BACTERIOLOGIA, 5

Autor: GARCIA SAENZ M CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PREVENTIVA, SALUD PUBLICA Y MICROBIOLOGIA MEDICA.

Resumen: El objetivo del presente trabajo fue valorar la adherencia de Staphylococcus epidermidis productores y no productores de slime a diferentes lentes de contacto blandas y lentes intraoculares, debido a la amplia y creciente utilización de ambos tipos de lentes, la implicación de S. epidermidis en patología ocular y la capacidad de este organismo para producir slime. Los resultados obtenidos demuestran que las cepas utilizadas, tanto productoras como no productoras de slime se adhieren a todos los tipos de lentes intraoculares y de contacto estudiadas, aunque, cuantitativamente la adherencia de la cepa productora es superior a la de la no productora. Las variables con influencia en la adherencia más importantes son el material, la ionicidad de superficie grado de hidratación y homogeneidad de superficie, dependiente éste último del método de fabricación de la lente.

Autor: GUERRA ROMAN BEATRIZ.
Año: 1997.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA FUNCIONAL.

Resumen: Se valoraron técnicas genéticas basadas en el análisis de fragmentos de restricción del ADN cromosómico: REA-tipificación, PFGE-tipificación realizada con XbaI, y ribotipificación con HincII, BglI, SalI, PvuII y EcoRI, como métodos de tipificación sobre una serie de 72 cepas de Salmonella enterica serotipo Typhimurium y su posterior correlación con biotipificación, fagotipificación y resistencia a antimicrobianos. La REA-tipificación no se mostró como un buen método por bajo índice de discriminación (ID), y dificultad de interpretación de resultados. Mediante PFGE, utilizando las bandas mayores de 100 kb como criterio de separación, se definieron 26 pulsotipos, con un ID=0,87. El dendrograma de relación genética entre pulsotipos mostraba tres "clusters" y dos ramas independientes a un nivel de similitud de 0,7. Sólo las ERs HincII, SalI y PvuII se mostraron apropiadas para la ribotipificación: 13, 9 y 9 ribotipos, respectivamente, e IDs de 0,81, 0,53 y 0,59. Al combinar resultados (esquema de "ribotipificación a tres vías"), el número de ribotipos combinados (RTCs) fué de 20, aumentando el ID a 0,84. En el dendrograma de relación genética, a un nivel de similitud de 0,78, todos los RTCs de Typhimurium quedaban agrupados en un único cluster. Ambos métodos permitían la diferenciación de cepas adscritas a los fagotipos más frecuentes y de las no fagotipificables. Se encontró cierta correlación entre los tres métodos (PFGE-tipificación, ribotipificación a tres vías y fagotipificación). La combinación de resultados de PFGE-tipificación, "ribotipificación a tres vías" y fagotipificación diferenció 46 líneas clonales, 42 de ellas presentes en Asturias; las tres líneas más frecuentes pueden considerarse endémicas, por incluir organismos patógenos recogidos a lo largo de la última década. Otras líneas parece que tienen menor incidencia en la salmonelosis humana.

Autor: HERRERA CERVERA JOSE ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA DEL CRECIMIENTO Y DESARROLLO EN PLANTAS SUPERIORES.

Resumen: Existe un gran interés por el estudio de los sistemas simbióticos fijadores de nitrógeno y desde hace tiempo las bacterias han sido utilizadas como inoculantes de leguminosas para incrementar su producción llevandose a cabo manipulaciones genéticas que incrementen la eficiencia de las mismas. La capacidad para predecir las consecuencias de la liberación de organismos manipulados genéticamente (GMOs) se ve limitada por la posibilidad de que el intercambio genético entre el GMO y las poblaciones indígenas pueda generar nuevas combinaciones genéticas. Este intercambio puede realizarse mediante varios mecanismos, tales como procesos de transducción de ADN, transformación con ADN libre procedente del inoculante y, la mas frecuente, transferencia por conjugación mediada por plásmidos. Existe actualmente un gran esfuerzo dirigido a la construcción de GMOs con una reducida capacidad para actuar como "donadores genéticos". Desde el punto de vista de bacterias de interés agronómico esto puede llevarse a cabo limitando la supervivencia del inoculante en el suelo o bien limitando su capacidad de actuar como donador genético. Las bacterias del género Rhizobium poseen de forma general, uno o varios plásmidos, algunos de los cuales, los llamados plásmidos simbióticos (pSym), son esenciales para el establecimiento de la asociación simbiótica con su leguminosa específica. Además de los pSyms, muchas cepas bacterianas de probada eficiencia simbiótica poseen plásmidos adicionales, denominados generalmente como crípticos, y que sin ser esenciales para la simbiosis, si pueden influenciar de forma importante el comportamiento simbiótico de la cepa que los contiene. Muchos de estos plásmidos crípticos son muchas veces autotransmisibles por procesos de conjugación, o bien pueden actuar como plásmidos auxiliares en la conjugación y transferencia intra e interespecífica de plásmidos que no son conjugativos. Este es el caso de los plásmidos no pSym de la cepa GR4 de R. meliloti, denominados pRmeGR4a (de 115 MDa) y pRmeGR4b (140 MDa). En estudios de transferencia genética horizontal llevados a cabo usando la cepa GR4 como donadora y diversos aislados nativos de un suelo como receptores, en experimentos de microcosmos, se ha podido constatar que la transferencia de los plásmidos no simbióticos de dicha cepa es indetectable, a pesar que potencialmente todos los aislados nativos pueden actuar como receptores de estos plásmidos. Existen factores, de tipo nutricional, que afectan la transferencia de los mismos, y por tanto han podido dificultar la detección de la transferencia. Sin embargo, el potencial de transferencia de R. meliloti GR4 es mayor de lo que se pensaba y además dicho potencial abarca todo su genoma y no sólo a los plásmidos transmisibles, pues dicha cepa posee varios orígenes de transferencia que, potencialmente, pueden servir como inicio de transferencia conjugativa.

