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CARACTERIZACIÓ GENÉTICA IQUIMICA DEL NUCLI DEL LPS DE "SERRATIA MARCESCENS" N28B
. Autor: PIQUE CLUSELLA NURIA. Año: 1999. Universidad: BARCELONA. Centro de lectura: FARMACIA.
Resumen: Los genes implicados en la biosíntesis del núcleo del
Lipopsolisacárido (LPS)- llamados génes naa-fueron caracterizados en Serratia mascescens N28b.
Los genes naa caracterizados constituyen una agrupación genética característica que se describe por primera vez. Los genes que se caracterizaron fueron: AmmaF, maaQII,maaG, maaB, maaQ, maaA, maaE i edtB.
A diferenciar del custer maa de Escherichia coli o Salonmella enterica, en Smarcescens destaca la presencia del gen maaE.
El estudio de la función de este gen demostró que podría codificar para una glucosil transferesa. Se observó que la proteina maaE en un LPS con estructura Bdi oRc de Eicoli o Senterib, podía transferir un residuo de blc a nivel de la HepI del
núcleo interno mediante un enlace Beta (1-4). Este residuo de blc se encuentra también en el núcleo de S. Morcescens según estudios realizados en el LPS de S.morceslens N28b. BASES MOLECULARES DE LOS MECANISMOS DE OSMORREGULACION EN BACTERIAS HALOFILAS MODERADAS.
Autor: CANOVAS LOPEZ DAVID. Año: 1998. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura: FARMACIA.
Resumen: Las bacterias halófilas
moderadas son microorganismos extremófilos que habitan ambientes hipersalinos, siendo capaces de creer en medios con un amplio rango salino (0,5-25%). Para poder compensar la presión osmótica externa, entre otros mecanismos de adaptación acumulan
intracelularmente una serie de compuestos orgánicos osmoprotectores o solutos compartibles. El objeto de la presente Tesis ha sido el estudio de los mecanismos de síntesis y transporte de dichos solutos, utilizando como modelo la bacteria Halomonas
elongata DSM 3043. En primer lugar, se procedió a determinar la naturaleza de los solutos acumulados, encontrándose que H. elongata acumula ectoína e hidroxiectoína por sintexis "de novo" y betaina por transporte y por síntesis a partir de colina.
De hecho, hemos caracterizado un transportador de alta afinidad por la betaína (Km= 3 M) y otro por la colina (Km= 10 M). A fin de estudiar los genes responsables de la síntesis de ectoína , se ha construido y caracterizado una serie de mutantes
sensibles a la sal, incapaces de sintetizar ectoína. El análisis por RMN y MS permitió demostrar que uno de ellos acumula Ny-acetildiaminobustirato, el precursor directo de la ectoína y que, tal como se ha podido demostrar, posee capacidad
osmoprotectora y estabilizadora de enzimas. El estudio de los mutantes ha permitido demostrar que la hidroxiectoína se puede sintetizar directamente por hidroxilación de la ectoína o por una ruta alternativa que comienza en el
Ny-acerildiaminobitirato. Asimismo, se han clonado todos genes necesarios para síntesis de extoína, así como los genes responsables del transporte. Además, los genes responsables de la síntesis de betaína han sido secuenciados y caracterizados,
demostrándose la existencia de 3 fases abiertas de lectura (betIBA).
TRANSFERENCIA GENETICA EN BACTERIAS HALOFILAS MODERADAS. CARACTERIZACION Y CLONACION DE UNA
ALFA-AMILASA PRODUCIDA POR HALOMONAS MERIDIANA. Autor: CORONADO NUÑEZ M. JOSE
. Año: 1998. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura: FARMACIA.
