CITOGENETICA ANIMAL

Autor: FRANCO NÚÑEZ SONIA.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA (CNB-CSIC) Y CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIONES ONCOLÓGICAS (CNIO).

Resumen: En las células de mamífero, el telómero protege los extremos de los cromosomas y permite la replicación del DNA sin pérdida de secuencias codificantes. La disfunción telomérica se asocia a inestabilidad genética, envejecimiento prematuro y, en determinados contextos, cáncer. En ausencia de telomerasa, la transcriptasa reversa que elonga el telómero, éste se acorta con cada división celular. Los ratones deficientes en telomerasas (terc-/-) con telómeros críticamente cortos muestran los siguientes fenotípos en el sistema cardiovascular: A,- Déficit angiogénico severo in vivo (en respuesta a implantes de Matrigel o a implantes tumorales). B,- Enlentecimiento del desarrollo tumoral como consecuencia de este déficit vascular. C,- Protección frente a la arteriosclerosis, debido al déficit proliferativo en las células vasculares e immunes. D,- Disminución de la capacidad regenerativa del corazón adulto. Las proteínas Ku86 y DNA-PKcs, dos componentes de la vía de reparación del ADN por unión terminal no homóloga (NHEJ), forman parte de la cromatina telomérica. El estudio comparativo de las colonias de ratón Terc-/-/Ku-/- y Terc-/-/DNA-PKcs-/- ha demostrado que: A,- Ku86 es un regulador negativo de la longuitud telomérica. B,- DNA-PKcs interacciona funcionalmente con la telomerasa, ya que, en ausencia de ésta, el déficit de DNA-PKcs acelera el acortamiento telomérico. C,- Las fusiones entre extremos cromosómicos que han perdido las repeticiones teloméricas están mediadas por la vía de unión terminal no homóloga (NHEJ), ya que se rescatan en ausencia de Ku86 ó DNA-PKcs. D,- Ku86 y DNA-PKcs se encuentran upstream de p53 en la señalización de la disfunción telomérica, ya que la apoptosis inducida por telómeros cortos se rescata en ausencia de Ku86 ó DNA-PKcs. El perfil transcripcional (arrays de oligonucleótidos) de las células Terc-/-, Ku86-/- y Terc-/-/Ku86-/- no difiere significativamente a nivel cualitativo. En los tres genotipos, se observa una respuesta global a estrés, de mayor intensidad en las células Terc-/- / Ku86-/-.

Autor: ROBLES RODRÍGUEZ FRANCISCA.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DPTO. DE GENÉTICA, FACULTAD DE CIENCIAS - UNIV. DE GRANADA.

Resumen: Los esturiones (Familia Acipenseridae) y los peces espátula (Familia Polyodontidae) se encuadran dentro del Orden Acipenseriformes, que se distribuyen exclusivamente en el hemisferio Norte. Consideramos fósiles vivientes, en la actualidad las poblaciones existentes de estos peces se encuentran en continua regresión hasta el punto de ser consideradas especies en peligro de extinción. Constituyen un grupo de especies muy interesantes desde el punto de vista ecológico, evolutivo y comercial. Pero es en el nivel genético y molecular donde encontramos las características más peculiares que lo convierten en un interesante material de estudio. Una de esas características es baja tasa evolutiva que presentan diversas regiones, codificadoreas y no-codificadoras, el genoma de estos peces, encontrando además, en éstas últimas, una forma evolutiva poco frecuente en este tipo de secuencias, como es la ausencia de evolución concertada. En este trabajo, se ha llevado a cabo el análisis de tres familias de secuencias repetidas nucleares, la familia de ADN satélite HindIII y PstI y las secuencias espaciadoras de los genes ribosómicos 5S, en catorce especies de este orden, determinando que la ausencia de evolución concertada es la norma general que siguen las secuencias repetidas en el genoma de los esturiones. Se han analizado las posibles causas y factores que influyen en la ausencia de evolución concertada, tanto fallos inherentes a los propios mecanismos moleculares implicados en la homogeneización de secuencias, como a fenómenos de hibridación, poliploidización, así como la actuación de la selección natural. Las secuencias repetidas, debido a que evolucionan a un ritmo muy superior al de otras fracciones del genoma eucariota y siguen una pauta evolutiva conocida como evolución concertada, constituyen un excelente marcador filogenético y taxonómico cuando se trata de analizar las relaciones existentes entre especies emparentadas. Con la particularidad que caracteriza a las secuencias analizadas en esta memoria, hemos analizado las relaciones filogenéticas entre las especies de esturión hasta donde ha sido posible. Así, nuestros datos sostienen que la especie H.huso podría incluirse dentro del género Acipenser, ya que no tiene identidad suficiente para ser considerada un género independiente. Econtramos también la asociación cladística, clado A.sturio-A.oxyrinchus, clado Scaphirhynchus clado Atlántico y clado Pacífico, de acuerdo a consideraciones filogenéticas y biogeográficas descritas por otros autores. También hemos estudiado la utilidad de estas secuencias nucleares, en comparación con secuencias mitocondriales, como marcadores taxonómicos. Así, hemos tratado de aclarar el status específico al que pertenecen los ejemplares de esturión conservados en diferentes museos, y que fueron capturados en el Mediterráneo occidental, haciendo especial énfasis en los esturiones capturados en el Guadalquivir. Se llega a la conclusión de que los ejemplares EBD8173 y EBD8401 se corresponden con la especie. A.naccarii para todos los marcadores moleculares y el origen híbrido del ejemplar EBD8174, ya que se corresponde con la especie A. naccarii para los marcadores nucleares y con A.sturio para los mitocondriales. Estos datos revelan además que las especies de esturión autóctonas de la Península Ibérica fueron A.sturio y A.naccarii, y que esta última especie no es endémica del Mar Adriático.