Autor: LUQUE LARA ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA MICROBIANA.

Resumen: En base a los resultados de caracterización del grupo de cepas de Vibrio P1 realizados hasta la actualidad, se planteó este trabajo con la necesidad de llevar a cabo estudios de caracterización más completos y precisos para la inclusión taxonómica de este microorganismo patógeno. Para ello se plantearon los siguientes objetivos: 1-Realización de una caracterización fenotípica y genética para establecer si Vibrio P1 es una nueva especie de Vibrio. Esta caracterización se llevó a cabo mediante estudios de caracterización morfológica y bioquímica, análisis de taxonomía numérica, determinación del porcentaje de G+C, hibridación ADN-ADN y secuenciación del ARNr 16S. 2-Estudio de la variación entre las cepas de Vibrio P1 aisladas de diferentes zonas geográficas. Para ello se llevaron a cabo estudios de los perfiles de biotipado, resistotipado, serotipado, actividad enzimática de los productos extracelulares, inhibición del crecimiento por cepas de Vibrio sp., análisis de los componentes de membrana externa, análisis plasmídico, análisis de restricción del ADN cromosómico y ribotipado. En base a los resultados obtenidos se pudo concluir: 1 El grupo de Vibrio P1 es diferente de cualquier otra especie del género Vibrio, a la que se ha denominado Vibrio tapetis, siendo la cepa B1090 la seleccionada como cepa tipo (CECT 4600). 2. El análisis del ARNr 16S indica que V. tapetis es una especie filogenéticamente cercana a V. splendidus. 3. Los análisis serológicos, perfiles electroforéticos de proteínas de membrana externa y lipopolisacáridos han podido permitir establecer la existencia de dos grupos en V. tapetis, confirmados con los análisis electroforéticos en campo pulsante y ribotipado. En base a sus diferencias bioquímicas, serológicas y genéticas, la cepa 0202RD puede constituir un subgrupo diferente de esta especie. 4. La técnica de electroforesis en campo pulsante de fragmentos de restricción del ADN genómico, ha permitido establecer variaciones intraespecíficas dentro de la especie V. tapetis. Estas variaciones no se han podido relacionar con el origen de aislamiento.

Autor: NOGUES BIAU ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: LLEIDA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIES MEDIQUES BASIQUES PROGRAMA DE DOCTORADO: FUNDAMENTOS BIOLOGICOS DE LA SALUD.

Resumen: La aplicación de la PCR al diagnóstico de las enfermedades infecciosas viene siendo una realidad en los últimos años. No obstante, su aplicación como instrumento diagnóstico rutinario en los laboratorios clínicos requiere de la adecuación de la técnica a las características peculiares de estos laboratorios que necesitan procesar un elevado número de muestras y dar respuesta en el menor tiempo posible a múltiples situaciones clínicas. El objeto de este estudio es encontrar y evaluar un diseño de diagnóstico por PCR que permita conjugar las ventajas de las técnicas de amplificación con las necesidades y características de un laboratorio clínico. Con esta finalidad hemos escogido una serie de patologías infecciosas que consideramos importantes y frecuentes en medio hospitalario (infecciones respiratorias, tuberculosis, infecciones bacterianas del SNC, infecciones en inmunodeprimidos), así como otras patologías menos frecuentes pero cuyo diagnóstico está cubierto deficitariamente por la Microbiología tradicional. Sobre este tipo de pacientes hemos aplicado y evaluado la PCR como técnica diagnóstica utilizando aquellas metodologías y equipamientos que se adaptan mejor a las características de un laboratorio clínico. Los resultados obtenidos demuestran que la PCR, en el nivel de desarrollo en que se encuentra actualmente, mejora en todos los casos el diagnóstico obtenido por los métodos clásicos, aporta en ocasiones un método diagnóstico alternativo mucho más sencillo y rápido que aquellos, ofrece los resultados en un tiempo útil para el clínico y todo ello puede conseguirse sin alterar la actividad rutinaria del laboratorio ni los presupuestos ordinarios del mismo.

