EMBRIOLOGIA ANIMAL

Autor: ROBLES RODRIGUEZ VANESA.
Año: 2004.
Universidad: LEON .
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: La compleja y multi-compartimentada estructura de los embriones de peces, junto a su gran tamaño, alto contenido en vitelo y elevada sensibilidad al frío, han dificultado su criopreservación, hasta el punto de llegar a impedir totalmente su supervivencia tras el proceso. Los beneficios derivados de la criopreservación de embriones de peces son muy numerosos, tanto en el campo de la acuicultura como en el de la conservación. El presente trabajo se ha realizado principalmente con embriones de rodaballo (Scophthalmus maximus) aunque se han utilizado otras especies como el pez cebra (Danio rerio) y el winter flounder (Pleuronectes americanus). Para la obtención de una criopreservación eficaz, es necesario usar compuestos crioprotectores que estén presentes en todos los campartimentos embrionarios y que protejan a las células de la congelación. No obstante la presencia de múltiples barreras rodeando cada compartimento dificulta este objetivo. Por ello gran parte de los esfuerzos se han dirigido hacia la búsqueda de métodos de permeabilización que incrementen la penetración de los crioprotectores en el embrión. También se realizaron estudios de toxicidad a difernetes crioprotectores permeables y no permeables y formularon soluciones vitrificantes y protocolos de incorporación de los crioprotectores. Tras la incorporación de los criporotectores, los embriones fueron vitrificados, estudiando varios factores que desempeñan un importante papel en el éxito o fracaso del proceso. Tras la vitrificación se evaluó la morfología embrionaria a microscopía óptica, y la actividad de enzimas citoplasmáticas mediante espectrofotometría, y se observó que entre los embriones que exhiben buena morfología, han de existir, según los resultados obtenidos, algunos en los que la mayor parte de sus células hayan mantenido intactas sus membranas celulares y una actividad metabólica adecuada. Los experimentos realizados con la especie sub-ártica, winter flounder (Pleuronectes americanus), que expresa de forma natural proteínas anticongelación (AFPs) sugirieron que la presencia de AFPs en los embriones podría actuar como un agente crioprotector natural que los dotará de una mayor resistencia a la vitrificación. Se observó que un porcentaje cercano a un 1% no solo sobrevivió al proceso sino que mostró capacidad de desarrollo aunque sin llegar a la eclosión. Los resultados prometedores obtenidos con esta especie sub-ártica dirigieron los siguientes experimentos hacia la utilización de proteínas anticongelación con embriones de rodaballo. Mediante microscopía confocal se determinó que la AFP difundió rápidamente dentro del compartimento en el que fue microinyectada. No obstante, este estudio demostró que la microinyección es completamente incompatible con la vitrificación. ha de encontrarse un método menos agresivo que permita la incorporación de estas proteínas de forma previa a la vitrificación y que sea compatible con este proceso.

