RETROVIRUS, 2

Autor: PEDRAZA FERNANDEZ M. ANTONIA.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: El objetivo del presente trabajo ha sido analizar el papel de la interleucina-2 (IL-2) en la reactivación del Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH) a partir de una situación de latencia. Para ello se han empleado diferentes modelos celulares "in vitro", utilizando linfocitos de sangre periférica: el sistema clásico de infección en células preactivadas, la transfección de un provirus en células en reposo y posteriormente estimuladas, y la activación de linfocitos de pacientes infectados por el VIH. Los resultados indican que la IL-2 es un mal inductor de la reactivación del VIH cuándo se parte de un provirus integrado, frente a otros estímulos conocidos como pueden ser fitohemaglutinina o anti-OD3 y teniendo como referencia un control de células sin estímulo. En cambio, IL-2 facilita la integración viral, ya que se ha visto un aumento de ADN proviral en linfocitos de pacientes cultivados en presencia de esta citocina. También se ha comprobado el pobre efecto de IL-2 en la translocación nuclear del factor de transcripción NFkB y en la transactivación del LTR viral, implicados en los procesos que tienen lugar al inicio de la replicación viral a nivel molecular. Asimismo, se ha comprobado la funcionalidad de todos los estímulos empleados en el trabajo.#

Autor: MINGUIJON PEREZ ESMERALDA.
Año: 1998.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: El Tumor intranasal enzoótico de la oveja es una enfermedad neoplásica transmisible. La transmisión experimental del proceso estableció un posible vínculo de la neoplasia con un agente infeccioso. Posteriormente los estudios de microscopía electrónica demostraron la presencia de partículas retrovirales en relación con céluas tumorales en animales seronegativos a lentivirus. Así mismo fue detectada, en extractos de tejido tumoral y fluido nasal, la existencia de actividad enzimática transcriptasa inversa en fracciones de densidad características de retrovirus. En estas mismas fracciones se demostró la presencia de polipéptidos que reaccionaban cruzadamente con otros retrovirus de tipo D y B como son el Mason Pfizer Monkey Virus (MPMV) y el Virus de la adenomatosis pulmonar ovina (JSRV). Conocidas estas relaciones con otros retrovirus y teniendo en cuenta la imposibilidad de propagar el virus en sistemas celulares y la existencia de numerosos retrovirus endógenos ovinos similares a JSRV, y presumiblemente al retrovirus relacionado con el Tumor intranasal enzoótico de la oveja (OvENTV), procedimos caracterizar este agente empleando para ello técnicas de biología molecular. Para ello en primer lugar se emplearon distintos protocolos de PCR desarrollados para la detección de JSRV obteniendo producto amplificado de un fragmento del gen gag. Al clonar y secuenciar dicho producto se comprobó que en esa región OvENTV era diferente de JSRV y de las copias retrovirales endógenas y se demostró la existencia de dos enzimas restricción AatII y PstI que podían ser empleadas como marcadores moleculares de OvENTV. Una vez comprobada la diferente naturaleza de los agentes se procedió a clonar y caracterizar el genoma completo de OvENTV. Para ello se sintetizaron dos genotecas en las cuales se realizaron distintos cribados empleados diferentes sondas marcadas radioactivamente procedentes de diversos clones de JSRV. Obtuvimos así el 83% de la secuencia vírica. Los cinco huecos en el genoma que permanecían sin conocer fueron obtenidos mediante amplificación con PCR y clonación. El genoma vírico resulto tener 7.434 nucleotidos y una estructura típica retroviral con genes gag, pol, pro y env solapados. Su similitud con JSRV a nivel de secuencia aminoacídica es superior al 95%. Las regiones más divergentes en relación con JSRV y las copias retrovirales endógenas son U3 en LTR, el gen env y el gen ORFX inexistente en OvENTV. Estas diferencias probablemente determinen un diferente tropismo del agente y patogenia de ambas enfermedades. El desarrollo de un PCR específico y muy sensible en fragmento U3 de LTR nos permitió en cuatro ovejas afectadas. realizar una búsqueda de células infectadas en 14 órganos o tejidos diferentes. Los resultados obtenidos indicaron que el virus se encontraba persistentemente en las células tumorales pero no en otros órganos, incluidas células mononucleares sanguíneas lo cual descarta este la posibilidad de emplear este test como método de diagnóstico in vivo.

Autor: CABODEVILLA ARETA JESUS FELIPE.
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .

