FISIOLOGIA GASTROINTESTINAL

Autor: VAQUÉ URBANEJA FRANCISCO JAVIER.
Año: 2003.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.

Resumen: HIPOTESIS.- La gastrectomía total determina un estado de nutrición deficiente, especialmente a largo plazo, relacionado con las alteraciones funcionales del intestino delgado secundarias a la pérdida de las funciones gástricas y a la posible alteración del funcionalismo intestinal. OBJETIVOS.- Con este trabajo se pretende demostrar el deficiente estado nutricional de estos pacientes y su evolución a largo plazo. También se plantean como objetivos determinar si esta malnutrición es consecuencia de alteraciones de la función intestinal absortiva, de alteraciones en la velocidad de tránsito o de la motilidad intestinal. MATERIAL Y METODOS.- Se estudian, durante 5 años de seguimiento, a 32 pacientes, 22 hombres y 10 mujeres, con una edad media de 61.4 años (rango: 30-79), diagnosticados de adenocarcinoma o linfoma gástrico, y sometidos a gastrectomía total y esplenectomía, con reconstrucción tipo esófago-yeyunostomía, con Y de Roux a 60 cm. del pie de asa yeyunal y linfadenectomía D1-D2. Todos ellos con intención curativa. Se ha valorado el estado nutricional en todos ellos mediante parámetros antropométricos, biológicos e inmunitarios, mediante una valoración anual y su seguimiento en 5 años. Se ha medido la calidad de vida mediante grados Visik, índice de Karnofsky y una encuesta para valorar mediante score parámetros afectivos y psicosociales. Durante el período de seguimiento se ha efectuado una encuesta nutricional, para determinar los hábitos dietéticos de los pacientes y se han valorado los síntomas digestivos que presentaban, especialmente en lo referente a la diarrea. Durante cada período de seguimiento se han efectuado análisis sanguíneos generales y otros que valoran el estado de la vitamina B12, ácido fólico, hierro y anemia, zinc y magnesio y colesterol junto a lipoproteínas. El estudio de la función intestinal ha consistido en una valoración estandarizada de malabsorción, comenzando con un test de grasas en heces para determinar los niveles de esteatorrea. Si este ha sido positivo se ha investigado la causa de la misma mediante pruebas que valoran el estado de la mucosa intestinal (test de la D-Xilosa, biopsia yeyunal y test de tolerancia a la lactosa), la existencia de sobrecrecimiento bacteriano (test del H2 espirado con glucosa), la posible insuficiencia pancreática exocrina mediante la administración de sustitutos enzimáticos pancreáticos, la velocidad del tránsito intestinal (Mediante comida marcada con Tc99 DTPH y mediante el test del H2 expirado con lactulosa), y un estudio manométrico del asa yeyunal de la Y de Roux. RESULTADOS.- En cuanto al estado nutricional, valorando todos los parámetros analizados en conjunto, los pacientes se encuentran en su mayor parte en un estado de desnutrición moderada, sin cambios en el tiempo. Este estado lo condiciona una importante pérdida de su peso habitual (no tan alarmante considerando el peso ideal), a expensas de una reducción importante del componente graso. El compartimiento proteico no está en situación deficitaria, e incluso mejora con el tiempo. (p=0.002). Existe una mejora de la calidad de vida según todos los criterios estudiados, sobre todo de parámetros específicos de la enfermedad (apetito, deglución, diarrea, dumping, pérdida de peso) (p=0.000), sobre todo a partir del 4º año. Existe una mejoría significativa en cuanto al número de deposiciones y consistencia de las heces, tornándose más frecuente la existencia de menos de 3 deposiciones al día de consistencia normal, sobre todo a partir del segundo y tercer año respectivamente. El resto de síntomas son inaparentes, excepto la plenitud postpandrial. Existe una mejoría estadísticamente significativa (p=0.004), comparando la proporción del número de enfermos con mala tolerancia alimentaria durante el 1º, 2º y 3er. años respecto el 4º y 5º. No existen alteraciones bioquímicas a partir del 4º año, con mejoría de los niveles de calcio y proteínas a partir del tercer año hacia la normalidad. La deficiencia de vitamina B12 y ácido fólico es casi constante. De igual modo la anemia ferropénica se presenta en el 57.8% de los pacientes sin mejoría evolutiva. En cuanto al estudio de malabsorción el 96.7% presentaron esteatorrea, de ellos el 80% moderada o severa. El test de la D-Xilosa no fue concluyente (normal en el 59.4%), lo que asociado a una normalidad histológica y no malabsorción de lactosa excluye una causa asociada a alteración de la mucosa. El 100% de pacientes tuvieron sobrecrecimiento bacteriano, no corregido en ningún caso tras la administración de antibióticos. Tras administración de encimas pancreáticos sólo se aprecia una mejora en cuanto al % pacientes

Autor: DÍAZ GARCÍA RICARDO JESÚS.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA.

