GENETICA MOLECULAR DE PLANTAS

Autor: GARCIA ORTIZ MARIA VICTORIA.
Año: 2003.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Los mecanismos de reparación del daño en el ADN y su tolerancia han sido estudiados intensivamente en microorganismos y animales, pero el conocimiento sobre ambos procesos en plantas es muy limitado. El objetivo de esta tesis ha sido identificar y caracterizar genes de Arabidopsis thaliana implicados en la reparación de lesiones en el ADN, así como de genes relacionados con mecanismos de tolerancia al daño. Los resultados obtenidos indican que Arabidopsis thaliana posee un homólogo estructural y funcional de la proteína Nth de Escherichia coli, al que se ha denominado AtNth1. AtNth1 es una ADN glicosilasa/liasa que cataliza la escisión de pirimidinas oxidadas (tales como timinglicol y urea) del ADN. El gen AtNTH1 consta de 11 exones y 10 intrones, y se expresa en un amplio rango de tejidos de la planta. Arabidopsis thaliana posee además un homólogo estructural y funcional de la proteína Ogg1 de Saccharomyces cerevisiae, al que se ha denominado AtOgg1. La purificación y caracterización enzimática de la proteína AtOgg1 ha demostrado que se trata de una 8-oxoguanina ADN glicosilasa/liasa que actúa preferentemente sobre pares 8-oxoG:C in vitro, y que es capaz de contrarrestar in vivo el efecto mutagénico de la 8-oxoG. Por otra parte, Arabidopsis thaliana posee una proteína perteneciente a la familia Y de ADN polimerasas, que se ha denominado AtPolk. AtPolk muestra la arquitectura típica de una proteína de la familia Y, con un dominio polimerasa amino-terminal que contiene cinco regiones altamente conservadas y un dominio carboxi-terminal menos conservado. La actividad enzimática de una forma truncada de la proteína demuestra que el dominio carboxilo de AtPolk limita su actividad polimerasa y su procesividad, pero aumenta su especificidad a la hora de incorporar el nucleótido correcto. La expresión de AtPolk parece estar regulada a distintos niveles. Así, el ARNm del gen AtPOLk sufre un procesamiento alternativo que genera distintos transcritos con diferentes patrones de expresión en los distintos órganos de la planta. Por otra parte, el promotor de AtPOLk es activo en tejidos específicos de la planta y, particularmente, en células que sufren endorreduplicación.

Autor: MIRETE CASTAÑEDA SALVADOR .
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: Las especies del complejo Gibberella fujikuroi, particularmente Fusarium verticillioides, se han estudiado profusamente utilizando distintas metodologías dada su importancia en diversas áreas de la biología. En esta Tesis Doctoral nos hemos centrado principalmente en la región espaciadora intergénica del rDNA (IGS) utilizando la técnica de reacción en cadena de la polimerasa - polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLPs) para detectar la variabilidad a nivel intraespecífico en Fusarium (capítulos 2 y 3). La secuenciación de esta región del rDNA en varias especies de Fusarium sirvió para diseñar cebadores específicos de F.verticillioides y de aislamientos productores y no productores de fumonisinas de esta especie (capítulo 4). La secuencia de la región IGS se ha utilizado también para realizar la filogenia de los aislamientos productores y no productores de fumonisinas de F.verticillioides junto con la secuencia del gen del factor de elongación 1 (EF-1) mediante el análisis "multilocus" (capítulo 5). También se han analizado algunos de los genes relacionados con la biosíntesis de las fumonisinas a nivel de DNA y de su expresión, principalmente el gen fum5 que codifica para una polikétido sintetasa. Por otra parte, se han diseñado cebadores específicos basados en el gen fum5 de las principales especies del complejo G.fujikuroi productoras de fumonisinas para su detección por PCR (capítulo 6). Finalmente, se ha analizado la variabilidad y la estructura primaria de la región IGS en las especies del complejo G.fujikuroi que se caracteriza por dos patrones de repeticiones, uno ausente en otras especies de Fusarium y otro consrvado en el género Fusarium que ha podido surgir de una duplicación (capítulo 7)