Autor: MÍNGUEZ ROYO YOLANDA.
Año: 2004.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Resumen: Aunque la experiencia de la microinyección intracitoplasmática (ICSI) de espermatozoides con espermatozoides de testículo se remonta a los últimos diez años, aún existen cuestiones controvertidas centradas en las azoospermias secretoras (AS): proporción real de pacientes potencialmente tratables, valor de los parámetros clínico- biológicos como factores pronósticos de los resultados de la biopsia (TESE), estrategia más adecuada para planificar el ciclo de ICSI (criopreservación de espermatozoides testiculares) o los propios resultados del ICSI en AS frente alas obstructivas (AO), comparando los resultados con espermatozoides testiculares frescos y congelados. Este trabajo retrospectivo ( 1994-2003) que incluye a 717 pacientes muestra que en todos los pacientes con AO y en la mitad de los pacientes con AS es posible recuperar espermatozoides del testículo para ICSI mediante biopsias testiculares abiertas. Además, algunos factores etiológicos de la azoospermia ( criptorquidia, varicocele, orquitis o síndrome de Klinefelter), el volumen testicular máximo, los niveles de FSH, el estudio anatomopatológico y el patrón histológico del testículo se asocian de forma estadísticamente significativa a mayores o menores tasas de recuperación de espermatozoides del testículo en AS. Unicamente la presencia o ausencia de espermatozoides o espermátides maduras en el estudio anatomopatológico testicular y el volumen testicular máximo poseen un valor pronóstico independiente sobre los resultados del TESE, siendo útiles para informar a los pacientes de la mayor o menor probabilidad de éxito del procedimiento, pero ninguno de los factores analizados permite predecir con certeza el resultado qel TESE en un paciente determinado. Observamos que las tasas d fecundación e implantación en AS, tras el ICSI de espermatozoides testiculares, son significativamente inferiores a las obtenidas en AO. Por otra parte, la criopreservación de espermatozoides testiculares es una técnica eficaz, que ofrece elevadas tasas de supervivencia espermática tras la descongelación, y que permite la posterior utilización . de los espermatozoides testiculares mediante ICSI, tanto en AO como AS. Encontramos que la congelación testicular previa no influye negativamente sobre los resultados del ICSI obtenidos al inyectar espermatozoides testiculares frescos, recuperados el mismo día de la punción folicular y el ICSI.

Autor: OCHOA GARRIDO IGNACIO.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La adrenomedulina (AM) es un péptido multifuncional de 52 aminoácidos que fue aislada recientemente de un feocromocitoma humano. Pertenece a la misma familia que el péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP), la calcitonina, la amilina o la intermedina. Se caracteriza por su actividad pluripotencial en diversos sistemas celulares. Por ejemplo, se ha demostrado que la AM tiene funciones biológicas tales como inducir hipotensión, regular diversas funciones renales, actuar como broncodilatador, modular la secreción hormonal y afectar al crecimiento, la apoptosis y la diferenciación de varios tipos celulares de mamíferos. También se ha descrito la capacidad de la AM de unirse a células embrionarias y la implicación de la AM en procesos de proliferación, diferenciación y apoptosis. Esto, junto con la hipótesis de que la AM pudiera estar implicada, directa o indirectamente, en el control de varios aspectos del desarrollo, hicieron que a partir de estudios descriptivos de la expresión de AM en los distintos estadios embrionarios de nuestro grupo, se plantease el papel de la AM en el control de la proliferación, de la apoptosis o de la diferenciación. Se ha confirmado la expresión y secreción de la AM y el PAMP en las distintas líneas de estudio mediante técnicas como la RT-PCR, la inmunocitoquímica, el western-blot o el radioinmunoensayo. También se ha detectado la expresión de las moléculas que forman el receptor específico de AM en estas líneas. Estudios de las distintas rutas de señalización a través de las cuales actúa la AM indican que este péptido activa distintas rutas de señalización. Con respecto a la proliferación, nuestros datos indican que la AM tiene capacidad de regular el crecimiento celular de modo dosis-dependiente en algunas líneas celulares. Sorprendentemente, se han descrito tanto efectos estimuladores como inhibidores del crecimiento, dependiendo del tipo celular y del porcentaje de suero presente en el medio de cultivo. También se ha descrito que la AM no ejerce ningún tipo de función como factor protector frente a la apoptois (factor de supervivencia), aunque se necesitan realizar otros experimentos para confirmarlo. En cuanto a la diferenciación, se ha posido concluir que la AM no es capaz de inducir la diferenciación en este modelo siguiendo una serie de protocolos, pero por el contrario, los niveles de AM sí que varían tras los procesos de diferenciación inducidos en la línea celular P19. Estudios preliminares indican que la AM podría tener actuar como inhibidor de la diferenciación espontánea, pero se necesitan realizar nuevos experimentos para confirmar esta hipótesis.

Autor: SÁNCHEZ LÓPEZ ANA M..
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES.

