GENETICA MOLECULAR

Autor: VAL RANERA GEMA.
Año: 2004.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS. UNIVERSIDAD DE LEON.

Resumen: El estudio de la translocación de proteínas a través de la membrana citoplasmática bacteriana es una de las áreas más dinámicas de la investigación biológica actual. Aparte de su interés básico en la profundización del conocimiento de la fisiologái celular existen interesantes palicaciones tecnológicas encaminadas a mejorar los rendimientos de obtención de roteínas recombinantes de interés farmacológico. Este interés se hace más evidente, si cabe, en el caso de bacterias Gram-positivas, y en especial del género Streptomyces, por su notable capacidad para secretar proteínas al medio extracelular. las especies de este género bacteriano han sido ampliamente utilizadas por la industria farmacéutica en la producción de metabolitos secundarios, principalemente antibióticos, por lo que sus requerimientos a nivel de fermentaciones industriales son bien conocidos. Aproximadamente el 30% de las proteínas sintetizadas en una bacteria son translocadas y se localizan en le periplasma o en el exterior celular, asociadas o no a la membrana. La mayor parte de ellas alcanzan su destino final siguiendo la ruta de secreción general, integrada por los factores Sec (secreción Sec-dependiente), cuyo estudio ha sido llevado a cabo principalmente en la bacteria gram-negativa Escherichia coli. En E. coli las proteínas secretadas se acumulan normalemente en el espacio periplásmico, y son liberadas por shock osmótico o por tratamiento con cloroformo. Estos tratamientos pueden inactivas las proteínas y permiten la salida de material intracelular no deseable. En las bacterias gram-positivas las proteínas son secretadas directamente al medio de cultivo separándose muy fácilmente de las células productoras. Los componentes centrales del sistema de secreción de bacterias Gram-positivas y Gram-negativas muestran un elevado grado de conservación, esto sugiere una función y un modo de actuar similar. De cualquier modo, existen varias diferencias, la más significativa, es la ausencia de una chaperona específica implicada en dirigir a las preproteínas hacia la translocasa. Streptomyces posee unos sitemas ARP Tat muy desarrollados respecto a los de E. coli. El primero parece implicado en la translocación psot-traducional además de la co-traducional, mientras que el segundo transloca proteínas plegadas e incluso asociadas a su cofactor. De hecho, en B. subtilis, se ha sugerido que la secreción vía Sec es directa o indirectamente dependiente de SRP. En este trabajo se ha desarrollado un sistema de translocación in vitro que abre una nueva área de estudio en la translocación de preproteínas, y que puede ser una importante herramienta para identificar nuevos componentes implicados en la maquinaria de exportación en S. lividans. Los componentes esenciales del canal de translocación existente en la membrana (SecY/E/G) fueron sobreexpresados en S. lividans permitiendo observar una estimulación en la secreción de algunas proteínas al medio extracelular. Asimismo se obtuvo un mutante secA condicional letal a temperaturas iguales o superiores a 39ºC que tiene afectada la capacidad de secreción de proteínas Sec-dependientes a temperatura permisiva. También se ha observado cómo la proteína SecA interacciona con las chaperonas moleculares GroEL 1 y GroEL2, siendo la interacción con GroEL2 específica en los últimos 22 aminoácidos de SecA, región que parece ser esencial para su funcionalidad.

Autor: NARANJO BRICEÑO LEOPOLDO ANTONIO.
Año: 2003.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y AMBIENTALES.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y AMBIENTALES.

Resumen: El ácido pipecólico es un componente y un precursor de diversos metabolitos secundarios con importantes actividades farmacológicas. En primer lugar, en el presente trabajo de investigación, se demostró que Penicillium chrysogenum es capaz de u tilizar ácido pipecólico para complementar los requermientos nutricionales de varios mutantes auxótrofos de lisina (lys-). La clonación del gen que codifica la sacaropina reductasa en P. chrysogenum (denominado gen lys7), así como la caracterización bioquímica y molecular de mutantes auxótrofos de lisina que eran incapaces de utilizar ácido pipecólico para complementar dicha auxotrofia (lys-/Pip-), permitió determinar que en este hongo filamentoso, el ácido pipecólico se convierte en lisina a través de su conversión en ácido piperidín-6-carboxílico (P6C) por acción de la pipecolato oxidasa, el P6C (que es la forma ciclada de alfa-aminoadipato gamma-semialdehído) se convierte en sacaropina y lisina a través de dos reacciones enzimáticas consecutivas catalizadas por la sacaropina reductasa y la sacaropina deshidrogenasa respectivamente. En segundo lugar, se demostró que Penicillium crhysogenum es capaz de sintetizar ácido pipecólico. El gen lys7 que codifica la sacaropina reductasa en P. crhysogenum fue interrumpido por la técnica de la doble recombinación. La cepa interrumpida (denominada P. chrysogenum SR1-) carece de actividad sacaropina reductasa, la cual, se recupera después de la transformación de dicho mutante con el gen lys7 intacto presente en un plásmido de replicación autonóma. la cepa P. chrysogenum SR1- es auxótrofa de lisina y acumula P6C. Cuando el mutante P. chrysogenum SR1- se crece con L-lisina como única fuente de nitrógeno y se añade ácido D,L-alfa-aminoadípico al medio de cultivo, se acumulaban intracelularmente niveles altos de ácido pipecólico. La comparación de la cepa SR1- con una cepainterrumpida en el gen lys2 que codifica la alfa-aminoadipato reductasa, demostró que P. chrysogenum sintetiza ácido pipecólico a partir del ácido alfa-aminoadípico y no a partir del catabolismo de lisina. En Penicillium chrysogenum la ruta de biosíntesis de ácido alfa-aminoadípico es muy activa. Por lo tanto, este mutante podría ser utilizado para producir metabolitos secundarios que contengan ácido pipecólico. Producto de la presente Tesis Doctoral se han publicado sendos artículos en revistas internacionales de algo índice de impacto: - Naranjo, L.; Martín de Valmaseda, E.; Casqueiro, J.; Ullán, R.V.; Lamas, M.; Bañuelos, O.; and Martin, J.F. Inactivatio of lys7 gene, encoding saccharopine reductase in Penicillium chrysogenum, leads to accumulatio of the secondary metabolite precursors piperideine-6-carboxylic acid and pipecolic acid form alfa-aminoadipic acid, Applied and Environmental Microbiology, (2004). Vol. 70, No. 2. p. 1031-1039. - Naranjo, L.; Martín de Valmaseda, E.; Bañuelos, O.; López, P.; Riaño, J.; Casqueiro, J.; Martín, J.F. The converion of pipecolic acid into lysine in Penicillium chrysogenum requires pipecolate oxidase and saccharopine reductase: Characterizatio of the lys7 gene endonding saccharopine reductase. Journal of Bacteriology. 2001 Dec; 183 (24):7165-72.