Autor: HERAS GUTIÉRREZ AITOR DE LAS.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: El género Fusarium agrupa numerosas especies de hongos filamentosos siendo más de la mitad importantes patógenos de plantas de interés económico. Fusarium oxysporum f.sp.radicis lycopersici (FORL) produce la podredumbre en platas de tomate, enfermedad que indica una gran degradación de la pared celular vegetal por parte del patógeno. Las poligalacturonasas (PGs) son enzimas degradadoras de la pared celular y vegetal y están implicadas en el proceso de colonización de la planta y la producción de síntomas. Por ello el primer objetivo de la tesis fue caracterizar las secuencias genómicas de cuatro genes codificadores de PGs de FORL, dos de ellas con modo de acción "endo" (ENDOPGs) y dos de modo de acción "exo" (EXOPGs), así como las secuencias adyacentes 5' y 3' y realizar un estudio comparativo de las secuencias de aminoácidos y sus estructuras tridimensionales teóricas. Se realizó también un análisis filogenético en base a la comparación de las cuatro PGs de FORL con una muestra de PGs de otros hongos filamentosos y de plantas. También se observó el grado de variabilidad que presentaban las dos EXOPGs en diferentes asilamientos del género Fusarium. Otro objetivo fundamental de esta tesis fue el estudio de la regulación de estos genes. Para ello primero se determinó el número de copias en el que se encontraban los genes de PGs en el genoma de diversas especies de Fusarium y posteriormente se estudió sus patrones de regulación frente a distinas fuentes de carbono en cultivos in vitro. Para determinar la presencia de motivos reguladores se analizaron las regiones promotoras de los cuatro genes de PGs de FORL y se desarrolló un sistema en S.cerevisiae para el análisis funcional de éstas. Por último se utilizó el sistema heterólogo de Pichia pastoris, para la expresión heteróloga de las dos EXOPGs de FORL.