Resumen: El objetivo general de este trabajo de investigación ha sido profundizar en el conocimiento de los mecanismos fisiológicos implicados en la adaptación de la actividad secretora del páncreas exocrino de rata a dietas con distinto contenido en grasa y diferente perfil de ácidos grasos. Para ello se han alimentado durante ocho semanas a ratas de la raza Wistar con dietas con distinta fuente de grasa (aceites de oliva virgen y de girasol) y distinto contenido graso (3.3% p/p y 10% p/p). La adaptación a estas dietas produce alteraciones en la composición en ácidos grasos de las membranas celulares pancreáticas, que reflejan el perfil de ácidos grasos de las dietas ingeridas. Nuestros resultados han demostrado también la influencia de a dieta en el contenido enzimático de la glándula, demostrando la existenciua de una adaptación de la actividad amilásica del páncreas a la cantidad de grasa de la dieta, observándose una relación inversa entre la cantidad de grasa de la dieta, observándose una relación inversa entre la cantidad de grasa del a dieta y la actividad amilásica del páncreas exocrino. Esta adaptación a la dieta fue independiente de la evolución ponderal y la ingesta calórica de los animales. Otro de los objetivos fue el estudio in vitro de la función de las células acinar pancreática estimada como secrección de amilasa, y la existencia de diferncias en la movilización de calcio citosólico en respuesta a distintas concentraciones de acetilcolina (ACh) y colecistoquinina octapéptido (CCK-8), como consecuencia del cambio en la composición lipídica de la membrana acinar tras la adaptación a las dietas. Nuestros resultados han demostrado que la calidad de la grasa de la dieta afecta a la secreción de amilasa en acinos pancreáticos, observándose niveles altos de secreción basal en esta enzima en ratas alimentadas con dietas ricas en ácidos grasos poliinsaturados. En cambio, en presencia de CCK-8 y ACh, la secreción neta de amilasa en el grupo alimentado con dietas ricas en ácidos grasos monoinsaturados fue significativamente superior a los otros grupos. En una suspensión de células acinares pancreáticas, los niveles basales de [Ca2+]i se modifican por efecto de la cantidad de grasa de la dieta, apreciándose un aumento en los niveles citoplasmáticos de este catión al aumentar el contenido de grasa dietética. El patrón de movilización de calcio en respuesta a secretagogos se modifica en función de la grasa de la dieta. La respuesta inducida por CCK-8 parece indicar un claro efecto de la calidad de la grasa de la dieta, al observarse la mayor respuesta en el grupo alimentado con la dieta rica en aceite de oliva virgen frente al grupo alimentado con dieta rica en aceite de girasol. En cambio, los cambios en los niveles de [Ca2+]i en respuesta a la ACh se modifican por la cantidad de grasa presente en la dieta. Al estudiar in vivo la influencia de diferentes tipos de grasa dietética sobre la respuesta secretora del páncreas exocrino de rata en condiciones de reposo y de estimulación por CCK-8, observamos un paralelismo entre los resultados obtenidos en ratas anestesiadas con los obtenidos en células acinares pancreáticas aisladas de ratas sometidas todas al mismo protocolo dietético. El grupo oliva ha demostrado una mayor eficacia secretora con respuestas inducidas por CCK-8 más mantenidas en el tiempo para todos los parámetros estudiados. Los resultados de este trabajo confirman la adaptación del páncreas exocrino al tipo de grasa dietética, produciendo modificaciones en la respuesta secretora del páncreas y en los mecanismos de señalización celular, hecho que planteamos como objetivo de nuestro trabajo.

Autor: FERNANDEZ SALAZAR MARIA PAZ .
Año: 2003.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: Los procesos fisiológicos que intervienen en la secreción hidroelectrolítica pancreática no están bien determinados. Nuestro objetivo fue establecer los mecanismos de transporte iónico presentes en la membrana basolateral, responsables de la secreción ductular en conductos pancreáticos aislados de ratón. Este objetivo se amplió al querer comprobar la actividad de alguno de estos mecanismos en la rata. La secreción ductular en conductos pancreáticos aislados de ratón y rata se determinó mediante la técnica de la videomicroscopía digital, que se basa en el aumento del volumen de los fragmentos de conductos, producido como consecuencia de la estimulación de la secreción. También se midió el pH intracelular en conductos pancreáticos aislados de ratón mediante microfluorimetría, utilizando BCECF como marcador fluorescente del pH, para estudiar los mecanismos implicados en la secreción de HCO3-. Los estudios funcionales se complementaron con estudios inmunohistoquímicos empleando anticuerpos específicos para algunos de los transportadores iónicos. Como resultado del trabajo concluimos que: 1. Los conductos pancreáticos de ratón y de rata secretan activamente tanto HCO3- como Cl-, de forma simultánea y en cantidades comparables. 2. La secreción de Cl- en las células ductulares pancreáticas de ratón y de rata está mediada por la actividad de un cotransportador Na+-K+-2Cl-, del tipo NKCC1, que acumula este anión a través de la membrana basolateral de estas células. 3. En el ratón, la acumulación de HCO3- a través de la membrana basolateral de las células ductulares pancreáticas se realiza por medio de la actividad de un intercambiador Na+/H+, del tipo NHE1, pudiendo también participar en este proceso un cotransportador Na+-HCO3- electrogénico. 4. La H+-ATPasa de tipo vacuolar no participa en los mecanismos de secreción de electrolitos de las células de los conductos pancreáticos de ratón 5. Algunas células ductulares del páncreas humano expresan, en su membrana basolateral, un cotransportador Na+-K+-2Cl-, del tipo NKCC1.

