MORFOLOGIA CELULAR, 2

Autor: ADAN TAPIA BEGOÑA.
Año: 1998.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: En el sistema nervioso central las masas tumorales inducen cambios en el lecho microvascular para adecuarlo a sus necesidades de crecimiento. En función de la tasa de proliferación y el grado de malignidad, el endotelio y la membrana basal vascular experimentan alteraciones a nivel morfológico y bioquímico que influyen en la funcionalidad de los vasos. En el presente trabajo se ha realizado una caracterización fenotípica de los vasos tumorales y peritumorales en una serie de gliomas astrocíticos y meningiomas. En los gliomas, la tipificación de la pared vascular mediante histoquímica de lectinas (RCA-I, UEA-I, WGA y ConA) e inmunohistoquímica de antígenos específicos del endotelio (factor de von Willebrand) y de la membrana basal (Colágeno IV), revela una pérdida de la expresión de factor de von Willebrand y un aumento de los radicales de D-manosa marcados por ConA en el endotelio conforme aumenta la malignidad tumoral. La valoración los meningiomas confirma una distribución homogénea de los marcadores propuestos. Sin embargo, los meningiomas de elevada proliferación y mayor malignidad presentan cambios de la pared vascular similares a los observados en gliomas. La expresión de Glicoproteína-P en el endotelio y en las células tumorales de los gliomas se ve alterada en relación con el índice de proliferación y puede explicar el desarrollo de resistencia ante los tratamientos quimioterápicos. El recuento de estructuras que expresan proteínas implicadas en la angiogénesis (VEGF y PDGFR-beta) no solo aporta información acerca del potencial angiogénico tumoral sino también sobre su capacidad edematógena y proliferativa respectivamente. El estudio morfométrico de la vascularización permite una comprobación de la formación de nuevos vasos o de la modificación de los preexistentes, poniendo de manifiesto un aumento significativo del diámetro, del perímetro y de la superficie de la luz vascular, sin que se detecten diferencias notables en el número de vasos en tejido tumoral y peritumoral. El estudio comparado del potencial angiogénico, el índice de proliferación y los datos morfométricos aportan una visión integradora de los procesos que tienen lugar en el microambiente tumoral.

Autor: GUERRICAGOITIA MARINA INMACULADA.
Año: 1998.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Este trabajo estudia la presencia del péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP) y de 3 proteínas ligantes de calcio (calbindina, parvalbúmina y calretinina) en los estratos superficiales e intermedios del colículo superior en el transcurso del desarrollo postnatal y los cambios que acontecen en su expresión tras la desaferenciación retiniana unilateral utilizando como modelo experimental la rata Sprague-Dawley. La localización de estas 4 proteínas se ha realizado mediante técnicas convencionales de inmunohistoquimia que han permitido estudiar su distribución en dicho núcleo. Complementariamente se ha estudiado la expresión del CGRP, en otros núcleos del sistema nervioso central, tanto durante el desarrollo prenatal como postnatal. Los resultados indican que la expresión de CGRP, en numerosos centros nerviosos, aumenta durante la primera semana postnatal, alcanza niveles máximos al término de la misma, comenzando posteriormente a disminuir hasta estabilizarse en unos niveles de expresión adultos entre los 15 y 20 días de vida postnatal. Una maduración similar se observa en las capas intermedias y superficiales del colículo superior. Inicialmente se aprecian abundantes fibras y neuronas que paulatinamente van desapareciendo hasta que en adulto la inmunorreactividad se restringe a pequeños fragmentos de fibras y algunos cuerpos neuronales aislados y débilmente teñidos. La desaferenciación visual tiene como consecuencia un aumento del número de células y fibras inmunorreactivas para el CGRP en las capas superficiales del colículo que persiste en el adulto. Las 3 proteínas ligantes de calcio estudiadas se expresan en los estratos superficiales del colículo superior con un patrón de distribución diferencial, desde la segunda semana de edad postnatal. Su expresión varía también de forma diferencial tras la desaferenciación visual dependiendo incluso de la edad del animal lesionado y de la supervivencia postlesional.