Autor: DOMINGUEZ GIMENEZ PALOMA.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUTO DE PARASITOLOGÍA Y BIOMEDICINA LÓPEZ-NEYRA (CSIC-GRANADA).

Resumen: Durante el desarrollo de los organismos multiceluares tienen lugar diversos procesos entre los que cabe destacar aquellos que implican un cambio en la forma de las células, ya que pueden afectar a la funcionalidad del tejido adulto. Para que estos cambios tengan lugar de forma correcta, las células deben reorganizar su citoesqueleto y regular sus sistemas de adhesión celular. Las integrinas son receptores de superficie celular que median adhesión a la matriz extracelular y al mismo tiempo pueden contactar con el interior celular. En esta tesis hemos analizado la implicación de las integrinas en los cambios de forma celular que tienen lugar durante el desarrollo. El proceso de formación del ala es uno de los cambios de forma más dramáticos del desarrollo de Drosophila melanogaster, en que una monocapa epitelial se pliega sobre sí misma para dar la bicapa que es el ala adulta. Estudios previos han demostrado que durante le proceso de formación del ala, la eliminación de la matriz extracelular basal en el primordio de ala conduce un cambio en la forma del epitelio que acelera el desarrollo del ala. Sin embargo, se desconocía cómo cambios en el exterior celular podían ser transmitidos al interior. En esta tesis doctoral se demuestra por primera vez que las integrinas, por su habilidad de mediar adhesión a la matriz y al mismo tiempo contactar con proteínas del citoplasma celular, transmiten cambios del exterior al interior celular durante el desarrollo. Además, demostramos que las integrinas regulan los cambios de forma celular necesarios para que la morfogénesis de ala tenga lugar correctamente. Asimismo, proponemos un sistema de regulación dinámica de la actividad de la Integrinas durante la morfogénesis del ala, a través de la rutura de Ras/Raf. Otro tipo de cambio de forma celular implica la migración de una o varias células. Las integrinas están implicadas en la migración de diversos sistemas epiteliales tanto in vitro como in vivo. Sin embargo, se desconoce sí las integrinas participan en la migración de otros tipos celulares. En esta tesis se demuestra que las integrinas son necesarias, durante el desarrollo embrionario de Drosophila melanogaster, para la migración de las células del mesodermo visceral caudal, de origen mesodermal. La integrinas son necesarias para que las células adquieran la forma mesenquimal migratoria, así como para que se produzca la migración correctamente. Lo que nos ha llevado a proponer un sistema de migración independiente del tipo celular, en que la integrina PS1 se requiera en las células migratorias y la integrina PS2 en el sustrato de migración. Por otr aparte, hemos demostrado la participación de la RhoGTPasas en la migración de las células del mesodermo visceral caudal. Esta actividad RhoGTPasa parece estar relacionada con los sistemas de adhesión regulados por la familia de las Caderinas. Lo que nos lleva a proponer un sistema migratorio en que los distintos sistemas de adhesión cooperen para favorecer la motilidad celular. Los resultados de esta tesis amplian las posibles funciones de la integrinas en los organismos multicelulares, pudiendo ser consideradas como dianas potenciales para su aplicación en el tratamiento de enfermedades y patologías.

Autor: CATALA RODRÍGUEZ RAFAEL.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: INIA.

Resumen: Muchas plantas de climas templados son capaces de aumentar su tolerancia a las temperaturas bajas tras un periodo de exposición a temperaturas de 10 a 0ºC, un proceso denominaod aclimatación que conlleva una serie de cambios tanto a nivel fisiológico como bioquímico, controlados en su mayor parte por modificaciones en la expresión génica. En los últimos años, se ha realizado un gran esfuerzo en la identificación y caracterización de las rutas de señalización y de los intermediarios que regulan este proceso. Sin embargo, todavía existen un gran número de incógnitas, desde la percepción hasta la regulación de la expresión génica. En esta tesis nos planteamos estudiar algunos de los puntos que quedan por comprender tanto al nivel de la regulación de expresión génica, como al nivel de la regulación hormonal o de la transmisión de la señal. Al nivel de la regulación de la expresión génica, los elementos CRT/DRE y CR1 son las únicas secuencias de regulación en cis implicadas en la respuesta a temperaturas bajas descritas hasta el momento. Un gran número de genes cuya expresión se induvce durante el proceso de aclimatación no incluye ninguna de estas cajas en su secuencia promotora, indicando que aún se desconocen la mayoría de los mecanismos responsables de la regulación de la expresión génica por frío. En esta tesis se ha identificado una nueva secuencia en el promotor de CAB1 implicada en esta respuesta, denominado caja Z. La regulación a través de esta caja parece estar mediada por la unión de una(s) proteína(s) nuclear, que actuaría como regulador negativo. Al nivel de la regulación hormonal, el papel del ABA en la respuesta de aclimatación es claro. Parece, sin embargo, que otras hormonas, como el etileno, también podrían tener una función importante en la regulación de este proceso. En este trabajo se ha caracterizado el papel del etileno en la regulación del proceso de aclimatación. Lo que ha revelado que a 4ºC se induce un incremento en la acumulación de etileno en Arabidopsis, que parece ser necesario para el completo desarrollo de su tolerancia a la congelación inducia por la aclimatación. Además, se ha podido determinar que el papel de esta hormona esta mediado por cambios en la regulación de la expresión génica. Finalmente, al nivel de la transmisión de la señal, el aumento en los niveles citoplasmáticos de Ca2+ en respueta a las temperaturas bajas sugiere que este catión es un segundo mensajero en dicha respuesta. El papel de los mecanismos de retirada de Ca2+ del citoplasma en el proceso de aclimatación no está todavía caracterizado. En esta tesis se ha determinado que la expresión de CAX1, un gen de Arabidopsis que codifica un intercambiador Ca2+/H+, es inducida por frío de manera transitoria en hojas. El análisis funcional de esta transportador ha revelado que actúa como regulador negativo de la inducción por frío de los genes CBF/DREB1 y de sus correspondientes genes diana, y por consiguiente del proceso de aclimatación a las temperaturas bjas. CAX1 mediaría esta regulación proporcionando el adecuado control de los niveles de Ca2+ citoplasmático.