Autor: SEVILLANO MARCOS SARA MARIA.
Año: 2003.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA, UNIVERSIDAD DE SALAMANCA.

Resumen: La pancreatitis aguda (PA) es una enfermedad inflamatoria cuya amplificación puede provocar complicaciones sistémicas e incluso la muerte. Afortunadamente, la PA suele ser un proceso autolimitante, y los daños morfológicos y funcionales sufridos pueden repararse en un proceso de regeneración pancreática. Un exceso de radicales libres de oxígeno (RLO), mecanismo patogénico involucrado en la PA, causa daño oxidativo sobre diferentes componentes celulares, amplifica la respuesta inflamatoria, y está implicado en la regulación de la proliferación en diferentes tipos celulares. Mediante la administración profiláctica intraperitoneal de N-acetilcisteína (NAC), precursor de glutatión con efecto antioxidante y antiinflamatorio, se previno la generación temprana de RLO durante la PA inducida por obstrucción bilio-pancreática (OBP) en rata. De este modo la NAC previno los desajustes de la homeostasis del Ca2+ y la cumulación de enzimas digestivas en las células acinares, probablemente impidiendo la oxidación de membranas celulares y proteínas como las del citoesqueleto, preservando sus funciones y paliando el bloqueo de la exocitosis inducido por la OBP y la gravedad de la enfermedad. La administración de NAC redujo y retrasó la respuesta inflamatoria local e inhibió su amplificación sistémica, quizás mediante la supresión del efecto quimioatrayente y activador de leucocitos de los RLO, capaces de promover la producción de citocinas proinflamatorias y moléculas de adhesión, favoreciendo la infiltración tisular y el daño asociado. Estos efectos se deben a la activación del factor de transcripción nuclear NF-kB dependiente de RLO, inhibida por NAC en diversos modelos experimentales. En cuanto a la progresión del ciclo celular, comprobamos que los RLO juegan un papel clave promoviendo la proliferación de las células acinares pancreáticas. La eliminación de la OBP después de 24 h de PA limitó eficazmente la progresión de las respuestas inflamatorias local y sistémica independientemente de la administración de NAC, aunque la atenuación del daño pancreático durante la PA, derivada del tratamiento, aceleró el posterior proceso de regeneración.

Autor: MANO TUDA ANA M. DE LA.
Año: 2003.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FISISOLOGÍA Y FARMACOLOGÍA.

Resumen: La pancreatitis aguda (PA) es una enfermedad inflamatoria del páncreas que puede afectar también a otros órganos alejados. El objetivo general de este estudio fue comprobar si una reducción de la carga enzimática intraacinar, inducida mediante la administración de L364,718, un antagonista de la colecistoquinina (CCK), a la dosis de 0.1 mg/kg/día durante 7 días, resulta eficaz para reducir la gravedad de la PA inducida por obstrucción bilio-pancreática (OBP) en la rata. Comprobamos en nuestro estudio que la reducción de la carga enzimática acinar, no previene la PA inducida por OBP, que se desencadena cuando en la célula acinar concurren un aumento de Ca2+ citosólico y una acumulación de enzimas, independientemente de su magnitud. En el grupo de animales tratados con el L364,718 el daño pancreático producido por la OBP se debe prioritariamente a las células acinares R1, población mayoritaria en el páncreas de la rata. Se comprobó además, que la administración del antagonista de la CCK produce alteraciones en el compartimento granular, que favorecen el bloqueo secretor, capaces de agravar el proceso inflamatorio en el curso de la OBP. El análisis del estado redox reveló que la producción de radicales libres de oxígeno se debe iniciar en las propias células acinares y posteriormente los neutrófilos infiltrados contribuirán a aumentar el estrés oxidativo de la glándula. En el grupo de animales tratados con el L364,718, no varió el grado de estrés oxidativo que se produce como consecuencia de la OBP. La administración de L364,718 altera la respuesta inmune sistémica de ratas sometidas a OBP, retrasando la participación de los monocitos y potenciando el papel de los linfocitos los cuales incrementan el proceso inflamatorio en estadios avanzados de la PA, por ser capaces de liberar mayor cantidad de citocinas proinflamatorias pero carecer de una reserva funcional de citocinas antiinflamatorias. El tratamiento con el antagonista de la CCK produce una inhibición de la proliferación de las células acinares, en ratas controles, asociada a una alteración en el estado redox celular. En los animales sometidos a OBP el tratamiento con L364,718 agravó las alteraciones, inducidas por la PA, en la maquinaria de replicación celular, que conducirían a adelantar la atrofia de la glándula.

Autor: VITURRO DEL RÍO ENRIQUE.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La aterosclerosis es una enfermedad que aparece desde edades muy tempranas de la vida, con la consiguiente manifestación en forma de enfermedad cardiovascular en la vida adulta. Los niveles de lípidos plasmáticos son factor de riesgo independiente y demostrado para el desarrollo de la aterosclerosis. Dichos niveles de lipidos están determinados por factores tanto genéticos como ambientales (dieta, tabaquismo, etc.) Hasta el momento, los gnes estudiados no explican por completo la amplia variabilidad interindividual en los niveles de lipidos plasmáticos. El estudio en los ultimos años de una nueva familia de genes, los transportadores ABC, implicados en absorción y excreción biliar del colesterol dietético, ha bierto nuevas perspectivas. En esta tesis se estudian variaciones en dos genes de la familia implicados en este proceso, ABCG5 y ABCG8 y su interacción con la dieta en la determinación del perfil lipidico en población infantil española. Se observa una importantísima influencia de la ingesta de colesterol y grasas saturadas diarias en el efecto hiperlipemiante de las dos mutaciones estudiadas. Las conclusiones que de este estudio se extraen, resultan de gran importancia a nivel educacional, ya que el consejo dietético en un futuro debería estar supeditado a la determinación de estos polimorfismos, identificando qué individuos podrían beneficiarse más de dietas restrictivas en grasas y colesterol, y cuales no.