Resumen: Las bacterias
halófilas moderadas son microorganismos extremófilos que habitan en ambientes hipersalinos, siendo capaces de crecer en un amplio rango de salinidades (0,5-25%). Aunque estos microorganismos han sido objeto de numerosos estudios taxonómicos,
fisiológicos o ecológicos, son muy escasos los estudios genéticos realizados en este grupo microbiano, debido a la falta de herramientas genéticas apropiadas. Así, el objeto de la presente Tesis ha sido facilitar la manipulación genética de los
mismos, estableciéndose los marcadores genéticos a utilizar (fundamentalmente, agentes antimicrobianos), diseñandose los medios de selección adecuados, y estudiándose los vectores de clonación más idoneós (transferencia por conjugación y
estabilidad), útiles en otras especies bacterianas. Finalmente, se han aplicado a un campo de interés actial los resultados obtenidos en la primera parte del presente Trabajo. Para ello, se ha seleccionado la alfa-amilasa extracelular producida por
la bacteria halófila moderada Halomonas meridiana DSM 5425, de posible interés biotecnológico, y se han establecido las condiciones óptimas de cultivo del microorganismo para obtener la máxima producción enzimática. Dicha enzima se ha caracterizado
tanto bioquímicamente (determinándose su pH, temperatura y concentración de NaCl óptimas de actividad) como a nivel molecular, clonándose el gen responsable de su síntesis, mediante la complementación de mutantes sin actividad amilasa
extracelular. ESTUDIO DE MUTANTES DE RHIZOBIUM TROPICI AFECTADOS EN LA RESPIRACION. Autor: MARROQUI ROMERO SILVIA. Año: 1998. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura: FARMACIA.
DETECCION Y MOVIMIENTO DE AGROBACTERIUM TUMEFACIENS EN DISTINTAS ESPECIES VEGETALES.
Autor: CUBERO DABRIO JAIME. Año: 1998. Universidad: VALENCIA. Centro de lectura: BIOLOGIA.
Resumen: Agrobacterium es una
bacteria fitopatógena que afecta a un gran número de especies vegetales. Hasta el momento el diagnóstico de esta enfermedad ha estado basado en el aislamiento de la bacteria mediante técnicas microbiológicas convencionales.
Ante la dificultad que entraña este tipo de diagnóstico se ha puesto a punto un método de detección de Agrobacterium mediante PCR. Este en comparación con los métodos tradicionales ha resultado más eficiente en la detección de Agrobacterium en
material vegetal. Además se ha diseñado un control interno de las reacciones de PCR que elimina el riesgo de los falsos negativos provocados por la presencia de inhibidores de la amplificación en el estracto de ADN. Se ha estudiado la migración de
Agrobacterium en varias especies de frutales y se ha comparado este fenómeno con otras especies en las que el movimiento de Agrobacterium ya estaba descrito. Además se ha comprobado la existencia de plantas asintomáticas que pueden ser portadoras
de la bacteria. Por último se ha observado la presencia de poblaciones endófitas heterogéneas en el interior de plantas con este tipo de infecciones.
ANALISIS FENOTIPICOS, GENETICOS Y FILOGENETICOS DE LA FLORA ENDOFITICA ASOCIADA A PSEUDOMONAS
SAVASTANOI. Autor: ROJAS MENDOZA ANA M.. Año: 1998. Universidad: SAN PABLO CEU. Centro de lectura: CIENCIAS
EXPERIMENTALES Y TECNICAS.
Resumen: Ante el problema de la ambiguedad taxonómica de determinadas
bacterias endofíticas, este trabajo estudia las poblaciones que acompañan a Pseudomonas savastanoi. Para ello se usaron, en primer lugar, los análisis fenotípicos clásicos pero los resultados se basan fundamentalmente en estudios genético
moleculares, en concreto de secuencias espaciadoras, repetitivas y rDNA 16s. Se observa que la flora endofítica pertenece mayoritariamente a la familia enterobacteriaceae pero es polifilética y ha sufrido convergencia adaptativas; los datos sugieren
varias reordenaciones en los operones rrn. El establecimiento de las relaciones evolutivas entre cepas ha permitido proponer la existencia de cuatro nuevas especies dentro del género Pantoea. No existe una relación clara entre las cepas bacterianas
y el tipo de hospedador. El trabajo demuestra claramente la utilidad de los marcadores moleculares en bacteriología. INFECCION ESTAFILOCOCICA ASOCIADA A LA FORMACION DE BIOFILMS: TRATAMIENTO ANTIBIOTICO Y OTRAS
OPCIONES TERAPEUTICAS. Autor: MONZON GARCES MARTA. Año: 1998. Universidad: NAVARRA. Centro de lectura: CIENCIAS
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Resumen: Se desarrolló un test de antibióticos para S. epidermidis en
biofilm basado en la técnica de ATP-bioluminiscencia para cuantificar las bacterias viables en el interior de dichos biofilms. Con él se determinó el efecto in vitro de 9 antimicrobianos, utilizando 4 cepas productoras de slime (SP). Tetraciclina y
