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FISIOLOGIA DE LA REPRODUCCION



97 tesis en 5 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5
  • VALORACIÓN DE LA TRANSLUCENCIA NUCAL COMO SCREENING DE CROMOSOMOPATÍAS.
    Autor: HUESO VILLANUEVA MARÍA.
    Año: 2004.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
    Resumen: INTRODUCCIÓN Las anomalías cromosómicas son la principal causa de mortalidad perinatal y discapacidad infantil. La más frecuente es la trisomía 21 (T 21). El diagnóstico de certeza se realiza mediante el estudio del cariotipo fetal, lo que necesita de pruebas invasivas que conllevan un riesgo de aborto. En el cribado de cromosomopatías se precisan métodos más sensibles y específicos, para poder limitar las técnicas invasivas, y disminuir el coste económico y las pérdidas fetales innecesarias. La translucencia nucal (TN) valorada de la 11 a 14 semanas de la gestación, combinada con la edad materna, es actualmente el marcador más útil de cromosomopatías, pues para una tasa de técnicas invasivas del 5% se identifican al menos el 75% de T 21. Con el presente trabajo queremos valorar la introducción de la medición de la TN como un nuevo método de cribaje de cromosomopatías en un hospital comarcal. Hipótesis de trabajo: · La TN supera la eficacia para la predicción de cromosomopatías al screening bioquímico del segundo trimestre. · La asociación de estas dos técnicas (screening secuencial) supera en sensibilidad a cualquiera de los dos por separado. MATERIAL Y MÉTODOS El estudio ha sido realizado en el Servicio de Obstetricia. De las 909 pacientes del estudio, controladas desde Octubre del año 2000 a Noviembre del 2003, hemos realizado 744 valoraciones de la TN, 494 estudios de los marcadores bioquímicos, 414 screenings secuenciales mediante la combinación de los riesgos de los dos anteriores. Así mismo hemos estudiado los cariotipos y las malformaciones. Hemos valorado la TN de acuerdo con las pautas establecidas por la Fetal Medicine Foundation. El riesgo de la TN se calcula mediante la multiplicación de la razón de verosimilitud (LR) por el riesgo base (riesgo de cromosomopatía que tiene una paciente de una determinada edad en un determinado momento del embarazo). El estudio de los marcadores bioquímicos del segundo trimestre es el se viene realizando clásicamente. Lo realizamos preferiblemente en la semana 15, y determinamos la alfafetoproteína y la fracción ß de la gonadotropina coriónica humana. La técnica empleada en el laboratorio para cuantificar los mismos es la electroquimioluminiscencia. Para el cálculo de los riesgos hemos utilizado un programa informático. La técnica que hemos utilizado en la mayor parte de las ocasiones es la amniocentesis; de más reciente introducción resulta la biopsia corial, con la que obtenemos mayor precocidad diagnóstica. Hemos estudiado los antecedentes de las pacientes, familiares, personales y obstétricos, así como los hallazgos ecográficos más relevantes de las gestaciones actualmente en estudio. Respecto a las 39 interrupciones voluntarias de embarazo, destacar que todas las T 21 y 18 optaron por esta vía, así como las malformaciones incompatibles con la vida o muy incapacitantes como los defectos de cierre del tubo neura.l Hemos realizado estadística descriptiva y analítica mediante el análisis de la varianza (ANOVA) y t de Student, test de Chi cuadrado y probabilidad exacta de Fisher. Para los estudios de asociación hemos realizado análisis de regresión mediante los coeficientes de correlación de Pearson y Spearman, y mediante tablas de contingencia de 2x2 se han calculado los correspondientes índices estadísticos, estableciendo el nivel de significación en p< 0,05. RESULTADOS 1. INDEPENDENCIA DE LOS MARCADORES DE CROMOSOMOPATÍAS: Nuestro marcador ecográfico, los bioquímicos y la edad pueden asociarse para aumentar la eficacia del screening, para ello deben ser independientes entre sí. Tras el estudio de correlación se observa que no se encuentran relacionados, por lo que esposible realizar un screening secuencial estimando un riesgo único. 2. ANÁLISIS DE LA RELACIÓN DE LAS PRUEBAS INVASIVAS Y LAS TÉCNICAS DE CRIBADO: Al comparar la eficacia de las técnicas de cribado en la población de alto riesgo y en la población general (muestra competa), observamos una discrepancia en los porcentajes de cribados positivos para la edad, screening bioquímico, TN y secuencial, que es esperable, puesto que se trata de dos poblaciones diferentes. Observamos que siempre el mayor número de amniocentesis se realizan por el criterio etario, mientras que en la población de alto riesgo ahorramos un 50% de amniocentesis con la TN y screening secuencial respecto al screening bioquímico, y en la población general disminuímos las mismas a la tercera parte con el screening bioquímico y la TN con respecto a la edad. El screening secuencial obtiene el porcentaje ideal establecido de pruebas invasivas cuando se realiza un screening universal. 3. CAPACIDAD DIAGNÓSTICA DE LAS TÉCNICAS DE CRIBADO PARA LAS ANOMALÍAS DEL CARIOTIPO: De los 347 cariotipos numéricos realizados mediante procedimiento invasivo durante el embarazo, obtuvimos 15 anomalías cromosómicas, existiendo 7 casos de T 21 y 3 de T 18. En las pacientes con cariotipo: la edad materna muestra una sensibilidad del 28,6% para la T 21 y del 33,3% para la T 21 y 18 conjuntas, lo que es concordante con la literatura, que muestra una sensibilidad del 30%. Al estudiar la TN, observamos que la capacidad diagnóstica de la misma es superior a la edad, con una sensibilidad del 66,7% para la T 21 y del 62,5% para la T 21 y 18. La LR es significativamente diferente de 1, es decir, a mayor TN mayor riesgo, y sin embargo una TN normal en nuestra casuística no es protectora. 4. UTILIDAD DE LAS TÉCNICAS DE CRIBADO EN EL DIAGNÓSTICO DE MALFORMACIONES FETALES Y RESULTADO PERINATAL: Excluyendo las cromosomopatías, obtenemos una buena concordancia entre la ecografía y las anomalías del recién nacido. La edad sólo se relaciona, contrariamente a lo esperado, con las anomalías fetales y cardiopatías, de manera que, a menor edad, mayor riesgo. Al estudiar la TN y calcular el índice de Kappa se observó que sus valores no eran buenos. Esto contrasta con la literatura. Al analizar el screenin bioquímico y el secuencial, sólo hemos encontrado asociación con el peso y la semana de finalización, de manera que a mayor riesgo en el screening, menor peso y semana; también existe una correlación negativa entre los niveles de alfa-fetoproteína y el peso y semana de finalización. CONCLUSIONES 1.Los marcadores estudiados: edad, TN, y bioquímica del segundo trimestre son independientes, por lo tanto al no proporcionar información redundante pueden utilizarse integrándolos para el cálculo de riesgo de T 21. 2.Podemos considerar la TN como un buen método de screening de cromosomopatías en nuestro hospital comarcal. 3.En nuestro estudio una TN anómala, excluyendo las cromosomopatías, no se asocia con un peor resultado perinatal objetivado para las malformaciones mayores/menores, índice de Apgar a los 5 minutos, peso y prematuridad, en tanto que el screening bioquímico y el secuencial sí se asocia a mayor prematuridad y menor peso fetal.
  • "BLOQUEO DE VEGFR-2 COMO MECANISMO CLAVE PARA LA INHIBICIÓN DE LA PERMEABILIDAD VASCULAR EN EL SÍNDROME DE HIPERESTIMULACIÓN OVÁRICA" .
    Autor: GÓMEZ GALLEGO RAÚL.
