METABOLISMO BACTERIANO, 2

Autor: SANCHEZ MARTINEZ OLGA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: ESTA TESIS TRATA EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MEDIANTE LOS CUALES LA BACTERIA ROJA DEL AZUFRE CHROMATIUM VINOSUM SE ADAPTA A LA LIMITACION POR LA LUZ. LOS EXPERIMENTOS SE LLEVARON A CABO EN UN CULTIVO CONTINUO QUE PERMITIA EL CAMBIO DE LAS CONDICIONES DE ILUMINACION MIENTRAS SE MANTENIAN CONSTANTES LA BIOMASA Y LAS CONCENTRACIONES DE SULFHIDRICO Y DE NUTRIENTES. LA DISPONIBILIDAD DE LUZ SE DESCRIBIO COMO LA TASA ESPECIFICA DE ABSORCION DE LUZ (GE), EXPRESADA EN MICROEINSTEINS POR MG DE PROTEINA POR HORA Y SE DETERMINO COMO LA CANTIDAD DE LUZ ABSORBIDA POR EL CULTIVO DIVIDIDA POR LA BIOMASA PRESENTE. ADEMAS, SE PRESENTA UN ESTUDIO DETALLADO DE COMO QUE SE ENCUENTRA AFECTADA POR VARIABLES COMO LA BIOMASA, LA MEDIDA DEL RECIPIENTE DE CULTIVO Y LA PRESENCIA DE ESTRUCTURAS REFRINGENTES. EN PARTICULAR, EL ESTUDIO INTENTA ANALIZAR DOS ASPECTOS PRINCIPALES: PRIMERO, LA CAPACIDAD DE C. VINOSUM DE ADAPTAR LA RESPUESTA FOTOSINTETICA CUANDO CRECE A IRRADIANCIAS BAJAS Y, SEGUNDO, LA POSIBILIDAD DE ASIGNAR EL PODER REDUCTOR A DIFERENTES FRACCIONES CELULARES.

Autor: OBAYA GONZALEZ ALVARO JESUS.
Año: 1995.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL (AREA DE MICROBIOLOGIA) PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA (BIENIO1991-93).

Resumen: SE HAN IDENTIFICADO VARIAS PROTEINAS QUE INTERACCIONAN CON GTP EN EXTRACTOS DE STREPTOMYCES COELICOLOR. ENTRE ELLAS, CUATRO SE CORRESPONDEN CON VERDADERAS "GTP BINDING PROTEINS" MIENTRAS QUE SE HA DETECTADO UNA PROTEINA DE 43 KDA QUE SUFRE UN PROCESO DE MODIFICACION COVALENTE POR GUANILILACION. ESTE PROCESO ES AUTOCATALITICO SIENDO EL RESULTADO DE LA UNION DE GMP A PARTIR DE GTP Y LIBERANDOSE PIROFOSFATO. LA MODIFICACION DE LA PROTEINA ES ESTABLE A BAJAS TEMPERATURAS, ACIDO LABIL Y PRESENTA UN PUNTO ISOELECTRICO DE ALREDEDOR DE 5'5 CON VARIAS FORMAS MODIFICADAS. PARALELAMENTE SE HAN IDENTIFICADO, AL MENOS, TRECE PROTEINAS QUE PARECEN SUFRIR PROCESOS DE FOSFORILACION A PARTIR DE GTP. POR OTRO LADO, SE HA PURIFICADO Y CARACTERIZADO LA NUCLEOSIDO DIFOSFATO QUINASA (NDPK) DE S. COELICOLOR, COMPROBANDOSE QUE SE TRATA DE UNA ENZIMA TRIMERICA CON SUBUNIDADES DE 16 KDA. ESTA ENZIMA CATALIZA UNA REACCION BISUSTRATO QUE SIGUE UN MECANISMO PING-PONG CARACTERIZADO POR LA FORMACION DE UN COMPLEJO INTERMEDIARIO FOSFORILADO EN UN RESIDUO DE HISTIDINA. ADEMAS, EXISTE UNA FOSFORILACION EN UN RESIDUO DE SERINA QUE REPRESENTA ALREDEDOR DEL 9% DE LA FOSFORILACION TOTAL. DURANTE LA PURIFICACION DE LA NDPK SE HA DETECTADO UNA ASOCIACION ENTRE ESTA ENZIMA Y LA SUCCINIL COENZIMA A SINTETASA DE S. COELICOLOR.

Autor: SOSA SAAVEDRA FRANCISCO JAVIER.
Año: 1995.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: EL METABOLISMO DEL CARBONO EN EL GENERO BACTERIANO BRADYRHIZOBIUM PLANTEA TODAVIA DUDAS ACERCA DE LA EXISTENCIA EN SUS REPRESENTANTES DE VIA DE LAS PENTOSAS FOSFATO DADO QUE NO SE HA ACLARADO AUN SI LA 6-FOSFOGLUCONATO DESHIDROGENASA QUE EXHIBEN (ACTIVA SOLO CON NAD), DESCARBOXILA SU SUSTRATO RINDIENDO UNA PENTOSA FOSFATO. EN UNA ESTIRPE DE ESTE GENERO AISLADA DE UNA PLANTA ENDEMICA DE CANARIAS (TAGASASTE) SE DESCRIBEN LAS RUTAS METABOLICAS. COMO RESULTADO SE OBTIENE UNA BACTERIA CON UNA SOLA VIA PARA DEGRADAR LAS HEXOSAS, LA VIA DE LAS PENTOSAS FOSFATO. LA 6-FOSFOGLUCONATO DH LIGADA A NAD ES PURIFICADA Y CARACTERIZADA DEMOSTRANDO SER DESCARBOXILANTE SOBRE SU SUSTRATO. ESTE RESULTADO ES CONFIRMADO EN LA ESTIRPE TIPO DE BRADYRHIZOBIUM, B. JAPONICUM, USDA 110 POR LO QUE DEMOSTRAMOS LA EXISTENCIA DE LA VIA EN ESTE GENERO BACTERIANO. ASIMISMO LA VIA DE ENTNER-DOUDOROFF ES DESCARTADA EN EL TRABAJO COMO LA PRINCIPAL VIA DE DEGRADACION DE HEXOSAS COMO SE VENIA ADMITIENDO HASTA AHORA EN LAS REVISIONES ACERCA DEL METABOLISMO DEL CARBONO EN ESTAS BACTERIAS PUESTO QUE EXISTEN ESTIRPES QUE CARECEN DE DICHA VIA.