rifampicina alcanzaron la mayor eficacia. El test se aplicó también al estudio del efecto de 9 combinaciones de antibióticos; aquéllas que incluían tetraciclina junto con clindamicina, rifampicina y vancomicna resultaron las más eficaces. Se
evidenció un efecto sinérgico en todas las combinaciones testadas. Para determinar la correlación entre los resultados in vivo e in vitro, se desarrollaron 4 modelos de osteomielitis crónica en rata (usando una cepa SP de S. aureus). Solamente el
modelo basado en un implante precolonizado alcanzó un 100% de éxito en la infección. Se determinó el efecto de los tratamientos con cefuroxima, vancomicina, tobramicina y ciprofloxacino aplicados sobre este modelo. Los resultados obtenidos in vivo
coincidían con los obtenidos in vitro, por lo que quedó validado el test in vitro para biofilms. Se realizó un estudio sobre el efecto bactericida de las ondas de choque sobre biofilms estafilocócicos. El tratamiento con un nivel de energía medio
alcanzó los mejores resultados. Se inició, para mejorar el diagnóstico de la infección por S. aureus, un estudio en leche bovina. Las colonias con morfología rugosa en CRA correspondían siempre a animales crónicos. Para determinar la presencia de
anticuerpos séricos frente estafilococos en estos animales, se desarrolló un ELISA usando como antígeno el extracto crudo de una cepa SP de S. aureus. Se observó un solapamiento de las distribuciones en el ELISA entre categorías.
EPIDEMIOLOGIA MOLECULAR DE YERSINIA ENTEROCOLITICA EN ASTURIAS. Autor: LOBATO ALVAREZ M. JOSE. Año: 1998. Universidad: OVIEDO. Centro de lectura: BIOLOGIA.
Resumen: OBJETIVO: Optimizar y
evaluar técnicas basadas en el análisis de los fragmentos de restricción del ADN y técnicas de amplificación génica mediante PCR, como métodos de tipificación para Yersinia enterocolitica; y aplicarlos al conocimiento de la epidemiología molecular
de la yersiniosis en Asturias.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES: La ribotipificación (mediante restricción-hibridación cortando el ADN con HindIII y BglI y utilizando el operón rrn como sonda) fue la técnica más precisa, mostró el índice de discriminación más elevado, y resultó de
valor probado en los estudios epidemiológicos y filogenéticos. La PCR-ribotipificación utilizando cebedores con secuencias conservadas de los genes ARNr 23S y 16S fue de utilidad en estudios epidemiológicos, aunque se descartó para los
filogenéticos. Se revelaron las relaciones entre los marcadores genéticos y fenotípicos (serotipificación/biotipificación) así como las existentes entre la resistencia a antimicrobianos y los perfiles de plásmidos y de integrones. Los resultados
fueron de gran utilidad para definir y comparar líneas clonales, relacionar cepas de diferentes origenes y nichos ecológicos, así como para trazar la epidemiología molecular de Yersinia enterocolitica en el Principado de Asturias.
ELIMINACION SELECTIVA DE BACTERIAS AUTOCTONAS Y ALOCTONAS POR PROTISTAS BACTERIVOROS EN UN SISTEMA
FLUVIAL. Autor: SANTAMARIA DE JUAN ESTHER. Año: 1998. Universidad: PAIS VASCO. Centro de lectura: CIENCIAS
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Resumen: La mayor o menor permanencia en los sistemas acuáticos de bacterias alectonas
tendra especial relevancia desde el punto de vista de la salud pública, ya que muchas de estas bacterias son potenciales patógenos para los humanos. Estos microorganismos llegan a los sistemas acuáticos procedentes de vertidos de aguas residuales y
son los protistas los principales responsables de su eliminación. Los resultados del presente trabajo demuestran la existencia de una predición diferencial por parte de la comunidad de protistas del rio Brutón. Entre los factores que influyen en
este proceso el tamaño, la morfología y el origen de las presas no fueron determinantes mientras que el tipo de pared si lo fue, siendo las bacterias Gram negativas más fácilmente eliminadas. Ademas, el proceso de eliminación estuvo condicionado por
la digestión, la cual implicó la mayor eliminación de bacterias como A.hydrophila y la menor en Ent. faecalis. En el análisis de la primera fase que tiene lugar en el proceso de eliminación o fase de respuesta se utilizó como modelo de estudio el
ciliado Uronema nigricans. Los resultados indicaron que el valor nutricional y los compuestos químicos excretados por las presas son los factores más importantes que determinan el comportamiento selectivo del ciliado. LA VIRULENCIA EN KLEBSIELLA PNEUMONIAE: MOLECULAS IMPLICADAS. Autor: RUBIRES FERRER FRANCESC XAVIER. Año: 1998. Universidad: BARCELONA. Centro de lectura: BIOLOGIA.