Resumen: Se ha purificado mediante cromatografía de afinidad por iones metálicos inmovilizados el polipéptido de 66 kDa, que forma parte de la transcriptasa inversa del HIV-1. El análisis de la muestra mediante cromatografía de filtración en gel indica que la proteína se encuentra en equilibrio entre la forma monomérica (p66) y la dimérica (p66/p66). La actividad DNA polimerasa RNA dependiente reside exclusivamente en la forma homodimérica de la enzima, aunque aproximadamente la mitad de los dímeros son inactivos. La dimerización de la subunidad p66 se produce en dos etapas. En la primera etapa las subunidades se asocian para formar un homodímero inactivo. Las sales anticaotrópicas y el aumento de temperatura favorecen la dimerización de la subunidad p66, aumentando tanto la velocidad a la que se alcanza el equilibrio como la estabilidad del homodímero. Se han estudiado los factores que afectan a la inhibición ejercida por los terminadores de cadena en los ensayos enzimáticos utilizando el AZT-TP como modelo. La incorporación de un solo terminador de cadena en cualquier etapa durante la síntesis provocaría la terminación de la polimerización e impediría que se completara la síntesis viral. Hemos analizado la combinación de terminadores de cadena utilizando un patrón-cebador en condiciones en que únicamente existe un solo sitio de terminación para cada análogo. En esas condiciones, la combinación de AZT-TP y ddCTP, dos inhibidores que compiten con distintos sustratos, inhiben sinérgicamente la actividad enzimática. Por el contrario la combinación de AZT-TP con ddTTP, dos inhibidores competitivos mutuamente excluyentes, no muestran sinergia cuando se prueban sobre la RT purificada. Si se utiliza un patrón-cebador que posee varios sitios potenciales de terminación para AZT-TP y ddCTP, la sinergia entre ambos se pierde. Estos resultados son coherentes con el mecanismo de acción de los terminadores de cadena y explican por qué la combinación de inhibidores que no compiten entre sí, no muestra sinergia en la inhibición de la actividad transcriptasa inversa en los ensayos cinéticos convencionales.

Autor: SUN YONGLIAN.
Año: 1998.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Con el fín de investigar el efecto antitumoral de células tumorales ingenierizadas para expresar los genes B7-1 y/o IL-12 en un modelo murino de hepatocarcinoma, desarrollamos vectores retrovirales que expresan el gen humano B7-1 (hB7-1), el gen murino de la citokina IL-12 (mIL-12) o ambos de forma coordinada. Para éste fín células BNL murinas fueron modificadas para expresar de forma estable B7-1, mIL-12 o ambos genes mediante la infección con los respectivos retrovirus. Nuestros resultados muestran que tras la administración de células BNL que expresan B7-1, IL-12 o ambos genes no se observó desarrollo tumoral en el 20, 75 y 95% respectivamente, incluso 250 días después de la inoculación. Contrariamente la inyección de células BNL no modificadas o que expresan el gen de la neomicina (BNL/neo), como control, indujo el desarrollo letal de tumores en todos los animales. Se observó inmunidad protectiva ante una nueva inoculación con células tumorales sólamente en los animales que habían rechazado previamente a las células BNL/IL-12, no dectándose este efecto en el caso de los animales que habían recibido BNL/B7-1 o BNL/B7-1-IL-12. El crecimiento de las células de hepatocarcinoma se retrasó significativamente cuando se realizó la inyección simultánea, en sitios distantes, de células tumorales irradiadas y que expresaban IL-12 o B7-1/IL-12, pero no se observó el mismo efecto empleando células que expresaban B7-1 solamente. El tratamiento de tumores establecidos mediante la inyección intratumoral directa de células empaquetadoras de retrovirus que expresan el gen de la IL-12 o IL-12/B7-1 resulta en una significativa inhibición del crecimiento de los tumores y en un incremento en la supervivencia que fue similar en ambos grupos. La inmunidad antitumoral inducida por B7-1 depende exclusivamente de las células T CD4+, la terapia que combina la administración de B7-1 e IL-12 depende en gran medida de las células CD4+ pero existe la intervención menor de un mecanismo T-independiente, mientras que el efecto de la IL-12 depende de las células CD8+ y también de un mecanismo independiente de las células T. La inmunización de los ratones con células tumorales modificadas que expresan IL-12 induce la secreción de un patrón de citokinas de tipo Th1, mientras que la coexpresión de B7-1/IL-12 en las células modificadas resulta en la inhibición de la producción de IFN-gamma inducida por la IL-12 que se observa cuando no es empleada en combinación con B7-1. El bloqueo de B7-1 revierte este fenómeno. Nuestros datos demuestran que la coexpresión de B7-1 e IL-12 en las células tumorales no resulta en una mejora de la actividad antitumoral sistémica protectiva ni de la eficacia antitumoral en los tumores establecidos.

