PROCESOS MICROBIANOS, 2

Autor: VAZQUEZ ARAGÓN PABLO.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA UAM.

Resumen: Los objetivo de esta tesis fueron: 1,- Cuantificar la frecuencia de infección nosocomial y sus características en un Servicio de Cirugía General. 2,- Conocer los factores que determinan la adquisición de una infección quirúrgica, infección del tracto urinario, neumonía nosocomial y bacteriemia. 3,- Estimar qué variables hay que conocer para predecir el riesgo de aparición de IQ, ITU, NN y bacteriemia. 4,- Valorar el impacto que la disminución de las estancia hospitalaria tiene sobre la detección de la infección quirúrgica hospitalaria. Entre el 1 de Enero de 1995 y el 31 de Diciembre de 1998, se realizó en el Complejo Hospitalario de Albacete, un estudio prospectivo, longitudianl, descriptivo y analítico de una cohorte de pacientes quirúrgicos en el que fueron incluidos 2794 pacientes del Servicio de Cirugía General, con una estancia postoperatoria superior a las 48 horas. A partir de la Historia Clínica, personal adiestrado de la Unidad de Medicina Preventiva cumplimentaba una ficha de Vigilancia Epidemiológica de Infección Nosocomial. Para el análisis de las variables cuantitativas, se utilizaron la t de Student o el test de Kruskall-Wallis, y para las variables cualitativas el test de Ji2 con corrección de Yates o el test de Fisher, además de la Ji2 de tendencias y el análisis de la varianza. El nivel de significación estadístico elegido, fue, para todos los estadísticos el de p

Autor: BLANCH SANCHO JOSE JAVIER.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: ALBACETE, HOSPITAL GENERAL.

Resumen: OBJETIVOS 1,- Conocer la incidencia y principales características de la bacteriemia en el hospital general de Albacete HGA. 2,- Describier la mortalidad de la bacteriemia en el HGA y las variables con ellas relacionadas. 3,- Definir un modelo de predicción de riesgo de mortalidad. 4,- Aportar recomendaciones que ayuden al clínico en el correcto manejo de la bacteriemia. MATERIAL Y MÉTODOS Estudio prospectivo de los episodios de bacteriemia verdadera en el HGA en pacientes mayores de 7 años durante los años 1991-1995. Para la identificación de las variables asociadas de manera independiente a la mortalidad, y en base a ellas realizar el modelo predictivo se usó la regresión logística. RESULTADOS Se estudiaron 1.386 episodios. La incidencia de bacteriemia en el HGA fue de 13,28 episodios por cada 1.000 ingresos hospitalarios. La adquisición fue mayoritariamente comunitaria (59%) y los principales focos de origen fueronel tracto urinario (25%), el primario (18%), el respiratorio inferior (12%), la vía venosa central (11%) y el tracto biliar (10%). Los principales gérmenes resonsables fueron, por este orden, E.coli, S.aureus, S.epidermidis, S.pneumoniae y Brucella spp. Las variables que tras análisis multivariante se comportaron como factores independientes de riesgo de muerte fueron la edad, el tipo de germen, el foco de origen de la bacteriemia, la enfermedad subyacente moderda o grave, la presencia de cirrosis, la temperatura inferior a 38º, la presencia de catéter vesical, de vía venosa periférica, la cifra de leucocitos, la presencia de coma, de shock, un tratamiento antibiótico ausente o inadecuado y el desarrollo de complicaciones durante el ingreso. En base a los resultados se reflejan una serie de recomendaciones para la mejoría del manejo de la bacteriemia, tanto en su prevención como tratamiento. CONCLUSIONES 1,- La incidencia y principales características de la bacteriemia en el HGA son similares a las de otros centros de similares características. 2,- Destaca el papel preponderante de la infección por Brucella, que refleja el carácter endémico de esta infección en nuestra comunidad. 3,- Se confirma el aumento en la incidencia de bacteriemia por estafilococos coagulasa-negativos. 4,- Mediante análisis multivariante se han obtenido las variables asociadas de manera independiente a la mortalidad por bacteriemia. La única susceptible de ser modificable es el tratamiento antibiótico. 5,- El estudio descriptivo permite realizar una serie de recomendaciones para ayuda del clínico en su práctica habitual.

Autor: GARMENDIA GARCIA JUNKAL.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA-CSIC.

