GENETICA HUMANA, 3

Autor: GARNACHO MONTERO CARMEN.
Año: 2002.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Los síndromes de Prader-Willi (SPW) y Angelman (SA) están asociados con anomalías del cromosoma 15. El 65-75% de los pacientes con estos síndromes presentan una deleción intersticial de novo en la región q11-q13 del cromosoma 15 de origen paterno en el SPW y materno en el SA. El 20-30% de los SPW heredan los dos cromosomas 15 de la madre, es decir, presentan disomía uniparental (DUP) materna, mientras que en el SA este mecanismo sólo supone un 5% de los casos y siempre es DUP paterna. Alrededor del 5% de los pacientes con SPW y SA tienen un mutación de "imprinting". En el SA, el 10% de los enfermos presentan una mutación puntual en el gen UBE3A. Por último, aproximadamente el 10% de los SA no presentan ninguna de las anomalías moleculares conocidas hasta el momento, por lo que su diagnóstico es exclusivamente clínico. En este trabajo se han estudiado un total de 143 pacientes con sospecha clínica de SPW y 87 con sospecha clínica de SA, confirmándose el diagnóstico en 59 de ellos (40 con SPW y 19 con SA). Para este diagnóstico se han utilizado las siguientes técnicas: estudio del cariotipo, estudios de Hibridación in situ con Fluorescencia (FISH), PCR específica de metilación (M-PCR) y análisis de marcadores de tipo microsatélite. Las técnicas de FISH y M-PCR se han puesto a punto por primera vez en Andalucía en nuestro laboratorio. Es de destacar que hemos diagnosticado el único caso descrito hasta el momento de dos hermanos con SPW debido a la deleción típica. La elevada frecuencia de negativos entre nuestros pacientes, similar a la bibliografía consultada, puede ser debida a que, una vez que se dispone de una técnica fiable de diagnóstico, ésta es utilizada para descartar el síndrome en pacientes que no tienen un fenotipo claro.

Autor: AYALA DE LA PEÑA FRANCISCO DE ASIS.
Año: 2001.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID.

Resumen: INTRODUCCIÓN La relación existente entre plaquetas y comportamiento tumoral del cáncer de mama puede resumirse en dos apartados: la participación plaquetaria en los fenómenos de aparición de metástasis y de progresión tumoral, medida por los mecanismos de agregación plaquetaria inducida por células tumorales TCIPA, y en segundo luagr, la existencia de moléculas de adhesión con expresión común en la superficie plaquetaria y en la superficie de las células tumorales (de forma aberrante o como consecuencia de su expresión normal en las células peiteliales). Las principales moléculas de adhesión de este grupo o con participación en la TCIPA son la glicoproteína Ib alfa y las integrinas alfa2, beta 1 y beta3 (que forma parte de la alfa iib beta3 y de la alfav y beta3). Para todas ellas se han descrito polimorfismos genéticos con potencial repercusión en su expresión o su función para los que se han establecido relaciones con la patología trombótica. Dada la importancia de la integrinas en el comportamiento tumoral y la relación de la TCIPA con la aparición de metástasis a distancia existe la posibilidad de que las modificaciones inducidas por estos polimorfismos genéticos puedan tener influencia en la aparición y la progresión de las neoplasias y en concreto del cáncer de mama. OBJETIVOS Determinación de la relación entre los polimorfismos genéticos de las moléculas de adhesión con expresión plaquetaria y la aparición y el comportamiento biológico y clínico del carcinoma de mama. MATERIAL Y MÉTODOS Se realizó un estudio de caso-control para cada polimorfismo genético con un grupo de 101 pacientes diagnosticadas de cáncer de mama y un grupo control de 101 mujeres sanas apareadas por edad con los casos.Se utilizó también un grupo más amplio individuos (entre 340 y 600, según el polimorfismo) para determinar la frecuencia de los polimorfismos en la población general de nuestra área. Se estudiaron los polimorfismos C807T y G1648a de la integrina alfa2, el polimorfismo T1565C de la integrina Beta3 y el VNTR de la CP Ibalfa. La determinación del genotipo se realizó a partir de DNA genómico, mediante amplificación por PCR y análisis del patrón de restricción que determina la enzima sensible al dimorfismo, excepto en el caso del VNTR, estudiado mediante electroforesis directa. Se estudiaron también ciertas regiones del promotor del gen de la integrina alfa2 (núcleo del promotor, región específica de células epiteliales y región específica de la línea megacariocítica) mediante PCR y secuenciación directa en individuos homocigotos para cada uno de los dos polimorfismos estudiados. Se realizó también un estudio de correlación entre los distintos genotipos de cada polimorfismo y las variables clínicas y anatomopatológicas que definen el pronóstico del cáncer de mama (estadio, TNM, tamaño tumoral, efectación ganblionar axilar, grado histológico, edad del diagnóstico, situación hormonal, receptores hormonales). Para el análisis de la supervivencia (global y libre de enfermedad) se seleccionó un grupo de 52 pacientes con cáncer de mama primario de alto riesgo ( 10 ó más ganglios axilares positivos, estudios IIIA y IIIB) tratadas de forma homogénea con quimioterapia intensiva y trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos de sangre periférica con intención adyuvante. RESULTADOS Y CONCLUSIONES No existe en nuestro estudio ninguna relación entre el polimorfismo VNTR de la glicoproteína Ibalfa y la aprición o el comportamiento tumoral del carcinoma de mama. Tampoco se ha observado ninguna relación con el polimorfismo genético C807T de la integrina alfa2. El genotipo 1565T/C del polimorfismo T1565C de la integrina beta3 se asocia a la ausencia de afectación ganglionar axilar y a un tamaño tumoral menor al diangóstico en pacientes con carcinoma de mama. Aunque no se han observado diferencias en la supervivencia global ni libre de enfermedad. En el estudio caso-control, el genotipo 1565T/c ejerció también una acción protectora sobre la aparición del cáncer de mama.Si se confirmara el efecto biológico de este polimorfismo, las razones de su influencia pueden estar relacionadas con la alteración estructura de la integrina beta3 asociada al alelo 1565C, que quizás tenga repercusiones funcionales en la acción de las integrinas alfaiib beta3 asociada al alelo 1565C, que quizás tenga repercusiones funcionales en la acción de las integrinas alfaiib beta3 y alfav beta3, implciadas en los fenómenos de TCIPA y de agniogénesis tumoral El polimorfismo G1648A del gen de la integrina alfa2 está relacionado con el comportamiento biológico del cáncer de mama. Nos e ha encontrado una relación entre el genotipo para este polimorfismo y la susceptibilidad al cáncer de mama, pero en las pacientes que presentan el genotipo 1648a se observa una tendencia, que no llega a ser estadísticamente significativa para todo el grupo, a presentar estadios de la enfermedad más bajos (I-II vs III-IV) al diagnóstico. Esta tendencia se hace significativa para el grupo de pacientes mayores de 45 años y para las pacientes sin antecedentes familiares de cáncer de mama. Las pacientes con cáncer de mama primario de alto riesgo con genotipo 1648G/A presentan una supervivencia global superior a la de las pacientes con genotipo 1648G/G tras el tratamiento con quimioterapia intensiva y trasplante autólogo de progenitores hemtopoyéticos de sangre periférica.No se observaron diferencias en la supervivencia libre de enfermedad, pero si una mayor supervivencia tras la recaída, lo cual indica un comportamiento clínico y biológico menos agresivo en este grupo de enfermas. El aumento en la expresión de la integrina alfa2beta1, que se ha relacionado en plaquetas con el alelo 1648A, podría conducir, en células epiteliales mamarias, al mantenimiento de las relaciones adhesivas intercelulares y con la matriz extracelular, y, por tanto, a un fenotipo neoplásico menos agresivo biologicamente y con menor capacidad metastásica, lo cual es consistente con nuestros hallazgos.El análsis de la región promotora del gen de la integrina alfa2 muestra dos alteraciones ligadas al alelo 1648A: una sustitución C-T en posición 52 descrita por otro grupo, y una sustitución C-T en posición 784, descrita por primera vez en este trabajo. La cercanía de la primera al sitio de unión de Sp1, relacionado con la acción del oncogen c-erbB2, y la localización de la segunda en la zona específica de células epiteliales del promotor permite plantear diferentes mecanismso que pueden explicar el comportamiento biológicomenos agresivo en las pacientes portadoras del alelo 1648A. Así, el efecto del cambio 52 y 784 podría determinar una expresión diferente de la integrina en células epiteliales, tanto normales como neoplásicas. Es posible que los alelos 52T y 784T se asocien a una expresión basal mayor de la integrina, pero también puede ocurrir que la respuesta a la expresión de c-erbB2 sea diferente en individuos con diferente genotipo 52; de esta forma una menor respuesta del alelo 52t a la sobreexpresión de cerbB2 implicaría una menor disminución de la expresión de la integrina alfa2beta1, y por tanto, un comportamiento neoplásico menos agresivo.como segunda posibilidad en estas diferencias también podría influir el cambio estructural asociado al polimorfismo G1648A, que está localizado cerca del dominio de unión de ligandos de la integrina alfa2 y que en células epiteliales podría producir cambios en la afinidad del receptor por el colágeno y la laminina y, por tanto, en el fenotipo tumoral