Autor: ALGUIZA BERROETA CORO.
Año: 1998.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Los tumores cerebrales son procesos proliferativos incontrolados. En las células que conformaban los tejidos los mecanismos moleculares encargados de regular la división y muerte celular pueden experimentar diversas alteraciones dando lugar a la formación de un proceso neoplásico. El estudio del desequilibrio entre la proliferación y muerte celular en tumores cerebrales resulta de sumo interés en cuanto a que aporta una información sobre la velocidad con la que la masa tumoral está creciendo. Este dato puede ayudar en el diagnóstico y pronóstico de la enfermedad, e incluso orientar las pautas terapeúticas a instaurar en base a la cinética celular. Así mismo, la identificación de las alteraciones en la expresión de ciertas proteínas implicadas en la regulación del ciclo celular, como la proteína supresora tumoral p53 y la oncoproteína p21-ras, pueden aportar un mejor conocimiento sobre la genésis y el desarrollo de dichos procesos. Por todo ello, el presente trabajo se ha centrado en la valoración de la proliferación y pérdida celular por apoptosis y la expresión de proteínas asociadas al ciclo en tumores cerebrales humanos. Con este propósito se empleó un conjunto de 177 muestras tumorales de diferente estirpe y grado de malignidad. Para la valoración de la proliferación celular se llevó a cabo un estudio comparativo entre diferentes métodos empleados actualmente. Se realizó una valoración del contenido en ADN por citometría de flujo, detección de PCNA y Ki-67 e incorporación de 5'-Bromo-2'- deoxiuridina (BrdU) en células tumorales "in vitro". La identificación de la apoptóis se realizó mediante la detección de radicales 3'-OH en los fragmentos de ADN y para la caracterización de la expresión de p53 y p21-ras se emplearon anticuerpos monoclonales específicos. Los datos obtenidos fueron relacionados con el tipo histológico y la supervivencia de los pacientes. Tras ello, se comprobó que la fracción proliferativa así como la expresión de PCNA, Ki-67 y BrdU aumentaba en aquellos tumores de mayor agresividad, siendo la expresión de PCNA la de mayor valor pronóstico. En meningiomas y meduloblastomas, la aparición de clones aneuploides incrementó notablemente en las formas con rasgos histológicos de malignidad. La capacidad de los tumores de mantener el mecanismo e muerte celular por apoptosis se hizo más patente en aquellos casos de mayor agresividad y mas proliferantes como son meduloblastomas y glioblastomas multiformes. La sobreexpresión de la proteína p53, se aprecio con gran frecuencia en las formas más agresivas y de peor pronóstico. Así mismo, p21-ras se expresó fundamentalmente en gliomas de estirpe astrocitaria y meningiomas con signos histológicos de malignidad.

Autor: CAMPO GONZALEZ DE LANGARICA JAVIER DEL.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Tras estudio computacional y morfoplanimátricode la expresión de la óxido nítrico sintasa neuroaltipo I, en los núcleos supraóptico, fornicales, circularis y en el área inter supraóptico-paraventricular del hipotálamo de rata cepa Wistat, el autor concluye que la expresión de la Nadph-diaforasa en las neuronas de estos núcleos es un hecho constante, que la morfoplanimetría y el estudio computacional con la técnica histoquímica de la NADPH-diaforsa es un buen diseño metodológico para valorar cambios plásticos en los núcleos del sistema nitrérgico del eje hipotálamo-hipofisario. Además, las neuronas NADPH-positivas del sistema hipotálamo-neurohipofisario en los núcleos estudiados sufren modificaciones tras la exposición a diferentes periodos de oscuridad y cambio de entorno. La deprivación de luz y modificación del entorno produce hiperactividad del sistema NADPH-diaforsa especialmente en el núcleo supraóptico y en menor medida en los magnocelulares accesorios. Este efecto es mayor cuanto mayor es la duración de la deprivación de luz. Por lo tanto, se confirma una clara relación entre el hipotálamo, el estrés y el óxido nítrico..

Autor: MOLINA RAMOS JUANA M..
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La morfoplanimetría y la técnica computacional con la técnica histoquímica de la NADPH-diaforasa es un método muy útil para detectar y valorar cambios plástico en el componente nuclear del sistema nitrérgico del eje hipotálamo-neurohipofisario. Con estos métodos, la autora observa que las neuronas NADPH-diaforosa positivas del sistema estudiado, sufren cambios tras distintas situaciones experimentales, en concreto, tras la exposición a bajas temperaturas. Así el frío produce un estado de hiperactividad del sistema nitrérgico hipotálamico, especialmente del NSO, al menos cuando se evalúa con técnica histoquímica y posterior morfoplanimetría. Este efecto de exposición al frío es mayor cuanto mas larga es la exposición. Pero al no existir diferencias significativas entre los tiempos largos estudiados, se concluye que el grado de hieractividad es prácticamente máximo a 12 horas. El estudio concluye destacando la estrecha relación entre óxido nítrico, hipotálamo y estrés..

Autor: VACAS BLAZQUEZ PABLO JOSE .
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Realizado un estudio morfoplanimétrico de la expresión de la óxido nítrico sintasa neuronal, detectada mediante técnica histoquímica de la NADPH-diaforasa en los componentes magno, parvi y mediocelulares del NPV del hipotálamo de rata Wistar, en condiciones de normalidad y tras estrés acuático a cuatro tiempo diferentes, se concluye que el sistema nitrérgico del NPV presenta un alto grado de plasticidad ante estímulos estresantes (en el presente caso, el ejercicio forzado), de manera que se produce un estado de hiperactividad de dicho sistema nitrérgico, especialmente de los componentes magno y parvicelular y en menor medida mediocelular. Dicho efecto es mayor cuanto más tiempo dura el ejercicio, aunque no existen diferencias entre los tiempos largos estudiados (30 y 40 minutos), lo cual hace suponer que el grado de hiperactividad máximo se alcanza a los 30 minutos. Estos resultados, junto con otros obtenidos que implicaban otros tipos de estrés indican una evidente relación entre el óxido nítrico, el NPV y el estrés..