Autor: ORTEGA PASTOR ENCARNACIÓN.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA .
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Resumen: El almendro [Prunus culcis (Mill.) D.A. Webb] tiene un sistema de incompatibilidad flora de tipo gametotífico, el cuál está controlado por un único (denominado S) con múltiples alelos codominantes, que en el estilo se expresan como ribonucleasas. Debido a su autoincompatibilidad, la mayoría de las variedades de almendro requieren de polinización cruzada con otras variedades para producir, asimismo existen algunas combinaciones de variedades interincompatibles. Por todo esto, para la obtención de una buena cosecha es necesaria la plantación de al menos dos variedades intercompatibles con un periodo de floración coincidente. Sin embargo, este tipo de plantaciones de almendro presenta una serie de desventajas para el agricultor, algunas de las cuales podrían evitarse mediante el cultivo monovarietal de una variedad autocompatible. Por ello, la obtención de variedades autocompatibles es un objetivo importante para la mayoría de los programas de mejora genética del almendro del mundo. Tradicionalmente la compatibilidad entre variedades y la autocompatibilidad se han determinado mediante polinizaciones controladas en campo y conteo del número de frutos cuajados. También se ha determinado en laboratorio mediante microscopía de fluorescencia tras autopolinización manual. Boskovic y colaboradores demostraron en 1997 que en lamendro existe una correlación entre los simogramas de ribonucleasas estilares obtenidos mediante isoelectroenfoque y el genotipo S. Paralelamente, se ha desarrollado una técnica basada en la PCR que ha permitido amplificar de forma específica algunos alelos S de almendro. La aplicación de estas técnicas supone a un avance muy importante tanto para el diseño de plantaciones como para la elección de genitores y la selección precoz de individuos autocompatibles. En esta memoria se han estudiado diversos aspectos relacionados con la caracterización, obtención y comportamiento de variedades autocompatibles de almendro. 1,- Comparación de métodos de determinación de la autocompatibilidad: El material vegetal estudiado lo constituyen 74 descendientes del cruzamiento 'R1000' x 'Desmayo Largueta'. En todos los descendientes estudiados se determinó el fenotipo o el genotipo de autocompatibilidad mediante cuatro métodos distintos: Embolsado de ramas, microscopía de fluoresencia, isoelectroenfoque de ribonucleasas estilares y PCR alelo-específica. Los resultados mostraron que: el análisis de ribonucleasas estilares y la PCR son los métodos más fiables; un individuo se puede considerar autocompatible cuando mediante el embolsado de ramas el cuajado de frutos es del 5% o superior o mediante microcopía de fluorescencia presenta al menos dos pistilos con tubos en el ovario. La PCR alelo-específica, a pesar de su elevado coste y complejidad, permite la selección precoz en vivero de individuos autocompatibles, lo que supone un importante ahorro de tiempo para el programa de mejora. El estudio de las ribonucleasas estilares parece el más adecuado para su aplicación en rutina, pero el embolsado debe ser finalmente utilizado para determinar la autofertilidad de las selecciones. 2,- Variabilidad genotípica de la incopatibilidad floral en almendro: Mediante la combinación de las técnicas de isoelectroenfoque y NEPHGE se han identificado 18 nuevas ribonucleasas-S en 28 variedades y 20 selecciones de almendro del Programa de Mejora del CEBAS-CSIC. Esta información junto con la disponible en la bibliografía indica la existencia de 43 alelos-S en variedades almendro de distinto origen. El estudio de estos datos nos ha permitido conocer la distribución geográfica de estos alelos S y la frecuencia con la que aparecen. La aparición de resultados contradictorios entre los distintos estudios ha puesto de manifiesto la necesidad de establecer criterios comunes de determinación del genotipo-S. La información aquí recogida será de gran utilidad para el diseño de estrategias de mejora de esta especie. 3,- Autopolinización versus polinización cruzada: No se observaron diferencias significativas entre la autopolinización y la polinización cruzada de genotipos autocompatibles de almendro respecto al número de tubos polínicos que alcanza el ovario, el porcentaje de ovarios penetrados, el porcentaje de frutos cuajados y las características del fruto estudiadas. Por lo tanto, la autopolinización de las variedades autocompatibles es igual de eficiente que la polinización cruzada, haciendo completamente viable su cultivo en plantación monovarietal, con las enormes ventajas que ello supone. 4,- Autocompatibles homocigóticos versus heterocigóticos: Durante tres años consecutivos se han estudiado 16 caracteres agronómicos en una población de 241 descendientes (129 homocigóticos (SfSf) y 112 heterocigóticos (S1Sf o S3Sf) obtenidos por autofecundación de 34 selecciones de almendro autocompatibles. Además, se ha estudiado el crecimiento de los tubos polínicos en el pistilo y el cuajado de frutos tras la autopolinización manual en 4 descendientes autocompatibles homocigóticos y 4 autocompatibles heterocigóticos. Los resultados obtenidos no mostraron diferencias importantes entre los genotipos autocompatibles homocigóticos y los heterocigóticos respecto a los caracteres estudiados. Ambos genotipos mostraron una escasa productividad, posiblemente consecuencia de su elevado nivel de consanguinidad. Aunque los tubos polínicos de los individuos homocigóticos mostraron un crecimiento más rápido que el de los heterocigóticos tras la autopolinización, a partir de las 72 horas el porcentaje de tuvos en el ovario fue similar en ambos casos. La eficiencia en el cuajado de frutos tras la autopolinización no parece estar relacionada con el genotipo homocigótico o heterocigótico, aunque algunos individuos homocigóticos presentaron problemas en el desarrollo del fruto, probablemente consecuencia de su nivel de consanguinidad. 5,- Estrategias para asegurar la autocompatibilidad en las descendencias: Se ha estudiado la transmisión de la autocompatibilidad en distintas descendencias de almendro obtenidas según tres tipos distintos de cruzamientos diseñados para obtener el 100% de individuos autocompatibles: autofecundación, cruces entre genitores que comparten un alelo autoincompatibles y cruces con individuos autocompatibles homocigóticos. Los resultados indicaron que las tres estrategias de cruzamientos utilizadas aseguran la autocompatibilidad en las descendencias. El análisis de los descendientes de autofecundación puso de manifiesto que aproximadamente la mitad fueron heterocigóticos y la otra mitad homocigóticos. En el caso de cruzamientos entre genitores que comparten un alelo y en los cruces con autocompatibles homocigóticos, la totalidad de los descendientes fueron heterocigóticos. Mientras que en la autofecundación y el cruce compartiendo un alelo tienden a producir consanguinidad y condicionan enormemente la elección de genitores, la utilización de individuos autocompatibles homocigóticos no presenta ninguno de estos inconvenientes, por lo que la consideramos como la más eficiente para asegurar la autocompatiblidad en la descendencia. 6,- Obtención y selección de variedades autocompatibles de almendro: Entre 1995 y 2002, en el Programa de Mejora del Almendro del CEBAS-CSIC han sido creados 4435 descendientes con el objetivo de obtener variedades de floración extra-tardía, o con frutos del tipo "Desmayo Largueta" y "Marcona, autocompatibles en todos los casos. Algunos individuos han sido seleccionados y utilizados como genitores por su floración tardía y su homocigosis para autocompatibilidad, asegurando este carácter en la descendencia. Igualmente han sido obtenidos descendientes que florecen en torno a 15 días después que la variedad Ferragnés, algunos autocompatibles, productivos y de buenas características agronómicas. La evaluación a nivel comercial de estos individuos en zonas con elevado riesgo de heladas permitirá conocer las posibilidades de extender el almendro a zonas del interior actualmente inaccesibles a este cultivo.