Autor: PELAZ ANTOLIN CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA II PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: La Legionelosis está considerada como una enfermedad bacteriana de origen ambiental por lo que cuando se aborda su estudio nos interesa tanto el paciente como el entorno ambiental del enfermo, como origen de la enfermedad. Esta Tesis pretende la comparación de aislados de enfermos con aislados recuperados de las supuestas fuentes de infección, mediante la aplicación de técnicas de tipificación (anticuerpos monoclonales, electroforesis en campo pulsante (PFGE) con dos enzimas y PCR arbitraria) para poder establecer su posible relación microbiológica. Se analizan 297 aislados de Legionella recuperados de enfermos y de ambiente, dividiéndolos según su implicación en infección comunitaria u hospitalaria y según su relación con brotes epidémicos, casos agrupados y casos esporádicos. Se analizan en profundidad dos episodios concretos: el brote de Alcalá de Henares, como ejemplo de brote comunitario y el seguimiento ambiental a lo largo de 14 años de un edificio asociado a casos. La PFGE con cualquiera de las dos enzimas se mostró como la técnica más discriminatoria.

Autor: RANILLA LOPEZ FELIPE.
Año: 1997.
Universidad: ALCALA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA.

Resumen: La enfermedad de Lyme está producida por una bacteria denominada Borrelia burgdorferi que es transmitida a través de la picadura de una garrapata que en nuestro país se ha identificado como I. ricinus. Nuestro objetivo ha sido determinar la existencia de esta infección en España y conocer la posible existencia de zonas endémicas. Para ello hemos analizado una muestra de 2.415 sueros procedentes de 23 centros sanitarios, pertenecientes a 17 provincias. En el análisis de estos sueros se utilizó la técnica de inmunofluorescencia indirecta para lo cual empleamos un conjugado de gammaglobulina de conejo antihumana marcada con fluoresceína. De total de sueros analizados, 103 fueron positivos, es decir un 4,26%. Todos los positivos fueron titulados y se les realizó una prueba de hemaglutinación frente a treponema pallidum. El rango de positividad entre las diferentes provincias osciló entre el 1% y el 10%. El menor porcentaje de seroprevalencia correspondió a Valencia y Cáceres, mientras que se obtuvieron las cifras mas elevadas en Granada y Zaragoza. Podemos concluir afirmando la existencia de la infección en nuestro país y a pesar de que los resultados muestran una cierta homogeneidad, existen zonas que se podrían considerar como endémicas, mientras que en otras la baja permanencia encontrada no permite confirmar este hecho en ellas.

Autor: RODRIGUEZ ARIAS M. COVADONGA.
Año: 1997.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 275 A.

Resumen: El objetivo del presente trabajo fue el desarrollo de un método de detección e identificación de Vibrio vulnificus rápido y específico mediante "Nested-PCR" y su posterior aplicación a diferentes ecosistemas y tipos de muestras, así como la tipificación de cepas de dicha especie procedentes de diferentes orígenes geográficos. El sistema de "Nested-PCR" permitió detectar V. vulnificus en muestras ambientales en menos de 24 h. La mejor estrategia para aislar V. vulnificus de muestras procedentes del Mediterráneo consistió en realizar un breve preenriquecimiento (APA 3% NaC1) y una posterior incubación sobre medio selectivo (CPC). Las colonias presuntivas fueron confirmadas mediante amplificación específica por PCR. Esta técnica permitió poner de manifiesto por primera vez la presencia de V. vulnificus en muestras del Mediterráneo. La tipificación fenotípica no ha respaldado la separación de la especie en dos biotipos. El análisis serológico y genético ha separado claramente las cepas pertenecientes al serovar E. Las tres técnicas genético-moleculares empleadas han permitido diferenciar subgrupos dentro del serovar E, comprobándose que las epizootias ocurridas en la piscifactoría fueron causadas por diferentes clones. La técnica AFLP se mostró como la más discriminativa.

Autor: URIEL VELILLA JOSE ANGEL.
Año: 1997.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA, MEDICINA PREVENTIVA Y SALUD PUBLICA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA .

Resumen: Hemos estudiado la sensibilidad antibiótica de 300 cepas de Streptococcus pneumoniae frente a 6 macrólidos: eritromicina, claritromicina, azitromicina, espiramicina, josamicina, y miocamicina mediante disco-placa y CMI por dilución en agar, y frente a penicilina y clindamicina MEDIANTE CMI por microdilución en caldo. Las cepas han sido serogrupadas y se ha realizado un análisis estadístico para ver la asociación entre la sensibilidad y el serogrupo. El análisis estadístico se llevó a cabo mediante las técnicas de comparación de X2 de Pearson. Hemos realizado pruebas mediante discos para ver la inducción de resistencia de los macrólidos de 14, 15 y 16 átomos. También comparamos los serogrupos con resistencia a macrólidos y penicilina con los que componen la vacuna antineumocócica, viendo la cobertura de esta vacuna en nuestro medio y concluyendo que las vacunas en fase de investigación deben tener en cuenta los serogrupos en fase de investigación deben tener en cuenta los serogrupos en los que aparece asociación con la resistencia a macrólidos y penicilina.

Autor: ALBA CARBALLO M. ITZIAR.
Año: 1997.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPRIMENTALES.