Autor: AGUILARA COLLADO RICARDO ALFREDO.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La glándula pineal secreta serotonina y melatonina en respuesta a informes fóticos. Mientras que la detección inmunocitoquímica de la serotonina es factible en el momento actual, no ocurre así con la melatonina. Dado que la melatonina se involucra en la regulación de distintos procesos biológicos normales o patológicos, el desarrollo de programas de investigación que precisen del conocimiento de la actividad funcional de la glándula pineal necesitan de una metodología de trabajo que nos acerque al conocimiento de la actividad biosintética de la glándula. Por ello, en nuestro trabajo de Tesis Doctoral hemos estudiado con métodos citoquímicos e inmunocitoquímicos la presencia de enzimas (ATPasa calcio dependiente, ATPasa Na+-K+ dependiente, proteín Kinasa C, tiaminopirofosfatasa y fosfatasas ácidas) y de proteínas ligadoras del ión calcio (calbindina y calmodulina) involucradas en la síntesis y liberación de melatonina por los pinealocitos. El estudio combinado de dichas sustancias con técnicas citoquímicas (a nivel ultraestructural) e inmunocitoquímicas, nos permite establecer criterios comparativos sobre la eficacia de ambos tipos de técnicas para valorar la respuesta de la glándula pineal ante diversas situaciones experimentales, ampliándose así la batería de técnicas morfológicas aplicables a líneas de investigación básicas o clínicas..

Autor: HUERTA LOPEZ JUAN JOSE.
Año: 1998.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE OVIEDO.

Resumen: Los ratones mutantes rd/rd son visualmente ciegos, aún así son capaces de sincronizar sus ritmos endógenos con los ciclos externos de luz-oscuridad. En esta tesis se utilizaron métodos inmunocitoquímicos para analizar la inducción por la luz de la expresión de c-Fos. Los resultados mostraron que la expresión de c-Fos inducido por la luz en la retina rd no se atenúa con el progreso de la degeneración. Además se encontró que las células que expresan Fos en respuesta a la luz se distribuyen homogeneamente por toda la retina, mientras que la expresión de opsina tine lugar sólo en la zona dorsal de la retina de ratones rd de un año de edad. Finalmente se encontró que la luz induce los mismos niveles de Fos en la retina durante el día y durante la noche subjetiva, mientras que en el núcleo supraquiasmático, Fos es estimulado sólo durante la noche subjetiva. Estos resultados apoyan la hipotesis de que existen nuevos, aún no descubiertos, fotorreceptores en la retina implicados en la captación de la luz para el sistema circadiano.

Autor: GARCIA SANTOS LUIS M..
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La metodología fundamental del trabajo se basa en estudios con microscopía óptica del órgano pineal del Mauremys caspica, a partir de conocimientos ultraestructurales previos,aplicando métodos inmunocitoquímicos. Utilizamos así, antisueros que contienen anticuerpos contra sustancias como opsina y alfa-transucina (proteínas caracterísitcas de la fototransducción) y contras sustancias como serotonina y melatonina (monoaminas fundamentales de la actividad bisosintética del órgano pineal). Esta parte de nuestro tabajo ha estado orientada a tratar de definir al órgano pineal del Mauremys caspica como un órgano preferentemente fotorreceptor o por el contrario como una estructura fundamentalmente neuroendocrina. Asimismo, hemos utilizado antisueros que contienen anticuerpos contra marcadores específicos de ciertas estirpes celulares tales como proteína glial fibrilar ácida (GFAP), vimentina y proteína S-100, intentando identificar los diferentes tipos de células gliales presentes en el órgano pinela del Mauremys caspica. La ausencia de material inmunorreactivo tipo opsina y alfa-transducina y la presencia de material inmunorreactivo tipo serotonina y melatonina en el citoplasma y prolongaciones citoplasmáticas de pinealocitos cercanos al lecho vascular indican que dicho órgano se puede considerar como una esturctura fundamentalmente neuroendocrina. Asimismo, en el órgano pineal del Mauremys caspica existe una amplia población de células gliales con inmunorreactividad para el antisueiro anti S-100, localizada de forma clara a lo largo de todo el citoplasma de las células ependimarias intersiticiales dispuestas en empalizada, mientras que la inmunorreactividad para el antisuero anti-vimentina se localiza preferentemente en las células gliales que rodena al lecho vascular, afectando la inmunorreactividad del antisuero anti-GFAP a un número muy reducido de somas celulares y a manojos de fibras que discurren paralelamente al lecho vascular.