Resumen: Las cepas de Pseudomonas putida que portan el plásmido TOL pWWO pueden vivir utilizando tolueno como única fuente de carbono y energia debido a la expresión de dos operones catabólicos. El operón superior se expresa a partir del promotor Pu, dependiente del factor s-54. Este promotor es activado a distancia por un regulador transcripcional que responde a sustratos de la ruta, denominado Xy1R. En ausencia de estos compuestos Xy1R se sintetiza constitutivamente en una forma inactva. En presencia de sustratos, el regulador sufre un cambio conformacional convirtiéndose en una proteina activa para promover la transcripción en Pu. Esta proteína perteneciente a la familia de activadores NtrC, presenta una organización modular en cuatro dominios. La región C-terminal (dominio D) está implicada en la unión al promotor. El dominio central tiene capacidad de unión e hidrólisis de ATP y de oligomerización. Los dominios restantes (B y A), las regiones menos conservados en cuanto a secuencia en la familia, han sido objeto de estudio en esta Tesis. El dominio B es una región corta, con predicción de estructura secundaria coiled-coil. El estudio de su implicación en el mecanismo de activación de Xy1R en respuesta a inductores ha sido una parte de este trabajo. El dominio A es la región implicada directamente en el reconomiento y unióno del inductor aromático. En esta Tesis se ha estudiado la actividad del dominio A de Xy1R a traves del diseño de un sistema de evolucion dirigida in vitro con el objetivo de construir reguladores transcripcionales a la carta, con nuevas actividades pre-determinadas. Estos activadores nuevos se han empleado en el desarrollo de un sistema de detección de un pesticida (Lindano) in situ.

Autor: SÁNCHEZ CONTRERAS MARÍA.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La variación de fase consiste en la diversificación de una población bacteriana en subpoblaciones especializadas y permite una mejor adaptación a cambios en el medio ambiente y la colonización de hábitats heterogéneos. Entre los mecanismos responsables de la variación de fase en encuentra la actuación de una recombinasa específica de sitio, que puede tener un papel enla colonización de rizosfera. Se ha observado la aparición de variantes de fase durante la colonización de la rizosfera de alfalfa por la estirpe Pseudomonas fluorescens F113. Dicha estirpe fue aislada de la rizosfera de remolacha en Irlanda y posee capacidad de biocontrol. Los experimentos de distribución de los variantes fenotípicos en la rizosfera muestran que se sitúan en las partes distales de la raíz. Se aislaron tres variantes recuperados de la rizosfera de alfalfa inoculada con F113, denominados C, F y S. El variante C corresponde a la morfología F113 original, las colonias de los variantes F y S presentan una morfología difusa, teniendo bordes más irregulares las colonias del variante S. Los experimentos de colonización mostraron que los tres variantes eran igualmente competitivos en rizosfera. Parece ser que la capacidad para diversificarse en la rizosfera es la caracteristica relevante, y no un fenotipo en concreto. La caracterización fenotípica mostró que los variantes F y S presentaban mayor movilidad que el variante C y que estaba correlacionada con una mayor longitud de los flagelos y con la sobreproducción de flagelina, la proteían estructural del filamento del flagelo. Estra sobreproducción de flagelina respondía a una sobreexpresión de los genes fliC y fleQ. Se analizaron otros caracteres como la producción de diversos metabolitos secundarios, que se encuentra regulada por los genes gacA-gacS. El variante F resultó afectado en el gen gacA. Además dicho variante presentaba otras características que no estaban relacionadas con los fenotipos anteriormente descritos: un patrón distinto de lipopolisacárido así como deficiencia en la formación de biopelículas. Por último se estudió la implicación del gen sss que codifica para una recombinasa específica de sitio, en la aparición de variantes de fase durante la colonización. Se construyó un mutante de dicho gen para la estirpe F113 y se observó la aparición de variantes fenotípicos tras la colonización de la rizosfera de alfalfa. La drástica reducción del número de variantes, además de la comprobación de que los escasos variantes fenotípicos surgiods responden a otras mutaciones, indica que la recombinasa es el principal factor en la valoración de fase en la rizosfera de P.fluorescens F113.

Autor: BERROCAL ESCOLAR M. MAR.
Año: 2000.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA (UNIVERSIDAD DE ALCALÁ).

Resumen: Debido al notable interés surgido en los últimos años por la transformación y aprovechamiento de residuos lignocelulósicos de origen agrícola, y a la escasez de datos sobre la implicación de enzimas específicas en la degradación de dichos residuos por actinomicetos, se llevó a cabo la selección de cepas de actinomicetos con capacidad ligninolítica en fermentación en estado sólido (SSF) con paja de trigo marcada radioactivamente. De este ensayo se seleccionó S.cyaneus por su capacidad para mineralizar y solubilizar dicho sustrato. A continuación, se establecieron las condiciones óptimas de SSF para la cepa seleccionada, considerando la actividad lacasa como parámetro indicativo de la efectividad del proceso. Una vez optimizado el proceso se analizó el extracto enzimático de diferentes días de incubación para conocer la maquinaria enzimática producida por S.cyaneus en esas condiciones. La actividad lacasa resultó ser mayoritariamente de entre todas las actividades enzimáticas valoradas, y por ello, se llevó a cabo su purificación y caracterización. Los resultados obtenidos en posteriores ensayos sugieren la implicación de la lacasa de S.cyaneus en los procesos de solubilización y mineralización de la lignocelulosa y sus características avalan el interés de esta enzima para ser utilizada con fines industriales. Por otro lado, se realizó el análisis químico, estructural y ultraestructural de los sustratos transformados en las condiciones optimas, con objeto de valorar la posibilidad de ser utilizado en la fabricación de pasta de celulosa y de papel. Por último, se realizó el análisis de calidad de las pastas, así como de las formetas, obtenidas a partir del sustrato transformado. Los resultados de estos análisis corroboran el potencial interés de s.cyaneus para ser utilizada en la fabricación de pastas de celulosa y de papel.

