HISTOLOGIA HUMANA

Autor: ZURITA UROZ NÉSTOR ANTONIO.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En el presente trabajo realizaremos un estudio tanto cualitativo como cuantitativo de la distribución iónica del calcio, azufre, fósforo y potasio a nivel de la membrana otoconial del sáculo y del utriculo, en los diferentes estratos que la componen como son la membrana gelatinosa constituida por la capa cupular y la capa columnar y la otoconia con el fin de explicar los mecanismos de biomineralización que se dan lugar en esta estructura. Para ello utilizaremos membranas otolíticas procedentes de ratones OF 1 Swiss de entre 25 y 50 gramos de peso e independientemente del factor sexo. Las muestras obtenidas son tratadas mediante criotécnicas para evitar la redistribución iónica de las mismas. Posteriormente serán incluidas en resina EPON y recubiertas con carbón para su análisis posterior mediante microscopía electrónica en modo STEM. El análisis morfológico y microanalítico se realiza mediante un sistema de energía dispersiva de rayos X adaptados a STEM. Una vez obtenidos los resultados podemos observar como la pauta metodológica aplicada resulta ser adecuada para establecer la concentración iónica elemental de la membrana otoconial. Así comprobamos como la distribución del calcio en la membrana otolítica muestra un comportamiento ascendente desde la capa columnar hacia el estrato otoconial y este hecho estaría a favor de la tesis postulada por Harada en 1993 sobre la morfogénesis otoconial a partir de las células de soporte. En cuanto al patrón microanalítico del azufre, fosforo y potasio en la membrana otoconial se puede observar valores mínimos del os mismos en el estrato otolítico, experimentando un aumento de concentración conforme nos vamos acercando hacia la membrana gelatinosa, hallando valores máximos de azufre y potasio en la capa cupular y de fósforo en la capa columnar. Por lo tanto y en el modelo de distribución iónica en la membrana otolítica en nuestro estudio se detecta la existencia de tres indicadores útiles del mecanismo de biomineralización. * El indicador calcio/azufre, donde el calcio y el azufre mantienen una relación inversa de modo que conforme avanzan los mecanismos de biomineralización, disminuye el contenido de azufre tras la nucleación de los residuos sulfatados de la matriz orgánica por los iones de calcio. * El indicador calcio/fósforo, que al igual que el anterior se mantendría una relación inversa entre el calcio y el fósforo, a fin de que los grupos fosfato participen en los procesos de nucleación de las otoconias. * El indicador calcio/potasio, con un comportamiento claramente independiente en animales adultos, refuerza la idea de que el potasio se deposita en la membrana otolítica desde la endolinfa, por lo cual serviría como marcador indirecto de su contenido en ella.

Autor: BLANCO RAMOS MONTSERRAT.
Año: 2002.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Resumen: Las orexinas A y B son dos péptidos hipotalámicos que provienen del mismo precursor (prepro-orexina). Ambos péptidos se unen a dos receptores de membrana acoplados a proteína G, denominados receptor de orexina tipo 1 y receptor de orexina tipo 2. Dado que las orexinas son péptidos reguladores, nuestro interés se centro en el estudio del sistema endocrino, tratando de demostrar la síntesis de dichos péptidos y su posible (análisis de los receptores) en las distintas glándulas endocrinas y en el sistema endocrino difuso. Para ello hemos empleado distintas técnicas: inmunohistoquímica, dobel inmunofluorescencia, inmunocitoquímica y ultraestructural e hibridación in situ. Nuestro trabajo ha demostrado que las orexinas y sus receptores muestran una amplia distribución tanto en los tejidos endocrinos normales como en tumores, siendo más frecuente la expresión de orexina A que de orexina B y de receptor de orexina tipo 1 que de receptor de orexina tipo 2. La coexpresión de los péptidos y sus receptores en los mismos tejidos sugiere un papel autocrino y/o paracrino de las orexinas.

Autor: FUERTES NÚÑÉZ MARTA.
Año: 2002.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LEÓN.

Resumen: Hemos estudiado el índice apoptótico mediante la técnica de TUNEL (TdT-mediated dUTP nick-end labelling, así como la expresión de las proteínas p53 y bcl-2 mediante procedimientos inmunohistoquímicos, en muestras de biopsia de médula ósea (MO) de 103 personas: 61 pacientes diagnosticados de síndrome mielodisplásico (SMD) según los criterios del grupo FAB (21 AR, 13 ARS, 12 LMMC, 8 AREB y 7 AREBt) y dos grupos de control: 1,- 25 personas sanas, sin citopenias en la sangre periférica, mayores de 50 años. 2,- 17 pacientes diagnosticados de leucemia aguda mieloblástica (LAM) "de novo" según los criterios del grupo FAB. Hemos analizado la correlación de estos parámetros con otras variables clínico-biológicas de interés, así como las variables que influyen sobre la supervivencia global de nuestro grupo de pacientes con SMD. El índice apoptótico y las puntuaciones de p53 y de bcl-2 fueron significativamente mayores en los SMD que en las personas sanas y en las LAM que en los SMD. En los pacientes con SMD no se observó ninguna correlación estadísticamente significativa entre el índice apoptótico, por un lado, y los recuentos celulares en la sangre periférica (SP) o el número de líneas celulares dishemopoyéticas en la MO, por otro. El índice apoptótico tampoco influyó de forma independiente en la superviviencia global de estos pacientes. La puntuación de bcl-2 no se correlacionó con los recuentos en SP ni los hallazgos dishemopoyéticos, ni influyó en la supervivencia. La puntuación de p53 mostró una correlación cordinal negativa con la concentración de hemoglobina (r=-0,316, p=0,014; Spearman) y con el recuento de lelucocitos (r=-0,274; p=0,034; Spearman) en el grupo de pacientes con SMD. También demostró un valor pronóstico independiente para la supervivencia global en este trupo de pacientes (p=0,045; Cox). La puntuación de p53 es un parámetro de obtención rápida y sencilla que podría mejorar el rendimiento pronóstico de los esquemas integrados utilizados en la actualidad.