Resumen: El primer objetivo de este estudio ha sido analizar el proceso de migración radial de las células microgliales en la retina embrionaria de codorniza utilizando la microscopía de barrido láser confocal. Dentro de este objetivo, se ha estudiado el comportamiento migratorio de las células microgliales durante dicho proceso, el sustrato de migración utilizado por estas células y las moléculas de adhesión expresadas en dicho sustrato y la posible relación entre los procesos de migración y ramificación de las células microgliales con diferentes componentes de matriz extracelular. En el segundo objetivo de este trabajo se ha estudiado el efecto de una lesión traumática producida en la retina embrionaria de codorniz sobre las células microgliales que migran tangencial y radialmente en ella. Para ello se utilizaron embriones de codorniz de diferentes edades, parte de los cuales fueron lesionados con una aguja en el ojo derecho y se dejaron sobrevivir desde 1 a 37 días. Sobre los animales lesionados y no lesionados se realizaron distintos marcajes inmunocitoquímicos a partir de los cuales se obtuvieron las siguientes conclusiones. Durante el desarrollo normal de la retina de codorniz, las células microgliales migran radialmente desde la superficie vítrea hasta el borde vítreo de la capa plexiforme interna, zonas intermedias de la capa plexiforme interna, borde escleral de la capa plexiforme interna y capa plexiforme externa, en los cuales se ramifican. Esta migración tiene lugar en forma de pequeños saltos desde un determinado nivel hasta el siguiente nivel más escleral, aunque en algunas ocasiones pueden evitar ramificarse en un determinado nivel y migrar hasta el siguiente nivel de ramificación. En la mitad vítrea de la retina, las células migran emitiendo un larga y fina prolongación que trepa hasta el siguiente nivel de ramificación, mientras que en la mitad escleral de la misma, la mayoría de las células microgliales que migran radialmente en la retina se adhieren estrechamente a las prolongaciones radiales de las células de Müller que expresan moléculas de adhesión como NCAM y S-laminina, y los niveles de ramificación parecen estar estrechamente relacionados con el modelo de expresión de tenascina, ya que estas células se ramifican en las interfases entre territorios con distinto grado de expresión de esa molécula. La lesión producida en la retina embrionaria de codorniz tras la realización de una herida traumática demuestra que las células microgliales ameboides que migran tangencialmente en la superficie vítrea de la retina son capaces de activarse al entrar en contacto con la lesión, de forma similar a como lo hacen las células microgliales ramificadas del SNC maduro, mientras que las células mcirogliales localizadas en las zonas no lesionadas no sufren alteraciones. La activación de estas células se caracteriza por la adopción de una morfología redondeada, un incremento en la expresión del antígeno reconocido por el anticuerpo QH1 y un compartimento lisosónico más desarrollado. La lesión afectuada en etapas intermedias del desarrollo embrionario persiste hasta estadios muy avanzados del desarrollo post-eclosión en las cuales continúan observándose un gran número de células mcirogliales activadas en su interior.

Autor: MURCIANO JIMÉNEZ M. CARMEN.
Año: 2002.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Análisis profundo de la regeneración de la aleta de Danio rerio desde el punto de vista morfológico. A través de diferentes situaciones experimentales de ablaciones, implantes de fragmentos de rayas y hemirrayas en la interraya 9 y en otras posiciones en el eje antero-posterior y trasplantes de fragmentos de hemirrayas en el eje anteroposterior y próximo-distal, se llegan a las siguientes conclusiones: * Las hemirrayas y las interrayas de la aleta presentan una elevada plasticidad morfogenética. * Se propone como unidad morfogenética de la aleta de Danio rerio al pinnámero. * Se propone un modelo morfogenético para explicar no sólo los resultados obtenidos en este trabajo de investigación sino las distintas condiciones mutantes.