Autor: ALVAREZ ORTI MANUEL.
Año: 2002.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: El azafrán es un cultivo tradicional de la zona geográfica de La Mancha, conocido por ser una de las especias más caras del mundo y muy apreciado por sus cualidades colorantes, aromatizantes y sus propiedades medicinales. Es una planta monocotiledónea, triploide, estéril, que se propaga únicamente de forma vegetativa a partir de un órgano subterráneo especializado en la acumulación de reservas, el cormo. Para profundizar en el conocimiento de la fisiología y expresión génica del cormo, se definieron seis estadíos de desarrollo, abarcando el desarrollo completo de este órgano, desde su aparición como yemas en estado latente, hasta su senescencia y muerte. Se analizó la expresión génica en dos de ellos, generando 650 secuencias parciales (ESTs) a partir de dos librerías de ADNc. El patrón de expresión fue diferente en las dos librerías. En la primera, construida a partir de cormos recogidos en el mes de febrero, en un estadío caracterizado por la acumulación de reservas y su engorde (C3), se encontraron un porcentaje mayor de ESTs que codifican para proteínas relacionadas con crecimiento celular, metabolismo proteico, percepción y transducción de señales, defensa frente a patógenos y estrés y metabolismo de carbohidratos. Por el contrario, en la segunda, construida a partir de cormos recogidos en julio, en un estado de dormancia (C4), se encontraron un mayor número de ESTs que codifican para proteínas relacionadas con el transporte. En ambas, un gran porcentaje (36% en C3 y 50% en C4) no mostró similitud significativa con ninguna secuencia de función conocida, poniendo de manifiesto el desconocimiento existente sobre este órgano. Además, se analizó la proteína de reserva mayoritaria, una lectina de unión a mananos. Su expresión es mayor durante los meses de verano previos a la brotación, cuando el cormo permanece durmiente. Se acumula en el cormo hasta la floración y desaparece después de esta, reforzando su papel como proteína de reserva.

Autor: GONZÁLEZ LAMOTHE ROCÍO.
Año: 2001.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Para mejorar el conocimiento de la enfermedad del repilo en el olivo, y diseñar estrategias para combatirla se han realizado los siguientes objetivos: 1,- clasificación filogenética del hongo "Spilocaea oleagina" a partir de herramientas moleculares. 2,- Análisis de la composición de la cutícula de una especie de olivo resistente al repilo y otra sensible. 3,- Estudio de la variabilidad del hongo como medida de la capacidad del patógeno de superar las medidas de resistencia usadas y como indicativo de la presencia de reproducción sexual en la naturaleza. 4,- Análisis de la especialización del patógeno sobre variedades del olivo. 5,- Puesta a punto de un método de detección temprana de repilo mediante PCR.

Autor: SANCHEZ MORAN EUGENIO.
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE GENETICA, FAC. BIOLOGIA, U.C.M..

Resumen: En el presente trabajo se realiza por primera vez una descripcion clara del proceso meiotico en diferentes ecotipos de la especie modelo Arabidopsis thaliana (L). Se ha llevado a cabo un cuidadoso analisis de la frecuencia de quiasmas en metafase I tanto a nivel celular como a nivel de cromosomas especificos. Estos datos se han comparado con los obtenidos en el estudio de dos mutantes meioticos (asy 1 y dsy 1), obtenidos en la Universidad de Birmingham (Inglaterra). La metodologia utilizada ha sido la hibridacion in situ mediante fluorocromos (FISH) de sondas de ADN ribosomico 45S y 5S. El otro objetivo primordial de la Tesis, ha sido la busqueda de mutantes semiesteriles en plantas de Arabidopsis sometidas a mutagenesis insercional (T-ADN). Posteriormente se ha estudiado la meiosis en dichos mutantes para comprobar si este proceso estaba alterado, y en caso afirmativo, caracterizar cual era la fase alterada. El siguiente paso ha sido comprobar el numero de inserciones de T-ADN en estas plantas, la expresion de los genes alterados y la secuenciacion de uno de ellos. Por ultimo se ha comparado el gen identificado y su producto, con los datos existentes en otros organismos.

Autor: LLORENTE DEL POZO ANA.
Año: 2001.
Universidad: LEON .
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA, UNIVERSIDAD DE LEÓN.

