GENES INTRODUCIDOS EN LA TOLERANCIA A LA SALINIDAD. HABIENDOSE EVALUADO TAMBIEN EN ESTE TRABAJO, LA TOLERANCIA A LA SALINIDAD EN LA DESCENDENCIA DE UNA PLANTA TRANSGENICA PORTADORA DEL GENHAL1. LA EVALUACION SE HA LLEVADO A CABO A NIVEL DE PLANTA (IN VITRO E IN VIVO) Y A NIVEL CELULAR. TODAS LAS EVALUACIONES EFECTUADAS MUESTRAN UNA MAYOR TOLERANCIA A LA SAL DE LA FAMILIA TRANSGENICA CON RESPECTO A LA FAMILIA TESTIGO. EN CONJUNTO, LOS RESULTADOS PARECEN INDICAR QUE HAY UN EFECTO FAVORABLE DEL GEN HAL1 SOBRE LA TOLERANCIA A LA SALINIDAD.

Autor: EGAÑA QUEREJETA BEATRIZ.
Año: 1995.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: HISTOLOGIA Y ANATOMIA PATOLOGICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: SE OBTUVIERON CALLOS REGENERABLES A PARTIR DE EMBRIONES MADUROS E INMADUROS Y ANTERAS, ASI COMO SUSPENSIONES CELULARES REGENERABLES, DE VARIEDADES DE CEBADA CULTIVADAS EN LOS SECANOS ESPAÑOLES. EL GENOTIPO FUE EL FACTOR MAS IMPORTANTE EN LA CAPACIDAD DE REGENERACION DE ESTOS CULTIVOS. SE PROBARON UN TOTAL DE 37 VARIEDADES EN CULTIVO DE EMBRIONES INMADUROS. LA VARIEDAD HOP FUE LA MEJOR DE LAS ENSAYADAS. NO SE ENCONTRO DIFERENCIA EN LA CAPACIDAD DE REGENERACION ENTRE VARIEDADES DE 2 Y 6 CARRERAS. UNA CONCENTRACION DE 2 MG/L DE BAP EN EL MEDIO DE INDUCCION, DISMINUYO EL CRECIMIENTO DE LOS CALLOS Y SU CAPACIDAD DE REGENERACION. LA SUSTITUCION DE SACAROSA POR MALTOSA NO INCREMENTO LA CAPACIDAD DE REGENERACION, PERO AUMENTO EL PESO DE LOS CALLOS DE LAS VARIEDADES IGRI Y REINETTE. PARA UN MISMO GENOTIPO, LOS EMBRIONES INMADUROS DIERON MEJORES RESULTADOS QUE LOS MADUROS. EN CULTIVO DE ANTERAS SE UTILIZARON 10 VARIEDADES, LOS MEJORES CULTIVARES FUERON COBRA E IGRI CON 20,72 Y 18,03 PLANTAS VERDES POR ANTERA, RESPECTIVAMENTE. SE ESTABLECIERON SUSPENSIONES CELULARES DE EMBRIONES INMADUROS DE LA VARIEDAD IGRI. SE REGENERARON PLANTAS ALBINAS A PARTIR DE ELLAS. ASI MISMO, SE OBTUVIERON SUSPENSIONES CELULARES REGENERABLES DERIVADAS DEL CULTIVO DE ANTERAS DE IGRI Y REINETTE. LAS PLANTAS REGENERADAS FUERON UNAS ALBINAS Y OTRAS VERDES, DIPLOIDES Y FERTILES. SE COMPROBO QUE LA CAPACIDAD DE REGENERACION DECLINO CON LA EDAD DE LA SUSPENSION, COINCIDIENDO CON LA APARICION DE ANOMALIAS CROMOSOMICAS EN LAS CELULAS EN SUSPENSION.

Autor: GARCIA FERRIZ JOSE LORENZO.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL DE LA UNIVERSIDAD DE VALENCIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 025B CONSERVACION Y APROVECHAMIENTO DE LAS PLANTAS Y EL SUELO.

Resumen: SE HA PROCEDIDO AL ESTABLECIMIENTO DE UN METODO DE PROPAGACION CLONAL DE PINUS PINEAL. MEDIANTE CULTIVO DE TEJIDOS. LA PROPAGACION MEDIANTE VIAS ORGANOGENICAS A PARTIR DE COTILEDONES INMADUROS Y DE MICROPROPAGACION A PARTIR DEL CONJUNTO COTILEDON/HIPOCOTILO, HA PERMITIDO ESTABLECER LAS CONDICIONES DE CULTIVO PARA MULTIPLICAR MATERIAL ADULTO PREVIAMENTE REJUVENECIDO MEDIANTE INJERTO Y PODA POSTERIOR. LA UTILIZACION DE MEDIOS SALINOS POBRES EN NITROGENO, Y TIEMPOS CORTOS DE EXPOSICION A LAS CITOQUININAS SE HAN REVELADO COMO MEJORES CONDICIONES DE CULTIVO PARA LA OBTENCION DE MICROESTAQUILLAS. EL ENRAIZAMIENTO EX-VITRO Y POSTERIOR MICORRIZACION DE LAS PLANTAS OBTENIDAS BAJO CONDICIONES CONTROLADAS HA DADO LUGAR A PLANTAS CON UN SISTEMA RADICULAR PERFECTO, BIEN DESARROLLADO, QUE HA PERMITIDO LA ADAPTACION A CAMPO DE LAS PLANTAS OBTENIDAS MEDIANTE MICROPROPAGACION, Y UNA SUPERVIVENCIA SUPERIOR AL 85%.