Resumen: Klebsiella
pneumoniae es un patógeno nosocomial de elevada incidéncia clínica. La presente tesis doctoral está estructurada en dos partes. La primera se basa en el estudio de los mecanismos de captura de hierro no dependientes de sideróforos en K. pneumoniae.
La segunda se basa en la búsqueda de una vacuna efectiva contra las infecciones provocadas por K. pneumoniae. Se describe un nuevo mecanismo, no descrito en K. pneumoniae de captura de hierro por interacción directa entre las ferriglicoproteínas:
transferrina y lactoferrina, y el compuesto del grupo hemo: hemoglobina, con los receptores específicos de la membrana externa Iuta y FepA.
IutA es también receptor para el sideróforo de aerobactina de codificación plasmídica y presente en las cepas más virulentas.
FepA es también receptor para el sidercofor de enterobactina, de codificación cromosómica y presente en todas las Enterobacteriaceae.
Se presenta también el estudio de la efectividad de diferentes vacunas bacterianas inactivadas, utilizando una mezcla de los distintos antígenos o del lipopolisacárido, proteinas de la membrana externa, proteínas de elevado peso molecular de la
membrana externa de K. pneumoniae, y proteína IutA purificada de K. pneumoniae 52145; como agentes inmunógenos.
Finalmente se ha encontrado una vacuna efectiva basada en la expresión del gen IutA de E. coli. Dicha vacuna es una vacuna de ADN que presenta la ventaja de estimular, a diferéncia de las vacunas clásicas, tanto la inmunidad celular como la
humoral. DIVERSIDAD GENETICA Y VARIACION ANTIGENICA EN EL GENERO BORRELIA . Autor: MARTI RAS NURIA. Año: 1998. Universidad: AUTONOMA DE
BARCELONA. Centro de lectura: VETERINARIA.
Resumen: Las bacterias pertenecientes al género Borrelia son responsables de dos tipos de
patologías en el hombre y en el animal. Dentro del complejo Borrelia burgdorferi sensu lato se incluyen los agentes etiológicos de la borreliosis de Lyme considerada la enfermedad de transmisión vectorial más frecuentemente diagnosticada en las
zonas templadas del globo terrestre. Una segunda entidad nosológica causada por el género Borrelia es la borreliosis de fiebres recurrentes.
En esta tesis nos hemos interesado en dos aspectos del género Borrelia, en su diversidad genética y relaciones filogénicas, así como en el fenómeno de variación antigénica que sufren distintas especies pertenecientes a este género.
La peculiar distribución geográfica de B. burgdorferi sensu lato en los dos contienentes separados por el Océano Atlántico nos ha llevado ha establecer una hipótesis del proceso de especiación y migración de éste. Previos estudios moleculares
muestran la estrecha relación entre las cepas americanas y europeas de B. burgdorferi sensu stricto, sugiriendo un ancestro común americano. En este estudio hemos confirmado este hecho y establecido una hipótesis de cuando y como ha ocurrido la
migración entre los dos continentes.
Un segundo aspecto abordado en esta tesis ha sido el análisis taxonómico y filogénico de Borrelia de fiebres recurrentes, así como el desarrollo de un método simple de identificación de las fiebres recurrentes y su posible utilización en el
diagnóstico.
Finalmente nuestro interés se ha centrado en el estudio de la variación antigénica en la lipoproteínas de membrana externa de B. turicatae, el agente de fiebres recurrentes.
