INMUNOLOGIA, 3

Autor: NAVARRO LÓPEZ FRANCISCO.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: HOSPITAL UNIVERSITARIO DE LA PRINCESA.

Resumen: La tesis doctoral se centra en el estudio e identificación de nuevos receptores para la molécula de clase Ib HLA-G, así como en el estudio del papel que desempeñan los receptores de células NL CD94/NKG2 en su reconocimiento. Por otra parte, también se estudia la coexpresión de formas activadoras e inhibidoras de los heterodímeros CD94/NKG2 por clones NK y cómo afecta el balance de señales entre ambos tipos de receptor a la respuesta funcional de estos clones a HLA-E (ligando del receptor CD94/NKG2). Mediante la generación de AcM pudimos identificar un nuevo receptor inhibidor para moléculas HLA de clase I diferente a los receptores NK de la familia de los KIR y CD94/NKG2 ya descritos. Nuestros estudios pusieron de manifiesto que este nuevo receptor, designado ILT2 ("Immunoglobulin like transcript 2"), es capaz de reconocer varios alelos de HLA-A, -B, así como también la molécula de clase Ib HLA-G. Además, este receptor no es específico de células NK, sino que se expresa en otros linajes leucocitarios. Por otra parte, nuestros estudios funcionales indican que ILT2 es capaz no sólo de inhibir la respuesta citotóxica de células NK y linfocitos T, sino que también es capaz de interferir en los procesos de señalización temprana en células B, monocitos y células dendríticas. Por tanto ILT2 podría tener un papel relevante como regulador de la respuesta inmunitaria al establecer un umbral de activación que debe ser superado por los dos receptores estimuladores. En cuanto al estudio del reconocimiento de HLA-G por los receptores CD94/MKG2 nuestros datos demuestran de forma clara que tanto el heterodímero inhibodr (CD94/NKG2A) como el activador (CD94/NKG2C) no son capaces de interaccionar de manera directa con la molécula de clase lb HLA-G. Por último, en el estudio de la coexpresión de formas activadoras e inhibidoras de CD94/NKG2 por clones NK se aportan evidencias experimentales de la coexpresión de ambas formas del receptor en clones NK y de que el balance de señales entre ambos es determinante de la respuesta funcional a HLA-E.

Autor: ORTA GARCÍA TERESA JESÚS.
Año: 2000.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Resumen: Hemos estudiado la capacidad de los linfocitos T de sangre periférica y de las células T CD8+ de expresar receptores CD94 y de miembros de la familia NKG2 en respuesta a tres modelos de estimulación: A,- Con anticuerpos anti-CD3 (OKT3). B,- Con superantígenos TSST-1 ó SEB. C,- Con PMA ó PMA más Ionomicina. En las células T totales, y en los linfocitos T CD8+ se expresan CD94 y NKG2A en respuesta a la estimulación con OKT3 y con superantígenos, pero no con PMa más Ionomicina, significativas en valores porcentuales en la respuesta frente a estos dos estímulos. El heterodímero CD94/NKG2A se expresó en las células T totales, y en los linfocitos T CD8+ a diferentes niveles según el tipo de estimulación empleada. Detectamos que la expresión de CD94 y NKG2A tanto en las células T totales como en los linfocitos T CD8+ está regulada por citoquinas como la IL-10. Así, la presencia de IL-10 en los linfocitos T totales y en los CD8+ expresaron niveles de CD94 y NKG2A por encima de los valores inducidos por la estimulación con OKT3, pero no afectó a las células estimuladas con superantígenos, PMA ó PMA más Ionomicina. También determinamos a mediante RT-PCR la expresión de los genes de la familia NKG2. En las células T totales y en los CD8+ en reposo se expresan los receptores NKG2D y NKG2E, mientras que la estimulación induce la expresión de los genes NKG2A y NKG2C. El papel funcional de los receptores CD94 y NKG2A en los linfocitos T fue estudiado determinando la capacidad de lisis de la población de células T CD8+/CD94+ frente a sus dianas (células P815). La caracterización fenotípica de la población T CD8+/CD94+ demostró que las células de nuestro estudio pueden tener un fenotipo de células T activadas efectoras/memorias. En las células T CD8+ estimuladas con TSST-1 se detectó una expansión oligoclonal de la población de células T CD8+/Vbeta2+/CD94+ llegando a valores cercanos al 90%. Paralelo al estudio de los receptores CD94 y NKG2, se estudiaron otros receptores CD161 (NLR-P1A) de las superfamilias de las lectinas tipo C, y los de la superfamilia de las Inmunoglobulinas p58.1 (EB6) y p58.2 no se detectó en las células T CD8+ en reposo, ni en las estimuladas, sugiriendo que se requiere en los linfocitos T de un mecanismo diferente para inducir la expresión de CD94 y NKG2.