Resumen: En la tesis que lleva por título "estudio y aislamiento de los cuerpos fibrocristalinos presentes en Archaeas halófilas" se incia el estudio de unas estructuras descritas en Halobacterium halobium (ahora H. salinarium) inicialmente por Cho y col. en 1967 y posteriormente por Robertson y col. (1982). Estos estudios aportaron tan solo la descripción morfológica del especto que presentaban al observar secciones ultrafinas de H. halobium mediante microscopía electrónica de transmisión. En este trabajo de Tesis Doctorales se ha desarrollado un método que permite el aislamiento de estas esctructuras tanto en H. salinarium como en varias especies de archaeas halófilas extremas. Esto ha sido indispensable para inciar la purificación de los Cuerpos Fibrocristalinos y estudiar su comportamiento "in vitro" frente a diferentes agentes tanto físico como quúmicos. Por otro lado, se ha iniciado el estudio de su posible función biológica. Los resultados obtenidos hasta el momento apuntan hacia una posible relación de estas estructuras conla división celular de las archaeas halófilas.

Autor: SOLANO GOÑI CRISTINA.
Año: 1997.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: El objetivo de este estudio fue la diferenciación invitro de aislamientos de Salmonella enteritidis cuya virulencia se diferenció en un modelo de infección en pollos recién nacidos, infectados intraperitonealmente. Los aislamientos se pudieron dividir en dos grupos dependiendo de la DL50 en el anterior modelo animal. Cuando estas cepas fueron incubadas en un medio deficiente en nutrientes esenciales, ATM (Adherence Test Medium), sólo las cepas de alta virulencia fueron capaces de formar filamentos visibles, adheridos al vidrio. Estudios de microscopía óptica y electrónica revelaron que las bacterias se encontraban extremadamente agregadas e incluídas en una matriz de naturaleza polisacarídica. Este fenotipo fue independiente del perfil plasmídico, de la estructura del LPS y de la expresión de fimbriae. La virulencia de las cepas se relacionó también con la capacidad de unión al rojo congo, el cual indujo la secreción de la matriz polisacarídica. La integridad de monocapas de células epiteliales Caco-2 se alteró mediante la infección con cepas de alta virulencia, así como con los sobrenadantes de estas cepas tras ser incubadas en condiciones de formación del biofilm, lo cual estaría confirmando las sospechas de la posible existencia de una toxina en S. enteritidis. Los resultados obtenidos sugieren que este biofilm, distinto a los descritos hasta ahora en la literatura, es, en efecto, un factor de virulencia.

Autor: BENGOECHEA ALONSO JOSE ANTONIO.
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INTERFACULTATIVO DE MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR .

Resumen: EN EL GENERO YERSINIA EXISTEN ESPECIES NO PATOGENAS Y PATOGENAS, Y DENTRO DE ESTAS ULTIMAS ESPECIES CON DIFERENTE CAPACIDAD INVASIVA, ASI, LOS BIOGRUPOS PATOGENOS DE Y. ENTEROCOLITICA MUESTRAN UNA CAPACIDAD INVASIVA LIMITADA, Y. PSEUDOTUBERCULOSIS MUESTRA UNA CAPACIDAD INTERMEDIA Y ESTA ES MAXIMA EN EL CASO DE Y. PESTIS, QUE INCLUSO SE MULTIPLICA INTRACELULARMENTE. DADA LA IMPORTANCIA DE LA MEMBRANA EXTERNA (ME) EN LA ECOFISIOLOGIA DE LAS BACTERIAS GRAM-NEGATIVAS, NOS PLANTEAMOS LA HIPOTESIS DE TRABAJO DE QUE LAS DIFERENCIAS EXISTENTES EN EL GRADO DE VIRULENCIA E INVASIVIDAD DE LAS YERSINIAS SE PODRIAN REFLEJAR EN LAS CARACTERISTICAS DE LA ME. PARA EL ESTUDIO DE ESTA HIPOTESIS NOS HEMOS PROPUESTO DOS OBJETIVOS COMPLEMENTARIOS. POR UNA PARTE, ESTUDIAR LA PRESENCIA DE UNA BARRERA EN LA ME FRENTE A LOS AGENTES HIDROFOBICOS, YA QUE AUNQUE ESTA BARRERA ESTA PRESENTE EN LAS ENTEROBACTERIAS MAS ESTUDIADAS, ESTA AUSENTE EN VARIOS PATOGENOS QUE COLONIZAN MUCOSAS (HAEMOPHILUS Y NEISSERIA) Y, AL MENOS, EN UN PATOGENO INTRACELULAR (BRUCELLA). Y, POR OTRA, ESTUDIAR LA ACCION DE AGENTES POLICATIONICOS SOBRE LA ME YA QUE EXISTE EVIDENCIA QUE RELACIONA LA VIRULENCIA DE ALGUNOS PATOGENOS INTESTINALES O INTRACELULARES CON LA RESISTENCIA A ESTOS AGENTES. ADEMAS, SE HA ESTUDIADO EL PAPEL DEL LIPOPOLISACARIDO (LPS) EN LOS FENOMENOS ANTERIORES. LOS RESULTADOS OBTENIDOS DEMUESTRAN QUE LAS MES DE Y. PSEUDOTUBERCULOSIS Y Y. PESTIS FUERON PERMEABLES A LOS AGENTES HIDROFOBICOS, MIENTRAS QUE LAS MES DE LOS BIOGRUPOS PATOGENOS DE Y. ENTEROCOLITICA SOLO FUERON PERMEABLES A ESTOS AGENTES EN CONDICIONES DE DEFICIENCIA DE CA++ EN EL MEDIO DE CULTIVO. EN NINGUN CASO, LAS MES DE LAS CEPAS NO PATOGENAS FUERON PERMEABLES A ESTOS AGENTES. LAS MEDIDAS DE LA FLUIDEZ DE LOS LIPOPOLISACARIDOS DEMOSTRARON QUE SOLO LOS LPSS DE Y. ENTEROCOLITICA TENIAN UNA TRANSICION GEL-CRISTAL LIQUIDO. MIENTRAS QUE LOS LPSS DE Y. PSEUDOTUBERCULOSIS Y Y. PESTIS FORMARON AGREGADOS QUE PRESENTARON UNA MAYOR FLUIDEZ Y NINGUNA TRANSICION DE FASE. SE SUGIERE QUE ESTA REDUCIDA INTERACCION ENTRE LAS MOLECULAS DE LPS EN LA ME FAVORECERIA LA PARTICION DE LOS AGENTES HIDROFOBICOS. A 26 GRADOS C. LA MES DE LAS CEPAS PATOGENAS Y NO PATOGENAS DE Y. ENTEROCOLITICA FUERON MAS RESISTENTES A LOS POLICATIONES QUE LA ME DE ESCHERICHIA COLI. A 37GRADOS C, SOLO LAS MES DE LAS CEPAS PATOGENAS CONTINUARON SIENDO RERSISTENTES A ESTOS AGENTES. ESTA RESISTENCIA FUE TODAVIA COMPARATIVAMENTE MAYOR EN Y. PSEUDOTUBERCULOSIS Y Y. PESTIS, ESPECIALMENTE A 37 GRADOS C. ESTASDIFERENCIAS SE RELACIONARON CON LA DIFERENTE INTERACCION DE LOS POLICATIONES CON LOS LPSS Y CON SU CARGA SUPERFICIAL RELATIVA. FINALMENTE, SE PROPONE QUE EL GENERO YERSINIA LAS VARIACIONES EN LA RESISTENCIA A LOS POLICATIONES Y EN LA PERMEABILIDAD DE LA ME ESTAN RELACIONADAS CON EL GRADO DE VIRULENCIA Y LA CAPACIDAD DE MULTIPLICACION INTRACELULAR.