Autor: PLAJA RUSTEIN ALBERTO.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACION CONTINUADA.

Resumen: Se ha analizado la frecuencia, localización y posible significado de los dobleces presentes en los cromosomas mitóticos obtenidos con técnicas citogenéticas convencionales. No se trata de un fenómeno aleatorio y los dobleces cromosómicos pueden ser remanentes de una disposición del cromosoma interfásico, facilitando la implicación de ciertas bandas frente a otras en reorganizaciones cromosómicas tales como los fragmentos isoacéntricos y contribuyendo a la elevada frecuencia de deleciones intersticiales e inversiones duplicaciones isodicéntricas de la región 15q11q13. Se han analizado 2262 dobleces centroméricos y 2718 dobleces no centroméricos de cultivos de sangre periférica pertenecientes a 11 individuos de ambos sexos. LA frecuencia de los dobleces centroméricos se correlaciona con la longitud relativa de los cromosomas y se han identificado al menos 69 bandas no centroméricas que se doblan con una frecuencia superior a la eserada por azar. El doblez no centromérico más frecuente en las metafases obtenidas a partir de cultivos de linfocitos está situado en 15q11q13, una región bien conocida por su inestabilidad y cuya deleción es una causa frecuente de los síndromes de Prader Willi y Angelman. Estudios de FISH y alta resolución demuestran que el doblez se cirunscribe a la banda 15q12. El análisis de metafases obtenidas a partir de líquido amniótico (867 dobleces centroméricos y 1118 no centroméricos) y cultivos de vellosidad corial (737 dobleces centroméricos y 874 no centroméricos) confirman los hallazgos en linfocitos con dos notables discrepancias: en líquido amniótico y vellosidad corial, el doblez 15q11q13, es mucho menos frecuente y los dobleces en Zq21 y Xq22 son mucho más frecuentes, especialmente en las hembras. Un estudio adicional en 100 metafases consecutivas de sangre, líquido amniótico y vellosidad corial confirman estas diferencias entre tejidos. Nuestra hipótesis es que los cromosomas se doblan de forma invariable en el núcleo interfásico, pero que las regiones de replicación más tardía tienen menos tiempo para rectificar los dobleces antes de entrar en metafase. Exiten varias líneas de evidencia que apoyan la hipótesis de que los dobleces en los cromosomas metafásicos son un remanente de la organización del cromosoma interfásico: * En el cromosoma 12 hay una correspondencia casi perfecta entre nuestros datos y los dobleces asumidos en el modelo de disposición de este cromosoma en el núcleo interfásico G0 (G1). * En análisis de los dobleces en los cromosomas 5 y 12 en metafases de alta resolución sugiere que los dobleces únicamente se producen en las bandas G de tinción oscuras, lo cual se adapta bien a los modelos actuales de distribución de la heterocromatina (periferia nuclear) y eucromatina (interior nuclear). * Las anomalías cromosómicas son suecesos que se producen en el núcleo interfásico. Una determinada disposición de los cromosomas interfásicos debería favorecer ciertos puntos de rotura frente a otros. Ocho de los nueve puntos de rotura no aleatorios identificados en la formación de una aberración inestable denominda isoacéntrico, coinciden con puntos de doblez. Hemos propuesto un modelo de formación de este tipo de figura basado en la presencia de un doblez. Una de las consecuencias de este modelo es la formación de dos tipos de isoacéntricos; con duplicación y sin duplicación del punto de rotura. Se ha podido confirmar la presencia de ambos tipos de isoacéntricos en cultivos de sangre periférica. El significado de los dobleces en los cromosomas interfásicos es incierto. Proponemos un modelo en que los cromosomas interfásicos plegados en zigzag se unen por sus bandas G de tinción oscura a la envoltura nuclerar permitiendo la rápida salida del RNA recién sintetizado al exterior nuclear.

Autor: ACHKOR HAKIMA.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BARCELONA.

Resumen: El formaldehído es un agente citotóxico que provoca mutaciones in el DNA, ha sido clasificado como un carcinógeno. Se produce durante el metabolismo celular normal, pero su concentración aumenta con el estrés oxidativo. El formaldehído es un polucionante atmosférico (especialmente de interiores) y de aguas residuales. El principal sistema enzimático que metaboliza el formaldehído en los organismos eucariotas es mediante la formaldehído deshidrogenasa dependiente de glutatión. La formaldeído dehidrogenasa dependiente de glutatión, también, llamada ADH clase III, en presencia del NAD+ cataliza la oxidación de formaldehído. El sustrato real del enzima el S-hidroximetilglutatión que se forma de la reacción espontánea entre el formaldehído y el glutatión. La FALDH se encuentra universalmente distribuida en todos los organismos, tanto en el reino vegetal como animal. Ambas propiedades del enzima, distribución ubicua y alta conservación de secuencia, sugieren que la función principal de este enzima es el metabolismo de formaldehído tanto endógeno como exógeno. Se ha estudiado el efecto de sobreexpresión del gen de la FALDH en dos organismos Sacaromyces cervisae y arabidopsis thaliana. La sobreexpresión en un vector multicopias del gen FALDH en levadura confiere a ésta la capacidad de resistir a altas concentración de formaldehído (2 mM). También, se han obtenido varias plantas transgénicas que sobrexpresan la FALDH de Arabidopsis. El estudio de la capacidad de la diferentes líneas transgénicas de metablizador concentraciones altas de formaldehído exógeno (5 mM y 2 mM), mostró un incremento del 20% y 30% con respecto a plantas de Arbidopsis sin transformar. Aunque la sobrexpresión del gen, sin embargo, no impide que la exposición a formaldehído (5mM) durante 24 H tendrá un efecto citotóxico, que produce la destrucción de cloroplasto. De otra parte, la inmunolocalización de la FALDH en células de tabaco BY2, mostró que se encuentra en el citoplasma como en el núcleo. Su distribución es similar a la de la alta-tubulina en las diferentes etapas del ciclo celular.