Autor: GARCIA PEYDRO MARINA.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Todos los clones de linfocitos T citotóxicos (CTL) analizados reconopéptidos presentandos por el aloantígeno HLA-B*2705. Los péptidos implicados en dicho reconocimiento son diferentes, para al menos 5 de estos CTL. Hemos logrado identificar el ligando natural reconocido por el CTL alorreactivo 27S69 en el cotexto de B*2705: el octámero RRFFPYYV. Este clon muestra un grado de flexibilidad en el reconocimiento de variantes estructurales del péptido, similar al de CTL autorrestringidos. Es posible antagonizar la alorreactividad directa del clon 27S69 mediante sustituciones en los residuos criticos del octámero. La reactividad cruzada del CTL 27S69 son subtipos de HLA-B27 es debida al reconocimiento del mismo péptido que en B*2705. No obstante, el polimorfismo de B27 modula el alorreconocimiento por este CTL mediante al menos 3 mecanismos diferentes. A pesar de la asociación difencial de B*2705 y B*2709 a la espondilitis anquilosante, ambos subtipos poseen una elevada similitud en sus propiedades de presentación antigénica a CTL alorreactivos. Por último, la presentación de epcitopos aloespecíficos por B 2705 es mayoritariamente independiente de tapasina. La ausencia de esta proteína ejerce únicamente un efecto cuantitativo sobre un número reducido de epítopos de B*2705, reconocidos por CTL.

Autor: SERRADOR PEIRO JUAN MANUEL.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: HOSPITAL UNIVERSITARIO DE LA PRINCESA.

Resumen: Para migrar, los linfocitos T cambian de una morfología esférica a polarizada. Quiomiocinas y otros factores quimotáctivos inducen la polarización de los linfocitos, induciendo la formación de un urópodo en el polo posterior de la célula, donde se redistribuyen las moléculas de adhesión ICAM-1, -2, -3, CD43 y CD44. En este trabajo de investigación, se han buscado proteínas que participan en la redistribución de receptores de adhesión al urópodo celular. Se ha observado que las proteínas ERM (ezrina, radixina y moesina) se localizan en el urópodo de las células T tratadas con quimiocinas donde interaccionan con ICAM-3. Dicha interacción está mediada por la región citoplasmática de ICAM-3. La expresión del dominio N-terminal de moesina en células polarizadas disminuía la localización de ICAM-3 en el urópodo. La mutación de la Ser496A la presente en la región citoplasmática de ICAM-3, disminuía de forma significativa la unión de la región N-terminal de moesina y la polarización de ICAM-3. Estos resultados sugieren que moesina participa en el flujo retrógrado de ICAM-3 hacia el urópodo de los linficitos T en migración. Además, en este trabajo se investiga el papel de CD43 y las proteínas ERM en la regulación de la polaridad de la célula T. Anticuerpos anti-CD43 inducen la polarización de CD43 y las proteínas ERM al urópodo de la células T, donde interaccionan. Dicha interacción se confirmó "in vitro" utilizando una proteína de la región citoplasmática de CD 43 fusionada a GST con la que se precipitaron moesina y ezrina de células Jurkat. Dicha interacción facilita la agregación celular desencadenada por anticuerpos frente a CD43 y el transporte de otras células por las células de migración.

Autor: RODRIGUEZ RAMIRO ALMUDENA.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR "SEVERO OCHOA".