Autor: MARTINEZ MORENO RAFAEL.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: E.T.S.INGENIERIOS AGRONOMOS - MONTES.

Resumen: El presente trabajo estudia el diseño de un protocolo para utilizar a un nivel industrial el alpechín como elemento mojante, sustituyendo al agua de riego, en un proceso de compostaje para la producción de champiñon.Este método ofrece una nueva alternativa para el aprovechamiento de un subproducto agroalimentario altamente contaminante, al tiempo que desarrolla una tecnología respetuosa con el medio ambiente. Eltrabajo ha contemplado la doble vertiente de investigación básica y aplicada. Durante cuatro años se han desarrollado un total de 76 ensayos con pilas de compost de 100, 1000 y 18000 kg. El escalado se ha hecho en función de los resultados obtenidos en cada campaña y éstos han venido avalados por los propios cultivadores de la zona. El seguimiento ha comprendido parámetros fisicoquímicos, microbiológicos y bioindicadores que han constatado la bondad de la metodologia diseñada. El incremento de los costes en un 8% sobre el precio actual del kg de compost, ocasionado por el riego con alpechín, se compensa con creces con el aumento de producción debido al acortamiento del compostaje en 1-2 días en cada ciclo. La población bacteriana, en general, y actinomicética, en particular, no se ha visto afectada negativamente por el uso de alpechín durante el proceso. Se ha comprobado la utilidad de emplear bioindicadores, tomados como elementos referenciales, para determinar la correcta evolución del compostaje, de cara a la producción de champiñón ( Agaricus bisporus). El rendimiento y la calidad del producto final no se vieron afectados por el uso de alpechín a lo largo del proceso.

Autor: VARGAS PARODY INMACULADA DE.
Año: 1999.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD BIOLOGIA.

Resumen: Existen una serie de procesos microbiológicos que juegan un importante papel en hidrometalurgia. Una de las aplicaciones más destacadas es la biolixiviación. La biolixiviación es un proceso en el cual se obtienen disoluciones ricas en metales a partir de minerales insolubles, mediante la acción del metabolismo de microorganismos, que generalmente son bacterias. En el marco de esta línea de investigación se emplaza esta tesis, en la que se han estudiado las poblaciones bacterianas que integraban dos reactores para la biooxidación del ion ferroso así como 4 cultivos mixtos que sirvieron como precedente para el inoculo de dichos reactores. Para ello se llevó a cabo un plan de trabajo consistente en un muestreo de dichos reactores y cultivos, un enriquecimiento en distintos medios con diferentes nutrientes para permitir el crecimiento de organismos ferrooxidantes, sulfooxidantes y heterótrofos, al que siguio un aislamiento y purificacion en medio sólido de estos diferentes microorganismos para su posterior identificación. Se aislaron 224 cepas de las cuales 70 eran ferrooxidantes, 10 sulfooxidantes y 144 heterótrofas. Después de llevar a cabo una identificación morfológica y fisiológica de estos aislamientos se concluyo que eran miembros de 5 especies distintas: Thiobacillus ferrooxidans, Leptospirillum ferrooxidans, Acidiphilium organovorum, Acidiphilium facilis y Acidiphilium cryptum. Además se pudo comprobar que las dos especies de ferroxidadores (T. Ferroxidans y L. Ferrooxidans) se localizaban en los 4 cultivos mixtos caracterizados asi como en ambos reactores de biooxidación, pero que el 93,10% de los aislamientos de L.ferrooxidans fueron obtenidos de cultivos de pH 1,25 lo que nos indicaba que este pH induce al enriquecimiento en dicho microorganismo. Sin embargo la distribucion de las especies de heterótrofos del genero Acidiphilium identificadas se vio que difería de unos cultivos a otros ya que en el cultivo de pH2 se identificaron las tres especies y los cultivos de pH 1,25 y en los reactores sólo se identificaron las especies Acidiphilium facilis y Acidiphilium organovorum. También se realizaron estudios de biooxidación del ion ferroso para conocer la influencia de los heterotrofos en dicho proceso, así como de biooxidacion del azufre y de la pirita. Estos estudios pusieron de manifiesto que T. Ferrooxidans presenta una mayor velocidad de oxidación que L. Ferrooxidans y que la presencia en los cultivos mixtos de otros microorganismos aerobios como hongos pueden hacer disminuir la velocidad de oxidacion en los reactores estudiados.