Autor: CASALS LÓPEZ FERRAN.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El objetivo de este trabajo es estimar la frecuencia con la que se fijan y cómo se producen las inversiones paracéntricas (las que no incluyen el centrómetro) en el género Drosophila. Se ha analizado la organización molecular de tres regiones cromosómicas de D.melanogaster en dos especies del grupo repleta, que divergió de D.melanogaster hace 40-62 millones de años. Las diferentes regiones analizadas no presentan diferencias significativas en el número de puntos de rotura que contienen, indicando que los puntos de rotura se reparten homogéneamente por todo el cromosoma. Extrapolando el comportamiento de las regiones analizadas al resto del cromosoma se obtiene que el número mínimo de inversiones fijadas entre D.melanogaster y las dos especies del grupo repleta estudiadas (D.repleta y D.buzzatii) es de 88+-14 inversiones (0,71 inversiones fijadas por millón de años). Estos resultados muestran que la tasa de evolución cromosómica en Drosophila es superior a la de la mayoría de organismos analizados y manifiestan la gran flexibilidad de su genoma. Posteriormente se ha estudiado cuál es el mecanismo que origina las inversiones en las poblaciones naturales. Concretamente, se han caracterizado los puntos de rotura de la inversión polimórfica 2q7 de D.buzzatti. Se ha demostrado que esta inversión se ha originado por recombinación ectópica entre dos copias del elemento transponible de tipo Foldback Galileo, y que los puntos de rotura de la inversión muestran una gran inestabilidad genética. Esta inestabilidad puede ser debida a la presencia de elementos del tipo Foldback. Estos elementos tienen la capacidad de producir estructuras secundarias, que se ha demostrado que pueden originar diferentes tipos de reordenaciones cromosómicas. Finalmente se ha estudiado la distribución cromosómica de los elementos transponibles en D.buzzatti. Los elementos trasnponibles tienden a localizarse en las regiones de baja recombinación, como las regiones pericentroméricas o las regiones incluidas en las inversiones cromosómicas. Se han localizado los elementos BuT5 y Galileo exactamente en las bandas donde se habían cartografiado los puntos de rotura de las inversiones 2z3 i 4s. Finalmente, se ha descrito una cierta tendencia de los elementos transponibles a localizarse en las bandas donde se han cartografiado los puntos de rotura de otras inversiones descritas en otras especies del complejo buzzatti, así como a coincidir diferentes elementos en las mismas bandas cromosómicas. Este resultado sugiere que la reducción de la recombinación no seria el único factor que provoca su acumulación en los puntos de rotura de las inversiones.

Autor: REY PÉREZ ALFONSO DEL.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DOCTORADO Y FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Se conoce bastatne bien la existencia en E.coli de un sistema multigénico que respodne a las lesiones en el DNA. Se trata del sistema SOS y no es exlusivo de esta especie bacteriana. El objetivo de esta tesis ha sido ahondar en el concomiento de la regulación del sistema SOS dentro del grupo alfa de las proteobacterias.Para conseguirlo hemos estudiado la regulación de los genes recA y uvrA. De Paracoccus denitrificans y Rhodobactr capsulatus. Aislamos la totalidad del gen recA de P. Dentrificans y la región operadora y extremo 5' de la región codificante de su gen uvrA. Para asegurarnos de que el gen uvrA formaba parte del sistema SOS comprobamos su capacidad de inducción frente a lesiones en el DNA. El estudio de las regiones operadoras de los genes uvrA y recA nos ha permitido identificar el motivo GTTCN7GTTC como la caja SOS de P. Dentrificans. La presencia de este motivo es necesaria para la unión de un represor, análogo al LexA de E. Coli. Así mismo, también estudiamos los genes recA y uvrA de R. Capsulatus. En el caso del fen uvrA comprobamos su inducibilidad frente a lesiones en el DNa. El estudio de la región promotora de estos dos genes permitió comprobar que la caja SOS de R. Cpasulatus responde al motivo GTTCN7GTTC. Los resultados obtenidos en este trabajo, así como los estudios previos realizados en nuestro laboratorio sobre el sistema SOS de R. Sphaeroides y de la familia de ls Rhizobiaceae nos permiten afirmar que el motivo GTTCYYYTTTTGTTC es la secuencia consenso para la caja SOS del grupo alfa de las Proteabacterias.Este es el primer caso en el que se describe una caja SOS cuya secuencia no es palindrómica.

Autor: FARES RIAÑO MARIO ALI.
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTA DE CIENCIAS BIOLOGICAS. UNIVERSITAT DE VALENCIA.

Resumen: La presente tesis versa acerca de la evolución de bacterias endosimbionte de insectos. Los resultados fundamentales de la tesis se resumen en los siguientes puntos: El análisis exhaustivo de las restricciones evolutivas utilizando el gen de choque termico GroEL, aislado a partir de diversas bacterias endosimbiones de insectos, demuestra que GroEL ha evolucionado bajo selección positiva. Aplicando este analisis a otras bacterias endosimbiontes de insectos, demuestra que este resultado es general en bacterias endosimbiontes de insectos y que no todos los genes evolucionan bajo las mismas restricciones selectivas. Los datos experimentales de eficacia, demuestran que GroEL puede haber tamponado el efecto de acumulación de mutaciones deletéreas en bacterias endosimbiontes, permitiendo de esta forma mantener la endosimbiosis durante tiempos geológicamente largos.

Autor: DURÁN VINAGRE M. YOLANDA.
Año: 2001.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LEÓN.

