VIRUS DERMATROPICOS

Autor: FUNES QUESADA JUAN MANUEL.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGIA.

Resumen: En este trabajo se determina y analiza la secuencia de nucleótidos de una region del genoma del poxvirus humano Molluscum contagiosum (MCV). Los resultados obtenidos del estudio de las ORFs mostraron la existencia de colinearidad en las regiones centrales del genoma respecto a otros poxvirus, asi como una perdida de homologia en aquellas ORFs localizadas más proximas a los extremos, zonas donde se encuentran los genes especificos de cada poxvirus. Por otra parte, el análisis detallado de la región más terminal del genoma de MCV permitió identificar una ORF que presentaba homología a las cochaperonas DnaJ. Estas proteinas poseen un motivo denominado dominio J que se caracteriza por mediar las interacciones con los miembros de la familia de proteinas Hsp70. Los resultados de este trabajo muestran la existencia de una interacción entre la proteina MC013L de MCV y la chaperona Hsp70 humana. Sin embargo, dicha interacción resultó ser independiente del dominio J, constituyendo una novedad respecto al mecanismo de acción de las proteinas DnaJ.

Autor: GIMENO CARDONA CONCEPCION.
Año: 1986.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGIA. FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE VALENCIA..

Resumen: EXISTEN DOS TIPOS DE VIRUS HERPES SIMPLEX (VHS) VHS-1 Y VHS-2 DIFERENCIABLES POR METODOS BIOLOGICOS BIOQUIMICOS E INMUNOLOGICOS. LA ANTIGENICIDAD DE LAS PROTEINAS DE VHS-1 Y DE VHS-2 DETECTADAS POR ANTICUERPOS MONOCLONALES ES ACTUALMENTE EL METODO MAS ASEQUIBLE DE DIFERENCIACION ENTRE AMBOS TIPOS. HEMOS INVESTIGADO PROTEINAS ESPECIFICAS DE VHS-1 Y VHS-2 QUE PERMITAN SU DIFERENCIACION OBTENIENDO ANTICUERPOS MONOCLONALES FRENTE A DICHAS PROTEINAS. LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES (AC.MO) FUERON OBTENIDOS FUSIONANDO CELULAS DE MIELOMA P3 X 63.AG 8.653 (AG8) Y LINFOCITOS PROCEDENTES DEL BAZO DE ANIMALES INMUNIZADOS CON CEPAS VHS-1 (CEPA VR3) Y VHS-2 (CEPA MS-1). PARA OBTENER LOS AC.MO. FUERON EVALUADAS VARIAS PAUTAS DE INMUNIZACION DE DOSIS Y TIPO DE ANTIGENO VIA DE INOCULACION METODO DE FUSION CELULAR ETC. ELIGIENDO FINALMENTE UN ANTIGENO SOLUBLE A RAZON DE 10.2 UFP/ML POR VIA INTRAPERITONEAL. LAS CELULAS DE MIELOMA Y LOS LINFOCITOS ESPLENICOS FUERON FUSIONADOS EN PRESENCIA DE POLIETILENGLICOL-1500 AL 50%. LOS CLONES FUERON SELECCIONADOS CON MEDIO HAT Y LA PRODUCCION DE ANTICUERPOS MONOCLONALES FRENTE A VHS-1 O VHS-2 FUE DETECTADA MEDIANTE ELISA PARA DETECTAR INMUNOGLOBULINAS DE RATON E INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA. OBTUVIMOS CLONES PRODUCTORES DE ANTICUERPOS MONOCLONALES (23G10 Y 32 D9) ESPECIFICOS DE VHS-1 Y VHS-2 CON UNA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE AMBOS DE 12.800 U/MG Y DE 6.400 U/MG RESPECTIVAMENTE. EL PRIMERO DE ELLOS ES DE LA SUBCLASE IGG2A Y EL SEGUNDO IGG2B DETERMINADO MEDIANTE INMUNODIFUSION RADIAL. LA IDENTIFICACION INMUNOQUIMICA DE LA PROTEINA DETECTADA POR LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES SE REALIZA MEDIANTE SEPARACION ELECTROFORETICA EN GEL DE POLIACRILAMIDA TRANSFERENCIA A MEMBRANA DE NITROCELULOSA Y REACCION INMUNOENZIMATICA. EL ANTICUERPO DEL CLON 23G10 RECONOCE UNA PROTEINA DE 35.000 DALTONS ESPECIFICA DE VHS-1 Y EL ANTICUERPO DEL CLON 32D9 RECONOCE UNA PROTEINA ESPECIFICA DE VHS-2 DE 60.000 DALTONS. HEMOS DEMOSTRADO QUE TALES AC.MO. SON UTILES PARA DETECTAR AISLAMIENTOS DE VHS EN CULTIVOS Y SU TIPADO ASI COMO DETECTAR CELULAS INFECTADAS POR VIRUS PROCEDENTES DE LAS LESIONES DE PACIENTES CON EXCELENTES RESULTADOS.