Autor: BARTUREN IBARZABAL KARMELE.
Año: 2003.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Resumen: La infección por la bacteria Helicobacter pylori causa invariablemente una reacción inflamatoria que conlleva la infiltración de células mono y polinucleares en la mucosa gástrica. A pesar de la intensidad de la respuesta inmune, la infección en la mayoría de los casos no llega a ser erradicada y conduce a patologías entre las que se encuentra la gastritis crónica, y dentro de ésta, la gastritis crónica atrófica caracterizada por una pérdida irreversible de glándulas y en casos más avanzados, por la sustitución de éstas por tejido metaplásico. En este trabajo se intenta a cabo diferentes estudios: entre ellos, la determinación de diferencias entere frecuencias de alelos del Sistema Mayor de Histocompatibilidad HLA DQA y DQB entre pacientes de gastritis crónica atrófica y un grupo control si atrofia por medio de técnicas de PCR-SSP; la evaluación de patrones linfocitarios, entre ellos el perfil Th1/Th2, la expresión de genes de quimiocinas y citocinas proinflamatorias por medio de RT-PCR y el análisis de la clonalidad de las células B presentes en biopsias de antro gástrico de los mismos sujetos por medio de PCR; y por último, el estudio de las posibles diferencias en la expresión de genes de moléculas relacionadas con procesos de apoptosis (también por técnicas de RT-PCR) y su posible implicación en la pérdida de glándulas que acompaña a la atrofia gástrica. El análisis de las frecuencias de alelos del HLA DQA y DQB no arrojó diferencias significativas entre los grupos estudiados, por lo que la variabilidad de estos genes no parece desempeñar un papel relevante en el desarrollo de atrofia gástrica. En cuanto al patrón Th1/Th2, en los casos de atrofia gástrica se halló una frecuencia elevada de expresión de citocinas como IL-12, IL-2 e IFN-y, lo que indica la presencia de células presentadoras de antígeno y un pat´ron Th1. También fueron elevadas las frecuencias de expresión de IL-8 en los casos de atrofia, que llevaría al mayor reclutamiento de neutrófilos. Las células B presentes en las biopsias de anto gástrico en los casos de gastritis crónica atrófica exhibieron un patrón policlonal, de respuesta a múltiples antígenos. Todo esto indica que las células dendríticas y macrófagos, que presentan antígenos a los linfocitos T darían lugar a la diferenciación Th1 y la consiguientes producción de IL-2 e IFN-y, que estimularía la función fagocítica de los macrófagos por medio de la producción de citocinas. Esto podría dar luga a la producción de daño tisular por parte de las citocinas procedentes de macrófagos activados que podría llevar a la desaparición de las glándulas por medio de reacciones de hipersensibilidad retardada crónica. La elevada expresión de genes de moléculas relacionadas con apoptosis bcl-2 y Fas fue similar en casos de atrofia como en controles.

Autor: YARNOZ IRAZABAL M. CONCEPCIÓN.
Año: 2003.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICNA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD PÚBLICA DE NAVARRA.

Resumen: Objetivos: Los objetivos de este estudio fueron valorar la posibilidad de alimentación oral en el postoperatorio inmediato de cirugía colorrectal y evaluar si esta alimentación influía en la morbilidad postoperatoria y en la estancia postoperatorio. Pacientes y métodos: 200 pacientes fueron aleatorizados en dos grupos. En el grupo control, grupo 1, la sonda nasogástrica se mantuvo colocada hasta que se observaron signos de peristaltismo intestinal y la ingesta oral no se inició hasta que no se retiró la sonda. En el grupo estudio, grupo 2, la sonda nasogástrica se retiró nada más terminar la inducción anestésica y la tolerancia oral se inicio el día siguiente de la intervención. Las variables registradas fueron: la presencia de sonda durante los diez primeros días del postoperatorio, la tolerancia a la ingesta oral, la presencia de nauseas y vómitos, la necesidad de recolocar la sonda nasogástrica, la morbilidad asociada y la fecha de la alta hospitalaria. Resultados: No hubo mortalidad en la serie. Los pacientes del grupo 2 no necesitaron la sonda nasogástrica de manera rutinaria, la tasa de colocación fue del 18,5%. El 92,5% de los pacientes del grupo 2 iniciaron la ingesta oral el primer día postoperatorio frente a ningún paciente del grupo 1 (p menor 0,05); estas diferencias se mantuvieron hasta el quito día del postoperatorio. Los pacientes del grupo 2 presentaron más vómitos durante los cuatro primeros días que los del grupo 1. No hubo diferencias en cuanto a la morbilidad. Los pacientes del grupo 2 fueron dados de alta de forma más precoz (estancia hospitalaria grupo 2:12,95 / 4,43; grupo 1: 16,35 / 9,36 p menor 0,05). Conclusiones: Es posible iniciar de forma precoz la alimentación oral en el postoperatorio inmediato de cirugía colorrectal. La alimentación oral precoz no aumenta la morbilidad postoperatoria y permite disminuir la estancia hospitalaria.