Autor: GUARDIOLA BARTOLOMÉ JOSE VICENTE.
Año: 1998.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se pretende completar un aspecto del desarrollo de la retina de la tortuga Pseudemis scripta Elegans que no se ha tratado hasta hoy. Se trata de la ultraestructura durante el desarrollo, y tratar de relacionarlo con resultados ya existentes en la bibliografía. Por este motivo, el presente trabajo consta de 2 partes diferenciadas pero que se continúan. Por una parte se pretende dar respuesta al desarrollo embrionario de la retina desde un punto de vista morfológico, y relacionarlo con los hallazgos elecrofisiologícos que se han producido. En este sentido habría que decir que existe una coincidencia entre el momento en que se produce la actividad espontánea en las células ganlionares y la formación de las sinapsis a nivel de la capa plexiforme interna de la retina; ambos eventos se producen en el estadío S22. De forma similar, también se produce una coincidencia entre la aparición de la respuesta electrofisiológica de las células ganglionares a un estímulo luminoso y el momento en que los fotorreceptores se encuentran formados, y son capaces de transmitir la señal luminosa, evento este que se produce en el estadío S23. Por otra parte centramos nuestro estudio en las retinas de tortugas psotnatales. En estos animales se pretende dar una respuesta morfológica a los hallazgos fisiológicos de Sernagor Grzwacz (1996), quienes habían sometido a las tortugas a diferentes condiciones experimentales (deprivación de luz y/o acción del clurare). Nosotros hemos sometido a las tortugas a las mismas condiciones experimentales, y hemos realizado una serie de medidas a nivel de la capa plexiforme interna de aquellos factores que pensamos pueden verse alterados, tales como los conos de crecimiento, procesos indicadores de degeneración los procesos sinápticos, tanto convencionales como en cintilla. De los resutlados obtendios se deduce que la densidad de conos de crecimientos es elfactor morfológico que mejor correlaciona con el crecimiento de los árboles dentríficos de las células ganglionares.

Autor: ABASCAL RUIZ M. IRENE.
Año: 1997.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: CONCEPTOS Y METODOS EN BIOLOGIA CELULAR CON IMPLICACIONES BIOMEDICAS. TRASLADO DE EXPEDIENTE DESDE LA UNIVERSIDAD PAIS V..

Resumen: La Tesis Doctoral se ha centrado en el estudio de dos aspectos diferentes del espermatozoide de rata. En primer lugar se ha procedido a la caracterización bioquímica del enzima a-L-fucosidasa, a su localización ultraestructural mediante técnicas inmunocitoquímicas en el espermatozoide y al estudio de los cambios que se producen en el enzima durante la maduración epididimaria de los espermatozoides. Así, se ha localizado el enzima en la superficie de la región convexa de la cabeza de los espermatozoides mediante la utilización de un anticuerpo anti-a-L-fucosidasa, no observándose la presencia del enzima en el acrosoma de los espermatozoides. Su localización específica en la superficie de la región convexa de la cabeza del espermatozoide, que es la zona de unión al ovocito en la rata, indicaria una posible relación del enzima con este proceso. La caracterización bioquímica del enzima determinó que se encuentra unido a la membrana plasmática del espermatozoide mediante fuerzas iónicas, no siendo una proteína integral de membrana. Posee dos subunidades de peso molecular 54 y 50 kDa, un pH óptimo de actividad próximo a 7 y dos únicas isoformas de pl 7.2 y 5.2. Durante el tránsito epididimario del espermatozoide no se producen cambios en los pesos moleculares de las subunidades del enzima así como tampoco en el pH óptimo de actividad del mismo. Sin embargo se observa que la isoforma de pl 5.2 aparece por vez primera en la zona distal de la cola del epididimaria. Es en esta zona donde los espermatozoides adquieren movilidad y capacidad fecundante, por lo que esta isoforma puede estar relacionada con los procesos de maduración que el espermatozoide sufre durante el tránsito epididimario y tener un papel en las interacciones espermatozoide- ovocito y/o en el proceso de fecundación. En segundo lugar, en la Tesis se ha realizado la identificación de diversos residuos oligosacarídicos mediante la utilización de técnicas citoquímicas de lectinas, tanto a nivel de microscopía de luz como de microscopía electrónica. Estos residuos se han localizado a lo largo de las diferentes regiones en las que se subdivide el epidídimo, tanto en las células que componen el epitelio como en los espermatozoides presentes en el lumen. Así por ejemplo, mediante el estudio de los residuos oligosacarídicos de las células principales del epitelio se ha visto que parece existir un mecanismo de regulación selectivo de la secreción de glicoproteínas por parte de estas células a lo largo del epidídimo. En el caso de las células claras, estas demostraron tener básicamente una función endocítica que se mantiene constante a lo largo del conducto epididimario. Los espermatozoides presentes en el lumen presentaron cambios en la composición oligosacarídica del acrosoma durante el tránsito epididimario, observándose la desaparición progresiva de residuos a y b-GalNac. Este hecho podría deberse a la acción de glicosidasas específicas presentes en la matriz acrosómica que se activarían durante el paso de los espermatozoides a lo largo del epidídimo.