Autor: FREIRE ÁLVAREZ M. RUTH.
Año: 2001.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se llevó a cabo la caracterización molecular de la unidad de repetición del ADNr 5S y de la región ITS en las especies de berberecho C.edule, C.glaucum y C.lamarcki, y en las de mejillón M.galloprovincialis, M.edulis y M.trossulus. También se realizó la localización cromosómica del ADNr 5S y del ADNr 18S-28S en uno de los berberechos, C.edule y del ADNr 5S en M.galloprovincialis. El tamaño de la unidad de repetición del ADNr 5S en los berberechos varió entre 539-561 pb de las que 120 pb se asignaron al gen. En los mejillones, se distinguen dos tipos de unidades (alfa y beta) definidas por la longitud y secuencia de la región espaciadora. El tamaño de las secuencias alfa varió entre 257-262 pb y el de las beta entre 749-779 pb, asignándose en ambos casos 119 pb al gen 5S. Todas las especies se caractrizan por mostrar un cierto grado de variacion intraindividual, identificándose dos tipos de unidades (A y B) en C.glaucum y C.lamarchi y dos subtipos de secuencias beta (beta1 y beta2) en M.edulis. La variación se detecta mayoritariamente en la región espaciadora. Atendiendo a los parámetros de divergencia y árboles filogenéticos inferidos, C.edule es la especie más divergente, y los tipos A y B de C.glaucum y C.lamarcki secuenicas parálogas originadas en el ancestro de ambos berberechos. En los mejillones, las secuencias alfa indican que M.edulis y M.galloprovincialis son las especies más estrechamente relacionadas, mientras que las secuencias beta parecen reflejar la persistencia de un amplio polimorfismo ancestral. La localización cromosómica del ADNr 5S en C.edule es el telómero del brazo largo de cinco pares cromosónicos, mientras que la del ADNr 18S-28S es el brazo corto de un par heteromórfico. En M.galloprovincialis, el empleo de sondas específicas mostró que las secuencias alfa y beta comparten al menos un locus, pero la existencia de un locus con secuencias beta hace suponer que ambas se originaron por separado. La región ITS de los berberechos abarca 762-783 pb, y la de los mejillones 942-966 pb. También se detectó un cierto grado de variación intraindividual, principalmente en los espaciadores, pero de menor grado que la observada en el ADNr 5S. El análisis de divergencia y relaciones filogenéticas de las secuencias ITS en berberechos indica que C.edule es la especie más divergente y C.glancum y C.lamarcki las más estrechamente relacionadas, estimándose un tiempo de divergencia de 7,5 m.a., en el primer caso y de 3 m.a., en el segundo. En los mejillones, la región ITS presenta un número insuficiente de caracteres informativos, lo cual podría estar relacionado con fenómenos de introgresión. Por otra parte, se evaluó el potencial de las secuencias analizadas para aportar marcadores moleculares especie-específicos. Las enzimas EcoRV y HaeIII revelan RFLPs de la unidad de repetición del ADNr 5S válidos para la distinción de C.edule y C.glaucum-C.lamarcki. En el ITS, una prueba de PCR basada en el uso de cebadores reversos especie-específicos conduce igualmente a diferenciar C.edule de C.glaucum-C.lamarcki. En los mejillones, no se llegó a reconocer marcadores especie-específicos, debido a que no se detectó toda la variabilidad existente o a las particularidades de los mejillones europeos.