Autor: GONZALEZ FERNANDEZ BEATRIZ.
Año: 1994.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: COMO RESULTADO DE UNA BUSQUEDA DE PROPIEDADES DE POSIBLE INTERES APLICADO ENTRE CEPAS DE BACTERIAS LACTICAS AISLADAS DE FERMENTACIONES NATURALES, SE DETERMINO QUE UNA CEPA DE LACTOBACILLUS PLANTARUM PRODUCIA UNA BACTERIOCINA CON UN AMPLIO ESPECTRO DE INHIBICION Y POTENTE ACTIVIDAD BIOLOGICA. DICHA BACTERIOCINA SE HA PURIFICADO A HOMOGENEIDAD, HABIENDOSE DETERMINADO QUE ES UN PEPTIDO DE APROXIMADAMENTE 3 KDA, AUNQUE EN SOLUCION ACUOSA FORMA AGREGADOS CON UN TAMAÑO SUPERIOR A LOS 100 KDA. ES TERMORRESISTENTE Y ESTABLE A PH ACIDO Y NEUTRO, PERO NO A PH ALCALINO. LA PLANTARICINA C PRESENTA UN ESPECTRO DE INHIBICION AMPLIO, AUNQUE RESTRINGIDO A BACTERIAS GRAM POSITIVAS. POSEE EFECTO BACTERICIDA, INDUCIENDO EN ALGUNOS CASOS LA LISIS CELULAR. SU BLANCO MOLECULAR DE ACCION ES LA MEMBRANA PLASMATICA, DONDE FORMA POROS QUE PERMITEN LA SALIDA DE IONES Y OTROS METABOLITOS ESENCIALES. DE ESTE MODO PROVOCA LA DISIPACION DE LA FUERZA PROTON MOTRIZ Y LA CONSIGUIENTE INHIBICION DE LOS PROCESOS DEPENDIENTES DE ELLA. ADEMAS, PARA EJERCER SU ACCION ANTIBACTERIANA NO REQUIERE UN RECEPTOR PROTEICO NI LA EXISTENCIA DE UNA DIFERENCIA DE POTENCIAL A AMBOS LADOS DE LA MEMBRANA. EN DETERMINADOS CASOS ES POSIBLE QUE, COMO EFECTO SECUNDARIO, INDUZCA LA DESREGULACION DEL SISTEMA AUTOLITICO DE LAS CELULAS SENSIBLES.

Autor: GUTIERREZ MARTINEZ JUAN CARLOS.
Año: 1994.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR .

Resumen: AZOTOBACTER VINELANDII ES UN BACTERIA DEL SUELO, FIJADORA DE NITROGENO, QUE PUEDE UTILIZAR EL NITRATO COMO UNICA FUENTE DE NITROGENO. LA ASIMILACION DEL NITRATO HASTA AMONIO TIENE LUGAR EN DOS PASOS: LA REDUCCION DEL NITRATO A NITRITO ESTA CATALIZADO POR EL PRODUCTO DEL GEN NASB, LA NITRATO REDUCTASA; EL PASO DEL NITRTIO A AMONIO ESTA CATALIZADO POR EL PRODUCTO DEL GEN NASA, LA NITRITO REDUCTASA. AMBAS ENZIMAS SON INDUCIBLES POR NITRATO Y REPRIMIBLES POR AMONIO. ESTA INDUCCION, AUNQUE MAS BAJA, TAMBIEN SE OBSERVA CUANDO EN EL MEDIO HAY NITRITO O CLORATO. LOS PRODUCTOS DE LOS GENES NTRA, NTRC Y DE LA REGION NASR SON NECESARIOS PARA LA INDUCCION DEL OPERON NASAB. LA REGION NASR ESTA FORMADA POR DOS GENES, NASS Y NASR. SIENDO NASR EL PRIMER GEN DEL OPERON. ADEMAS DE ESTOS ELEMENTOS REGULADORES, SE REQUIERE DE UNA NITRATO REDUCTASA ACTIVA O, AL MENOS, UNIDA A SU COFACTOR PARA QUE EL CIRCUITO DE INDUCCION POR NITRATO SEA OPERATIVO. LA EXPRESION CONSTITUTIVA DEL GEN NIFO TIENE DOS EFECTOS, UNO A NIVEL DE EXPRESION DEL OPERON NASAB, QUE SE HACE MAS SENSIBLE A LA REPRESION POR AMONIO; Y OTRO, A NIVEL DE ACTIVIDAD NITRATO REDUCTASA, QUE DISMINUYE. EN RHIZOBIUM FREDII HAY MAS DE UNA NITRATO REDUCTASA Y DE UNA NITRITO REDUCTASA QUE SE EXPRESAN EN AEROBIOSIS. LOS GENES NASA Y NASB DE ESTA BACTERIA ESTAN FORMANDO PARTE DE LA MISMA UNIDAD TRANSCRIPCIONAL, EN LA QUE NASA ES EL PRIMER GEN, AL IGUAL QUE EN A. VINELANDII.

Autor: QUINTELA FERNANDEZ JOSE CARLOS.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL TRABAJO REALIZADO EN ESTA TESIS DOCTORAL HA PERMITIDO CARACTERIZAR LOS PROCESOS METABOLICOS POSTINSERCIONALES QUE OCURREN EN EL PEPTIDOGLICANO DE E. COLI. SE HA PODIDO CUANTIFICAR EL PROCESO DE RECICLAJE DE MUROPEPTIDOS, QUE HA SIDO ESTIMADO EN UN 10% POR GENERACION. SE HA CARACTERIZADO UNA LD-ENDOPEPTIDASA QUE DEGRADA PUENTES DIAMINOPIMELIL- DIAMINOPIMELATO DE MODO ESPECIFICO. SE HA PROCEDIDO A UN ESTUDIO DE LA VARIABILIDAD ESTRUCTURAL DEL SACULO EN BACTERIAS MESOFILAS GRAM NEGATIVAS Y CARACTERIZADO LA CAPA DE PEPTIDOGLICANO DE UNA BACTERIA TERMOFILA EXTREMA, THERMUS TERMOPHILUS. COMO CARACTERISTICA MAS PECULIAR, DESTACA LA PRESENCIA DE ACIDO FENILACETICO, CUYA PRESENCIA EN LA MUREINA NUNCA HABIA SIDO DESCRITA HASTA EL MOMENTO.