Autor: ESPLIEGO VAZQUEZ FERNANDO.
Año: 1996.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ASPECTOS BASICOS EN BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: MAS DE DOS TERCIOS DE LA SUPERFICIE TERRESTRE ESTAN CUBIERTOS POR AGUA. EN ESTE ESPACIO, SE HAN DESCRITO MAS DE MEDIO MILLON DE ESPECIES DE ORGANISMOS EUCARIOTAS. LOS ORGANISMOS MARINOS, DEBIDO A SU ESCASO ESTUDIO, SON UNA FUENTE PROMETEDORA DE NUEVOS ACTINOMICETOS PRODUCTORES DE NUEVOS COMPUESTOS CON ACTIVIDAD ANTITUMORAL. EN ESTA TESIS, SE PRESENTA EL PROGRAMA DE AISLAMIENTO DE UN ELEVADO NUMERO DE COLONIAS DE ACTINOMICETOS A PARTIR DE MUESTRAS DE ORGANISMOS MARINOS. SE ANALIZAN LOS RESULTADOS DE AISLAMIENTO EN ESTE TRABAJO, ASI COMO LOS PROCESOS DE SELECCION DE AQUELLAS CEPAS MAS INTERESANTES DESDE EL PUNTO DE VISTA TAXONOMICO Y QUE PRESENTARON ACTIVIDAD ANTITUMORAL EN SUS CALDOS DE CULTIVO. TAMBIEN SE PRESENTAN LOS ESTUDIOS TAXONOMICOS Y DE FERMENTACION DE CUATRO CEPAS, REPRESENTATIVAS CADA UNA DE UN GRUPO DE ACTINOMICETOS, SELECCIONADAS DE ENTRE TODAS LAS AISLADAS. SE PROPONEN DOS NUEVAS ESPECIES NOCARDIOPSIS LEGIONENSIS Y MICROMONOSPORA MARINA. POR ULTIMO, SE PRESENTA EL PROTOCOLO DE EXTRACCION Y ELUCIDACION ESTRUCTURAL DEL METABOLITO ACTIVO PURIFICADO DE LOS CALDOS DE FERMENTACION DE ESTAS CUATRO CEPAS.

Autor: GONZALEZ TORRES CONCEPCION.
Año: 1996.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA MICROBIANA .