Resumen: La lenteja (Lens culinaris Medik.) es una leguminosa autógama y diploide (2n = 14) que posee un genoma relativamente grande (aprox. 4 063 Mpb por contenido haploide), de gran valor nutritivo para el consumo humano por el alto contenido proteico y de fibra de sus semillas. Lens culinaris es una especie que posee comparativamente poca variabilidad genética; esta es la causa de que hasta el momento los mapas genéticos en esta especie sean todavía incompletos, incluyendo un escaso número de marcadores, principalmente isoenzimas y RFLPs, que cubren una porción relativamente reducida del genoma. El desarrollo reciente y de una gran variedad de nuevos marcadores moleculares como ISSRs, SSRs, y en especial RAPDs y AFLPs, está proporcionando la base sobre la que construir mapas genéticos muchos más detallados, incluso en organismos de viabilidad reducida como es el caso de Lens culinaris. Se han utilizado 22 accesiones (13 accesiones cultivadas, 2 accesiones ssp orientalis, 3 accesione sL. Odemensis, 1 accesión L.nigricans, L.ervoides, L.tomentosus y L.lamottei) con objeto de estimar distancias genéticas intra e interespecífica en el género Lens y establecer las relaciones genéticas entre sus especies, usando marcadores RAPD, ISSR e SSR, y determinar un número suficiente de marcadores para generar un mapa genético de ligamiento. Se realizó una genoteca enriquecida para el microsatélite (GA)n, obteniendo 5 marcadores SSR polimórficos. El establecimiento de las relaciones genéticas entre las distintas muestras de lenteja, se llevo a cabo mediante análisis de agrupamiento siguiendo el método de Fitch y Margoliash (1967), se elaboraron dendrogramas no enraizados agrupando las muestras por parecido genético. El análisis de agrupamiento se realizó por separado para marcadores RAPD e ISSR y posteriormente, por el alto coeficiente de correlación entre las dos matrices de similitud obtenidas con ambos tipos de marcadores, se realizó un análisis de agrupamiento conjunto de marcadores RAPD e ISSR. No se realizó dendrograma para datos de marcadores SSR, debido al bajo número de loci utilizados. Los dendrogramas diferencian claramente las especies definidas del género, apareciendo agrupadas las muestras de cada una de ellas. Las líneas o variedades de lenteja cultivada españolas presentan unas distancias genéticas muy pequeñas y el grupo de L.c.ssp.culinaris incluye también L.c.spp.orientalis y L.tomentosus. El resto de las especies del género forman grupos separados, apareciendo juntas las tres accesiones de L.odemensis, demostrando su similitud genética. El mapa genético de Lens culinaris Medik., obtenido, está basado en marcadores RAPD, ISSR, AFLP y SSR, y es el mapa más extenso disponible hasta la fecha. El mapa de ligamiento obtenido presenta 10 grupos de ligamiento, que incluyen 161 marcadores, cubriendo una longitud de 2.172,4 cM del genoma de lenteja, con una distancia media entre marcadores de 15,87 cM.

Autor: FERNÁNDEZ MARTÍNEZ MARTA.
Año: 2001.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE LEÓN.

Resumen: Las leguminosas representan una de las fuentes más ricas y asequibles de proteínas para la alimentación humana, siendo la lenteja (Lens culinaris, Medik.) uno de los cultivos tradicionales en España. Una de las herramientas útiles para detectar variabilidad es a nivel de los genes del DNA ribosomal. Cada unidad repetida del DNAr contiene las regiones codificantes, los corespondientes espaciadores internos y un espaciador intergénico (IGS) cuya longitud varía entre 1 y 13 kpb, y que se debe a la presencia de un número variable de copias de una o más familias de secuencias repetidas. A pesar de estas diferencias el papel funcional de IGS se ha conservado siendo una unidad reguladora compleja con secuencias relacionadas con las transcripción el pre-procesamiento del rRNA. Por su parte los genes ribosomales 5S están formados por una región codificadora altamente conservada de 120 bp y un espaciador no transcrito cuya longitud varia entre 80 y 900 bp. En los genomas de plantas, los genes que codifican para ARNr de 5S no se encuentran ligados a los genes de ARNr de 18S, 5.8S y 25S siendo posible visualizar su localización cromosómica mediante FISH (hibridación in situ por fluorescencia). Los objetivos desarrollados en este trabajo han sido varios, en primer lugar se estimó la variabilidad en longitud intra e interespecífica del espaciador intergénico del DNA ribosomal 25S-18S en el género Lens, y se determinó la secuencia completa del espaciador intergénico del DNA ribosomal 25S-18S de Lens culinaris culinaris variedad Verdina, estableciendose su estructura a nivel molecular y localizando secuencias reguladoras. Por otro lado se estudió la variabilidad en longitud intra e interespecífica del espaciador del DNA ribosomal 5S en el género Lens, y se determinó la secuencia de alguno de los espaciadores ribosomales 5S de Lens culinaris culinaris y de la especie silvestre Lens culinaris orientalis, localizando también secuencias reguladoras. Con la secuencia de los espaciadores ribosamales 25S-18S se establecieron relaciones fitogenéticas entre Lens culinaris culinaris y otras especies de leguminosas y por último se localizó cromosómicamente los loci ribosomales Nor y 5S en la especie cultivada y varias especies silvestres del género Lens.

Autor: SÁNCHEZ-FONT M. FRANCISCA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA - UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: El síndrome de down (SD) consecuencia de la trisomia del cromosoma 21, es la principal causa de retraso mental en humanos. El fenotipo SD es muy complejo y variable. La causa principal de esta variabilidad es el elevado número de genes implicados en esta patología, no solo los situados en el cromosoma 21, sino también aquellos genes situados en otros cromosomas pero regulados directa o indirectamente por genes del cromosoma 21. En esta tesis se ha analizado la expresión diferencial en cerebro fetal down. Mediante hibridación substractiva supresora (SSH) se ha identificado el gen PRDX2 (peroxiredoxina2) como un gen putativamente subexpresado en individuos down y el gen FABP7 (proteína de unión de ácidos grasos en el cerebro) como un gen putativamente sobreexpresado en individuos down. Con el objetivo de analizar el efecto de la subexpresión de PRDX2 a nivel celular se han trasfectado células de neurobastoma con un cDNA antisentido de PRDX2. La subexpresión de este gen en cultivos celulares ha resultado en una disminución de la variabilidad celular y un incremento en la muerte celular programada o apoptosis via caspasa-3, en condiciones basales y en presencia de diversos agentes citotoxicos oxidativos. Estos resultados apuntan hacia la posible implicación de PRDX2 en el estrés oxidativo neuronal asociado al fenotipo SD. Por otro lado, la sobrexpresión de FABP7 en cerebros fetales down ha podido ser relacionada con el efecto de dosi del gen PKNOX1 (localizado en el cromosoma 21), consecuencia directa de la trisomia del cromosoma 21. En esta tesis se ha demostrado la capacidad de la proteína PKNOX1 de interacionar con el dominio PBX/POU de la región promotora de FABP7 y incrementar su transcripción. La importancia de FABP7 en la formación del sistema radial de fibras gliales, necesario para la correcta migración de las neuronas inmaduras hacia capas corticales del cerebro, podría ser indicativa de la posible implicación de FABP7 en determinadas anomalías anatómicas del cerebro down, como por ejemplo la disminución de la densidad celular o la alteración en número de conexiones sinapticas. En conjunto todos estos resultados apuntan hacia la importancia de genes no situados en el cromosoma 21 en el fenotipo final down.