Autor: REY NAVARRO LUIS.
Año: 1993.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y FORESTAL.

Resumen: DURANTE LA FIJACION SIMBIOTICA DE N2 EN NODULOS DE LEGUMINOSAS SE GENERA H2 COMO SUBPRODUCTO OBLIGADO DE LA ACTIVIDAD NITROGENASA. ALGUNAS CEPAS DE RHIZOBIUM Y BRADYRHIZOBIUM POSEEN UN SISTEMA HIDROGENASA QUE OXIDA EL H2 GENERADO EN LOS NODULOS Y AUMENTA LA EFICIENCIA DEL PROCESO DE FIJACION DE N2. LA HIDROGENASA DE ESTAS CEPAS ES UNA PROTEINA HETERODIMERICA QUE CONTIENE NI Y GRUPOS FE-S. EN ESTA TESIS SE HAN ESTUDIADO LA ORGANIZACION Y FUNCIONES DE LOS DETERMINANTES GENETICOS DE LA OXIDACION H2 (GENES HUP) EN RHIZOBIUM LEGUMINOSARUM. MEDIANTE SECUENCIACION DE UN FRAGMENTO DE ADN DE 7,8 KB, ANALISIS DE LA SECUENCIA Y CARACTERIZACION FENOTIPICA DE MUTANTES CON INSERCIONES TN5, SE IDENTIFICO UNA AGRUPACION DE OCHO GENES, DESIGNADOS HUPIJKHYPABFCD, NECESARIOS PARA LA SINTESIS DE UNA HIDROGENASA ACTIVA. EL PRODUCTO DEL GEN HUPI ES UNA RUBREDOXINA Y EL DE HUPK PROBABLEMENTE UNA PROTEINA DE "ANDAMIAJE". LAS PROTEINAS HYPABFD CONTIENEN MOTIVOS, CXXC, DE UNION A METALES Y ESTAN PROBABLEMENTE IMPLICADAS EN LA INCORPORACION DE NI A LA HIDROGENASA. LA PROTEINA HYPB POSEE MULTIPLES HISTIDINAS CONTIGUAS EN EL EXTREMO N TERMINAL Y FUE PURIFICADA A PARTIR DE SU SOBREEXPRESION EN CELULAS DE E. COLI POR CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD POR NI. MEDIANTE ENSAYOS DE DIALISIS DE EQUILIBRIO SE DEMOSTRO QUE HYPB SE UNE EN SOLUCION A 4 IONES NI2+ POR MONOMERO DE HYPB CON UNA KD DE 2,5 UM. UTILIZANDO ANTICUERPOS CONTRA HYPB PURIFICADA SE DEMOSTRO LA SINTESIS DE HYPB EN CELULAS MICROAEROBICAS DE R. LEGUMINOSARUM Y EN BACTEROIDES DE GUISANTES. SE PROPONE QUE LA PROTEINA HYPB UNE NI INTRACELULARMENTE Y ESTA IMPLICADA EN SU TRANSFERENCIA A LA APOENZIMA DURANTE EL PROCESO DE SINTESIS DE LA HIDROGENASA.

Autor: FERNANDEZ CONTRERAS M. ENCARNACION.
Año: 1992.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: PLAN ANTIGUO.

Resumen: LOS PAPILOMAVIRUS HUMANOS (PVH) SON VIRUS DE MARCADO CARACTER ONCOGENICO, QUE EN EL TRACTO GENITAL FEMENINO PRODUCEN ALTERACIONES QUE VARIAN DESDE DISPLASIAS LEVES HASTA CARCINOMA, EXISTIENDO UNA CLARA RELACION ENTRE EL GRADO DE MALIGNIDAD DE LA LESION PRODUCIDA Y EL GENOTIPO INFECTANTE. CON OBJETO DE CONOCER LA PREVALENCIA Y LOS GENOTIPOS MAS FRECUENTES DE PVH EN NUESTRO MEDIO SE HA DETERMINADO LA PRESENCIA DE ADN DE ESTOS VIRUS EN EL EXUDADO DE 345 MUJERES. DE ELLAS, 249 ERAN MUJERES SANAS, CON CITOLOGIA NORMAL; LAS OTRAS 96 (GRUPO PATOLOGICO) ERAN PACIENTES CON ALTERACIONES CLINICAS Y/O CITOLOGICAS COMPATIBLES CON INFECCION POR PVH; EN ESTAS MUJERES SE TOMO, ADEMAS DEL EXUDADO ENDOCERVICAL, DOS MUESTRAS DE BIOPSIA (UNA DE VULVA Y OTRA DE CERVIX) Y UN LAVADO CERVICOVAGINAL. TODAS ELLAS CONTESTARON UN PROTOCOLO EN EL QUE SE INCLUIAN DIVERSOS DATOS EPIDEMIOLOGICOS Y DEMOGRAFICOS. LA PREVALENCIA DE INFECCION FUE MAS ELEVADA EN EL GRUPO PATOLOGICO QUE EN EL NORMAL. EN EL PRIMERO, LA FRECUENCIA DE APARICION DE PVH FUE MAS ELEVADA EN BIOPSIAS, SEGUIDA DE LAVADOS Y EXUDADOS. EL GENOTIPO MAS FRECUENTE CORRESPONDIO A PVH INDETERMINADOS, SEGUIDO DE 16 Y 18. DE LOS DISTINTOS FACTORES DE RIESGO ESTUDIADOS PARA LA PRESENCIA DE ALTERACIONES, EL MAS IMPORTANTE FUE LA INFECCION POR PVH.

Autor: DELGADO IGUEÑO M. JESUS .
Año: 1990.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ESTACION EXPERIMENTAL DEL ZAIDIN UNIDAD ESTRUCTURAL DE MICROBIOLOGIA.