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ABORDADO UN ESTUDIO COMPARATIVO DE LA INFECCION POR LAS VIAS ORAL, I.P., E I.V. EN EL RATON CON EL SEROTIPO 09. POR VIA ORAL CAUSA UNA INFECCION DE LA MUCOSA INTESTINAL CON ELIMINACION DE YERSINIAS EN HECES DURANTE UN TIEMPO NO INFERIOR A 15 DIAS, SIENDO NECESARIA PARA LA INFECCION LA PRESENCIA DEL PLASMIDO. POR VIA PARENTERAL, (I.P. E I.V.), LA CEPA PORTADORA DEL PLASMIDO CAUSA UNA BACTEREMIA TRANSITORIA CON COLONIZACION DEL BAZO E HIGADO DESDE DONDE LAS BACTERIAS ALCANZAN LA VESICULA BILIAR Y POR DESCARGA BILIAR LLEGAN A LA LUZ INTESTINAL INSTAURANDO UNA INFECCION ENTERICA SIMILAR A LA PRODUCIDA POR VIA ORAL. LA INFECCION ENTERICA DEL RATON CON IP383 CAUSA PROFUNDAS ALTERACIONES INMUNOLOGICAS. GRAN ESPLENOMEGALIA Y AUMENTOS SIGNIFICATIVOS DE CELULAS T, MACROFAGOS Y CELULAS NULAS. SE INDUCE LA APARICION DE ESPLENOCITOS ADHERENTES CAPACES DE SUPRIMIR LA LINFOPROLIFERACION EN RESPUESTA A MITOGENOS. EN EL TRATAMIENTO DE LA INFECCION ENTERICA MOSTRO EFICACIA CEFTRIAXONA Y CIPROFLOXACINO. PARA LA INDUCCION DE INMUNIDAD PROTECTORA FRENTE A LA INFECCION ENTERICA SE REQUIRIO UNA INFECCION PREVIA CON UNA CEPA VIRULENTA.

Autor: MONTES ROS M. MILAGROSA.
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: LA FIEBRE Q ENFERMEDAD CAUSADA POR COXIELLA BURNETII, CONSTITUYE UN IMPORTANTE PROBLEMA DE SALUD PUBLICA EN GIPUZKOA, DONDE ANUALMENTE SE DIAGNOSTICAN UNA MEDIA DE 80 CASOS. EL 75% DE ELLOS AFECTAN A VARONES, LA MAYORIA SON ADULTOS JOVENES CON EDADES COMPRENDIDAS ENTRE LOS 20 Y 39 AÑOS. CASI EL 80% DE LOS CASOS DE FIEBRE Q SE DIAGNOSTICAN EN LA PRIMERA MITAD DEL AÑO, EPOCA QUE COINCIDE CON LA MAYOR PARIDAD EN EL GANADO. SE HA CONFIRMADO QUE LOS TRABAJADORES DE MATADEROS TIENEN UN ELEVADISIMO RIESGO DE ADQUIRIR LA FIEBRE Q. NO LO TIENEN SIN EMBARGO LAS MATRONAS Y GINECOLOGOS DE GIPUZKOA A PESAR DE ESTAR EN CONTINUO CONTACTO CON PLACENTAS HUMANAS. LAS PERSONAS INFECTADAS CON EL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA, A PESAR DE LO PRECARIO DE SU SISTEMA INMUNE, NO TIENEN MAS PROBABILIDAD QUE LAS PERSONAS NO INFECTADAS CON EL VIH DE ADQUIRIR LA INFECCION POR COXIELLA BURNETTI. SE HA CONSTATADO QUE LA SEROLOGIA SIGUE SIENDO LA PRINCIPAL HERRAMIENTA DIAGNOSTICA, Y QUE EL CULTIVO CELULAR, PESE A LA SIMPLIFICACION QUE SE OBTIENE MEDIANTE EL EMPLEO DE LA TECNICA DEL SHELL-VIAL, TIENE UN BAJO RENDIMIENTO DIAGNOSTICO EN LAS INFECCIONES AGUDAS.

Autor: MOURIÑO GOMEZ MERCEDES.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA AMBIENTAL Y BIOTECNOLOGIA.

Resumen: El gen hha de E. coli fue identificado como un modulador de la expresión de la alfa-hemolisina. La proteína Hha presenta una elevada homología con la proteína YmoA de Versinia enterocolitica que es un modulador de la expresión dependiente de temperatura de la expresión de distintos factores de virulencia de esta especie. Los mutantes hha e ymoA presentan similitudes fenotípicas con los mutantes hns, por lo que se ha sugerido que las proteínas Hha e YmoA también son proteínas que modulan la expresión génica en respuesta a cambios en las condiciones ambientales a través de la modificación de la topología del DNA. En este trabajo se han aportado datos que apoyan la hipótesis de que el efecto de la proteína Hha sobre la expresión de la alfa-hemolisina se puede correlacionar con alteraciones en el nivel de superenrollamiento del DNA. La expresión de los genes hly que codifican la alfa-hemolisina es sensible a condiciones que se sabe que provocan la relajación del DNA como la novobiocina y una mutación en el gen gyrB de la girasa bacteriana. Asimismo, en contra de lo que se creía se ha demostrado que la síntesis de alfa-hemolisina no es constitutiva, sino que además de la osmolaridad, la temperatura y la presión parcial de oxígeno son factores ambientales que regulan la expresión de la toxina. La proteína Hha, al igual que lo hace su homóloga YmoA en la especie Y. enterocolitica, modula la expresión de otros factores de virulencia en E. coli. La proteína Hha ha resultado ser un modulador dependiente de la osmolaridad (en el caso de la alfa-hemolisina) y de la temperatura (en el de la alfa-hemolisina y la adhesina Vir). Además, la propia expresión del gen hha es sensible a las condiciones en las que ejerce su efecto modulador, es decir, a cambios en la osmolaridad y la temperatura. Por último, la construcción de un doble mutante hha hns ha permitido establecer que la mutación del gen hns también provoca un incremento de la expresión de los genes hly similar al que provoca la mutación hha y moderado si se compara con el detectado en el doble mutante hha hns. Este descubrimiento permite afirmar que dos proteinas asociadas al nucleoide (Hha y H-NS) regulan la expresión de alfa-hemolisina en la especie E. coli.