Autor: CARDONA IGLESIAS PERE-JOAN .
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL UNIVERSITARI "GERMANS TRIAS I PUJOL".

Resumen: La tuberculosis es una enfermedad ocasionada por Mycobacterium tuberculosis que mata anualmente unos 3 millones de personas. Uno de los factores que contribuyen a la falta de control de esta enfermedad es el déficit de instrumentos eficaces de diagnóstico, basados todavía mayoritariamente en la prueba de la tuberculina, la realización de radiografías de tóraz i la búsqueda de bacilos ácido-alcohol resistentes en el esputo de los enfermos. En este trabajo se ha investigado la producción de anticuerpos contra glicolípidos presentes en el exterior de la pared celular de M. Tuberculosis. Debido a su disposición, se cree que estos antígenos pueden desencadenar algún tipo de respuesta inmune en el huésped infectado que podría incluir la producción de anticuerpos. Para determinar la cinética de la síntesis de anticuerpos contra los antígenos Cord Factor, Diaciltrehalosas, Glicolípidos Fenólicos y Sulflípido I se utilizó el modelo de tuberculosis en el ratón, infectado mediante un aerosol, para imitar diferentes circunstancias en la historia natural de la tuberculosis en el hombre: infección, reinfección, reactivación, profilaxis y tratamiento. Puesto que una de las grandes diferencias histopatológicas en las lesiones provocadas por M. Tuberculosis en el hombre y el ratón es que en este último no se detecta necrosis intragranulomatosa, se diseñó un modelo "humanizado" basado en la introducción intranasal de lipopolisacárido para recrear esta característica en el ratón. Los resultados han mostrado que la producción de anticuerpos era únicamente del isotipo IgM, que se desencadenaba a partir del día 60 post-infección, y que eran de mayor envergadura contra los antígenos glicopídicos que contra los peptídicos. Particularmente la respeusta era más intensa contra las Diaciltrehalosas y el Sulfolípido I, mostrando en el modelo de infección, una correlación linear entre los títulos de anticuerpos y la concentración bacilar en el pulmón. Este hecho podría ser de alguna utilidad para detectar personas con infección enfermedad ocasionadas por M. Tuberculosis.

Autor: MONTIEL FERNANDEZ M. DOLORES .
Año: 1999.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En este trabajo, se ha desmostrado que la cepa Streptomyces ipomoea CECT 3341, secreta actividad B-mananasa al medio de cultivo, induciendose esta actividad en presencia de galactomanano. Asimismo, se ha comprobado que mediante la selección del sustrato inductor apropiado se pueden obtener preparaciones enzimaticas,libres de actividad celulasa, con niveles elevados de actividad ananasa y/o xilanasa, que ponen de manifiesto la versatilidad enzimática de este microorganismo. Zimogramas de actividad mananasa realizados a partir de los sobrenadantesde cultivo del microorganismo en el medio con galactomanano revelan la presencia de 3 bandas de actividad mananasa Man1,Man2 y Man3, con pesos moleculares, estimados mediante SDS-PAGE, de 48,46 y 40 kDa, respectivamente. La identidad del 100% en la secuencia del extremo amino terminal de estas tres proteinas y los resultados del estudio de proteolisis realizado, ponen de manifiesto que la manamasa Man3 es consecuencia de la accion de proteasas extracelulares secretadas por Streptomyces ipomoea CECT 3341, sobre la mananasa de mayor peso molecular, Man1. La mananasa purificada Man3, es un glicoproteina monomerica de 40 kDa, con un modo de accion de tipo endo. Entre sus caracteristicas fisico-quimicas y cineticas, cabe destacar su estabilidad a pH 8,0 y 50ºC, el notable incremento de su actividad en presencia de iones Mn2+ y su elevada eficiencia catalitica frente al galactomanano. El ensayo comparativo del efecto del crudo enzimatico y de la mananasa purificada sobre los parametros que miden la calidad de las pastas, asi como el estudio del efecto de las actividades xilanasa y mananasa producidas por este microorganismo, aplicadas tanto individual como secuencialmente, pusieron de manifiesto que ambas actividades contribuyen al incremento de la blancura, mientras que el descenso del numero kappa se relaciona mas directamente con la actividad xilanasa, sin que en ninguno de los casos se vea afectada la viscosidad de las pastas.