Resumen: EN ESTA MEMORIA DE DOCTORADO SE HAN ABORDADO LOS SIGUIENTES ASPECTOS: EN PRIMER LUGAR, SE HA ESTUDIADO LA RELACION EXISTENTE ENTRE ACTIVIDAD NITRATO REDUCTASA E HIDROGENASA EN B.JAPONICUM, ENCONTRANDOSE LA EXISTENCIA DE UNA RELACION INVERSA ENTRE AMBAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS EN CELULAS EN VIDA LIBRE Y EN SIMBIOSIS.EN SEGUNDO LUGAR, SE HA PROFUNDIZADO EN LOS CONOCIMIENTOS ACTUALES SOBRE EL METABOLISMO DEL NITRATO EN NODULOS FORMADOS POR (BRADY)RHIZOBIUM. LOS RESULTADOS OBTENIDOS HAN PERMITIDO CONCLUIR QUE EL TRATAMIENTO DE PLANTAS DE SOJA Y GUISANTE CON DOSIS MODERADAS DE NITRATO NO IMPLICA LA UTILIZACION DE ESTE ELEMENTO POR LOS BACTEROIDES Y QUE EL NITRITO NO SE ACUMULA NORMALMENTE EN EL CITOSOL DE LOS NODULOS. POR ULTIMO, SE HAN INICIADO LOS ESTUDIOS DE CARACTERIZACION DE LA ENZIMA NITRATO REDUCTASA EN B.JAPONICUM TANTO EN VIDA LIBRE COMO EN SIMBIOSIS, ENCONTRANDOSE QUE LA ACTIVIDAD NR DE LAS VESICULAS DE MEMBRANA DE BACTERIAS Y BACTEROIDES CORRESPONDE A DOS ENZIMAS CUYOS PESOS MOLECULARES SON 240 Y 80 KD, RESPECTIVAMENTE, Y LA EXISTENCIA DE DOS ISOENZIMAS CON ACTIVIDAD NR EN LAS VESICULAS DE MEMBRANA DE LAS BACTERIAS.

Autor: FERNANDEZ CADENAS ROSA.
Año: 1990.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ECOLOGIA, GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA.

Resumen: LAS CORINEBACTERIAS SON MICROORGANISMOS GRAM +, CLASIFICADOS EN LA SECCION 15 EN LA ULTIMA EDICCION DEL MANUAL BERGEY (1986). EL PLASMIDO PBL1 DE BREVIBACTERIUM LACTOFERMENTUM HA SIDO USADO POR NUMEROSOS GRUPOS DE INVESTIGACION PARA EL DESARROLLO DE VECTORES DE CLONACION PERO NADA SE SABIA SOBRE SU BIOLOGIA MOLECULAR. POR ESTA RAZON LOS OBJETIVOS DEL TRABAJO HAN SIDO (1) ESTUDIO DE LA BIOLOGIA MOLECULAR DEL PLASMIDO PBL1 Y CONSTRUCCION DE NUEVOS VECTORES PARA CORINEBACTERIAS. DEL ESTUDIO DE LA BIOLOGIA MOLECULAR SE DEDUCE: A) LA REGION INDISPENSABLE PARA LA REPLICACION ESTA CONTENIDA EN UN FRAGMENTO HINC II-SPH I (1.8 KB) QUE CONTIENE LOS MARCOS DE LECTURA ORF1 Y ORF5. LA REGION QUE CONTROLA LA ESTABILIDAD Y NUMERO DE COPIAS ESTA COMPRENDIDA EN UN FRAGMENTO HIND III - SPHI (0.8 KB). LA REGION HIND III - SCA I (1.1 KB) PARECE DISPENSABLE. SE HAN CONSTRUIDO UNA SERIE DE VECTORES COMO VECTORES SONDA PARA LA CLONACION DE PROMOTORES (CON LOS QUE SE HA CLONADO OCHO PROMOTORES DE PBL1), VECTORES DE EXPRESION, DE SELECCION POSITIVA DE RECOMBINANTES, ETC. SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION DE LOS GENES AMILASA Y GALACTOSIDASA DE STREPTOMYCES EN CORINEBACTERIAS. LA GALACTOSIDASA NO ES SECRETADA, AL CONTRARIO SUCEDE CON LA AMILASA, EL PROCESAMIENTO DE LA PROTEINA Y EL RECONOCIMIENTO Y CORTE DEL PEPTIDO GUIA EN EL PROCESO DE SECRECION ES SIMILAR EN STREPTOMYCES Y EN CORINEBACTERIAS.

Autor: MURILLO MARTINEZ JESUS.
Año: 1990.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPTO. DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR, MICROBIOLOGIA, GENETICA Y FITOPATOLOGIA. ETS DE INGENIEROS AGRONOMOS DE MADRID.