Autor: CANCIO URIARTE IBAN.
Año: 1997.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ZOOLOGIA Y DINAMICA CELULAR ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA .

Resumen: Los peroxisomas son orgánulos rodeados de membrana sencilla distribuidos en el citoplasma de las células eucariotas. Se ha observado que la arquitectura de este orgánulo es dependiente de la especie, del tipo celular y también de la situación metabólica o fisiológica de la célula. Con este estudio se pretende estudiar la localización, estructura y función de los peroxisomas en las células de la glándula digestiva del mejillón y establecer las bases que nos permitirán desentrañar los procesos que gobiernan la biogénesis de los peroxisomas en estos organismos. En este estudio encontramos que diferentes tejidos del mejillón contienen las enzimas generadoras de radicales libres de oxígeno (ROS) palmitoil-CoA oxidasa (AOX), D-amino ácido oxidasa (DAOX), manitol oxidasa y xantina oxidorreductasa (XOR), AOX y DAOX están presentes en peroxisomas de la glándula digestiva del mejillón, lo que sugiere que los peroxisomas cumplen alguna función en el metabolismo lipídico y la producción de ROS en estos organismos. Además, los anticuerpos contra proteínas peroxisómicas de mamíferos pueden ser utilizadas como herramientas adecuadas para el estudio de los peroxisomas de moluscos. Las proteínas de la matriz peroxisómica catalasa, AOX y enzima multifuncional, y la proteína integral de la membrana peroxisómica de 70 kDa (PMP-70) han sido detectadas en peroxisomas de la glándula digestiva utilizando estos anticuerpos. Las enzimas de la via Beta-oxidativa han sido localizadas preferentemente en los epitelios de la glándula digestiva que realizan la absorción de los ácidos grasos (conductos y estómago). Urato oxidasa (UOX) no se localiza en peroxisomas en mejillones. Una proteína que reacciona con el anticuerpo contra la UOX hepática de rata, y que muestra una movilidad electroforética idéntica a su proteína correspondiente de mamíferos se localiza en compartimentos de la vía secretor, representando probablemente alguna proteína transportadora de urato. Los mejillones no muestran actividad xantina oxidasa alguna en los tejidos investigados. La actividad xantina deshidrogenasa (XDH) se localiza fuera de los peroxisomas en los conductos, el estómago y las células del epitelio renal y en el tejido conjuntivo de la glándula digestiva. Tanto la actividad enzimática como la proteína se encuentran en el tejido conjuntivo que rodea los vasos hemolinfáticos y los tejidos digestivos, así como alrededor de los protozoos parásitos. Los estudios de fraccionamiento celular revelan la existencia de dos subpoblaciones de peroxisomas en la glándula digestiva, una con un coeficiente de sedimentación de 1,15 g x cm elevada -3 junto con mitocondrias y que es más rica en catalasa y otra de 1.20 g x cm elevado -3 que esta enriquecida en AOX y PMP-70. Una de estas subpoblaciones puede estar constituida por peroxisomas capaces de importar proteínas, proceso esencial para la biogénesis de los peroxisomas. La exposición de los mejillones a ciertos contaminantes ambientales como el hidrocarburo policíciclico aromático benzo(a)pireno y un aceite lubricante comercial provoca una inducción moderada de las enzimas peroxisómicas AOX y DAOX aunque los incrementos en el volumen y el número de los peroxisomas no se detectan en todos los casos. La actividad AOX varía estacionalmente, con actividades 25 veces más altas durante los meses de finales de primavera/verano (abril a junio) que durante los meses invernales de menor actividad. También se han medido variaciones estacionales significativas en la actividad catalasa, las actividades más altas coincidiendo con los actividades más altas en AOX registradas durante el período primavera/verano. La actividad DAOX varía de forma no estacional con máximas en noviembre, febrero y mayo. Las densidades volumétrica, superficial y numérica de peroxisomas sufren variaciones estacionales significativas, coincidiendo los valores más altos con los meses en que se registran las actividades más altas de catalasa y AOX. Estas variaciones en la estructura y en la actividad de la Beta-oxidación peroxisómicas se correlacionan significativamente con los cambios en el contenido lipídico de la glándula digestiva, estando estas posiblemente relacionadas con disponibilidad de alimentos y el ciclo reproductor. La actividad XDH sufre variaciones estacionales significativas en su actividad siendo estas más altas durante los meses de verano, probablemente en relación a una intensificación del metabolismo de purinas originado por un aumento general de la demanda metabólica durante esta estación. El aumento en la actividad XDH llevaría a un aumento en las concentraciones de urato que podrían llevar a cabo una función desintoxicativa de los radicales libres de oxígeno en estos animales.

Autor: MARIN LOPEZ JUAN JOSE.
Año: 1997.
Universidad: GRANADA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA Y DIFERENCIACION CELULAR.