    Año: 2004.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
    Resumen: Durante los ciclos de reproducción asistida y con el fin de obtener un mayor número de ovocitos se administran gonadotropinas. De forma mayoritaria las pacientes no ofrecen respuesta adversa, sin embargo, cerca del 5% desarrollan el síndrome de hiperestimulación ovárica (SHO) caracterizado por aumento de permeabilidad vascular con salida y acumulación de fluidos sanguíneos en cavidad peritoneal y pulmonar. Nosotros hemos desarrollado un modelo animal de SHO en el cual hemos podido asignar el aumento de PV al factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF) que se sobreproduce casi exclusivamente a nivel ovárico. Hemos ensayado la inhibición del VEGF como posible tratamiento del SHO con exitosos resultados por los que hemos sido galardonados internacionalmente. Asimismo hemos ensayado protocologos de estimulació hormonal con bajas dosis de LH, que igualmente han sido exitosos en el descenso de VEGF producido, PV y por lo tanto en el desarrollo del SHO. Actualmente seguimos trabajando en nuevos tratamientos no agresivos para ser aplicados en humanos en el futuro.
  • REACTIVIDAD DE LAS ARTERIAS CORIONICAS FRENTE A FACTORES VASOACTIVOS DERIVADOS DEL ENDOTELIO.
    Autor: ALIAGA PARREÑO REGINA.
    Año: 2004.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.
    Resumen: La gran mayoría de los estudios sobre circulación feto-placentaria hacen referencia a su morfología vascular, a los flujos sanguíneos o a mecanismos de transferencia de sustancias. El hecho de que la disfunción de esta circulación pueda ocasionar graves consecuencias para el desarrollo de la gestación como son RCIU (retraso de crecimiento intrauterino), oligoamnios, preeclampsia…, es una motivación para el estudio de la circulación placentaria desde un punto de vista funcional. Estudios sobre reactividad vascular del lecho placentario se ha realizado principalmente en vasos umbilicales, siendo escasos los trabajos que se han centrado en la investigación de vasos coriales, aún conociéndose que estos vasos son más representativos de la circulación vellositaria que los vasos umbilicales y que además participan de la resistencia vascular en la circulación placentaria. Ante esto se planteó el objetivo genérico de investigar las respuestas motoras de las arterias coriales frente a estímulos vasoconstrictores y vasodilatadores (especialmente aquellos relacionados con el endotelio), con el fin de contribuir al mejor conocimiento de los mecanismos de control de la circulación feto-placentaria. Los objetivos pormenorizados son los siguientes: 1.- Estudio del efecto y mecanismo de acción de ET-1. 2.- Estudio comparativo de los efectos de distintos vasodilatadores, atendiendo principalmente a su dependencia del endotelio y al agente vasoconstrictor inductor del tono activo. 3.- Estudios de correlación entre los datos clínico-obstétricos y las respuestas vasomotoras de las arterias coriales humanas. Material y Métodos: La secuencia abreviada del estudio fue la siguiente: 1) Selección de las placentas y recogida de datos epidemiológicos pertenecientes a la gestación y al parto. 2) Aislamiento de las arterias coriales y disposición de las mismas para el registro de tensión isométrica en un baño de órganos. 3) Protocolo experimental con estudio de los datos obstétricos, respuestas vasoconstrictoras y vasodilatadoras de las arterias de la placa corial y análisis estadístico posterior de los resultados Las placentas debían ser de gestantes de raza blanca, sin antecedentes de interés y con curso de gestación normal, a término, de paro vaginal o cesárea sin complicaciones y no debía existir una diferencia entre la hora del parto y el inicio del experimento mayor de 6 horas. Accediendo a la historia clínica y una vez se seleccionaron las placentas, se recogieron datos clínicos de la madre: edad, gestaciones, peso, aumento ponderal durante la gestación, grupo sanguíneo y Rh; del parto: semanas de gestación, horas con contracciones, horas de bolsa rota, horas de PAP, diferencia en horas desde el parto al inicio del experimento, vía de finalización del parto (vaginal o cesárea), peso de la placenta en g, anestesia utilizada (local, peridural o general) y del recién nacido (sexo del neonato, gasometría de sangre del cordón umbilical, Apgar al minuto y a los 5 minutos, peso del recién nacido) con el objetivo de correlacionar los datos de reactividad vascular con los datos obstétricos. Las arterias estudiadas son ramas principalmente de 3er orden de la placa corial placentaria del 1/3 externo de la placa y mediante disección fina, se aislaron segmentos arteriales de 1 mm de diametro y 4 longitud. Para el registro de la tensión isométrica desarrollada por los segmentos arteriales se dispusieron los segmentos en un baño de órganos con solución nutritiva, burbujeada con gas carbógeno y con Tª cte de 37°C. Los segmentos arteriales se encuentran conectados a un transductor de tensión isométrica, conectado a su vez a un amplificador de señal y un polígrafo. Las condiciones previas a la realización de los experimentos son: La aplicación de una tensión basal de 2 g (que ha sido establecida previamente como optima).Dado que la respuesta inmediata de los segmentos arteriales es relajarse, la tensión debe ajustarse periódicamente hasta que se estabilizan en dicha tensión. Durante este proceso el líquido nutritivo se renueva cada 15 min. Una vez alcanzada una tensión basal constante de 2 g y con el fin de comprobar la viabilidad de los segmentos arteriales, se someten a un estímulo despolarizante (KCl 50 mM). A continuación realizamos las curvas concentración-respuesta mediante la adición al baño de órganos de concentraciones acumulativas del fármaco a estudiar. Para el estudio de la respuesta contráctil de las arterias de la placa corial placentaria y de los mecanismos que la modulan, nos centramos en el estudio del comportamiento arterial frente a ET-1. Se realizaron curvas concentración-respuesta de ET-1 (10-11-10-7 M), en situación control y en cada una de las siguientes situaciones experimentales: 1) Con el fin de determinar el tipo de receptor predominante, ETA o ETB, se obtuvieron curvas concentración-respuesta de ET-1 (10-11-10-7 M) y de ET-3 (10-10-10-6 M), analizando la potencia relativa entre ambos agonistas. 2) Con el fin de estudiar la posible participación del NO en la respuesta, se obtuvieron curvas concentración-respuesta de ET-1 y ET-3 tras la incubación (20 min.) de los segmentos arteriales con el inhibidor de la síntesis de NO, NG-nitro-L-arginina metilester (L-NAME, 10-4 M). 3) Para valorar el papel que juega el Ca2+ en la respuesta, se obtuvieron curvas concentración-respuesta de ET-1: a /en medio sin Ca2+ y en presencia de un quelante del ión Ca2+ (EGTA, 10-3 M); b/ previa incubación (20 min) con el bloqueante de los canales de Ca2+, nicardipina (10-5 M). Para el estudio de la respuesta relajante de las arterias de la placa corial se ensayaron sustancias vasodilatadoras que actúan mediante diferentes vías: endotelio-dependientes (ACh), y endotelio-independientes tales como adenosina, NPS (dado de NO) y nicardipina (antagonista del Ca2+). Para llevar a cabo estos experimentos se exponen previamente las arterias a un estímulo que active la contracción arterial de manera sostenida, lo que permite, tras la adición posterior de la sustancia vasorrelajante, estudiar el comportamiento arterial frente al estímulo dilatador. Se han llevado a término los siguientes experimentos:1) Estudio de la respuesta vasorrelajante vía endotelio-dependiente con ACh (10-9-10-4 M). 