Autor: BENET GIMÉNEZ MARTA.
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR.

Resumen: La fibrosis quística es una alteración hereditaria de carácter recesivo que afecta a 1 de cada 2000 individuos caucásicos y se origina por mutaciones en el gen regulador de la conductancia de transmembrana responsable de la fibrosis quística CFTR, que codifica un canal de cloro regulado por AMPc. El objetivo principal de este trabajo ha sido transferir el gen de la fibrosis quística humano a células cuyo nivel de expresión es bajo o nulo, con el fin de inducir la expresión del gen CFTR humano e instaurar la funcionalidad de la proteína CFTR. Para este trabajo, hemos utilizado los lipoplejos (complejos lípido cationico: ADN) y poliplejos (complejos polímero catiónico: ADN) como vectores no virales de transferncia géncia, y el gen humano de la fibrosis quística, CFTR, como gen terapéutico. Haciendo uan breve síntesis del trabajo presentado en este manuscrito podíamos decir, que son la utilización de los vectores no virales, como los lipoplejos y poliplejos: i) se ha consegudio transferir y expresar el gen CFTR en células que normalmente no lo expresan y los niveles de expresión alcanzados han sido superiores al de las células que lo expresan de forma normal. ii) se ha instaurado una proteína nueva para la célula y funcionalmente activa, en células cuya actividad funcional de la proteína previa a la transferncia, era prácticamente nula. iii) en estudios in vivo se ha conseguido transferir el gen CFTR a las vías aéreas, alcanzando niveles de expresión relativamente elevados en este territorio, sin llegar a la circulación sistemática. iv) en los estudios de tratamiento múltiple, se ha consegudio la persistencia de expresión del gen en el tiempo durante períodos relativamente prolongados.