Autor: GALBIL MARTINEZ M. LUISA.
Año: 2000.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE GENETICA, FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: El gen carD de Myxococcus xanthus participa en la activación de dos promotores inducibles por la luz, los promotores, de los genes carQRS y crtI. CarD tambien es necesario para la activación de varios genes especificos del desarrollo. El extremo carboxilo de la proteina CarD contiene un dominio de union al DNA descrito previamente sólo en organismos eucarióticos, como es el caso de la proteina HMGA humana, que se encuentra asociada a la cromatina. La unión de HMGA a sus sitios especificos en el DNA regula la activación de distintos promotores, participando en una gran variedad de procesos biologicos. Esto llevó a pensar que carD determina una proteina que actúa sobre un amplio espectro de genes, participando posiblemente en otros procesos de M.xanthus, aparte de la carotenogenesis y el desarrollo multicelular. En este trabajo, se han analizado 613 promotores vegetativos de M.xanthus con el objeto de identificar nuevos promotores cuya actividad se ve afectada por la mutación carD. Se encontraron así seis promotores que vieron afectada su actividad de forma significativa, escogiendose cuatro para su estudio posterior. La clonación y secuenciación de los genes correspondientes ha revelado que, entre ellos, se encuentra una proteina de bombeo de toxinas, un receptor de membrana dependiente de TonB, siendo el caso más interesante un factor transcripcional global con caracteristicas arquitectonicas, la proteina Lrp. Tambien se ha estudiado la relación funcional de CarD con otras proteinas reguladoras de la carotenogenesis que participan con el en la activación de un promotor de la carotenogenesis, CarQ e IhfA, con respectoa la activación de los promotores identificados en el trabajo. Por último, con el fin de identificar productos génicos relacionados funcionalmente con CarD, se ha realizado una busqueda de mutaciones supresoras de mutaciones carC. Para dicha busqueda se ha utilizado un promotor muy afectado por la mutacion carD y posteriormente se ha analizado el efecto de las distintas mutaciones supresoras sobre varios promotores dependientes de CarD.

Autor: MACIAN ROVIRA M. CARMEN.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE CC. BIOLOGICAS-UNIVERSITAT DE VALENCIA.

Resumen: En esta Tesis Doctoral se presenta un estudio taxonomico y filogenetico de bacterias Gram-negativas, aeorbias y anaerobias facultativas, aisladas en trabajos previos a partir de ostra cultivada y agua del Mar Mediterraneo. Las cepas que se habian identificado previamente como pertencientes al genero vibrio(las especies Vibrio splendidus, V. Harveyi y V.tubiashii) se caracterizaron a nivel intraespecifico utilizando el ribotipado como tecnica de tipificacion molecular. Las cepas de identidad deconocida se caracterizaron mediante secuenciacion del ARNr 16S y 23S, un amplio estudio fenotipico y la aplicación de tecnicas moleculares como hibridacion ADN-ADN, determinacion del contenido en G+C del ADN y analisis de acidos grasos celulares, lo que ha permitido la descripcion, y propuesta de descripcion de nuevos taxones en las clases a y y de las Proteobacteria, asi como en el phylum Bacteroidetes. La incorporacion de nuevas secuencias de ARNr en la base de datos de la Universidad Tecnica de Munich, utilizando el programa informatico ARB, y el analisis global de todas ellas, ha puesto de manifiesto la existencia de grupos bacterianos cuya situacion taxonomica actual es erronea a la luz de nuestros analisis filogeneticos. Dichos estudios han permitido situar filogeneticamente todas las cepas bacterianas utiizadas en el estudio, lo que ha dado lugar a la descripcion de 1 nuevo genero con una especie, Thalassomonas viridans. Y 2 nuevas especies del genero Vibrio, V.lentus y V.agarivorans, todos ellos pertenecientes a la clase y de las Proteobacteria. Ademas, se ha propuesto la descripcion de 1 nueva especie, Gelidibacter algens, en el phylum Bacteroides, y de 1 nuevo genero con 2 nuevas especies, Thalassobacter marinus y T. Oligotrophus en la a-Proteobacteria.

Autor: MATEU BRULL EMILIA.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAT DE CIENCIES BIOLOGIQUES.

Resumen: INTRODUCCION:El retinoblastoma es el tumor intraocular más frencuente en niños. El origen molecular del mismo son mutaciones en ambos alelos del gen RB1, localizado en el brazo largo del cromosoma 13 humano. La enfermedad se da con carácter hereditario en el 40% de los casos y con carácter no hereditario en el 60% restante de los pacientes como de sus hermanos y otros familiares, para un mejor pronóstico de la enfermedad y la realización de un consejo genético adecuado. OBJETIVOS:Dado que en algunos casos no es posible la realización del diagnóstico diferencial entre retinoblastomas hereditarios y no hereditarios mediante estudios clínicos, y la importancia de un diagnóstico temprano para la preservación de la visión de los ojos afectados y la supervivencia del paciente, los objetivos de este trabajo fueron el desarrollo de un protocolo de estudio molecular en el retinoblastoma y la valoración de su aplicabilidad en la práctica clínica. RESULTADOS: En la serie de 69 familias analizadas 5 eran casos de retinoblastoma familiar, 14 presentaban un individuo afectado de retinoblastoma bilateral esporádico, y 40 presentaban un individuo afectado de retino blastoma unilateral esporádico. El análisis molecular en estos pacientes permitió detectar la mutación responsable del tumos a nivel constitucional, y por tanto determinar el carácter hereditario de la enfermedad en el 80% de los casos familiares, en el 57% de los casos bilaterales esporádicos y en el 7,5% de los casos unilaterales esporádicos. La detección de las mutaciones unicamente en tejido tumoral permitió determinar el carácter no hereditario del tumor en otros cuatro pacientes con retinoblastoma unilateral esporádico. En los casos bilaterales esporádicos(teóricamente hereditarios) de los que se dispuso de muestra tumoral y no se detectaron mutaciones en el gen RB1, se determinó también la no implicación de p53 en el desarrollo tumoral. El análisis de haplotipos y de las frecuencias alélicas de los marcadores polimórficos utilizados en el estudio en la población sana y en la población enferma permitió determinar la no existencia de desequilibrio de ligamiento en el retinoblastoma, y que los marcadores más informativos son Rbi2 y RB1.20. CONCLUSIONES:Es posible llevar a cabo estudios moleculares de la enfermedad a nivel asistencial con el fin de proporcionar un adecuado consejo genético y diagnóstico prenatal en familias afectadas de retinoblastoma, especialmente en casos familiares y bilaterales esporádicos.