Resumen: Durante la diferenciación intratímica de células T el locus TCR reordena y se expresa antes que TCR. En estos momentos de la diferenciación T, TCR se asocia con una cadena invariante denominada preTCR (pT) para constituir el complejo preTCR. El preTCR es responsable de desencadenar el proceso que se ha llamado selección, la cual incluye al menos dos fenómenos: el establecimiento de la exclusión alélica en el locus TCR, y la inducción de un proceso de expansión celular por el que se genera un número normal de células doble positivas (DP) en el timo. Al comienzo de este trabajo de tesis doctoral se desconocían en gran medida los mecanismos asociados al proceso de selección, y el momento en el que el preTCR operaba durante la diferenciación intratímica. A través del aislamiento de poblaciones pro- y pre-T de timo humano hemos caracterizado el momento en que TCR reordena y se expresa en ausencia de TCR en el timo humano, en una población de timocitos DP-TCR. Esta información nos permitió identificar el homólogo humano del pT de ratón. Ambas cadenas presentan una conservación del 87% en sus regiones extracelular y transmembrana, pero esta homología se pierde bruscamente en las secuencias citoplasmáticas. La expresión de pT está regulada durante el desarrollo intratímico humano, pero no se encuentra restringida a esta localización. La expresión del complejo preTCR lleva asociada tanto la regulación de los genes activadores de la recombinasa (RAG1 y RAG2), como la expresión del tránscrito en línea germinal TEA. Así mismo hemos determinado que la selección conlleva una rápida modulación negativa del mRNA de pT. Hemos identificado y caracterizado dos formas de procesamiento alternativo de pT: pTb y pTc. La isoforma pTb carece del dominio extracelular de inmunoglobulinas y no es capaz de promover la expresión en la membrana de un complejo preTCR. Sin embargo se asocia a la cadena TCR en el citoplasma. Estas características bioquímico/estructurales, junto al hecho de presentar una regulación de expresión específica apuntan a que podría tener una función contrapuesta o reguladora de la forma primeramente descrita, pTa. Por el contrario, pTc conserva parte del dominio extracelular de inmunoglobulinas, y no sólo es capaz de asociarse con TCR, sino que promueve la expresión de un complejo funcional de membrana. Presenta un patrón de expresión paralelo al de pTa, por lo que cabría sugerir que pTc puede desempeñar parte de las funciones primeramente adscritas a la isoforma pTa. Todo ello indica que la expresión y función del preTCR podría implicar mecanismos complejos de regulación, que se discuten en este trabajo.

Autor: LOPEZ GOYANES ALBERTO.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: INMUNOLOGIA. HOSPITAL UNIVERSITARIO 12 DE OCTUBRE.

Resumen: El sistema del complemento consituye una de las barreras primarias de protección de los vertebradso frente a las infecciones por microorganismo patógenos. Su conocimiento en profundidad ha proporcionado y puede proporcionar herramientas diagnósticas y terapeúticas para inmunodeficiencias causadas por defectos en el funcionammiento de dicho sistema. Las proteínas C4 y factor B del complemento son componentes, respectivamente, de las denomiandas ·vía clásica" y "vía alternativa" del sistema del complemento. Los genes que codifican para estas proteínas presentan, enla población humana, cierto grado de polomorfismo, más acusado en el caso del gen C4 que en el del factor B, que indica la flexibilidad y adaptabilidad de este sistema de protección inmunológica. En un parte del presente trabajo se han secuenciado y caracterizado 3 nuevos alelos del gen C4 denominados C4A13, C4B12 y C4B93. El estudio de la región polomórfica de éstos y de los demás alelos de C4 conocidos ha permitido caracterizar 2 regiones genómicas susceptibles de participar en mecanismos de recombinación, lo que ha llevado a pensar que dichos mecanismo pueden ser los responsables de gran parte del polomorfismo encontrado en los genes C4. Por otra parte, también se han secuenciado en su totalidad y caracterizado los alelos más frecuentes del factor B denominados Bf*Fa, Bf*FB y Bf*S. Sus secuencias se han comparado entre si y se han determinado las variaciones entre ellas, lo que ha llevado a la conclusiónd e que el gen Bf presenta un grado de polomorfismo muy reducido que puede explicarse, principalmente, mediante mecanismos de mutuación puntual. La secunciación completa de estos 3 alelosha permitido descubrir, además, una nueva variante del alelo Bf*S denominada Bf*S (I).