Resumen: LA PRODUCCION DE H2 POR LA NITROGENASA DURANTE EL PROCESO DE FIJACION DE N2 ES UNA DE LAS PRINCIPALES CAUSAS DE INEFICIENCIA DE LA SIMBIOSIS (BRADY)RHIZOBIUM-LEGUMINOSAS. POR ELLO, LA POSESION DE UN SISTEMA HIDROGENASA (SISTEMA HUP) EFECTIVO EN NODULOS ES UNA CARACTERISTICA DESEABLE EN CEPAS DE RHIZOBIUM Y BRADYRHIZOBIUM USADAS COMO INOCULO DE LEGUMINOSAS AGRICOLAMENTE IMPORTANTES. DURANTE ESTA TESIS SE HAN ESTUDIADO DOS ASPECTOS DEL METABOLISMO DEL H2 EN (BRADY)RIZOBIOS: 1) EVALUACION DE LA EFICIENCIA ENERGETICA DE BRADYRHIZOBIUM SP. CON ALTRAMUCES (LUPINUS) E IDENTIFICACION DE CEPAS HUP+ EN ESTA ESPECIE, Y 2) CARACTERIZACION A NIVEL MOLECULAR DE GENES DE LA OXIDACION DE H2 EN RHIZOBIUM LEGUMINOSARUM BV. VICEAE (RL/VICEAE). LAS PRINCIPALES CONCLUSIONES EXTRAIDAS DE ESTE TRABAJO SE EXPONEN A CONTINUACION: 1) LA MAYORIA DE LAS CEPAS DE BRADYRHIZOBIUM SP. (LUPINUS) ANALIZADAS SON ALTAMENTE INEFICIENTES EN SIMBIOSIS CON L. ANGUSTIFOLIUS. LAS PERDIDAS MEDIAS DE ENERGIA POR PRODUCCION DE H2 DE 22 CEPAS EXAMINADAS EN SIMBIOSIS CON ESTA ESPECIE DE ALTRAMUZ FUERON DEL 53%. 2) SE HAN IDENTIFICADO CINCO CEPAS DE BRADYRHIZOBIUM SP. (LUPINUS) QUE INDUCEN UN SISTEMA DE OXIDACION DE H2 EN SIMBIOSIS CON TRES ESPECIES DE ALTRAMUZ Y/O CON ORNITHOPUS COMPRESSUS Y SE HA DEMOSTRADO QUE LA EXPRESION DEL SISTEMA HUP EN NODULOS ESTA CONTROLADA POR LA LEGUMINOSA HOSPEDADORA. 3) EL ANALISIS COMPARATIVO DEL DNA HUP HA DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE DOS TIPOS DIFERENTES DE SECUENCIAS HUP EN BRADYRHIZOBIUM SP. (LUPINUS). 4) LOS OPERONES HUPV Y HUPVI DE LA AGRUPACION HUP DE RL VICEAE SE INDUCEN EN VIDA LIBRE EN RESPUESTA A MICROAEROBIOSIS. ESTA EXPRESION ES DEPENDIENTE DEL SISTEMA DE GENES REGULADORES FIXLJ Y FIXK EN CELULAS DE R. MELILOTI. 5) LA EXPRESION IN VIVO DE LA REGION HUPV HA MOSTRADO QUE DICHA REGION CONTIENE AL MENOS DOS GENES, QUE CODIFICAN PARA PROTEINAS DE APROXIMADAMENTE 39 Y 79 KDA. 6) MEDIANTE SECUENCIACION DE UN FRAGMENTO DE DNA DE 1.836 PB PERTENECIENTE A LA REGION HUPV, SE HAN IDENTIFICADO TRES SECUENCIAS POSIBLEMENTE CODIFICANTES (ORF51, ORF52 Y ORF53). LA ORF52 ESTA COMPLETA EN EL FRAGMENTO SECUENCIADO Y CODIFICA PROBABLEMENTE PARA LA PROTEINA DE 39 KDA OBSERVADA EN E. COLI AL EXPRESAR EL OPERON HUPV. LA ORF53 SE LOCALIZA DESPUES DE LA ORF52 Y COINCIDE CON EL DNA QUE CODIFICA PARA LA PROTEINA DE 79 KDA EN E. COLI. EN LA SECUENCIA QUE PRECEDE A LA ORF52 SE HAN IDENTIFICADO POSIBLES SECUENCIAS DE RECONOCIMIENTO POR LAS PROTEINAS REGULADORAS FNR, IHF Y NTRA, POR LO QUE ES POSIBLE QUE EN ESTA ZONA SE LOCALICE EL PROMOTOR DEL OPERON HUPV.

Autor: VIGAL GARCIA TOMAS.
Año: 1990.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ECOLOGIA, GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: INGENIERIA GENETICA Y BIOTECNOLOGIA .

Resumen: LA PRODUCCION DE PROTEINAS HETEROLOGAS POR PARTE DE HOSPEDADORES EUCARIOTAS O BACTERIANOS ES ACTUALMENTE UNO DE LOS CAMPOS MAS IMPORTANTES DE LA BIOTECNOLOGIA. ESTA TESIS DOCTORAL ABORDA ESTE OBJETIVO MEDIANTE LA ESTRATEGIA DE VECTORES DE SECRECION DE STREPTOMYCES LIVIDANS JI66. COMO GEN "PORTADOR" SE ESCOGIO EL DE LA ALFA-AMILASA DE S. GRISEUS Y COMO GEN HETEROLOGO EL DEL FACTOR DE LIBERACION DE LA CORTICOTROPINA HUMANA (HCRF). EN UNA PRIMERA PARTE DEL TRABAJO SE CLONO, SE SECUENCIO Y SE CARACTERIZO EL GEN DE LA ALFA-AMILASA (AMY) DE STREPTOMYCES GRISEUS EN S. LIVIDANS JI66. COMO COMPLEMENTO A ESTA CARACTERIZACION TAMBIEN SE ESTUDIO LA EXPRESION DEL GEN AMY EN ESCHERICHIA COLI COMO PROTEINA DE FUSION CON LA BETA-GALACTOSIDASA. POSTERIORMENTE SE OPTIMIZO LA EXPRESION DEL GEN AMY MEDIANTE DIFERENTES ESTRATEGIAS: INCREMENTO DE SU TASA TRANSCRIPCIONAL POR REEMPLAZAMIENTO DE SU PROMOTOR POR OTROS DE MAS EFICIENTE EXPRESION EN S. LIVIDANS E INCREMENTO DE LA TASA DE SECRECION DE LA ALFA-AMILASA POR INTRODUCCION EN SU PEPTIDO "LEADER", A TRAVES DE TECNICAS DE MUTAGENESIS "IN VITRO", DE INSERCIONES, SUSTITUCIONES O DELECIONES DE AMINOACIDOS. POR ULTIMO SE REALIZO LA FUSION TRADUCCIONAL ENTRE EL GEN AMY Y EL GEN CRF EN DIFERENTES PUNTOS A LO LARGO DEL PRIMERO, ENTRE LOS QUE SE INCLUYO UNA FUSION TRADUCCIONAL DIRECTA JUSTO DETRAS DE LA ZONA DEL DNA QUE CODIFICABA PARA EL PEPTIDO "LEADER" DE LA PROTEINA ALFA-AMILASICA.

Autor: BASCARAN RODRIGUEZ M. VICTORIA DE.
Año: 1989.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: AREA DE MICROBIOLOGIA. DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA FUNCIONAL. UNIVERSIDAD DE OVIEDO..