Autor: PALAU PEREZ VICENTE JAVIER.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y ECOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA..

Resumen: SE ANALIZAN 620 EPISODIOS DE BACTERIEMIA PRECOZ (DOCUMENTADA EN LOS PRIMEROS CINCO DIAS DEL SINDROME FEBRIL) OCURRIDAS EN PACIENTES NEUTROPENICOS CON NEOPLASIAS HEMATOLOGICAS. EL PERIODO DE ESTUDIO FUE DESDE 1977 HASTA 1996. EL LUGAR FUE EL SERVICIO DE HEMATOLOGIA DEL HOSPITAL LA FE. SE COMPARAN BACTERIEMIAS MONOMICROBIANAS PRODUCIDAS POR GRAMNEGATIVOS Y POR GRAMPOSITIVOS. SE ANALIZAN SUS DIFERENCIAS, SEGUN SU DISTRIBUCION A LO LARGO DEL PERIODO DE ESTUDIO, SEGUN SUS CARACTERISTICAS INICIALES, SEGUN EL TRATAMIENTO EMPIRICO INICIAL, SEGUN SU EVOLUCION. ASIMISMO, SE REALIZAN LAS MISMAS COMPARACIONES ENTRE LAS BACTERIEMIAS MONOMICROBIANAS Y POLIMICROBIANAS. ENTRE LAS BACTERIEMIAS MONOMICROBIANAS SE ESTUDIARON EN MAYOR PROFUNDIDAD LAS PRODUCIDAS POR STAPHYLOCOCCUS COAGULASA NEGATIVA, POR STAPHYLOCOCCUS AUREUS, POR STREPTOCOCCUS DEL GRUPO VIRIDANS, POR ESCHERICHIA COLI Y POR PSEUDOMONAS AERUGINOSA. POR ULTIMO, SE ESTUDIO LA EMERGENCIA DE BACTERIEMIAS POR E. COLI RESISTENTE A QUINOLONAS.

Autor: ZAPARDIER FERRERO TOMAS JAVIER .
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PREVENTIVA Y SALUD PUBLICA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: SE HA DISEÑADO UN MEDIO SELECTIVO-DIFERENCIAL PARA EL AISLAMIENTO DE CORYNEBACTERIUM UREALYTICUM (CU) EN MUESTRAS CLINICAS DE PACIENTES SELECCIONADOS Y EN ESTUDIOS EPIDEMIOLOGICOS. LA COMPOSICION DEL MEDIO PERMITE DETECTAR PEQUEÑOS INOCULOS DE CU, INCLUIDAS LAS CEPAS MAS SENSIBLES A LOS ANTIBIOTICOS QUE PODRIAN SER INHIBIDAS EN OTROS MEDIOS SELECTIVOS. EL MEDIO POSEE UNA EXCELENTE ACTIVIDAD INHIBITORIA FRENTE A BACILOS GRAMNEGATIVOS, RESULTANDO PEOR PARA BACTERIAS GRAM-POSITIVAS, QUE PUEDEN SER DISTINGUIDAS DE CU POR LOS CAMBIOS EN EL MEDIO Y LA MORFOLOGIA DE LAS COLONIAS. SU EMPLEO, INCREMENTA EL AISLAMIENTO DE CU EN MUESTRAS DE ORINA, PERO AUMENTA EL PORCENTAJE DE RECUENTOS NO SIGNIFICATIVOS, HACIENDO RECOMENDABLE RESTRINGIR SU USO A ESTUDIOS EPIDEMIOLOGICOS O PACIENTES SELECCIONADOS POR EL ELEVADO RIESGO DE INFECCION. EN SIEMBRAS DE MUESTRAS DE LA PIEL, EL MEDIO CONSIGUE UNA IMPORTANTE REDUCCION DE LOS RECUENTOS DE COCOS GRAM-POSITIVOS, MANTENIENDO E INCLUSO POTENCIANDO EL CRECIMIENTO DE LOS DIFTEROMORFOS LIPOFILICOS. SE REALIZO UN ESTUDIO DE LA COLONIZACION CUTANEA DE UN GRUPO DE PACIENTES DESDE QUE INGRESABAN EN EL HOSPITAL Y DURANTE SU ESTANCIA. C.UREALYTICUM ESTABA PRESENTE EN LA PIEL DEL 53,6% DE LOS PACIENTES, SIENDO MAS FRECUENTE EN LAS MUJERES. EL 26,2% DE LOS PACIENTES ESTABAN COLONIZADOS EN LAS PRIMERAS 24 HORAS DE ESTANCIA. EL 42,6% DE LOS CASOS NO COLONIZADOS AL INGRESO, SE COLONIZARON DURANTE LA HOSPITALIZACION, GENERALMENTE EN LA PRIMERA SEMANA. EN LA MAYORIA DE LOS PACIENTES CON COLONIZACION CUTANEA SE AISLARON CEPAS RESISTENTES O MULTIRRESISTENTES. EL AISLAMIENTO DE CEPAS NO-MULTIRRESISTENTES DE CU FUE SIGNIFICATIVAMENTE MAYOR EN LOS PACIENTES CON COLONIZACION DETECTADA EN LAS PRIMERAS 24 HORAS DE HOSPITALIZACION. LA DETECCION DE CU EN EL AIRE DE LAS HABITACIONES DE LOS PACIENTES Y LA PRESENCIA DE COLONIZACION TRANSITORIA DE LAS MANOS DEL PERSONAL, ALERTAN SOBRE LA POSIBLE PARTICIPACION DEL AMBIENTE HUMANO E INANIMADO DEL HOSPITAL EN LA ADQUISICION DE LA COLONIZACION Y LAS INFECCIONES POR LA BACTERIA.