Autor: PEREZ CLEMENTE ROSA M..
Año: 1995.
Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: LA PERDIDA DE ESPECIES SILVESTRES QUE SON DESPLAZADAS DE SU GENOCENTRO Y LA CONTINUA RENOVACION DE LAS VARIEDADES COMERCIALES PARA ADAPTARSE A LAS TENDENCIAS DE MERCADO, HAN CONDUCIDO A PLANTEARSE, A NIVEL INTERNACIONAL, LA NECESIDAD DE CONSERVAR LAS ESPECIES Y VARIEDADES DE CITRICOS Y SUS RELATIVOS (IBPGR, 1982).SE HA ESTUDIADO LA POSIBILIDAD DE CONSERVAR EL GERMOPLASMA DE LOS CITRICOS MEDIANTE EL ALMACENAMIENTO, A TEMPERATURAS CRIOGENICAS, DE DIFERENTES EXPLANTES: SEMILLAS, OVULOS, EMBRIONES SOMATICOS, APICES CAULINARES Y LINEAS CELULARES EMBRIOGENICAS.SE HA DISEÑADO UN METODO DE CRIOCONGELACION POR ENFRIAMIENTO RAPIDO QUE PERMITE LA CONSERVACION A LARGO PLAZO DE SEMILLAS TOLERANTES Y PARCIALMENTE TOLERANTES A LA DESECACION, A LAS TEMPERATURAS DE -80 C Y -196 C.NO SE HA ESTABLECIDO UN PROTOCOLO DE CRIOCONGELACION DE LINEAS CELULARES BASADO EN LA APLICACION DE UN TRATAMIENTO CRIOPROTECTOR Y CONGELACION POR ENFRIAMIENTO LENTO. EL METODO ES MUY EFICIENTE, REPETIBLE Y SE HA APLICADO CON EXITO A 21 ESPECIES Y VARIEDADES DEL GENERO CITRUS, 3 DEL GENERO FORTUNELLA, 1 ESPECIE DE MICROCITRUS Y OTRA DEL GENERO GLYCOSMIS. SE HAN ESTABLECIDO TAMBIEN LAS CONDICIONES IDONEAS PARA EL ALMACENAMIENTO DE LAS LINEAS CELULARES CRIOCONGELADAS, LO QUE PERMITIRA SU CONSERVACION A LARGO PLAZO. EL PROTOCOLO DE CRIOCONGELACION Y ALMACENAMIENTO DESARROLLADO SE ESTA UTILIZANDO DE FORMA RUTINARIA EN EL DEPARTAMENTO DE PROTECCION VEGETAL Y BIOTECNOLOGIA DEL IVIA, DONDE SE HA ESTABLECIDO UN BANCO DE LINEAS CELULARES EMBRIOGENICAS DE CITRICOS.

Autor: BURGOS GORJON INOCENCIO.
Año: 1994.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y PATOLOGIA Y OBSTETRICIA, GINECOLOGIA PED. PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: OBJETIVOS: ESTABLECER UN MODELO EXPERIMENTAL VALIDO DE INFECCION PULMONAR POR P. AERUGINOSA, ANALIZAR LA INFLUENCIA DE LA HIPEROXIA SOBRE EL MODELO EXPERIMENTAL Y VALORAR LA IMPORTANCIA DE LOS MECANISMOS DE DEFENSA ANTIOXIDANTE (SOD) EN LA HIPEROXIA Y EN LAS INFECCIONES POR P. AERUGINOSA. HEMOS UTILIZADO LA RATA WISTAR RECIEN NACIDA Y 4 GRUPOS EXPERIMENTALES: A (NORMOXIA), B (HIPEROXIA, SUPERIOR AL 95% OXIGENO), C (NORMOXIA E INSTILACION CON P. AERUGINOSA) Y D (HIPEROXIA E INSTILACION CON P. AERUGINOSA). REALIZAMOS LOS SIGUIENTES ESTUDIOS: MORFOLOGICO CON MICROSCOPIA OPTICA Y ELECTRONICA, MICROBIOLOGICO, ENZIMATICO (DETERMINACION DE SOD EN HOMOGENEIZADO PULMONAR Y LAVADO BRONCOALVEOLAR) Y DETERMINACION DE ELASTASA DE MACROFAGO ALVEOLAR EN LAVADO BRONCOALVEOLAR. NUESTROS RESULTADOS INDICAN UN MAYOR GRADO DE LESION EN EL GRUPO D CON LESIONES EXUDATIVAS Y LESION ENDOTELIAL, ATRIBUIBLES A LA ACCION POTENCIADORA DE LA HIPEROXIA SOBRE LA INFECCION POR P. AERUGINOSA; MAYOR PORCENTAJE DE CULTIVOS POSITIVOS EN EL MISMO GRUPO, DISMINUCION DE LOS VALORES DE SOD (SUPEROXIDO DISMUTASA) EN D CON RESPECTO A C Y MAYOR ACTIVIDAD ELASTOLITICA EN C Y D. CONCLUSION: EL MODELO ES VALIDO PARA PRODUCIR INFECCION Y LA HIPEROXIA ES FUNDAMENTAL EN EL DESARROLLO DE INFECCION PULMONAR POR P. AERUGINOSA.

Autor: FAL FERNANDEZ M. ANGELES.
Año: 1994.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA DE ORGANISMOS Y SISTEMAS PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA DE ORGANISMOS Y SISTEMAS TERRESTRES .

Resumen: EL EFECTO DEL AMBIENTE IN VITRO, DETERMINADO POR LOS RECIPIENTES EMPLEADOS DURANTE EL CULTIVO, DEPENDE DE LA TASA DE INTERCAMBIO GASEOSO DEL RECIPIENTE, QUE CONDICIONA LA COMPOSICION DE LA ATMOSFERA DE CULTIVO Y EL POTENCIAL HIDRICO DEL MEDIO, AL INFLUIR EN SU DESECACION. SE HA COMPROBADO EN DOS CULTIVARES DE CLAVEL QUE LA TASA DE HIPERHIDRATACION SE INCREMENTA AL REDUCIR LA VENTILACION, PRODUCIENDO MAS ETILENO EL CULTIVAR MAS SENSIBLE, LA SITUACION SE INVERTIA AL AUMENTAR LA VENTILACION O ELIMINAR EL ETILENO PRODUCIDO, ESPECIALMENTE SI SE REALIZABA DURANTE LAS DOS SEMANAS SIGUIENTES A LA PUESTA EN CULTIVO, APUNTANDO A UNA ACCION DEL ETILENO RELACIONADA CON LA HIPERHIDRATACION DE LAS PLANTAS DURANTE LA MICROPROPAGACION. SE HA DEMOSTRADO QUE ES POSIBLE MICROPROPAGAR PLANTAS SENSIBLES A HIPERHIDRATACION EN MEDIO LIQUIDO, MEDIANTE EL EMPLEO DE SOPORTES SOLIDOS ALTERNATIVOS AL AGAR (FIBRAS DE CELULOSA). EL AMBIENTE DE MICROPROPAGACION PROVOCA EN EL KIWI UNA SERIE DE ALTERACIONES EN LA SUPERFICIE FOLIAR, QUE AFECTAN A LA TASA DE TRANSPIRACION, HACIENDO NECESARIA SU ACLIMATACION GRADUAL A LAS CONDICIONES EXTERIORES. LAS PLANTAS DE KIWI MICROPROPAGADAS PRESENTAN BAJOS VALORES DE RESISTENCIA FOLIAR A LA DIFUSION DEL VAPOR DE AGUA, LO QUE PUEDE RELACIONARSE CON SU INCAPACIDAD DE INCREMENTAR LOS NIVELES DE ACIDO ABSCISICO EN RESPUESTA A LA PERDIDA DE AGUA. LA CAPA DE CERAS EPICUTICULARES DE LAS HOJAS, EN CLAVEL Y EN KIWI, SE ENCUENTRA ALTERADA EN CANTIDAD Y COMPOSICION, EN PLANTAS MICROPROPAGADAS. TANTO LA TASA DE PERDIDA DE AGUA COMO DE FOTOSINTESIS, CONTENIDO DE PIGMENTOS FOTOSINTETICOS Y CANTIDAD DE CERA EPICUTICULAR SON MAS PARECIDAS A LAS PLANTAS NORMALES EN LOS NUEVOS SISTEMAS DE CULTIVOS VENTILADOS EN MEDIO LIQUIDO CON SOPORTES DE CELULOSA. MEDIANTE ESTOS SISTEMAS ES POSIBLE LA MICROPROPAGACION MIXOTROFICA O AUTOTROFICA DE LOS EXPLANTOS, DEPENDIENDO SU OPTIMIZACION DEL ESTABLECIMIENTO DE LOS REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES REALES DEL EXPLANTO EN LAS NUEVAS CONDICIONES DE CULTIVO Y MEJOR HOMOGENEIZACION DEL AMBIENTE EN EL INTERIOR DE LOS RECIPIENTES.