Autor: GÓMEZ ZAERA MONTSERRAT.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Los resultados recogidos en la memoria tratan sobre 4 enfermedades humanas y su asociación con alteraciones en el DNA mitocondrial (mtDNA). Las enfemedades son: atrofía óptica de Leber (LHON), abliopía alcohol-tabaco (TAA), síndrome de Wolfram (WS) y lipodistrofia asociada a terapia antiretroviral (LD). Se han estudiado 31 personas con atrofía óptica y 18 familiares de las mismas. En los pacientes se ha detectado una proporcion de mutaciones en el mtDNA tipo LHON primarias del 29%, a diferencia de toros estudios mundiales en los que 90% de las personas diagnosticadas con LHOM tiene alguna mutación primaria. Podrían existir otras mutaciones (mitocondriales o nucleares) responsables de la atrofía ópica padecida por estos afectados.También se ha observado recuperación visual espontánea en una persona con la mutación primaria 14484C; y la penetrancia incompleta en familias de enfermos que son homoplasmicos para la misma mutación que el paciente ,y no sufren atrofía óptica. Respecto a la TAA, se ha estudiado si la atrofía óptica en un grupo de enfermos estaba causada por el consumo de alcohol y/o tabaco elevado, por un estado nutricional deficiente, o por la presencia de mutaciones en el mtDNA. Los pacientes ambliópicos se han comparado con dos grupos control: personas alcohólicas sin alteraciones visuales, y personas no alcohólicas. Los pacientes con ambiopía presentan un estado nutricion comparable al del grupo contro alcohólico. El porcentaje de pacientes ambliópicos con una mutación primaria LHOM o > 1 secundaria es claramenye superior al mismo porcentaje en los dos grupos control. La predisposición genética debida a la presencia de las mutaciones mitocondriales LHOM junto con un consumo elevado de alcohol pueden ser los responsables de la atrofía óptica sufrida por muchos de estos casos amblópicos. En 22 pacientes con la WS se han detectado 11 mutaciones en el gen nuclear WFS1. Una de estas mutaciones (425ins16, exón 4) se ha identificado en el 41% de los pacientes y en el 50% de las familias con mutacioens en este gen. En 4 y 6 familias se han detectado deleciones múltiples y mutaciones puntuales tipo LHOM en el mtDNA, respectivamente. Pensamos que no se han identificado más deleciones en el mtDNA porque no se han obtenido muestras de tejidos afectados por el síndrome (páncrea, crebro). Únicamente se han estudiado sangres, tejido no alterado en esta enfermedad. A propósito de la lipodistrofia asociada a terapia antiretroviral, se han estudiado individuos con LD, un grupo de personas también HIV-positivas sin LD, y un segundo grupo control formado por personas no infectadas por el virus. Existen alteraciones mitocondriales en todos los pacientes con LD, las cuales no se han detectado en controles. Las alteraciones mitocontriales son consecuencia de la aplicación de terpiss antiretrovirales altamente activas, pero no se puede determinsr si las alteracionrs bioquímicas y genéticas en las mitoconfrias de los pacientes son un requisito previo y necesario en el desarrollo de la LD.

Autor: CALVO MARTINEZ BEGOÑA.
Año: 2001.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La diabetes tipo 1 es el resultado de la destrucción autoinmune de las células B pancreáticas productoras de insulina. El bajo nivel de concordancia para la enfermedad entre gemelos idénticos (30-50%) hace pensar en un componente ambiental pero siempre en un entorno de susceptibilidad genética determinado. En este sentido, se conoce la existencia de asociación entre la región HLA y la diabetes tipo 1 e incluso se considera que entre el 30 y el 60% del componentes genético se debe a los genes de esa zona del cromosoma 6p21.3. El objetivo principal de este trabajo ha sido la caracterización de la región HLA de clase II(loci HLA-DRB1,HLA-DQA1,HLA-DQB1 y HLA-DPB1) y de clase III (loci del complemento BF, C2, C4A y C4B) en familias con diabetes tipo 1 de etnia vasca. Se pretendía, en primer lugar, establecer el perfil genético de nuestra población diabética y compararlo con el de otras poblaciones, dada la existencia de la gran heterogeneidad genética del sistema HLA asociado a enfermedad en los diferentes grupos poblacionales y en segundo lugar, identificar posibles marcadores de riesgo o protección a diabetes tipo 1 que pudieran ser empleados en el análisis de futuros pacientes. El análisis de haplotipos extendidos obtenidos por combinación de todos los loci estudiados muestran dos haplotipos caracteristicos de nuestra poblacioni: el F1C30-DRB1*0301-DQA1*0501-DQB1*0201-DPB1*0202 como marcador de riesgo y el SC31-DRB1*1501-DQA1*0102-DQB1*0602-DPB1*0401, marcador de protección y completamente ausente entre los enfermos, lo que hace pensar en una protección dominante incluso en presencia de un haplotipo diabetogénico. Nuestro haplotipo de riesgo, es el mismo que caracteriza a la población sarda, aunque el suyo no conserva el HLA-DPB1*0202 mientras que el nuestro sí, a pesar del conocido "hotspot" existente entre el HLA-DQB1 y el HLA-DPB1. Cuando se analiza el haplotipo de riesgo en detalle, con objeto de identificar el marcador cuya asociación se más fuerte con la enfermedad, se comprueba la existencia de asociación alélica entre todos los factores que componen, lo que no permite discernir si la asociación de cada uno de ellos con la enfermedad es primaria o producto del equilibrio de ligamiento.

Autor: COLLADO NIETO ROSA M..
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: SERVICIO DE HEMATOLOGÍA DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO DE VALENCIA.

Resumen: La leucemia linfático crónica y el mieloma múltiple, dentro del grupo de los síndromes linfoproliferativos crónicos, son dos ejemplos representativos de la importancia y a su vez, la dificultad que supone el estudio cromosómico en este tipo de patologías. Se ha podido constatar la situación de los linfocitos B y de las células plasmáticas en el ciclo celular, y como en el caso de la LLC-B, una adecuada estimulación ha inducido a que un porcentaje de sus células alcance las fases más prolifederativas. El estudio de ADN mediante Fish y citometría de flujo ha permitido corroborar en determinados casos las alteraciones cromosómicas ya observadas mediante citogenética convencional, y en otros casos complementar esta información tras la detección de otros clones patológicos. De los 100 pacientes estudiados, se han detectado anomalías cromosómicas en el 84% de los casos con LLC-B y en el 90% de los casos con MM, lo cual apoya la hipótesis formulada por Bovery en 1914, según la cual todos los cánceres tienen un origen genético específico.