Gracias a métodos moleculares hemos podido correlacionar la variabilidad antigénica de las proteínas de membrana con la recombinación genética entre distintos plásmidos lineares. Una nueva variante antigénica ha sido caracterizada y asociada a
la invasión del sistema nervioso central en etapas iniciales de la infección experimental. DETECCION DE MICROORGANISMOS DE CONTAMINACION FECAL Y SU RELACION CON SALMONELLA EN AGUAS DE BAÑO
DE CATALUÑA. Autor: POLO RODRIGUEZ FRANCESC LLUIS. Año: 1998. Universidad: ROVIRA I VIRGILI. Centro de lectura: MEDICINA
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Resumen: La contaminación fecal de las aguas naturales está
adquiriendo en los últimos años una importancia creciente. La aplicación de la Directiva Comunitaria para las aguas de baño requiere la evaluación de una serie de parámetros microbiológicos (coliformes y estreptococos fecales) considerados
indicadores de contaminación fecal. Uno de los objetivos ha sido evaluar las metodologías descritas en el Standard Methods para la detección de estos indicadores. Nuestros resultados demuestran la escasa fiabilidad de los medios y métodos comúnmente
utilizados en la detección de coliformes totales y coliformes fecales. Respecto a los estreptococos fecales la transferencia de membrana desde el medio m-Enterococcus (m-Ent) al medio BEA corrige la baja especificidad del medio m-Ent en comparación
con el procedimiento recomendado por el Standard Methods. El medio OAA, recientemente descrito, resultó más eficiente que el m-Ent en agua dulce y marina presentando la ventaja adicional de no requerir confirmación. Otro de los objetivos ha sido
evaluar la relación entre los indicadores y Salmonella en aguas de baño. La detección de Salmonella resultó altamente variable. Es de destacar su presencia cuando los nieveles de indicadores son bajos. Salmonella ententidis, el serotipo más
frecuente en clínica, lo fué también en aguas recreacionales.
Como último objetivo se ha efectuado un estudio un estudio crítico de la Directiva Comunitaria y se constata que los indicadores y sus estándares numéricos deben ser revisados en futuras propuestas. LA TUBERCULOSI A LES PRESONS DE L'AREA DE BARCELONA. Autor: MARCH VALLVERDU FRANCESCA. Año: 1998. Universidad: AUTONOMA DE
BARCELONA. Centro de lectura: CIENCIAS.
ESTUDIO DE LA DIVERSIDAD DE LAS POBLACIONES DE GENEROS MINORITARIOS DE ACTINOMICETES, DESARROLLO DE
TECNICAS MOLECULARES PARA SU DETECCION, AISLAMIENTO E IDENTIFICACION. Autor: MORON HODGE
RAQUEL. Año: 1998. Universidad: ALCALA. Centro de lectura: CIENCIAS.
Resumen: Las Técnicas moleculares que se han desarrollado en los
últimos años permiten plantear el diseño de nuevas herramientas para abordar el estudio y la caracterización de nuevos microorganismos obtenidos del entorno. Entre ellos figuran los actinomicetos pertenecientes a la familia Pseudonocardiaceae cuya
extensa diversidad morfológica y la dificultad que presenta su caracterización taxonómica justifican el planteamiento de un abordaje alternativo que permita la identificación inequívoca de un elevado número de cepas.
Este trabajo ha planteado el diseño de oligonucleótidos a partir de la información obtenida del análisis comparativo de las secuencias del ARN 16S de cinco géneros de la familia Pseudonacardiaceae: >accharomonospora, Saccharopolyspora,
Pseudonocardia, Amycolatopsis y Saccharothrix. La caracterización de la especificidad de estas parejas de oligonucleótidos se ha realizado mediante experimentos de amplificación con el ADN genómico de cepas de referencia, lo que permite evaluar su
utilización en la identifiación de las cepas pertenecientes a dichos géneros a partir de un grupo de cepas salvajes. Posteriormente se ha estudiado la diversidad de secuencias que las parejas de oligonocleótidos son capaces de detectar dentro de
cada género y se han caracterizado quimiotaxonómicamente las cepas en estudio mediante el análisis de ácidos grasos.
Como abordaje alternativo a la amplificación se ha estudiado la aplicación de los oligonucleótidos específicos de género como sondas de hibridación a ácidos nucleicos en condiciones de marcaje no radiactivo, lo que representa una herramienta
adicional aplicable al estudio de elevados números de cepas.