2) Estudio de la respuesta vasorrelajante de las arterias de la placa corial humana vía endotelio-independiente. En este apartado se analiza el comportamiento del NPS (10-9-10-4 M), de la adenosina (10-8-10-4 M) y de la nicardipina (10-10-10-4 M). Como sustancias inductoras del tono activo se emplea una concentración única de ET-1 (10-7 M) ó PGF2a (10-5 M). En el caso de la nicardipina se completa la investigación con una tercera sustancia vasoconstrictora inductora de tono activo, KCl (50 mM). Con el fin de determinar la posible influencia de factores obstétricos y neonatales sobre la respuesta de los vasos coriales, se llevaron a cabo los correspondientes análisis estadísticos entre las semanas de gestación, horas PAP, horas desde el parto hasta el inicio del experimento, peso de la placenta, peso del neonato y pH de arteria y vena de cordón umbilical, con respecto a los valores de CE50 y Emáx obtenidos para todos los estímulos investigados en las diferentes condiciones experimentales. Resultados: En cuanto a los datos obstétricos, por lo que se refiere a las variables cualitativas: sexo, via finalización del parto y tipo de anestesia, la distribución porcentual de nuestra muestra es superponible a la de la población estudiada en nuestro hospital; los valores de las variables cuantitativas se encuentran dentro de los parámetros de normalidad que hemos exigido para nuestro estudio. Respecto de los resultados sobre reactividad vascular: 1) Los resultados son compatibles con la activación de los receptores ETA de las arterias de la placa corial, la ET-1 tiene mayor afinidad que la ET-3 por estos receptores. Se estableció un orden de potencia de 10 veces mayor para ET-1 respecto de la ET-3. 2) La activación de los receptores para ET-1 activa la producción de NO. Este NO atenuaría la respuesta contráctil a la ET-1, si su síntesis se ve inhibida, también lo estarán sus efectos. La respuesta vasoconstrictora inducida por ET-3 no se ve modificada por el L-NAME, lo cual demuestra que este mecanismo de retroalimentación negativa sólo opera para la ET-1. 3) La entrada de Ca extracelular juega un papel importante como mecanismo mediador de la respuesta contráctil de las arterial coriales para ET-1. En nuestros experimentos alrededor del 66% de la respuesta máxima a ET-1 depende de la entrada del Ca extracelular. 4) Las arterias coriales responden a estímulos relajantes, aunque la magnitud de la relajación ve a depender del agente inductor de tono activo. En nuestro resultados de objetiva una gran respuesta relajante de las arterias coriales siguiendo la vía del NO. 5) En los estudios de correlación entre los parámetros clínicos y la reactividad vascular se objetivan cuatro funciones de regresión lineal estadísticamente significativas: correlación positiva entre las semanas de gestación y el peso del neonato respecto del Emáx de ET-1 en medio sin Ca+2. Correlación negativa entre el peso del neonato vs Emáx de ET-1 en presencia de L-NAME y correlación positiva entre pCO2 en sangre de arteria umbilical vs Emáx de nicardipina en arterias precontraídas con PGF2a Conclusiones: 1.- Las arterias coriales humanas exhiben una potente respuesta contráctil cuando se exponen a ET-1. El hecho de que el valor de CE50 se encuentre en el mismo rango que los niveles de ET-1 en cordón umbilical durante el parto, apoya la participación de ET-1 en la regulación del flujo sanguíneo feto-placentario en la fase final del embarazo. 2.- La respuesta contráctil de las arterias coriales humanas a ET-1 se produce tras la activación de receptores específicos del tipo ETA. 3.- La exposición de las arterias coriales humanas a ET-1 desencadena un mecanismo de retroalimentación negativa, en virtud del cual la activación de los receptores ET-A induce la liberación de NO el cual, a su vez, ejerce un efecto inhibidor sobre la respuesta a ET-1. 4.- La respuesta contráctil de las arterias coriales humanas a ET-1 muestra gran dependencia del Ca2+, cuyo flujo desde el medio extracelular a través de canales selectivos resulta decisivo para la contracción del músculo liso vascular. Aunque en menor medida, la liberación de Ca2+ desde los depósitos intracelulares también parece participar en dicha contracción. 5.- La respuesta relajante de las arterias coriales humanas a los diferentes estímulos investigados depende fundamentalmente del agente inductor de tono activo. En presencia de PGF2a, ni Ach (agonista endógeno dependiente de endotelio) ni adenosina (agonista endógeno no dependiente de endotelio) son capaces de inducir relajación. Además, las respuestas relajantes a los otros dos agentes vasorrelajantes investigados (NPS y nicardipina) también son de menor magnitud en presencia de PGF2a. La no dependencia de la respuesta a PGF2a respecto del Ca2+ podría explicar este hallazgo. 6.- Las arterias coriales humanas desarrollan respuestas relajantes de gran magnitud cuando se exponen a NPS o nicardipina. Este hecho demuestra la operatividad de las vías del NO y del Ca2+ en estas arterias en condiciones fisiológicas, y fundamenta la adopción de estrategias farmacológicas relacionadas con ambas para limitar el aumento de resistencia vascular que se produce en la preeclampsia. 7.- La existencia en cuatro casos de funciones de regresión lineal estadísticamente significativas, demuestra que algunos parámetros clínico-obstétricos, especialmente los indicadores de madurez fetal, se correlacionan con la reactividad de las arterias coriales frente a determinados estímulos, principalmente ET-1. La significación funcional de dichas correlaciones está por determinar.
  • "Caracterización bioquímica, Molecular y Funcional de las Hormonas Gonadotropas en la Lubina (Dicentrarchus labrax)" .
    Autor: MATEOS PÉREZ JORGE.
    Año: 2004.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: Facultad Ciencias Biológicas.
    Resumen: El tema de la tesis doctoral es la caracterización bioquímica y molecular de las gonadotrpinas (GTHs) en la lubina, así como el estudio de los mecanismos de retroalimentación de los esteroides sexuales sobre las GTHs. El clonaje de los genes que codifican las GTHs dió como resultado la secuencia completa de los tres genes de las correspondientes subunidades que forman las dos GTHs. Genes que han sido descritos, analizados y caracterizados, así como realizado el estudio de sus interrelaciones filogenéticas y evolutivas. Se han purificado, analizado y descrito la LH de lan lubina y desarrollado un ELISA para cuantificar su síntesis y secreción. Además, se han descrito, el ciclo de expresión de las GTHs de la lubina macho durante la etapa de reproducción, los perfiles de secreción de la LH tras la inyección de GnRHa en lubinas hembra maduras, el mecanismo de regulación del proceso reproductor por la testosterona en lubinas prepúbres y los efectos de los esteroides sexuales y el GnRH sobre la expresión de las GTHs. La investigación de la función de las GTHs es una de las bases que permiten la comprensión de la regulación hormonal del proceso reproductor. Así mismo, puede contribuir a mejorar la tecnología del control de la reproducción de los peces, en concreto de la lubina y de otras especies de peces importantes económicamente.
  • EFECTO DEL CICLO DEL ESTRO, PARIDAD Y ENVEJECIMIENTO MATERNO SOBRE LA CALIDAD DE OVOCITOS, EMBRIONES Y DESCENDENCIA EN EL RATON.
    Autor: GOMEZ PIQUER VANESSA.