Resumen: El objetivo esencial ha sido el estudio de las pautas de la diferenciación morfológica de la macroglía del nervio óptico del pollo en condiciones normales de desarrollo, con especial atención a las interrelaciones que se van estableciendo entre los diversos elementos que comparten el entorno físico. Los aspectos estudiados han sido: 1 . Estudio de la diferenciación de los elementos histológicos del nervio (compartimento celular, vascular y neuropilo); 2 . Estudio de la organización histológica del nervio óptico en el pollo adulto y 3 . Estudio de las relaciones célula a célula que podrían influir en el proceso de diferenciación glial. Para ello se han empleado técnicas habituales e inmunocitoquímicas para microscopía óptica y electrónica, variantes del método de Golgi y el método de Kluver y Barrera. Los resultados demuestran una estrecha relación entre la diferenciación macroglial y otros procesos que acontecen durante la morfogénesis tardía del nervio (degeneración de axones ganglionares, proceso de vascularización y presencia masiva de células de microglía activa).

Autor: MARTINEZ QUINTANA M. EUGENIA.
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA E HISTOLOGIA HUMANAS PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS: ORGANIZACION MORFOFUNCIONAL DEL SISTEMA NERVIOSO.

Resumen: Después de un estudio histoquímico de la expresión de la oxido nítrico sintasa en el núcleo paraventricular del hipotálamo de ratas albinas (machos y hembras), tras ovariectomía bilateral y post-administración de 17 beta estradiol, se concluye que: 1/ La combinación de técnicas morfométricas y de contaje celular y la técnica histoquímica de la NADPH-DIAFORASA es excelente para valorar los cambios plásticos acaecidos en el sistema nitrérgico del NPV. 2/ Que las neuronas NADPH-DIAFORASA POSITIVAS, localizadas en el NPV, modifican sus características morfoplanimétricas después de determinadas situaciones experimentales, tal como la ovariectomía. 3/ La ovariectomía bilateral produce alteraciones que sugieren una hipoactividad del sistema nitrérgico de las 3 poblaciones neuronales del NPV (magno, parvi y medioceluar); especialmente en la población magno celular. Por el contrario la administración de 17 beta estradiol de manera crónica a animales machos provoca una hiperactividad del sistema de producción del óxido nítrico. 4/ Parece evidente que este esteroide gonadal es el responsable de los cambios producidos y que ejerce una acción estimuladora de la expresión/funcionamiento del óxido nítrico a nivel de las neuronas del NPV.

Autor: MAYO BARRALLO JUAN CARLOS.
Año: 1997.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MORFOLOGIA Y BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR. BIENIO 93-95.

Resumen: Uno de los modelos más empleados para el estudio del Parkinson es la línea celular neuronal PC12. La melatonina es una hormona con conocidas capacidades antioxidantes, antiproliferativas y antiapoptóticas. También se sabe que induce un aumento tanto de la actividad como del RNA de los enzimas antioxidantes. Esto nos llevó a plantearnos si esta hormona sería capaz de inhibir la citotoxicidad causada por ciertas neurotoxinas como la 6-OHDA y el MPP+. Demostramos que la melatonina es capaz de rescatar parcialmente las células PC12 de la muerte celular programada inducida por la 6-OHDA. Este efecto inhibidor de la melatonina está mediado por su acción sobre los niveles de RNA de los enzimas antioxidantes. Paralelamente, y dada la capacidad antiproliferativa de la melatonina, comprobamos que esta hormona también es capaz de inhibir la proliferación celular de las PC12. Estos dos efectos, antiproliferativo y antioxidante, podrían estar relacionados entre sí. La melatonina sólo fue capaz de inhibir la citotoxicidad causada por el H2O2 en células PC12 neuronales, potenciando el efecto antioxidante del NGF en estas células. Por último comprobamos que la melatonina fue capaz de inhibir la caída de viabilidad inducida por el MPP+ en este mismo modelo celular. Estas evidencias, además de ratificar el efecto antioxidante y antiproliferativo de la melatonina en células neuronales, apunta a la melatonina como una sustancia con posibilidades terapéuticas en el Parkinson.

Autor: PEREZ MENENDEZ M. TERESA .
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA E HISTOLOGIA HUMANAS PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS: ORGANIZACION MORFOFUNCIONAL DEL SISTEMA NERVIOSO.