Autor: RUIZ GARCÍA JOSEFINA.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE GRANADA.

Resumen: En la presente Tesis se ha realizado el estudio histológico del esmalte y dentina en la Amelogénesis Imperfecta Hipomineralizada mediante la aplicación conjunta de microscopía electrónica de barrido y microscopía electrónica analítica. Se pretende establecer los patrones histológicos del esmalte en dichas dipslasia, comparándolos con los patrones ortotípicos de desarrollo; determinar los aptrones microanalíticos cuantitativos de Ca y P en el esmalte y dentina de la amelogénesis imperfecta hipomineralizada de acuerdo con la metodología desarrollada por nuestro Departamento, y establecer la correlación entre los patrones microscópicos y microanalíticos de dicha alteración en comparación con los patrones ortotípicos, definiendo los indicadores morfológicos y de mineralización. Las conclusiones más relevantes a las que se ha llegado son las siguientes: - El estudio con microscopía electrónica de barrido y microanálisis, llevado a cabo en el esmalte y dentina de las distintas piezas dentarias, nos permite sistematizar patrones morfoestructurales y microanalíticos sin generar alteraciones significativas. - Mediante microscopía electrónica de barrido hemos observado, en la amelogénesis imperfecta hipomineralizada, la existencia de un esmalte prismático inmaduro, el cual debe relacionarse con diferencias en la actividad secretora de los ameloblastos durante el desarrollo del esmalte. - Los estudios microanalíticos cuantitativos han puesto de manifiesto, a nivel de las muestras afectadas con amelogénesis imperfecta hipomineralizada, niveles de calcio y fósforo superiores al de las muestras controles tanto en el esmalte como en la dentina. - El índice de mineralización en dicha displasia revela que los mecanismos biológicos del proceso de mineralización no sufren alteraciones significativas; por lo tanto, los cambios morfológicos existentes a nivel del esmalte no conllevan alteraciones en la mineralización del mismo. - Por otra parte, en la amelogénesis imperfecta hipomineralizada existe un patrón de mineralización semejante en esmalte y dentina, con las consecuencias biomecánicas que ello implica, ya que no se han observado diferencias significativas en los niveles de calcio y de fósforo entre el esmalte y la dentina en los distintos tipos de dientes, mientras que en las muestras controles sí existen diferencias significativas en los niveles de calcio entre ambas regiones, si bien en cuanto a los niveles de fósforo sólo hay diferencias a nivel de los premolares. - Por último, la hipermineralización existente en la dentina, en las distintas piezas dentarias con amelogénesis imperfecta hipomineralizada, debe interpretarse en el contexto de sus propiedades físicas (elasticidad).

Autor: CASTRO SÁNCHEZ M. JOSE.
Año: 2002.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Dado que a nivel bibliográfico existen amplias referencias sobre fenómenos de sinergismo entre los receptores opiáceos mu y serotoninérgico 5-HT1A, nos planteamos determinar in vivo el mecanismo de acción implicado. Nuestros objetivos fueron determinar el efecto analgésico, dosis dependiente y tiempo dependiente de fentanilo y su relación con las características de los receptores 5-HT1A en áreas limbicas, amigdala e hipotálamo y comparar este efecto con el originado por los tratamientos agudo y crónico con imipramina, fluoxetina y SAMe, tanto a nivel analgésico como receptorial. Se determinó el efecto analgésico mediante el test de Randall Selitto y ante estímulo nociceptivo de tipo térmico y se caracterizaron los receptores 5-HT1A mediante experimento de autorradiografía con el agonista 5-HT1A selectivo 3H-80H-DPAT, entre los resultados obtenidos en este trabajo destacan que el efecto analgésico de fentanilo agudo se asoció a un incremento de la densidad de los receptores 5-HT1A de áreas limbicas, amigdala e hipotálamo. El efecto analgésico de imipramina y SAMe fué independiente de la función de estos receptores, pero apareció en forma tiempo dependiente y tras tratamiento crónico igualmente se relacionó con un incremento de la densidad de estos receptores. Fluoxetina sólo mostró efecto analgésico en tratamiento crónico siendo este independiente de la función de los receptores 5-HT1A.

Autor: GUZMÁN LARA JUAN.
Año: 2002.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: HIPÓTESIS FUNDAMENTAL La administración pasiva de humo de tabaco en animales de experimentación produce Enfermedad Obstructiva Crónica (EPOC). MATERIAL Y MÉTODOS Se utilizarón 61 ratas divididas en 2 grupos: el de los animales en exposición a humo de tabaco y el grupo de animales no manipulados. Los animales expuestos se dividieron a su vez en 3 grupos: en un grupo de exposición a 3 meses, el segundo a 4 meses y el tercero a 5 meses de exposición. Los animales se sacrificaron y sus pulmones se procesaron por histología de luz. Los cortes histológicos de los pulmones con sus diferentes tinciones fueron digitalizados y estudiados con métodos: automático, semiautomático y no automático. Las variables utilizadas cuantificaron en el parénquima el tamaño del alvéolo, el volumen del tejido distal, el volumen de fibras elástica y de colágeno. En la vía aérea se cuantificaron la luz del bronquio, la lámina basal, la muscular y la adventicia del bronquio. Se realizó estudio estadístico de los resultados. RESULTADOS Los animales expuestos durante 4 meses presentaron mayor número de modificaciones. En el parénquima, los alvéolos tenían disminuido el volumen y aumentado el grosor de su parde. En la vía aérea, la luz disminuida y la capa muscular aumentada. CONCLUSIÓN La exposición a humo de tabaco, produjo modificaciones inespecíficas del parénquima pulmonar y alteraciones de la vía aérea compatibles con obstrucción al flujo aéreo.

Autor: RUBIO MARTÍNEZ LUIS ALBERTO.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA - UNIVERSITAT DE VALÉNCIA.