    Año: 2003.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: OBJETIVOS: (1) Analizar, en el ratón, (a) el efecto de la fase del ciclo del estro en el momento de la inyección de gonadotropina de suero de yegua preñada (PMSG) sobre el porcentaje de fecundación (FIV) y desarrollo embrionario in vitro hasta la fase de blastocisto; (b) las relaciones causa-efecto entre varias variables de FIV y desarrollo embrionario pre-implantatorio; (c) si mantener a las hembras como vírgenes hasta una edad reproductiva avanzada se asocia con una menor eficacia y vida reproductiva; (d) el efecto del grado de paridad de hembras de edad reproductiva avanzada sobre su eficacia y cese de su vida reproductiva; (e) si los ovocitos procedentes de hembras de edad reproductiva avanzada muestran diferente susceptibilidad a ser activados partenogenéticamente, así como diferentes niveles de tioles y actividad del factor promotor de la mitosis (MPF), proteínas quinasas activadas por agentes mitogénicos (MAPKs) y glutatión transferasas (GSTs); y (f) los efectos a largo plazo de una maternidad retrasada sobre el desarrollo postnatal, características del comportamiento, eficacia reproductiva y longevidad de la descendencia. Y (2) esclarecer si las mujeres presentan un periodo de celo dentro de su ciclo menstrual. CONCLUSIONES: En el ratón, (1a) la fase de estro es la fase óptima del ciclo del estro para la inyección de PMSG; (1b) el nº total de ovocitos ovulados es una variable predictora del porcentaje de fecundación y nº total de células en blastocistos de día 5, el porcentaje de fecundación predice el porcentaje de blastocistos de día 5, el porcentaje de blastocistos de día 5 predice el nº total de células en blastocistos de día 5, y el nº total de células en blastocistos de día 5 es una variable predictora del porcentaje de células apoptósicas, nº de células asignadas al trofectodermo (TE) y masa celular interna (ICM) y el cociente ICM/TE en dichos blastocistos; (1c) Las hembras mantenidas como vírgenes hasta una edad reproductiva avanzada presentan una menor eficacia y vida reproductiva que las hembras emparejadas con machos a una edad más temprana; (1d) en ratonas de edad avanzada, una elevada paridad se asocia con una mayor eficacia reproductiva, pero no con una prolongación de la vida reproductiva de las hembras; (1e) los ovocitos procedentes de hembras de edad reproductiva avanzada presentan mayor resistencia a ser activados partenogenéticamente, menores niveles de actividad GSTs y tioles, así como una mayor actividad MPF y MAPKs; (1f) una matenidad retrasada induce efectos negativos sobre el desarrollo predeste, capacidad de aprendizaje y longevidad de la descendencia, pero no afecta a la eficacia reproductiva de los descendientes. (2) Las mujeres exhiben periodos recurrentes de aumento de atracción y procepción en la fase periovulatoria de su ciclo menstrual, sin embargo, estos cambios cíclicos no son tan patentes, obvios y abiertos como los que presentan las hembras de otras especies de mamíferos.
  • DETECCIÓ, ANÀLISI I TRACTAMENT DIDÀCTIC DE LES CONCEPCIONS ALTERNATIVES EN REPRODUCCIÓ HUMANA .
    Autor: PACHÉS LEAL MERCÈ.
    Año: 2003.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: PEDAGOGÍA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FORMACIÓ DEL PROFESSORAT.
    Resumen: En esta investigación se detectan y analizan diversos conocimientos y concepciones alterantivas en producción y sexualidad humanas que presentan los chicos y chicas de 2º ciclo de la ESO., mediante un test de evaluación inicial (y también por observación al aula), el cual se pasa también inmediatamente después de la instrucción (posttest I) y meses después de ésta y sin previo aviso (posttest II). La muestra a estudio abarca cuatro años académicos que corresponden a cuatro fases de estudio, y a 12 grupos- clase de 3º y 4º de ESO. Los aspectos analizados sobre los conocimientos del alumnado antes y después de la instrucción son anatomía de los aparatos reproductores, funciones de ovarios y testículos, regla y ovulación, recorrido de los espermatozoides por el cuerpo femenino, formación de gemelos, causas y soluciones a la esterilidad, y diversos mitos sobre la menstruación, el primer coito.. Se estudian los conocimietnos conjuntos de las chicas y chicos, y también por separado. Los datos obtenidos se utilizan para diseñar y desarrollar una instrucción basada en la pedagogía del cambio conceptual cuando hay que erradicar la idea del alumnado, y cuando no es así, utilizando otras estrategias didácticas según la distancia entre la idea del alumno y científicamente correcta. La instrucción se ha ido perfeccionando en las fases de estudio y logra que los alumanos aprendan ya que las pruebas del test de Wilcoxon o de la T de Student nos muestran diferencias estadísticamente significativas al comparar cada pregunta del pretest respecto a las de cada posttest. En cambio, no se hayan diferencias significativas entre las preguntas de los dos posttests entre si. Para ver el aprendizaje de los alumnos, además de comparar el número de respuestas correctas totales antes y después de la instrucción también se analiza de qué tipo son. Algunas de las concepciones alternativas tratadas han sido muy resistentes al tratamiento didáctico. Por ello la instrucción se ha tenido que ir optimizando. Han sido útiles los ejercicios que preguntan directamente por qué no es cierto lo que dice la concepción alterantiva. También lo han sido las actividades didácticas que rompen con las reglas del pensamiento causal que se han apuntado como posible origen de algunas concepciones. El uso de ejercicios con determinados dibujos también ha mejorado el aprendizaje y favorecido el cambio conceptual. Dichas actividades han aumentado más las respuestas correctas después de la instrucción y también que se conservasen mejor meses después. Además se ha mostrado útil tener en cuenta en la instrucción la frecuencia de sus conocimientos del alumnado, que cuando era baja la de los correctos o alta la de los alternativos se han tratado también con más detenimiento.
  • CARACTERIZACIÓN DEL PAPEL Y MECANISMOS DE ACCIÓN DE GHRELINA EN EL CONTROL DE LA FUNCIÓN TESTICULAR .
    Autor: BARREIRO ARCA M. LUZ.
    Año: 2003.
    Universidad: CORDOBA.
    Centro de lectura: MEDICINA .
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
    Resumen: La ghrelina, es un péptido de 28 aminoácidos sintetizado principalmente en el estómago e implicado en el control de la secrección de GH y la ingesta de alimentos. Distintas evidencias experimentales han abierto la posibilidad de que la hormona también esté implicada en el control de la función reproductora. En esta Tesis se llevó a cabo un análisis exhaustivo de la expresión de la ghrelina y su receptor en el testículo de rata y también se estudiaron las posibles acciones biológicas de la hormona en este tejido. Asimismo, se inició el análisis de la expresión de la ghrelina y su receptor en otros tejidos esteroidogénicos: la gláncula adrenal y el ovario de rata, ovario y testículo humanos. La ghrelina se expresa en el testículo de rata a lo largo del desarrollo postnatal. Ésta se localiza slectivamente en las células Leydig, del intersticio testicular, siendo máxima su expresión en las células de Leydig maduras tanto fetales como adultas, y dicha expresión está regulada por la LH hipofisaria. El receptor de ghrelina, el GHS-R, se expresa en el testículo de rata a lo largo del desarrollo postnatal. Sin embargo, el ARNm que codifica la forma funcional del receptor, GHSR-1a, se expresa sólo a partir del periodo prepuberal. La expresión de GHS-R 1a es detectable en diversos tipos celulares testiculares (céluas de Leydig, células de Sertoli y probablemente células germinales) y es regulada por la propia ghrelina y la FSH hipofisaria. La ghrelina inhibe la secreción estimulada de testosterona y la expresión de genes que codifican etapas clave en la ruta esteriodogénica (StAR, p450scc. 3beta-HSD, 17beta-HSD). Igualmente, la ghrelina inhibe la expresión del gen de SCF, factor específico de las células de Sertoli del testículo con un papel relevante en el control de la espermatogénesis. El receptor GHS-R se expresa igualmente en la glándula adrenal de rata, siendo ésta regulada por su ligando. No obstante, la regulación por ghrelina de los niveles de ARNm de GHS-R es opuesta a la observada en testículo e hipófisis. A pesar de la expresión detectable de GHS-R en esta glándula, la ghrelina no parece participar en el control de la esteroidogénesis drenal. La ghrelina se expresa igulamente en ovario de rta, así como en ovario y testículo humano. Por su parte, el receptor GHS-R1a es igualmente detectable en ambas gónadas en la especie humana. El patrón celular de expresiáon de ghrelina y su receptor es muy similar en gónadas de ambas especies. La presencia de ambos elementos (ligando y receptor) del sistema ghrelina/GHS-R sugieren un papel conservado se esta molécula en el control de la función gonadal.
  • EFECTOS DE LA SUPLEMENTACIÓN NUTRICIONAL CON DHA (AC. DOCOSAHEXANOICO) Y/O FOLATO DURANTE LA GESTACIÓN, SOBRE EL CONTROL DE LA TENSIÓN ARTERIAL Y LA DURACIÓN DEL EMBARAZO .
    Autor: PARDILLO PILAR SUSANA.