Resumen: Se han aislado y caracterizado varios genes que codifican las proteínas de reserva del tipo legumina en las especies del género Lens mediante la técnica de PCR. Se han obtenido cuatro genes de la lenteja cultivada (Lens culinaris culinaris) y uno de cada una de las cuatro especies silvestres del género (Lens culinaris orientalis, Lens odemensis, Lens ervoides y Lens nigricans). Los genes de leguminas analizados de Lens culinaris culinaris pertenecen a dos clases distintas, A y B. Se han detectado al menos cinco genes diferentes de leguminas B y uno de leguminas A. Las zonas secuenciadas de los genes de leguuminas A y B de Lens tienen la misma estructura que los genes descritos para otras leguminosas, con cuatro exones separados por tres intrones en leguminas A y tres exones interrumpidos por dos intrones en leguminas B. Además se ha caracterizado la zona reguladora 5' de un gen que codficia una legumina de clase B, que presenta señales de transcripción semejantes a las de otros genes de leguminas de la tribu vicieae: Caja TATA y Caja Legumina con elemento RY completo. Los genes de leguminas del género Lens codifican proteínas pobres en aminoácidos azufrados. Se propone que la región carboxilo terminal del péptido alfa (que es la más variable) sería la mejor candidata para realizar en ella modificaciones para aumentar el contenido en estos aminoácidos. Los genes de una clase de leguminas procedentes de distintas especies de leguminosas se parecen más entre ellos, que los de distinta clase A y B dentro del género Lens, por lo que la aparición de las dos clases de genes es anterior a la especiación. Posteriormente, dentro de las especies hubo procesos de duplicación y divergencia de los genes de lelguminas B que codifican las subunidades de 60.000-65.000 Da. Se ha detectado mayor variabilidad en los genes de lelguminas B de L. C. Culinaris que en las secuencias de las especies silvestres del género Lens, lo que se pdoría atribuir a la selección y mejora efectuada en la lenteja cultivada. Los genes de lenguminas B analizados pertenecientes a las especies silvestres del género Lens mantienen una homología del 99% por lo que se podrían considerar ortólogos. Estos genes reflejan la especiación del género Lens. Se ha caracterizado una secuencia de 840 pb que presentan unas características que indican que podría ser parte de un retrotransposón tipo copia.

Autor: MANZANERO ALONSO SILVIA.
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS.

Resumen: Los neocentrómeros de plantas aparecen lejos de la cromatina cetromérica, se muestran activos junto al verdadero centrómero y comparten con éste la capacidad de movimiento hacia los polos del huso. Los más estudiados, que son los de maíz, y centeno, se activan exclusivamente en meiosis. Estos neocentrómeros se ven como extensiones de cromatina fuertemente orientadashacia los polos, para la segregación de los cromosomas se ve poco afectada por ellos. En este trabajo se caracterizan dos tipos de neocentrómeros de centeno: (i) Neocentrómeros terminales. Están presentes en plantas de la población Paldang, de polización libre, donde todos los cromosomas pueden mostrar activar neocéntrica en meiosis desde metafase I hasta anafase II. Los neocentrómeros se localizan en la heterocromatina terminal sensible al bandeo c, formada principalmente por secuencias repetidas en tándem. Tres de estas secuencias, pSc34, pSc74 y pSc200, tras llevar acabo hibridación in situ, revelaron extensiones de cromatina en los neocentromeros que no aparecian en las plantas control. Mediante inmunolocalización con anti a-tubulina se vieron en ocasiones microtúbulos unidos a los neocentrómeros. La tecnica de impregnación argéntica mostró acumulaciones de proteinas en las regiones terminales de los cromosomas con y sin neocentrómeros. Sin embargo, el anticuerpo MPM-2, que revelalos cinetoros en metafase, no detectó las regiones terminales. No existen diferencias en la metilacion de citosinas en estas regiones entre plantas con y sin neocentromeros. (ii) Neocentrómero intersticial en el brazo largo del cromosoma 5R. Aunque se ha decrito tambien en otros materiales, aquí se ha estudiado en un alinea de adición trigo-5RL. Una constricción intersticial aparece estirada en primera division mieótica, y puede formar un neocentromero en metafase I. En anafaseI la constricción es capaz de mantener las cromátidas hermanas unidas, que es otra de las funciones del centromero. La constricción contiene una banda C pequeña, formada por repeticiones en tándem de la secuencia pSc119.2. Se ha detectado mediante inmunolocalización la union de la constrición a microtubulos y mediante tinción argéntica la presencia de una acumulacion de proteinas en esta region. La existencia de heterocromatina formada por DNA altamente repetido en tandem y proteinas que aparentemente estan asociadas a este tipo de DNA es un factor comun en ambos tipos de neocentromeros. Ademas, en ambos casos la cromatina presenta una estructura peculiar que se permite estirarse de forma anormal. Esta heterocromatina anormal podria adquirir la facultad de unirse a motores moleculares, implicados en el movimiento de los cromosomas, que a su vez serian responsables de la actividad neocentrica.

