VACUNAS, 2

Autor: FUENTES MAJA M. PILAR.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCOLA DE DOCTORAT I FORMACIO CONTINUADA.

Resumen: Investigamos antígenos de espermatozoide que intervengan en la fecundación. Seleccionamos tres anticuerpos monoclonales antiespermatozoide humano(VIC-1,ZAP-7,CRL-10) que reconocen antigenos en espermatozoides de ratón, especificos de tejido. Administramos VIC-1,ZAP-7 o CRL-10(1 mg) por inmunización pasiva, via intravaginal,para estudiar su efecto en la fecundacion in vivo del raton. ZAP-7 y CRL-10 aumentan la mortalidad embrionaria preimplantacional hasta un 50%. VIC-1 no tiene ningun efecto deletero. CRL-10 detecta una proteina de 76+-2 kDa en extractos de espermatozoide capacitado de raton(1%SDS; condiciones reductoras), por la tecnica de Western blot. Investigamos tambien antigenos alternativos, con la colaboracion de la Dra. Caroline Osterhoff (Universidad de Hamburg, Alemania). Utilizamos la proteina recombinante de la Dra. Caroline Osterhoff(Universidad de Hamburg, Alemania). Utilizamos la proteina recombinante de HE2 humana, y un peptico sintetico de HE2(aminoacidos 15-28:GELRERAPGQGTNGC) para diseñar una vacuna de control de la fertilidad. Los espermatozoides de raton tienen una proteina con epitopos comunes en la proteina HE2 humana. Un epitopo se localiza en la secuencia de aminoacidos 15-28 de HE2 humana("peptido HE"). Los ratones inmunizados con péptido HE2 y adyuvante de Freund tienen un 50% menos de embriones preimplantaciones viables, in vivo, que los ratones no inmunizados. En experimentos de bloqueo de la fecundacion in vitro de raton,demostramos que el peptido HE2 participa en la adhesión del espermatozoide a la zona pelucida del ovocito. En las inmunizaciones, el uso de adyuvante de Freund es preferible por via subcutanea que por via intraperitoneal, pues se obtienen titulos de anticuerpos mas elevados y con menos efectos secundarios. Hemos investigado otros adyuvantes menos tóxicos, en colaboracion con el Dr. M. Sábes(Universitat Autonoma de Barcelona) y el Dr. P. Cooper (Australian National University, Canberra, Australia). La combinación liposomas+vitaminasE+gamma inulina(B-D(2->1) polifructofuranosil a-D glucosa, cristales +-1 um) es muy efectiva con proteinas pero es poco efectiva con peptidos.

Autor: MARTÍNEZ GARCÍA PEDRO.
Año: 2000.
Universidad: ISLAS BALEARES.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSITAT DE LES ILLES BALEARS (BIOL. FONAMENTAL).

Resumen: En el presente trabajo de investigación se analiza la influencia que la vacunación específica, frente a S.pneumoniae y frente a H.influenzae, tiene sobre determinados factores biológicos. También se estudia la influencia de determinados factores genéticos en la respuesta a vacunas, así como su implicación en la respuesta frente a bacterias capsuladas. Otros aspecto fundamental de este trabajo fue la estadarización de una técnica basada en la citometría de flujo para valorar la capacidad de opsonización y fagocitosis. MATERIAL Y MÉTODOS * Población estudiada: - Controles Sanos (n=27). - Inmunodeficiencias primarias (n=17). - Inmunodeficiencias secundarias por HIV (n=63). - Infecciones de repetición de causa nofiliada (n=25). * Variable analítica/técnica utilizada: - Alotipos IgG2m (n): Doble difusión en gel. - Alotipos del Fcy RIIA: PCR-SSP anillada. - Cuantificación de C', Igs y subclases: Nefelometría. - CH50: Lisis de hematíes en tubo. - Título de Ac. Específicos: ELISA de captura no competitivo. - Afinidad de Ac. Específicos: ELISA de captura no competitivo, y evolución con tiocinato amónico. - Opsonofagocitosis: Citometría de flujo. RESULTADOS/CONCLUSIONES * Controles Sanos: Incrementan el título de los tres isotipos de Igs y frente a las tres especificidades medidas, con aumento de la afinidad funcional para la IgG y en menor cuantía el de la IgA. * Pacientes: Escasa o nula maduración de la afinidad funcional. Se mantiene la respuesta "cuantitativa" mediada por IgA, disminuye la mediada por IgG y desaparece la mediada por IgG2. Incremento de la frecuencia de alotipos "bajo respondedores". * La determinación de la Opsonofagocitosis porcitometría de flujo, en el laboratorio clínico, es rápida y reproducible, correlacionando con la clínica mejor que las técnicas de ELISA.

Autor: HERNANZ MORAL M. CARMEN.
Año: 2000.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: Aeromonas hydrophila es una bacteria Gram negativa Anaerobia facultativa que se encuentra relacionada tanto con enfermedades humanas como de animales terrestres y acuáticos. Origina pérdidas importantes en cultivos intensivos de peces debido a que es el agente causal de la septicemia hemorrágica. La vacunación esta ganando terreno a la quimioterpia como método de control y prevención de la enfermedad. Las vacunas vivas atenuadas proporcionan una y mayor protección que las vacunas convencionales debido a que estimulan más eficientemente la inmunidad mediada por células. Una forma de obtener organismos atenuados es mediante la introducción de mutaciones en genes que codifican enzimas que participan en rutas metabólicas universales. Un ejemplo es el Gen aroA, cuya funciónes esencial en la bacteria para sobrevivir y crecer in vitro y por lo tanto causar enfermedad. Los mutantes en este gen dependen para su crecimiento de metabolitos que no están presentes en los tejidos del hospedador, por lo que no se pueden desarrollarse, aunque mantienen la capacidad de inducir una respuesta inmune protectora.