Finalmente, se ha abordado la aplicación de las sondas para la detección de miembros de estos géneros a partir de ácidos nucleicos extraidos de muestras de tierra, un primer paso hacia el aislamiento monitorizado de nuevas cepas y hacia el
estudio de la distribución in situ de los diferentes miembros de la familia Pseudonocardiaceae.# MECANISMOS DE RESISTENCIA A QUINOLONAS FLUORADAS EN STAPHYLOCOCCUS AUREUS. IMPLICACION DE LA
PRESENCIA DE MUTACIONES EN LOS GENES GYRA, GYRB, GRLA Y NORA, Y DE LA EXISTENCIA DE BOMBAS DE FLUJO. Autor: ALONSO MANZANARES M. ANGELES. Año: 1998. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: FARMACIA.
Resumen: Las fluoroquinolonas constituyen uno de los
avances más importantes realizados en los últimos años en el campo de los antimicrobianos. Se trata de moléculas que prestan un amplio aspecto de actividad que incluyen a Staphylococcus aureus. Los mecanismos de resistencia a fluoroquinolonas en
este microorganismo se producen por mutaciones en las topoisomerasas y por mecanismos de flujo activo.
Objetivos: Se estudio la implicación de los mecanismos de resistencia antes mencionados en cepas clínicas de Staphylococcus aureus, con el fin de conocer su repercusión en la utilización de las nuevas fluoroquinoloras de 3 y 4 generación.
Materiales y Métodos: Se utilizaron 100 cepas clínicas de Staphylococcus aureus con diferentes niveles de resistencia a quinolonas. Sigueindo las normas del NCCLS se determinó su sensibilidad a 23 fluoroquinolonas. Todas las cepas fueron
sometidas al análisis de polimorfismos estructurales de cadena sencillas (SSCP) para los genes gyrA,gyrB,grlA y norA. A continuación se secuenciaron varias cepas de los distintos patrones obtenidos con el fin de determinar las mutaciones implicadas
en la resistencia. Aquellas cepas que presentaban mutaciones en el promotor de gen norA, se les realizó estudios de mecanismos de flujo activo.
Resultados:
Fenotipo Promotor Ciprofloxacino
Grupo GyrA GrlA norA CMI50 CMI90 Frecuencia
1A silvestre silvestre silvestre 0.25 1 37
1B silvestre silvestre T->G(-89) 0.25 0.25 1
1C silvestre silvestre A->AA(-99) 1 1 1
2 Val-104-Ile silvestre silvestre 4 4 1
3A silvestre Ser-80-Phe silvestre 2 2 3
3B silvestre Glu-86-Lys silvestre 2 2 2
4A Ser-84-Leu Ser-80-Phe silvestre 8 16 50
4B Ser-84-Leu Ser-80-Phe T->G(-89) 128 128 1
4C Ser-84-Leu Ser-80-Tyr silvestre 8 8 3
4D Ser-84-Leu Glu-86-Lys silvestre 4 4 1
Tabla 1: Los distintos fenotipos de GyrA y GrlA y el genotipo del promotor norA obtenidos para los 100 de Staphylococcus aureus.
Conclusiones: La mutación en el promotor del gen norA, parece modificar la sensibilidad a las fluoroquinolonas siendo su efecto mayor frente a las moléculas más hidrofílicas. El fenotipo 2, presenta una mutación que no había sido descrita con
anterioridad a este trabajo y que además aparece de forma aislada, lo que además de ser un hecho muy infrecuente, dio lugar a incrementos en las CIMs mayores que las mutaciones aisladas en grlA, que se traduciían en resistencia a las moléculas de la
2a generación. Todas las cepas que presentaban doble mutación se mostraron resistentes a las fluoroquinolonas más antiguas y el grado de afectación de las quinolonas más nuevas dependía de la molécula de que se trate.# OPTIMIZACION DE TECNICAS PARA EL ANALISIS DE PIGMENTOS Y ACIDOS GRASOS DE BACTERIAS FOTOTROFICAS
DEL AZUFRE . Autor: NUÑEZ CARDONA M. TERESA. Año: 1998. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE CATALUÑA.
Resumen: En este documento se estudia la utilidad de las
características pigmentarias y la composición de los ácidos grasos en la quimiotaxomía de las bacterias fototróficas.