Autor: RANGEL CAMARA TEREZINHA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA ANIMAL, BIOLOGIA VEGETAL Y ECOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA VEGETAL.

Resumen: EL OBJETIVO DE ESTA TESIS FUE ESTUDIAR EL EFECTO DEL ESTRES SALINO Y DE LA ADICION DE PROLINA Y PUTRESCINA EXOGENAS SOBRE EL MANTENIMIENTO DE CALLOS EMBRIOGENICOS PROCEDENTES DE CULTIVARES SENSIBLES Y TOLERANTES A LA SALINIDAD. LOS CALLOS SE OBTUVIERON MEDIANTE CULTIVO "IN VITRO" DE EMBRIONES INMADUROS. LOS TRATAMIENTOS SE APLICARON POR UN PERIODO DE 60 DIAS. SE ANALIZARON LA TASA DE CRECIMIENTO RELATIVO, ASI COMO LOS CONTENIDOS ENDOGENOS DE POLIAMINAS Y AMINOACIDOS LIBRES. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE PUEDE DEDUCIR QUE: 1) EL CRECIMIENTO ES AFECTADO POR EL ESTRES SALINO EN MAYOR O MENOR ORDEN SEGUN EL GENOTIPO; 2) LA PROLINA EXOGENA TIENE UN EFECTO POSITIVO AUNQUE LIMITADO SOBRE EL CRECIMIENTO. 3) LA CAPACIDAD DE ACUMULAR PUT ENDOGENA ASI COMO SPD Y SPM PARECE ESTAR RELACIONADA CON UN MEJOR CRECIMIENTO. EN GENERAL, LA PRO FUE EL AMINOACIDO MAS DIRECTAMENTE INVOLUCRADO EN LA RESPUESTA AL ESTRES SALINO.

Autor: VILA IGLESIAS M. ROSA.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.

Resumen: SI BIEN EXISTEN MARCADORES DE CELULAS ACINARES CAPACES DE IDENTIFICARLAS COMO TALES DESDE EL INICIO DEL DESARROLLO DEL PANCREAS, NO SE CONOCEN MARCADORES CAPACES DE DISTINGUIR CELULAS DUCTALES INMADURAS. ES DECIR, HASTA EL MOMENTO, LA DEFINICION DE CELULA DUCTAL SE HA REALIZADO ATENDIENDO A CRITERIOS NEGATIVOS. ESTA PROBLEMATICA HA LLEVADO A FAVORECER LA CONTROVERSIA QUE EXISTE SOBRE EL ORIGEN CELULAR DEL CANCER DE PANCREAS. POR ESO NOS HA INTERESADO IDENTIFICAR MOLECULAS QUE PUDIERAN SER UTILIZADAS COMO MARCADORES DE CELULAS DUCTALES Y ESTUDIAR SU EXPRESION EN PANCREAS NORMAL Y EN CANCER DE PANCREAS. PARA ELLO HEMOS DESARROLLADO UN SISTEMA CELULAR IN VITRO COMO MODELO DE ESTUDIO DEL PANCREAS NORMAL Y HEMOS ESTABLECIDO Y CARACTERIZADO CUATRO LINEAS CELULARES DERIVADAS DE TUMORES PANCREATICOS COMO MODELOS DE ESTUDIO DEL CANCER DE PANCREAS. EL ANALISIS DE LA EXPRESION DE CKS EN TEJIDOS DE PANCREAS HUMANO NOS HA PERMITIDO DEFINIR A ALGUNOS DE ESTOS POLIPEPTIDOS COMO MARCADORES DE CELULAS DIFERENCIADAS DEL PANCREAS ADULTO CUYA EXPRESION VARIA EN EL PANCREAS FETAL Y EN TUMORES DE PANCREAS. LA ULTRAESTRUCTURA, PATRON DE EXPRESION DE CKS, MUCINAS Y DE OTROS MARCADORES DE DIFERENCIACION, ASI COMO LOS ESTUDIOS FUNCIONALES (DETERMINACION DE LA RESPUESTA A SECRETINA Y EXPRESION DE CFTR Y CA II), HAN DEMOSTRADO QUE LAS CELULAS EN CULTIVO DE PANCREAS EXOCRINO NORMAL HUMANO TIENEN UN FENOTIPO MUY SIMILAR AL DE LAS CELULAS DUCTALES. UTILIZANDO ESTOS MISMOS CRITERIOS, HEMOS ESTABLECIDO Y CARACTERIZADO CUATRO LINEAS CELULARES DERIVADAS DE TUMORES PANCREATICOS HUMANOS COMO MODELO DE ESTUDIO IN VITRO DE CANCER DE PANCREAS. ESTAS LINEAS CELULARES PRESENTAN DISTINTOS ESTADOS DE DIFERENCIACION, SIENDO, ESTE MODELO, MUY UTIL EN EL ANALISIS DE LAS ALTERACIONES CELULARES Y MOLECULARES QUE TIENEN LUGAR DURANTE LA PROGRESION DE LA TRANSFORMACION NEOPLASICA. DADA LA IMPLICACION DE ALGUNOS FACTORES DE CRECIMIENTO Y SUS RECEPTORES EN LA PROLIFERACION CELULAR Y EN EL DESARROLLO DE ALGUNAS NEOPLASIAS, HEMOS ESTUDIADO EL EFECTO DE UN AMPLIO PANEL DE FACTORES DE CRECIMIENTO SOBRE LAS CELULAS EN CULTIVO DE PANCREAS EXOCRINO NORMAL, CON EL FIN DE OPTIMIZAR LA DURACION DE LOS CULTIVOS Y DETERMINAR CUAL DE ELLOS PODRIA TENER UN PAPEL FISIOLOGICO EN LA PROLIFERACION PANCREATICA. ASI, EL HGF HA MOSTRADO SER EL MITOGENO MAS POTENTE PARA LAS CELULAS DE PANCREAS EXOCRINO NORMAL. POR EL CONTRARIO, HGF NO TIENE EFECTO SOBRE LA PROLIFERACION DE LAS LINEAS TUMORALES PANCREATICAS. DADO QUE EL RECEPTOR DE HGF, EL PROTO-ONCOGEN C-MET, ESTA SOBRE-EXPRESADO EN TUMORES GASTRICOS Y QUE PARECE ESTAR IMPLICADO ACTIVAMENTE EN LOS PROCESOS DE TRANSFORMACION NEOPLASICA, HEMOS ANALIZADO SU EXPRESION EN LAS CELULAS EN CULTIVO DE PANCREAS EXOCRINO NORMAL Y EN LAS LINEAS TUMORALES, MOSTRANDO, EN ESTAS ULTIMAS UNA EXPRESION MAS ELEVADA QUE EN EL PANCREAS NORMAL.