Autor: MUGARZA BORQUE FERNANDO .
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FAC. MEDICINA/UNIV AUTONOMA.

Resumen: -Estudio de segmentación, combinando la investigación cualitativa y cuantitativa para conocer la actitud frente a la vacunacion en padres de niños menores de 6 años. CONCLUSIONES: -Se valora la vacunación infantil como el gran avance de la medicina, asimilandose la vacunación a la medicina prevetiva por excelencia, aun cuando queda mucho por hacer en el ambito de la comunicación y de la propia medicina, lo que da pie a proponer una forma de actuación con los padres de los niños en edad de vacunación. -A través de los diversos aspectos tratados, se ha podido constatar con nitidez que es posible a través del proceso investigador llegar a conocer las actitudes de los padres de los niños españoles de 0 a 6 años ante la vacunacion infantil, habiendose estableciendo una tipologia actitudinal de dicho colectivo y estructurado un plan de comunicación diferenciado según los cinco tipos obtenidos en la investigacion, para transmitir diversas informaciones de interes sobre la vacunacion infantil. -Para la obtencion final de los cinco tipos cluster que se han obtenido a traves del analisis multivariable se han tomado como base las siguientes variables: Actitudes (opiniones) hacia la vacunación, Nivel de información sobre vacunas, Para responsable de los temas sanitarios. El resultado de dicho análisis han sido cinco grupos que tienen la siguiente estructura y penetración. Cluster N.componentes % ------------------------------------------------------- I:Tradicionales 254 31,0 II:Modernos,eficaces 105 12,8 III:Criticos, desinformados 92 11,2 IV:Miedo a la reacción 140 17,1 V:Sin miedo a reacción 228 27,8 -Se ha constatado igualmente que existen diferencias estadisticas significativas en el perfil actitudinal de los padres que han permitido una clasificación según su actitud y comportamiento, mas alla de las variables sociodemograficas que habitualmente se consideran, por lo que, igualmente, se ha podido diseñar una estrategia de comunciación basada en estos cinco grupos actitudinales. -Existe una preocupación sobre los temas de vacunación en los medios de comunicación, obteniéndose de la información recogida el perfil de las caracteristicas de las informaciones publicadas en los medios, de su contenido y su evolución temporal, así como de las características de los portavoces públicos y privados que se dirigen a la población a través de los medios. -Existe un perfil diferenciado y las actitudes que han permitido llevar a cabo el estudio cuantitativo y el analisis estadistico subsiguiente. Las principales actitudes y motivaciones detectadas han sido: convencimiento por prevención, por tradicion, por necesidad, por demostracion historica, por propia experiencia, preocupacion por efectos secundarios y riesgos generales, etc. -A través del estudio cuantitativo y tras el análisis estadistico de correspondencias de las respuestas a las cuestiones de motivaciones y actitudes se han obtenido cinco grupos tipológicos, lo que demuestra el aspecto central de la hipotesis inicialmente planteada. -se ha definido una estrategia de comunicación diferenciada para cada uno de los grupos obtenidos a través de la explotacion informatica de la recogida masiva de datos. Es decir que, corroborando la hipótesis, aún cuando a través de la explotacion informatica de la recogida masiva de datos. Es decir que,corroborando la hipotesis, aun cuando se ha detectado una actitud favorable hacia la vacunación de los niños en gran parte de los padres españoles, las diferentes formas de comportamiento y actitudes en las cuales se basan sus opiniones y la falta de informacion detectada, hacen necesario preparar planes especificos de comunicación para mejorar el comportamiento y las actitudes de los padres de los niños en edad de vacunación, habiendose incluido incluso una propuesta estrategica para llevar a cabo en la practica estos planes diferenciados. -En lineas generales, la extension de las medidas preventivas como la vacunacion ha tenido un importante impacto social en la poblacion española analizada, es decir, entre los padres de niños en edad de vacunacion, y en los distintos grupos actitudinales que sehan identificado en el proceso investigador. Se podria hablar, teniendo en cuenta tambien los distintos datos secundarios considerados, de una mejora general en la actitud ante la vacunacion, que se puede seguir potenciado en el futuro a traves de la aplicación de las estrategias diferenciadas que se ha propuesto utilizar para los distintos grupos actitudinales detectados.

Autor: RODRÍGUEZ PÉREZ NURIA.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOLOGÍA FUNDAMENTAL INSTITUTO DE SALUD CARLOS III.