    Año: 2003.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
    Resumen: Mediante suplementación nutricional con DHA (Ac.docosahexanoico) y/o 5-MTHF (5-metil tetra-hidrofolato), desde las 20 semanas de gestación y comparando los resultados con los de gestantes sin suplementación nutricional, se trata de demostrar los efectos, de estos suplementos sobre la edad gestacional y la tensión arterial materna, alcanzando como conclusiones: 1,- La suplementación nutricional no influye sobre la duración de la gestación. 2,- La suplementación nutricional, no influye sobre la tesnión arterial durante el embarazo. 3,- Las concentraciones de ácidos grasos en plasma materno y en cordón umbilical, tienen escasa correlacción con la duración de la gestación, el peso, la talla y el indice ponderal de los recien nacidos. 4,- La gestación agota los depósitos de DHA maternos, por lo que las multípares necesitarían una suplementación de DHA durante el embarazo para asegurar un aporte óptimo para el feto.
  • LEUCOCITOSPERMIA, INFECCIÓN E INFERTILIDAD .
    Autor: TORTOLERO MENDOZA INGRID CARMEN.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: Se evaluaron 298 muestras seminales provenientes de 42 varones con fertilidad probada (controles), 170 de varones subfértiles y 86 de varones con varicocele para demostrar una posible relación entre la concentración de leucocitos y los parámetros seminales como son: pH, concentración, movilidad, morfología y con la peroxidación lipídica e infección del tracto genital masculino. Las muestras fueron evaluadas según las normas de la OMS, mediante estudio citomorfológico en el laboratorio de Andrología del "Hospital Doce de Octubre" y siempre por el mismo personal. Las muestras que presentaron un recuento de leucocitos mayor de 1x10 6/ml se remitieron para estudio de estrés oxidativo (MDA), en plasma seminal. Igualmente, a este grupo de pacientes se les realizó un exudado uretral para detectar la presencia de Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum y Chlamydia trachomatis y se obtuvieron muestras de sangre y plasma seminal para el estudio de anticuerpos IgA e IgG anti-chlamydia. Los resultados mostraron que el semen proveniente del grupo de varones subfértiles y los que consultan por varicocele presentaron una concentración de leucocitos significativamente más alta (2,50 +- 1x10 6/ml) y (2,3 +- 0,1 x 10 6/ml) respectivamente, que los varones fértiles (1,10 +- 0,1x10 6/ml) (p menor 0,0001). Igualmente, la concentración de células redondas estuvo significativamente más alta en el grupo de hombres subfériles (6,5 +- 0,3x10 6/ml) y en los varones con varicocele (6,1 +- 0,4x10 6/ml) que en los varones fértiles (4,5 +- 0,4x10 6/ml) (p menor 0,05). La concentración espermática de los varones subfértiles y con varicocele fue significativamente menor (42,1 +- 2,4x10 6/ml) y (49,9 +- 3,5x10 6/ml) respectivamente, que la de los varones fértiles (82,4 +- 5,7x10 6/ml) (p menor 0,0001). El porcentaje de espermatozoides con movilidad tipo "a" fue significativamente menor en el grupo de varones subfértiles (14,1 +- 0,9) y con varicocele (19,9 +- 1,4) que en el grupo de varones fértiles (32,1 +- 1,2) (p menor 0,0001). Igualmente la movilidad "a+b" mostró un porcentaje significativamente menor en el grupo de varones subfértiles (26,7 +- 1,4) y con varicocele (34,1 +- 1,9) respectivamente, que la de los varones fértiles (50,0 +- 1,3) (p menor 0,0001). El grupo de varones subfértiles presentó un porcentaje significativamente menor de formas normales (43,3 +- 1,5) que los varones con varicocele (50,0 +- 1,6) y que los varones fértiles (60,6 +- 1,3) (p menor 0,001). Los varones con varicocele fueron estadísticamente diferentes de los fértiles (p menor 0,001). Las anormalidades de cabeza (micro) se presentaron en mayor proporción en el grupo de varones subfértiles (20,0 +- 1,4) y con varicocele (17,8 +- 1,6) (p menor 0,001) que en el grupo de varones fértiles (14,1 +- 0,7) (p menor 0,001). Igualmente el grupo de varones subfértiles presentó un porcentaje mayor (14,1 +- 0,7) y estadísticamente significativo (p menor 0,001) de anormalidad de peiza intermedia que los otros dos grupos. De las 81 muestras de exudado uretral de varones subfértiles asintomáticos evaluadas para estudio microbiológico, en 25 de ellas se detectó la presencia de microorganismos patógenos, C.trachomatis en 14, U.urealyticum en 11 y M.hominis y U.urealyticum en 2 pacientes. La concentración de MDA fue significativamente mayor en el plasma seminal de los varones subfértiles y con varicocele (2,86 +- 0,12 M) vs (2,80 +- 0,18 M) respectivamente, que en los varones fértiles (2,19 +- 0,17 M) (p menor 0,006) y (p menor 0,03). Se concluye que el aumetno de leucocitos en semen es más frecuente en varones con subfertilidad y con varicocele que en los varones fértiles. El deterioro de los parámetros seminales sugiere un posible efecto asociado al aumento de leucocitos. La técnica de peroxidasa brinda una adecuada evaluación de procesos inflamatorios y/o infecciosos en este tipo de pacientes. La presencia de microorganismos patógenos mostró en este estudio una asociación con la leucocitospermia y con niveles aumentados de MDA. El estrés oxidativo (MDA) parece ser un posible factor negativo sobre los parámetros seminales en los pacientes subfértiles de causa desconocida.
  • CARACTERISTICAS DEL ESPERMOGRAMA Y DETERMINACIÓN DE LOS NIVELES SERICOS DE GONADOTROFINAS AL INICIO DE LA ESPERMATOGENESIS HUMANA EN UNA POBLACIÓN DE ADOLESCENTES (1999-2000) .
    Autor: VASQUEZ RENGIFO JESUS FERNANDO.
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.
  • ANÁLISIS DEL PERFIL SECRETOR DE MELATONINA EN EL EMBARAZO DE GESTANTES NORMALES Y DIABÉTICAS: RELACIÓN CON VARIABLES FETALES Y PERINATALES .
    Autor: BONILLO PERALES JUAN CARLOS .
    Año: 2002.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: UNVIERSIDAD DE GRANADA.
    Resumen: OBJETIVOS * Analizar los niveles de melatonina en el transcurso de la gestación normal y diabética, así como sus repercusiones sobre el feto y el recién nacido. * Describir los cambios biofísicos y hemorreológicos que se producen en el curso del embarazo y su posible relación con los niveles de melatonina. * Describir las relaciones y leyes que participan en el complejo equilibrio homeostático y hemorreológico en gestantes normales y diabéticas. * Identificar situaciones que podrían recomendar el empleo de melatonina durante la gestación. MATERIAL Y MÉTODOS Se realizó un estudio longitudinal de a 32 embarazadas normales en el primer, segundo y tercer trimestre de gestación. También se realizó un estudio comparativo entre gestación normal, Diabetes Gestacional y Diabetes Tipo 1 analizadas entre las semanas de gestación 25 y 36. En cada uno de estos momentos analizamos las siguientes variables: * Variables gestacionales: edad materna, peso, tensión arterial, edad gestacional, paridad, diámetro biparietal y longitud de fémur. * Variables del parto: Edad gestacional del parto, gasometría en arteria umbilical, peso del recién nacido y test de Apgar al minuto y a los 5 minutos. * Melatonina realizada por técnicas de radio inmuno ensayo. * Variables reológicas y eritrocitarias: - IR analizando por filtrabilidad en filtros Millipore de 5 micras de poro. - VP realizado con un viscosímetro de caída de bola automático. - HB A1 por técnica cromatografía en microcolumnas de intercambio catiónico. - Nº total de glóbulos rojos, hemoglobina, hematocrito. * Variables proteicas: albúmina, proteínas totales, apoproteína A y B, e índice albúmina/globulina (analizadas por técnicas electroforéticas). * Variables lipídcas: Colesterol total, HDL, LDL, triglicéridos, fosfolípidos y ácidos grasos libres (determinadas por espectrofotometría enzimática). El análisis estadístico realizado en el estudio longitudinal fue el siguiente: Para comparar los diferentes momentos de la gestación se realizó un estudio ANOVA Para analizar la relación y asociación entre las diversas variables realizamos un estudio de correlación y análisis de regresión logística. Con el Test de Fisher analizamos si el grado de relación entre las variables es diferente en los grupos estudiados y finalmente para conocer las variables predictivas perinatales y del crecimiento fetal se realizó un análisis de regresión múltiple. RESULTADOS Los resultados más importantes de la Tesis Doctoral fueron los siguientes: * En el estudio longitudinal, las semanas gestacionales medias en las que fueron analizadas la embarazadas fueron 9,08, 20,47 y 35,3 respectivamente. * En el transcurso de la gestación de curso normal observamos un aumento progresivo y estadísticamente significativo del colesterol total (p
  • MODULACIÓN POR ESTRADIOL DE LA RESPUESTA ADRENÉRGICA EN PINEAL DE RATA HEMBRA: CARACTERIZACIÓN DE LOS MECANISMOS DE ACCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE LOS RECEPTORES ESTROGÉNICOS IMPLICADOS .
