|
|
|
| 89 tesis en 5 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
DETECCION, CLONACION Y CARACTERIZACION DE GENES EXPRESADOS DIFERENCIALMENTE EN GLUCOSA O LACTOSA EN
PENICILLIUM CHRYSOGENUM . Autor: CASTILLO ORJUELA NANCY ISABEL. Año: 2003. Universidad: LEON. Centro de lectura: FACULTAD DE
CIENCIAS BIOLOGICAS Y AMBIENTALES. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y AMBIENTALES.
Resumen: Las diferentes técnicas para la determinación de diferencias en la expresión génica entre dos tipos de células, o dos condiciones diferentes en que
se desarrollan las células, constituyen en la actualidad una herramienta de importancia fundamental para dilucidar muchos aspectos importantes de la biología molecular de los organismos, en particular en aspectos relacinados con la regulación
temporal y espacial de diferentes grupos de genes que funcionan de forma coordinada para desarrollar distintas funciones celulares.
Con el fin de obtener un conocimiento más amplio del metabolismo primario de Penicillium chrysogenum, además de tratar de encontrar genes que pudieran tener influencia sobre la biosíntesis de penicilina, bien por regular directamente los genes
de la ruta o bien por cualquier otro mecanismo indirecto, se clonaron y caracterizaron clones de ADNc obtenidos de células P. chrysogenum NRRL 1951 (cepa silvestre) crecidas en medios con glucosa (fuente represora de la biosíntesis de penicilina) o
lactosa (fuente no represora) como fuentes de carbono. Para ello se utilizó la técnica de substracción de ADN y selección por PCR (kit PCR-Select TM cDNA Substraction de la casa comercial Clontech).
De los clones caracterizados, 55 presentaron identidad con diferentes proteínas conocidas en las bases de datos utilizadas, mientras que 92 no presentaron identidad significativa con ninguna proteína ya caracterizada. El análisis de los clones
condujo a la caracterización de varios genes no identificados aún en P. chrysogenum.
Algunos de los clones obtenidos y que presentan una expresión diferencial drástica están involucrados en la respiración. El análisis y caracterización completos de estos genes podría contribuir a elucidar mecanismos regulares o rutas de
transducción de señales involucradas en la generación de energía en P. chrysogenum.
En resumen, en este trabajo se analizó una pequeña parte del genoma de P. crysogenum; se h an secuenciado en total cerc de 25 kb, de las cuales 13 kb corresponden a genes ya identificados en otros organismos, pero la mayoría de ellos aún no
están caracterizados en P. chrysogenum. El ADn restante pertenece a genes aún no caracterizados en las bases de datos públicos utilizados. INTERACCIÓN DE LA RUTA HOG CON ELEMENTOS DE TRANSDUCCIÓN DE SEÑAL EN EL HONGO PATÓGENO CANDIDA
ALBICANS: IDENTIFICACIÓN DE DIANAS MEDIANTE UNA APROXIMACIÓN GENÓMICA . Autor: EISMAN REDONDO
BLANCA. Año: 2003. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: MICROBIOLOGÍA II, FACULTAD DE FARMACIA, UCM.
Resumen: El incremento en la incidencia y la elevada tasa de mortalidad asociada a las
infecciones producidas por Candida albicans hacen indispensable el desarrollo de terapias más eficaces, lo que ha impulsado en los últimos años el estudio de esta levadura. El conocimiento de la fisiología de este organismo incluye, entre otros, el
estudio de rutas de transducción de señal, que median la adaptación del organismo a las condiciones ambientales y en última instancia, regulan la interacción microorganismo-hospedador. Uno de los sistemas mejor conocidos son las rutas de
señalización medidas por quinasas MAP. En nuestro grupo hemos clonado y caracterizado algunos de los elementos que integran estas rutas. En concreto, hemos establecido que la ruta HOG de respuesta a alta osmolaridad no sól está implicada en la
adaptación a este tipo estrés, sino que además participa en la regulación de otros procesos como la respuesta a estrés oxidativo o la morfogénesis.
En este trabajo se ha abordado el estudio de la ruta HOG en la fisiología de C.albicans desde dos vertientes complementarias. Por un lado, y con el fin de establecer la relación de HOG con otros elementos implicados en transducción de señal,
hemos construido mutantes en HOG1 y en otros genes relacionados con procesos de señalización celular y hemos caracterizado su respuesta frente a estímulos que activan la ruta. Por otro lado, utilizando arrays de DNA, hemos caracterizado la respuesta
transcripcional de una cepa silvestre y de un mutante hog1 en respuesta a estrés osmótico, a estrés oxidativo y en presencia de suero, un factor inductor de la transicion dimórfica en C.albicans. ESTUDIO A NIVEL GENETICO Y ULTRAESTRUCTURAL DE LA DEFICIENCIA EN EL TRANSPORTADOR DE
CARNITINA/ACIL CARNITINA EMPLEADO COMO MODELO ASPERGILLUS NIDULANS. Autor: MARTINEZ JIMENEZ
OSCAR. Año: 2003. Universidad: ALCALA. Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
Resumen: La deficiencia de la translocasa de carnitina/acil-carnitina es la enfermedad
genético-metabólica más grave que afecta a la b-oxidación de ácidos grasos. Esta metabolopatía es letal en humanos y también en el resto de animales vertebrados e invertebrados, lo que imposibilita el desarrollo de modelos animales para su estudio.
Sin embargo, en Aspergillus nidulans, esta deficiencia no es letal de manera que cepas deficientes en el gen acuH, que codifica la TCAC de este hongo, pueden ser cultivadas en fuentes de carbono y energía alternativas a los ácidos grasos como, por
ejemplo, azúcares y glicerol. Esta condición nos ha permitido estudiar distintos aspectos de relevancia genético-molecular de esta metabolopatía.
En primer lugar, se han caracterizado las mutaciones presentes en las 6 cepas acuH- de A. nidulans existentes en nuestro laboratorio. Además, se ha demostrado la localización celular exclusiva de este transportador en la membrana interna
mitocondrial de A. nidulans, descartándose la posible localización dual, peroxisomal y mitocondrial, propuesta para esta proteína por algunos autores. Finalmente, se han aislado supresores extragénicos de la deficiencia en la TCAC de A. nidulans,
habiéndose clonado y caracterizado un gen supresor de esta deficiencia, el gen solA. La mutación solA7 en este gen, que codifica para el factor de terminación de la síntesis de proteínas eRF1 de A. nidulans, suprime la deficiencia de alelos sin
sentido en el gen de la TCAC.
EL SISTEMA HIDROLÍTICO DE TRICHODERMA. Autor: SANZ ANDREU LUIS. Año: 2003. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: BIOLOGÍA. Centro de realización: EDIFICIO DEPARTAMENTAL.
Resumen: Representantes de distintas especies de trichoderma han demostrado su validez como agentes de biocontrol frente a un amplio rango de hongos fitopatógenos, presentándose como una alternativa viable al uso de pesticidas químicos.