Resumen: El virus respiratorio sincitial humano VRSH es el principal agente causal de las infecciones en el tracto respiratorio inferior en niños y ancianos, causando bronquiolitis y pneumonías, y ocasionando en algunos casos la muerte. Hasta la fecha no se dispone de ninguna medida profiláctica eficaz contra este virus por lo que consideramos sería de interés desarrollar una vacuna contral el VRSH. La inmunización con DNA representa un nuevo método para la generación de una respuesta inmune contra una proteína del virus, codificada por un plásmido, en ausencia de vectores replicativos. Generalmente,las proteínas empleadas en el desarrollo de estas vacunas suelen ser las más inmunógenas, por lo que decidimos trabajar con las proteínas G y F, que son proteínas que se encuentran en la membrana viral y en la superficie de células infectadas. Los resultados indican que la inoculación de plásmidos que codifican para la proteína F o G (DNA/F y DNA/G) son capaces de inducir una respuesta humoral específica en el ratón, y que éstos están protegidos frente a la infección experimental por VRSH, aunque el grado de protección varía dependiendo del antígeno y de la vía de inmunización empleada. Así, por inmunización intramuscular (i.m.) no se llega a obtener nunca una protección completa, siendo más elevada con DNA (gene gun), la tasa de protección aumenta significativamente con ambos antígenos, obteniéndose una eficiencia protectora de un 100% con DNA/F. También nos propusimos comparar la respuesta inmune frente a la proteína F dependiendo de la forma en la que ésta se presenta al sistema inmune. De esta forma encontramos diferencias en el título de anticuerpos específicos inducidos, isotipo de los mismos y capacidad de neutralización del virus, cuando la proteína F se presentaba en forma de DNA (tanto por vía i.m. Como por gene gun), mediante un virus vaccinia recombinante que la expresara VRBF, o en su estado natural VRSH. Lo más relevante fueron las diferencias encontradas en inmunizaciones con DNA/F dependiendo de la vía de inoculación escogida. En inmunización i.m., la respuesta inducida era Th1 (reflejada por un predominio de anticuerpos de isotipo IgG2a) y los anticuerpos específicos apenas era neutralizantes, mientras que por el contrario, el mismo plásmido inoculado por gene gun inducía respuetas tipo Th2 (reflejado por un predominio de anticuerpos de isotipos IgG1), y los anticuerpos eran neutralizantes. Además, encontramos diferencias referentes al reconocimiento de epítopos dependientes en mayor o menor medida de confirmación. Así, los sueros de los ratones inmunizados con DNA/F por cualquier vía de inoculación no reaccionaron con la proteína F en Western-Blot en condiciones reductoras, mientras que los sueros procedentes de ratones inmunizados con VRBF o infectados con VRSH si reaccionaban, aunque con distinta afinidad. Sin embargo, los sueros anti-DNA/F, si que reconocieron a la proteína por Western-Blot cuando ésta no se reducía, lo que indicaba una clara dependencia de cierta conformación. Estos estudios se apoyaron mediante otras técnicas, como por ejemplo, ELISA desnaturalizante por calor, que gracias a los AcMs anti-F disponibles en el laboratorio, se pudo demostrar que existía una correlación entre ausencia de reactividad por un determinado anticuerpo con la proteína reducida en Western-Blot, y reactividad del mismo con la proteína pre-tratada con calor a más de 95ºC por ELISA.

Autor: LÓPEZ DÍAZ DE CERIO ASCENSIÓN.
Año: 2000.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La inmunización de ratones BALB/c con el péptido HVSGHRMAWDMMMNWA de la proteína E1 del virus de la Hepatitis C, induce una respuesta citotóxica CD8+ y una respuesta helper CD4+ del tipo Th1, tanto si la inmunización se lleva a cabo en adyuvante incompleto de Freund como en suero fisiólogico. Mediante péptidos truncados se determinó que el epítope citotóxico mínimo comprende los residuos SGHRMAWDM, mientras que el epítope reconocido por los linfocitos T Helper (LTh) requiere toda las secuencia original. El reemplazo de V por A en la secuencia del péptido original eliminó tanto su carácter helper como su capacidad de inducir linfocitos T citotóxicos (LTc). Esta capacidad se pudo restaurar inmunizando con un péptido helper externo (DTh). Ella fue más eficaz cuando el perfil de citoquinas inducido por el DTh era del tipo Th1 que cuando era del tipo Th0. El reemplazo de aminoácidos en la secuencia de dos péptidos DTh, uno con un perfil Th1 que comprende los residuos 323-337 de la ovalbúmina, y otro con carácter Th0 que comprende los residuos 106-118 de la mioglobina de cachalote, dio lugar en algunos casos a péptidos capaces de inducir IFN-gama y/o IL-4 hasta un orden de magnitud superiores a los del péptido original. Los cambios más eficaces se obtuvieron reemplazando aquellos aminoácidos que apuntan al receptor de las células T, por aminoácidos con una alta propensidad de interacción en las proteínas. Los péptidos de tipo Th1 fueron más eficaces que los Th0 en proporcionar ayuda para la inducción de LTc frente a la secuencia 2422-2427 de la proteína NS5 del virus de la Hepatitis C. En efecto, se requirió hasta diez veces menos de estos péptidos que de péptido original para inducir una respuesta citotóxica equivalente. Por otra parte, los péptidos que produjeron alta cantidad de IL-4 e intermedia o baja de IFN-gama, fueron los más eficaces para proporcionar ayuda en la inducción de anticuerpos frente al péptido hapténico correspondiente a los residuos 301-315 de la proteína gp120 del virus de la inmunodeficiencia humana. Los péptidos Th1 también ayudaron a la producción de anticuerpos cuando el IFN-gama por ellos inducido fue menor de 3000 pg/ml. Estos resultados demuestran que es posible modificar los DTh para inducir respuestas citotóxicas o respuestas de anticuerpos más eficaces.

Autor: FRIEYRO FERNANDEZ OCTAVIO.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: U.AUTONOMA DE MADRID.