Autor: CORTES PEÑA M. LUISA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: EL gen tk-HSV1 es uno de los genes suicidas más utilizados en ensayos de terapia génica. En este trabajo se muestran los resultados de la utilización de este gen suicida en el tratamiento de tumores cerebrales (glioblastomas) inoculados en ratas Wistar. Se analizan las dosis más efectivas in vivo de antiherpéticos como el ganciclovir y el bromoginildesoxiuridina, así como distintas vías de inoculación de los mismos. Posteriormente se muestra un sistema de obtención de células productoras de retrovirus de alto título, sistema AVET, cuya aplicación puede aumentar in vivo el acceso de retrovirus portadores de genes suicidas a las células tumorales. Por último se desarrolló un nuevo sistema suicida alternativo a los ya probados, basado en el gen de origen vegetal, linamarasa, de la planta cassava. Este enzima codifica por una beta-glucosidas que hidroliza un sustrato inocuo, linamarina a glucosa, acetona y cianuro. La novedad del sistema radica, por una parte, en la utilización de un gen de plantas y, por otra, en la producción del cianuro por parte de las células neoplásicas que han sido infectadas por el retrovirus. El cianuro pude extenderse a las células vecinas y ejercer un potente efecto colaterial. Este nuevo sistema suicida ha demostrado la curación in vivo de tumores de gran tamaño en la rata Wistar. Los animales no mostraron en ningún síntoma de toxicidad por cianuro. En vista de los esperanzadores resultados obetenidos tanto in vitro como in vivo, este nuevo sistema suicida puede considerarse una alternativa, muy prometedora, para el tratamiento de tumores cerebrales malignos en el hombre..

Autor: CHAMORRO PEREZ M. CRISTINA .
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: En la memoria se describe el diseño sintesis y determinación estructural de nuevos análogos del inhibidor específico de la transcriptasa inversa de VIH-1, TSAO-T descubiertos en nuestro grupo de trabajo. Concretamente se describe la obtención de nuevos 3'-espironucleosidos, analogos de TSAO-T, con modificaciones tanto en la base nucleosica como en la posicion 5' del azucar. Asimismo, con el fin de aumentar la afinidad por la enzima T1 se describe la síntesis de una serie de "inhibidores bidentados" que combinan en su estructura un grupo de reconocida capacidad quelante de metales divalentes con TSAO-T. Además, se da cuenta de las actividades de dichos compuestos frente al virus del SIDA. La actividad y selectividad encontrada para algunos de estos compuestos hacen que puedan ser considerados como nuevos "cabezas de serie" de fármacos activos frente al virus del SIDA. También algunos de estos compuestos estan siendo empleando para profundizar en el modo de interacción de los derivados TSAO con la enzina transcriptasa inversa de VIH-1. Por otro lado, se ha descubierto una nueva serie de nucleosidos que inhiben de forma específica la replicación del virus de inmunodeficiencia humana tipo 1. Estos compuestos presentan estructuras más sencillas que los derivados TSAO y parece que no pertenecen a la misma familia farmacológica. Algunos de ellos estan siendo utilizados como prototipos para la obtención de compuestos más activos y selectivos..

Autor: PEREZ ELIAS M. JESUS.
Año: 1998.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: En 1996 se inició en nuestros hospitales la utilización de una nueva familia de fármacos antirretrovirales, "los inhibidores de la proteasa", con una potente acción contra el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH/SIDA). Los ensayos clínicos habían demostrado marcados ascensos en los linfocitos T CD4+, así como descensos en la carga viral, pero no existía información acerca de la efectividad inmunológica, virológica y clínica que estos fármacos tendrían en la práctica clínica habitual y la repercusión que representaría su impantación con respecto a terapias previas. Los tres primeros compuestos de esta familia que se comercializaron fueron el saquinavir, el ritonavir y el indinavir. El uso generalizado de los tres primeros inhibidores de la proteasa en nuestros hospitales nos brindan una oportunidad única para conocer aspectos no explorados en los estudios de investigación. Nos interesaba conocer la efectividad a largo plazo y los factores predictores para obtener una respuesta satisfactoria. Otro interrogante que se planteaba eran los resultados con respecto a la utilización de recursos sanitarios: la adherencia a los tratamientos; la modificación de la calidad de vida; la supervicencia y la permanencia en una determinada terapia. Adembas, en los pacientes que precisaban una modificación del tratamiento se planteó la necesidad de conocer la efectividad obtenida tras el cambio y los factores que influán. Iniciaron tratamiento antirretroviral con triple terapia que incluye un inhibidor de la proteasa 400 pacientes entre marzo de 1996 y marzo de 1997. En general, eran pacientes con enfermedad por VIH muy evolucionado, y el 91% habían recibido tratamiento antirretroviral previamente. El inhibidor de la proteasa utilizado con mayor frecuencia fue el indinavir (46%) seguido del saquinavir (27.8%) y del ritonavir (26.3%). Las conclusiones fundamentales obtenidas tras el análisis de los datos son que: 1) La mayoría de los pacientes tratados con terapia antirretroviral que incluye un inhibidor de la proteasa presentan mejoría inmunológica y clínica, aunque más de la mitad no mantienen supresión virológica al año. 2) Los pacientes que tienen una respuesta virológica inicial y sin tratamiento antirretroviral previo alcanzan con mayor probabilidad supresión virológica. Los factores que se asocian con una menor probabilidad de supresión virológica son la utilización de saquinovir, o tener una carga viral más alta al inicio del tratamiento. 3) La situación inmunológica inicial y la adecuada adherencia al tratamiento influyen de forma significativa en su supervivencia. 4) La utilización de ritonavir o saquinavir, una peor situación virológica, desarrollar toxicidad o un nuevo evento clínico son factores que disminuyen la permanencia en el primer inhibidorde la proteasa. Los factores que favorecen la mayor permanencia en una terapia son una mejor situación inmunológica inicial o la respuesta inmunológica tras el inicio del tratamiento. 5) Una significativa proporción de los pacientes desarrolla una toxicidad que obliga a la retirada del fármaco, aunque los efectos adversos graves son poco frecuentes. 6) El efecto adverso desarrollado con mayor frecuencia fue la intolerancia digestiva, en general, asociada al uso de ritonayir. El cambio de terapia necesario no empeoró la evolución de estos pacientes; 7) Al comparar por estratos los tres inhibidores de la proteasa encontramos que el indinavir presenta un mejor perfil de eficacia y toxicidad con respecto al saquinavir y al ritonavir, respectivamente. 8) La respuesta virológica que se obtiene tras la utilización de un 2 inhibidor de la proteasa es inferior a la que se observa en los pacientes que reciben por 1 vez estos fármacos. 9) Una carga viral más alta en el momento del cambio, un tiempo de exposición más largo al primer inhibidor de la proteasa y utilizar un régimen menos potente son los factores que influyen de forma independiente para obtener un mayor riesgo de fracaso virológico, tras la introducción de un 2 inhibidor de la proteasa. 10) El régimen de triple terapia, que incluye un inhibidor de la proteasa mejoró de forma significativa la evolución inmunológica, en todos los estratos de linfocitos T CD4+. En los pacientes muy inmunodeprimidos reduce la morbi mortalidad y la utilización de los recursos sanitarios, frente a la doble terapia con análogos de los nucleósidos.#