Los resultados de este trabajo tomados en su conjunto demuestran la enorme biodiversidad del género trichoderma en lo que se refiere a las enzimas involucradas en el proceso de micoparasitismo y el modo de acción sinérgico de estas enzimas en la
degradación de la pared celular de hongos fitopatógenos asimismo, se ha purificado, carcterizado y clonado una proteína extracelular de trichoderma asperellum, con actividad x-1,3-glucanasa, que es distinta a obras x-1,3-glucanasas descritas en la
bibliografía, que se induce específicamente en condiciones de micoparasitismo y de la que se derivan importantes aplicaciones industriales y agrícolas. FILOGENIA Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE HONGOS BASIDIOMICETOS DEL GÉNERO MYCENA
. Autor: MORAL JUÁREZ CATALINA DEL. Año: 2003. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
Resumen: Mycena (Pers.) Roussel con al menos 500 especies y variedades
descritas, constituye un grupo importante de hongos pertenecientes a la familia Tricholomataceae. La diversidad morfológica del género sugiere un origen polifilético. Este estudio proporciona un primer análisis del género Mycena basado en filogenia
molecuar. Se estudiaron 83 aislados que incluían 45 especies pertenecientes a 20 de las 45 secciones definidas en el género Mycena, y 2 especies del género relacionado Hemimycena Singer. Para el estudio de las relaciones filogenéticas de Mycena, se
amplificaron y secuenciaron las regiones ribosómicas del ADNr 18S; los dominios D1-D2 del ADNr 28S y la región espaciadora interna transcrita completa (ITS1; 5,8S ADNr y ITS2).
El análisis filogenético se ha comparado con los datos taxonómicos actuales, basados en caracteres morfológicos. Los análisis filogenéticos realizados mediante el método de Máxima Parsimonia y "Neighbour-joining" sugieren la existencia de varios
grupos monofiléticos, que deberían incluirse en 7 géneros distintos. Uno de ellos formado por las especies filogenéticamente relacionadas con la especie tipo del género, M.galericulata, las cuales deberían ser mantenidas dentro del género Mycena. Se
deberían crear 4 nuevos géneros para las actuales secciones Hiemales, Adonidae, Aciculae y Roridae. Un nuevo género adicional se debería establecer para las secciones filogenéticamente cercanas Amictae y Bulbosae. Por último, la sección Calodontes
debería ser transferida al género Prunulus Gray.
Nuestro estudio sugiere la necesidad de revisión de algunos de los caracteres morfológicos, tradicionalmente considerados en la taxonomía del género Mycena. CAPACIDAD ANTAGONISTA DE PENICILLIUM OXALICUM CURRIE & THOM Y TRICHODERMA HARZIANUM RIFAI FRENTE A
DIFERENTES AGENTES FITOPATÓGENOS. ESTUDIOS ECOFISIOLÓGICOS . Autor: ROSELLÓ CASELLES JOSEFA
LUISA. Año: 2003. Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA. Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS. Centro de realización: UNIVERSIDAD POLITÉCNICA DE VALENCIA.
Resumen: En la actualidad, el uso de plaguicidas químicos aún resulta necesario para controlar e incrementar los rendimientos agrícolas, pero en los últimos años el uso abusivo de estos productos ha desencadenado una serie de
alteraciones medioambientales, que han influido en el deterioro del suelo, la pérdida de biodiversidad, y el aumento de las enfermedades que atacan a los cultivos debido al desarrollo de especies resistentes a los plaguicidas.
Además, los consumidores están preocupándose cada vez más por los efectos directos, indirectos y acumulativos que los plaguicidas tienen sobre la calidad de los alimentos, la salud y el medio natural. Por ello, existe un consenso cada vez mayor,
por parte de la comunidad científica, de que los métodos de cultivo basados en el uso de productos químicos de síntesis son insostenibles, y como resultado de ello se están investigando nuevos sistemas más ecológicos para la protección de los
cultilvos. La concepción actual del control de las enfermedades se basa en la integración compatible, racional y sostenible de todos los sistemas de control disponibles (control cultural, control químico y control biológico). Estos sistemas de
control persiguen reducir de modo importante la dependencia de los plaguicidas químicos, y para ello se apoya en la utilización de los métodos de control biológico y en los mecanismos de defensa de las plantas. El esfuerzo que la investigación les
dedica se ha incrementado de manera espectacular, y eso se ha empezado a reflejar el número de agentes de biocontrol disponibles en el mercado o en fase de estudio.
Ante la necesidad de encontrar nuevos métodos que sustituyan a los productos químicos para el control de plagas y enfermedades de los cultivos, una alternativa sería aprovechar las ventajas que ofrecen los hongos como agentes de biocontrol
frente a otros sistemas de lucha, bien por ellos mismos o a través de sus metabólicos fúngicos. Por otra parte, está reconocido que el control biológico se produce de forma natural sin intervención del hombre, puesto que las plagas tienen sus
antagonistas naturales. Por ello, si se conocen los mecanismos de interacción entre un patógeno y los organismos antagónicos, el control biológico puede mantener el equilibrio entre las poblaciones. Los organismos dificultan la actividad patogénica
de otros utilizando una gran variedad de mecanismos de acción como la antibiosis, la competencia por los nutrientes y el espacio, y el parasitismo. En ocasiones, no es fácil determinar con precisión los mecanismos que intervienen en las
interacciones entre antagonistas y patógenos, pero en general, no tienen un único tipo de acción, y sí el antagonista posee varios de ellos reduce el riesgo de que el patógeno desarrolle sistemas de resistencia; por ello poseer distintos mecanismos
les convierte en posibles agentes de biocontrol.
Entre las especies fúngicas con mayor potencial para el control de las enfermedades de las plantas, cabe destacar a los géneros Penicillium y Trichoderma. La especie P.oxalicum ha demostrado ser activa frente a Fusarium oxysporum
f.sp.lycopersici, que causa la fusariosis del tomate, y en cuanto a Trichoderma, diversos autores han referenciado el comportamiento antagonista de T.harzianum frente a otros hongos patógenos de plantas, a través del micoparasitismo como principal
mecanismo de acción.
Este trabajo tiene como objetivo la obtención de un organismo de interés para el desarrollo de una agricultura más respetuosa con el medio ambiente, capaz de controlar a los agentes patógenos que causan enfermedades en los cultivos. Y para
conseguirlo nos propusimos estudiar "in vitro" el comportamiento de las cepas Penicillum oxalicum LBVB 1001 y Trichoderma harzianum LBVB 1010, con el fin de evaluar su capacidad para competir y dominar bajo determinadas condiciones ambientales de
actividad de agua (aw) y temperatura (T), cuando se enfrentan a distintas cepas fitopatógenas: Rhizoctonia solani CECT 2819, Verticillium dahliae CECT 2694, Fusarium oxuysporum f.sp.lycopersici CECT 2715 y CECT 2866, Fusarium oxysporum f.sp.gladioli
CECT 2867 y CECT 2868.
En primer lugar se estudió la respuesta de las cepas fúngicas a los factores ecofisiológicos en cultivo individual. Posteriormente, en ensayos de crecimiento dual, se evaluó la influencia de dichos factores enfrentando P.oxalicum con las cuatro
cepas de F.oxysporum, así como T.harzianum frente a R.solani, F.oxysporum f.sp.lycopersici CECT 2715 y V.dahliae. Además, basándonos en el Tipo de Interacción que establecen las especies enfrentadas en la sinteracciones interespecíficas, se calculó
el Índice de Dominancia (ID) para cada una de ellas. Finalmente, los resultados obtenidos nos permitieron determinar la capacidad antagonista de las cepas P.oxalicum y T.harzianum frente a los agentes fitopatógenos estudiados.