Autor: FERNANDEZ DE ARCAYA ROTELLAR ISABEL.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Los péptidos hipotensores adrenomedulina (AM) y el péptido de 20 aminoácidos NH2-terminal de la adrenomedulina (PAMP) derivan del mismo precursor y están ampliamente distribuidos. Demostrado, por técnicas inmunohistoquímicas, que se detectan ampliamente a lo largo del tracto gastrointestinal, nos propusimos investigar si afectaban a las funciones del intestino. La absorción intestinal se midió en ratas Wistar in vivo (absorciones sucesivas tras perfusión de asa de yeyuno) e invitro (acumulación de sustrato en anillos de intestino evertido) y en monocapa de células Caco 2. La expresión del cotransportador SGLT1 en la membrana de borde en cepilllo se verificó mediante Western blot y ulterior densitometría. También se midió la actividad enzimática de las disacaridasas y de la Na+, K+ ATPasa y la motilidad de intestino de rata se registró en baño de órganos. Los resultados demuestran que los péptidos derivados de la adrenomedulina AM y PAMP regulan la absorción intestinal en rata. Actúan sobre el contransportador luminal SGLT1 y son efectivos desde el rango picomolar. El Rpam Pprovoca siempre estimulación, mientras que el efecto de la rAM dpende de la concentración (inhibitorio a bajas, 10 -12M, y estimulatorio a mas altas, 10 -8M). Los efectos de los dos péptidos no son aditivos. La acción del rPAMP y la del rAM a 10 -8M está mediada por incremento del AMPc, con ulterior aumento de la expresión de SGLT1 en la membrana apical de los enterocitos. En cambio, los resultados con 10 -12M de rAM reclaman la mediación de otro segundo mensajero con efecto inhibidor sobre la absorción de azúcares, sin la implicación de la PKC. Ninguno de los péptidos afecta la actividad disacaridásica ni la Na+, K+ ATPasa, mientras que provocan un efecto contráctil en el intestino.

Autor: URUÑUELA BRIÑÓN ARÁNZAZU .
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: DPTO. FISIOLOGÍA Y FARMACOLOGÍA.

Resumen: La pancreatitis aguda (PA) es una enfermedad inflamatoria del páncreas asociada fundamentalmente al consumo abusivo de alcohol y a la presencia de cálculos procedentes del tracto biliar. Sin embargo, no se conocen con claridad los mecanismos implicados en su fisiopatología. En nuestro trabajo hemos estudiado el desarrollo de la PA inducida por obstrucción bilio-pancreática en la rata, analizando por citometría de flujo a diferentes estadíos de la enfermedad diversos componentes intracelulares que pueden resultar factores patógenicos, como son: contenido enzimático intracelular, concentración de calcio citosólico y producción de radicales libres de oxígeno (RLO), así como ciclo celular y apoptosis de células acinares para conocer el estado trófico del páncreas. También hemos analizado el papel de la colecistoquinina (CCK) en la PA, mediante la administración de un antagonista de la hormona, L364,718. Los estudios de citometría revelaron la existencia de dos poblaciones celulares en el páncreas R1 y R2, que se comportan de forma diferencial ante la PA. La obstrucción bilio-pancreática indujo una concentración intracelular de enzimas desde los estadíos iniciales, debida al bloque secretor característico de la PA. Esta acumulación, junto con el incremento de los niveles citosólicos de calcio, es responsable del inicio de la enfermedad. Hemos demostrado además que las propias células acinares contribuyen al aumento de RLO en el páncreas, que ocasiona un estrés oxidativo responsable del descenso del glutatión pancreático y actúan como mediadores amplificando el daño inducido por la obstrucción. El estudio del ciclo celular y de la apoptosis reveló que tras 48h de obstrucción, el páncreas progresa hacia una situación de atrofia, al no ser reemplazadas las células muertas por apoptosis por otras nuevas. A lo largo de todos estos estudios, la administración del L364,718 empeoró la severidad de la PA, por lo que deducimos que la CCK no juega un papel esencial en el desarrollo de la enfermedad. En la segunda parte de nuestro estudio retiramos la ligadura del conductro bilio-pancreático tras 24h de obstrucción, con el fin de estudiar la capacidad de regeneración del páncreas tras la PA. Comprobamos que la retirada de la obstrucción permite la recuperación de las condiciones homeostáticas intracelulares y una lenta regeneración del páncreas, un proceso en el que la CKK no juega un papel trófico esencial.

Autor: ARTILLO REMBADO M. REYES.
Año: 2002.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: El objetio del estudio es comprobar los efectos que etanol produce sobre el metabolismo del zinc materno y ver si guarda relación con las alteraciones producidas en las crías. Los resultados obtenidos nos muestran que la exposición al etanol durante gestación y lactancia aumetna la absorción de zinc en duodeno. Esto se traduce en cuanto a los niveles del metal en suero, que se debe además también a la disminución de zinc observada en organos y a la disminución de la excreción (heces) del metal. La diferencia nutricional es responsable de las disminución de estos últimos procesos.