Resumen: El tratamiento del cáncer de pulmón de establecen en base a diferentes estrategias, siendo la más definitiva el tratamiento quirúrgico radical de la lesión original. Sin embargo, la cirugía se aplica exclusivamente en pacientes con tumores en estadios I iniciales. De ellos, más del 0% no supera los 5 años de vida. El objetivo de este estudio es la búsqueda de nuevos factores pronósticos que ayuden a identificar al grupo de pacientes con un mayor riesgo de muerte asociado y en los que una terapia adyuvante sería beneficiosa. Con este fin, se analizaron 103 casos de tumores NSCLC en estadios iniciales I (T1/T2N0M0) diagnosticados e intervenidos en el Hospital Universitario La Fe entre los años 1992 y 1996, con un seguimiento clínico superior a 5 años. En primer lugar, se estudiaron las variables clínico-patológicas: tipo tumoral, grado de diferenciación, sintomatología, tamaño tumoral, parámetro T, sexo y edad. En segundo lugar, se realizó un estudio morfométrico automatizado de la angiogénesis tumoral mediante un analizador de imágenes. También se analizaron las expresiones inmunohistoquímicas de los factores biológicos VEGF e iNOS (sintasa del óxido nítrico inducible). Por último, se valoró la expresión de las proteínas supresoras de tumores P53 y p21WAF1. Los factores analizados en el análisis estadístico univariable (Kaplan-Meier) que demuestran una correlación con una menor de supervivencia son: un tamaño tumoral >3 cm, casos en el estadio T2, una angiogénesis elevada y la no expresión de la proteína p21WAF1. Estos factores con significación pronóstica fueron incluidos en el análisis multivariante (modelo de Cox), mostrando como únicos factores pronósticos independientes en relación a la supervivencia: el tamaño tumoral (p=0,0063), la angiogénesis (p=0,0271) y la expresión del p21WAF1 (p=0,0478); siendo, en este sentido, el factor más importante el tamaño tumoral, con un riesgo de muerte asociado de 2,7462 (95% CI=1,3307-5,6673). Posteriormente, los factores pronósticos independientes se incluyeron en el modelo de riesgo, identificando el grupo de pacientes con una menor supervivencia en función del número de factores pronósticos desfavorables. En conclusión, en este estudio indentifica aquellos factores pronósticos independientes en relación a la supervivencia en el cáncer de pulmón no microcítico y demuestra la validez del modelo de riesgo propuesto como herramienta eficaz a la hora de identificar al grupo de pacientes con un riesgo de muerte asociado elevado, para los que una terapia adyuvante sería aconsejable.

Autor: MALDONADO EZEQUIEL VICENTE.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN El control de las hormonas esteroideas sobre el ciclo endometrial está mediado por factores de transcripción, cuatro de los cuales son el receptor de estrógenos (RE), el de progesterona (RP), c-jun y c-fos, todos ellos expresados en el endometrio. En la literatura ha quedado establecido como, en términos generales, los niveles suprafisiológicos de estradil conllevan una disminución en las tasas de fecundación, de implantación y de embarazo, siendo este fenómeno debido, en mayor medida a la alteración sobre el endometrio. HIPÓTESIS Y OBJETIVOS Las importantes modificaciones en los niveles séricos hormonales que se originan en cilcos de FIV-TE deben conllevar importantes modificaciones, tanto morfológicas, como en la distribución y expresión de receptores esteroideos y otros factores de transcripción. Para ello planteamos como objetivos: A,- Profundizar en el estudio de los factores de transcripción a lo largo del ciclo menstrual en mujeres fértiles. B,- Comparar estos resultados con los obtenidos en mujeres sometidas a estimulación ovárica. C,- Comprobar el efecto morfológico que la hiperestimulación ovárica controlada tiene sobre el endometiro y su maduración. D,- Determinar la influencia que, sobre la expresión de los distintos factores de transcripción, tienen los niveles séricos hormonales suprafisiológicos. MATERIAL Y MÉTODO Hemos estudiado a 53 pacientes con ciclos naturales, 26 en fase proliferativa (día 9 a 12 de ciclo) y 27 en fase secretora (días 20 a 22), pacientes que habían solicitado esterilización definitiva y que cumplían con los requisitos de ser eumenorreicas, con antecedente de embarazo en los últimos 3 años y sin antecedente reciente de forma de anticonceptivos hormonales o haber portado DIU. Recogimos otras 54 pacientes procedentes del programa de FIV-TE de nuestra Unidad de Reproducción del Servicio de Obstetricia y Ginecología del HU Virgen de las Nieves de Granada; a las 20 recogidas en fase proliferativa se les canceló el ciclo en todo caso son niveles séricos de estradiol superiores a 1000 pg/mL; se recogieron 34 en fase secretora, 34 pacientes en las que no hubo fecundación ovocitaria. A todas las pacientes se les realizó una determinación de hormonas séricas (estradiol, progesterona, FSH, LH, testosterona, prolactina) el mismo día en que se les realizó una toma endometrial mediante cánula de Cornier. Dicha muestras se procesó realizándose un estudio histológico estándar, así como técnicas de inmunohistoquimia para RE, RP, c-jun y c-fos. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Si bien todos las muestras histológicas procedentes de endometrios de ciclos naturales resultaron adecuados a la fase (Noyes, 1950), los endometrios de ciclos estimulados resultaron con maduración irregular, siendo predominante un efecto de adelanto madurativo del estroma y un retraso del estroma, fenómeno éste coincidente con la literatura (Noci et al., 1997). En cuanto a los niveles séricos hormonales, comprobamos como mientras que en ciclos naturales solo encontramos diferencias significativas de la progesterona entre ambas fases, en ciclos estimulados encontramos diferencias en estradiol, progesterona y FSH; así cuando comparamos entre ciclo natural y estimulado, encontramos mayores niveles de estradiol en estos últimos, debido a la estimulación con FSH exógena, junto a menor LH (dada la inhibición mediante análogos de la GnRH), mayor prolactina (relacionada directamente con los valores de estradiol) y menor FSH durante la fase secretora de dichos ciclos estimulados. El receptor de estrógenos que en ciclos naturales muestra mayor expresión en los cuatro compartimentos titulares (estroma, endotelio, epitelio glandular y de superficie) durante la fase proliferativa, dado el efecto represor de la progesteroa (Lessey et al., 1988; Levey et al., 1980); en ciclos estimulados muestra mayor expresión en fase secretora en los epitelios. En dichos ciclos estimulados, muestra relación entre RE y estradiol en todos los compartimentos salvo en el endotelio, manteniéndose el control de la progesterona durante la fase secretora (Levi et al., 1980; Dichson et al., 1989; Beato et al., 1989; Salmi et al., 1996; Salmi et al., 1998). El receptor de progesterona, en ciclos naturales muestra mayor expresión durante la fase proliferativa en los epitelios, careciendo de carácter cíclico en los otros dos compartimentos. Lo constancia de la expresión en el estroma coincide con lo publicado por Press y colaboradores en 1988, aunque no con lo publicado por Shiozawa y colaboradores en 2003, siendo esta diferencia explicable por el método semicuantitativo de valoración de intensidad de expresión utilizado por nosotros. El carácter cíclico encontrado en los epitelios se relaciona con los niveles de estradiol y de progesterona presentes. En cuanto a c-jun, encontramos que en ciclos naturales sigue una distribución similar a RE, con mayor expresión en la fase proliferativa (Salmi et al., 1998), mientras que en ciclos estimulados perdemos el carácter cíclico en el estroma, no siendo posible justificar esta alteración por variaciones en alguna de las fases; por tanto, esto apunta a una pérdida de las relaciones entre factores de transcripción en endometrios anómalos (Salmi et al., 1999); de tal modo que el estroma muestra cierta independencia del estrógeno y dela progesterona en ciclos estimulados, es decir parecen existir distintos mecanismos de control de carácter célula-específico. Estas alteraciones también se encuentran en cuanto a la relación entre RE y Rp con c-jun. En lo referente a c-fos, resulta destacable la pérdida del carácter cíclico en los epitelios; así como la pérdida de la relación entre c-jun y c-fos en el epitelio glandular durante ciclos estimulados. CONCLUSIONES La expresión de factores de transcripción en el endometrio humano depende del comportamiento tisular y de la fase del ciclo, estando relacionada con los estrógenos séricos, ya que dicha expresión es mayor en la fase proliferativa. Existe una relación directa en ciclos naturales, entre la expresión del receptor de estrógenos y el de progesterona con la expresión de c-jun y c-fos en el endometrio, lo cual sugiere la existencia de mecanismos de corregulación entre los mismos. La estimulación ovárica altera la expresión de factores de transcripción en el endometrio, dicha alteración es dependiente del compartimento tisular. Así c-fos altera su expresión en los epitelios, principalmente en la fase secretora, mientras que c-jun altera su expresión en el estroma. Estas diferencias en la expresión de factores de transcripción en el endometrio motivados por la estimulación ovárica, sugieren la existencia de mecanismos específicos en cada compartimento tisular que regulan dicha expresión. La profundidad en el estudio de dichos mecanismos reguladores es clave para conocer la importancia de la alteración que sufre el endometrio durante la estimulación ovárica.