    Autor: SÁNCHEZ SÁNCHEZ JUAN JOSÉ.
    Año: 2002.
    Universidad: LA LAGUNA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA. DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA.
    Resumen: La glándula pineal es un órgano neuroendocrino que sintetiza la hormona melatonina y la secreta a la circulación con arreglo a un patrón circadiano, siendo máxima su producción y secreción durante la fase de oscuridad (Reiter, 1991). En la rata hembra, la oscilación cíclica de los niveles circulantes de estradiol (E2), son acompañados por cambios en la tasa de secreción de melatonina al torrente sanguineo (Alonso et al., 1993). Estudios previos de nuestro laboratorio han demostrado, in vitro, que concentraciones de estradiol de 10 -1 M durante 48 horas de exposición, producen una reducción en la actividad del enzima sNAT y la secreción de melatonina, así como de la acumulación de AMPc en respuesta a la estimulación adrenérgica (Sánchez 1999). El estradiol, a las mismas dosis e idénticas condiciones experimentales, no afectó el aumento en la producción de AMPc inducido por forskolina (activador de la AC), lo que implicaría que, las acciones estrogénicas en relación con esta vía se ejercen a algún nivel previo a la AC (Hernández et al, 2001). A lo largo del presente estudio hemos determinado la acción del E2 sobre diferentes puntos de la cadena de segundos mensajeros asociados a los receptores de membrana alfa/beta-adrenérgicos. Con este planteamiento hemos podido demostrar que el E2 tiene un efecto bifásico y dependiente de la dosis sobre la respuesta pineal a la estimulación adrenérgica. Ello se traduce en una inhibición, a dosis bajas (10-11 -10-9), de la acumulación de inositoles fosfatos y AMPc tras activación de los alfa- y beta-adrenoceptores, respectivamente. Así como a nivel los indoles y cinética del enzima sNAT, paso limitante en la síntesis de melatonina y diana final de las diferentes señales activadas por la estimación adrenérgica. El patrón temporal característico de estos efectos (latencia de 48h tras la retirada del estrógeno), junto al hecho de que no sean reproducidos cuando el E2 es administrado a las células pineales en forma no-permanente (acoplado a BSA), sugieren que se trate de un mecanismo mediado por receptores intracelulares, probablemente de tipo genómico. A la dosis más efectiva (10-9 M), el 17alfa-E2 mostró efectos similares el 17beta-E2. La exposición a E2 de células pineales en cultivo no afectó la acumulación de AMPc inducida por tóxina colérica, lo que sugiere que el efecto modulador del estrógeno sobre la vía beta-adrenérgica debe ejercerse a través de modificaciones a nivel del beta-adrenoceptor, y no a nivel de las proteínas Gs. Confirmando lo anterior, el tratamiento con Es fue capaz de modificar la máxima capacidad de unión (Bmáx.) y la constante de disociación (Kd) del receptor beta-adrenérgico presente en membranas pineales, sin observarse modificaciones significativas en la cantidad del ARNm que codifica para esta proteína. El efecto bifásico del estrógeno, así como su posible mecanismo genómico de acción, podrían ser consecuencia de la expresión, localización y distribución celular diferencial de ambos subtipos de receptores estrogénicos (alfa y beta) en los pinealocitos. El conjunto de resultados descritos indican que el estradiol, en un rango de concentraciones equivalente al de sus oscilaciones fisiológicas en la rata hembra, es capaz de modular la actividad pineal inducida por estimulación adrenérgica. Si bien los mecanismos de acción precisos no han sido aún aclarados, los resultados obtenidos son compatibles con la activación estrógeno-dependiente de uno o varios receptores intracelulares, lo que se traduciría en la modificación en el número y/o estado funcional del receptor de membrana beta1-adrenérgico y tal vez otras dianas proteicas pineales.
  • MODULACIÓN ESTROGÉNICA DE LA RESPUESTA COLINÉRGICA EN UNA LÍNEA CELULAR DE NEURONAS PRODUCTORAS DE LHRH .
    Autor: MORALES RODRÍGUEZ M. ARACELI.
    Año: 2002.
    Universidad: LA LAGUNA.
    Centro de lectura: MEDICINA .
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
    Resumen: En eta tesis doctoral se ha abordado a nivel celular un problema fisiológico relacionado con la regulación estrogénica del sistema reproductor en la hembra, como es el mecanismo de retroalimentación negativa del sistema LHRH-LH. Esta es una cuestión clásica de la neuroendocrinología y fisiología reproductora que no ha sido suficientemente explicada hasta el momento. Los objetivos abordados son: 1,- La validación de la línea celular GT1-7 hipotalámica como modelo adecuado para el estudio de la fisiología de las neuronas productoras de LHRH. 2,- El estudio y caracterización de la señal de calcio inducida por acetilcolina en este modelo celular, así como el efecto del 17beta-estradiol en la modulación de esta señal. 3,- La determinación de los mecanismos de actuación intracelular de 17beta-estradiol en este efecto. 4,- El estudio de la presencia de sitios de unión para el estradiol en la membrana plasmática de estas células. Para abordar estos objetivos se ha utilizado la siguiente metodología: cultivos celulares, medidas de calcio intracelular, cuantificación de segundos mensajeros, identificación de sitios de unión al estradiol, inmunocitoquímicas, RT-PCR. Los resultados obtenidos demuestran que la línea celular GT1-7 es un modelo válido para el estudio de las neuronas LHRH, y que la acetilcolina actúa sobre estas células induciendo un aumento rápido de los niveles intracelulares de calcio, actuando a través de receptores colinérgicos muscarínicos. Esta acción de la acetilcolina es modulada de forma rápida por el estradiol, a través de un mecanismo que parece iniciarse en la membrana plasmática de las células y que implica la activación de la proteina kinasa dependiente de GMPc. Esta acción del estradiol no está relacionada con sus receptores intracelulares clásicos. Además, se ha observado la presencia de sitios de unión específicos para el 17beta-estradiol en la membrana plasmática de estas células. Estos datos constituyen una aportación relevante, al proporcionar las bases de un posible efecto modulador del estradiol sobre la actividad de las neuronas LHRH, a través de un mecanismo de acción inicialmente identificado-aunque, evidentemente, precise de experimentos posteriores para su clarificación y confirmación-y que serviría para explicar un efecto sistémico presente en todos los mamíferos.
  • GIZAKIA ETA ARRATOIAREN GARUNEKO PEPTIDASAK: OPIAZEOEKIKO MENPEKOTASUNAREN ERAGINA NEUROPEPTIDO EN ANDERAKUNTZAN .
    Autor: LARRINAGA EMEITA GORKA.