Autor: ALONSO ARIAS REBECA.
Año: 1997.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA MEDICA: PATOLOGIA Y TERAPEUTICA..

Resumen: En esta memoria nos propusimos profundizar en el estudio de factores maternos predictivos de transmisión vertical del VIH-1: estudio de aislados virales de las madres, fenotipo y cinetica de replicación de los aislados, tropismo por monocitos y linfocitos del virus, mecanismo de entrada del virus via correceptores CXCR4 y-o CCR5, carga viral, recuento de linfocitos T CD4+ y CD8+, respuesta inmune materna..... La función que ejerce la placenta como barrera frente al VIH-1 está muy debatida, nos planteamos diseñar un módelo de infección aguda "in vitro" por el VIH-1 en células de trofoblasto placentario de mujeres no infectadas por el virus y la susceptibilidad de lineas celulares de coriocarcinoma humano a la infección por VIH-1. Así mismo, estudiamos las alteraciones funcionales causadas por la infección en células de trofoblasto y lineas celulares de origen placentario, y tratamos de caracterizar los mecanismos implicados. Por último, consideramos de gran interés estudiar el papel de hormonas, citocinas pro-inflamatorias, quimiocinas y del NO en la infección por el VIH-1 en estos sistemas celulares.

Autor: BENITO HUETE JOSE MIGUEL .
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS: ESTUDIAR LAS SUBPOBLACIONES VIRGEN Y MEMORIA DE LINFOCITOS T CD4+ Y CD8+, LAS SUBPOBLACIONES CITOTOXICA Y SUPRESORA DE LINFOCITOS T CD8+, ASI COMO EL ESTADO DE ACTIVACION DE LAS MISMAS EN LOS DISTINTOS ESTADIOS DE LA INFECCION VIH. CARACTERIZAR, EN LA INFECCION VIH, LAS ALTERACIONES DE LOS NIVELES SERICOS DE MOLECULAS SOLUBLES QUE REFLEJAN ACTIVACION DEL SISTEMA INMUNE. ANALIZAR LAS CORRELACIONES ENTRE SUBPOBLACIONES FUNCIONALES DE LINFOCITOS T Y ESTAS MOLECULAS SOLUBLES. IDENTIFICAR SUBPOBLACIONES FUNCIONALES DE LINFOCITOS T QUE PUEDAN TENER PODER PREDICTIVO DE PROGRESION DE LA INFECCION VIH. SUJETOS Y METODOS: LAS SUBPOBLACIONES DE LINFOCITOS T CD4+ Y CD8+ SE HAN CUANTIFICADO POR CITOMETRIA DE FLUJO, EMPLEANDO MARCAJE CON TRES COLORES, EN 192 PACIENTES CON INFECCION VIH EN DISTINTAS CATEGORIAS CLINICAS (CC) DE LA INFECCION (A, N=116; B, N=34; C, N=42), EN 39 SUJETOS SANOS (CS), Y EN 30 SUJETOS VIH (-) ADICTOS A DROGAS POR VIA PARENTERAL (ADVP). SE HAN CUANTIFICADO LOS NIVELES SERICOS DE LAS MOLECULAS DE ACTIVACION BETA2-MICROGLOBULINA (BETA2-M), NEOPTERINA, RECEPTOR SOLUBLE DE TNF (STNF-R), E IGA, POR TECNICAS DE ELISA Y DE RIA. ESTADISTICA: ANALISIS DE LA VARIANZA DE UNA VIA (ONEWAY): ANALISIS DE LA COVARIANZA (ANCOVA) CON LA CATEGORIA CLINICA (CC) COMO FACTOR Y LA CIFRA ABSOLUTA DE CELULAS CD4+ COMO COVARIABLE; COEFICIENTE DE CORRELACION LINEAL DE PEARSON, Y DE LOS RANGOS DE SPEARMAN; ANALISIS DE REGRESION LINEAL MULTIPLE. RESULTADOS: EXISTE UN INCREMENTO PROGRESIVO ESTADISTICAMENTE SIGNIFICATIVO EN LOS PORCENTAJES (%) DE LAS SUBPOBLACIONES ACTIVADAS (CD38+DR+), MEMORIA (CD45RO+), Y MEMORIA ACTIVADAS (CD45RO+DR+) DE CELULAS CD4+ EN LOS PACIENTES CON RESPECTO A LOS GRUPOS DE CONTROL. ESTAS ALTERACIONES NO DEPENDEN DE LA CATEGORIA CLINICA DEL PACIENTE SINO DE LA CIFRA ABSOLUTA DE CELULAS CD4+ (ANCOVA P