Autor: JUANAS FERNÁNDEZ FELIPE ESTEBAN.
Año: 2002.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Se estudian 42 polígonos de Willis humanos completos (18 de mujeres y 24 de hombres) que provienen de las autopsias clínicas realizadas en el Hospital Clínico Universitario de Zaragoza "Lozano Blesa", entre los años 1997 y 2001. En nuestro trabajo estudiaremos la estructura normal de las arterias componentes del Polígono de Willis humano, desde el punto de vista de la microscopía óptica. Para ello, utilizaremos las tinciones de hematoxilina eosina, tricrómico de Martins, orceína para fibras elásticas y Verhöeff para fibras elásticas, lo que nos permitirá estudiar la organización histológica de la pared de estos vasos, su estructuración en capas, el desarrollo y defectos en la lámina elástica interna, así como la distribución del material elástico en la túnica media. Del mismo podo, queremos estudiar la presencia, organización y distribución de los engrosamientos intimales fisiológicos, ya descritos anteriormente por Hassler en 1961 y Díaz Herrera en 1985. Las arterias componentes del Polígono de Willis pertenecen al grupo de las arterias musculares, si bien presentan una serie de particularidades que las individualizan sobre el resto de las arterias de la economía siendo la alteración más frecuentemente observada en el espacio subendotelial la aparición de placas de ateroma que van aumentando en tamaño con la edad. La L.E.I. en general, se presenta gruesa, bien definida, muy festoneada y con pequeñas fenestras que permiten el intercambio de sustancias entre la corriente sanguínea y los elementos constitutivos de la pared del vaso, dicha lámina muestra diferentes alteraciones en su estructura que aumentan progresivamente con la edad y van desde el simple desdoblamiento hasta el desflecamiento en múltiples láminas. La Túnica Media es la de mayor grosor entre las capas de la pared de estos vasos y se encuentra constituida por fibras musculares lisas de disposición transversal con respecto a la dirección de la corriente sanguínea sin mostrar en ningún caso la presencia de fibrillas elásticas entre las células musculares lisas que la componen, al contrario de lo que ocurre en otras arterias del cuerpo humano. La Túnica Adventicia presenta un grosor ligeramente inferior al de la Túnica Media y está formada por un tejido conectivo laxo cuyos elementos se disponen longitudinalmente y entre los cuales es fácil observar la presencia de pequeños vasa vasorum y filetes nerviosos siendo muy llamativa la ausencia de material elástico, al contrario de lo que ocurre en otras arterias de la economía. Es frecuente la aparición de engrosamientos intimales fisiológicos a la salida de las colaterales de las arterias motivo de nuestro estudio. Estas estructuras se encuentran formadas por numerosas membranas elásticas, entre las que se intercalan fibras musculares lisas provenientes de la túnica media. Debido a su estructura, composición y localización estamos convencidos de que los engrosamientos intimales fisiológicos tienen un papel regulador del flujo sanguíneo de las ramas colaterales al principio de las cuales asientan.