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN IDENTIFICADO DOS SISTEMAS REGULATORIOS QUE CONTROLAN DISTINTOS ASPECTOS DEL METABOLISMO DE STREPTOMYCES CLAVULIGERUS EN RESPUESTA A LA DISPONIBILIDAD DE NITROGENO. EL PRIMERO DE ELLOS PARTICIPA EN EL CONTROL DE LA UTILIZACION DE COMPUESTOS NITROGENADOS, Y AFECTA A LA FORMACION DE AL MENOS CUATRO ENZIMAS: GLUTAMINA SINTETASA, UREASA, ARGINASA Y ORNITINA AMINOTRANSFERASA. ESTE SISTEMA RESPONDE A LA DISPONIBILIDAD DE FUENTE DE NITROGENO, REFLEJADA EN LOS PRODUCTOS DE LA RUTA DE ASIMILACION DE AMONIO, ACTIVANDO O REPRIMIENDO EL USO DE FUENTES DE NITROGENO ALTERNATIVAS. EL AISLAMIENTO DE MUTANTES DESREGULADOS QUE, EN GRAN PROPORCION, PRESENTAN UNA ACTIVIDAD GLUTAMINA SISTETASA TERMOSENSIBLE, INDICA QUE ESTE ENZIMA DESEMPEÑA UN PAPEL CRITICO EN EL FUNCIONAMIENTO DE ESTE CIRCUITO REGULATORIO. LA GLUTAMINA SISTETASA ESTA TAMBIEN SUJETA A UN MECANISMO DE CONTROL POSTRANSCRIPCIONAL QUE PODRIA PARTICIPAR EN EL SISTEMA DE CONTROL, PRIMERO DE ESTE TIPO IDENTIFICADO EN UNA BACTERIA GRAM-POSITIVA. SE HA ESTUDIADO ADEMAS LA REGULACION DE LA FORMACION DE OTRAS DOS ACTIVIDADES, LA LISINA AMINOTRANSFERASA Y UNA METALOPROTEASA EXTRACELULAR, PROBABLEMENTE VINCULADAS AL METABOLISMO SECUNDARIO. LA PRIMERA SE ENCUENTRA ESTRECHAMENTE RELACIONADA CON LA BIOSINTESIS DE CEFAMICINA C, POSIBLEMENTE COMO SUMINISTRADORA DE PRECURSORES. AMBAS ACTIVIDADES SE PUEDEN EXPRESAR COMO CONSECUENCIA DE UNA DISMINUCION EN LA DISPONIBILIDAD DE NITROGENO, EN CONDICIONES DE RESPUESTA ESTRICTA. SE HAN AISLADO MUTANTES CON ALTERACIONES SIMULTANEAS EN ESTA RESPUESTA Y EN LA FORMACION DE AMBOS ENZIMAS. EXISTE SIN EMBARGO UNA SEGUNDA SEÑAL, DEPENDIENTE DE LA FUENTE DE NITROGENO, QUE DA LUGAR A UNA REGULACION DIFERENCIAL DE ESTAS ACTIVIDADES. DICHA SEÑAL NO SE GENERAL DIRECTAMENTE POR EL SISTEMA DE CONTROL QUE OPERA EN EL METABOLISMO PRIMARIO.

Autor: GARCIA DOMINGUEZ MODESTA.
Año: 1989.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DPTO. ECOLOGIA, GENETICA Y MICROBIOLOGIA. FAC. BIOLOGIA UNIVERSIDAD DE LEON .

Resumen: STREPTOMYCES CLAVULIGERUS NRRL-3585 ES UN ACTINOMICETO INCAPAZ DE CRECER EN GLUCOSA, PRODUCTOR DE VARIOS ANTIBIOTICOS ENTRE LOS QUE SE INCLUYEN EL P-LACTAMICO CEFAMICINA C Y EL INHIBIDOR DE P-LACTAMASAS ACIDO CLAVULANICO, ADEMAS DE OTROS METABOLITOS SECUNDARIOS. POR TRATAMIENTO DE ESPORAS DE S. CLAVULIGERUS CON N-METIL-N-NITRO-N-NITROSOGUANIDINA SE AISLO UN MUTANTE, AL QUE SE DENOMINO S. CLAVULIGERUS GUTL, QUE A DIFERENCIA DE LA CEPA PARENTAL ES CAPAZ DE CRECER EN GLUCOSA Y GALACTOSA. S. CLAVULIGERUS NRRL-3585 Y S. CLAVULIGERUS GUTL CRECEN SOBRE MALTOSA, POSEEN UN SISTEMA DE TRANSPORTE ESPECIFICO Y PLENAMENTE FUNCIONAL PARA DICHO AZUCAR, PUESTO QUE LA MALTOSA ES HIDROLIZADA POR UNA -GLUCOSIDASA INTRACELULAR; POR TANTO S. CLAVULIGERUS POSEE UNA VIA NORMAL DE CATABOLISMO DE GLUCOSA. AMBAS CEPAS POSEEN ADEMAS UN DOBLE SISTEMA DE UNION DE GLUCOSA CON ALTA Y BAJA AFINIDAD, RESPECTIVAMENTE, POR ESTE CARBOHIDRATO; LAS AFINIDADES DE ESTOS SISTEMAS SON SIMILARES EN AMBAS CEPAS. TANTO LA CAPA SILVESTRE COMO EL MUTANTE POSEEN ACTIVIDAD GLUCOSA-QUINASA Y FOSFORILA GLUCOSA "IN VITRO". EXPERIMENTOS DE TRANSPORTE DE GLUCOSA INDICAN QUE S. CLAVULIGERUS NRRL-3585 ES INCAPAZ DE UTILIZAR GLUCOSA, DEBIDO A LA EXISTENCIA DE UN SISTEMA DEFICIENTE DE TRANSLOCACION DE GLUCOSA AL ESPACIO INTRACELULAR. LA BIOSINTESIS DE CEFAMICINA C EN S. CLAVULIGERUS GUTL NO SE VE REGULADA POR LA PRESENCIA DE ALTAS CONCENTRACIONES DE GLUCOSA ENEL MEDIO DE CULTIVO. SE HA DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE REGULACION CATABOLICA POR GLUCOSA DE ENZIMAS IMPLICADAS EN LA UTILIZACION DE AZUCARES, QUE PARECE SER EJERCIDA EN S. CLAVULIGERUS POR METABOLITOS FOSFORILADOS DE GLUCOSA. POR OTRA PARTE, SE HA DESARROLLADO UN SISTEMA DE TRANSFORMACION EFICIENTE EN S. CLAVULIGERUS, QUE PERMITE OBTENER FRECUENCIAS DE TRANSFORMACION DE 5X10 TRANSFORMANTES-UG DE DNA, Y SE HA DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE UN FUERTE SISTEMA DE RESTRICCION-MODIFICACION EN ESTA CEPA. POR ULTIMO, SE PROCEDIO A LA CLONACION DEL GEN PCBC (CODIFICA PARA LA ISOPENICILINA N SINTASA, ENZIMA IMPLICADA EN LA BIOSINTESIS DE CEFAMICINA C A NIVEL DE LA FORMACION DE ISOPENICILINA N) DE S. GRISEUS NRRL-3851. EL GEN PCBC CONTIENE UN MARCO DE LECTURA ABIERTO DE 990 NUCLEOTIDOS, QUE CODIFICA PARA UNA PROTEINA DE 329 AMINOACIDOS Y UNA MR DE 37371 DA. EL RNA DEL GEN PCBC DE S. GRISEUS FORMA UN TRANSCRITO UNICO DE UN TAMAÑO APROXIMADO DE 1.1 KB. EL PRIMER NUCLEOTIDO TRANSCRITO (+1) ESTA SITUADO A 44 PB POR DELANTE DEL CODON DE INICIACION DE LA TRADUCCION. EL GEN PCBC DE S. GRISEUS SE HA EXPRESADO EN UN MUTANTE DE S. CLAVULIGERUS BLOQUEADO EN LA BIOSINTESIS DE CEFAMICINA C A NIVEL DE LA ISOPENICILINA N SINTASA.