Autor: RIVERO CARMENA MIGUEL EDUARDO .
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En la ataxia-telangiectasia (AT) se hanobservado defectos en el sistema inmunológico tanto a nivel humoral (B) como celular (T). Como consecuencia, los enfermos AT están predispuestos a sufrir infecciones sinopulmonares. Los mecanismos patogénicos de esta enfermedad son todavía desconocido. En este trabajo se hanexplorado los efectos de la ausencia del gen ATM en células del linaje T aisladas de 13 enfermos AT con defectos probados en sus células T, mediante la inmortalizaciónde linfocitos T CD4+ y CD8+ con Herpesvirus saimiri, y el análisis de su comportamiento funcional en comparación concontroles sanos. Se han analizado varios parámetros funcionales enrespeusta a estímulos de membrana (anti-CD3, IL2) y transmembrana (PMA más ionomician): 1) movilización de calcio intracelular, 2) inducciónde moléculas de activación (CD71, CD154, CD69, y CD25). 3) síntesis de citocinas (IL2 y TNFa) y4) proliferación celular. Hemos visto que todos estos procesos, tempranos y tardíos, son normales en las células T ATM inmortalizadas lo que indica que ATM no es necesaría para su inducción. Como era de esperar, los linfociots T ATM muestranun incremento de la sensibilidad a la radiación en ensayos de síntesis de ADN radioresistente y de supervivencia. En contraste a los datos publicados recientemente para los linfocitos B, nuestros resultados indican que los linfocitos T maduros de los enfermos AT no presentan defectos intrínsecos en su función inmune. Por lo tanto, los defectos descritos en los linfocitos T podrían ser debidos a un defecto en el desarrollo o a la presencia de factores supresores in vivo. Los linfocitos T inmortalizados podrían ayudar a la comprensión al papel de ATM en los diferentes tipos celulares y al desarrollo de terapias frente a la inmunodeficiencias de los enfermos AT.

Autor: ROSAL SANCHEZ MANUEL.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: INMUMOLOGIA. HOSPITAL 12 DE OCTUBRE.

Resumen: En el presente trabajo se han estudiado por primera vez los genes DRB en los monos verdes (Cercopithecus aethipos). Se han secuenciado once nuevos alelos DRB (exón 2, exón 3) a partir de cDNA, y se ha visto que pertenecen a un número limitado de linajes: DRB1*03 (4alelos), DRB1*07 (3 alelos), DRB5 (1 alelo), DRB*w6 (1 alelo) y DRB*w7 (2 alelos). El hallazgo de 3 alelos DRB1 en 3 individuos diferentes apoya la existencia de duplicaciones del gen Ceae-DRB1. Es posible que el alelo CRB1*0701 no sea funcional, ya que lleva el aminoácido serina en la posición 82, que, según se ha demostrado en ratones evita la expresión de la molécula en superficie. Este alelo se ha encontrado sólo en haplotipos conla duplicaciónd e Ceae-DRB1*. El patrón de cambios de base entre los alelos es consitente conla generación de polimorfismo por mutaciones puntuales o intercambio de segmentos cortos. Los once alelos cumplen los requerimientos de funcionalidad como moléculas presentadoras deantígenos (excepto, quizás, DRB1* 0701), pues: 1) se han aislado a partir de cDNA y no presentan deleciones, inserciones o dodones stop; 2) conservan los motivos estructurales necesarios para un correcto plegamiento de la moléculas, para la formación de los dímeros DR/DR e interacción con CD4, y 3) el núemro de sustituciones no sinónimas es superior al número de sustituciones sinónimas en la región de unión al péptido, mientras que ocurre lo contrario fuera de dicha región.

Autor: GONZALEZ SAN MARTIN ESTHER.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: En este trabajo se han evaluado los efectos que la proteína tat de VIH tiene en la activación de los linfocitos T. La expresión endógena de esta proteína viral en células jurkat altera la expresión de las proteínas CD25, CD69 e IL-12. Además, tat puede ejercer efectos distintos en la regulación transcripcional dependiendo de su localización intra- o extra-celular, así como de su concentración. Tat es capaz de interferir en los procesos de regulación transcripcional alterando selectivamente la funcionalidad de diversos factores de transcripción (NFAT, API, NFkB) de forma dependiente de la secuencia a la que se unen. Así, tat actúa fundamentalmente sobre elementos reguladores en los que se producen interacciones cooperativas entre factores de transcripción con dominios de homología rel (NFkB, NFAT) y miembros de la familia API. Los mecanismos a travésde los cuales tat es capaz de ejercer estos efectos incluyen desde la interacción directa de tat con ciertos factores de transcripción hasta la alteración cuantitativa y/o cualitativa de la composición del complejo de unión al ADN.