Autor: CANALEJO RAYA ANTONIO LUIS.
Año: 1993.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ANALIZADO LA RESPUESTA MORFOGENICA IN VITRO DE UNA COLECCION DE COMBINACIONES GENOMICAS DE LA TRIBU TRITICEAE. LOS RESULTADOS INDICAN QUE UNA COMBINACION INFIPLOIDE, EL TRITICALE TETRAPLOIDE (DDRR), HA DEMOSTRADO UNA EXCEPCIONAL CAPACIDAD DE REGENERACION A PARTIR DE LOS EXPLANTES PROBADOS: LA HOJA BANDERA Y LA INFLORESCENCIA. MEDIANTE EL CULTIVO DE ANTERAS DE ESTA COMBINACION SE HA OBTENIDO EL DIHAPLOIDE DR. ADEMAS SE HA ANALIZADO LA RESPUESTA DE REGENERACION DE ESTA COMBINACION. LA CAPACIDAD DE RESPUESTA SE AJUSTA AL MODELO DE DESARROLLO DE LA HOJA. TAMBIEN SE LLEVO A CABO EL CULTIVO DE PROTOPLASTOS DE DDRR Y SE LLEVO A CABO LA TRANSFORACION TRANSITORIA A PARTIR DE LOS CULTIVOS DESARROLLADOS ANTERIORMENTE, ORIGINANDOSE FINALMENTE LA TRANSFORMACION ESTABLE.

Autor: LOPEZ RUIZ ANTONIO.
Año: 1993.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR DE PECES TELEOSTEOS.

Resumen: EL PRESENTE TRABAJO TIENE DOS OBJETIVOS. EL PRIMERO ES CARACTERIZAR LOS LEUCOCITOS DE DORADA PRESENTES EN RIÑON CEFALICO, SANGRE Y EXUDADO PERITONEAL, MEDIANTE METODOS MORFOLOGICOS Y CITOQUIMICOS, TANTO MICROSCOPICO OPTICOS COMO MICROSCOPICO ELECTRONICOS. LOS RESULTADOS MUESTRAN QUE SE CUMPLE EL PATRON HEMATOLOGICO DE VERTEBRADOS. ESTAN PRESENTES TROMBOCITOS, GRANULOCITOS, CELULAS LINFOIDES Y MONOCITOS/MACROFAGOS. SIN EMBARGO, ESTAS CELULAS PRESENTAN EN DORADA CARACTERISTICAS ESPECIFICAS QUE LAS DIFERENCIAM DE LAS DE OTROS VERTEBRADOS. EL SEGUNDO OBJETIVO ES LA ACTIVACION DE LOS LEUCOCITOS DE DORADA PARA OBTENER SOBRENADANTES CONTENIENDO MEDIADORES SOLUBLES, CAPACES DE ACTIVAR LOS MACROFAGOS DE ESTA ESPECIE. SUSPENSIONES CELULARES ENRIQUECIDAS EN LEUCOCITOS, OBTENIDOS MEDIANTE CENTRIFUGACION EN GRADIENTE DE DENSIDAD, FUERON ESTIMULADOS CON EL MITOGENO CONCANAVALINA A. SE HAN OPTIMIZADO LAS CONDICIONES DE LOS ENSAYOS PARA LA OBTENCION DE LOS SOBRENADANTES (CONCENTRACION DE MITOGENO, TIEMPO DE ESTIMULACION Y PROCEDENCIA DE LOS LEUCOCITOS), SE HA MEDIDO LA ACTIVIDAD DE LOS SOBRENADANTES, MEDIANTE EL USO DE TECNICAS DE ESPECTROFOTOMETRIA BASADAS EN LA REDUCCION DE UNA SAL DE TETRAZOLIO ("NBT") Y FINALMENTE, SE HAN DETERMINADO CONDICIONES OPTIMAS DE ENSAYO PARA ACTIVAR LOS MACROFAGOS DE DORADA (DILUCION DE LOS SOBRENADANTES, TIEMPO DE INCUBACION CON LOS SOBRENADANTES, NUMERO DE LEUCOCITOS Y PROCEDENCIA DE LOS LEUCOCITOS.