Autor: PÉREZ DE NANCLARES LEAL GUIOMAR.
Año: 2001.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La diabetes mellitus tipo 1, enfermedad celiaca y enfermedad de Addison son tres patologías autoinmunes causados por la interacción de ciertos genes y determinados factores ambientales. De hecho, estas tres enfermedades comparten ciertas características genéticas comunes, en concreto los alelos HLA-DR3y -DQ2 se asocian con riesgo a estas tres enfermedades. La pregunta a la que el presente trabajo pretende responder es si existe una base genética común, es decir, si los mismos genes están implicados en las distintas enfermedades autoinmunes, o si por el contrario, es la región HLA común a todas ellas y en función de qué otro gen aparezca se desarrollará específicamente cada una de las enfermedades. Por ello los objetivos principales de este trabajo han sido el análisis de la contribución de la región INS-VNTR y el gen CTLa-4 en la susceptibilidad autoinmune como entidad y de forma específica en la diabetes mellitus tipo 1, enfermedad celiaca y enfermedad de Addison, y asimismo la determinación de la existencia de asociación ente el genotipo INS-VNTR clase I/clase I y la presencia y título de autoanticuerpos anti-insulina. El análisis de los genes INS-VNTR y CTLA-4 en 102 pacientes con diabetes tipo 1, 59 niños con enfermedad celiaca y 57 individuos con enfermedad de Addison con relación a 111 individuos de la población general sin historia personal ni familiar de autoinmunidad detectó que el locus INS-VNTR se asocia con diabetes tipo 1 y no con enfermedad celiaca ni con la enfermedad de Addison. En concreto, los alelos de clase III de este locus son los que se asocian con protección y los alelos de clase I en homozigosis con riesgo a diabetes tipo 1. Estos resultados apoyan el papel específico de la región INS-VNTR en el desarrollo de diabetes mellitus tipo 1. Además, el genotipo I/I INS-VNTR se asocia con un debut más temprano de diabetes tipo 1. Por otro lado, no se encuentran evidencias de asociación entre la auto-respuesta humoral a la insulina y la región INS-VNTR ya que el nivel de anticuerpos anti-insulina, medido en nU/ml, no presenta asociación con el genotipo que portaban los diferentes individuos con diabetes tipo 1. En cuanto al gen CTLA-4, no se encontró asociación de este gen con ninguna de las poblaciones con enfermedad autoinmune estudiadas. Esta ausencia de asociación podría deberse a que el efecto de los alelos de este gen no se observa en pacientes con HLA-DR3, alelo con el que preferentemente se asocian en poblaciones del sur de Europa las tres patologías autoinmunes analizadas.

Autor: HERNÁNDEZ MAÑÚ RAFAEL.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: La p44mapk humana forman parte de un sistema de transducción de señales extracelulares estimulado por factores de crecimiento, agentes mitogénicos e inductores de diferenciación. Su actividad está regulada por fosforilación reversible a través de quinasas y fosfatasas específicas. Pero además existen datos que indican una posible regulación a nivel transcripcional relacionada con procesos de proliferación celular. En este trabajo se ha analizado, en primer lugar, aproximadamente una kilobase del promotor de su gen, determinándose que la actividad transcripcional basal depende en gran medida del factor de transcripción Sp1 para el que existen cinco elementos de reconocimiento en una región de aproximadamente 200 pb 5' desde el punto de inicio de la traducción. Además, de Sp1, otros elementos presentes en esta región parecen necesarios para alcanzar niveles elevados de transcripción. Por otro lado, se sugiere también la presencia, en posiciones más distales, de una región con posible acción represora que contribuirá a un ajuste más fino en los niveles de transcripción. En segundo lugar, se ha analizado la actividad transcripcional del promotor del gen de la p44mapk humana en el proceso de proliferación celular, demostrándose que tanto la actividad transcripcional como los niveles de mRNA disminuyen cuando células que se hallan en un estado activo de proliferación dejan de dividirse. Esto indica que existe una regulación transcripcional de este gen relacionada con el proceso de proliferación, de manera que la expresión del gen es inducida por la proliferación y reprimida cuando esta cesa.

Autor: HERRAÍZ BAYOD MAITE.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: Una de las estrategias antitumorales basadas en terapia génica desarrollada recientemente, es la que utiliza la timidín-kinasa del virus Herpes-simple (HSV-tk) para convertir el profármaco ganciclovir en un metabolito tóxico que resulta letal para la célula. El ganciclovir produce la muerte celular debido a su capacidad para ser incorporado a la molécula de DNA e interrumpir su síntesis en células en división. En virtude de este mecanismo de acción, no debería resultar tóxico para células quiescentes, sin embargo se ha demostrado que el ganciclovir produce daño en el hígado sano. El objetivo de este trabajo ha sido investigar la repercusión del tratamiento con HSV-tk y ganciclovir en las mitocondrías del hígado, estudiando en particular si el tratamiento produce disfunción mitocondrial y daño en el DNA miticondrial. Se ha podido comprobar que la administración de ganciclovir a ratas sanas, que previamente habían recibido un adenovirus que codifica para HSV-tk, induce daño hepatocelular caracterizado por la presencia de metamorfosis grasa microgotular, balonización de hepatocitos y cuerpos apoptóticos. Ultraestructuralmente se confirma la alteración en la forma y tamaño de las mitocondrias que presentan crestas aberrantes y una matriz hipodensa. También se ha posido demostrar un descenso en la actividad de la enzima citocromo c oxidasa que forma parte de la cadena respiratoria mitocondrial. A esta alteración podría contribuir la disminución detectada en la expresión de una de las subunidades protéticas codificada por el ADN mitocondrial como es la subunidad II. El análisis de southern blot reveló una reducción substancial del contenido total de DNA mitocondrial en el hígado. Utilizando ganciclovir marcado radiactivamente se pudo demostrar la incorporación de este compuesto tanto en el DNA nuclear como mitocondrial de una línea celular hepática de rata que había sido transducida previamente con HSV-tk. Estos hallazgos confirman que el ganciclovir puede dañar tanto el DNA nuclear como mitocondrial de células transducidas con HSV-tk, pudiendo ser este efecto el responsable de la severa disfunción mitocondrial y de la toxicidad observada en células que no se dividen.