Autor: JIMÉNEZ GIL NURIA.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS - UNIVERSIDAD DE NAVARRA .

Resumen: La biología prostática está controlada por andrógenos y factores locales. El gen de la preproadrenomedulina codifica para la adrenomedulina (AM) y el péptido de 20 aminoácidos del extremo N-terminal de la proadrenomedulina (PAMP), dos péptidos amidados potencialmente implicados en el control del crecimiento celular. La única enzima amidante identificada en mamíferos es la monooxigenasa alfa-amidante de peptidilglicinas (PAM). En nuestro estudio hemos encontrado expresión de los genes preproAM y PAM tanto en la próstata humana normal como tumoral. La inmunorreactividad para PAMP se localiza exclusivamente en células neuroendocrinas (NE). El marcaje para AM se detecta en todos los tipos celulares epiteliales y en algunos componentes del estroma. PAM se expresa en los mismos tipos celulares positivos para AM o PAMP. También hemos encontrado que en la próstata existe un fenómeno de corte y empalme alternativo para los genes preproAM y PAM así como un procesamiento postraduccional de las proteínas precursoras. En la próstata humana, la presencia de andrógenos no es necesaria para la expresión de los genes de preproAM y PAM. En algunos modelos experimentales de carcinoma prostático (CP), la expresión de PAM aumenta tras la eliminación de andrógenos. Esto podría llevar a la aparición de CP refractarios a través de un aumento en la tasa de bioactivación de péptidos reguladores. La tinción para AM se encuentra con frecuencia en el CP. Sin embargo, parece no ser un buen marcador diagnóstico ni estar relacionado con la agresividad tumoral. Muchos CP presentan células NE positivas para PAMP o PAM. Pero éstas no parecen tener valor como marcador diagnóstico, a excepción de los pacientes pretratados con terapia antihormonal, quienes tienden a presentar una gran diferenciación de células NE positivas para PAMP. La retirada de andrógenos induce la diferenciación de subplobaciones NE positivas para PAMP y PAM en algunos modelos de heterotrasplante de CP, lo que puede relacionarse con el tiempo de supervivencia de los tumores. Nuestro resultados apoyan la hipótesis de que las células NE puedan estar implicadas en la emergencia de tumores refractarios de próstata.

Autor: PÉREZ CABALLERO DAVID.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El Sistema del Complemento engloba un conjunto de más de 30 proteínas distribuidas tanto en fase fluida como en la superficie de las células y constituye una parte importante de la inmunidad innata. Su función principal es la eliminación de microorganismos, aunque también posee otras funciones biológicas importantes. Este sistema es rápido pero por su baja especificidad requiere proteínas reguladoras que evitan su activación sobre los tejidos propios. La importancia de las proteínas reguladoras se reflejan en que situaciones de disfunción de estas proteínas, su ausencia por deficiencia genética, o la utilización que hacen de ellas algunos organismos, son la causa de enfermedades muy graves. Entre estas enfermedades se encuentran tanto infecciones recurrentes (Streptococcus pyogenes) como enfermedades crónicas (Síndrome hemolítico Urémico). Streptococcus pyogenes es una bacteria gram positiva que produce numerosas enfermedades leves de la piel y del tracto respiratorio superior, que al hacerse crónicas pueden originar secuelas postestreptocócicas muy graves como la fiebre reumática aguda o la glomerulonefritis aguda. Ocasionalmente, S.pyogenes puede producir enfermedades invasivas serias como la fascitis necrotizante o el síndrome de choque tóxico. El factor de virulencia mejor caracterizado presente en la superficie bacteriana es la proteína M. Esta proteína participa en adhesión y posee propiedades antifagocíticas. Se ha sugerido que las propiedades antifagocíticas de proteína M se deben a la interacción de proteínas plasmáticas como los reguladores de complemento C4BP, factor H y FHL-1. El objetivo de este trabajo de tesis ha sido profundizar en las interaciones entre reguladores del complemento y S.pyogenes. Las conclusiones a las que se han llegado son: 1,- La unión de los reguladores del complemento C4BP, factor H y FHL-1 es específica de serotipo. 2,- El 50% de los aislados clínicos analizados (33/69) son capaces de unir alguna proteína reguladora del complemento. 3,- La diferente capacidad de unir C4BP por distintas cepas de S.pyogenes del mismo serotipo depende del número de sitios expuestos en la superficie bacteriana. 4,- Se cuestiona la importancia fisiológica de la interacción del factor H y S.pyogenes. 5,- La interacción de FHL-1 es de alta afinidad e implica la región C-terminal de la molécula. 6,- C4BP y FHL-1 se unen a cepas M18 a través de proteínas estreptocócicas diferentes. El Síndrome hemolítico urémico (HUS) es una patología renal cuya manifestación clínica incluye anemia hemolítica microangiopática, trombocitopenia y fallo renal agudo. Este síndrome se subdivide en típico (producido por infecciones por la cepa O157;H7 de E. Coli) y atípico (de etiología muy variada). Recientemente se ha asociado al regulador del complemento factor H con HUS atípico. El objetivo de este trabajo de tesis ha sido realizar un análisis mutacional del gen de factor H en pacientes con HUS atípico. Las conclusiones de este trabajo son: 1,- El 31% de los pacientes españoles analizados con HUS atípico poseen mutaciones en el gen de factor H. 2,- El agrupamiento de las mutaciones en la región C-terminal de factor H y su caracterización funcional, sugieren que un defecto en la capacidad de proteger superficies celulares podrían ser importante en la patogénesis del síndrome hemolítico urémico atípico.