Autor: MERINO SANCHEZ M. CONCEPCION.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA I PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA CLINICA.

Resumen: LAS NEOPLASIAS VESICALES SON LESIONES DE DIFICIL VALORACION, DEBIENDOSE FUNDAMENTALMENTE ESTE FENOMENO A UNA GRAN HETEROGENEIDAD DE SUS LESIONES Y UNA BIOLOGIA TUMORAL MULTIFORME. EL OBJETIVO PRINCIPAL DE ESTE ESTUDIO HA SIDO REALIZAR UN PROTOCOLO QUE PERMITA CARACTERIZAR BIOLOGICAMENTE ESTOS TUMORES. HEMOS DETERMINADO LA EXPRESION DE EGF-R, GEN SUPRESOR P53 Y ONCOGEN RETROVIRICO ERBB-2/NEU. RELACIONAMOS LAS ONCOPROTEINAS ANALIZADAS CON LAS CARACTERISTICAS CLINICAS Y ANATOMOPATOLOGICAS DE LOS CARCINOMAS VESICALES. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE LA DETERMINACION DE LOS ONCOGENES P53, EGF-R Y C-ERBB-2/ NEU PERMITE ESTABLECER SUBGRUPOS CON UN PEOR COMPORTAMIENTO BIOLOGICO, CONTRIBUYENDO A LA CARACTERIZACION BIOLOGICA DE ESTOS TUMORES.

Autor: GIL RODA CRISTINA.
Año: 1993.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE MEDICINA. UNIVERSIDAD DE BARCELONA.