Autor: FRANCO IRIARTE JESUS M..
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: La enfermedad tromboembólica venosa (TEV) es considerada hoy en día como una enfermedad de origen multigénico en la que la combinación de factores genéticos y adquiridos determina el riesgo que un sujeto tiene de sufrir un episodio trombótico. El presente trabajo fue diseñado para estudiar el papel de los polimorfismos H5/H7 y R353Q del gen del factor VII, 4G/5G del gen del PAI-1 y C677T de la MTHFR en la trombosis venosa, así como evaluar su posible interacción con la presencia de factores genéticos (mutación FV Leiden, mutación G20210A de la protrombina y deficiencias de PC, PS y ATIII) y adquiridos. Un total de 291 pacientes diagnosticados de TEV de edades comprendidas entre 16 y 65 años y 319 controles sin antecedentes personales de TEV fueron analizados. No se encontró ninguna asociación significativa tras realizar el análisis de regresión logística univariante entre los polimorfismos objeto de estudio y el riesgo de experimentar un episodio de TEV tras comparar el grupo de pacientes y el grupo control. Sí encontramos una asociación entre el polimorfismo C677T del gen de la MTHFR en homocigosis y el déficit de proteína S (OR = 4,85; IC 95%: 1,22-19,19). Nuestros resultados nos permiten concluir que ninguno de los cuatro polimorfismos estudiados constituyen por sí mismos factores de riesgo. Sin embargo la presencia del polimorfismo C677T de la MTHFR coheredado con el déficit de proteína S podría contribuir a la aparición de un estado trombótico.

Autor: VÁZQUEZ-GUNDÍN MOLINELLI FERNANDO.
Año: 2001.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD DA CORUÑA.

Resumen: La interacción de las radiaciones con los organismos puede tener una gran relevancia tanto en ellos mismos como en su progenie. La principal diana en cuanto a relevancia biológica es el ADN. Ya sea de forma directa o indirecta (por medio de derivadosde la radiolisis del agua), los fenómenos de ionización y/o excitación alteran el ADN modificándolo. Entre las principales alteraciones, destacan las roturas de cadena sencilla y de doble cadena. Hasta ahora, ninguna de las técnicas existentes para el análisis de roturas en el ADN, permitía estudiar la heterogeneidad de respuesta celular ante los distintos agentes, en secuencias específicas. Este trabajo desarrolla una técnicas sencilla que permite estudiar las roturas presentes en el ADN en áreas concretas. Denominada DBD-FISH (DNA Breakage Detection-FISH), esta técnica morfológica aúna las técnicas de Microgeles, Unwinding (desenrollamiento) alcalina, y FISH. Las células a estudio se aíslan y mezclan con agarosa de bajo punto de fusión. Se crea un microgel sobre un portaobjetos y se somete a una solución de lisis para generar un nucleoide (estructura de ADN residual desorganizada, sin proteínas). A partir de los extremos de rotura y por acción del álcali, se genera ADN de cadena sencilla (ADNcs). Se restringe al máximo posible este ADNcs al lugar de rotura por ajuste de tiempos de exposición alcalina. A continuación se realiza una hibridación in situ con diferentes sondas específicas sobre estas dianas. Con un microscopio de fluorescencia y una cámara de alta densidad, se capturan las señales emitidas por las sondas. A mayor cantidad de roturas, más cantidad de ADNcs se genera, y por lo tanto habrá más diana sobre la que hibridar las sondas marcadas. Con un programa informático se cuantifica la señal y se analizan diferentes parámetros con un paquete estadístico. La intensidad total será el reflejo de la cantidad de roturas existentes en la zona concreta a estudio. Además de determinar la radiosensibilidad en diferentes regiones del genoma, la DBD-FISH, permite determinar la presencia de lugares lábiles alcalinos, así como las diferentes señales basales para distintas secuencias y el fenoma considerado en su conjunto. Nos encontramos por ejemplo, que los satélites clásicos de la familia de 5pb, presentan un elevado marcaje basal por ser ricos en lugares lábiles al álcanil. Por oro lado, permite analizar cuál es la protección ejercida por la estructura cromatínica sobre las secuencias estudiadas (satélite clásico, satélite alfoide, telómeros …) frente a las radiaciones y al álcali.

Autor: CEBRIÁN ARANDA ARÁNZAZU.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA, UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID.

Resumen: La Neoplasia Endocrina Múltiple tipo 1 (NEM) es una enfermedad que se caracteriza por la presencia combinada de diferentes tumores localizados, principalmente, en las glándulas del paratiroides, tejido pancreático e hipófisis. Es una enfermedad autosómica dominante con penetrancia casi completa y expresividad variable. El gen responsable de esta enfermedad fue clonado en 1997, MEN1, es un gen supresor de tumores que contiene 10 exones y codifica para una proteína de 610 aminoácidos denominada Menina, cuya función hasta el momento es desconocida aunque se cree que está implicada en la regulación del ciclo celular y en el mantenimiento de la integridad del genoma. Los objetivos de este trabajo fueron: 1,- Llevar a cabo un análisis molecular completo del gen MEN1 para establecer la proporción de casos debidos a mutaciones en este gen en nuestra población. Caracterizar el tipo y distribución de las mutaciones detectadas a intentar establecer una correlación genotipo-fenotipo. 2,- Realizar un estudio, mediante marcadores microsatélites, de los tumores de estos pacientes para caracterizar el segundo mecanismo de inactivación del gen MEN1. 3,- Establecer un protocolo de trabajo a la hora de abordar este tipo de estudios en familias y casos esporádicos candidatos. Para llevar a cabo estos objetivos se seleccionaron 24 casos esporádicos y 21 casos familiares con sospecha de MEN 1. En primer lugar se puso a punto la técnica de CSGE para el análisis del gen MEN 1. Esta técnica ya había sido utilizada para el análisis de otros genes de gran tamaño y presentaba una sensibilidad cercana al 100% y sin falsos positivos. Para validar la técnica, todos los casos fueron confirmados por secuenciación. El 81% de los casos familiares presentaron mutaciones y todas, excepto una, generaban una proteína truncada, apoyando el papel de MEN 2 como gen supresor de tumores. El porcentaje de alteraciones localizadas en el exón 10 fue más elevado que lo descrito hasta el momento. El 41,6% de los casos esporádicos tuvieron mutación y al igual que en los casos familiares predominó la proteína truncada. El 60% de estas mutaciones se localizaron en el exón 2, indicando que este fragmento es especialmente proclive a generar mutaciones, siendo el principal responsable de la aparición de nuevos casos NEM 1. Parece existir una asociación entre la presencia de mutación y el desarrollo del prolactinoma. Los pacientes con HPT y GH no son casos MEN 1 sino fenocopias debidas a otro gen. Los casos mayores de 40 años sin antecedentes familiares no presentan mutaciones en este NEM 1. En los HPT se observó una región mínima solapante de LOH sugiriendo la existencia de al menos otro gen supresor en esta región. Existe un porcentaje elevado de tumores NEM 1 con inestabilidad de microsatélites, indicando que el gen MEN 1 está implicado en la reparación del ADN, o que existe algún gen de reparación implicado en el desarrollo de estos tumores.