Autor: ALVAREZ ZAPATA DAVID.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: El receptor de antígeno de la célula T(AlfaBeta) (complejo TCR/CD3) es una estructura multiprotéica compleja de estequiometría desconocida integrada por las cadenas variables TCR (TCRalfa y TCRbeta), responsables del reconocimiento de antígeno, y las cadenas invariantes CD3(CD3 , CD3 , CD3 y CD3 ), responsables de los procesos de señalización celular, y cuya estructura global se supone compartida por todas las células T, CD4+ y CD8+. Sin embargo el papel fisiológico de cada una de estas cadenas en la activación de la célula T no es aún conocido, y es tema de debate si sus funciones son redundantes o si por el contrario cada una asume funciones específicas. El estudio de mutantes (naturales o inducidos; murinos o humanos) para cada una de estas cadenas es una muy útil aproximación para el esclarecimiento de estas cuestiones. En este trabajo se analiza desde múltiples puntos de vista (fenotípico, funcional, bioquímico y molecular), y tanto ex vivo (linfocitos T primarios) como desarrollando modelos in vitro (linfocitos T inmortalizados con Herpesvirus saimiri), el comportamiento de células T humanas de un individuo deficiente para la cadena CD3 , profundizándose en el estudio de la subpoblación de linfocitos T CD8+, el trabajo confirma que podría existir una cierta especialización de funciones en el complejo multiprotéico TCR/CD3, puesto que sólo determinados trabajos, como la producción de IL2, pero no otros como la citolisis, la proliferación o la síntesis de TNFalfa, se encuentran afectados en ausencia de CD3 (A Pahceco-CastrolDA Zapata et al. J. Immunol. 161: 3152-3160, 1998) y sugiere, por otra parte, que, además de este papel funcional diferencial, la cadena CD3 puede tener un papel estructural diferencial en el linaje CD8+ respecto al CD4+ (DA Zapata et al J. Biol. Chem. En prensa 1999).#

Autor: PAZ MIGUEL JESUS ENRIQUE.
Año: 1999.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El síndrome de Down o trisomía 21 es el transtorno cromosómico más frecuente entre los seres humanos que nacen a término. A lo largo de su vida las personas con SD presentan con relativa frecuencia una elevada incidencia de infecciones bacterianas y víricas. Todo ello hace pensar que los transtornos de la inmunidad pueden contribuir al cuadro clínico del SD y estar relacionado con las alteraciones del metabolismo oxidativo. Los ratones Ts65Dn presentan una trisomía restringida al segmento que dentro del cromosoma 16 murino, es homólogo al 21 humano. Nos planteamos validar este modelo en relación a las alteraciones inmunológicas y estudiar los diferentes aspectos de la respuesta inmunológica. El desarrollo experimental se realizó en dos partes. En la primera parte se analizó globalmente la respuesta inmunitaria. Así los ratones Ts65Dn presentan las siguientes características: (i) disminución de los niveles de IgA y aumento de IgG en el suero, (ii) disminución de las células CD4+ en sangra, (iii) niveles elevados de interferon gamma, (iv) mayor expresión de moléculas del MHC II y (v) presentación más eficaz de los antígenos. En la segunda parte se analizó el timo de los Ts65Dn, siendo lo más relevante: el incremento de las células apoptóticas, menor número de células CD4+CD8+, mayor sensibilidad a la apoptosis, niveles superiores de peróxidos y reversión de la apoptosis con antioxidantes. En resumen, se ha constatado la implicación de los radicales del oxígeno en el proceso.#

Autor: MUÑOZ CALLEJA CECILIA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La infiltración leucocitaria constituye la característica anatomopatológica principal de la inflamación. La migración leucocitaria hacia el foco inflamatorio tiene lugar a través del denominado proceso cascada de adhesión leucocito-endotelio en la que participan moléculas de adhesión, citoquinas y quimioquinas. La activación del factor de transcripción NF-kB es un requisito necesario para la transcripción de las moléculas mencionadas en respuesta a mediadores inflamatorios como TNF-alfa. El objetivo de la tesis fue analizar el efecto de agentes inhibidores de NK-kB (en concreto los agentes antioxidantes N-acetilcisteína (NAC) y pirrolindínditiocarbamato (PDTC) sobre la expresión de moléculas endoteliales dependientes de NF-kB como las moléculas de adhesión E-selectina, VCAM-1 e ICAM-1 y las citoquinas IL-6, IL-8 y GM-CSF. PDTC y NAC inhiben la secreción, en respuesta a TNF-alfa, de las tres citoquinas en estudio. Dicha inhibición está mediada por el bloqueo de la activación de NK-kB y consiguientemente de la transcripción de los genes que codifican para aquellas citoquinas. De forma similar, PDTC inhibe la inducción de la expresión, mediada por agentes inflamatorios, de E-selectina y VCAM-1. Por el contrario, ICAM-1 no se inhibe en presencia de agentes antioxidantes. Esta falta de inhibición es debida al efecto inductor del agente antioxidante sobre la molécula ICAM-1. Este efecto se detecta a nivel de proteína de superficie y corresponde a un aumento de la actividad transcripcional del gen en cuestión, que se acompaña de un incremento de la actividad del factor de transcripción AP-1..