Autor: SANCHEZ GOMEZ M. VICTORIA.
Año: 1993.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: NEUROCIENCIAS PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: LOS GLIOBLASTOMAS MULTIFORMES HUMANOS REPRESENTAN EL 40% DE TODAS LAS NEOPLASIAS INTRACRANEALES, AFECTAN A INDIVIDUOS DE TODAS LAS EDADES Y LA APLICACION DE LAS TECNICAS TERAPEUTICAS ACTUALES NO OFRECEN RESULTADOS POSITIVOS SOBRE SU TRATAMIENTO. SUS ESPECIALES CARACTERISTICAS LOS TRANSFORMAN EN TUMORES ALTAMENTE MALIGNOS Y CON ESCASAS POSIBILIDADES DE ELIMINACION. CON EL OBJETIVO DE PLANTEAR NUEVAS PERSPECTIVAS TERAPEUTICAS, MUCHOS INVESTIGADORES HAN SUGERIDO LA PRESENCIA DE ANTIGENOS ESPECIFICOS ASOCIADOS A LAS CELULAS MALIGNAS DE ORIGEN GLIAL. EN ESTE CAMPO, LA APARICION DE LA TECNOLOGIA DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES (MABS) HA AUMENTADO CONSIDERABLEMENTE LAS POSIBILIDADES DE DETECCION DE ESTOS ANTIGENOS Y HA OFRECIDO SATISFACTORIOS RESULTADOS EN TUMORES DE DIFERENTES ORIGENES. BASANDONOS EN ESTOS ANTECEDENTES, TRATAMOS DE PRODUCIR MABS QUE FUERAN CAPACES DE RECONOCER DE MANERA ESPECIFICA MOLECULAS ANTIGENICAS PRESENTES EN CELULAS DE GLIOBLASTOMA HUMANO, Y QUE ADEMAS TUVIERAN CAPACIDAD CITOTOXICA FRENTE A ESTAS CELULAS, LO QUE FACILITARIA SU APLICACION COMO AGENTES INMUNOTERAPEUTICOS. MEDIANTE LA TECNICA DE LA FUSION CELULAR A TRAVES DEL POLIETILENGLICOL SE PRODUJERON VARIOS MABS CONTRA CELULAS DEL GLIOBLASTOMA HUMANO R-110, QUE HABIA SIDO MANTENIDO EN RATONES DESNUDOS TRAS SU EXTIRPACION DEL PACIENTE POR CIRUGIA. LOS ANTICUERPOS OBTENIDOS SE SELECCIONARON, INICIALMENTE, EN BASE A SU CAPACIDAD PARA REACCIONAR CON MOLECULAS PRESENTES EN EL GLIOBLASTOMA HUMANO R-110 Y AUSENTES EN EL CEREBRO HUMANO ADULTO NORMAL, BIEN POR INMUNOHISTOQUIMIA O POR ELISA. TODOS AQUELLOS MABS SELECCIONADOS, CAPACES DE RECONOCER CELULAS TUMORALES DE MANERA SELECTIVA, FUERON ENSAYADOS PARA DETERMINAR SU POTENCIAL CITOTOXICO FRENTE A DIFERENTES LINEAS TUMORALES CEREBRALES, NO CEREBRALES Y CELULAS NORMALES NO TRANSFORMADAS. ASI PUDIMOS DETECTAR CINCO HIBRIDOS PRODUCTORES DE ANTICUERPOS CON DIFERENTES MODELOS DE REACTIVIDAD PERO SEMEJANTES EN CUANTO AL CUMPLIMIENTO DE UNA SERIE DE CARACTERISTICAS ESPECIFICAS QUE LOS HICIERON SUMAMENTE INTERESANTES PARA NUESTROS OBJETIVOS. ESTOS MABS (1A1-B7, 1D4-G3, 2A12, 3D9 Y 3G2) ERAN CAPACES DE INHIBIR, CASI EN SU TOTALIDAD, EL CRECIMIENTO DE LOS GLIOBLASTOMAS HUMANOS R-110-P6 Y R-110-P35 (MAS DEL 90%), Y DE LAS LINEAS CONTINUAS DE GLIOMAS HUMANOS U-87 MG, U-138 MG Y U-373 MG EN PROPORCIONES SIMILARES. EL CRECIMIENTO DE LA LINEA CONTINUA DE GLIOMA DE RATA C6 SE VIO TAMBIEN AFECTADO POR ALGUNOS MABS, AUNQUE EN MENOR GRADO. SIN EMBARGO, NINGUNO DE LOS MABS ALTERARON EL CRECIMIENTO DE CULTIVOS DE ASTROCITOS PRIMARIOS DE RATA, DE MIELOMA DE RATON NI DE CARCINOMAS HUMANOS DE DISTINTOS ORIGENES. EL MISMO PATRON DE RESULTADOS SE OBTUVO AL ANALIZAR LA REACTIVIDAD DE LOS ANTICUERPOS MEDIANTE LA TECNICA DE ELISA, DONDE ADEMAS SE PUDO OBSERVAR COMO LOS ANTIGENOS ESPECIFICOS DE TUMOR DETECTADOS ESTABAN TAMBIEN PRESENTES EN SEIS GLIOBLASTOMAS MULTIFORMES OBTENIDOS DIRECTAMENTE DEL PACIENTE Y NO SE ENCONTRABAN EN DIFERENTES AREAS DE DISTINTOS CEREBROS ADULTOS NORMALES. ADEMAS, LOS MABS 2A12 Y 3D9 SE MOSTRARON CITOTOXICOS IN VIVO AL REDUCIR SIGNIFICATIVAMENTE EL RITMO DE CRECIMIENTO DEL GLIOBLASTOMA U-373 MG INOCULADO EN RATONES ATIMICOS. POR ULTIMO, Y MEDIANTE TECNICAS ELECTROFORETICAS, SE PUDO DEMOSTRAR QUE CADA MABS IBA DIRIGIDO HACIA MOLECULAS ANTIGENICAS DISTINTAS, DE NATURALEZA PROTEICA Y CON PESOS MOLECULARES COMPRENDIDOS ENTRE 16 Y 50 KD. POR TODO ESTO SE PUEDE CONCLUIR QUE LOS MABS OBTENIDOS EN ESTE TRABAJO SON CAPACES DE RECONOCER DETERMINANTES ANTIGENICOS ASOCIADOS A LAS CELULAS DE GLIOBLASTOMAS HUMANOS, QUE ESTAN AUSENTES EN LAS CELULAS CEREBRALES NORMALES HUMANAS ASI COMO EN OTROS TIPOS TUMORALES DE ORIGEN NO GLIAL, Y ADEMAS CAUSAR LA MUERTE DE ESTAS CELULAS TUMORALES TANTO IN VITRO COMO IN VIVO, POR LO QUE PODRIAN SER UTILES MARCADORES TUMORALES DE GLIOMA Y TENER UN IMPORTANTE VALOR INMUNOTERAPEUTICO.

Autor: SEVIL GRIMAL BELEN.
Año: 1993.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: TOXICOLOGIA Y FARMACOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ENSAYOS ALTERNATIVOS EN EXPERIMENTACION ANIMAL APLICADOS A FARMACOLOGIA Y TOXICOLOGIA VETERINARIA.

Resumen: LAS ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS SON UN TEMA DE PLENA ACTUALIDAD; PARA SU ESTUDIO ES IMPORTANTE INDUCIR ALTERACIONES MOTORAS Y DEL COMPORTAMIENTO EN LOS ANIMALES DE LABORATORIO. PRECISAMENTE LA CONJUNCION DE LOS CULTIVOS CELULARES NERVIOSOS, NEURONALES Y ASTROCITARIOS, Y LOS EFECTOS DEL IDPN SON UNA BUENA BASE PARA EL ESTUDIO DE LAS ENFERMEDADES NERVIOSAS HUMANAS. ESTE COMPUESTO PRODUCE UNA NEUROPATIA EXPERIMENTAL Y UNOS CAMBIOS ESTRUCTURALES EN EL AXON QUE SON UN MODELO EXCELENTE PARA EL ESTUDIO DE ENFERMEDADES NEURODEGENERATIVAS. ASI PUES, UNA VEZ ESTABLECIDO ESTE MODELO, HEMOS VALORADO EL DAÑO PRODUCIDO POR EL IDPN Y PODEMOS ESTUDIAR EL EFECTO REPARANTE DEL FACTOR DE CRECIMIENTO FIBROPLASTICO (FGFB). EL ESTUDIO DE LA ACCION REPARANTE DEL FGFB IN VITRO PUEDE SER INTERESANTE POR EL APORTE DE DATOS DIRIGIDOS A TRABAJOS POSTERIORES DE REPARACION IN VIVO EN PACIENTES QUE SUFREN DE NEURODEGENERACION.