Autor: MARTÍNEZ NAVARRO M. ESPERANZA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El objetivo principal de la tesis ha sido analizar la asociación de ciertas variantes polimórficas de genes del sistema renina-angiotensina y del gen de la óxido nítrico sintasa con valores extremos de presión arterial en una población general de la provincia de Albacete. Las causas de la variación interindividual de la presión arterial son difíciles de identificar, debido a que esta influencia por factores genéticos, y ambientales, tales como modo de vida y alimentación, y por los distintos tipos de interacciones entre ellos. Además, la influencia de determinados factores genéticos puede variar en distintas poblaciones humanas en función de su fondo genético. Por ello es necesario analizar en distintas poblaciones estos factores. El trabajo presentado se ha realizado sobre una muestra amplia de población general, formada por 1300 individuos, elegidos de forma aleatoria y estratificada según la distribución por quintiles extremos de presión arterial, y no según criterios clínicos de hipertensión. Entre las aportaciones más destacadas del trabajo se encuentran las siguientes: 1,- Las frecuencias alélicas y genotípicas de los polimorfismos estudiados de los genes Agt, de la ECA y del receptor AT1 son similares a las observadas en otras poblaciones españolas y caucasianas. 2,- El genotipo del gen Agt, T174T-T235T, está asociado con historia familiar de HTA, pudiendo considerarse como potencial marcador de predisposición a hipertensión en individuos con una historia familiar de hipertensión arterial. 3,- Se han obtenido evidencias de que la cadena polipeptídica de la variante polimórfica T174-235T podría sufrir un cambio en su estructura secundaria, lo que justificaría una función diferente, y por lo tanto la asociación mencionada anteriormente. 4,- el alelo (+) del polimorfismo Bg/I del gen Ren está asociado con hipertensión arterial esencial.

Autor: ARIAS DE LA FUENTE M. CARMEN.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLÓGICAS.

Resumen: En la presente tesis se tratan diversos aspectos de la biología del factor de transcripción FOXJ2, perteneciente a la familia Forkhead. En primer lugar se caracteriza el gen humano de FOXJ2, codifica por 2 isoformas una larga L y otra corta, S, generados por splicing diferencial. El gen está formado por II exones, los 8 primeros y parte del 9 comunes a cada isoforma. Ambos isoformas se expresan simultáneamente en varias líneas celulares. El gen FOXJ2 tiene 2 sitios de inicio de la transcripción. La región 400 pb río arriba de estos sitios tiene actividad promotora dependiente de tipo celular, presentando mayor capacidad en aquellas celulas donde más se expresa. En segundo lugar se aborda la caracterización de FOXJ2 en ratón, presenta 89% de homología con respecto a FOXJ2 humano, conservando completamente la secuencia aminoacídica del dominio forkhead del dominio I, dominio II y acidic blob. El ARN mensajero de FOXJ2 se expresa en la mayoría de los tejidos adultos de ratón aunque con diferentes niveles y no se expresa en todas las células dentro de un tejido. FOXJ2 se expresa muy tempranos durante el desarrollo embrionario detectándose ya en el estadio de 8 células. También se intentó la sobreexpresión de FOXJ2 en animales transgéicos, su sobreexpresión produce un retraso en el desarrollo preimplantación embrionario probablemente afectando a la viabilidad del embrión.

Autor: CORRAL CANTÓ TERESA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La neurofibromina o NF1 (producto del gen Nf1), es una proteína citosólica conocida como regulador negativo de Ras. Un fragmento de 400 aminoácidos localizado en el centro de la molécula (NF1-GRD) tiene gran similitud con otras moléculas de la familia GAP, que incluye p120GAP, y las proteínas de levadura IRA1 e IRA2, todas ellas capaces de acelerar la actividad GTPasa de las proteínas Ras. De esta manera, las proteínas de la familia GAP facilitan el tránsito de Ras a su estado inactivo, unido a GAP. Descubrimientos recientes revelan que NF1 puede estar involucrado en otros importantes procesos celulares. Nuestro estudio muestra que la inactivación de un alelo de Nf1 coopera in vivo con la sobreexpresión del proto-oncogén ras en la formación de tumores, sugiriendo una actividad supresora de tumores para Nf1. Por otro lado, NF1-GRD coopera con Ras en el mecanismo de crecimiento libre de anclaje en fibroblastos de ratón, sin afectar: 1,- Su capacidad de crecer en baja concentración de nutrientes. 2,- Su capacidad de adhesión celular. 3,- La expresión de diversas proteínas involucradas en las interacciones célula-célula y célula-matriz extracelular. 4,- El estado de activación de Rac o Ral. Por otro lado, la sobreexpresión de NF1 induce un aumento en la expresión de la proteína FAK, y cambios específicos (según la isoforma de Ras) en el estado de activación de las MAPKs Erk-1 y Erk-2. Estos resultados sugieren la existencia de un mecanismo dependiente de NF1 e independiente de Ras, que es capaz de modificar expresión de FAK y la activación de las MAPKs y que podría afectar a la capacidad de crecimiento libre de anclaje de la célula.