Resumen: OBJETIVO: OBTENCION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES MURINOS DIRIGIDOS CONTRA LAS PROTEINAS DEL CORE DEL VIRUS VIH PARA SU POSIBLE UTILIZACION EN EL DESARROLLO DE TESTS DE DIAGNOSTICO. METODO: INMUNIZACION DE NUEVE RATONES BALB/C CON UN LISADO VIRAL DE LA CEPA HTLV-IIIB SEGUN TRES PAUTAS DE INMUNIZACION: PAUTA A) INMUNIZACIONES MENSUALES, PAUTA B) INMUNIZACIONES SEMANALES Y PAUTA C) INMUNIZACIONES RAPIDAS (CADA 3 DIAS). LOS HIBRIDOS PRODUCTORAS DE ACM SE OBTUVIERON TRAS LA FUSION DE LAS CELULAS P3-NS1 CON LOS ESPLENOCITOS EXTRAIDOS DEL BAZO DEL RATON INMUNIZADO. LA ESPECIFICIDAD CONTRA VIH SE DETERMINO POR ELISA Y WESTERN BLOT. ADEMAS SE REALIZARON PRUEBAS COMPLEMENTARIAS COMO EL WESTERN BLOT ANTI-BSA E IFI EN CELULAS DE SANGRE PERIFERICA (PBMC). RESULTADOS: 25/64 CULTIVOS PRIMARIOS MANTUVIERON DE FORMA ESTABLE LA SECRECION DE IGG. EL ACM 8PC3D12 (IGG1K) RECONOCE UNA REGION DE LA PROTEINA P24 DE VIH INMUNOGENICA PARA LA RESPUESTA HUMORAL DE LOS PACIENTES ESTUDIADOS. ADEMAS, ES CAPAZ DE CAPTURAR ESPECIFICAMENTE EL ANTIGENO P24 EN LAS MUESTRAS DE SUERO DE PACIENTES INFECTADOS POR VIH. LOS ACM 8PC2G3 Y 8PC7H4 (IGG1K) RECONOCEN PROTEINAS VIRALES DE PESO MOLECULAR DE 57 Y 70 KDA. EL ACM9PC9H11 RECONOCEN PROTEINAS ESPECIFICAS DE VIH POR ELISA ESPECIFICOS. SIN EMBARGO, NO SE PUDO DETERMINAR EL PESO MOLECULAR DE LA PROTEINA RECONOCIDA PORQUE TODAS LAS PRUEBAS EFECTUADAS POR WESTERN BLOT RESULTARON NEGATIVAS. LOS ACM 5PC2A8, 8PC5G7 Y 8PC3A11, RECONOCEN LA ALBUMINA SERICA BOVINA (BSA) DEL LISADO VIRAL. LOS ACM 2PC4C4, 6PC2A8 Y9PC10B4, FUERON REACTIVOS POR ELISA ANTI-VIH CUANDO CONTENIA LISADO VIRAL FIJADO EN FASE SOLIDA. LOS ESTUDIOS PARA LA CARACTERIZACION POR IFI EN PBMC DE INDIVIDUOS SANOS (CMPS), DEMOSTRARON QUE ESTOS ACM RECONOCEN PROTEINAS CELULARES. LOS ACM 6PC1A8 Y 9PC10B4 RECONOCEN PROTEINAS CITOPLASMATICAS, MIENTRAS QUE EL ACM 2PC4C4 RECONOCE UN EPITOPO CONFORMACIONAL DE T-200 O CD45 PRESENTE EN EL LISADO VIRAL. CONCLUSIONES 1. SE HAN OBTENIDO CUATRO ACM ESPECIFICOS CONTRA PROTEINAS DEL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (VIH): 8PC3D12, 8PC2G3, 8PC7H4 Y 9PC9H11, DE LOS CUALES SOLAMENTE EL ACM 8PC3D12 HA RESULTADO ESPECIFICO CONTRA LA PROTEINA P24 CODIFICADA POR GEN GAG DE VIH. EL ACMI 8PC3D12 HA MOSTRADO SU CAPACIDAD PARA CAPTURAR EL ANTIGENO P24 CIRCULANTE EN MUESTRAS DE SUERO DE PACIENTES INFECTADOS POR EL VIH. ESTA CARACTERISTICA HACE DE ESTE ANTICUERPO MONOCLONAL UN REACTIVO UTIL PARA SER INCLUIDO EN EL DISEÑO DE LOS TESTS DE DIAGNOSTICO BASADOS EN LA CAPTURA DEL ANTIGENO P24. 2. LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES ESPECIFICOS CONTRA PROTEINAS NO RELACIONADAS CON EL VIH, OBTENIDOS EN EL DESARROLLO DE ESTA TESIS, HAN MOSTRADO QUE LA PRESENCIA DE ESTAS PROTEINAS CONTAMINANTES EN LOS LISADOS VIRALES PUEDE INDUCIR LA RESPUESTA INMUNITARIA DEL RATON INMUNIZADO E INTERFERIR EN LA DETERMINACION DE LA ESPECIFICIDAD DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES PRODUCIDOS.

Autor: ORTIZ RIVERA MARTA.
Año: 1993.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA MEDICA.

Resumen: EL OBJETIVO DEL PRESENTE TRABAJO HA SIDO COMPROBAR SI LA TERAPIA PROLONGADA CON AZT EN NIÑOS SINTOMATICOS PROVOCA LA APARICION DE VARIANTES RESISTENTES Y SI EXISTE RELACION ENTRE EL FENOTIPO BIOLOGICO DE LAS CEPAS Y LA APARICION DE VARIANTES RESISTENTES. SE HA PODIDO OBSERVAR UNA EVOLUCION EN LAS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS CEPAS A LO LARGO DEL TRATAMIENTO, ASI COMO EN SU SENSIBILIDAD A AZT. POR OTRA PARTE, TODAS LAS CEPAS DE VIRUS ESTUDIADAS FUERON SENSIBLES A DDI, LO QUE IMPLICA LA NO EXISTENCIA DE RESISTENCIA NATURAL A DICHA DROGA. DE FORMA PARALELA SE HA INTENTADO CORRELACIONAR LA EVOLUCION EN LAS CARACTERISTICAS BIOLOGICAS DE LAS CEPAS CON LA DE LOS MARCADORES DE EVOLUCION CLINICA A LO LARGO DEL TRATAMIENTO.