Autor: MONTOYA SANCHEZ M. CONCEPCION.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: El objetivo general de la tesis ha sido el estudio de los diferentes procesos que tienen lugar durante la transmigración leucocitaria. En la primera parte se ha analizado la importancia de la regulación del metabolismo oxidativo en la adhesión de los neutrófilos al endotelio vascular. El tratamiento de los neutrófilos en atmósfera de hipoxia o con agentes antioxidantes induce la adhesividad de los mismos. Este efecto pro-adhesivo va acompañado de una reducción del rodamiento celular y esta mediado por las integrinas LFA-1 y Mac-1. En la segunda parte se han estudiado distintos procesos durante la transmigración de linfocitos B. Estos estudios han puesto de manifiesto que los linfocitos B de memoria residentes en los órganos linfoides secundarios ruedan sobre la superficie endotelial en condiciones de flujo a través de su interacción con la selectina E, siendo esta interacción independiente de los ligandos previamente descritos para la selectina E. Los linfocitos B presentan un nuevo ligando flicoprotéico para la selectina E que tiene un peso molecular de 240 kD en condiciones reductoras. Este ligando depende de Ca2-, ácido siálico, y N glicosilación para interaccionar con la selectina E. Por último se han identificado los agentes quimiotácticos capaces de inducir la migración de los linfocitos B. Las células B migran en respuesta a MIP-1alfa, MIP-1beta, IL-8, SDF-1alfa, y Lindotactina. Se ha demostrado la capacidad de la linfotactina de inducir la migración, polarización y adhesión de linfocitos B..

Autor: FERNANDEZ MIGUEL GEMA.
Año: 1997.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA .

Resumen: Estudio de la estequiometría del módulo de reconocimiento del receptor para el antígeno de las células T utilizando como modelo de trabajo ratones dobletransgénicos para la subunidad TCRBeta y anticuerpos específicos capaces de discriminar ambas subunidades TCRBeta distintas. La detección de asociación bioquímica de ambas subunidades TCRBeta y su vecindad física en receptores T expresados en la superficie de las células, nos permiten apoyar la idea del carácter multivalente del receptor T. Los resultados obtenidos en este estudio y la revisión de los datos al respecto recogidos en la literatura nos han permitido diseñar y proponer un modelo de receptor T bivalente. Por otra parte, también se ha estudiado el carácter redundante o no estructural y/o funcional del módulo CD3epsilon delta, concluyéndose que es redundante estructural y funcionalmente para las células del linaje T y no redundante para las células del linaje Talfa beta. La carencia de la subunidad CD3 provoca inmunodeficiencias.

Autor: FLORES HERNANDEZ IGNACIO.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA .

Resumen: El objetivo de este trabajo es estudiar los procesos de transducción de señales mediados por lípidos. El sistema elegido es la respuesta inmunitaria. No sólo por ser clave en la vida de los mamíferos, sino porque en ella se dan procesos celulares bien definidos como son los de activación, proliferación y muerte celular. Los resultados obtenidos reflejan la importancia de los lípidos en estos procesos. Todos ellos constituyen respuestas celulares a largo plazo y en todos, además de cambios rápidos y transitorios, se producen variaciones lipídicas sostenidas. En el caso de la activación hemos comprobado como la activación secuencial de la fosfolipasa D (PLD) y la fosfatasa del ácido fosfatídico (PAB) genera aumentos prolongados de diacilglicero (DAG). En la respuesta mitogénica inducida por interleuquina 2 además de la generación rápida de ácido fosfatídico (PA) hay un aumento sostenido de DAG. Por último, en el mecanismo de apoptosis por deprivación de interleuquina 2 se produce una elevación sostenida de los niveles intracelulares de ceramida y una disminución en los de DAG. De estas observaciones se deduce que la composición lipídica de la célula ejerce un papel activo actuando como un "integrador" de señales.

Autor: OLASO MONTERO ELVIRA.
Año: 1997.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y CIENCIAS MORFOLOGICAS PROGRAMA DE DOCTORADO: CONCEPTOS Y METODOS DE BIOLOGIA CELULAR CON IMPLICACIONES BIOMEDICAS.