Resumen: Tras un estudio histoquímico de la expresión de la actividad diaforasa en el núcleo supraóptico y en los magnocelulares accesorios de rata albina, tanto en condiciones de normalidad como tras la orquidectomía y la criptorquidia, se comprobó: 1/ Que la técnica histoquímica de la NADPH-DIAFORASA es un método adecuado y sencillo para detectar poblaciones neuronales magnocelulares y del sistema hipotálamo-hipofisario (tanto soma como prolongaciones). 2/ Que la expresión de la NADPH-DIAFORASA es muy estable. 3/ Que después de la orquidectomía bilateral y la criptorquidia bilateral, las poblaciones de neuronas que expresan actividad NADPH-DIAFORASA, modifican sus características morfo-planimétricas. 4/ Ambos estados experimentales sugieren un estado de hiperactividad de las neuronas magnocelulares, sin que existan diferencias en función del núcleo donde se localicen dichas neuronas. 5/ Los cambios morfológicos y morfométricos desaparecen tras el tratamiento con testosterona, por lo cual se supone que es ella la responsable de dichas modificaciones. 6/ En consecuencia, parece evidente que la esfera gonadas y el estado en el que se encuentre la misma, juega un papel a tener en cuenta en la regulación de la producción del óxido nítrico a nivel del sistema hipotálamo-hipofisario.

Autor: BELLO FERNANDEZ JOSE MANUEL.
Año: 1997.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El óxido nítrico (NO) es un mensajero biológico implicado en multitud de procesos fisiológicos y patofisiológicos tanto en el animal adulto como durante el desarrollo. Durante la angiogénesis, la inhibición crónica de la síntesis de NO con L-NAME durante el periodo embrionario produce alteraciones necróticas en la extremidad posterior de los animales recién nacidos. La incidencia de teratogénesis depende del periodo gestacional en que se administra el L-NAME pero no de la dosis del mismo. El sustrato de la NOS, la L-arginina, disminuye significativamente el número de crías con teratogénesis, mientras que los peroxinitritos lo aumentan. En los animales con teratogénesis, el L-NAME produce también un retardo del crecimiento fetal evidenciado por la disminución en el peso y la longitud corporal, permaneciendo éste efecto al menos hasta el inicio de la pubertad. Por otro lado, las alteraciones necróticas comienzan con un proceso inicialmente apoptótico de la célula endotelial, desencadenado por isquemia y agregación plaquetaria en la extremidad posterior. Durante el desarrollo prenatal y postnatal de la rata, el marcaje diaforasa se concentra durante las primeras fases de la gestación en el endotelio vascular y en el citoplasma perinuclear de la mayor parte de los neuroblastos. Conforme avanza el desarrollo, el marcaje en los vasos disminuye en intensidad al tiempo que éstos disminuyen de calibre y se ramifican. Por otro lado, se observa una clara expresión transitoria del enzima diaforasa en los cuerpos neuronales durante la maduración, pudiéndose diferenciar un gradiente temporal y regional de pérdida de la expresión del enzima en las neuronas corticales. Por último, las neuronas sólidamente marcadas aparecen por primera vez en el estadio P0 y las primeras fibras nitrérgicas en el estadio postnatal de 5 días. Tanto las neuronas sólidas como las fibras nitrérgicas maduran progresivamente adquiriendo ya la morfología adulta en el día postnatal de 21 días. Así pues, la inhibición crónica de la óxido nítrico sintasa durante la embriogénesis produce alteraciones vasculares graves en las extremidades posteriores. Sin embargo, no se altera el desarrollo normal de la corteza cerebral e hipocampo de la rata.

Autor: AVILES SANCHEZ MANUEL.
Año: 1996.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: CURSO AVANZADO DE MORFOLOGIA MICROSCOPICA.

Resumen: SE ESTUDIA LA COMPOSICION Y DISTRIBUCION DE LOS RESIDUOS GLUCIDICOS PRESENTES EN LA ZONA PELUCIDA DE FOLICULOS OVARICOS, OVULOS Y CIGOTOS DE RATA Y RATON. SE HAN APLICADO TECNICAS CITOQUIMICAS DE LECTINAS E INMUNOCITOQUIMICAS A NIVEL DE MICROSCOPIA DE LUZ Y ELECTRONICA. LOS RESULTADOS FUERON CUANTIFICADOS MEDIANTE ANALISIS DE IMAGEN COMPUTERIZADO. EN ESTE ESTUDIO OBSERVAMOS QUE DURANTE LA FOLICULOGENESIS Y TRAS LA FECUNDACION IN VIVO SE PRODUCE UN CAMBIO EN LA COMPOSICION GLUCIDICA QUE PODRIA ESTAR INVOLUCRADO EN EL PROCESO DE MADURACION ZONAL Y REACCION ZONAL. APORTAMOS DIFERENTES DATOS QUE APOYAN LA IMPLICACION DEL OOCITO EN LA SINTESIS DE LA ZONA PELUCIDA, LA VIA DE SECRECION ASI COMO EL PAPEL DESEMPEÑADO POR LOS GRANULOS CORTICALES TRAS LA FECUNDACION.

Autor: CEBALLOS AFAN DE RIVERA DOLORES.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIES.