Autor: HELLIN SANZ M. TERESA.
Año: 1989.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL RAMON Y CAJAL.

Autor: MARTIN MARTIN M. CRUZ.
Año: 1989.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FACULTAD DE MEDICINA DPTO. BIOLOGIA FUNCIONAL. AREA MICROBIOLOGIA.

Resumen: LOS ESTREPTOMICETOS PRESENTAN UNA MORFOLOGIA COMPLEJA QUE LOS DIFERENCIA DE OTRAS BACTERIAS, CRECEN FORMANDO GRANDES FILAMENTOS RAMIFICADOS Y POSEEN UN BAJO NIVEL DE SEPTACION. ES INDUDABLE QUE EL CONOCIMIENTO DE LOS MECANISMOS QUE REGULAN EL CRECIMIENTO EN LOS ESTREPTOMICETOS AYUDARIA A COMPRENDER MEJOR LA MORFOGENESIS Y EL MECANISMO DE CRECIMIENTO DE LA PARED BACTERIANA. SIN EMBARGO, SON POCOS LOS CONOCIMIENTOS QUE SE TIENEN SOBRE LOS ASPECTOS BASICOS DE SU BIOLOGIA. EN ESTE TRABAJO SE DESCRIBE UN METODO DE ACTIVACION CON ULTRASONIDOS QUE FAVORECE LA OBTENCION DE CULTIVOS SINCRONIZADOS Y EL EFECTO QUE DICHO TRATAMIENTO PROVOCA SOBRE LAS PROPIEDADES DE LAS ESPORAS. POR OTRO LADO, SE ESTUDIA LA INTERACCION ENTRE EL MATERIAL NUCLEAR Y LA PARED CELULAR DURANTE EL PROCESO DE ELONGACION. EN PRIMER LUGAR, SE INVESTIGAN LOS METODOS MAS EFICACES QUE PERMITEN UNA VALORACION DE LA SINTESIS DE ADN (METODO DE BURTON E INCORPORACION DE PRECURSORES RADIACTIVOS). TAMBIEN SE ESTUDIA LA REGIONALIZACION DEL CITOPLASMA A LO LARGO DE LA HIFA PARA PODER COMPRENDER LA DISTRIBUCION DE ACTIVIDADES FISIOLOGICAS A LO LARGO DE LA MISMA. POR ULTIMO, SE ESTUDIAN LAS RELACIONES EXISTENTES ENTRE LA BIOSINTESIS DEL PEPTIDOGLICANO Y LA SINTESIS Y REPLICACION DEL MATERIAL NUCLEAR. EL EMPLEO DE ANTIBIOTICOS QUE INHIBEN LA APARICION DE NUEVAS RONDAS REPLICATIVAS (VANCOMICINA O CLORANFENICOL) PERMITEN DETERMINAR EL TIEMPO DE REPLICACION DEL CROMOSOMA DE STREPTOMYCES ANTIBIOTICUS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE EL CROMOSOMA TARDA APROXIMADAMENTE 90 MINUTOS EN COMPLETAR SU REPLICACION. ADEMAS, SE COMPRUEBA QUE EN PRESENCIA DE CLORANFENICOL, EL MAXIMO TIEMPO DE ACTIVIDAD BIOSINTETICA DE PEPTIDOGLICANO DETECTADO ES DE APROXIMADAMENTE 80 MINUTOS, MUY SIMILAR AL OBTENIDO PARA LA REPLICACION DEL CROMOSOMA. ESTOS DATOS SUGIEREN QUE EL TIEMPO DE FUNCIONAMIENTO O DE ACTIVIDAD DE UNA ZONA DE CRECIMIENTO EN STREPTOMYCES PODRIA ESTAR DETERMINADO POR LA DURACION DE LA REPLICACION DEL CROMOSOMA. DE ESTA FORMA, AL INICIARSE LA REPLICACION DEL CROMOSOMA SE SINTETIZARIA UNA NUEVA ZONA DE CRECIMIENTO QUE SERIA ACTIVA HASTA QUE EL CROMOSOMA TERMINARA DE REPLICARSE. ESTOS RESULTADOS PUEDEN SER DE GRAN AYUDA PARA COMPRENDER MEJOR EL MECANISMO DE CRECIMIENTO EN STREPTOMYCES Y PUEDEN SER DE UTILIDAD A LA HORA DE SU APLICACION A NIVEL INDUSTRIAL.

Autor: SANTANA RODRIGUEZ OTILIA EVORA.
Año: 1989.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: COLEGIO UNIVERSITARIO DE LAS PALMAS DE GRAN CANARIA Y CATEDRA DE MEDICINA PREVENTIVA Y SALUD PUBLICA DE LA UNIVERSIDAD DE LA LAGUNA.