Resumen: Durante el desarrollo de la metástasis hepática, las células que expresan iso-alfa-actina de músculo liso (SMA) constituyen un componente importante del estroma tumoral. Sin embargo, no existe información precisa sobre su procedencia específica, regulación y función durante la progresión tumoral. Este trabajo demuestra la localización intrametastásica de células que expresan SMA desde estadios muy tempranos del proceso de metástasis experimental hepática del melanoma B16 (MB16). Estas células con SMA formaron una red estromal alrededor de las células del MB16, y expresaron microfilamentos de desmina en un porcentaje muy pequeño. Por el contrario, aquellas partes del higado que no estuvieron afectadas por metástasis, presentaron células estrelladas hepáticas perisinusoidales (CEH) con expresión de desmina, pero no de SMA. El tratamiento in vitro de cultivos de CEH recien aisladas con medio condicionado del melanoma B16 (MB16-MC) produjo un incremento progresivo (P

Autor: PIO OSES RUBEN .
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: En este trabajo se ha detectado la presencia de una actividad DNasa asociada a los linfocitos T y al los monocitos de pacientes con enfermedades autoinmunes. En el caso de la cirrosis biliar primaria, esta actividad fue mayor que en la enfermedad de Graves, la esclerosis múltiple y los donantes sanos. La actividad DNasa fue dependiente de Ca2+, inhibibe por Zn2+ y mayor a pHs ácidos, su peso molecular aproximado fue de 66 kDa, y se mostró más activa frente al DNA monohebra. La actividad DNasa asociada a los monocitos fue también dependiente de la presencia del óxido nítrico. El análisis por citometría de flujo de las subpoblaciones de células linfomononucleares mostró que la actividad asociada a células T4 correlaciona con la relación entre las células T4 memoria y las "naive", la asociada a los linfocitos T8 lo hace con la subpoblación de linfocitos T4 inductores de citotoxicidad, y por último, la actividad DNasa de los monocitos se asocia a una subpoblación activada y madura de éstos. Esta actividad DNasa podría tener un papel importante en los mecanismos de citotoxicidad y apoptosis implicados en las alteraciones de la respuesta autoinmune.

Autor: ALLENDE MARTINEZ LUIS MIGUEL.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA - III PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA MEDICA: PATOLOGIA Y TERAPEUTICA.

Resumen: EL TERMINO RETINOIDE ENGLOBA UN GRUPO DE COMPUESTOS QUE INCLUYE AL ACIDO RETINOICO (AR), EL RETINOL (ROL) Y UNA SERIE DE DERIVADOS NATURALES Y SINTETICOS QUE PRESENTAN ACTIVIDAD TIPO VITAMINA A. EL RETINOL EJERCE SUS EFECTOS A TRAVES DE LA INTERACCION DEL COMPLEJO RETINOIDE-RECEPTOR NUCLEAR DE RETINOIDE CON REGIONES PROMOTORAS DEL DNA NUCLEAR DE GENES INDUCIBLES POR ACIDO RETINOICO. LOS RETINOIDES EN GENERAL EJERCEN FUNCIONES MUY IMPORTANTES EN LA REGULACION, DIFERENCIACION Y HOMEOSTASIS DEL DESARROLLO DE VERTEBRADOS; ADEMAS, CADA VEZ SE IMPLICAN MAS A ESTAS MOLECULAS EN EL DESARROLLO Y MADURACION DE GRAN VARIEDAD DE TIPOS CELULARES (INCLUIDAS LAS DEL SISTEMA INMUNE), ASI COMO EN EL TRATAMIENTO DE DIVERSAS PATOLOGIAS: CANCER, ENFERMEDADES DERMATOLOGICAS E INMUNODEFICIENCIAS. MEDIANTE EL ESTUDIO DE LA PROLIFERACION CELULAR EN CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA (PBMCS), SE HA ANALIZADO EL PAPEL DEL ROL EN LINFOCITOS PREVIAMENTE ACTIVADOS CON UN AMPLIO PANEL DE MITOGENOS. SE HA UTILIZADO TANTO ROL COMO AR OBSERVANDOSE UN MAYOR EFECTO DEL ROL, SE HA ESTANDARIZADO LA CONCENTRACION OPTIMA DE ROL Y CUAL ES EL MOMENTO ADECUADO DE LA ADICION DEL MISMO. EL EFECTO OBSERVADO ES REALMENTE UN AUMENTO DE PROLIFERACION CELULAR Y NO UNA DISMINUCION DE LA POSIBLE APOPTOSIS INDUCIDA AL ESTIMULAR VIA CD3. UNO DE LOS MECANISMOS POR LOS QUE EL ROL MODULA LA MITOGENESIS A TRAVES DE CD3, ES LA INDUCCION DE LA PRODUCCION DE IL-2 E IFN-GAMMA EN PBMCS ESTIMULADAS PREVIAMENTE CON ANTICUERPOS MONOCLONALES ANTI-CD3. NO SE HAN OBSERVADO EFECTOS ADITIVOS DEL ROL SOBRE LA SINTESIS DE OTRAS CITOCINAS COMO IL-4, IL-6, IL-10 LO QUE CLARAMENTE SUGIERE UN PERFIL DE ACTIVACION TIPO TH1. ADEMAS, LAS PBMCS QUE SE ESTIMULARON CON ANTICUERPOS ANTI-CD3 Y POSTERIORMENTE CON ROL HAN MOSTRADO UN AUMENTO DE PORCENTAJE DE EXPRESION Y DE DENSIDAD CELULAR EN DIVERSOS MARCADORES DE ACTIVACION DE CELULAS T (CD18, CD45RO, CD25). EL AUMENTO DE EXPRESION DE ESTOS MARCADORES ESTA EN RELACION CON LA EXISTENCIA DE REGIONES DE UNION DE RETINOIDES SOBRE LOS PROMOTORES DE LOS GENES DE ESTAS MOLECULAS. POR ULTIMO, SE HA ESTUDIADO EL EFECTO DEL ROL SOBRE LINFOCITOS T ACTIVADOS DE DIFERENTES INMUNODEFICIENCIAS ENCONTRANDOSE QUE SOLO EN AQUELLOS CASOS EN QUE LA VIA DE ACTIVACION DEL CD3 SE ENCUENTRA INTACTA, EL EFECTO DEL ROL PERSISTE. ESTOS HALLAZGOS PERMITEN PLANTEAR SU USO TERAPEUTICO EN DETERMINADAS INMUNODEFICIENCIAS.