Autor: GÁLVEZ PACHECO JUAN.
Año: 2001.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: Las lesiones precancerosas de laringe constituyen una patología que aun hoy día entraña dificultades diagnósticas, pronosticas y terapéuticas. Califano, establece un modelo que relaciona las alteraciones morfológicas con el sustrato genético, destacando una serie de cromosomas que albergan distintos marcadores (p53, ki-67, bcl-2 y cerbB-2), sin que ello signifique, en ningún caso, que la clave de la precancerosis laringea reside exclusivamente en estos marcadores, ya que existen aun muchas discrepancias al respecto. Además, lo que le interesa al clínico es poder transmitirle a un paciente con una lesión precancerosa el riesgo individual que tiene de contraer un cáncer. Esto es el gran reto de la oncología moderna, y hasta hoy no se ha realizado en laringe. Realizamos un estudio inmunohistoquímico de los marcadores p53 ki-67, bcl-2 y cerbB-2 en 285 lesiones precancerosas de laringe distribuidas de la siguiente manera: 91 displasia leve, 83 displasias moderadas, 51 displasia severa y 60 carcinomas "in situ". En el tratamiento estadístico aplicamos por un lado un análisis univariante y por otro un análisis multivariante mediante la regresión múltiple de Cox, que permite crear grupos de riesgo individual. Hemos determinado el papel de estos marcadores en la carcinogenesis laringea, su interrelación con los factores de riesgo clásicos y por último, establecimos un modelo de calculo de riesgo individual, aplicable en la consulta clínica diaria.

Autor: VÁZQUEZ GIL M. JOSÉ .
Año: 2001.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE MEDICINA INTERNA.

Resumen: La fibrosis hepática, se caracteriza por la alteración en la síntesis y degradación de los componentes de la matriz extracelular. Un modelo experimental de fibrosis hepática es el de ligadura del conducto biliar común (LCB) que induce un daño hepático colestático, pudiendo observarse el proceso fibrótico a las tres semanas de la ligadura. En la LCB, la expresión de la isoforma inducible de la óxido nítrico sintasa (NOS) y la producción de óxido nítrico (NO) están alteradas, mientras que los sistemas antioxidantes están deteriorados, disminuyendo también los niveles de S-adenosilmetionina (Adomet). Además, el NO inhibe directamente la actividad de la metionina adenosil transferasa (MAT), enzima responsable de la síntesis de Adomet. Hemos estudiado en la LCB de 31 días la administración crónica, de aminoguanidina (AG) o NG-L-arginina-metil-éster (L-NAME), además del efecto del tratamiento con S-adenosilmetionina (S.amet®). Nuestros resultados confirman la existencia de fibrosis de origin biliar, que se acompaña de cambios hemodinámicos, de la función hepática y del estado oxidativo. A partir de ellos, podemos concluir que: 1,- En animales sin ligadura se expresan, tanto la NOSi como la NOSe, la inducible en células parenquimatosas y la endotelial en territorios vasculares. En animales LCB, se manitene la localización y aumenta la expresión de ambas. La producción de NO también aumenta. 2,- El tratamiento de las ratas, ligadas o no, con Adomet reduce la síntesis de NO de forma comparable al L-NAME o Aminoguanidina. El Adomet interfiere en algún paso de la síntesis del NO. Las tres sustancias parecen actuar en una vía sintética común. 3,- En las ratas ligadas tratadas con Adomet, sólo o combinado con L-NAME o Aminoguanidina, aumenta la bilirrubinuria. El Adomet induce una activación de las enzimas conjugantes renales y/o hepáticas. 4,- La administración crónica de Adomet, L-NAME o Aminoguanidina a ratas ligadas, no mejora ni la función hepática, ni el grado de oxidación, ni modifica el grado de fibrosis.

Autor: GARCÍA HONDUVILLA NATALIO.
Año: 2001.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN Se utilizan células mesoteliales (CM) como alternativa a las células endoteliales (CE) ya que, al tener un origen embriológico común y unas funciones similares in vivo, ambas estirpes celulares podrían tener un comportamiento similar al entrar en contacto con el componente sanguíneo. Nuestro objetivo ha consistido en comparar el comportamiento de ambas estirpes celulares en la creación de bioprótesis vasculares mediante ingeniería tisular, utilizando como armanzón prótesis de PTFE. MATERIAL Y MÉTODOS Las CE fueron obtenidas de vena umbilical humana mientras que las CM lo fueron a partir de fragmentos de epiplón humano. Se extrajeron las células mediante tratamiento enzimático del tejido. Se sometieron las distintas estirpes celulares a condiciones de cultivo previa identificación de las mismas mediante técnicas inmunohistoquímicas. Se sembraron prótesis de PTFE y se comparó su comportamiento. Para promover la estabilidad de la monocapa celular se trato la superficie luminal, bien con moléculas de adhesión (fibronectina) bien con la interposición de una matriz fibroblástica. Una vez establecidas las bases del comportamiento celular sobre el biomaterial, realizamos estudios encaminados a describir la viabilidad de las prótesis sembradas tras su interposición en condiciones de flujo, midiendo tanto la resistencia celular a las condiciones de flujo como el porcentaje de agregación plaquetaria en cada grupo. RESULTADOS Las CM en cultivo presentan características morfológicas e inmunohistoquímicas que las hacen claramente diferenciables de las CE, aunque su comportamiento en cultivo es similar. Ambas estirpes celulares tienen un comportamiento similar sobre la superficie del biomaterial, formando una monocapa a las 24 horas, monocapa que permanece estable hasta el 4º día en el que se produce el desanclaje de las células. Sobre la matriz fibrobástica, las células tienen un mayor poder de anclaje. En cuanto a su comportamiento en condicioens de flujo, la utilización de una matriz fibroblástica se traduce en uma mayor resistencia a las fuerzas de shear stress y, por lo tanto, la retención celular sobre la superficie protésica es mayor que en los grupos de prótesis incubadas con fibronectina. Sin embargo, en cuanto a su comportamiento antiagregante y antitrombogénico, las prótesis sembradas sobre fibronectina tiene una mayor resistencia a la agregación plaquetar. CONCLUSIONES Las técnicas de ingeniería tisular, empleando CM, pueden ser necesarias como paso previo al implante de prótesis vasculares de mediano y pequeño calibre en el ser humano y que las CM son una buena alternativa al empleo de CE en la creación de bioprótesis vasculares.