Autor: MELON GARCIA SANTIAGO.
Año: 1992.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: SE ESTUDIARON MARCADORES VIRALES DIRECTOS (ANTIGENEMIA, VIREMIA LINFOCTICA Y PLASMATICA Y REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA-PCR) FRENTE AL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA TIPO 1 (VIH-1) EN UN PROTOCOLO DE SEGUIMIENTO DE 24 PACIENTES HEMOFILICOS SEROPOSITIVOS. SE BUSCO UNA RELACION DE ESTOS MARCADORES CON LA EVOLUCION DE LA INFECCION, CON PARAMETROS INMUNOLOGICOS Y CON LA RESPUESTA AL TRATAMIENTO. SE ESTUDIARON 370 MUESTRAS EN UN PERIODO MEDIO DE SEGUIMIENTO DE 29 MESES. (14,9 +- 5,12 MUESTRAS POR PACIENTE). LA ANTIGENEMIA APARECIO DE FORMA ESPORADICA EN UNOS PACIENTES Y PERSISTENTE EN OTROS, PERSISTENCIA QUE SE RELACIONO CON LA PROGRESION DE LA INFECCION. LA VIREMIA LINFOCITICA FUE EL MARCADOR MAS SENSIBLE. SU APARICION EN PACIENTES ASINTOMATICOS APOYO LA IDEA DE LA NO LATENCIA DEL VIRUS Y ESTUVO FAVORECIDA POR LA PRESENCIA DE INFECCIONES OPORTUNISTAS. LA VIREMIA PLASMATICA SE CORRELACIONO CON EL CONTAJE DE LINFOCITOS CD4+ Y POR TANTO CON LA PROGRESION DE LA INFECCION. LA PCR SE MOSTRO POSITIVA EN PACIENTES SINTOMATICOS A LO LARGO DEL TIEMPO, MIENTRAS QUE EN ASINTOMATICOS SOLO LA REAMPLIFICACION AUMENTO LA SENSIBILIDAD DE LA TECNICA. EN CUANTO AL TRATAMIENTO, LA APARICION DE LOS MARCADORES VIROLOGICOS DIRECTOS FUE MAS TARDIA CUANDO SE UTILIZARON DOSIS DE AZT SUPERIORES A 500 MG/DIA.

Autor: SANCHEZ PALOMINO SONSOLES.
Año: 1992.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: EL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA TIPO 1 (VIH-1) SE CARACTERIZA POR SU ELEVADA VARIABILIDAD GENETICA Y FENOTIPICA. EN EL PRESENTE TRABAJO HEMOS ESTUDIADO LA VARIABILIDAD DE UN AISLADO NATURAL DE VIH-1 EN UN SISTEMA "IN VITRO". HEMOS ANALIZADO SEIS CLONES OBTENIDOS TRAS 5 PLAQUEOS CONSECUTIVOS EN CELULAS MT-4. EN EL SISTEMA "IN VITRO" ESTABLECIDO SE HAN REPRODUCIDO ALGUNAS DE LAS VARIACIONES OBSERVADAS EN EL VIRUS DURANTE LA INFECCION NATURAL, COMO POR EJEMPLO CAMBIOS EN LA CAPACIDAD DE FORMAR SINCITIOS O CAMBIOS EN LA SECUENCIA DEL LAZO V3. DESPUES DE PASES SERIADOS A DOS MULTIPLICIDADES DE INFECCION DIFERENTES HEMOS OBSERVADO QUE SE ACUMULAN UN MAYOR NUMERO DE CAMBIOS A BAJA MULTIPLICAD, LO QUE QUIERE DECIR QUE EN ESTAS CONDICIONES SE ENCUENTRA PROMOVIDA LA EXPRESION DE VARIANTES DE VIH-1.

Autor: VALLEJO TILLER ALEJANDRO.
Año: 1992.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA.

Resumen: LOS VIRUS LINFOTROPICOS DE CELULAS T HUMANOS (HTLV-I Y HTLV-II) PERTENECEN A LA FAMILIA DE LOS RETROVIRIDAE. EN ESTE TRABAJO SE HAN REALIZADO ESTUDIOS DE DETECCION DE HTLV EN 1) POBLACION GENERAL (DONANTES DE SANGRE) EN UN PAIS AFRICANO ENDEMICO PARA HTLV-I Y EN DOS PAISES EUROPEOS (PORTUGAL Y ESPAÑA), 2) POBLACION CON PRACTICAS DE RIESGO (ADICTOS A DROGAS POR VIA PARENTERAL) Y 3) PATOLOGIAS CUTANEAS COMO MICOSIS FUNGOIDE (RELACIONADO CON LA INFECCION POR HTLV). EL RESULTADO DE ESTOS ESTUDIOS DAN UNA TASA DE PREVALENCIA DE LA INFECCION POR HTLV DEL 0,7% EN POBLACION GENERAL AFRICANA (CON LA DETECCION DE HTLV-II), DEL 16/100.000 EN PORTUGAL Y POSIBLEMENTE UNA TASA INFERIOR A 4/100.000 EN ESPAÑA AL NO PODER DETECTAR: LA PRESENCIA DE HTLV EN LA MUESTRA ESTUDIADA. SE DETECTO UN 0,67% EN POBLACION CON PRACTICAS DE RIESGO Y NO DETECTAMOS LA PRESENCIA DE HTLV EN LOS CASOS DE MICOSIS FUNGOIDE. EL AISLAMIENTO DE LOS PRIMEROS HTLV-II ESPAÑOLES NOS PERMITIO CARACTERIZARLOS FENOTIPICAMENTE, ASI COMO GENETICAMENTE. LOS ESTUDIOS DE SECUENCIACION DE ESTOS AISLADOS ESPAÑOLES PERMITIO CLASIFICARLOS DENTRO DEL SUBTIPO B DE LOS HTLV-II.