Resumen: El tratamiento quirurgico de la ictericina obstructiva se asocia a una elevada morbimortalidad. Varios factores relacionados con la inmunosupresión podrian estar implicados en esta mayor tasa de complicaciones. La traslocacion bacteriana y el aumento de la endotoxemia son dos hechos que se han demostrado, ocurren en etapas tempranas en modelos experimentales de ictericia obstructiva. En este sentido, se estudiaron estos dos fenómenos en relación con la inmunodepresión observada, y el papel que en ello juegan los linfocitos T. Por otro lado, tanto la translocación bacteriana, como la endotoxemia, estimulan la secreción, por parte de los macrofagos tisulares (cels. de KUPFFER en el tejido hepaticod), de varias citoquinas (entre ellas, el TNF-x), dando lugar a un estado proinflamatorio en la segunda parte de la tesis nos centramos en el oxido nítrico (NO), molecula multifuncional implicada entre otras en la activación leucocitaria y en diversos mecanismos de defensa antimicrobiana. En la sintesís de no estar implicada entre otras la no sintasa inducible (nosi), la cual requiere para su expresión la presencia de determinadas citoquinas. Entre los factores que regulan la expresión de la nosi, las celulas linfomononucleares juegan un papel fundamental. Al aparecer un estado pro-inflamatorio a nivel hepatico, en situaciones en ictericia obstructiva, se trató de relacionar la producción de no este nivel y el papel que en ello pudieran jugar las celulas linfomononucleares, observandose que la depresión linfocitaria que tiene lugar, favorece la expresión de la nosi, hecho en el que parece estar parcialmetne implicada una citoquina como es la IL-4.

Autor: GIL BORJA M. TERESA.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE CC. BIOLÓGICAS -UNIVERSIDAD DE VALENCIA-.

Resumen: La rotavirus consistuyen la principal causa de gastroenteritis no bacteriana en niños y animales jóvenes. Se ha estudiado la expresiónd e distitnas proteínas de la cápside de ratavirus (VP4, VP6, VP8) en vectores procariotas (E. Coli y L. Lactis). Se ha evaluado la capacidad inmunogénica de estas proteínas recombinantes en un modelo de ratón lactante, comprbándose que las proteínas VP6 y Vp8* expresadas en E. Coli sonaltamente inmunógenas. La inmunización de las madres conproteína VP8* protege frente a la diararea por rotavirus enlas crías, aunque esta queda restringida por el serotipo del virus infectante. También se ha comprobado que esta protección es conferida por los anticuerpos anti-VP8* presentes en la leche materna, pero no por los anticuerpos séricos adquiridos a través de la placenta. Se logró asimismo la expresión de la proteína VP8* como proteína de secreción extraceluar en Lactococus lactis, que conserva antigenicidad y capacidad hemaglutinante, aunque no se ha conseguido la inmunización de ratones.El estudio de la expresión VP8* con sueros hiperinmunes específicos de esta proteína han aportado información sobre su estrecha interacción con la proteína VP6 de la cápside de rotavirus.

Autor: DURAN FERRER MANUEL DOMINGO.
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: La investigación ha pretendido evaluar la eficacia de la vacunación por vía conjuntival de ovejas adultas con la cepa Rev-1 de Brucella melitensis (dosis = 4'5 x 10e9 u.f.c.) y simultáneamente conocer cómo se modifican las respuestas inmunológica, bacteriológica y clínica de los animales inmunizados cuando éstos se infectan experimentalmente, pasados dos años y medio de la vacunación, con una cepa de B. melitensis de elevada virulencia (cepa H-38, dosis = 5 x 10e7 u.f.c., vía conjuntival). Se ha trabajado con un total de 30 hembras mestizas de las razas segureña, montesina y manchega, distribuidas en los siguientes grupos experimentales: a) ovejas vacunadas en edad impúber por vía subcutánea (grupo SC, 4 animales de entre tres y seis meses de edad al comienzo de la investigación), b) ovejas vacunadas en edad adulta por vía conjuntival (grupo CJ, 13 animales de entre dos y tres años de edad), c) ovejas no vacunadas (grupo NV, 9 animales de entre dos y tres años de edad), y d) un grupo de ovejas no vacunadas que tampoco fueron infectadas experimentalmente, pero que convivieron con animales excretores de brucelas (grupo CT, 4 animales de un año de edad cuando se inició la investigación). La investigación se extendió durante mil trescientos veinte días y puede dividirse en dos etapas cronológicas: etapa de inmunización (de 660 días de duración) y etapa de infección experimental (de 440 días de duración) durante la cual se estudiaron variables clínicas, bacteriológicas e inmunológicas durante dos ciclos reproductivos consecutivos. La respuesta inmunitaria se determinó mediante las diferentes metodologías de aglutinación con antígeno rosa de bengala, técnica de fijación del complemento, técnica ELISA indirecto y técnica de detección inmunoenzimática del interferón gamma. A los treinta días de la vacunación la respuesta inmunitaria fue intensa, pero pasados noventa días se asistió a un descenso marcado de animales seropositivos, excepto frente al método ELISA indirecto. La vacuna resultó eficaz tanto para prevenir los abortos, aunque no de manera absoluta (frecuencia relativa de abortos = 0'17), como para reducir el número de ovejas excretoras activas de brucelas. Tanto la excreción de brucelas por vía vaginal como por la vía mamaria fue reducida y muy transitoria en el grupo de ovejas inmunizadas por vía conjuntival. El grado de concordancia (estimador kappa) entre las técnicas de inmunodiagnóstico fue alto o muy alto durante la infección aguda, especialmente en el grupo de ovejas no inmunizadas que desarrollaron de forma masiva la enfermedad (frecuencia relativa de abortos = 1'00) y una excreción activa de brucelas. Sin embargo, durante la fase de infección crónica en la que no se detectó brucelosis clínica, dicha concordancia fue significativamente menor. El ELISA indirecto fue la técnica más sensible y la novedosa técnica del interferón gamma demostró una gran utilidad para reconocer los diferentes estados de infección.