Autor: CARMONA MEJÍAS RITA M..
Año: 2002.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En embriones de aves y mamíferos los tipos celulares epitelial y mesenquimático son responsables del establecimiento de un patrón corporal básico y una correcta morfogénesis. El proceso celular que determina el cambio fenotípico desde epitelio a mesénquima se conoce como Transición Epitelio Mesénquima (TEM). En esta memoria se profundiza en la jerarquía existente entre estos dos tipos celulares al describir y caracterizar las TEM que sufren cierto tipo de epitelios durante el desarrollo. En los trabajos presentados se analiza con detalle la potencialidad de las células mesenquimáticas derivadas del epitelio celómico esplancnopleural así como su capacidad para diferenciarse en diferentes tipos celulares (endotelio, musculatura lisa y precursores hematopoyéticos). Se discute en profundidad la posible función señalizadora del mesénquima no diferenciado, la relevancia biomédica de dichos resultados y se considera el objeto de estudio desde una perspectiva filogenética. La metodología usada a lo largo de la realización de esta tesis incluye técnicas de histología convencional, ultraestructura (microscopía electrónica), inmunohistoquímica (predominando al análisis a través del microscopio confocal) y trazado celular in vivo con carboxifluoresceínas.

Autor: GARCÍA DEL BARRIO MARTA.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA.

Resumen: Los miembros de la familia génica Snail son fctores de transcripción del tipo dedos de Zinc implicados en múltiples procesos durante el desarrollo embrionario incluyendo la formación del mesodermo y de la cresta neural (review, Nieto, 2002). La cresta neural es una población celular multipotente que da lugar al sistema nervioso periférico, las células pigmentarias y el esqueleto craneofacial entre otros derivados. Se origina en la parte dorsal del tubo neural. Estas células, así como las del mesodermo, sufren una transición epitelio mesénquima (TEM) y delaminan del tubo neural o la línea primitiva respectivamente, para migrar grandes distancias hasta alcanzar sus lugares de destino (Le Dourain y Kalcheim, 1999). El objetivo de nuestro estudio fue determinar el papel de esta familia génica en el desarrollo de la cresta neural en el embrión de pollo. Experimentos de falta de función de Slug -un miembro de esta familia- indicaron que este gen es crucial para la migración de la cresta neural (Nieto y col., 1994). Así, decidimos llevar a cabo experimentos complementarios de ganancia de función mediante la sobreexpresión de Slug en el tubo neural del embrión de pollo y estudiar sus efectos. Como estrategia experimental para la sobreexpresión se ha utilizado la electroporación in ovo. Conocíamos previamente que el patrón de expresión de dos miembros de la familia, Slug y Snail, estaban intercambiados entre pollo y ratón durante el desarrollo de la cresta neural. Slug se expresa en los precursores de la cresta neural en el tubo neural y Snail en la población migratoria, mientra en ratón, es Snail el miembro de la familia que se expresa en los precursores de la cresta (Sefton y col., 1994). Nuestro propósito fue estudiar la posibilidad de una equivalencia funcional de los miembros de la familia en el desarrollo de la cresta neural. Para contestar a estas cuestiones, hemos expresado ectópicamente Snail de pollo y de ratón en el tubo neural de pollo. Las principales conclusiones de este trabajo son: 1,- La sobreexpresión de Slug en el tubo neural de pollo induce un incremento de la poblacion de la cresta neural, acompañado de la inducción de otros marcadores de cresta neural como HNK-1, Rhob y Sox 10, así como un aumento de la expresión de Pax3 (Del Barrio y Nieto, 2002). Esto indica que Slug esta siduado muy arriba en la jerarquía de genes implicados en el desarrollo de la cresta neural. 2,- La delaminación de la cresta neural esta gobernada por diferentes mecanismos en la región de la cabeza y en la médula espinal. Mientras que en la cabeza Slug induce la formación de cresta neural premigratoria y migratoria, en la medula espinal induce la producción de sus precursores pero no afecta a la población migratoria. 3,- Los dos miembros de la familia Snail -Slug y Snail- pueden ser funcionalmente equivalente tanto intra como ínter-especie entre pollo y ratón en la formación de la cresta neural (Del Barrio y Nieto, 2002). Adicionalmente hemos realizado un estudio descriptivo comparado de diferentes marcadores de cresta neural, incluyendo HNK-1, Rhob y Slug en embriones de pollo con el ánimo de caracterizar las distintas poblaciones. Hemos determinado las poblaciones que expresan cada uno de los marcadores y caracterizado la existencia de poblaciones dobles marcadas en distintas combinaciones. Ninguno de ellos puede ser considerado como un marcador de toda la cresta neural, aunque Slug está presente en toda la cresta premigratoria y en la migratoria temprana.