    Año: 2002.
    Universidad: PAIS VASCO.
    Centro de lectura: MEDICINA .
    Centro de realización: FAC. MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
  • OPTIMIZACIÓN DE LAS CONDICIONES BIOLÓGICAS PARA EL TRASPLANTE DE ESPERMATOGONIAS GENÉTICAMENTE MODIFICADAS .
    Autor: VECINO HERNÁNDEZ PAOLA.
    Año: 2002.
    Universidad: PAIS VASCO.
    Centro de lectura: MEDICINA .
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DEL PAIS VASCO.
    Resumen: El transplante de espermatogonias es una técnica que podría ser una alternativa a los métodos convencionales de producción a gran escala de animales transgénicos. La ventaja de esta técnica frente a los métodos convencionales de creación de transgénicos consiste en la estabilidad del transgen en los animales producidos y en la posibilidad de obtener un gran número de animales por cada transplante de espermatogonias genéticamente modificadas. Sin embargo, esta técnica ha presentado un gran número de inconvenientes derivados principalmente de la dificultad para conseguir un número elevado de espermatogonias para el transplante y de la ineficiencia de los métodos de eliminación de la población endógena de la línea germinal. Este estudio trata de solucionar ambos problemas, incrementando la población de espermatogonias de partida tanto por métodos in vivo como in vitro y eliminando completamente la población endógena de la línea germinal. El incremento de espermatogonias in vitro se consigue mediante la transfección de espermatogonias aisladas de animales prepúberes con un plásmido de que contiene el gen que codifica para al antígeno T mayor del virus SV40. Los resultados obtenidos permiten mantener las espermatogonias en cultivo durante más tiempo. Por otro lado, el número de espermatogonias puede aumentarse in vivo mediante la combinación de una intervención quirúrgica que inhibe el desarrollo de la espermatogénesis (el paso de espermatogonia a espermatocito) y consiste en introducir los testículos en la cavidad peritoneal y mantenerlos durante un periódo de 30 días (por sutura del tejido adiposo anexo a la pared peritoneal) y un tratamiento hormonal que acelera la proliferación de las espermatogonias. Este método permite que puedan aislarse hasta tres veces el número de espermatogonias que se obtenían por los métodos convencionales. Finalmente, la eliminación selectiva de las células de la línea germinal se ha realizado mediante el empleo combinado de agentes quimioterapéuticos y agentes hormonales. El agente quimioterapéutico empleado es el Busulfán, sustancia alquilante que se intercala en el DNA de las células con alto potencial proliferativo. La eliminación de las células de la línea germinal ha de ser acompañada de una inhibición en el desarrollo de la espermatogénesis, que se realiza mediante la administración de estradiol en animales de corta edad. Por otro lado, el uso de agonistas de la hormona liberadora de gonadotropina coriónica ha sido utilizado para reestablecer las condiciones originales del testículo, con el fin de favorecer la recolonización del túbulo siminífero por las células transplantadas. El empleo de estos métodos de forma previa al transplante de espermatogonias genéticamente modificadas mejorará notablemente el rendimiento de la técnica y evitará los problemas derivados del uso de la misma.
  • ANÁLISIS INTEGRADO DE MORFOMETRÍA Y MOVILIDAD ESPERMÁTICA HUMANA CON EL USO DEL SPERM CLASS ANALYZER .
    Autor: ÁLVAREZ LLEÓ CRISTINA.
    Año: 2002.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: MATEMÁTICAS .
    Centro de realización: FACULTAD DE CC. BIOLÓGICAS - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
    Resumen: El uso de los sistemas computarizados de análisis seminal requiere su validación respecto de los métodos de uso generalizado de valoración referidos a los criterios de la OMS (1999). En este trabajo se pretende validar el uso del Sperm Class Analyzer (V5.1) en el laboratorio clínico humano, así como abordar un análisis integrado de los diversos parámetros cinemáticos y morfométricos de los espermatozoides aportados por el sistema. Del estudio de correlación entre la valoración de concentración, morfología normal y movilidad progresiva realizada de forma subjetiva y con el uso del Sperm Class Analyzer, se concluyó que existía concordancia entre ambos tipos de valoración, lo que unido al aporte de una mayor cantidad de información mediante el sistema computarizado, apoya su utilidad en la valoración clínica de espermiograma humano. Por otra parte, se analizaron con el módulo de movilidad del SCA versión 5.1, con el uso de la cámara Makler y óptica de contraste de fase negativo (20x), 56 muestras de donantes voluntarios. De cada muestra se analizaron frotis que se tiñeron con Hemacolor, analizándose con el módulo de morfometría del SCA un mínimo de 100 células por muestra. Se obtuvieron 8 parámetros cinemáticos y 13 morfométricos, que se redujeron a sus componentes principales (CP) mediante el programa SPSS. Estas componentes explicaban el 83,19% del ttoal de la varianza CPI, Forma de la Cabeza (explicación de la varianza 29,65%), CP2, Tamaño de la cabeza (20,57%), CP3, Índice de velocidad (1371%), CP4, Velocidades (12,44%) y CP5, Pieza intermedia (6,78%). Esto abre las puertas a una comprensión integrada de las características espermáticas, lo que implica la introducción en la valoración seminal de criterios más robustos que la valoración individualizada de los parámetros. Finalmente, se analizaron los parámetros cinemáticos y morfométricos, así como sus componentes principales entre diferentes grupos de diagnóstico, concluyéndose que los criterios diagnósticos seguidos hasta ahora por la OMS no se ajustan a la valoración cuantitativa de la que ahora se dispone. Por ello, el trabajo futuro debe centrarse en el establecimiento de nuevos criterios.
  • INFLUENCIA DEL TRABAJO AERÓBICO PROGRAMADO EN EL DESARROLLO DE LA GESTACIÓN. PARÁMETROS MATERNO-FETALES .
    Autor: BARAKAT CARBALLO RUBEN.
    Año: 2002.
    Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
    Centro de lectura: INEF .
    Centro de realización: INSTITUTO NACIONAL DE EDUCACIÓN FÍSICA. MADRID.
    Resumen: A través de la historia, las recomendaciones acerca del ejercicio durante la gestación han estado basadas más en razones sociales y culturales que en evidencias puramente científicas. Actualmente, con el ejercicio físico convertido en una parte integral de la vida de muchas mujeres, la pregunta acerca de la influencia del ejercicio sobre la gestación tiene cada vez más importancia. El propósito de este trabajo de investigación ha sido conocer los efectos del ejercicio aeróbico moderado sobre los resultados del embarazo. Se trataó de un estudio de carácter experimental, del tipo de casos y controles, desarrollado en colaboración entre el INEF de Madrid y el Servicio de Ginecología y Obstetricia del Hospital "Severo Ochoa" de Leganés. Un total de 72 mujeres, sin complicaciones en su embarazo (ni embarazo múltiple) fueron asignadas de forma aleatoria al grupo de Tratamiento (casos) y 70 mujeres, con los mismos criterios de inclusión, formaron parte del grupo Control. El programa de ejercicios consisitó ent res clases semanales de 35 minutos durante el segundo y tercer trimestre de embarazo conducidas por un Licenciado en CC de la Actividad Física y el Deprote, siguiendo las líneas directrices del ACOG (Colegio Americano de Obstetras y Ginecólogos). Los resultados no muestran asociación entre practica de ejercicio físico durante el embarazo y complicaciones en el curso de la gestación ni resultados adversos de la misma. Asimismo se ha encontrado que las gestantesl del grupo Tratamiento (ejercicio) ganan menos peso y tienen recién nacidos con menor peso de nacimiento que las del grupo Control (no ejercicio); todo ello dentro de niveles considerados como normales. En conclusión, los resultados de esta investigación sugieren que mujeres sanas, sin complicaciones en su embarazo, pueden practicar ejercicio aeróbico moderado durante su segundo y tercer trimestre de embarazo, sin que ello genere complicaciones materno-fetales.