Autor: MIRON LOPEZ JESUS.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: QUIMICA.

Resumen: Desde un punto de vista aplicado, se demostró que los efluentes de procesado de mejillón constituyen un medio apto para el cultivo de Aspergillus niger, tanto en la modalidad de cultivo sumergido como en estado sólido, con destino a la producción de la enzima glucosa oxidasa y de ácido glucónico. Se optimizó la producción no solo consiguiendo un medio óptimo, sino optimizando las variables físicas del soporte cuando se trata de cultivos en estado sólido. Con los resultados obtenidos se escaló el proceso a un reactor de 5 L, de diseño propio, en régimen de aireación continua, mezcla y alimentación discontinuas y acopladas, descarga con extrusión y lavado intermitente, sin reinóculo, multiplicando por trece la producción, ya en los primeros ensayos; el orden de escalado es de 160, y se mantienen las predicciones básicas acerca del comportamiento del sistema. Desde un punto de vista más básico o teórico se desarrolló un modelo dinámico en cultivo sumergido, para la producción de GOD, que no solo inyegra los supuestos microbiológicos básicos de un cultivo, sino también supuestos cinéticos, tales como acción directa de catalasa sobre el agua oxigenada producida por la propia actividad de la glucosa oxidasa, y responsable de su desactivación, y permite concluir que esta enzima constituye un metabolito primario y semiconstitutivo. Del mismo modo se desarrolló nuevamente un modelo estrictamente cinético que explica las complejas inhibiciones del ácido glucónico y nuevamente incluye las cinéticas de acción del agua oxigenada y la calasa, con efectos determinantes en este sistema.

Autor: GUERRA DEL AGUILA VICTOR.
Año: 1998.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: El alpechín es un residuo líquido acuoso que se genera durante el proceso de obtención del aceite de oliva con gran poder contaminante cuya composición química a su vez lo hacen adecuado para su aprovechamiento como sustrato en los procesos biotecnológicos. Siendo el objetivo del trabajo de investigación la producción de exopolisacáridos (EPS) microbianos, biopolímeros de gran interés industrial, empleando el alpechín como única fuente de nutrientes, caracterización química, el estudio de sus propiedades físico-químicas y biológicas. Para el cumplimiento de dicho objetivo se desarrollaron actividades experimentales consiguiendo los siguientes resultados: 1.- Selección y caracterización microbiológica de 10 bacterias productoras de EPS, capaces de crecer en alpechín como única fuente de nutrientes, las cuales fueron aislados a partir de compost tratado con alpechín. Llegando a establecerse que pertenecen al género Bacillus. 2.- Estudio de la producción de EPS en fermentador extrapolando las condiciones y parámetros de cultivo establecidos previamente en la producción a pequeña escala con matrace en agitación, obteniendo información sobre la cinética de producción y crecimiento microbiano, las cuales están directamente asociadas. 3.- Aislamiento, purificación y determinación de la composición química de los biopolímeros obtenidos, mediante análisis químicos cuali-cuantitativos y físico-químicos: espectrometría UV-Vis, cromatografía en capa fina, cromatografía de exclusión molecular, cromatografía de gases, espectroscopía infrarrojo y espectrometría de masas. Estableciendo que la biomolécula está constituída por dos heteropolisacáridos de naturaleza aniónica, diferentes tanto en su composición como en su peso molecular. 4.- Estudio del comportamiento reológico de las soluciones acuosas del producto, para lo cual se realizaron medidas de viscosidad en relación a su concentración y del efecto de factores externos, como la temperatura, la fuerza iónica y el pH. Presentando sus soluciones un comportamiento pseudoplástico típico de un fluido no-newtoniano. 5.- Se evaluó asimismo la actividad emulsificante la cual guardó relación con la composición química del EPS obtenido en nuestro trabajo. El EPS biosurfactante tienen ventajas con respecto a los sintéticos, además de ser más eficaces frente al aceite vegetal, aceite mineral y petróleo, son atóxicos y biodegradables, constituyendo un excipiente con potencial aplicación en la industria farmaceútica, de alimentos yen sistemas de bioremediación 6.- También se determinó que el producto posee excasa toxicidad aguda y subaguda, lo que facilitó su eso en ensayos biológicos posteriores. Llegando a determinarse que el EPS posee actividad mitogénica notable y tiene acción inmunosupresora. Pudiendo concluirse que la producción exopolisacáridos a partir de alpechín constituye un proceso biotecnológico que debe tomarse en cuenta como un sistema de bioremediación desde el punto de vista ambiental y como un proceso de importancia económica.