Autor: DELGADO VILLAR SONIA GUADALUPE.
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE MICROBIOLOGIA BIOQUIMICA.

Resumen: La bioquimica de la replicación del DNA se conoce bastante bien en algunos virus y procariotas,cuyos genomas tienen origenes de replicación unicos y bien definidos. Los organimos con genomas mayores requieren un gran numero de origenes de replicación que se activen de forma coordinada una vez por ciclo celular. En varios de los sistemas que se han estdiado se ha visto que existe una relación entre replicación y transcripción, ya que mutaciones en sitios de unión,para factores de transcripción afectan al mismo tiempo a la replicacion del DNA y a la transcripcion de los genes. Los ORIs de mamiferos no se han caracterizado con tanto detalle, y la relación entre replicacion y transcripcion se basa principalmente en la correlación entre replicación temprana y actividad transcripcional para un gran numero de genes. Los promotores de aproximadamente el 50% de todos los genes de mamiferos estan asociados con islas CpG, regiones de en torno a 1 kb, que difieren del resto del genoma por ser ricas en G+C(65%) y estar libres de metilación. Además, frecuentemente contienen multiples sitios de unión para factores de transcripción y una conformación abierta de la cromatina. En contraste, el resto del genoma es en comparación pobre en G+C (40% por termino medio) y está fuertemente metilado en CpG. Con nuestro trabajo hemos demostrado que el conjunto de promotores que constituyen las islas CpG esta asociado con origenes de replicacion realizados sugieren que la sintesis de Dna comienza en la región 5´delas islas CpG, con una fase de iniciación y una fase de elongación, y la liberación ocasional de cadenas nacientes de pequeño tamaño. Este trabajo representa una contribución muy significativa al campo de la replicación del DNA, y a que extiende a las celulas animales a la posible relación funcional entre la replicación del DNA y la transcripción de los genes que ya se ha decrito en otros sistemas. Por otra parte, el funcionamiento de las isalas CpG como origenes de replicacion puede explicar las propiedades que difirencian a estas regiones del riesgo del genoma, lo que tabien es una aportacion importante para entender el patrón de metilación de los vertebrados.

Autor: CASTRO ALBERTO JAIME.
Año: 1995.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNDAMENTAL (AREA DE GENETICA) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MARINA Y ACUICULTURA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN CARACTERIZADO LOS POLIMORFISMOS DE LAS REGIONES ORGANIZADORAS NUCLEOLARES EN 29 POBLACIONES NATURALES DE SALMO TRUTTA DE LA COMUNIDAD GALLEGA Y EN TRES STOCKS DE REPOBLACION, DESDE UNA PERSPECTIVA CITOGENETICA Y MOLECULAR. LOS RESULTADOS OBTENIDOS HAN DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE UNA IMPORTANTE VARIACION DE TAMAÑO EN EL PRINCIPAL ORGANIZADOR NUCLEOLAR DE ESTA ESPECIE, COMO CONSECUENCIA DE DIFERENCIAS EN EL NUMERO DE GENES RIBOSOMICOS QUE CONTIENEN. HEMOS DETECTADO, IGUALMENTE, LA EXISTENCIA DE UNA GRAN VARIABILIDAD PARA EL NUMERO DE REGIONES NOR PRESENTES EN ESTA ESPECIE COMO CONSECUENCIA DE UN PROCESO DISPERSIVO PUNTUAL Y LIMITADO GEOGRAFICAMENTE, QUE HA PROVOCADO LA APARICION DE 19 NUEVAS POSICIONES NO DESCRITAS CON ANTERIORIDAD. ESTAS REGIONES, ESENCIALMENTE TELOMERICAS, HAN DEMOSTRADO ESTAR CONSTITUIDAS POR GENES RIBOSOMICOS Y SUPONEN UN AUMENTO DE MAS DE CINCO VECES EN EL NUMERO DE GENES RIBOSOMICOS CON RESPECTO A EJEMPLARES ESTANDAR. MEDIANTE UN ANALISIS MOLECULAR DE LOS GENES ADNR HEMOS DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE IMPORTANTES DIFERENCIAS EN EL TAMAÑO DEL IGS COMO CONSECUENCIA DE LA VARIACION EN EL NUMERO DE SUBUNIDADES CONTENIDAS EN EL INTERIOR DE ESTOS ESPACIADORES. LOS POLIMORFISMOS ESTUDIADOS RESULTAN INTERESANTES MARCADORES GENETICOS EN ESTA ESPECIE.

Autor: ESCODA VALERO M. CANDELAS.
Año: 1993.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: PRODUCCION ANIMAL PROGRAMA DE DOCTORADO: PRODUCCION DE ANIMALES MONOGASTRICOS Y RUMIANTES:.