Los resultados del estudio individual de las cepas objeto de este trabajo, a las aw (0.85, 0.90, 0.95, 0.98 y 0.995) y T (15 y 25ºC) ensayadas, ponen de manifiesto que se produce un incremento en las ratios de crecimiento a medida que la
disponibilidad de agua del medio aumenta, situándose el valor máximo de crecimiento cuando la aw también es máxima (0.995). Sin embargo, en la cepa P.oxalicum, las ratios se incrementan al aumentar la aw hasta 0.98, donde obtiene el óptimo de
crecimiento, pero posteriormente éste experimenta un descenso cuando la aw asciende a 0.995. En todas las cepas ensayadas, se observa una variación de las tasas de crecimiento con la temperatura, siendo la disminución de la temperatura, de 25 a
15ºC, la que ocasiona el descenso del crecimiento fúngico. Destacar que la cepa V.dahliae se ha caracterizado por presentar los valores de crecimiento más bajos de todas las cepas analizadas, por el contrario T.harzianum ha sido la que mayores
ratios ha alcanzado.
La cepa P.oxalicum, en las interacciones con las cepas de F.oxysporum, obtiene tasas de crecimiento más altas cuando a 25ºC la aw es igual o menor que 0.98. A la temperatura de 15ºC, P.oxalicum es capaz de superar el crecimiento de la cepa 2715
y 2867 de F.oxysporum si la aw es igual o menor que 0.95 y que 0.90, respectivamente. Sin embargo, a 15ºC y a la aw de 0.95, no se aprecian prácticamente diferencias en las ratios de crecimiento entre P.oxalicum y las cepas 2866 y 2868 de
F.oxysporum. La cepa T.harzianum presenta en los ensayos de crecimiento dual frente a R.solani y V.dahliae, tanto a 15 como a 25ºC, mayores valores de crecimiento para aquellas aw en las que las cepas de la interacción crecen en común (0.98 y
0,995), quedando de manifiesto el total predominio d e T.harzianum sobre las cepas enfrentadas. En la interacción entre T.harzianum y la cepa 2715 de F.oxysporum, también es T.harzianum la que obtiene ratios de crecimiento mayores en casi todas las
condiciones ensayadas en las que muestran crecimiento, excepto a la aw de 0.95 y 15ºC, donde no se observan diferencias entre los valores de crecimiento de las cepas.
El Tipo de Interacción que se originan entre P.oxalicum y las cepas de F.oxysporum, así como el Índice de Dominancia obtenido para cada una de ellas, ponen de manifiesto que, cuando las condiciones de aw no superen el valor de 0.95 a 25ºC, la
cepa P.oxalicum es capaz de inhibir, la distancia o por contacto el crecimiento de las mismas, correspondiéndole valores máximos de ID (5 y 4 respectivamente) y con posterior crecimiento a través de sus colonias. Además, ambos parámetros nos
demuestran también el total predominio de T.harzianum sobre R.solani, V.dahliae y F.oxysporum cepa 2715, inhibiendo por contacto (ID de 4) sus crecimientos, cuando en ambas temperaturas la aw está comprendida entre 0.95 y 0.995, excepto frente a la
cepa de Fusarium, que a 15ºC y para una aw de 0.95, ambas especies establecen antagonismo mutuo por contacto, sin predominio de una sobre la otra, y siendo el ID (valor 2) el mismo para las dos.
Los resultados obtenidos nos permiten concluir que la cepa T.harzianum presenta una extraordinaria capacidad antagónica frente a R.solani y F.oxysporum f.sp.lycopersici cepa 2715, por lo que puede ser considerado como un buen agente de
biocontrol.
La cepa P.oxalicum no presenta unos resultados tan espectaculares como T.harzianum, pero no por ello, menos interesantes. Esta cepa nos aporta datos muy útiles al mostrar mayor poder de competencia cuando las condiciones de aw no son las óptimas
para su crecimiento, demostrando que la competitividad entre las especies no está relacionada con el crecimiento. Esta circunstancia es la que le permitirá controlar a las cepas de F.oxysporum estudiadas, quedando demostrada también su capacidad
antagónica frente a las mismas y su papel como agente de biocontrol
BASES CELULARES Y MOLECULAR DE LA VERTICILIOSIS (PRODUCIDA POR VERTICILLIUM FUNGICOLA) DE LOS
CULTIVOS INDUSTRIALES DE CHAMPIÑÓN (AGARICUS BISPORUS) Y EFECTO DEL FUNGICIDA PROCLORAZ-MN . Autor: BERNARDO LÓPEZ DOLORES. Año: 2002. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: BIOLOGÍA. Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLÓGICAS CSIC.
Resumen: La verticiliosis o "mole seca" de los cultivos de champiñión está producida por
el hongo Hifomiceto Verticillium fungicola que parasita los carpóforos de Agaricus bisporus (hongo Basidiomiceto), pero no su correspondiente micelio vegetativo. Estudios precedentes han puesto de manifiesto las diferentes estructuras químicas de
las paredes celulares de los micelios vegetativos y agregado de A.bisporus así como de las hifas de V.fungicola, estructuras celulares implicadas en la verticiliosis. También ha sido demostrado que V.fungicola sinetiza in vitro las enzimas
necesaritas para degradar las paredes celualres de ambos micelios de A.bisporus, mientras que solo es capaz de digerir in vivo las paredes del micelio agregado de los carpóforos de A.bisporus.
En fungicida Procloraz-Mn es utilizado rutinariamente en los cultivos industriales de champiñión para controlar la verticiliosis, que ocasiona cuantiosas pérdidas económicas en el sector. El efecto que produce este fungicida sobre las paredes
celulares de V.fungicola ha mostrado ser una inhibición parcial de las proteínas junto con ciertas modificaciones estructurales en los polisacáridos. Pero igualmente las paredes celulares de A.bisporus se ven afectadas parcialmente en su estructura
química por la acción del Procloraz-Mn, aunque los resutldos efectivos muestren únicamente una disminución en la producción industrial de champiñión. Dichos efectos producidos por el fungicida en las paredes celulares de los dos organismos
implicados parecen interferir en los mecanismos de contacto y reconocimiento y/o unión entre el micoparásito y el huesped, previos al desencadenamiento de la infección.
La segunda parte de esta Tésis estudia los citados mecanismos de contacto y reconocimiento y/o unión, habiendo podido demostrar la presencia de la proteína hidrofobina en V.fungicola, purificándola y caracterizándola, que junto con la
hidrofobia de A.bisporus anteriormente descrita, son las responsables del contracto inespécifico entre las hifas de ambos organismos. Seguidamente la glicoproteina lectina de A.bisporus, purificada y caracterizada igualmente en esta Tésis, ha
mostrado ser el ligando específico del glucogalactomanano de las paredes celulares de V.fungicola, cuya unión específica inicia el citado desencadenamiento de la verticiliosis. PRODUCCIÓN DE ENZIMAS HIDROLÍTICOS DE LA PARED CELULAR VEGETAL POR HONGOS ARBUSCULARES, HONGOS
SAPROBIOS Y RHIZOBIUM Y SU REPERCUSIÓN EN LOS MECANISMOS DE FORMACIÓN DE LA SIMBIOSIS . Autor: TRIBAK MOHAMED. Año: 2002. Universidad: GRANADA. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: ESTACIÓN EXPERIMETNAL DEL ZAIDÍN.