Autor: PALLARES MARTINEZ FRANCISCO JOSE .
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: Se evaluaron los parámetros clínicos de la totalidad de la muestra. Se realizó un estudio anatomopatológico macroscópico de los pulmones de 6.188 animales. Se practicó un estudio histopatológico y de inmunofluorescencia sobre una muestra de 47 animales, realizándose un análisis estadístico. Se estudiaron los parámetros zootécnicos y económicos, con sus correspondientes estudios estadísticos. Se demostró la existencia de diferencias significativas entre los animales vacunados y no vacunados en cada uno de los sistemas de producción. El análisis de distribución de bajas por causa de muerte sólo refleja diferencias significativas en las muertes por neumonía en el sistema de producción de "dos sitios", pero con un porcentaje de mortalidad por esta causa muy bajo. Tras el estudio de lesiones macroscópicas en matadero se obtuvieron diferencias significativas (p

Autor: PEREZ DIEZ AINHOA.
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: En modelos tumorales humanos existen pocos datos sobre la respuesta antígeno-específica desarrollada por los linfocitos CD4+ o sobre la respuesta del sistema inmune innato inducida por péptidos derivados de antígenos de rechazo tumoral. En el presente trabajo hemos estudiado la posibilidad de obtener respuesta mediada por linfocitos CD4+ y por el sistema inmune innato en dos modelos humanos distintos. En primer lugar, PBMC de donantes sanos fueron incubados con péptidos de 15 aminoácidos cuyas secuencias pertenecen a antígenos codificados por la familia de genes MAGE. Estos péptidos estimularon la liberación de citoquinas IL-1alfa, IL-6 y TNF-alfa por los monocitos, así como su actividad citotóxica frente a líneas celulares de melanoma que expresaban el gen MAGE. Algunos de los péptidos también indujeron la expresión de la forma inducible de la sintasa de óxido nítrico (iNOS) en dicha población celular. Con respecto a las células NK, los péptidos estimularon la liberación de citoquinas Th tipo 1 como IL-2 e INF- y su actividad citotóxica frente a líneas celulares de melanoma. Estos resultados sugieren un efecto inmunopotenciador de los péptidos sobre el sistema inmune innato que podría ser de gran importancia en la posterior generación de una respuesta inmune específica frente a los mismos antígenos de rechazo tumoral de los que proceden. En segundo lugar, mediante un modelo de presentación antigénica basado en células dendríticas (DC) y en el antígeno Melan A/MART-1 (MART-1), se muestra que DC autólogas de un paciente de melanoma HLA-A2 positivo transducidas con un adenovirus que contiene la secuencia del antígeno MART-1, son capaces de inducir tanto linfocitos CD8+ como linfocitos CD4+ específicos frente a MART-1 en co-cultivos in vitro. Tras varias estimulaciones, ambos tipos celulares liberaron IFN- de una manera específica y también reconocieron el antígeno MART-1 en ensayos de citotoxicidad. Estas observaciones podrían ser muy útiles para comprender la respuesta específica de linfocitos CD4+ frente a antígenos de rechazo tumoral y el papel que juegan los linfocitos CD4+ en el mantenimiento de una respuesta Th tipo 1 frente a dichos antígenos.

Autor: JADO GARCIA ISABEL .
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: La memoria presentada por Isabel Jado García para optar al grado de Doctor en Ciencias, resume el trabajo experimental realizado por esta persona a lo largo de los cuatro años de disfrute de una beca predoctoral del Instituto de Salud Carlos III. Como se describe en la memoria, Isabel Jado García ha obtenido doce anticuerpos monoclonales de los cuales cinco mostraron capacidad protectora frente a una infección por neumococo. Estos cinco anticuerpos se estudiaron más en profundidad y su utilización permitió clonar e identificar un nuevo gen en Streptococcus pneumoniae y en otras especies del mismo género, clonar el operon completo en el que se encuentra el gen psaA e identifica un gen muy similar en tres especies próximas a S. pneumoniae, así como identificar una secuencia de inserción en el extremo 3' del gen psaA en unas cepas atípicas de neumococo. Los resultados obtenidos con este trabajo, además de contribuir al conocimiento de la inmunogenicidad de este microorganismo, abren nuevas posibilidades de estudio tendentes a identificar la función precisa de las proteínas estudiadas en este trabajo, así como la regulación de su expresión, lo que esperamos resulte muy útil en el desarrollo de una futura vacuna proteíca. Es de destacar que, parte de los resultados obtenidos han sido objeto de tres publicaciones en revistas de disfusión internacional.