Autor: ALONSO ALONSO PEDRO.
Año: 1995.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA PATOLOGICA, MICROBIOLOGIA, MEDICINA PREVENTIVA ... PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: EN NUESTRO ESTUDIO HEMOS ENCONTRADO CON MAS PREVALENCIA EL GENOTIPO 1B DEL HCV SEGUIDO DEL GENOTIPO 1A Y DEL 3A. LOS GENOTIPOS 2 Y 4A SE ENCONTRARON CON POCA FRECUENCIA. EL GENOTIPO LA PREDOMINO EN ADICTOS A DROGAS POR VIA PARENTERAL Y EL 1B EN PACIENTES TRANSFUNDIDOS Y CON FACTOR DE RIESGO DESCONOCIDO. NO HEMOS ENCONTRADO UNA ASOCIACION DE NINGUN GENOTIPO CON UNA MAYOR SEVERIDAD DE LA LESION HEPATICA. LA RESPUESTA SEROLOGICA FRENTE A DISTINTOS ANTIGENOS DEL HCV FUE MAS FRECUENTE E INTENSA EN PACIENTES CON RNA DEL HCV EN SUERO. LA SENSIBILIDAD DE LA DETECCION DE ANTICUERPOS IGM FRENTE AL HCV FUE BAJA (MENOS DEL 50%) NO EXISTIENDO ASOCIACION CON LA SEVERIDAD DE LA LESION HEPATICA. TAMPOCO ENCONTRAMOS ASOCIACION ENTRE LA RESPUESTA SEROLOGICA FRENTE AL HCV Y EL GENOTIPO.

Autor: ARIZA COPADO M. ANGELES.
Año: 1995.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA MICROBIANA Y MICROBIOLOGIA MEDICA.

Resumen: LA TESIS DESCRIBE LA COMPOSICION Y ESTRUCTURA DE NUEVOS GLICOLIPIDOS DE DOS ESPECIES DE MICOBACTERIAS DE CRECIMIENTO RAPIDO: M. FORTUITUM Y M. FLAVERCENS. M. M. FORTUITUM CONTIENE UNA 2,3- DI-0-ACIL TREHALOSA (DAT), EN DONDE LOS GRUPOS ACILO SON LINEALES, DE 14 A 18 C, Y 2-METIL, 2-INSATURADOS, DE 17 A 21 C. MEDIANTE ESPECTROMETRIA DE MASAS DE MODO FAB, SE DEMUESTRA QUE LA DAT ESTA FORMADA POR AL MENOS 40 ESPECIES MOLECULARES, CON COMBINACIONES DE GRUPOS ACILO LINEALES + LINEALES, LINEALES + METIL RAMIFICADOS Y METIL RAMIFICADOS + METIL RAMIFICADOS. LA ESPECIE MOLECULAR MAYORITARIA SE IDENTIFICO COMO 2,3-DI-0-2-METIL OCTADEC- 2-ENOIL TREHALOSA. LA DAT FUE RECONOCIDA POR SUEROS DE PACIENTES CON TUBERCULOSIS PULMONAR Y POR SUEROS DE PACIENTES SANOS MEDIANTE UNA TECNICA DE ELISA, POR LO QUE NO ES UTIL COMO MARCADOR DE LA ENFERMEDAD. EL VALOR TAXONOMICO DE LA DAT ES CLARO AL APARECER EN UNA AMPLIA COLECCION DE CEPAS DE M. FORTUITUM VAR. FORTUITUM. EN M. FLAVESCENS SE DETECTARON CUATRO GLICOLIPIDOS QUE CONTIENEN RAMNOSA, 2,4-DI-0-METIL GLUCOSA Y GRUPOS ACIDO DE 14 A 19 C.