Autor: DELGADO VILLA Mª JESÚS.
Año: 2001.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FAC. FARMACIA.

Autor: BARRENETXE HUICI JAIONE.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE FISIOLOGÍA Y NUTRICIÓN.

Resumen: El descubrimiento de la leptina en 1994 y la identificación de sus receptores funcionales en múltiples tejidos periféricos, incluido el intestino, ha hecho que en los últimos años se considere que la leptina podría tener numerosos efectos periféricos además del papel en la regulación del peso corporal y el gasto energético. Estudios preliminares llevado a cabo en el departamento había demostrado mediante técnicas in vitro que la leptina inhibe el transporte intestinal de galactosa en rata. El presente trabajo continúa con esos estudios iniciales en intestino de rata, que se amplían a otras especies como la especie humana y el ratón. En primer lugar se ha determinado, mediante técnicas in vitro, que la leptina también inhibe el transporte intestinal de galactosa en ratón disminuyendo la afinidad del transporte por el azúcar sin modificar el transporte máximo. Por otro lado se ha comprobado el efecto inhibidor de la hormona sobre la captación de alfa-metilglucósido en células intestinales humanas, utilizando como modelo de estudio la línea celular de adenocarcinoma de colon Caco-2. En esta misma línea celular también se ha observado la capacidad de la leptina para regular la actividad proliferativa de estas células epiteliales. Por otra parte, se ha demostrado el papel modulador de la hormona sobre la actividad de las enzimas intestinales sacarasa, maltasa y ATPasa dependiente de Na+/K+ utilizando homogenado intestinal de mucosa de rata. Además, se ha demostrado la implicación de la proteína quinasa C como mediador de la leptina en la inhibición del transporte intestinal de galactosa en rata, mediante técnicas inv itro y bioquímicas (Western blot). Por útlimo, mediante técnicas inmunocitoquímicas de microscopía óptica y electrónica, se ha identificado la presencia del receptor largo de la leptina, OB-Rb, en los enterocitos de rata, ratón y humano. También se ha determinado la presencia de mRNA de dicha isoforma del receptor de leptina en células Caco-2 y biopsias duodenales humanas utilizando el método de detección de mRNA RT-PCR. El conjunto de nuestros datos sugieren que la leptina podría ser considerada como una hormona con capacidad reguladora de distintas funciones intestinales.

Autor: SÁNCHEZ GARCÍA JOSE LUIS.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: La barrera mucosa gastrointestinal, formada por surfactante, moco y epitelio mucoso, separa la luz del tubo digestivo del medio interno. El surfactante, compuesto de fosfolípidos, condiciona propiedades de superficie a la mucosa. Estudios sobre esta barrera se han llevado a cabo en estómago de animales. OBJETIVO Estudiar los fenómenos de superficie en la mucosa del colon humano. MATERIAL Y MÉTODO Muestras de mucosa de colon y recto humano obtenidas de piezas quirúrgicas se han procesado en solución fisiológica modificada (SF), con factor de crecimiento epidérmico (EGF), prostaglandina E2 (PGE2), diclofenaco (45 ug y 90 ug) e indometacina (mismas dosis) determinándose con un goniómetro el ángulo de contacto como medida de la hidrofobicidad. Desde un homogeneizado de mucosa determinamos las proporciones de fosfolípidos. Análisis estadístico: U de Mann-Whitney, análisis de la varianza de Kruskal-Wallis, coeficiente de correlación de Spearman, t de Student y ANOVA. Nivel de significación: 5%. RESULTADOS De 74 pacientes se obtuvieron 134 muestras de mucosa. El 0 en el grupo control fue de 39.52; en el grupo procesado con SF 42.29 (p

Autor: HERMOSA CABALLERO M. ANGELES DE LA.
Año: 2000.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En esta Tesis se ha estudiado el transporte de los monosacáridos D-glucosa, D-galactosa y D-fructosa a través de la membrana apical del epitelio intestinal del yeyuno e íleon, habiéndose utilizado ratas consanguíneas normotensas, de la cepa Wistar-kyoto, y ratas espontáneamente hipertensas(Spontaneously Hypertensive Rats, SHR). La conclusión a la que se llega es la siguiente: Las ratas hipertensas muestran una menor capacidad de transportar monosacáridos a través de la membrana apical del yeyuno e íleon. Esta disminución está relacionada, con alteraciones en la estructura y ultraestructura de dichas membranas apicales y con la disminución en la localización de la proteína SGLT1, sin relacionarse con cambios en la fluidez de membrana.

Autor: RAMIREZ LORCA M. REPOSO.
Año: 2000.
Universidad: SEVILLA .
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En el presente trabajo se han identificado dos acuaporinas en el pollo, que son genes homólogos a AQP4 y AQP5 de mamíferos. La distribución tisular de estas proteínas es similar a la observada en mamiferos. Por otro lado, se han identificado acuaporinas en el tracto gastrointestinal de rata, concretamente AQP3,AQP4 y AQP5, siendo AQP4 la más abundante en el estómago y AQP3 en el intestino delgado y grueso. La distribución de estas acuaporinas en el intestino delgado sugiere que estas proteínas tengan una función importante en el transporte intestinal de agua. AQP3 se ha localizado en la membrana basolateral del epitelio intestinal y puede representar la ruta de salida del agua hacia el capilar de la vellosidad. Por último, se han identificado dos proteínas MIP en los túbulos de Malpighi del insecto Rhodnius prolixus, Rp-MIP con una nueva secuencia y Rp-AQP2 con una secuencia homóloga a AQP2 de mamíferos. Ambas proteínas se localizan a lo largo de todo el túbulo, y probablemente estén asociados con la formación de la orina. Los resultados de la Memoria apoyan el transporte transcelular de agua por el epitelio intestinal de mamíferos y aves y por los túbulos de Malpighi de los insectos.