Autor: GONZALO DAGANZO ROSA M..
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: La leishmaniosis es una grave enfernedad parasitaria causada por el protozoo Leishmania. Afecta principalmente al hombre y al perro en más de 88 países, incluída España. En la cuenca mediterránea la especie endémica es Leishmania infantum, que causa las formas cutáneas y viscerales de la enfermedad. El perro es el principal reservorio de Leishmania. En España se estima que entre el 7 y el 20% de la población canina puede estar infectada con Leishmania. Una vacuna de uso veterinario frenaría la infección en el reservorio y reduciría la incedencia de los casos en humanos. Numerosos estudios demuestran que en esta enfermedad, una respuesta inmunitaria del tipo Th1 por parte del hospedador produce un efecto protector, mientras que una respuesta del tipo Th2 facorece la susceptibilidad al parásito. El propoósito de este trabajo es el estudio de protocolos de inmunización protectores en el modelo murino como paso previo para su uso en el modelo canino. La aproximación consiste en emplear el antígeno P36 o LACK de Leishmania infantum, la interleuquina 12 (IL-12) como inmunomodulador y el virus Vaccinia (VV) como vector de inmunización. Se generaron diferentes cirus Vaccinia recombinantes que expresaban el antígeno P36, así como P36 y la IL-12 simultáneamente. Más tarde, se probaron diferentes protocolos de inmunización, basados en combinaciones de los virus generados y la proteína P36 soluble, en el modelo murino de leishmaniosis cutánea producida por L. major. Se estudiaron los parámetros de infección (tamaño de lesión y carga parasitaria en los ganglios linfáticos), así como los parámetros de respuesta inmunitaria humoral y celular (inmunoglobulinas IgG1, IgG2a y las citoquinas IFN-g e IL-10 respectivamente) antes y después de la infección experimental. La inmunización con los virus Vaccinia recombinantes logró provocar una respuesta Th1 en los ratones antes y después de la infección con el parásito, lográndose hasta un 52% de protección respecto de los animales control. Se observó que la inmunización con los virus que expresaban IL-12 provocaron una mayor activación de la respuesta Th1 a juzgar por los altos niveles de IFN-g y de IgG2a y por las mayores disminuciones en el tamaño de las lesiones respecto de los animales control. Además se iniciaron estudios de inmunización con DNA que expresa P36 y VV recombiantes para la misma proteína, obteniéndose unos excelentes resultados en los niveles de protección de los ratores, próximos al 70%. Los estudios realizados pueden ayudar al diseño de una vacuna eficaz de uso veterinario frente a Leishmania.

Autor: BARRIOS DEL PINO YVELISE.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La inmunoterapia activa de tumores malignos de estirpe B es un nuevo método que posibilita un tratamiento alternativo en un grupo de pacientes para los que no existe actualmente curación. En la tesis se presentan los resultados de la aplicación del protocolo en 7 pacientes diagnosticados de linfoma B de bajo grado y 1 paciente con mieloma múltiple. Para realizar la vacunación ha sido necesario la puesta a punto de una serie de procesos que incluyen: la producción de la Ig idiotípica tumoral mediante técnicas de fusión somática; aplicación de técnicas de biología molecular para el estudio de los hibridomas resultantes que incluyeron la secuenciación de los genes codificantes de las regiones variables de las Igs; expansión de estos híbridos productores de la proteína tumoral y su aislamiento desde el medio de cultivo. La Ig idiotípica tumoral así obtenida fue conjugada a la molécula portadora KLH y administrada a los pacientes según un calendario establecido previamente. En la tesis se muestran los resultados del seguimiento de estos pacientes, estudiando para ello la respuesta humoral anti-idiotípica específica y la desarrollada frente a la molécula portadora. Los hallazgos obtenidos de este estudio son una aportación novedosa en el diseño de nuevos tratamientos anti-tumor, discutiéndose ampliamente las ventajas e inconvenientes de su aplicación actual..

Autor: CORPA ARENAS JUAN MANUEL.
Año: 1998.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: En la primera parte se ha realizado un estudio inmunopatológico de la pratuberculosis caprina, con el objeto de valorar y clasificar las lesiones intestinales y analizar su relación con la respuesta del animal a las pruebas de diagnóstico inmunológico, celular y humoral, en sangre periférica. Se observaron lesiones paratuberculosas en el 50% de las 136 cabras estudiadas, reconociéndose lesiones focales, asociadas al extremo tuberculoide del espectro de las micobacteriosis, y lesiones difusas multibacilares y difusas linfocíticas, situadas en las zonas intermidio-lepromatosa e intermedio-tuberculoide, respectivamente. La respuesta a las pruebas inmunes estuvo estrechamente asociada a las lesiones de forma que las de carácter lepromatoso fueron positivas, en su mayoría, a las pruebas de tipo humoral y las tuberculoides a las de tipo celular. En la segunda parte se ha efectuado un estudio con el objeto de conocer la respuesta inmune periférica asociada a la vacunación, en corderos y cabritos inmunizados a los 10-15 días y 4-5 meses, y la respuesta local, en tejido linfoide intestinal, en corderos vacunados a los 10-15 días y sacrificados a los 30 dpv. En todos los animales vacunados se observó una respuesta inmune periférica celular y humoral rápida y simultánea, que fue más intensa y persistente en los animales vacunados a los 4-5 meses de que en los más jóvenes. El incremento del porcentaje de linfocitos CD45R observado en sangre y tejido linfoido intestinal a los 30 dpv, y su elevado número en el nódulo vacunal, hacen de esta población celular la más destacada en la respuesta a la vacuna frente a paratuberculosis.

Autor: GOMEZ DIAZ JOSE ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA, PATOLOGIA Y BIOTECNOLOGIA MICROBIANAS.