Autor: MÉNDEZ DE VIGO SOMOLINOS BELÉN.
Año: 2001.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: En este trabajo se desarrolla un mapa genético de Phaseolus vulgaris L. Constituido por 208 maracadores moleculares (RAPDs, RFLPs y SCARs). Paralelamente se identifican los genes de resistencia a antracnosis introducidos en cuatro líneas esencialmente derivadas de Andecha obtenidas mediante mejora genética por retrocruzamiento en el SERIDA (Villaviciosa): Co-3/Co-9 en la líneas A1220 y A1231; Co-2 en la línea A1183; y un nuevo gen dominante localizado en el cromosoma 11J, próximo al locus Co-2 en la líneas A1258. Se localizan estos y otros genes de resistencia a antracnosis en el mapa genético desarrollado: Co-1 en el cromosoma 1H, Co-2 en el cromosoma 11J, Co-3/Co-9 en el cromosoma 4B, Co-4 en el cromosoma 8F y Co-6 en el cromosoma 7A.

Autor: ANDRES DOMÍNGUEZ M. TERESA DE.
Año: 2001.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA, UNIVERSIDAD DE ALCALA.

Resumen: En este trabajo se ha analizado la identidad y diversidad genética de una colección de plantas de portainjertos, procedentes de 6 Bancos de Germoplasma europeos, mediante la aplicación de 3 sistemas marcadores nucleares, y cloroplásticos, y AFLPs. El uso de portainjertos en viticultura, no fue hasta la aparición de la plaga de la filoxera responsable de la destrucción de más de dos terceras partes de los viñedos del contienente europeo. La filoxera de la uva, Daktulosphaira vitifoliae, es un pequeño insecto de aspecto parecedio a los pulgones de pequeño tamaño que se alimenta exclusivamente de plantas del género Vitis. Los portainjertos aparecieron como consecuencia de no encontrar un método de lucha directo sobre esta plaga y del descubrimiento de que la vid se puede cultivar injertada sobre cepas americanas resistentes, sin perder ninguna de sus condiciones agronómicas. La colección estudiada se puede considerar representativa de los tipos utilizados en el cultivo mundial de vid, e incluye variedades y formas derivadas entre las que se encuentran las más primitivas y de mejores resultados en la práctica agrícola en los principales países productores de vid. Los STMS nucleares, permiten un estudio sencillo, rápido y reproducible, de las muestras, relevando una gran capa capacidad de discriminación de los portainjertos. Los AFLP son más polimórifocs, más efectivos en la cobertura del genoma, más útiles para la detección de clones dentro de una misma variedad y proporcionan mayor información sobre el origen genético de los portainjertos que los STMS nucleares. Los STMS de cloroplastos proporcionan una información diferente y complementaria de los dos sistemas anteriores, siendo la única técnica capaz de determinar el parental femenino del cruzamiento en un pedigrí.

Autor: LARRAYA RETA LUIS M..
Año: 1999.
Universidad: PUBLICA DE NAVARRA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: E.T.S. INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: Pleurotus ostreatus (seta ostra)en un hongo comestible con creciente interes agricola e industrial. A pesar de su importancia economica, esta especie no ha sido objeto de estudiar geneticos detallados ni se han desarrollado planes de mejora a nivel mundial. El principal objetivo de esta tesis se desarrollar las herramientas geneticas necesarias para establecer las bases de futuros planes de mejora. En primer lugar se han obtenido marcadores moleculares ligados a los genes que controlan el sistema de apareamiento, y que han servido para complementos estudiar clasicos sobre el control de apareamiento Tambien se ha obtenido el cariotipo molecular de P. Ostreatus, relevando la presencia de once cromosomas por genomio hapbida, con un tamaño total de 35,1 bib. Finalmente se ha obtenido un mapa de ligamiento basado en marcadores bioquimicos, moleculares y funcionales. Dicho mapa conste de once grupos de ligamiento que han sido correlacionados molercularmente con los once cromosomas El mapa de ligamiento presenta un tamaño de 1000,7 cm.