Autor: MARTIN CLEMENTE JUAN PEDRO.
Año: 1992.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: RECURSOS FITOGENETICOS.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION GENICA A NIVEL DE PROTEINAS SOLUBLES Y DE ISOENZIMAS, MEDIANTE TECNICAS ELECTROFORETICAS, DURANTE EL DESARROLLO DE PROCESOS DE RIZOGENESIS, DE CAULOGENESIS Y DE EMBRIOGENESIS SOMATICA INDUCIDOS EN CALLOS, QUE HAN SIDO OBTENIDOS A PARTIR DE EXPLANTOS DE HOJAS COTILEDONARES Y DE HIPOCOTILO, DE TRES VARIEDADES COMERCIALES DEL GENERO BRASSICA: B. OLERACEA VAR. BOTRYTIS, B. NAPUS VAR. OLEIFERA CV. ORO Y B. NAPUS VAR. OLEIFERA CV. JET NEUF. ADEMAS, MEDIANTE TECNICAS HISTOLOGICAS SE HA SEGUIDO LA EVOLUCION DE DICHOS PROCESOS MORFOGENICOS, DE MANERA QUE HAN PODIDO SER CORRELACIONADOS LOS CAMBIOS MACROMORFOLOGICOS E HISTOLOGICOS OBSERVADOS EN LOS CALLOS CON MODIFICACIONES EN LA EXPRESION PROTEICA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE TANTO LA RESPUESTA CALLOGENICA COMO LA MORFOGENICA VARIAN EN FUNCION DEL GENOTIPO. TAMBIEN SE HAN ENCONTRADO DIFERENCIAS EN LA COMPETENCIA Y EN LA DETERMINACION MORFOGENICAS DEPENDIENDO DEL TIPO DE EXPLANTO PRIMARIO UTILIZADO; ASI, LOS CALLOS DERIVADOS DE EXPLANTOS COTILEDONARES SOLO HAN DADO LUGAR A PROCESOS ORGANOGENICOS Y NUNCA HAN LLEGADO A FORMAR EMBRIONES SOMATICOS, MIENTRAS QUE LOS CALLOS DE HIPOCOTILO HAN DESARROLLADO ESTRUCTURAS EMBRIOGENICAS Y RIZOGENICAS, PERO EN NINGUN CASO SE ORIGINARON BROTES ADVENTICIOS. EN CUANTO AL CONTENIDO DE PROTEINAS SOLUBLES, DE FORMA GENERAL, SE HA OBSERVADO UNA DISMUNUCION DE DICHO PARAMETRO CON LA FORMACION Y EL DESARROLLO DE ORGANOS ADVENTICIOS EN LOS CALLOS. ESTE PARAMETRO MUESTRA DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS ENTRE SUBTIPOS DE CALLOS CON DIFERENTE CAPACIDAD ORGANOGENICA, LO CUAL NO OCURRE EN EL TRATAMIENTO DE EMBRIOGENESIS SOMATICA. EN CADA UNA DE LAS ETAPAS DEFINIDAS PARA LOS TRATAMIENTOS DE MORFOGENESIS HAN SIDO EXAMINADOS LOS PATRONES ELECTROFORETICOS MONO-Y BIDIMENSIONALES DE PROTEINAS SINTETIZADAS IN VIVO. EL ESTUDIO DE LOS PATRONES PROTEICOS MONODIMENSIONALES HA REVELADO ESCASOS CAMBIOS Y DE CARACTER CUANTITATIVO, QUE NO PUEDEN SER CORRELACIONADOS CLARAMENTE CON LOS EVENTOS MORFOGENICOS DESARROLLADOS EN LOS CALLOS. POR OTRO LADO, LOS PATRONES BIDIMENSIONALES MUESTRAN CAMBIOS CUALITATIVOS Y CUANTITATIVOS QUE PUEDEN SER RELACIONADOS CON LAS DIFERENTES RESPUESTAS OBSERVADAS DURANTE LOS TRATAMIENTOS IN VITRO. MEDIANTE ESTA TECNICA ELECTROFORETICA SE HAN PODIDO IDENTIFICAR: PROTEINAS POSIBLEMENTE IMPLICADAS EN EL METABOLISMO BASICO, POLIPEPTIDOS QUE PODRIAN ESTAR ASOCIADOS CON PROCESOS DE CALLOGENESIS, Y POLIPEPTIDOS QUE PUEDEN SER CORRELACIONADOS CON EL DESARROLLO DE ORGANOS ADVENTICIOS, TANTO RAICES (PROTEINAS 5, 10, 12 Y 21) COMO BROTES (PROTEINA 4), O BIEN CON LA FORMACION DE ESTRUCTURAS EMBRIOGENICAS (PROTEINAS 11,18,32 Y 34). DE IGUAL FORMA SE HAN DETECTADO VARIAS PROTEINAS CUYA SINTESIS ES REPRIMIDA CON EL DESARROLLO DE RAICES (POLIPEPTIDOS 2, 13, 14, 15, 24, 26 Y 33) O BROTES (POLIPEPTIDOS 28 Y 29). EN EL PROCESO DE EMBRIOGENESIS TAMBIEN CABE DESTACAR UNA POSIBLE RELACION DEL POLIPEPTIDO 8 CON LA PERDIDA DE CAPACIDAD PARA DESARROLLAR EMBRIONES SOMATICOS EN CALLOS DE BRASSICA. ADEMAS, EN LA SINTESIS DE PROTEINAS IN VIVO SE HAN OBSERVADO MODIFICACIONES QUE DEPENDEN DEL GENOTIPO, DEL TIPO DE EXPLANTO PRIMARIO Y, POSIBLEMENTE, DE LOS REGULADORES DE CRECIMIENTO EMPLEADOS EN CADA CASO. EL ESTUDIO DE VARIOS SISTEMAS ISOENZIMATICOS (ESTERASAS, FOSFATASA ACIDA, PEROXIDASAS, ENZIMA MALICO Y GLUTAMATO DESHIDROGENASA), HA PUESTO DE MANIFIESTO LA EXISTENCIA DE MODIFICACIONES EN LOS RESPECTIVOS ZIMOGRAMAS, QUE PUEDEN SER CORRELACIONADAS CON DIFERENTES SUCESOS DURANTE LA RESPUESTA IN VITRO. LAS MAYORES DIFERENCIAS GENOTIPICAS SE HAN DETECTADO EN LOS PATRONES DE ESTERASAS Y FOSFATASA ACIDA. MODIFICACIONES, CUALITATIVAS Y CUANTITATIVAS, EN LOS SISTEMAS ESTERASAS Y PEROXIDASAS HAN PODIDO SER RELACIONADAS CON LA FORMACION Y EL DESARROLLO DE ORGANOS ADVENTICIOS, MIENTRAS QUE UNICAMENTE UNA ISOESTERASA HA PODIDO CORRELACIONARSE CON LA INDUCCION DE EMBRIOGENESIS SOMATICA. POR OTRA PARTE, LA ISOFORMA MAS ANODICA DEL SISTEMA GLUTAMATO DESHIDROGENASA PODRIA ESTAR CORRELACIONADA CON LA CAPACIDAD DE DESARROLLAR EL PROGRAMA EMBRIOGENICO EN CALLOS DE BRASSICA.