Autor: GONZÁLEZ MARTÍNEZ LUIS.
Año: 2000.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Hemos estudiado el desarrollo de las articulaciones de la cadena osicular timpánica en fetos humanos. Para ello se han estudiado 24 series embrio-fetales de edades comprendidas entre 36 días (14 mm) y 29 semanas (270 mm). Una vez realizadas las mediciones para datar cronológicamente al feto, se llevó a cabo una minuciosa y cuidada disección de los temporales en bloque; posteriormente fueron fijados en formol al 10%, descalcificados con ácidos nítrico al 2%, deshidratados en alcoholes a concentraciones progresivamente crecientes, incluídos en parafina, cortados en serie a 7 um., y teñidos en serie con las técnicas de Hematoxilina-Eosina y Tricrómico de Martins. La articulación incudo-maleolar exhibe las características de una diatrosis en encaje recíproco. Su primordio aparece a las 7 semanas de desarrollo, la formación de una interzona trilaminar a las 8 semanas, los primeros signos de cavitación a las 9 semanas y la presencia de una cavidad articular a las 10 semanas. La presencia de un cartílago hialino que recubre las superficies articulares del martillo y del yunque se observa a partir de las 20 semanas de desarrollo, estando completamente diferenciado a partir de las 26 semanas cada cápsula a base de finos haces de colágeno de disposición fibrilar. La articulación incudo-estapedial durante el desarrollo presenta las características típicas de una diatrosis tipo enatrosis. El primordio de esta articulación aparece a las 7 semanas de desarrollo, la formación de una interzona homogénea a las 7 semanas manteniéndose como tal hasta las 12 semanas, y no completa sus cavitación hasta las 16 semanas de desarrollo. Hasta las 29 semanas de desarrollo no hemos observado la presencia de un cartílago hialino en las superficies articulares del yunque y el estribo a nivel de su articulación. Durante su desarrollo la articulación incudo-estapedial presenta un ligamente capsular robusta a base de densas fibras de colágeno que se adhieren a los bordes de los cartílagos articulares. La articulación estapedio-vestibular durante el desarrollo presenta las características típicas de una sindesmosis. El primordio del rodete anular deriva de la diferenciación del cartílago, tanto de la platina del estribo como de la cápsula ótica que la rodea, a mesénquima y su posterior transformación a tejido fibroso, alcanzando sus características definitivas a partir de las 18 semanas del desarrollo. En la pseudoarticulación entre el martillo y la membrana del tímpano hemos observado cómo durante los tres primeros trimestres prenatales el mango presentaba una estructura cartilaginosa.

Autor: MORENO CEANO PALOMA.
Año: 1999.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Se ha realizado un estudio morfométrico y estereológico de las neuronas y células de la glía de las capas visuales astro zonal (I), gris superficial (II) y óptico (III) del colliculus superiro (CS) durante el envejecimiento. Se ha utilizado 20 ratas machos de la raza Wistar de 3,24,26 y 28 meses de edad. Los objetivos planteados han sido establecer 1: S i el envecejicimiento origina cambios: 1) en el tamamño y en la forma de las neuronas y células de la glía, 2) en el volumen de estas capas, en la fracción de volumen de neuronas y de glía y en la densidad y número total de neuronas y células de la glía. Se utilizaron cortes seriados transversales de 8um y se tiñeron conla técnica de Klüver-Barrera, aplicándose ha metodología cuantitativa adecuada para cada parámetro. Los resultados del estudio morfométrico evidencia que en las capas I-II y III el soma y el núcleo de las neuronas desde los 3-24 meses experimenta un ligero incremento en el área, diámetro máximo y mínimo valorado entre 4,5-17,7%. Posteriormente entre 24-28 meses se observa un proceso de atrofia neuronal manifiesta. Durante el mismo periodo las neuronas no experimentan cambios de forma. Con respecto a las células de la glía disminuyen de tamamño desde la etapa adulta a la vejez. El estudio estereológico ha permitido conocer que las capas I y II del CS experimentan un aumento de volumen entre 3-26 meses de un 48,5% y que entre 26-28 meses, disminuye un 19%. En la capa III no se producen cambios de volumen. La densidad numérica de neuronas en las cpas I y II se mantiene estable entre 3 y 24 meses y disminuye con el envejecimiento (p0,05). En la capa III este parámetro desciende con el envejecimiento.El estudio del número total nos indica que si bien existen varaicaciones a lo lardo de la edad en las tres capas, las diferencias no son significativas. De los resultados estereológicos en las células de la glía destacamos que la densidad numéridca glial se mantine estable cone l paso del tiempo en las capas I y II. En la capa III se incrementa un 15% entre 3-24 meses y se mantiene a partir de esta edad. Finalmente el número total de células en las capas I y II aumenta de los 3 a los 6 meses (p0,05) y desciende ligeramente entre 26 y 28 meses. En la capa III el número no cambia a lo largo del periodo estudiado.

Autor: RUIZ GOMEZ M. CONCEPCION.
Año: 1999.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Con objeto de evidenciar cambios debidos al envejecimiento, hemos realizado un estudio sobre 20 ratas albinas macho de raza Wistar. Los animales fueron divididos en 4 grupos de 5 animales cada uno atendiendo a la edad: 3,18,24 y 28 meses. Se realizó un estudio morfológico ultraestructural sobre las neuronas de proyección del NGLD y un estudio cuantitativo estereológico. Con el estudio morfológico hemos observado cambios mínimos en estas neuronas durante el envejecimiento. Destacamos: en el núcleo, condensaciónde cromatina, presencia de inclusiones, microesférulas nucleolares y aumento en la profundidad de las escotaduras de la membrana; en el citoplasma, acúmulo de gránulos de lipofuscina y dispersión y fragmentación del retículo endoplásmico rugoso PER. Mediante la aplicación de técnicas cuantitativas destacamos enlos grupos de animales de mayor edad; - Disminución del volumen, área y perímetro nuclear. - Aumento del volumen del nucléolo - Disminución del número de mitocondrias y aumento de su volumen - Aumento del volumen de grándulos de lipofuscina que son menos numerosos y de mayor tamaño. - Relacióninversa entre el volumen del PER y de los cuerpos de membrana