Autor: ROBLES RAMOS PEDRO.
Año: 1999.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de realización: -UNIVERSIDAD DE ALICANTE -UNIVERSIDAD MIGUEL HERANDEZ.

Resumen: Se sometieron a escrutinio 23.445 semillas M2, procedentes de 2,931 lineas parentales M1, aislando 904 mutantes con alteraciones en la morfologia de la hoja, de los que 523 resultaron fertiles. Se estudiaron 28 estirpes que presentaron penetrancia completa y expresividad poco variable y fueron agrupadas en 5 clases fenotipicas para su analisis de complementacion, del que se concluyo que correspondian a 8 genes. Cuatro de estos grupos de complementacion estan integrados por nuevos alelos de genes previamente descritos: AS1, ICU1,ICU8 e ICU15. Los mutantes aislados y analizados geneticamente en esta Tesis manifiestan diferentes anomalias en el desarrollo foliar. Las estirpes asymetric leaves presentan hojas lobuladas (as1) o fuertemente indetadas (as3), asi como una alteracion en la simetria bilateral del organo, probablemente como consecuencia de la aparicion ectopica de ciertos elementos de patron tales como algunos nervios primarios supernumerarios. El fenotipo de estos mutantes podria deberse a la desrepresion ectopica en la hoja de alguna gen KNOX. El limbo de las estirpes que hemos llamado incurvata esta recurvado hacia el haz. Autores anteriores han demostrado que este fenotipo esta asociado a la expresion ectopica en lahoja de algunos genes de identidad de organo florar(en los mutantes clf), o la anticipacion de la fase vegetativa adulta(en los mutanteshst). Nuestras observaciones permiten considerar plausible esta ultima hipotesis para explicar el fenotipo de las estirpes icu8 e icu15, que serian presuntamente portadoras de mutaciones heterocronicas. Las hojas de los mutantes denticulata estudiados en esta Tesis muestran alteraciones muy severas en la estructura y la distribucion espacial de las celulas de sus tejidos internos, lo que podra deberse a una perdida parcial de la dorsoventralidad del mesfilo. Las estirpes exigua muestran hojas cuyas celulas son mas pequeñas que las de su ancestro silvestre, que manifiestan necrosis prematura, lo que podria corresponder a la activacion constitutiva de alguna respuesta de defensa frente a patogenos. La estirpe ultracurvata2 presenta hojas enrolladas en espiral hacia el enves, cuya expansion proximodistal es incompleta, un fenotipo que puede deberse a la alteracion de algun control polar de la division o la elongacion celular en la direccion longitudinal del crecimiento. Hemos estudiado las posibles interacciones entre las mutaciones obtenidas en esta Tesis, encontrando sinergia solo en su caso, el de as1 y den30. El fenotipo del doble mutante sugiere que ambos genes, esten implicados en el establecimiento y/o el mantenimiento de los dominios dorsal y ventral de la hoja. Hemos introducido mejoras significativas en los protocolos de uso comun en Arabidopsis thaliana para el analisis de ligamiento mediante SSLP, que han hecho posible la amplificacion simultanea de 21 microsatelites, en una sola mezcla de reaccion de PCR multiple, utilizando paraello 21 parejas de cebadores. Los microsatelites fueron elegidos en virtud de su posicion en el mapa genetico de Arabidopsis thaliana, y de su grado de polimorismo entre los ecotipos Ler, Col-0 y En-2. Se emplearon para ello tres fluoroforos distintos (HES,TET Y 6-FAM), lo que facilita la discriminacion de moleculas de igual tamaño en aquellos casos en que dos microsatelites diferentes presentan longitudes similares. Los productos de estas PCR multiples, cuyo numero oscila entre 21 y 42, según el genotipo de la planta estudiada, fueron resueltos en un secuenciador automatizado oscila entre 21 y 42, según el genotipo de la planta estudiada, fueron resueltos en un secuenciador automatizado Perkin Elmer ABI Prism 377 y sometidos a analisis de fragmentos mediante el programa GeneScan 2.0. La aproximacion descrita en el parrafo anterior permite realizar analisis de ligamiento a razon de solo un gel por cada gen, empleando 19 plantas de la F2 de un cruzamiento entre una estirpe mutante y un ecotipo distinto de su ancestro silvestre. El procedimiento es particularmente util en proyectos de mutagenesis a gran escala, dado que hace posible establecer la posicion de mapa de un gen en menos de 24 horas tras la obtencion de los correspondientes individuos F2. El desarrollo de un metodo de cartografia de alto rendimiento nos ha permitido determinar la posicion de mapa de 91 genes cuyas mutaciones perturban el desarrollo de la hoja, algo que no hubiera sido posible con los procedimientos convencionales de analisis de ligamiento. Hemos contrastado la fidelidad de nuestro metodo comprobando que nuestras distancias de mapa entre marcadores no difieren significatvamente de las de otros autores.