Autor: AVILA ZARAGOZA MATIAS ANTONIO.
Año: 1991.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II.

Resumen: LA INSULINA, AL INTERACCIONAR CON SU RECEPTOR DE MEMBRANA ESTIMULA LA HIDROLISIS DE UN GLICOSIL-FOSFATIDILINOSITOL (GPI), GENERANDOSE UN INOSITOL-FOSFOGLICANO (IPG) QUE HA SIDO IMPLICADO COMO MEDIADOR DE LOS EFECTOS METABOLICOS "A CORTO PLAZO" DE LA HORMONA. EN ESTE TRABAJO SE HA EVALUADO LA CAPACIDAD DEL IPG DE MEDIAR EFECTOS CONSIDERADOS "A LARGO PLAZO" DE LA INSULINA: LA ESTIMULACION DE LA PROLIFERACION CELULAR Y LA REGULACION DE LA EXPRESION GENICA. LOS DATOS OBTENIDOS APOYAN LA HIPOTESIS DE QUE EL SISTEMA GPI/IPG SE INVOLUCRA PLENAMENTE EN LA TRANSMISION DE ESTAS SEÑALES DE LA INSULINA. EN UNA SEGUNDA PARTE SE HA CARACTERIZADO UN GPI EN GANGLIO COCLEOVESTIBULAR DE EMBRION DE POLLO, ORGANO EMBRIONARIO CUYO CRECIMIENTO EN ESTADIOS TEMPRANOS SE DEMUESTRA ESTAR REGULADO POR LAS NEUROTROFINAS BDNF Y NT3. A LA VEZ QUE SE HA REALIZADO ESTE ESTUDIO DEL CONTROL PROLIFERATIVO, SE HA MOSTRADO EL PAPEL DEL SISTEMA DE SEÑALIZACION GPI/IPG EN LA MEDIACION DE LA SEÑAL DE ESTAS NEUROTROFINAS Y DEL NGF.

Autor: NAVARRO RECUERO SALUD.
Año: 1991.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CITOLOGIA E HISTOLOGIA NORMAL Y PATOLOGICA PROGRAMA DE DOCTORADO:.

Resumen: SE REALIZA UN ESTUDIO EN LESIONES PROLIFERATIVAS DE LA MAMA, TANTO BENIGNAS COMO MALIGNAS, A LAS QUE SE APLICA UNA TECNICA CON LECTINAS PARA INTENTAR ESTABLECER UN MARCADOR TISULAR FIABLE ENTRE LAS DISTINTAS PATOLOGIAS. LAS LECTINAS UTILIZADAS HAN SIDO LAS SIGUIENTES: ULEX EUROPAEUS-I, DOLICHOS BIFLORUS, TRITICUM VULGARE, SUCC DE TRITICUM VULGARE, ARACHIS HYPOGAEA, GLYCINEMAX Y BAVHINIA PURPUREA, CADA UNA DE ELLAS CON AFINIDAD PARA DISTINTOS RADICALES GLUCOSIDICOS. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS HAY QUE DESTACAR LA MAYOR POSITIVIDAD EN SUPERFICIE APICAL CELULAR EN LAS PATOLOGIAS BENIGNAS (FIBROADENOMAS Y MASTOPATIAS FIBROQUISTICAS), EN CAMBIO EN LOS CARCINOMAS SE OBSERVA MAYOR REACCION EN EL CITOPLASMA DE LAS CELULAS NEOPLASICAS, DESTACANDO TAMBIEN EN ESTOS LA PRESENCIA DE NUMEROSAS "INCLUSIONES" CITOPLASMICAS.

Autor: TRIGO SANCHEZ M. INMACULADA.
Año: 1991.
Universidad: SEVILLA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CITOLOGIA E HISTOLOGIA NORMAL Y PATOLOGICA PROGRAMA DE DOCTORADO: PATOLOGIA TUMORAL.

Resumen: EN LA ACTUALIDAD EXISTEN NUMEROSAS ALTERACIONES CROMOSOMICAS ASOCIADAS CON TIPOS TUMORALES ESPECIFICOS, PERO DADO QUE LA MAYORIA DE LOS DATOS SE REFIEREN A TUMORES LIQUIDOS, MIENTRAS QUE LOS ESTUDIOS EN TUMORES SOLIDOS SON MUY ESCASOS NOS PLANTEAMOS EL ESTUDIO CITOGENETICO DE LAS NEOPLASIAS QUE AFECTAN AL PULMON EN BUSCA DE ANOMALIAS CROMOSOMICAS QUE PUEDAN DIFERENCIAR LAS DISTINTAS PATOLOGIAS NEOPLASICAS. PARA ELLO, REALIZAMOS EL ANALISIS CITOGENETICO DE 90 EXUDADOS PLEURALES Y DE 29 MUESTRAS DE TEJIDOS PULMONARES, APLICANDOLES TECNICAS DE BANDEO CBG, GTG Y POSTERIOR TRATAMIENTO ESTADISTICO. COMPROBAMOS QUE LA MAYORIA DE LOS CROMOSOMAS SE ENCUENTRAN INVOLUCRADOS EN ALTERACIONES CROMOSOMICAS, NO OBSTANTE, LOS SELECTIVAMENTE IMPLICADOS EN CADA TIPO TUMORAL SON DISTINTOS, ASI EN OAT CELL SON EL 1, 19 Y 20 ENCONTRANDO EN UN CASO NUMEROSOS CROMOSOMAS DOBLE MINUTO (PROBABLEMENTE REPRESENTAN EL ONCOGEN MYC AMPLIFICADO). EN CARCINOMA EPIDERMOIDE EL 17 Y 19, LLAMANDO LA ATENCION LA GRAN IMPLICACION DEL CROMOSOMA 17 EN MONOSOMIAS, DADO QUE EN EL SE ENCUENTRA EL ANTIONCOGEN P53. EN CARCINOMA GASTRICO EL 1, 3, 16, 19 Y 21.EN CARCINOMA DE OVARIO EL 17 Y X, LA PERDIDA DEL X PARECE SER UN HALLAZGO COMUN, PUDIENDO SER UNA POSIBLE VIA DE CARCINOGENESIS EN ESTE TIPO TUMORAL. EN MESOTELIOMA EL 5, 9, 10 Y 13. EN ADENOCARCINOMA PULMONAR EL 5, 8, 10, 20 Y 21. FINALMENTE EN LINFOMA EL 3, 8 Y 14. ESTA DIFERENTE IMPLICACION DE LOS CROMOSOMAS PROBABLEMENTE ES DEBIDA A LA EXISTENCIA DE DETERMINADOS ONCOGENES O ANTIONCOGENES EN ELLOS QUE SE ACTIVAN O INACTIVAN POR AMPLIFICACION GENETICA, PERDIDA DEL CONTROL DE LA REGULACION O POR PERDIDA DEL FRAGMENTO CROMOSOMICO QUE LOS CONTIENE.