Resumen: En esta Tesis Doctoral se ha estudiado desde diferentes puntos de vista la proteína de Neisseria meningitidis encargada del transporte del hierro al interior de la bacteria y que se denomina FbpA. Esta proteína ha sido identificada en todas las cepas meningocócicas, así como en algunas especies comensales del género Neisseria, y se ha comprobado su carácter de proteína regulada por el hierro, es decir, la FbpA se sintetiza en mayor cantidad cuando la bacteria crece en un ambiente con restricción del hierro. Se ha diseñado un protocolo de purificación de la proteína FbpA basado en la cromatografía de afinidad a hierro que permite obtener la proteína en condiciones nativas. La determinación del punto isoeléctrico ha revelado un valor altamente básico, situado entre 9,2 y 9,5 y coincidente con el descrito para la FbpA de Neisseria gonorrhoeae. La disponibilidad de la proteína purificada en estado nativo ha permitido estudiar la respuesta inmune frente a la FbpA. Esta proteína es inmunogénica en ratones y los anticuerpos dirigidos contra ella muestran una total reactividad cruzada cuando se enfrentaron con la proteína FbpA de diferentes cepas meningocócicas. Sin embargo, estos anticuerpos no poseen actividad bactericida significativa ni siquiera frente a la cepa homóloga y no son capaces de bloquear la asimilación del hierro a partir de diferentes fuentes del metal. En ningún caso se han detectado anticuerpos anti-FbpA en sueros humanos procedentes de pacientes que habían sido hospitalizados con infección meningocócica de lo que se deduce la falta de inmunogenicidad in vivo de la proteína estudiada durante la infección en el organismo humano. En este trabajo se ha demostrado la exposición de la proteína FbpA en la superficie del meningococo. La demostración se ha llevado a cabo por métodos diversos como inmuno-ensayos en fase sólida, en fase líquida y, sobre todo, utilizando la inmunomicroscopía electrónica. Finalmente, se ha estudiado la capacidad de la proteína FbpA para unir el hierro a partir del citrato y de la transferrina. En el primero de los casos, la proteína puede obtener el hierro directamente, mientras que cuando el metal es aportado por la transferrina es imprescindible la presencia de los componentes TbpA y TbpB del receptor meningocócico para la transferrina humana. En el seno de estos estudios se ha demostrado que las proteínas TbpA y TbpB integran un receptor único mediante una verdadera asociación física. Como conclusión, las dos aportaciones principales de esta Tesis Doctoral radican en la demostración de la exposición en superficie de la FbpA meningocócica y en la constatación de que el receptor para la transferrina humana resulta imprescindible si el meningococo ha de obtener el hierro a partir de dicha fuente.

Autor: DEVESA REGUEIRO SERGIO.
Año: 1996.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: LA PATOLOGIA MICROBIANA EN ACUICULTURA.

Resumen: EL CULTIVO DEL RODABALLO INICIADO EN GALICIA A FINALES DE LOS 70 ES EN LA ACTUALIDAD UNA ACTIVIDAD INDUSTRIAL SOLIDAMENTE ESTABLECIDA CON UNAS ESTIMACIONES DE PRODUCCION DE 4.000 TM/AÑO PARA EL AÑO 2.000.AL ANALIZAR LA INCIDENCIA DE LOS PRINCIPALES PATOGENOS QUE AFECTARON AL RODABALLO CULTIVADO DURANTE LOS AÑOS 1985-1995, SE OBSERVAN DOS PERIODOS CARACTERIZADOS POR EL CAMBIO EN LAS CAUSAS DE LAS MORTALIDADES: UN PRIMER PERIODO ENTRE 1985-1990 EN DONDE LAS SEPTICEMIAS BACTERIANAS POR VIBRIO ANGUILLARUM Y BOTHRIOCEPHALUS SCORPII Y TRICHODINA DENTRO DE LOS PARASITOS SON LA PRINCIPAL CAUSA DE MORTALIDAD. NO SE DETECTARON MORTALIDADES ASOCIADAS A VIRUS. UN SEGUNDO PERIODO, ENTRE 1991-1995, EN DONDE LA PRINCIPAL CAUSA DE MORTALIDAD SON LAS SEPTICEMIAS BACTERIANAS POR ENTEROCOCCUS Y FLEXIBACTER MARITIMUS. PARAMIXOVIRUS TUVO UNA INCIDENCIA GRAVE EN ALGUNAS PISCIFACTORIAS Y TETRAMICRA BREVIFILUM Y COSTIA NECATOR SON LOS PARASITOS CON MAYOR INCIDENCIA ECONOMICA. EXCEPTO EN EL CASO DE T.BREVIFILUM, LA INCIDENCIA DE LOS DISTINTOS PATOGENOS SE VE AGUDIZADA AL PRODUCIRSE UN INCREMENTO EN LA TEMPERATURA DEL AGUA. EL DESARROLLO DE VACUNAS HA PERMITIDO CONTROLAR LAS DOS SEPTICEMIAS BACTERIANAS MAS IMPORTANTES: LA VIBRIOSIS Y LA ENTEROCOCOSIS. SE APORTAN DATOS MORFOMETRICOS Y SE DESCRIBE POR PRIMERA VEZ EL TRICHODINA QUE AFECTA AL RODABALLO CULTIVADO, PROPONIENDOSE LA ESPECIE T.SCOPHTHALMI. SE ANALIZA LA REPERCUSION ECONOMICA DE LAS DISTINTAS PATOLOGIAS, NO SOLO DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LAS MORTALIDADES PRODUCIDAS, SINO TAMBIEN TENIENDO EN CUENTA EL COSTO DE LOS TRATAMIENTOS TANTO PREVENTIVOS (VACUNACION) COMO CURATIVOS (QUIMIOTERAPIA).

Autor: GARCIA CALVO CARMEN.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA INTERNA PROGRAMA DE DOCTORADO: AVANCES EN MEDICINA INTERNA.