Autor: HORITA GONZÁLEZ SANDRA MACHIKO.
Año: 2001.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La leucemia mieloide crónica (LMC) es un desorden mieloproliferativo clonal resultado de la transformación neoplásica de una célula madre hematopoyética, caracterizada por la presencia del cromosoma Filadelfia, o translocación recíproca entre los cromosomas 9 y 22 en una célula madre hematopoyética, que fusiona parte del gen bcr con parte del gen abl. Este gen quimérico va a dar lugar a una proteína de 210 kD características de la LMC, y que posee una elevada actividad tirosina quinasa, fundamental en la capacidad transformante de Bcr-Abl. Una característica de estas células es la mayor resistencia a la apoptosis que está asociada con un aumento en la expresión y/o activación de numerosos efectores como Ras, PI-3k, Akt, STATs, … En este trabajo nosotros proponemos la ruta Bcr-Abl/Stat5/BclxL como una ruta principal de supervivencia tanto en líneas celulares que expresan Bcr-Abl como en células primarias de pacientes de LMC en fase crónica y en crisis blástica. Por supuesto esta no es la única ruta que mantiene la supervivencia de estas células, otra vía como es la de NF-kB también hemos visto que contribuye al aumento en la expresión de BclxL. Para este trabajo hemos empleado un dominante negativo de Stat5 así como un inhibidor específico de la actividad quinasa de Bcr-Abl, STI571, que induce la muerte de la célula con disminución en la expresión de Bcl-xL. En este proceso apoptótico hay expresión de una proteína letal, Hrk, que en condiciones normales debe mantenerse reprimida. En nuestro modelo, la proteína represora DREAM parece impedir la transcripción de Hrk. Por último hemos estudiado posibles mecanismos de resistencia al STI571 que ya se emplea exitosamente en el tratamiento de la LMC.

Autor: MATEO FERNÁNDEZ JOSE IGNACIO.
Año: 2001.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE CANTABRIA.

Resumen: Se ha realizado el análisis molecular de la mutación GAA características de la Ataxia de Friedreich en 111 enfermos con un cuadro cínico progresivo de ataxia cerebelosa de presentación esporádica o con herencia autosómica recesiva. Se utilizaron los criterios diagnósticos de Harding de 1981 para definir a los enfermos con clínica típica o atípica. Se encontraron 40 enfermos homocigotos para la expansión GAA, de los cuales 10 tenían un cuadro clínico atípico. El tamaño de la mutación oscila de las 132 a las 1167 repeticiones GAA. El tamaño de la mutación en el alelo menor (GAA1) es significativamente menor en el fenotipo atípico. En una de nuestras familias con tres miembros afectos el cuadro clínico de presentación fue el de una ataxia espástica de inicio en la edad adulta. No se ha observado variabilidad clínico-molecular en nuestras familias. Se ha analizado la variabilidad intergeneracional en 38 transmisiones progenitor- hijo enfermo y hemos encontrado una tendencia general a la contracción del tamaño de la mutación GAA, que es mas evidente en la transmisión paterna. Los enfermos con mutaciones GAA1 grandes tienen una enfermedad mas grave, además de una mayor prevalencia de pies cavos, arreflexia, escoliosis, debilidad y neuropatía. La duración de la enfermedad es el determinante fundamental en la aparición de disfagia, alteraciones de esfínteres, uso de silla de ruedas, atrofia cerebelosa, amiotrofia y disartria. El tiempo de evolución hasta el uso de la silla de ruedas se correlaciona de forma inversa con el tamaño del alelo pequeño (GAA1). En nuestros enfermos por cada 100 repeticiones que aumenta el tamaño de GAA1 la edad de inicio de la enfermedad se adelantan en 4 años en tanto que el adelanto es de solo 1 año para el alelo GAA2.