Autor: MATILLA FERNANDEZ M. BELÉN.
Año: 2000.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA, UNIVERSIDAD DE LEON.

Resumen: Los procesos inflamatorios sistémicos que conducen a daño y disfunción orgáncia son una frecuente complicación tras shock hemorrágico y conducen a una alta mortalidad. La glicina es un aminoácido antiinflamatorio que ha demostrado ejercer protección frente a diferentes procesos patológicos. El objetivo de esta Tesis Doctoral es evaluar los potenciales efectos positivos que una dieta conglicina al 5% ejerciese sobre las alteraciones hepáticas producidas por un shock hemorrágico agudo y severo. Se establecieron tres grupos experimentales: Grupo C (estrés quirúrgico), Grupo S (Shock hemorrágico + dieta estándar) y grupo G (shock hemorrágico + dieta conglicina 5%). Las distitnas dietas se administraron durante 4 días previo al desarrollo del shock hemorrágico. Las ratas anestesiadas fueron sometidos a shock hemorrágico hasta conseguir una presión arterial media de 35-40 mm Hg durante 1 hora y posterior resucitación con el 60% de la sangre extraída y solución Ringer Lactato. Los animales fueron sacrificados a las 20 h por exanguinación. El plasma resultante de la centrifugación de la sángre y el hígado de los diferentes animales se utilizaron para el desarrollo metodológico posterior. Las ratas alimentadas conglicina redujeron significativamente tanto la elevada mortalidad mostrada en el grupo de animales que recibió una dieta estándar, como la elevación de los nivles de transaminasas hepáticas AST yALT y los fenómenos inflamatorios y cecróticos hepáticos. El incremento en la concentración sérica del Factor de Necrosis Tumoral (TNF-a) y del óxido nítrico (NO) provocado por el shock hemorrágico, era suprimido con la administración de glicina con la dieta. La hemorragia provocaba incremento del estrés oxidativo (analizado por la elevación tanto de la concentración de TBARS como de la relación GSSG/GSH). Estos cambios se acompañan de una reducción de las defensas antioxidantes, con disminución en las actividades enzimática SOD, CAT y GPx, de la sobre-expresión de la NOS inducible (iNOS) y de la activación del Factor de Transcripción Nuclear (NF-kB). La inhibición de la actividad de las enximas antioxidantes enlos animlaes sometidos a shock hemorrágico es de carácter post-transcripcional, pues no produce una disminución paralela en la correspondiente expresión génica. La administración de glicina con la dieta,provocó un descenso del estrés oxidativo, reduciendo el incremento de los marcadores de peroxidación lipídica y manteniendo la actividad d elas enximas antioxidantes,redujo la concentración del TNF-a, inhibió la activación del factor nuclear (NF-kB) y previno la sobre-expresión de la iNOS. La dieta conglicina al 5% protege por lo tanto, frente al daño hepático y reduce la mortalidad originada por el shock hemorrágico en la rata. La reducción del estrés oxidativo y de la producción de citoquinas y de óxido nítrico, así como la prevención de la activación de NF-kB pueden desempeñar un papel importane en dichos efectos.La suplementación de la dieta conglicina podría constituir parte de la terapéutica en el fallo multiorgánico inducido por shock hemorrágico.

Autor: MARTINEZ GONZALEZ ISABEL M..
Año: 1999.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA.