Autor: GARCIA-CREUS RUIZ BERDEJO M. DOLORES.
Año: 1999.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Con la elaboración de esta tesis hemos pretendido hacer una valoración sobre la eficacia del estudio citogenético en medula ósea en las diferentes neoplasias hematológicas y su posible repercusión tanto en el diágnostico, como en el seguimiento de estas enfermedades o la elección de su tratamiento. Nos propusimos también la puesta a punto de una técnica nueva sensible y específica que permitiera un diagnóstico genético a nivel molecular: la hibridació in situ con fluorescencia (FISH) que pone de manifiesto la translocación de los oncogenes ab1/bcr presente en mas de 90% de los casos de las LMC, alguno LLA,LMA y excepcionalmente en mielomas. Se recogieron de un total de 240 muestras procedentes de 210 individuos(234 de medula ósea y 6 de sangre periferica). Se realizo un metodo directo y un cultivo a corto plazo en medula osea y un cultivo de 72 horas en sangre periferica. Se estudiaron citogenéticamente a todos los pacientes y se aplicaron tecnicas de FISH en 32 casos. Para el FISH se utilizó una sonda para el gen ab1 y otra para el gen bcr. El grupo estudio se clasificó por patologías y por resultados citogenéticos encontrandose en el analisis cromosómicos un 42,4% de cariotipos normales, un 39,5 de cariotipos patológicos. En el 18,1% restantes de los casos, no se obtuvieron resultados. Los grupos que presentaron mayor nº de cariotipos anómalos fueron las LA y SMPC. Respecto a la técnica de FISH,9 casos fueron ab1/bcr+ y 16 casos ab1/bcr.- Se vieron afectados casi todos los cromosomas en el grupo estudio (excepto los cromosomas 4 y 5), el 22 fue el afectado con más frecuencias(cromosoma filadelfia). La presencia de células poliploides fue abundante en nuestra casuística y parece tener un gran valor pronóstico.

Autor: PÉREZ SANCHEZ M. BELEN.
Año: 1999.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA. UNIVERSIDAD VALLADOLID.

Resumen: La tasa de resistencias en España es una de las más altas de la unión Europea y se relaciona con un consumo escesivo ATB en la atención comunitaria. El objetivo de este trabajo es realizar un análisis de consumo cuantitativo del grupo I01 antibioticos sistemicos en España. Periodo de estudio: 1985-1995. Metodología aplicada, la recomendada por la OMS para este tipo de estadios, la unidad técnicas de medida y comparación utilizada es la dosis diaria --- (ODO)x 1.000 habitantes y día (DHD). Los resultados obtenidos muestran un incremento de utilización del grupo I01 A.S. De 10,52 DHD dispensadas en el año 1985 a 16,32 DHD en el año 1995 (+54%). El subgrupo terapeutico más prescrito: I01C3 penicilinas de amplio espectro (DHD media=6,1 DHD) los subgrupos terapeuticos que experimentaron un mayor crecimiento son: I01 D cefacosporinas (3-10%). El resto de los subgrupos presentian perfiles descuentos y conporcentajes de consumo poco significativos respecto al total. Las principios activos más prescritos son: Amoxicilina (40,7%), Amoxicilina-claulanico (15,7%) y Eritromicinas (8,22%) los principios activos que experimentan mayor incremento de sus consumo son: amoxicilina-Claulanico, cefuromi -axetilo, cefalclor, cefonicida, cefixima, claritromincina, azitromicina. Conclusiones se produce un incremento d ela utilización del grupo I01 antb. Sistemicos, La introducción de nuevos antb. En nuestro pais no suele coservar una sustitución de los ya existentes, sino, cierta adicción.

Autor: GINARTE VAL MANUEL.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Antecedentes. La piel normal posee los elementos necesarios para responder al eje hormona del crecimiento-somatomedinas (GH/IGF); de hecho, las diferentes células cutáneas responden in vitro a la GH y al factor de crecimiento tipo insulina-1 (IGF-1). Además, en los estados patológicos de exceso y defecto de GH, la piel sufre modificaciones clínicas. Por otra parte se ha implicado al eje GH/IGF en el desarrollo de múltiples tipos de tumores humanos. Hasta el trabajo de Lincoln y col de 1998, no existía ningún estudio que relacionase el receptor de la hormona del crecimiento (GHR) y patología cutánea. Objetivos. Por todo ello, nos hemos propuesto estudiar la expresión del GHR en 7 entidades proliferativas cutáneas, tanto de naturaleza benigna (fibromas blandos, queratosis seborreicas, nevus nevocelulares e histiocitomas) como maligna (carcinomas basocelulares, carcinomas espinocelulares y melanomas). Métodos. Hemos utilizado la inmunohistoquímica con el anticuerpo monoclonal 263 en biopsias cutáneas. Resultados. Las queratosis seborreicas y los fibromas blandos exhibieron una inmunorreactividad para el GHR idéntica de la mostrada por la piel normal. En los nevus nevocelulares la inmunotinción fue más débil. Los histiocitomas presentaron hallazgos variables, pero lo más llamativo fue el patrón nuclear de la epidermis hiperplásica suprayacente al tumor que se normalizaba en la periferia. En los cancinomas basocelulares y espinocelulares la inmunotinción fue menos marcada que la de la piel normal fue menos marcada que la de la piel nornal, y en los últimos se correlación con el grado de diferenciación celular. En los melanomas los hallazgos fueron heterogéneos. Conclusiones. El GHR es un receptor ubicuo, tanto en la piel normal como en diversos procesos proliferativos. El eje GH/somatomedinas puede estar implicado en el desarrollo de diversos tipos de neoplasias cutáneas, lo cual tiene importancia para el desarrollo de futuras estrategias terapéuticas. La localización intracelular del GHR podría implicar un significado funcional, por lo menos en los histiocitomas.