Se hizo una comparación de seis técnicas diferentes para obtener el espectro de abseroción in vivo de diferentes micoorganismo fotosintéticos. A partir de los resultados de este ensayo se seleccionó una de estas técnicas para utilizarla de
forma rutinaria.Se obtuvieron los espectros de absorción in vivo características de diversas cepas silvestres de microorganismos fotosintéticas.
Para conocer la composición de los ácidos grasos de cuarenta cepas de las familias Chromatiaceae y Cholorbiaceae se aplicó una técnica por saponificación y los ácidos grasos en forma de metil éstres se analizaron por cromatografía de
gases-espectrometría de masas. Todas las cepas analizadas se cultivaron en las mismas condiciones y la composición del medio de cultivo en todos los casos fue la mismas.
Los análisis de este ensayo revelan que los ácidos grasos de las Chromatiaceae estan dominados por el C16:0, C16:1, C18:1. En el caso de las cepas de la familia Chlorobiaceae, sus ácidos grasos mayoritarios son el C16:0, C16:1 y C14:0.
De manera general, las diferencias detectadas en la composición de los ácidos grasos de las bacterias fotógrafas aquí analizadas están en común de acuerdo con sus propiedades pigmentarias.
Ambos caracteres pueden considerarse de gran valor para la caracterización e identificación de las familias Chromatiaceae y Chromatiaceae. CARACTERIZACION DE CEPAS DE LACTOBACILLUS DE ORIGEN HUMANO PARA SU POSIBLE USO COMO
PROBIOTICOS. Autor: BORIS ALVAREZ SOLEDAD. Año: 1997. Universidad: OVIEDO. Centro de lectura: MEDICINA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA FUNCIONAL
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Resumen: Se seleccionaron tres especies de lactobacillus de origen
vaginal: L.acidophilus, L.gasseri y L.jensenii con capacidad de autoagregación y adherencia a células vaginales, que impiden la adherencia de microorganismos patógenos como C.albicans y G.vaginalis. Producen sustancias antimicrobianas como H2 O2 y
ácido láctico, siendo éste último el inhibidor "in vitro" del crecimiento de patógenos oportunistas como E.coli y S.agalactiae.
Un estudio similar se realizó con una cepa de L.delbrueckii ssp. lactis aislada de heces de niños, resistente al ácido y las sales biliares y que se adhiere a células intestinales. Produce inhibidores como H2 O2, ácido láctico y una bacteriocina
e impide el crecimiento "in vitro" de S.choleraesuis serotipo Enteritidis, Y.enterocolitica, E.coli enteropatógena Olll y Cl.perfringens. ANALISIS DE LAS CARGAS DE TRABAJO Y COSTES DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA. Autor: BREZMES VALDIVIESO M. FELIPA. Año: 1997. Universidad: VALLADOLID. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA PATOLOGICA, MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.
Resumen: Introducción y Objetivos: La
implantación de modelos de gestión empresarial y control del gasto en nuestros hospitales ha condicionado que el laboratorio de microbiología deba conocer el coste real y la rentabilidad de los distintos productos que genera. Por ello nos propusimos
confeccionar el Catálogo de Productos del Laboratorio de Microbiología, analizar las cargas de trabajo y costes (directos e indirectos) de cada uno de ellos, estimar su rentabilidad, sus variaciones temporales, así como el consumo y costes de
productos microbiológicos por servicios y procesos.
Material y Métodos: Para contestar a estos objetivos estudiamos todas las determinaciones analíticas realizadas en el Laboratorio de Microbiología del Hospital Virgen de la Concha de Zamora durante los años 1995 y 1996 (73.192 determinaciones).
Asignamos cargas de trabajo para cada producto definido (combinación muestra - determinación solicitada - técnica - tipo de resultado), basándonos en una adaptación del método del College of American Pathologists (CAP versión 1992).
Asimismo calculamos sus costes directos de material fungible y laborales, y la parte correspondiente del resto de los costes del laboratorio. Para poder calcular el consumo y coste por procesos analizamos también todos los ingresos hospitalarios
del mismo bienio, incluidos en las bases de datos del Servicio de Admisión (26.247), que clasificamos por sus diagnósticos principales (CIE-9MC) y sus Grupos Relacionados con el Diagnóstico (GRD 3M/MEDIGES, versión 10).