Resumen: El intestino delgado juega un papel muy importante en la homeostasisde la glucosa. Numerosos estudios han demostrado que la diabetes tipo 1 influencia los procesos de digestión, absorción y metabolismo intestinal de la glucosa, sin embargo no existen datos sobre efec tos similares en la dibetes tipo 2, Por ello el primer objetivo de la tesis doctoral es desarrollar y caracterizar dos modelos de diabetes experimental tipo 2 (modelos n0-STZ y n5-STZ) en ratas Wistar macho. Para ello se miden las concentraciones plasmáticas de diferentes parámetros de control metabólico (glucosa, insulina, triglicéridos y colesterol total)y en enterocitos aislados se miden las actividades enzimáticas: discaridasas intestinales (sacaras y maltsa), fosfotructoquinasa 1(PFK-1) y se realiza un estudio de captación de glucosa y producción de lactato. El interés del estudio se basa en que el uso de inhibidores de las alfaglucosidasas permite profundizar en los mecanismos fisiológicos y bioquímicos de la digestión y absorción intestinal de glucosa en ratas normales y diabéticas tipo 2. Así el segundo objetivo del trabajo es: estudiar la administración oral, de miglitol (inhibidor de las alfa-glucosidasas, 10 mg/Kg p.c.,21 días) sobre los parámetros biquímicos detallados anteriormente y parámetros de control metabólico (peroso corporal, ingestión de agua y de comida) e investigar el efecto de este fámaco sobre la captación de glucosa, producción de lactato y sobre las actividades detalladas en el objetivo 1 en enterocitos aislados tras el periódo de tratamiento. Las conclusiones del trabajo de investigación son las siguientes: 1 los modelos de diabetes experimental n0-STZ y n5-STZ son unos modelos adecuados para la realización de estudios sobre la diabetes mellitus tipo 2.2. El intestino delgado sufre modificaciones como un aumento de las actividades discaridasa intestinales y una diminución estadíusticamente significativa en la actividad PFK-1 medida en enterocitos aislados de ratas dibéticas n0-STZ y n5-STZ con respecto a los observados en ratas normales.3. La administraciónoral de miglitol, reduce los nivels de glucemia, si afectar los niveles de insulina plasmática en ningún modelo de diabetes experimental utilizado por lo tanto, mejora el estado metabólico de las ratas diabéticas n0-STZ y n5-STZ y de una forma más sginificativa en el modelo n0-STZ.4. Sobre el intestino, la administración vía oral del miglitol produce: una disminución de las actividades disacaridasa y recuperación de la actividad PFK-1 en enterocitos aislados de ratas dibéticas n0-STZ y una tendencia a la disminución de las actividades disacridasas y a la recuperación de la PFK-1 en el modelo n5-STZ, con respectro a las actividades medidas en enterocitos de las ratas diabéticas tipo 2, que no fuern sometidas al tratamiento con miglitol.

Autor: VILLARES GARCIA CARMEN.
Año: 1999.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FACULTAD VETERINARIA.UNIVERSIDAD DE LEON.

Resumen: La identificación y caracterización de sustancias naturales con actividad hipocolesteremiante tienen gran revelancia en nuestra sociedad en la que se detecta una persistente progresión de hipercolesterolemia. Las B-ciclodextrinas, son oligosacáridos cíclicos solubles en agua y con una cavidad hidrofóbica capaz de albergar compuestos hidrofóbicos y vehiculizados en soluciones acuosas. El objetivo del presente estudio fue cuantificar la posible acción hipolesterolémica de la administración de distintas dosis de B-ciclodextrina-reducción que la acumulación hepática y sérica de colesterol-, y explicar, en su caso, los mecanismos bioquímicos de este efecto. Las conclusiones fueron:1-La dieta que contiene el oligosacárico cíclico indujo un decrecimiento de los niveles de fosfolípidos y triglicéridos plasmáticos acompañado de menores niveles de VLDL. 2- Se produjo una disminución de la relación colesterol libre/esterificado en hígado. 3- La dieta hipercolesterolémica causó un decrecimiento en la síntesis hepática de colesterol, marcada por una actividad de la enzima HMG-CoA reductasa hepática, que no fue revertido por la acción de B-ciclodextrina. 4.-La B-ciclodextrina indujo incremento de la vía catabólica, medida por la actividad 7 -hidroxilasa hepática de modo dosis dependiente. 5.-Las dietas ricas en ciclodextrina producen una disminución de la recirculación hepática de ácidos biliares mediante el arrastre a heces unido al oligosacárido no hidrolizado. Los ácidos biliares parecen afectar directamente a la 7 -hidroxilasa, más que mediante la supresión primaria de la HMG-CoA reductosa, sin que se pueda descartar la inducción de otras vías catabólicas a ácidos biliares como las 27 hidroxilasa mitocondrial. 6.- Finalmente la B- ciclodextrina indujo aumento significativo de las transaminasa hepáticas de un modo dosis dependiente. Igualmente, los estudios histológicos mostraron signos evidentes de daño hepático, con aumento de la fibrosis, inflamación y necrosis.

Autor: GARCIA BENITO MONICA.
Año: 1999.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE SALAMANCA DEP. BIOQUIMICA.

Resumen: Hemos analizado los efectos del óxido nítrico sobre la secreción exocrina pancreática. Nuestros resultados demuestran que el NO no tiene un efecto secretor directo sobre las células acinares ni sobre las ductulares, ni tampoco media las acciones secretores de agentes como la CCK(sobre las células acinares) o la forkolina(sobre las células ductulares). Además analizamos el efecto del NO en la ruta de señalización intracelular que desencadena la fosforilación de proteínas de las placas de adhesión focal en acinos pancreáticos mediante la técnica de Western blotting. Nuestros resultados muestran que el NO estimula la fosforilación de p125FAK y paxilina en acinos pancreáticos a través de la activación de la guanilil ciclasa y la síntesis de GMPc. Además comprobamos que el calcio intracelular no es imprescindible en el proceso de fosforilación de estas proteínas tras la estimulación con NO. La CCK estimula la síntesis de NO y activa la guanilil ciclasa soluble. Hemos comprobado que el efecto de la CCK sobre la foforilación de p125FAK y paxilina está mediado, al menos en parte, por el sistema N /GMPc. Ni el NO ni el GMPc intervienen en la fosforilación de p125FAK y paxilin estimulada por CCK en un paso posterior a la activación de la PKC. El incremento en los niveles citosólicos de calcio activa la NOS,generando NO que estimula la fosforilación de p125FAK y paxilina a través de un mecanismo dependiente de GMPc.