Autor: MARTINEZ CHECA BARRERO FERNANDO JOSE .
Año: 1998.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: El exopolisacárido V2-7 producido por Halomonas eurihalina cepa F2-7 tiene una potente actividad surfactante sobre diversas sustancias hidrofóbicas, entre ellas hidrocarburos derivados del petróleo. Tomando como dato de partida lo anterior, el objetivo de la Tesis Doctoral ha sido, por una parte desarrollar una metodología para la óptima producción y el aprovechamiento biotecnológico de este microorganismo y, por otra, seleccionar otras cepas de la misma especie que produjeran polímeros con propiedades funcionales similares. Con fines comparativos en nuestro estudio hemos empleado surfactantes comerciales. Con nuestro estudio hemos demostrado que la cepa F2-7 es capaz de crecer y producir EPS en medios de laboratorio adicionados de residuos petrolíferos de consistencia sólida. Se puede inducir una actividad surfactante más específica cultivando el microorganismo sobre un determinado substrato hidrofóbico. Los rendimientos óptimos (gramos de EPS/litro de medio) se alcanzan al adicionar el mismo a las 48 horas de cultivo. Se han aislado otras cepas de Halomonas eurihalina que producen EPS con diversas actividades emulgentes. Aunque ninguno de ellos posee un espectro de actividad tan amplio como el polímero V2-7, algunos EPS se sintetizan con rendimientos superiores y/o tienen actividades emulgentes más potentes sobre determinados substratos. Por último, hemos estudiado la composición química y propiedades reológicas de los distintos EPS, comprobando que un aumento de la actividad emulgente va acompañado de un incremento de la fracción protéica asociada con el polímero y un descenso en la viscosidad de las soluciones acuosas del mismo.

Autor: FOUCES MARTINEZ ROBERTO .
Año: 1998.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: La tilosina es una antibiótico empleado en veterinaria para el tratamiento de enfermedades causadas por microorganismos Gram+ y como promotor del crecimiento animal adicionada en piensos. En la presente tesis se ha determinado la organización genética del extremo izquierdo del agrupamiento de genes biosintéticos de tilosina (región ty1EDHFJ) de Streptomyces fradiae. El análisis de un fragmento de ADN de 12,9 kb reveló la presencia de 11 marcos abiertos de lectura (ORFs). Las funciones probables de las proteínas codificadas por dichos genes son las siguientes: peptidasa (ORFI,ddcA), determinante de resistencia a tilosina (ORF2, tlrB), glucosiltransferasa (ORF3, tylN), metiltransferasa (ORF4, ty1E), cetoreductasa (ORF5, ty1D), ferredoxina (ORF6, tylH2), citocromo P450 (ORF7, tylH2), metiltransferasa (ORF8, tylF), epimerasa (ORF9, tylJ), acil-CoA oxidasa (ORF10, tylP) y receptor de factores reguladores (ORF11, tylQ). EL gen tlrB se ha empleado con éxito como marcador de resistencia para tilosina en S. lividans, S. parvulus y S. coelicolor. Asimismo, se ha propuesto la ruta biosintética del azúcar 6-desoxialosa, precursor de la micinosa.

Autor: ENGUITA LOMBARDO FRANCISCO JAVIER.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: La cefamicina C es un antibiótico de estructura beta-lactámica, cabeza de serie de todas las cefamicinas semisintéticas, que es producido por especies de estreptomicetos como Streptamyces clavuligerus y Nocardia lactamdurans. La característica estructural más importante de la cefamicina C es la presencia de un grupo metoxilo en la posición 7 del anillo de beta-lactama. Este grupo metoxilo incrementa la resistencia del antibiótico a la degradación por beta-lactamasas microbianas. En el desarrollo de este trabajo se han caracterizado dos genes, amcI y amcJ, de la agrupación biosintética de cefamicina C de Nocardia lactamdurans, responsables de la introducción del citado grupo metoxilo durante la biosíntesis del antibiótico. Los productos génicos del amcI y amcJ, proteínas P7 y P8 respectivamente, constituyen un sistema de dos componentes capaces de interaccionar entre sí, catalizado de forma coordinada la reacción de metoxilación del anillo beta-lactámico. La proteína P7 posee zonas de identidad significativa en aminoácidos con metiltransferasas dependientes de S-denosilmetionina y con hiddroxilasas dependientes de Fe(IIE no hemínico. Esta proteína se encuentra implicada en el reconocimiento de algunos de los cofactores de la reacción enzimática. Por su parte, la proteína P8 parece estar directamente implicada en el reconocimiento del substrato de la reacción, y resulta esencial para la estabilidad del complejo P7-P8. Este complejo proteico existe in vivo en todos los microorganismos productores de cefamicina C que han sido estudiados. Debido al elevado potencial biotecnológico que presenta este sistema, durante el desarrollo de esta memoria se han utilizado los genes amcI y amcJ de Nocardia lactamdurans para la producción de 7-metoxicefalosporina C, mediante expresión de los mismos de Acremonium chrysogenum utilizando vectores integrativos. En estos experimentos se ha demostrado la formación del antibiótico híbrido 7-metoxicefalosporina C, con un rendimiento próximo al 10%..

