VIRUS RESPIRATORIOS, 2

Autor: LOPEZ DEL OLMO JUAN ANTONIO .
Año: 1989.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE MICROBIOLOGIA. VIROLOGIA E INMUNOLOGIA SANTARIAS. INT. DE SALUD CARLOS III MAJADAHONDA. MADRID.

Resumen: EL VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL (VRS) HUMANO ES EL AGENTE CAUSAL MAS IMPORTANTE DE ENFERMEDAD DE LAS VIAS RESPIRATORIAS EN NIÑOS DE CORTA EDAD. HASTA LA FECHA NO EXISTE NINGUNA VACUNA CONTRA EL VIRUS. EN ESTA TESIS SE HA INICIADO EL ESTUDIO DE LA RELACION ENTRE LA ESTRUCTURA DE LA PROTEINA DE FUSION (F), UNA DE LAS DOS GLICOPROTEINAS DEL VIRUS, CON SU ANTIGENICIDAD. PARA ELLO, SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA PROTEINA F DEL VIRUS LONG, CONTRA LA QUE SE HABIAN PREPARADO ANTICUERPOS MONOCLONALES (ACM). DE LA SECUENCIA DE AMINOACIDOS DEDUCIDA SE OBSERVA QUE EXISTE UNA GRAN HOMOLOGIA CON LA PROTEINA F DE OTROS VIRUS VRS (92-98%), INDICANDO QUE LOS CAMBIOS DE AMINOACIDOS ESTAN FUERTEMENTE RESTRINGIDOS PARA EL MANTENIMIENTO DE SU FUNCION. UNO DE LOS ACMS, EL 47F, QUE RECONOCE UN EPITOPO ENTRE DISTINTOS AISLADOS NATURALES Y QUE MUESTRA UN ALTO INDICE DE NEUTRALIZACION "IN VITRO", PERMITIO SELECCIONAR 5 VARIANTES ANTIGENICOS DEL VIRUS LONG RESISTENTES A LA NEUTRALIZACION POR DICHO ANTICUERPO. POR SECUENCIACION DEL MRNA DE ESTOS 5 VARIANTES SE HAN LOCALIZADO, POR PRIMERA VEZ EN VRS, DOS RESIDUOS ESENCIALES EN EL EPITOPO RECONOCIDO POR UN ACM NEUTRALIZANTE. PARA EVALUAR EL PAPEL QUE DICHO EPITOPO TIENE EN LA INMUNOGENICIDAD GLOBAL DE LA PROTEINA F SE HAN PREPARADO VIRUS VACUNALES RECOMBINANTES QUE EXPRESAN LA PROTEINA F DEL VIRUS LONG O PROTEINAS F CON MUTACIONES EN DICHO EPITOPO. LOS RESULTADOS INDICAN QUE UNA MUTACION PUNTUAL EN DICHO EPITOPO NO AFECTA A LA INMUNOGENICIDAD DE LA PROTEINA F. SIN EMBARGO, UNA PROTEINA F CON 5 MUTACIONES ADICIONALES TIENE ALTERADA DRASTICAMENTE SU INMUNOGENICIDAD. ESTAN EN MARCHA EXPERIMENTOS ENCAMINADOS A DETERMINAR QUE RESIDUO(S) ES(SON) RESPONSABLE(S) DE DICHA ALTERACION.

Autor: LUNA GARGANTILLA SUSANA DE LA.
Año: 1989.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR (CSIC-UAM).

Resumen: SE HAN SINTETIZADO "IN VITRO" LOS GENES DE LAS SUBUNIDADES DE LA REPLICASA DEL VIRUS DE LA GRIPE, ESTIRPE A/VICTORIA/3/75. SE HA DETERMINADO LA SECUENCIA DE NUCLEOTIDOS DE ESTOS GENES, LO QUE HA PERMITIDO DETERMINAR LAS TASAS DE EVOLUCION DE ESTOS GENES DENTRO DEL SUBTIPO H3N2, ASI COMO LA PREDICCION DE POSIBLES ZONAS FUNCIONALES DENTRO DE LAS PROTEINAS PB1, PB2 Y PA POR COMPARACION A OTRAS RNA POLIMERASAS VIRALES Y PROTEINAS DE FUNCION CONOCIDA. LOS GENES QUE CODIFICAN PARA LAS PROTEINAS PB1, PB2 Y PA SE HAN CLONADO EN VECTORES QUE PERMITEN SU EXPRESION EN BACTERIAS (SISTEMAS BASADOS EN LA RNA POLIMERASA DEL FAGO T7), ASI COMO EN VECTORES CON LOS QUE SE HA CONSEGUIDO SU EXPRESION EN CELULAS DE MAMIFERO (VECTORES DERIVADOS DEL VIRUS SUYO Y DEL VIRUS DE LA VACUNA). LOS RESULTADOS OBTENIDOS HAN ESTABLECIDO LAS BASES PARA EL ESTUDIO DE LA ESTRUCTURA Y FUNCION DE LAS SUBUNIDADES DE LA REPLICASA DEL VIRUS DE LA GRIPE, AL PROPORCIONAR LOS ELEMENTOS QUE PUEDEN PERMITIR LA RECONSTITUCION Y POR TANTO, EL ANALISIS Y LA MANIPULACION DE LAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS DE LAS QUE SON RESPONSABLES.

Autor: PORTELA MOREIRA AGUSTIN.
Año: 1985.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR CSIC-AUM. FACULTAD DE CIENCIAS UNIVERSIDAD AUTOMONA DE MADRID.

Resumen: SE DESCRIBE EN ESTA TESIS LA PUESTA APUNTO DE UN SISTEMA DE CLONAJE DE GENES DEL VIRUS DE LA GRIPE SOBRE VECTORES HIBRIDOS DEL DNA DEL PLASMIDO PBR322 Y DEL GENOMA DEL VIRUS SU40. CON LOS RECOMBINANTES OBTENIDOS SE HA EXPRESADO LA HEMAOLUTININA LA NUCLEO PROTEINA Y LAS DOS PROTEINAS NO ESTRUCTURALES NSA Y NS2 DEL VIRUS DE LA GRIPE. EL RECOMBINANTE QUE EXPRESA LAS PROTEINAS NS1 Y NS2 PERMITE REGULAR EN FUNCION DE LA TEMPERATURA A LA QUE SE MANTIENEN LAS CELULAS LA EXPRESION DE ESTAS PROTEINAS. TRANSFIRIENDO ESTE RECOMBINANTE A CELULAS VERO SE HAN OBTENIDO LINEAS ESTABLES QUE REGULAN LA EXPRESION DE LAS DOS PROTEINAS NO ESTRUCTURALES.