Resultados y Discusión: Nuestro laboratorio atendió una demanda mayoritariamente hospitalaria, predominando los servicios médicos sobre los quirúrgicos. La carga de trabajo media por determinación fué de 14,64 Unidades de Tiempo (UT). El
urocultivo fué el producto más frecuentemente solicitado. Entre las determinaciones más frecuentes, las de mayor carga de trabajo fueron, por orden decreciente, los estudios de parásitos, los coprocultivos, los cultivos de exudados y los cultivos de
micobacterias. El coste medio por Producto Definido fué en nuestro laboratorio 2.671 pesetas, el coste medio del urocultivo (unidad relativa de valor), alcanzó las 2.262 pesetas, con una importante diferencia en función de su resultado (urocultivo
negativo: 1.785; positivo: 4.934).
Entre los productos más frecuentes pudimos diferenciar varios grupos en función de su rentabilidad (bajo coste por positivo): productos de rentabilidad aceptable (cultivo de esputo, exudado amigdalar, urocultivo y exudado vaginal), productos de
rentabilidad intermedia (hemocultivos y coprocultivos) y productos de baja rentabilidad (examen de parásitos en heces y cultivo de micobacterias en productos contaminados). Al menos una cuarta parte de los ingresos hospitalarios contaban con alguna
determinación microbiológica, generando una carga de trabajo media de 52,9 UT (rango: 11 a 222 UT) y un coste medio de 10.194 pesetas. El GRD con mayor coste por proceso fué el correspondiente a "Infecciones Relacionadas con el Virus de la
Inmunodeficiencia Humana y/o Uso de Opioides" (GRD 708), cuyo coste medio fué 41.713 pesetas. PSEUDOMONAS SYRINGAE PV. SYRINGAE, AGENTE CAUSAL DE LA NECROSIS APICAL DEL MANGO. ECOLOGIA Y
CARACTERIZACION BACTERIOLOGICA Y MOLECULAR. Autor: CAZORLA LOPEZ FRANCISCO MANUEL
. Año: 1997. Universidad: MALAGA. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA
PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y PATOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: Pseudomonas syringae
pv. syringae es el agente causal de la necrosis apical del mango Dicha enfermedad se asocia con la presencia de altos niveles de P. syringae y con bajas temperaturas y alta humedad. La activada nucleadora de hielo no parece estar implicada en el
desarrollo de los síntomas de esta enfermedad en la zona de estudio.
Su tratamiento con productos fitosanitarios comerciales debe estudiarse más a fondo. Se ha puesto de manifiesto la presencia de una toxina antimetabolito en las cepas de P. syringae no descrita hasta el momento y que constituye el factor de
virulencia más importante de dichas cepas bacterianas.
Las cepas de P. sringae pv. syringae aisladas tanto desde tejidos sanos como desde tejidos afectados por la necrosis apical del mango, presentan patrones de hibridación con un plásmido mayoritariamente detectado (65 Kb) y con su patrón de
fragmentos de restricción, usando diversas secuencias como sondas específicas, que es característico de los distintos orígenes geográficos de aislamiento, pruebas que pueden tener valor epidemiológico. RESPUESTA INMUNITARIA HUMORAL EN LA BRUCELOSIS HUMANA Y SU UTILIDAD PARA EL DIAGNOSTICO
SEROLOGICO. Autor: CUERVO ABARQUERO MILAGROS. Año: 1997. Universidad: VALLADOLID. Centro de lectura: MEDICINA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA PATOLOGICA, MICROBIOLOG.,MED.PREV.Y S.PUBL.Y TOX. PROGRAMA DE
DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.
Resumen: La brucelosis es una zoonosis ampliamente difundida en algunas regiones del mundo, que persiste a pesar de los esfuerzos realizados para su erradicación y cuyas repercusiones socio-económicas son muy importantes. Esta enfermedad presenta
una clínica muy polimorfa y plantea grandes problemas de diagnóstico diferencial. Además el aislamiento de Brucella es difícil y esto hace que el método de diagnóstico de laboratorio más extendido sea el diagnóstico serológico. Uno de los aspectos
de este trabajo trata de conocer la relación entre las pruebas serológicas clásicas y los sistemas diagnósticos basados en el enzimoinmunoensayo (EIA). También se intenta conocer la respuesta de las subclases de IgG específica frente a Brucella y la
avidez de las IgG específicas en las diferentes formas evolutivas de la brucelosis humana.
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