Autor: HERNANDEZ CORONADO QUINTERO M. JESUS.
Año: 1998.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Las cepas de Streptomyces ensayadas son capaces de deslignificar la paja de trigo obteniéndose un polímero de lignina precipitable por ácido (APPL) cuya caracterización físico-química por distintas cepas analíticas nos ha permitido alucidar la capacidad oxidativa de Streptomyces sobre la lignina. Además, las cepas ensayadas son capaces de despolimerizar la lignina dando lugar a productos de alto valor añadido como son el ácido vainílico y el ácido ferúlico. Por otra parte, se ha comprobado que la capacidad de Streptomyces para degradar en cultivo sumergido una álcali-lignina obtenida a partir de la paja de trigo transformada por las distintas cepas, está relacionada con el pH del medio de cultivo, que a su vez es dependiente de la fuente de nitrógena. Destacar también, la producción de enzimas oxidativas y hemicelulolíticas por las cepas ensayadas en diferentes condiciones de cultivo, lo que permite la utilización especialmente de la cepa S. UAH 23 para la obtención de parta de papel (biopulpeo), como ha sido demostrado en este trabajo.#

Autor: LUNA ESTARREADO NURIA .
Año: 1998.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: El presente trabajo de investigación trata de abordar diversos aspectos de la microbiología del carbón: - Aislamiento de microorganismos presentes en la hulla. - Caracterización de bacterias y hongos filamentosos mediante estudios morfológicos, fisiológicos y bioquímicos. - Identificación y selección de los microorganismos, con el fin de conocer los géneros que presentan algún defecto en los distintos tipos de carbones estudiados, haciendo hincapié en los que presentan efectos en el carbón bituminoso. - Estudio de las condiciones de cultivo más favorables para la biotransformación. - Análisis de los productos obtenidos a partir del carbón por microorganismos creciendo en medios líquidos y medios sólidos. - Estudiopor microscopía electrónica de barrido de las cepas microbianas creciendo juntoa los carbones y en presecia de algún derivado del carbón (ácidos húmicos). - Fraccionamiento del lignito y utilización por parte de los microorganismos de una de estas fracciones (ácidos húmicos). - Estudio del crecimiento de los microorganismos seleccionados en derivados del lignito (ácidos húmicos). Estos estudios pretenden contribuir al conocimiento que se tiene de los microorganismos presentes en algunos carbones españoles, así como de los factores que puedan intervenir en la solubilización-licuación de estos carbones por microorganismos. De esta forma, conociendo los microorganismos que alteran los carbones, sus características y los factores que influyen en su crecimiento, se puede mejorar el rendimiento de la licuación/solubilización y la obtención de productos de interés biotecnológico.#

Autor: VARGAS GARCIA CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: ALMERIA.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Autor: ALONSO SANCHEZ M. CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: TECNICAS EXPERIMENTALES EN BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR.

Resumen: Como objetivo general se planteó establecer el papel de las partículas víricas en la cadena trófica del medio marino en la regulación de la biomasa bacteriana y en la generación de ADN disuelto. Como primer paso se realizaron estudios de distrivución y abundancia de bacterias y virus en el mar de Alborán en los veranos de 1992 y 1993, poniéndose de manifiesto que el título víurico es similar o sólo ligeramente superior al de bacterias, como corresponde al caracter oligotrófico del mar de Alborán en las condiciones de estratificación estival en las que se llevaron a cabo los muestreos, así como la importante subestimación que supone la utilización de la microscopía de epifluorescencia sobre filtros de policarbonato de 0,2um para el recuento de partículas víricas. En las dos campañas se obtuvo un coeficiente de correlación de Spearman significativo entre la concentración de virus y bacerias, pero no entre el título vírico y la concentración de clorofila-a (biomasa fitoplanctónica), lo que indica que la mayoria de las particulas víricas son bacteriófagos líticos. Los estudios comparativos a nivel de microcosmos de las tasas de depredación de flagelados, ciliados y bacteriófagos han permitido establecer que la tasa de depredación a nivel de comunidad de los ciliados es significativamente inferior a la de los flagelados, no observándose diferencias significativas entre el impacto ejercido por los flagelados y los bacteriófagos sobre la comunidad de bacterias. No existieron diferencias significativas en función de la bacteria utilizada como presa. Se evaluó la implicación de las interacciones antes estudiadas en la generación de ADN disuelto. Se detectó ADN disuelto en todos los sistemas de microcosmos (usando como depredador ciliados, flagelados, o fagos), obteniéndose las máximas concentraciones en aquellos inoculados con fagos. Sin embargo, no se observó una relación entre la densidad de depredadores y la concentración de ADN disuelto. Dada la importante subestimación que supone el empleo de la microscopía de epifluorescencia, en el presente trabajo se diseñó un método que permite la concentración de partículas víricas para su posterior recuento a MET. La aplicación de este método a muestras naturales permite la obtención de títulos víricos significativamente superiores a los calculados mediante microscopía de epifluerescencia.