Resumen: MEDIANTE INHIBICION SELECTIVA POR EL CN-, H2O2 Y AZIDA, SE HAN VALORADO Y VISUALIZADO POR ISOELECTROENFOQUE DOS ISOENZIMAS DE SUPEROXIDO DISMUTASA QUE SE COMPORTAN COMO MN-SOD Y FE-SOD CON PI DE 5.3 Y 4.8, RESPECTIVAMENTE. TANTO LA CATALASA COMO LA PEROXIDASA DE S.MARCESCENS SON INACTIVADAS POR EL CN- Y LA AZIDA, LO QUE SUGIERE LA PRESENCIA DE UN GRUPO PROTOHEMO EN SU MOLECULA. SE HAN DETECTADO DOS TIPOS DE CATALASA: I(A Y B) Y II(C Y D), INTEGRADA CADA UNA DE ELLAS POR DOS ISOENZIMAS CON PI 4.2; 4.8; 6.2 Y 8.2, RESPECTIVAMENTE. LA ACTIVIDAD SUPEROXIDO DISMUTASA PERMANECE ESTABLE EN UN AMPLIO RANGO DE PH, 6.5 A 11, MIENTRAS QUE LA PEROXIDASA TIENE UN PH OPTIMO ENTRE 6.0 Y 6.7. LOS NIVELES DE OXIGENO NECESARIOS PARA QUE LA CELULA RESPONDA CON UN INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD SOD, CATALASA Y PEROXIDASA, VARIAN DE UNA ENZIMA A OTRA. EL NO3- AÑADIDO AL MEDIO EN ANAEROBIOSIS SUPLE, AUNQUE PARCIALMENTE, LA AUSENCIA DE OXIGENO INDUCIENDO LA SINTESIS DE MN-SOD, CATALASA Y PEROXIDASA. EL PARAQUAT SE COMPORTA EN PRESENCIA DE OXIGENO COMO UN TOXICO PARA LAS CELULAS POR GENERAR RADICALES O2- EN EL INTERIOR DE LAS MISMAS. LA CATALASA I PREDOMINA DURANTE LA FASE DE CRECIMIENTO LOGARITMICO Y LA CATALASA II SE INCREMENTA DURANTE LA FASE ESTACIONARIA. POR OTRA PARTE, EXISTE CORRELACION ENTRE LOS CAMBIOS DE PH EN EL MEDIO DE CULTIVO Y LA SINTESIS DE DOD, CATALASA Y PEROXIDASA.

Autor: CUETO LOPEZ MARIANO.
Año: 1988.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Autor: MOZO DEL RIO TERESA.
Año: 1988.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPT. BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR, GENETICA, MICROBIOLOGIA Y FITOPATOLOGIA. E.T.S. INGENIEROS AGRONOMOS DE MADRID.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN ESTUDIADO DOS ASPECTOS DIFERENTES RELACIONADOS CON LA SIMBIOSIS ENTRE LA LEGUMINOSA HEDYSARUM CORONARIUM Y SU RIZOBIO ESPECIFICO (RHIZOBIUM HEDYSARI). EN UNA PRIMERA PARTE SE HA INICIADO UN ESTUDIO GENETICO DE ESTE GRUPO DE RIZOBIUOS QUE, HASTA LA FECHA, SE ENCONTRABAN PROBREMENTE CARACTERIZADOS. EN ESTE ESTUDIO SE HAN DETERMINADO LOS PERFILES PLASMIDICOS DE 45 CEPAS DE R. HEDYSARI, Y SE HA DEMOSTRADO QUE LOS GENES SIMBIOTICOS NIF Y NOD SE LOCALIZAN EN PLASMIDOS Y QUE SU ORGANIZACION SE ENCUENTRA ALTAMENTE CONSERVADA EN CEPAS DE ESTE GRUPO DE RIZOBIOS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PERMITEN AFIRMAR QUE SE TRATA DE UN GRUPO DE RIZOBIOS MUY HOMOGENEO Y CLARAMENTE RELACIONADO CON EL GRUPO CLASICO DE RIZOBIOS DE CRECIMIENTO RAPIDO. EN UN SEGUNDO ASPECTO, SE HAN CONSTRUIDO VECTORES DE CLONAJE A PARTIR DE PLASMIDOS NATIVOS DE R.HEDYSARI. ESTOS ESTUDIOS HAN PERMITIDO IDENTIFICAR LA REGION ESENCIAL PARA LA REPLICACION DE UN PLASMIDO INDIGENA DE R.HEDYSARI EN UN FRAGMENTO PSTI DE 5,4 KB, ASI COMO CONSTRUIR, POR INTEGRACION DE DICHA REGION DE REPLICACION EN UN VECTOR DE E.COLI, UNA SERIE DE PLASMIDOS QUE SE REPLICAN Y MANTIENEN CON DIFERENTES GRADOS DE ESTABILIDAD EN DIVERSAS CEPAS Y ESPECIES DE RHIZOBIUM. LOS PLASMIDOS ASI CONSTRUIDOS EN ESTA TESIS SON POTENCIALMENTE UTILES COMO VECTORES EN BACTERIAS ENDOSIMBIOTICAS.

Autor: PALACIOS ALBERTI JOSE MANUEL.
Año: 1988.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS .
Centro de realización: DPTO. DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR, GENETICA, MICROBIOLOGIA Y FITOPATOLOGIA. ETSI AGRONOMOS. UNIVERSIDAD POLITECNICA DE MADRID..

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA INVESTIGADO LA EXPRESION INTER E INTRAESPECIFICA DE LOS GENES DE OXIDACION DE HIDROGENO Y SE HA ESTUDIADO SU REGULACION, CON EL FIN DE DISEÑAR ESTRATEGIAS QUE PERMITAN CREAR POR MANIPULACION GENETICA CEPAS DE RHIZOBIUM CON INTERES AGRICOLA QUE SEAN ENERGETICAMENTE EFICIENTES EN SIMBIOSIS CON SUS LEGUMINOSAS RESPECTIVAS. LA TRANSFERENCIA DE LOS GENES DE OXIDACION DE HIDROGENO (GENES HUP) ENTRE CEPAS Y ESPECIES DE RHIZOBIUM SE HA ACOMETIDO MOVILIZANDO PLASMIDOS SYM-HUP INDIGENAS O COSMIDOS PORTADORES DEL SISTEMA HUP DE R. LEGUMINOSARUM. LA REGULACION DE LA EXPRESION DE LOS GENES HUP SE HA ANALIZADO MEDIANTE LA CONSTRUCCION DE FUSIONES HUP-LACZ Y MEDIANTE EL ANALISIS DE MRNA (ESPECIFICOS DE LAS DISTINTAS REGIONES HUP.