Autor: RUIZ LORENZO M. FERNANDA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID .
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: La composición de dosis génica es un mecanismo mediante el cual, el producto de los genes ligados a los cromosmas sexuales se encuentran en cantidades similares en machos y hembras, a pesar de que dichos genes se encuentran en dos dosis en el sexo homomórfico y en una dosis en el sexo heteromórfico. Puesto que en Sciara ocellaris (Díptero del Suborden Nematocera) y en Drosophila melanogaster (Díptero de Suborden Branchycera), la compensación de dosis génica se resuelve de manera similar (por hipertranscripción del único cromosoma X de los machos), usamos S, ocellaris como modelo experimental para estudiar como los mecanismos de la compensación de dosis génica han evolucionado en estas dos especies de Dípteros. Con este fin se inició el aislamiento y la caracterización de los genes de S. ocellaris que son homólogos a los genes de la compensación de dosis génica de D. melanogaster. En esta Tesis se documenta el aislamiento y la caracterización del gen de S. ocellaris que es el homólogo al gen maleless (mle) de D. melanogaster. Usando como sonda el eDNA del gen mle de D. melanogaster se ha clonado un fragmento genómico de 10Kb que contiene la unidad completa de transcripción del gen mle de S. ocellaris. El patrón de expresión del gen mle en S. ocellaris es igual que en D. melanogaster, ambos se expresan de forma general en todos los estadíos del desarrollo, en machos y hembras, así como en los testículos y los ovarios de los adultos. El gen mle de S. ocellaris produce un único transcrito de 4.2 Kb que codifica una proteína de 1253 aminoácidos. Las proteínas MLE de S. ocellaris y D. melanogaster se encuentran muy conservadas. La proteína MLE de S. ocellaris no se asocia principalmente al único cromosoma X de los machos, como ocurre en D. melanogaster, sino que se encuentra asociada de manera similar tanto al cromosoma X como a los autosomas de los machos y de las hembras. Esto sugiere que MLE no está involucrada en el proceso de la compensación de dosis génica de S. ocellaris. En esta Tesis se propone que en el linaje filogenético que dió lugar a Drosophila, el gen mle fue reclutado para constituirse en un gen con un papel específico en la compesación dosis génica, mientras que en el linaje filogenético que dió lugar a Sciara, sería una helicasa distinta la que habría sido reclutada para la compensación de dosis génica, y el gen mle desempeñaría una función más general.

Autor: QUESADA PÉREZ VICTOR MANUEL.
Año: 1998.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ALICANTE UNIVERSIDAD DE MIGUEL HERNÁNDEZ .

Resumen: Hemos iniciado una aproximación genética al problema agronómico que representa el estrés abiótico causado por la salinización de las tierras de regadío, eligiendo como objetivo experimental al sistema modelo Arabidopsis thaliana, por su utilidad para el análisis genético y molecular. Hemos intentado el aislamiento de estirpes con capacidad para germinar en presencia de altas concentraciones salinas, tanto de origen natural como obtenidas mediante mutagénesis. Hemos comparado la tolerancia a la salinidad de 102 estirpes silvestres o ecotipos de Arabidopsis tahliana, constando la existencia de grandes diferencias en su capacidad para germinar en medios suplementados con NaCl 250 mN. Esto puede interpretarse en el sentido de que existe variacion continua, lo que sugiere que la variabilidad natural observada está controlada por loci cuantitativos. Hemos llevado a cabo una búsqueda de mutantes de Arabidopsis tahliana con germinación halotolerante, empleando varios fondos genéticos y diferentes procedimientos de mutagénesis, como el tratamiento con metanosulfonato de etilo, el bombardeo con neutrones rápidos y las inseciones del ADN-T de Agrobacterium tumerfaciens. A partir del escrutinio de 675.500 semillas derivadas de mutagénesis, hemos aislado y sometido análisis genético 17 líneas mutantes, presentando todas ellas salvo una, tasas de germinación superiores al 25% en NaCl 250 mM, concentración que inhibe completamente la germinación de las estirpes silvestres. El modo de herencia de su fenotipo mutante es monogénico y recesivo, aunque parece influido por el fondo genético de cada estirpe. Su análisis de complementación indicó que correspondían a 10 mutaciones genuinamente distintas, probablemente hipomorfas o nulas, que fueron asignadas a 5 genes,que hemos denomimado SALOBREÑO (SAÑ). Los resultados de la cartografía de los genes SAÑ indican que no se corresponden con ninguna de las mutaciones previamente descritas cuyo fenotipo incluye alteraciones en la sensibilidad al NaCl. Los mutantes afectados en los genes SAÑ1 a SAÑ4 son tolerantes al estrés iónico que producen sobre la germinación los iones Na+ y Cl-, y al osmótico causado por el manitol. El mutante sañ5 es además resistente al K+ e insensible al ácido abscísico. Nuestros resultados genéticos y moleculares demuestran que sañ5 es un alelonulo del gen ABO4, presentando una delección de un par de bas es que genera un cambio de pauta de lectura que destruye buena parte de la proteína ABI4, incluido el dominio APETALA2 de unión a ADN.

Autor: ARIZA COBOS MANUELA.
Año: 1997.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA FUNCIONAL .

Resumen: Hemos estudiado clínica y molecularmente 30 familias con poliquistosis renal dominante. Mediante marcadores polimórficos identificamos 24 familias con ligamiento al cromosoma 16 (gen PKD1), 5 con ligamiento al cromosoma 4 (gen PKD2), y una con ligamiento negativo a ambos cromosomas. En las 24 familias tipo 1 no hallamos mutaciones en la región 3' no duplicada (específica) del gen PKD1 (análisis SSCP-secuenciación directa, exones 35 a 46). Describimos dos polimorfismos en esta región del gen PKD1. En 4 de las 5 familias tipo 2 hallamos mutaciones diferentes en el gen PKD2, responsables de la enfermedad en estos pacientes. Del análisis clínico de los portadores concluimos que la forma tipo 1 es más severa que la tipo 2, con desarrollo de quistes renales, manifestación de hipertensión arterial y pérdida de la función renal a edad más temprana en los primeros.

Autor: BALDRICH RUBIO EVA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA I MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.

Resumen: El locus white de Drosophila melanogaster es responsable de la coloración de ojos, ocelos y testículos de larvas y adultos. El mutante white-apricot(wa) muestra coloración reducida en estos tres tejidos, a causa de la inserción del retrotransposón copia en el segundo intrón. Aunque la escisión de los retrotransposones es poco frecuente, diversos autores han detectado la aparición de revertientes parciales de wa, tras escisión parcial de copia por recombinación homóloga entre sus dos LTRs. Se discute la posibilidad de que diversos factores estresantes (por ejemplo ambientales) puedan inducir este fenómeno. En el presente trabajo se expone el resultado de la exposición de machos wa a choque térmico y al agente alquilante N-etil-N-Nitrosourea (ENU). Entre los descendientes de los machos tratados se buscaron revertientes parciales o totales, en los que copia se hubiera escindido, con la intención de estudiar el mecanismo molecular de la escisión y su efectos mutagénicos. En ningún caso aparecieron revertientes totales, y los revertientes parciales no se correlacionaron con la pérdida del elemento. Los diversos resultados dejaron de manifiesto la importancia de otros factores a tener en cuenta al evaluar el efecto de un determinado estímulo sobre el genoma. Este es el caso del contexto genético y la actuación de loci modificadores.