Autor: RODRIGUEZ VILLANUEVA GARCIA JULIO.
Año: 1990.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PREVENTIVA, SALUD PUBLICA Y MICROBIOLOGIA MEDICA. PROGRAMA DE DOCTORADO:.

Resumen: DURANTE EL PERIODO 1988-90 SE ESTUDIARON LOS EPISODIOS DE BACTERIEMIA MICROBIOLOGICAMENTE SIGNIFICATIVA REGISTRADOS EN PACIENTES VIH EN EL HOSPITAL GENERAL GREGORIO MARAÑON. EN 4652 PACIENTES VIH SE PRODUJERON 284 EPISODIOS DE BACTERIEMIA, LO CUAL SUPONE QUE EL 10,5% DE LOS EPISODIOS TOTALES DEL HOSPITAL Y EL 8,8% DE LOS PACIENTES SPTICEMICOS SON VIH. LA EDAD MEDIA FUE DE 29 AÑOS Y EL 75% ERAN VARONES. EL ORGIEN COMUNITARIO SE DIO EN EL 78% DE LOS CASOS; EL 92% DE LOS PACIENTES ERAN ADICTOS A DROGAS Y EL 42% TENIAN EL DIAGNOSTICO PREVIO DE SIDA. LA ETIOLOGIA FUE MONOMICROBIANA EN EL 92% DE LOS EPISODIOS. LOS COCOS GRAM APARECIERON EN EL 75% Y LOS BACILOS GRAM- EN EL 24%. STSAPHYLOCOCCUS AUREUS (39,7%), S. COAGULOSA NEGATIVOS (15,2%), SALMONELIA SPP. (10,0%)Y S. PNEUMONIAE (8,6%) FUERON LOS MAS REPRESENTATIVOS. EN MAS DEL 50% DE LOS EPISODIOS SE DOCUMENTO UNA MEASTASIS SEPTICA. LA MORTALIDAD GLOBAL DE ESTOS EPISODIOS FUE DEL 12,5%.

Autor: LOPEZ CORRAL JUAN CARLOS.
Año: 1989.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA. .

Resumen: DESPUES DE HACER UN AMPLIO RESUMEN DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA INMUNODEFICIENCIA HUMANA (V.I.H.) INICIA EL ESTUDIO DE CUATRO POBLACIONES DISTINTAS PARA PONER DE MANIFIESTO LA INCIDENCIA DE LA MENCIONADA INFECCION Y DEMUESTRA QUE LA PRESENCIA DEL VIRUS (VIH) ES BASTANTE ELEVADA EN PRISIONES SIENDO EL PRINCIPAL GRUPO DE RIESGO LAS ADICTAS A DROGAS POR VIA PARENTERAL DEMUESTRA ASIMISMO EL RIESGO DE LA INFECCION POR VIRUS DE LA HEPATITIS B (VHB) DE LAS RECLUSAS. POR OTRA PARTE DE LOS CASOS ESTUDIADOS, NUEVE DE LOS MISMOS SON PORTADORES DE MARCADORES SEROLOGICOS PARA EL V.I.H. Y V.H.B.

Autor: SARRIA URIGUEN LOURDES.
Año: 1986.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA E INMUROLOGIA. HOSPITAL CIVIL DE BILBAO. FACULTAD DE MEDICINA. BILBAO. UPV/EHU.

Resumen: EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO SE HA BASADO EN BUSCAR LA APROXIMACION TECNOLOGICA DE DOS PROCEDIMIENTOS CENTRADOS EN LA CAPACIDAD DE DETECTAR ACTIVIDAD ENZIMATICADE DOS VIRUS VHB Y VIH QUE AUN PERTENECIENDO A GRUPOS DISTINTOS PRESENTAN GRANDES SEMEJANZAS BIOLOGICAS. SE TRATA DE VIRUS CARACTERIZADOS POR POSEER ELEMENTOS ENZIMATICOS PROPIOS DNA POLIMERASA (VHB) Y TRANSCRIPTASA INVERSA (VIH) RESPONSABLES PRIMARIOS DE LA REPLICACION VIRICA Y POR TANTO CON UN NOTABLE PROTAGONISMO EN LAS INFECCIONES QUE PRODUCEN. LA IMPORTANCIA DE LA DETERMINACION DE ESTOS ELEMENTOS ENZIMATICOS EN DISTINTOS MOMENTOS DE LA INFECCION SE DEBE NO SOLO A SU PAPEL PATOGENICO SINO A LA POSIBILIDAD DE UN DIAGNOSTICO ADICIONAL ASI COMO AL CONTROL EVOLUTIVO DE LAS INFECCIONES PRODUCIDAS POR AMBOS VIRUS TANTO DE FORMA ESPONTANEA COMO MEDIANTE TRATAMIENTO.