Resumen: Los hongos formadores de micorrizas, hongos saprobios y
bacterias de género Rhizobium tienen la capacidad de producir xiloglucanasas. Estos enzimas xiloglucanolíticos producidos por hongos saprobios y Rhizobium se segregan de forma mayoritaria al medio de cultivo y son inducibles mediante la presencia de
sustrato. Los hongos arbusculares y saprobios produjeros enzimas xiloglucanolíticos diferentes no solo a nivel de especie sino también a nivel de raza.
Los hongos arbusculares, hongos saprobios y bacterias del género Rhizobium incrementan la producción de xiloglucanasas por raíces de las plantas, este incremento es variable según la planta sobre la que se inoculan los microorganismos. La
inoculación de los hongos arbusculares en presencia de microorganismos saprofiticos o mutualistas produjo un incremento generalizado cuantitativo y cualitativo de la actividad xiloglucanásica de las plantas inoculadas. Se ha observado que existe una
correlación de la actividad endoxiloglucanasa del micelio externo de los hongos arbusculares, con el grado de colonización de las raíces de plantas inoculadas y con el efecto del hongo arbuscular sobre el crecimiento de la planta.
La actividad xiloglucanasa es importante en el proceso de colonización de la raíz por los hongos formadores de micorrizas arbusculares y por Rhizobium. ALTERNATIVAS BIOTECNOLÓGICAS EN CULTIVARES DE MUSA FRENTE A LOS PRINCIPALES PATÓGENOS DE SUELO EN
CANARIAS . Autor: RODRÍGUEZ ROMERO ANA SUE. Año: 2002. Universidad: LA LAGUNA. Centro de lectura: FARMACIA
. Centro de realización:
FACULTAD FARMACIA /ICIA.
Resumen: La aclimatización "post vitro" de platanera plantea ciertas dificultades derivadas del tránsito desde una fase con condiciones acémicas y heterotrofía, a otra antótrofa y no estéril. La ausencia de floramicrobiana en las
raíces de estas plantas incide negativamente en dicha adaptación. Algunos microorganismos del suelo (hongos y bacterias promotoras del crecimiento vegetal), pueden ayudar a la adaptación de las plantas, ambos microbios son capaces de contribuir a
una mejora de la condición sanitaria, incrementando la tolerancia a ciertos patógenos de raíz. ANÁLISIS DE LA FOSFORILACIÓN DEL FACTOR DE TRANSCRIPCIÓN PACC Y DE LA RESPUESTA TEMPRANA AL PH
ALCALINO EN ASPERGILLUS NIDULANS . Autor: ALVARO BLANCO JOSUE. Año: 2002. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
Resumen: PacC es un factor de transcripción con tres dedos de zinc que pertenece al hongo filamentoso A.nidulans. Su función es la de regular la expresión de algunos genes en función del pH del medio en el que crece el hongo. En respuesta a la
alcalinización del medio de cultivo del hongo la forma completa de PacC (PacC72) es procesada proteolíticamente mediante la eliminación de parte de sus residuos carboxilo terminal. Esto produce una forma truncada transcripcionalmente activa
(PacC27).
El diseño de un nuevo tipo de experimentos (los experimentos de cambio de pH), nos han permitido estudiar por primera vez la respuesta tempara de A.nidulans a la alcalinización del medio de crecimiento. El análisis de la proteína PacC en los
experimentos de cambio de pH nos ha proporcionado nueva información sobre el mecanismo de regulación por PaC:
1,- La forma PacC27 no procede de la proteólisis de la forma PacC72 presente a pH ácido (PacC72ac) sino del procesamiento de una forma PacC72 sintetizada a pH alcalino (PacC72alc).
2,- La señal de pH alcalino, además del procesamiento de PacC72ac, induce la degradación de la forma PacC72ac.
3,- En una cepa silvestre existe una forma PacC53 intermediaria del procesamiento de PacC72 a PacC27.
Por otro lado, el análisis mediante Northern de los niveles de expresión de pacC en los experimentos de cambio de pH nos ha permitido establecer que el pH alcalino induce de forma rápida y transitoria la expresión de pacC y que esta inducción es
dependiente del procesamiento de PacC72, lo que indica que PacC regula su propia transcripción ya sea de forma directa o indirecta. Nuestros resultados sugieren que la forma PacC53 está implicada en la producción del pico de transcripción de pacC.
La atenuación del pico de transcripción de pacC es dependiente de síntesis proteica y la forma PacC27 podría ser la responsable de esa atenuación.
Otra parte importante del trabajo realizado en esta tesis ha sido la determinación y estudio de la forforilación de PacC. Las aportaciones más relevantes de esta parte del trabajo han sido:
1,- La forma PacC72 es fosforilada en múltiples sitios, al menos en 4, siendo lo más probable que tenga 6-8 residuos fosforilados a pH ácido.
2,- La forma PacC53 aparece también fosforilada, mientras que no hemos detectado fosforilación en la forma PacC27.
3,- La activación de la ruta de señalización de pH (pal) no afecta al grado de fosforilación de PacC72, por lo que la ruta pal no regula la activación del procesamiento de PacC72 a través de un cambio global en el grado de fosforilación de
PacC72.
4,- El grado de fosforilación de PacC72 es dependiente de pH, pero no está condicionado por la activación de la ruta pal, lo que sugiere la existencia de un mecanismo independiente de la ruta pal que lo regula.
5,- La diferencia en el grado de fosforilación de PacC72 a pH ácido y alcalino es debida a la activación de proteínas quinasa inactivas a pH alcalino. RELACIÓN ENTRE EL CICLO CELULAR Y EL DESARROLLO SEXUAL EN EL HONGO CAUSANTE DEL CARBÓN DEL MAÍZ,
USTILAGO MAYDIS . Autor: GARCÍA MUSE TATIANA. Año: 2002. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.
Resumen: Los carbones
de las plantas son causados por hongos Basidiomicetos del orden Ustilaginales. Esta enfermedad genera graves pérdidas principalmente en cosechas de cereales. Aunque el rango de infección es muy estricto todos los carbones tienen en común la
necesidad de aparear para poder infectar la planta.
Así pues es imprescindible que tenga lugar la unión de dos células para desencadenar el programa de patogénesis.
Ustilago maydis, responsable del carbón del maiz, es un modelo de estudios de fitopatología, y ha permitido un mayor conocimiento del proceso de apareamiento que conlleva a la infección de la planta.
En esta tesis se ha pretendido analizar el proceso de diferenciación durante la respuesta sexual desde la óptica del ciclo celular.
U.maydis en respuesta a la feromona detiene su ciclo celular, y esta parada tiene lugar en fase G2. Para profundizar en el estudio del proceso de diferenciación desde el punto de vista del ciclo celular fue necesario caracterizar elementos
basales de la regulación del mismo en U.maydis.
Existe una única CDK en U.maydis, que se ha denominado Cdk1, que es especial. También se ha demostrado la existencia de dos ciclinas tipo B, que se han denominado Clb1 y Clb2.