  • ATRESIA DE LOS FOLÍCULOS OVÁRICOS PREANTRALES DE CERDA: IDENTIFICACIÓN DE DIFERENTES TIPOS DE DEGENERACIÓN CELULAR Y TISULAR.
    Autor: PALLARÉS RODRÍGUEZ JACINTO.
    Año: 2001.
    Universidad: MURCIA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
    Resumen: En la presente tesis doctoral, se realiza un estudio histológico e histoquímico de la atresia en los folículos preantrales de cerdas prepuberales y adultas con el fin tanto de poner de manifiesto los cambios que en ellos tienen lugar durante esta fase degenerativa, como para comparar si el proceso histológico es similar al más concodio de los folículos antrales. Para ello se utilizaron ovarios de cerdas adultas y prepuverales procedentes de mataderos. Estos se procesaron de forma convencional par su estudio microscópico, y caracterización de los distintos estados de atresia. Algunas secciones se utilizaron para estudios histoquímicos de carbohidratos, tanto con técnicas convecionales como con lectinas. Parte se utilizaron para estudios inmuocitoquimicos tanto de proteínas de matriz extracelular como de detección de células proliferantes y apoptóticas en los folículos preantrales sanos y atrésicos. Se observaron diferentes mecanismos histológicos para la eliminación de los folículos preantrales dependiendo del tipo de folículo. Así, en los folículos primordiales, primarios y primarios multilaminares de pequños tamaño, es el ovocito el primero en degenerarse, y la participación de la apoptosis es muy baja. Por otro lado, en los folículos primarios multilaminares de mayor tamaño las células de la granulosa son las primeras en degenerarse, y en ellos el peso de la apoptosis es algo superior. Se distinguió durante la artresia de los primarios multilaminares de pequeño tamamño tres fases, destacando la Fase II, donde las células de la granulosa y teca se renian, y terminan por disgregarse en la matriz ovárica.Por otro lado, en los multilaminares de gran tamaño también se distinguió tres fases, en las dos primeras se va modificando paulatinamente las células de la granulosa que adquiere un aspecto estrellado, mientras que en la tercera fase, se produce un colapso del folículo. Se observaron las primeras células proliferantes en la gramulosa durante la transición de los folículos primordiales a primarios unilaminares.Estas se incrementan posteriormente en los folículos multilaminares, junto a algunas células de la teca.En la degeneración atrésica de los folículos multilaminares de pequño tamaño, la proliferación disminuye aunque todavía aprecen prolfierando unas pocas células de la granulosa. En los de gran tamamño la disminución del número de células proliferants es muy significativa en número, tanto en la teca como en la granulosa, y es observado antes de las modificaciones estructurales típicas de la tresia folicular. Se observó que a lo largo del proceso atrésico de los folículos preantrales la degeneración de los mismos no parece depender tanto de la apoptosis de sus elementos celulares como ocurre en los folículos antrales. Las apoptosis empezó a ser algo manifesta en los folículso preantrales primarios multilaminares de gran tamaño. En cuanto a las proteínas de matriz extracelular se apreció que su localización es similar en todos los tipos de folículos preantrales no atrésicos.como consecuencia de la atresia se mantuvo dicha disposición pero también se observó en estructuras foliculares donde se acumulaban estas proteínas. Así se identificaron principalmente fibronectina y colágeno IV en los folículos sanos a nivel de la membrana basal y los cuerpos de Call-Exner. Durante la atresia demás apreció postividad como engrosamiento de la lámina basal (en células globosas de la granulosa de los folículos multiaminares de mayor tamaño. También en estados avanzados de atresia se encontró células globosas reactivas a estas proteínas en los folículos primarios multilaminares de mayor y menor tamañó, en especial en los de pequeño tamaño. Las observaciones histoquímicas realizadas con lecitinas permitieron observar que la ZP se va formando gradualmente en los folículos preantrales a lo largo de su crecimiento. En el cambio de primoridales a primarios se pasó de una ZP con GC fundamentalmente neutros a otra con algunos ácidos del tipo O- y en el paso a multilaminares se puso de manifesto la paresencia de residuos sulfatados y de carácter ácido tanto de tipo O- como N- La composición glucídica de los folículos preantrales no se vio alterada por la atresia, aunque es de destacar el incremento en la positividad a SNA mostrada por las células de la granulosa de los folículos primarios multilaminares de gran tamaño durante la fase de estrelammiento.El uso de lectinas nos permitó identificar la existencia de dos poblaciones residuales de células durante las últimas fases degenerativas tanto en los folículos primarios de pequeño y gran tamamño, pues mostraron una distinta reactividad, unas de morfología globosa y débil positividad a las lectinas, mientras que las otras reactivas entre otras lectinas a GNA. La proliferación en la teca como en la granulosa. Mientras que en los folículos preantrales el inicio de la atresia supuso una disminución del índice de proliferación en la granulosa y teca no acompañado por un incremento significativo de la picnosis. En los antrales se acompañó por un aumento de la picnosis en la granulosa. En síntesis concluismo: A,- El proceso histológico de la atresia de los folículos preantrales fue similar en los ovarios de cerdas adultas y prepuberales. B,- Se pareció tres tipos de procesos degenerativos diferentes relacionados con los folículos primoridales y primarios de una sola capa, primarios multilaminares de pequños tamañó y primarios multilaminares de gran tamaño. C,- La atresia supuso una disminución importante de la proliferación celular tanto en teca como en granulosa, tanto en los folículos preantrales fue escasa la paticipación de la apoptosis como mecansimo de eliminación celular, siendo por el contrario muy importante en la granulosa de los folículos antrales.
  • ALTERACIONES EN LA FOLICULOGÉNESIS COMO CAUSA DE LA BAJA CALDIAD OVOCITARIA EN LAS PACIENTES CON ENDOMETRIOSIS: ESTUDIO "IN VIVO" E "IN VITRO" DE LAS CÉLULAS DE LA GRANULOSA Y LEUCOCITOS FOLICULARES .
    Autor: GARRIDO PUCHALT NICOLÁS.
    Año: 2001.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA UNVIERSIDAD DE VALENCIA.
    Resumen: La endometrosis es una enigmática enfermedad que se define como la presencia de fragmentos endometriales fuera del útero. Su relación con la infertilidad es clara, y diversos estudios clínicos hacen suponer que la causa es debida a alteraciones en la foliculogénesis que dan ovocitos de baja calidad, que a su vez resultarán en embiones anormales con mal pronóstico. Existen numerosos factores autocrinos y paracrinos que afectana la calidad ovocitaria. En esta tesis doctoral se analizan, por un lado, aspectos endocrinos estudiando la biología de la progeterona, al medir CBG y 33HSD en células de la ganulosa por RT-PCR y RIA, asimismo, se midió en igual modelo la II-6 y UEGF por las mismas técnicas y por citometría de flujo. De ello y de la cuantificación de leucocitos foliculares no se hallaron diferencias.
  • HORMONAL AND AMBRYONIC REGULATION OF HUMAN MUCIN MUC 1 IN ENDOMETRIAL EPITHELIUM .
    Autor: MESEGUER ESCRIVÁ MARCOS.
    Año: 2001.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA-UNIVERSITAT DE VALÉNCIA.
    Resumen: Muc 1 es una proteína de membrana presente en el endometrio materno, que puede actuar como barrera física para la implantación del embrión humano. Se ha mostrado en este trabajo que Muc 1 aumenta por efecto de la progesterona. Se expresa en el período receptivo de la fase lútea del ciclo menstrual y también en el embrión antes de implantar en el endometrio. Los embriones de buena calidad son capaces de aumentar su expresión en las fases del desarrollo previas a la adhesión pero en el momento de la misma el embrión o algún agente endometrial como TGF-B1 (factor de crecimiento transformante) eliminan la molécular tanto de la superficie materna como del propio embrión permitiendo el proceso de adhesión lo que explicaría su función como molecular antiadhesiva.
97 tesis en 5 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5
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