Resumen: LOS CAMBIOS FISIOLOGICOS EN EL SNP CON LA EDAD ESTAN RELACIONADOS CON ALTERACIONES MORFOLOGICAS. EL PATRON DE ESTAS ALTERACIONES NO ESTA ESTABLECIDO COMPLETAMENTE. ESTE TRABAJO HA CONSISTIDO EN CARACTERIZAR MORFOLOGICA Y ULTRAESTRUCTURALMENTE EL NERVIO TIRIAL DE RATON. SE HAN UTILIZADO RATONES HEMBRA SWISS OF1 DE 2 A 33 MESES. LAS MUESTRAS SE HAN FIJADO, DESHIDRATADO E INCLUIDO EN EPON, OBTENIENDO SECCIONES SEMIEINAS Y ULTRAFINAS. EL ANALISIS MORFOMETRICO SE HA REALIZADO MEDIANTE TABLETA DIGITALIZADORA. EL AREA FASCICULAR, EL GROSOR DEL PERINEURO Y EL NUMERO DE FIBROBLASTOS APENAS VARIA, MIENTRAS QUE EL AUMENTO DE MACROFAGOS Y DE MASTOCITOS ES SIGNIFICATIVO YA A LOS 16 MESES. EN RATON, LA EDAD ENTRE 16-22 MESES PARECE SER CRITICA. CON LA EDAD, HAY PERDIDA DE FIBRAS, EL DIAMETRO AXONAL Y LA LONGITUD INTERNODAL DISMINUYEN, Y EL GRADO DE MELINIZACION ES VARIABLE, NUMEROSAS FIBRAS TIENEN VAINAS DELGADAS. ALGUNAS PRESENTAN REGIONES DESMIELINIZADAS QUE A NIVEL DEL NODO SE PIERDE LA CONSTRICCION NODAL. ESTOS CAMBIOS PUEDEN CONTRIBUIR A LA DISMINUCION DE LA VELOCIDAD DE CONDUCCION NERVIOSA Y DE LA AMPLITUD DE POTENCIALES DE ACCION NERVIOSO Y MUSCULAR, OBTENIDA EN ESTUDIOS FUNCIONALES. AUMENTA EL NUMERO DE FIBRAS MIELINICAS IRREGULARES, AUNQUE SU SIGNIFICADO FUNCIONAL ES DESCONOCIDO. LA INCORPORACION DE ESTAS FIBRAS PERMITE UNA APROXIMACION MAS REALISTA DEL ESTUDIO DE LAS RELACIONES MORFO- FUNCIONALES DEL NERVIO, EL NUMERO DE MICROTUBULOS EN LAS FIBRAS MIELINICAS ESTA RELACIONADO CON EL TAMAÑO AXONAL Y CON LA EDAD TIENDE A INCREMENTARSE.

Autor: GARCIA VELASCO JOSE VICTOR.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y PATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: PROGRAMA INTERDEPARTAMENTAL DE DOCTORADO EN NEUROCIENCIA.

Resumen: LAS HORMONAS TIROIDEAS ALTERAN EL PROCESO DE MIGRACION CELULAR DURANTE LA HISTOGENESIS CORTICAL EN LAS CORTEZA TEMPORAL. ESTA ES LA PRIMERA DESCRIPCION DE UNA ALTERACION DEBIDA A UNA TRANSFERENCIA DEFICIENTE DE HORMONAS TIROIDEAS DE LA MADRE AL FETO Y A UNA DISFUNCION DE LA GLANDULA TIROIDES FETAL. USANDO LA TECNICA DE LA BROMODEOXIURIDINA EN RATAS HIPOTIROIDEAS, HEMOS OBSERVADO QUE EN TODAS LAS EDADES EMBRIONARIAS INYECTADAS SE ORIGINAN CELULAS QUE FINALMENTE SE LOCALIZAN EN CAPAS QUE NO LES CORRESPONDEN. ALGUNAS DE LAS CELULAS QUE EMIGRAN MAL, ESPECIALMENTE LAS GENERADAS EN E14, 15 Y 16, SE OBSERVAN LOCALIZADAS EXTOPICAMENTE EN LA SUSTANCIA BLANCA SUBCORTICAL. SIN EMBARGO, LOS DATOS CUANTITATIVOS INDICAN QUE EN LAS RATAS HIPOTIROIDEAS NO HAY UN RETRASO RELATIVO EN EL PROCESO DE HISTOGENESIS NEOCORTICAL. NI CON EL ESTUDIO DE LA ORGANIZACION DE LA GLIA RADIAL DURANTE EL PERIODO DE MIGRACION NEURONAL USANDO ANTICUERPOS ANTI-VIMENTINA Y ANTI-GFAP, NI CON EL ESTUDIO DE LA MATRIZ EXTRACELULAR UTILIZANDO ANTICUERPOS ANTI-TENASCINA, ANTI-LAMININA, ANTI-FIBRONECTINA Y ANTI-TROMBOSPONDINA, HEMOS OBSERVADO DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS ENTRE RATAS NORMALES E HIPOTIROIDEAS, POR LO QUE SE PUEDE SUPONER QUE OTROS FACTORES SEAN LOS RESPONSABLES DE LAS ALTERACIONES AQUI DESCRITAS.