Analizando el papel de estos tres elementos sobre la regulación del ciclo celular se ha propuesto que Clb1 tiene un papel en las transiciones G1/S y G2/M, mientras que Clb2 interviene desencadenando la entrada en mitosis. Ambas subunidades
reguladoras deben ser degradadas para permitir la progresión y salida del ciclo celular, en concreto Clb1 debe ser degradada para permitir la progresión por el ciclo celular a través de las fases G2 y mitosis, y Clb2 debe ser destruida en anafase
para permitir la progresión por el ciclo celular así como en la segregación cromosómica.
Por otro lado se ha caracterizado un regulador de ciclo de la familia Fizzy-related, que se ha denominado Cru1. Como otros miembros de la familia Cru1es necesario para la degradación de las ciclinas tipo B descritas. Cru1 también intervienen en
adapatar el ciclo celular al medio de crecimiento y en los procesos de apareamiento, donde el papel de Cru1 está ligado a su papel sobre los niveles de ciclinas tipo B. CARACTERIZACIÓN DEL ANTICUERPO MONOCLONAL C7 DESARROLLADO FRENTE A UNA MANOPROTEÍNA DE CHOQUE
TÉRMICO DE LA PARED CELULAR DE CANDIDA ALBICANS . Autor: OMAETXEBARRIA IBARRA MIREN JOSU
. Año: 2002. Universidad: PAIS VASCO. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.
Resumen: La alta incidencia de la candidiasis en las últimas décadas ha hecho necesaria la
investigación a nivel diagnóstico, epidemiológico y así como de tratamiento de la infección.
La pared celular de C.albicans, como estructura más externa de la célula juega un papel esencial en la relación entre el hospedador y el parásito y está implicada en las funciones biológicas del hongo relacionadas con la virulencia y la
patogenicidad. En este contexto resulta interesante identificar antígenos de la superficie celular que sean inmunodominantes y puedar se utilizados como vacunas para el desarrollo de una respuesta inmune protectora o para la producción de
anticuerpos monoclonales que puedan ser utilizados en el diagnóstico y tratamiento de la canidiasis. Si bien la respuesta celular provocada por dichos antígenos ha sido la que ha concertado un mayor interés y se ha estudiado ampliamente, durante
los últimos años ha ido en aumento el interés por la respuesta humoral inducida por ampliamente, durante los últimos años ha ido en aumento el interés por la respuesta humoral inducida por dichos antígenos. Interés que se ha centrado en el papel
protector de diversos anticuerpos que reconocen antígenos de la pared del hongo como mananos, manoproteínas, el receptor de la toxina killer de Pichia anomala o la Hsp90 entre otros. Con estos antecedentes se planteó identificar un antígeno
inmunodominante en la respuesta frente a la candidiasis oral y producir anticuerpos monoclonales frente a dichos antígenos.
La utilización de la saliva permitió identificar un antígeno de la superficie celular inmunodominante en la respuesta frente a la candidiasis oral.
Se obtuvieron anticuerpos monoclonales frente a dicho antígeno que resultó ser un componente manoproteíco de peso molecular superior a 200 kDa. De los anticuerpos monoclonales seleccionados en un principio por su reactividad frente a antígenos
de la superficie celular del hongo se centró el trabajo en el AMc C7. Este AMc reacciona más intensamente con el micelio que con la levadura, siendo el micelio la fase celular más intimamente ligada a la adhesión y posterior invasión de tejidos.
Además reconocía el componente de alto peso molecular reconocido por la IgA secretora de la saliva y con el que se habían inmunizado los ratones de la fusión, además de reconocer la proteína altamente inmunogénica enolasa.
Es conocida además la actividad biológica de este AMc en base a resultados obtenidos por el laboratorio y que demuestran la actividad candidacida de este anticuerpo monoclonal. Por todo ello centramos el interés en el AMc C7.
El hecho de que el antígeno reconocido por el AMc C7 se expresara más a 37ºC que a 24ºC nos hizo pensar en su posible relación con las proteínas de choque térmico. Estas proteínas como chaperoninas que protegen al hongo frente a diferentes tipos
de estrés y recientemente se ha mostrado que también protegen a la célula frente a estímulos apoptóticos. Estos trabajos avalan la relación existente entre HSPs y cáncer. El hecho de que el AMc C7 había sido producido a partir de la inmunización con
una manoproteína de choque térmico, el alto nivel de conservación de las HSPs y su más que probable relación con el cáncer nos llevó a analizar la reactividad del AMc C7 frente a tejidos tumorales humanos.
El estudio de la reactividad del AMc C7 frente a tejidos y líneas tumorales permitió confirmar que este AMc podía ser utilizado como indicador de pronóstico en procesos tumorales.
Se conocía además la actividad candidacida de este AMc y sospechabamos que podría actuar de modo similar al anticuerpo antiidiotipo K10 que se unea al receptor para la toxina killer de P.anomala y cuya unión desemboca en muerte celular de
C.albicans, a pesar de que no hemos podido identificar el lugar de unión o receptor para el AMc C7. Diversos análisis resultaron en la identificación de una región de una proteína reconocida por el AMc C7 que presentaba homología con el receptor
para la acetil colina de Acheta domesticus.
Este resultado nos pareció interesante ya que estabamos buscando una molécula implicada en la actividad candidacida del AMc C7. Este resultado ha supuesto el inicio de una serie de trabajos dirigidos hacia la identificación del epitopo
reconocido por el AMc C7. CONTRIBUCIÓN AL ESTUDIO CLÍNICO EPIDEMIOLÓGICO DE LAS DERMATOFITOSIS EN EL AREA SANITARIA SUR DE
SEVILLA . Autor: MARTINEZ DIAZ DE ARGANDOÑA CONCEPCIÓN. Año: 2002. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura:
MEDICINA. Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
Resumen:
Desde Septiembre de 1999 hasta Septiembre de 2001, se procedió al estudio de un total de 547 pacientes con sospecha clínica de Tinea, de ellos, en 106 casos se confirmó el diagnóstico mediante cultivo positivo a dermatofitos.
Realizamos con los datos obtenidos un estudio clínico epidemiológico con los siguientes resultados.
La incidencia de dermatofitosis en nuestro área sanitaria se cifró en un 0.66%, proporción inferior a la registrada en anteriores estudios realizados en la provincia de Sevilla.
El agente patógeneo más aislado en nuestra casuística fue Microsporum canis (44,34%).
Trichophyton mentagrophytes y Trichopyton rubrum compartieron el segundo lugar con una proporción de 25,47%. Otros dermatofitos hallados en nuestro medio fueron: Mycrosporum gypseum (1,89%), Epidermophyton floccosum (0,94%), Trichophyton
verrucosum (0,94%) y Trichophyton violaceum (0,94%).
Los hongos de origen zoofilico fueron los agentes más aislados constituyendo el 70,75% de nuestra muestra. Los de origen antropofílico el 27,35% y los geofilicos, los menos frecuentes con un 1,89%.
Tiña corporis fue la manifestación clínica más frecunte con un 34,91%. En segundo lugar destacamos Tiña pedis con una proporción del 21,70%, superando a Tiña capitis con un 17,93%. Tiña unguium, 14,15%. Tiña barbae y Tiña cruris presentaron
una proporción de un 4,72%. Tiña manuum fue la localización menos observada con un 1,89%.
Los hombres en nuestra casuística (59,43%) predominaron ligeramente sobre las mujeres (40,57%).