Autor: ALCALA ARELLANO ANGELA.
Año: 1990.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIRUGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: PLAN ANTIGUO.

Resumen: EN ESTA MEMORIA SE ABORDA EL ESTUDIO DE LA BIOLOGIA CELULAR DE MENINGIOMAS HUMANOS, MEDIANTE EL ANALISIS DE SU COMPORTAMIENTO EN CULTIVOS CELULARES Y HETEROTRASPLANTES EN ANIMALES INMUNODEPRIMIDOS (RATONES ATIMICOS). TANTO LOS CULTIVOS CELULARES COMO LAS MASAS NEOPLASICAS DESARROLLADAS EN DICHOS ANIMALES SE HAN CARACTERIZADO SEGUN PARAMETROS MORFOLOGICOS, HISTOQUIMICOS E INMUNOCITOQUIMICOS. ESTOS TUMORES SE COMPORTAN SEGUN CRITERIOS ESPECIFICOS QUE DEFINEN SU ESTIRPE ORIGINARIA Y LA PLURIPOTENCIALIDAD DE EXPRESION FENOTIPICA DE LA MISMA. LOS MENINGIOMAS HUMANOS PRESENTAN UNA BUENA CAPACIDAD TUMORIGENICA, 70%, EN LOS RATONES ATIMICOS, TRAS EL XEROINJERTO DE ESTAS NEOPLASIAS EN TORAX ANTERIOR SE DESARROLLAN MASAS TUMORALES HOMOGENEAS, VASCULARIZADAS, REALIZANDOSE CON EXITO HETEROTRASPLANTES SUCESIVOS. LOS MENINGIOMAS PRESENTAN UNA MODULACION HORMONAL YA QUE SU CAPACIDAD TUMORIGENICA ES SIGNIFICATIVAMENTE MAYOR EN HUESPEDES HEMBRAS. DESTACAMOS UN INCREMENTO EN SU FRACCION DE CRECIMIENTO CUANDO SE INOCULAN SIMULTANEAMENTE CON LINEAS CONTINUAS MURINAS DE ADENOCARCINOMA DE MAMA. LAS MASAS TUMORALES DESARROLLADAS PRESENTAN CARACTERISTICAS FENOTIPICAS PROPIAS DE ESTIRPES EPITELIALES (PRESENCIA DE CK, EMA, PATRONES MORFOLOGICOS MENINGOTELIALES). LO QUE CONDUCE A ADJUDICAR A LAS ESTIRPES PROLIFERANTES O STEM CELLS TUMORALES, UNA ESTIRPE O DIFERENCIACION EPITELIAL. EL MANTENIMIENTO DEL COCIENTE DIFERENCIACION/ PROLIFERACION CELULAR QUE CARACTERIZA A LOS ELEMENTOS INTEGRANTES DE UNA NEOPLASIA SE MANIFESTARIA EN ESTOS TUMORES, PUESTO QUE LAS MASAS DESARROLLADAS EN LOS ANIMALES, AL SER CULTIVADAS, EXHIBEN CARACTERISTICAS MORFOLOGICAS E INMUNOCITOQUIMICAS DE DIFERENCIACION EPITELIAL.

Autor: ESCALERA GRIMA MARIANO ANTONIO DE LA.
Año: 1990.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS (C.S.I.C.) .

Resumen: HEMOS DETERMINADO QUE ETAPAS DEL CICLO CELULAR ESTAN REGULADAS POR EL TAMAÑO CELULAR EN CELULAS MERISTEMATICAS DE LA RAIZ DE ALLIUM CEPA. PARA ELLO, HEMOS MEDIDO LA VARIABILIDAD DE LA DURACION DE CADA UNA DE LAS FASES DEL CICLO CELULAR, Y LA HEMOS RELACIONADO CON LAS DISTRIBUCIONES DE TAMAÑOS CELULARES EN ALGUNOS PUNTOS CONCRETOS DEL CICLO. ESTO NOS HA PERMITIDO: I) CONFIRMAR LA EXISTENCIA DE UNA APARENTE MASA CRITICA NECESARIA PARA COMENZAR LA REPLICACION DEL DNA, UNA VEZ ALCANZADA LA CUAL, LA PROBABILIDAD DE INICIAR LA SINTESIS DE DNA AUMENTA CON EL TAMAÑO DE LA CELULA ("SLOPPY SIZE CONTROL MODEL"); II) AFIRMAR QUE EXISTE UNA ESTRICTA CORRELACION NEGATIVA ENTRE EL TAMAÑO CELULAR EN LA INICIACION DE LA REPLICACION Y LA DURACION DE LA ETAPA S; Y III) AFIRMAR QUE EL TAMAÑO CELULAR MODULA LA DURACION DE LA PARTE POSREPLICATIVA DEL CICLO. SE HA ESTUDIADO LA PROLIFERACION EN CULTIVOS CELULARES DE ESTA ESPECIE. PARA ELLO HEMOS SELECCIONADO LAS CONDICIONES OPTIMAS QUE PERMITEN OBTENER Y MANTENER CALLOS INDIFERENCIADOS. ESTAS CONDICIONES CORRESPONDEN A: MEDIO BDS, OSCURIDAD, 25 C, LA COMBINACION HORMONAL DE ACIDO 2,4-DICLOROFENOXIACETICO 2.5 UM CON KINETINA 5 UM, Y EXPLANTES PROCEDENTES DE LA CORONA BULBAR. SE PRESENTAN RESULTADOS SOBRE ALGUNOS ASPECTOS CONCRETOS DE LA PROLIFERACION DE LAS CELULAS EN CULTIVO: A) LA DURACION DE ALGUNA DE LAS ETAPAS DEL CICLO EN LAS CELULAS CULTIVADAS; B) EL ANALISIS ELECTROFORETICO DE LA FRACCION SOLUBLE DE PROTEINAS PROCEDENTES DE ALGUNOS TIPOS DE CALLOS Y DE LA RAIZ; C) EL ANALISIS DE LA PROLIFERACION EN MERISTEMOS DE RAICES REGENERADAS POR EMBRIOGENESIS SOMATICA A PARTIR DE CALLOS, Y D) OBTENCION Y CULTIVO DE PROTOPLASTOS DE ESTA ESPECIE.