Resumen: LA HEPATITIS OCASIONADA POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB) CONSTITUYE UNO DE LOS PRINCIPALES PROBLEMAS SANITARIOS EN TODO EL MUNDO. LA DISPONIBILIDAD DESDE PRINCIPIOS DE LOS AÑOS 80 DE UNA VACUNA EFICAZ PARA LA PREVENCION ACTIVA DE ESTA INFECCION NO HA CONSEGUIDO DETENER LA CRECIENTE INCIDENCIA OBSERVADA PARA ESTA INFECCION, AL MENOS EN DETERMINADOS GRUPOS DE RIESGO. DADO QUE TANTO LA RESISTENCIA NATURAL FRENTE A LA INFECCION POR ESTE VIRUS COMO EL ESTADO DE PROTECCION PROPORCIONADO POR LA VACUNA ANTIHEPATITIS B ESTAN CLARAMENTE RELACIONADOS CON LA PUESTA EN MARCHA DE RESPUESTAS INMUNOLOGICA A MEDIACION CELULAR (RMC), EN EL TRABAJO DE EXPERIMENTACION DESARROLLADO EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HA EVALUADO LA EFICACIA Y SEGURIDAD DE AM3 UN MODIFICADOR DE LA RESPUESTA BIOLOGICA CON CONOCIDAD CAPACIDAD PARA DERIVAR HACIA RMC, PARA INCREMENTAR EL ESTADO DE PROTECCION ALCANZADO POR LA VACUNA, TANTO EN LA PRIMOVACUNACION (PV) DE INDIVIDUOS SANOS COMO EN LA REVACUNACION (RV) DE INDIVIDUOS SANOS Y PACIENTES HEMODIALIZADOS. EN EL CONJUNTO DE LOS PROTOCOLOS DE VACUNACION REALIZADOS EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HA DEMOSTRADO COMO AM3 ES CAPAZ DE INCREMENTAR LA RESPUESTA HUMORAL ALCANZADA TRAS LA VACUNA, AL COMPARAR CON LOS GRUPOS CONTROLES DEL ESTUDIO. LA AUSENCIA DE EFECTOS ADVERSOS RELACIONADOS CON LA ADMINISTRACION DEL PRODUCTO Y SU BAJO COSTE JUSTIFICAN SU ADMINISTRACION COMO ADYUVANTE A ESTA Y, POSIBLEMENTE, OTRAS VACUNAS QUE PRECISEN DE MECANISMOS DE INMUNIDAD CELULAR PARA SU CORRECTO FUNCIONAMIENTO.

Autor: HURTADO MARTINEZ ALICIA .
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HAN REALIZADO ESTUDIOS PRELIMINARES PARA LA UTILIZACION DE CAPSIDAS RECOMBINANTES DE VP2 DE PARVOVIRUS COMO SISTEMA DE PRESENTACION DE ANTIGENOS O COMO VACUNAS POLIVALENTES. LOS ANALISIS REALIZADOS PARA EL ESTUDIO DE ZONAS ESENCIALES EN LA ESTRUCTURA DE LA CAPSIDA INDICAN QUE LOS RESIDUOS 1 A 14 DEL EXTREMO AMINO DE LA VP2, Y LOS AMINOACIDOS 218 A 233 DEL BUCLE 2 SON PRESCINDIBLES PARA EL ENSAMBLAJE DE LA CAPSIDA. LA INSERCION DIRECTA DE EPITOPOS EN EL EXTREMO AMINO DE LA VP2 NO ALTERA EL ENSAMBLAJE DE LA CAPSIDA SI BIEN ESTOS NO SE EXPONEN DE FORMA ADECUADA PARA INDUCIR RESPUESTA HUMORAL. LA INSERCION DE EPITOPOS EN EL BUCLE 2 NO ALTERA LA ESTRUCTURA DE LA CAPSIDA Y LOS EPITOPOS SE EXPONEN CORRECTAMENTE PERMITIENDO LA INDUCCION DE RESPUESTA HUMORAL ADECUADA. EL BUCLE 2 CONSTITUYE DE LOS LUGARES ESTUDIADOS EL MAS ADECUADO PARA LA INSERCION DE EPITOPOS B. LOS DATOS OBTENIDOS EN ESTA TESIS DOCTORAL HAN PERMITIDO COMPROBAR LA IDONEIDAD DEL SISTEMA DE CAPSIDAS VACIAS DE VP2 PARA EL DESARROLLO DE VACUNAS POLIVALENTES Y COMO SISTEMAS DE PRESENTACION DE ANTIGENOS.

Autor: MUÑOZ CERVERA MARINA.
Año: 1996.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: EL TRABAJO LLEVADO A CABO EN PERIODO 1985-1996, REFLEJA LA EFICACIA DE LA VACUNA MAYORITARIAMENTE UTILIZADA EN ANDALUCIA, CEUTA Y MELILLA PARA EL TRATAMIENTO FRENTE A LA POSIBLE INFECCION POR VIRUS RABICO EN HUMANOS. EL PREPARADO INMUNOGENO DE CELULAS DIPLOIDES HUMANAS INACTIVADO POR BETAPROPIOLACTONA, HA SIDO ESTUDIADO POR LOTES, INDICANDO UN PORCENTAJE DE FALLOS DE RESPUESTA INMUNITARIA, NO SIGNIFICATIVO. UNA APROXIMACION A LA RESPUESTA INMUNITARIA A LA VACUNA DE LA RABIA, UTILIZADA EN NUESTRO MEDIO, EN ANIMALES, NOS DEMUESTRA UN FALLO DE RESPUESTA MUY SUPERIOR AL ESPERADO. SE DEMUESTRA, PUES, QUE LA VACUNA HUMANA (EN PAUTA DE INDICACION) ES EFICAZ FRENTE A LA DISEMINACION DEL SEROTIPO 1 DEL GENERO LYSSAVIRUS, Y, FRENTE AL SEROTIPO NO TIPIFICADO EBL. SE RECOMIENDA LA REVISION DE VACUNACION EN ANIMALES.