Resumen: UN ESTUDIO REALIZADO A 202 ANIMALES DE LA RAZA CAPRINA MURCIANO-GRANADINA PERMITIO IDENTIFICAR UNA FUSION CENTRICA EN UNA FAMILIA DE ANIMALES DESCENDIENTES DE UN MACHO PORTADOR. LOS CROMOSOMAS IMPLICADOS EN ESTA FUSION FUERON IDENTIFICADOS MEDIANTE BANDEO C. EPG. G. R CON LOS CROMOSOMAS 7 Y 26. ASIMISMO SE PUDO IDENTIFICAR EN ALGUNOS DESCENDIENTES UNA FUSION CENTROMERO-TELOMERO IDENTIFICANDO SUS CROMOSOMAS CON LOS NUMEROS 20 Y 25. POSTERIORMENTE REALIZARON ESTUDIOS DE FERTILIDAD, FECUNDIDAD Y PROLIFICIDAD A UN GRUPO DE 7 MACHOS, ENTRE LOS CUALES SE ENCONTRABAN DOS CON FUSION CENTRICA EN HETEROCIGOSIS. EN UNO DE LOS MACHOS FUSIONADOS SE PUDO ESTUDIAR LA TRASMISION DE LA FUSION SOBRE SU DESCENDENCIA. DEL ESTUDIO DE LOS MISMOS, SE DEDUCE LA IMPORTANCIA DE LA FUSION CENTRICA, PUESTO QUE AL COMPARAR LOS DATOS DE LOS ANIMALES FUSIONADOS CON LOS DE CARIOTIPO NORMAL, SE PUEDE OBSERVAR VARIACIONES DE DICHOS PARAMETROS EN LOS ANIMALES PORTADORES DE UNA FUSION CENTRICA.

Autor: PETEIRO CARTELLE FRANCISCO JAVIER.
Año: 1986.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CATEDRA DE PATOLOGIA GENERAL Y PROPEDEUTICA CLINICA.

Resumen: LA EXPOSICION DE MERISTEMOS DE ALLIUM DURANTE PERIODOS COMPRENDIDOS ENTRE 30 MINUTOS Y 7 HORAS A CAMPOS MAGNETICOS DE 0.045 T Y 0.25 T (GENERADOS POR ELECTROIMANES Y MEDIDOS POR EFECTOS HALL) SE ACOMPAÑO DE ALTERACIONES CINETICAS REPRODUCIBLES (AUMENTO EN LAS PROPORCIONES DE CELULAS MITOTICAS EN PROFASE Y/O METAFASE CON DISMINUCION EN LAS PROPORCIONES DE ANAFASES/TELOFASES UN LIGERO AUMENTO EN LA TASA DE NACIMIENTO CELULAR SIN CAMBIOS SIGNIFICATIVOS DEL INDICE MITOTICO) INTERPRETABLES COMO UN ACORTAMIENTO DE LA SEGUNDA MITAD DE LA MITOSIS Y ATRIBUIBLES A LA INTERACCION DEL CAMPO MAGNETICO CON LA DINAMICA MICROTUBULAR. SE OBSERVARON LIGEROS PERO SIGNIFICATIVOS AUMENTOS EN LAS PROPORCIONES DE PUENTES ANAFASICOS Y DE FIGURAS MITOTICAS APOLARES. TRAS EXPOSICION DE LINFOCITOS A UN CAMPO MAGNETICO DE 0.045 A 0.125 T PREVIAMENTE A SU SIEMBRA EN MEDIOS DE CULTIVO CONTENIENDO FITOHEMAGLUTININA A O CON POSTERIORIDAD A ELLA DURANTE TODO EL TIEMPO DE CULTIVO (48 A 96 HORAS) NOHUBO MODIFICACIONES SIGNIFICATIVAS EN EL INDICE MITOTICO NI EN LAS PROPORCIONES DE CELULAS HABIENDO SUFRIDO UNO DOS O TRES CICLOS DE REPLICACION DE DNA A LO LARGO DE 72 A 96 HORAS DE CULTIVO (VALORADAS MEDIANTE TINCION DIFERENCIAL DE CROMATIDAS PREVIA INCUBACION EN PRESENCIA DE BROMODEOXIURIDINA).TAMPOCO SE HALLARON ALTERACIONES SIGNIFICATIVAS EN LAS PROPORCIONES DE DICENTRICOS FRAGMENTOS POLIPLOIDIAS NI DE INTERCAMBIOS DE CROMATIDAS (SCE).