Autor: BEN HAMMAN OMAR.
Año: 1997.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA MICROBIANA.

Resumen: Phanerochaete flavido-alba es un hongo basidiomiceto del grupo de la podredumbre blanca de la madera en el que se ha detectado la presencia de actividad lignina-peroxidasa (LiP), manganeso-peroxidasa (MnP) y lacasa. En esta tesis se ha estudiado el efecto de la limitación nutricional en carbono, nitrógeno y el efecto de la concentración de Mn(II) sobre el crecimiento, la producción de LiP y MnP por este hongo y las características de distintos isoenzimas producidos. Los cultivos ligninolíticos de este hongo se han aplicado para la biotransformación del alpechín. Así, se ha conseguido una mayor reducción del color tanto del pigmento del alpechín (85%) responsable de su color, como del propio alpechín (70%) en cultivos inducidos para la MnP. Además se ha podido reducir con eficacia el contenido fenólico y la toxicidad del alpechín. Por ello, Phanerochaete flavido-alba podría ser utilizado para el tratamiento industrial de este residuo recalcitrante que causa una importante contaminación del medio ambiente.

Autor: BOUCHOTROCH SAMIR.
Año: 1997.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ECOLOGIA MICROBIANA .

Resumen: El concepto de ambiente extremo es relativo y, en consecuencia, de difícil definición. Según Brock (1969) estos ambientes son aquellos en los que existe una escasa diversidad biológica y en los que están ausentes algunos grupos taxonómicos. Los hábitats hipersalinos constituyen un ejemplo típico de ambiente extremo y en ellos se puede encontrar una relativamente baja diversidad de especies microbianas. El espectro de organismos presentes en estos biotopos está determinado principalmente por parámetros tales como la salinidad, la solubilidad del oxígeno, la composición iónica y, en muchos casos, por la temperatura y el ph del medio. Los microorganismos halófilos son aquellos que requieren elevadas concentraciones de sales (especialmente NaCl) para desarrollarse óptimamente. Dichos microorganismos son habituales en los medios ambientes hipersalinos tales como aguas y suelos. En los últimos años numerosos autores han estudiado la fisiología, bioquímica y la taxonomía de los microorganismos halófilos, así como la ecología de los ambientes hipersalinos. Recientemente existe un interés dirigido hacia la explotación de estos microorganismos con fines comerciales. El término "exopolisacárido", (EPS), se utiliza para describir polímeros que están unidos externamente a la superficie de la célula bacteriana. Los EPS están compuestos principalmente por carbohidratos, formando homo o heteropolímeros. La aplicación de los polisacáridos extracelulares en la industria comenzó a mediados de los 60 y ha experimentado una notable expansión en nuestros días. Los exopolisacáridos son utilizados principalmente en la industria de alimentos, farmacéutica, cosmetológica y en la industria del petróleo y textil. Los objetivos concretos de este trabajo han sido los siguientes: 1. Selección de un amplio grupo de cepas bacterianas productoras de exopolisacáridos de tres situadas al norte de Marruecos. 2. Identificación taxonómica de las cepas productoras de EPS. 3. Finalmente se realizó un estudio sobre los EPS producidos por las 50 cepas seleccionadas. Tras la caracterización fenotípica de las 50 cepas y el análisis numérico 29 de las cepas se agruparon en 4 fenones con cepas semejantes a las especies de Halomonas. Los estudios físicos sobre los EPS dieron los resultados siguientes: La cepa que produce mayor cantidad de exopolisacárido es la 30 con 2,8 gramos de EPS por litro de medio MY, seguido de las cepas 35 y 41 con 2,7 y 2,2 g/l. Los resultados de la composición química de los EPS varían según la cepa que lo produce. El estudio reológico nos permitió comprobar que algunos de los EPS presentan una importante viscosidad, llegando a superar el xantano en el caso del EPS producido por la cepa 30. En cuanto a la actividad emulgente de los EPS los resultados obtenidos son los siguientes: el 68% de las cepas tuvo una actividad emulgente frente al petróleo superior a la de los 4 patrones, el 10% fue mejor emulgente del aceite mineral que los controles y el 4% fue más activo que los patrones sobre el n-octano, el n-hexadecano y el n-tetradecano. Los EPS que presentaron mayor actividad emulsionante fueron el 30 y el 32.