El grupo de edad con mayor número de aislamientos fue de los 0 a 9 años, presentando fundamentalmente Tiña corporis y Tiña capitis. Los mayores de 60 años ocuparon el segundo lugar con Tiña corporis, Tiña pedis y Tiña unguium.
El ámbito rural presentó una frecuencia 3,16 veces superiro al urbano. Microsporum canis fue el agente más aislado en ambos. La vía de contagio más identificada fue el contacto con animales de compañía (47%). Fundamentalmente el perro (49%) y
el gato (37%). Microsporum canis constituyó el 60% y el 74,9% de los cultivos positivos en perros y gatos respectivamente. BIOLOGÍA Y FUNCIÓN DEL ALERGENO MAYOR DE ALTERNARIA ALTERNATA (ALT A 1). ESTUDIOS DE REACTIVIDAD
CRUZADA COMO COMPONENTES DE OTRAS ESPECIES DE HONGOS DE INTERÉS ALERGOLÓGICO . Autor: SÁENZ DE
SANTAMARÍA SÁEZ DE SANTAMARÍA MIRÍAM. Año: 2002. Universidad: PAIS VASCO. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
Resumen: El
objetivo del presente proyecto fue estudiar la naturaleza biológica, la localización a nivel celular y la reactividad cruzada del alergeno mayor (Alt a 1) de Alternaria alternata, una de las principales especies fúngicas alergénicas.
Los resultados obtenidos demostraron que la glicoproteína Alt a 1 es un enzima con actividad hidrolasa que se secreta al medio externo y que dicha actividad enzimática es independiente de la parte glucídica de la molécula.
Las especies alergénicas filogenéticamente próximas entre sí (A.tenuísima, U.botrytis, C.lunata y S.botryosum) demostraron tener proteínas de bajo peso molecular con epitopos o estructuras antigénicas comunes a Alt a 1, mientras que otras más
alejadas filogenéticamente (P.chrysogenum, C.Herbarum y A.fumigatus) no presentaron estructuras antigénicas comunes. ESTUDIO DE LOS FACTORES QUE INFLUYEN EN LA SENSIBILIDAD IN VITRO DE LOS HONGOS FILAMENTOSOS
. Autor: LLOP MARGALEF JOSEP CARLES. Año: 2001. Universidad: ROVIRA I VIRGILI. Centro de lectura: MEDICINA
. Centro de realización: FACULTAT DE MEDICINA I CIENCIES DE LA SALUT.
Resumen: En los ultimos años, se ha detectado un aumento de la incidencia de las infecciones
producidas por hongos patogenos oportunistas, especialmente en pacientes inmunodeprimidos.
El estudio de la sensibilidad de estos hongos a los antifungicos puede llevarse a cabo mediante tecnicas in vitro. Sin embargo, los resultados de este tipo de determinaciones estan altamente influenciados por una serie de variables, entre las
que se encuentran principalmente el criterio de lectura de la CMI, el tiempo de incubacion, la temperatura, las caracteristicas del inóculo fungico, el medio de cultivo y el pH.
Los objetivos de esta tesis fueron, en primer lugar, comprobar si los resultados in vitro de hongos filamentosos no estudiados anteriormente mediante el metodo de microdilucion eran equiparables a los que se obtenian por el de macrodilucion. En
segundo lugar, una vez comprobado esto, era valorar la influencia que diferentes factores ejercian sobre el desarrollo de esta tecnica, que hasta aquellos momentos no era considerda como de referencia.
La metodologia utilizada se basó en la indicada en los documentos M-28A yM-38P del National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS).
-Los resultados obtenidos con el metodo de microdilucion son equiparables a los obtenidos por macrodilucion.
-El metodo del hemocitometro permite preparar inoculos de un tamaño predeterminado, ya que los resultados obtenidos con el contaje de celulas se corresponden bien con el numero de UFC/mL obtenidas tras el recuento en placa. Sin embargo, la
lectura espectrofotometrica de estos inoculos varia en funcion de las caracteristicas celulares de los conidios de las diferentes especies fungicas.
-Si la cuantificacion de inoculos se lleva a cabo mediante contaje de UFC/mL, los resultados de CMI y CML obtenidos en estudios de susceptibilidad varian significativamente según el tipo de inoculo (conidios o hifas).
El medio de cultivo, el tiempo de incubacion y el criterio de lectura de la CMI influyen de manera relevante en los resultados de sensibilidad frente a los diferentes antifungicos, mientras que la temperatura no.
-La lectura de CMI mediante el sistema visual es comparable a las lecturas visual con agitacion y espectrofotometrica.
La relevancia clinica de los resultados y conclusiones obtenidos deben ser posteriormente evaluada en ensayos in vivo. MANIFESTACIONES UNGUEALES EN LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA.
Autor: GARCIA SILVA JESUS M.. Año: 2001. Universidad: A CORUÑA. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: CENTRO UNIVERSITARIO DE OZA.
Resumen: FUNDAMENTO: Es contraste con las manifestaciones cutáneas, las alteraciones ungueales en la infeccion por el VIH han sido objeto de un número muy reducido de trabajos y sus caracteristicas epidemiologicas,
expresibidad clinica, posible valor pronostico y correlación con el estado inmunitario son desconocidos. Ademas, existen controversias no resultas como el "sindrome de las uñas amarillas" asociado a la infección por VIH, y aspectos confusos como la
paroniquia por antirretroviricos, que ha sido atribuida a diferentes farmacos y se ha incluido en el sindrome de lipodistrofia. OBJETIVOS: Determinar las caracteristicas clinicas y epidemiologicas de las onicopatias en los pacientes que las padecen
y el resto. Establecer si la ocurrencia y la intensidad delas onicopatias se correlacionan con el estado inmunitario. Comparar las pruebas para el diagnostico de onicomicosis. Determinar si la melanoniquia tiene valor como marcador de toxicidad
medular por cidovudina (AZT). Caraterizar el sindrome de las uñas amarillas asociado al VIH. Confirmar la existencia de un efecto similar al de los retinoides orales inducido por antirretroviricos, determinar los farmacos responsables y describir
sus caracteristicas. METODOS: Estudio observacional prospectivo y transversal de 335 pacientes seropositivos consecutivos desde enero de 1997 a julio de 1999. Se usaron formularios para la recogida sitematica y procesamiento informatico de los
datos. Se efectuó exploración dermatologica y pruebas complementarias. Para el diagnostico de onicomicosis se realizo examen directo con KOH y tinta Parker, estudio histológico de recorges de lamina teñidos con PAS y cultivos. Se empleó el programa
de base de datos de Acess 97 y los programas estadisticos SPSS 10.0 y Epi Info 6.04. RESULTADOS. El 46,58% presento alteraciones ungueales. El 11,64% tuvo onicomicosis, se asoció estadisticamente con una edad mas avanzada y la presencia te tinea
pedis, la frecuencia fue mayor en homosexuales (23,1%) que en UDVP (10,3%), diferencia no significativa (P=0,072). No fue mas frecuente en pacientes con sida ni hubo correlacion con la categoria clinica ni el estado inmunitario. La intensidad se
asocio significativamente con linfocitopenia CD4 y cargas viricas mas elevadas y fue mayor en los pacientes con sida y con tiempo desde el diagnostico más prolongado. El método diagnóstico de mayor sensibilidad, y VPN fue el estudio histológico de