Autor: ANGULO BARTUREN IÑIGO.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA III PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA MEDICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO EL MECANISMO DE ACCION DE LAS CELULAS SUPRESORAS NATURALES DE MEDULA OSEA. LOS RESULTADOS MUESTRAN QUE EL OXIDO NITRICO ES EL PRINCIPAL MEDIADOR DE ESTA ACTIVIDAD. LA PRODUCCION DE ESTE COMPUESTO DEPENDE DE LA EXPRESION DE LA OXIDO NITRICO SINTASA INDUCIBLE (INOS) POR LAS CITADAS CELULAS E INDUCIDA POR IFN-GAMMA. SIN EMBARGO, OTRAS SEÑALES ADICIONALES SON NECESARIAS PARA LA PRODUCCION DE GRANDES CANTIDADES DE OXIDO NITRICO. UTILIZANDO UN ANTICUERPO MONOCLONAL AGONISTA DE CD40 SE DEMUESTRA QUE LA SEÑALIZACION A TRAVES DE ESTA VIA INDUCE LA PRODUCCION DE OXIDO NITRICO EN PRESENCIA DE IFN-GAMMA. ESTA SEÑALIZACION OCURRE DE MANERA INDIRECTA MEDIANTE LA PRODUCCION DE IL-1 Y TNF-ALFA POR LAS CELULAS SUPRESORAS NATURALES. ESTAS SE CARACTERIZAN FENOTIPICAMENTE COMO CELULAS INMADURAS DE ESTIRPE MIELOIDE YA QUE EXPRESAN LOS ANTIGENOS GR-1, CD40 Y EL ANTIGENO RECONOCIDO POR EL ANTICUERPO MONOCLONAL ER-MP12.

Autor: DOMINGUEZ RODRIGUEZ M. MERCEDES.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA II PROGRAMA DE DOCTORADO: PLAN ANTIGUO.

Resumen: EN EL TRABAJO PRESENTADO COMO MECANISMO DE INFECCION EN LAS ETAPAS INICIALES DE LA TRANSMISION DE LA LEISHMANIOSIS, SE DESCRIBE EL PROCESO DE INMUNOADHERENCIA QUE FACILITA LA PENETRACION DE LOS PROMASTIGOTES OPSONIZADOS EN LOS FAGOCITOS MONONUCLEARES DEL HOSPEDADOR VERTEBRADO. ESTE MECANISMO REPRESENTA LA PRINCIPAL ESTRATEGIA ADAPTATIVA DEL PARASITO, PARA EVADIR LA RESPUESTA INNATA DEL HOSPEDADOR DURANTE LAS ETAPAS INICIALES DE LA TRANSMISION DE LA LEISHMANIOSIS.