Autor: RUBIO JAREÑO ANA.
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: La Esclerosis Múltiple (EM) es la enfermedad neurológica más frecuente en los adultos jóvenes del norte de Europa y América. Se trata de una enfermedad crónica del sistema nervioso central (SNC) que se caracteriza por la formación de lesiones en forma de placas en la mielina de los nervios. La epidemiología ha aportado una información considerable sobre los factores de susceptibilidad a la EM. La descripción de gradientes geográficos de prevalencia y los estudios de migración apoyan la existencia de factores ambientales, presumiblemente infecciosos. Sin embargo, la distribución irregular de la prevalencia según el fondo racial, y sobre todo, la mayor frecuencia de la enfermedad entre familiares de pacientes y particularmente entre gemelos monozigotos son sólidos argumentos a favor de una susceptibilidad genética, que según toda evidencia, incluida la disponibilidad de los modelos experimentales de EM, implica la interacción de varios genes. A lo largo de los últimos decenios se han valorado en estudios de asociación y de ligamiento numerosos genes candidaros según la idea de una patogenia mediada inmunológicamente contra antígenos de la mielina del SNC, y recientemente se han efectuado estudios de ligamiento rastreando todo el genoma con marcadores anónimos. Los resultados disponibles, con discrepancias entre estudios, subrayan el papel de la región del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC), localizado en el brazo corto del cromosoma 6, como el determinante genético para la EM. Los objetivos planteados en esta Tesis fueron: 1,- Encontrar, tanto dentro del MHC como fuera de él, genes asociados primariamente a la susceptibilidad a padecer EM. Este estudio se realizará mediante un análisis caso-control que podrá determinar loci adicionales de riesgo aparte del ya conocido alelo de susceptibilidad de clase II, HLA-DRB1*1501. 2,- Evaluar si las asociaciones positivas o negativas encontradas se deben a la existencia de ligamiento, determinado por un test de desequilibrio de transmisión en 63 familias de EM. 3,- Localizar mediante la técnica del mapeo de miceosatélites la ubicación más probable en el MHC de los genes de susceptibilidad y resistencia implicados en el proceso patológico. 4,- Mediar la contribución de los marcadores genéticos estudiados y asociados a la esclerosis múltiple al efecto conferido por el alelo HLA-DRB1/1501. 5,- Valorar el papel de los polimorfismos de las citocinas anti-inflamatorias, IL-10 e IL-1Ra, en la susceptibilidad a padecer la EM. 6,- Determinar si existen similitudes o diferencias genéticas en los loci estudiados (MHC, IL-10 e IL-1RN) entre la forma clínica Primaria-Progresiva y la forma mayoritaria de la enfermedad Remitente-Recurrente. Las conclusiones de esta investigación fueron: 1,- El alelo -376A del promotor del gen TNFA (clase III del MHC) se asocia primariamente a ls susceptibilidad a pader EM, independientemente de la región de clase II. 2,- La presencia combinada de los alelos HLA-DRB1*1501 y TNFA-376A en un mismo individuo aumenta considerablemente la susceptibilidad a padecer EM en comparación con el efecto de cada uno de ellos por separado. 3,- La presencia combianda del alelo HLA-DRB1*1501 y los microsatélites TNFa11b4c1d3e3 en un mismo sujeto disminuye notablemente la susceptibilidad a padecer EM conferida por el DRB1*1501 solo. 4,- El acusado desequilibrio de ligamiento existente en el MHC dificulta la localización exacta del gen o genes moduladores de la susceptibilidad a padecer EM. 5,- El alelo 12 del microsatélite IL-10G, ubicando en el cromosoma 1, es un marcador de susceptibilidad de la EM. 6,- Ningún alelo del gen IL-1RN, situado en el cromosoma 2, se asocia a la susceptibilidad a padecer EM en nuestra población. 7,- La forma clínica Primaria-Progresiva no se diferencia genéticamente de la forma mayoritaria Remitente-Recurrente en los loci estudiados.

Autor: ESPARZA DEL VALLE CLARA ISABEL.
Año: 2001.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA - UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: El estudio del polimorfismo de ADN se ha aplicado en dos situaciones clínicas concretas el seguimiento del trasplante hematopoyético y la detección de nuevos casos de cáncer colorrectal hereditario no polipósico hasta ahora ignorados por los estrictos criterios clínicos utilizados en el diagnóstico de este síndrome hasta ahora. Los marcadores polimórficos utilizados han sido los microsatélites. La técnica utilizada fue la PCR fluorescente cuantitativa. En la primera parte del estudio se realizó el seguimiento de un grupo de 21 pacientes con diversas patologías malignas hematológicas, sometidos a diversos tipos de trasplante (estándar, selección + y minitrasplante). Los objetivos planteados en esta primera parte del estudio han sido: 1,- El desarrollo de una técnica sensible e informativa para el estudio del quimerismo y la cinética del trasplante hematológico. 2,- Evaluar el quimerismo post-trasplante, como marcador de significado pronóstico del curso clínico del trasplante y su utilidad en la detección de EICH y recaída leucémica. A la vez que valoraremos el quimerismo en función de su localización anatómica y de su presencia en las distintas poblaciones leucocitarias. 3,- Estudio comparativo de la reconstitución de la diversidad T en las distintas técnicas de trasplante utilizadas. En la segunda parte del trabajo de tesis se analizaron 131 muestras de adenocarcinomas y sus respectivas mucosas normales con cuatro marcadores de microsatélites dos en zona no codificante BAT26 y BAT40 y dos en zonas codificante TFGBII y BAX. El número y el tipo de marcadores a utilizar en el diagnóstico de este síndrome es un tema en discusión, por ello el objetivo de esta segunda parte fue establecimiento de un panel mínimo de microsatélites para el estudio de la inestabilidad genómica como marcadores de selección de familias con cáncer de colon hereditario.

Autor: RABIONET JANSSEN RAQUEL.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: La sordera es una patología geneticamente muy compleja. Se cree que hay varios cientos de genes implicados en la audición. Un locus importante de sordera en la población española es el locus DFNB1. El gen responsable de la sordera ligada a DFNB1 es el gen GJB2. Este gen codifica para la conexina 26, la cual estaría implicada en el reciclaje de los iones potasio en el oído interno. Se han estudiado 372 casos de sordera de la población española para mutaciones en el gen GJB2, y se han identificado 18 mutaciones distintas. La mutación más frecuente identificada es la mutación 35 del G, la cual representa el 56% de las mutaciones identificadas en este gen. Se ha analizado la frecuencia de portadores de 35 del G en diversas poblaciones europeas, siendo la frecuencia media de portadores de 1 en 50, pero observándose diferencias entre las poblaciones mediterráneas (1 en 30) y del centro y norte de Europa (1 en 75). Probablemente esta mutación tenga un origen único y su elevada frecuencia sea debida a un efecto fundador y posible ventaja de los heterocigotos. La mayor parte de las mutaciones identificadas causan sordera profunda de herencia recesiva y de aparición prelingual. Dos de las mutaciones identificadas, G21R yR75Q, son causa de sordera autosómica dominante no sindrómica. Se ha identificado también la presencia de una deleción de 342 KB que incluye otro gen de conexinas segregando en trans con mutaciones en el gen de la conexina 26 en 5 casos con sordera de herencia recesiva, siendo esta deleción la tercera mutación causante de sordera congénita más frecuente identificada. Se ha creado también una base de datos consultable a través de internet (www.crg.es/deafness) con las distintas mutaciones identificadas en el gen GJB2 y en otros genes de conexinas implicados en sordera tanto sindrómica como no sindrómica. También se ha analizado la implicación del gen TMPRSS3 en la sordera de la población española, identificándose un individuo homocigoto para la mutación 207 del C y observándose que la contribución de este gen a la sordera de la población española no es cuantitativamente importante.