recortes teñidos con PAS, y el de menor, el cultivo. Resultado de los cultivos. 45,71% negativos, T.rumrum 34,29%, T.mentagrophytes 11,43%, Acremonium 2,86%(1 caso), contaminación por levaduras 5,71% (2 casos). Las formas clínicas fueron: OSDL
67,67%, ODT 28,21%, OBS 12,82%, OSP 5,13% y OSDL-PD 2,56%. El 17,95% presentó varias formas clínicas. El 8,36% de la serie presentó melanoniquia. Se asoció estadisticaemnte con la raza, el fototipo cutáneo alto, el color oscuro del cabello y el iris
y la edad más avanzada. El 18,75% de los que recibieron AZT desarrolalron melanoquiniquia no relacionada con AZT; no hubo diferencias sifnificativas en los valores del hemograma. Diez pacientes (2,98%) presentaron xantiniquia de causa no filiada,
estos tenian antecedentes de tuberculosis con una frecuencia significativamentemayor que el resto de los enfermos, aunque es un hallazgo incierto por imprecisión estadística(P=0,019 OR=2,97 IC 95% 1,15-7,61), ninguno cumplia criterios del sindrome
de las uñas amarillas. Hubo asociación significativa entre efecto retinoide y sus manifestaciones (influyendo paroniquia y uñas enclavadas) e indinavir. El 27,63% de los pacientes que recibieron indinavir presentaron efecto retinoide el 9,21%,
paroniquia y uñas enclavadas) e indinavir. El 27,635 de los pacientes que recibieron indinavir presentaron efecto retinoide el 9,21% paroniquia. La interrupción del indinavir o sustitución por otro antirretrovírico (incluyendo a otros inhibidores
de la proteasa) resolvía todas estas manifestaciones (aun manteniendo la 3TC si formaba parte de la terapia de combinación), que recidivaban al reintroducirlo. La onicopatia psoriásica (4,78%) y la psoriasis se asociaron estadisticamente a la
infección por el VHB. La leuconiquia aparente (4,78%) se presentó principalmente en enfermos con hepatopatías crónicas. Los 5 casos con acropaquias tenian enfermedades sistémicas concurrentes conocidas como causa de las mismas. Los 2 caos con
eritema perungueal aislado intenso y persistente tenian hepatitis crónica por VHC. Hubo 3 casos de paroniquia por levaduras, sin afectación de la lámina ungueal. CONCLUSIONES. Las alteraciones ungueales son frecuentes y pueden ser de ayuda en el
diagnóstico de la infección por VIH, enfermedades asociadas, y efectos adversos del tratamiento. La ocurrencia de onicomicosis no se correlaciona con el estado inmunitario, pero si su gravedad. Sus caracteristicas clinicas y etiologicas y la
respuesta al tratamiento son semejenates a los de la población seronegativa. El examen histológico de recortes teñidos con PAS es el método con mayor capacidad diagnóstica de onicomicosis. La melanoquinia es frencuente, en relación con los farmacos
y las enfermedades asociadas, carece de implicaciones pronósticas y no tienen valor práctico para la detección de toxicidad medular por AZT. La xantoniquia es la cromoniquia más frecuente, la xantoniquia no filiada no constituye una entidad
nosológica y la infección por VIH no es una causa del síndrome de las uñas amarillas. El indinavir es la causa más frecuente de paroniquia en los pacientes seropositivos, que aparece en el contexto del efecto retinoide, el cual es la toxicodermia
más frencuente por indinavir. ESTUDIOS FILOGENÉTICOS EN LA FAMILIA MYCOCALICIACEAE (MYCOCALICIALES, ASCOMYCOTA)
. Autor: VINUESA NAVARRO M. ANGELES. Año: 2001. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: BIOLOGÍA. Centro de realización: SMITHKLINE BEECHAM.
Resumen: Esta Tesis muestra un estudio de la familia Mycocaliciaceae en distintos niveles
taxonómicos:
Interespecífico, intraespecífico, delimitación de los géneros constituyentes de la familia y relaciones de la familia con otros familias de Ascomycota, empleando datos de distinta naturaleza, morfológicos, genéticos y químicos.
El abordaje molecular de la familia Mycocaliciaceae, en función de las secuencias de los genes 18S y 28S ADNr, muestra que se trata de un grupo monofilético.
En cuanto a sus relaciones externas con otros taxones de Ascomycota, se establece una agrupación estable (18S) con Sphinctrinaceae, ya observada previamente (Wedin y Tibell, 1997), que dio lugar a la descripción del orden Mycocaliciales (Tibell
y Wedin, 2000). La secuencia de un fragmento de 1250 pb del gen 28S ADNr muestra un agrupamiento con la familia Coniocybaceae (antiguo Caliciales, actualmente familia de posición incierta en Ascomycota). Las relaciones internas entre los géneros
que componen la familia son complejas. Los datos moleculares obtenidos, coinciden con los datos morfológicos recogidos por Tibell en sus numerosos trabajos (Tibell, 1975, 1978, 1984, 1987, 1994, 1996, Tibell y Titov, 1995), puesto que no han sido
suficientes para la delimitación de cada género. Los análisis de las secuencias de la mitad 5' del gen 28S ADNr en Mycocaliciaceae muestran que los géneros Chaenothecopsis y Mycocaliciuim tal como se circunscriben actualmente no son monofiléticos.
Se establecen relaciones entre especies con mayor o menor apoyo en datos morfológicos y de producción de metabolitos secundarios en cultivo.
En el nivel taxonómico de especie, el análisis de las secuencias de las regiones ITS, permiten la descriminación genética entre M.subtile y M.albonigrum, especies de muy complicada discriminación morfológica. La variabilidad en esta región para
dos especímenes (UPSC 02173 y UPSC 01896) identificados como M.subtile es suficiente como para proponerlos como especie nueva, a pesar de que morfológicamente se encuentran dentro del rango de valores descritos para la especie M.subtile. Sin
embargo, su patrón de producción de compuestos es semejante al producido por M.albonigrum. Los estudios filogenéticos realizados con secuencias de las regiones ITS, 18S, muestran que los representantes de esta especie críptica se encuentran
genéticamente más cercanos a M.subtile que a M.albonigrum. AISLAMIENTO Y DETERMINACIÓN ESTRUCTURAL DE LOS METABOLITOS SECUNDARIOS Y DE BIOTRANSFORMACIÓN DEL
HONGO FITOPATOGENO COLLETOTRICHUM GLOEOSPORIOIDES (PENZ.) PENZ Y SACC. Autor: GARCÍA PAJON
CARLOS MARIO. Año: 2001. Universidad: CADIZ. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
Resumen: De los medios de cultivo
Czapec-Dox del hongo fitopatógeno Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Penz y Sacc., se aislaron e identificaron los siguientes metabolitos: 4-(2-acetoxi-etil)-fenol, 4-(1,2-dihidroxi-etil)-1,2-dihidroxibenceno,
2-(3,4-dihidroxifenil)-3,4-dihidroxitetrahidrofurnao, 3,4-dihidroxiacetofenona, Ácido 3,4-dihidroxibenzoico, 4,5-dihidroxi-2-metoxiacetofenona, 4,5-dihidroxi-3-metoxiacetofenona, Ácido 4-hidroxiftálico,
4-metoxi-3-metil-6-(1-metilpropenil)piran-2-ona. (Nectriapironal), 6-(3-hidroxi-1 -metilpropil)-4-metoxi-3-metilpiran-2-ona, 2,5-dihidroximetil-furano. (2,5-dimetanol-furano), Ácido 1H-indol-3-carboxílico, el esteroide ergosterol, junto con los
trigliceridos de los ácidos grasos oleico, linoleico, linolenico y palmitico y los digliceridos y monogliceridos de estos mismos ácidos grasos.
Se realizó la evaluación antifúngica contra C.gloeosporioides de los alcoholes y cetonas aromáticas citadas a continuación: bencil-4-clorofenilcetona, 1-(4-clorofenil)-2-feniletanol, bencil-4-hidroxifenilcetona,
2-fenil-1-(4-hidroxifenil)etan-1-ol, 4-clorofenil-ciclopropilcetona, 4-clorofenil-1-ciclopropilmetan-1-ol, 4-cloro-propiofenona, 1-(4-clorofenil)propan-1-ol, 3-cloropropiofenona y 1-(3-cloro-fenil)propan-1-ol. La mayor actividad se observó con el
compuesto 1-(4-clorofenil)-2-feniletanol el cual fue sometido a biotransformación, con el fin de estudiar el mecanismo de destoxificación del hongo, en el proceso se observó que la mezcla racemica del compuesto 1-(4-clorofenil)-2-feniletanol produce
los siguientes metabolitos: bencil-4-clorofenilcetona, 1-(4-clorofenil)-1-acetoxi-2-feniletano, 2-(4-clorofenil)-2-hidroxi-1-feniletanona, 1-(4-clorofenil)-1,2-dihidroxi-2-feniletano, 1-(4-clorofenil)-1,2-dihidroxi-2-feniletano,
1-(4-clorofenil)-1-acetoxi-2-(2-acetoxifenil)-etanol, 1-(4-clorofenil)-1-acetoxi-2-(3-acetoxifenil)-etano y 1-(4-clorofenil)-1-acetoxi-2-(4-acetoxifenil)-etano. En la biotransformación del compuesto 1-(4-clorofenil)-2-feniletanol el hongo
fitopatógeno C.gloeosporioides hidroxila la cadena alquílica formado 1,2-dioles como productos principales e hidroxila selectivamente, de forma no regioespecífica, el anillo aromático no clorado. FILOGENIA Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE HONGOS ASCOMICETOS DE LA FAMILIA XYLARIACEAE
. Autor: SÁNCHEZ-BALLESTEROS VEGA JAVIER. Año: 2001. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS
. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.
Resumen: La familia Xylariaceae (orden Xylariales) constituye un grupo
importante de hongos Asocomicetos con más de 40 géneros aceptados actualmente. Es un grupo de distribución cosmopolitan y con una gran diversidad morfológica, de hábitat y modo de vida.
Este trabajo tiene como objetivo la caracterización molecular y el análisis filogenético de cepas de la familia Xylariaceae a partir de secuencias de la región de ADN que codifica para lso ARN ribosómicos (región de ADN ribosómico), así como la
comparación de los resultados de los análisis filogenéticos obtenidos con las clasificaciones basadas en datos morfológicos. Para ello se han utilizado 72 cepas, pertenecientes a 14 géneros y 45 especies distintos, todos ellos pertenecientes a la
familia Xylariaceae, excepto Camarops ustulinoides, perteneciente a la familia Boliniaceae (orden Sordariales). Para todas las cepas, se amplificó y secuenció la región ITS total del ADN ribosómico.
Para 25 cepas representativas de los géneros estudiados se amplificó y secuenció la zona 5' de la región 28S. Se comprobó la alta variabilidad de secuencia de la región ITS total, principalmente en la región ITS1. La zona 5' de la región 28S
presenta una variabilidad mucho menor. No se han detectado intrones en la región secuenciada de ninguna de las cepas. En este trabajo se describen por primera vez en la familia Xylariaceae la existencia de repeticiones de tres motivos de secuencia,
muy similares, en un número y distribución muy variable, incluso entre cepas de una misma especie. Los análisis filogenéticos realizados apoyan el carácter monofilético de la familia Xylariaceae, que constituye así un grupo natural. Se confirma la
posición taxonómica de Camarops fuera de la familia Xylariaceae. El género Xylaria es un género complejo, con una gran variabilidad, y probablemente sin un origen monofilético. Nuestros datos no se correlacionan con las propuestas de subdivisión del
género. Se confirma la gran afinidad de Kretzschmaria con Xylaria, así como la sinonimia de Ustulina con Kretzschmaria. Hypoxylon constituye un género con una alta variabilidad, cuya subdivisión en secciones no es apoyada por nuestros resultados. La
separación entre Biscogniauxia y Camillea podría ser artificial según nuestros datos. De los géneros segregados de Hypoxylon, se confirma la posición más alejada de Nemania. Por el contrario, la posición taxonómica de Creosphaeria y de Whalleya es
dudosa. Rosellinia es un género polifilético y, por tanto, artificial. Finalmente, nuestros datos confirman la estrecha relación existente entre Podosordaria y Poronia, así como la pertenencia de Dicyma (anamorfo de Ascotricha) a la familia
Xylariaceae. ACTIVIDAD DE LOS LEUCOCITOS POLIMORFONUCLEARES FRENTE A HONGOS FILAMENTOSOS CAUSANTES DE
ENFERMEDADES INTERNAS . Autor: GIL LAMAIGNERE CRISTINA. Año: 2001. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: ARISTOTLE UNIVERSITY OF THESSALONIKI.
Resumen: La incidencia de infecciones fungicas internas esta aumentando
paulatinamente, principalmente debido al incremento en el número de pacientes inmunodeprimidos. En el presente estudio evaluamos la actividad antifungica de los neutrofilos (PMNL) frente a hifas de hongos pertenencientes al filo Zygomycota (Absidia
Corymbifera, Rhizopus Oryzae y Rhizopus Microsporum) y al filo ascomycota de Anión superoxido y de actividad, antifungica global.
Además, se evaluo el efecto que una incubación a corto y largo plazo de estos PMNL en presencia de GM-CSF y/o IFN-gamma, tiene sobre dicha actividad. Asi mismo, se evalua el efecto que ciertos fármacos tienen sobre la actividad antifungica de
estos fagocitos. Los fármacos fueron distintas formulaciones farmacológicas de anfotericina B (AmB) (disuelta en deoxicolato o DAMB, en complejo lipidico o ABLC y liposoñial o LAMB) y diversos azoles (Itraconazol o ITC, voriconazol o VRC y
posaconazol o PSC).
Los Resultados mostraron que los PMNL muestran distinta actividad frente a las diversas especies estudiadas. Además, el tratamiento con las citoquinas estudiado es capaz de incrementar su actitividad antifungica con una cinética temporal
variable según el hongo evaluado, con una mejor actividad de GM-CSF. De las formulaciones de AmB, ABLC muestra un efecto aditivo sobre la actividad antifungica de los PMNL frente a todos los hongos evaluados, mientras las otras dos formulaciones lo
hacen solo frente a algunos de los hongos. Por otra parte, los tres azoles estudiados mostraron un efecto aditivo sobre la actividad antifungica de los PMNL frente a ambos scedosporium, si bien solamente PSC mostro efectos sinérgicos con los PMNL
frente a scedosporium prolificans.
| 89 tesis en 5 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
|
|
|