Autor: ZALDUENDO MACUA M. MAR.
Año: 2002.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Resumen: En el presente trabajo se ha analizado el patrón de metilación y la estructura de la cromatina de dos genes con impronta opuesta, U2af1-rs1 (impronta materna) y H19 (impronta paterna), en tres estadios del desarrollo de la línea germinal masculina de ratón: en células germinales embrionarias de la línea EG-1, derivadas de PGCs de embriones de 8,5 dpc, en espermatogonias de testículos de 6-7 días de edad y en los espermatozoides maduros. En el ensayo se incluyó, entre otros controles, la línea EG-3 derivada de PGCs de ratones de sexo femenino de 8,5 días de desarrollo. El gen U2af1-rs1 se encontró totalmente desmetilado en las células germinales embrionarias masculinas y femeninas, lo que indica que el borrador del patrón de improtan de este gen se ha producido ya en la línea germinal en el embrión de 8,5 dpc. El porcentaje de metilación aumentó conforme lo hizo el grado de diferenciación de las células analizadas y, sorprendentemente, se correspondió con niveles cada vez mayores de expresión génica. Los espermatozoides no mostraron el patrón de metilación correcto del gen U2af1-rs1, por lo que serán necesarias modificaciones posteriores tras la fecundación. Por otra parte, observamos la asociación de una estructura de la cromatina menos compactada con los alelos paternos del gen U2af1-rs1, así como también la presencia de sitios hipersensibles a la DNasa-I. En las células germinales embrionarias femeninas, pero no en las masculinas, se encontró borrado el patrón de impronta del gen H19 heredado de los progenitores. El porcentaje de metilación aumentó en las células germinales más diferenciadas, detectándose la metilación de ambos alelos en los espermatozoides (patrón de impronta establecido). Una estructura de la cromatina menos compactada y la presencia de sitios hipersensibles a la DNasa-I se encontraron asociadas a los alelos maternos no improntados del gen H19. Por otra parte, de los resultados obtenidos se deduce que el establecimiento de la nueva impronta sexo-expecífica tiene lugar en ambos alelos tras el borrado de la impronta heredada de los progenitores.

Autor: VENDRELL LAGUNA VICTOR DAVID.
Año: 2002.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOLOGÍA Y GENÉTICA MOLECULAR.

Resumen: El oído interno es un órgano sensorial presente en todos los vertebrados terrestres y acuáticos que se originan a partir de la vesicula ótica. La estructura del oído interno en el adulto es muy similar en los mamíferos, aves y peces teleósteos y los procesos biológicos que llevan a la formación del oído interno maduro (inducción y morfogénesis) son muy parecidos entre ellos. Sin embargo se conoce aún poco acerca de qué factores son responsables de las etapas tempranas del desarrollo ni su grado de conservación. El presente trabajo demuestra la capacidad del factor de crecimiento de fibroblastos 3 (FGF 3) de inducir vesículas óticas en el ectodermo de las aves así como de modificar el desarrollo normal de las vesículas normotópicas. Se establece también un paralelismo funcional del gen Fgf3 en las etapas tempranas del desarrollo de tres especies de vertebrados: peces teleósteos, aves y mamíferos. Por último se discute la función del FGF3 y su relación con otros factores de crecimiento en la inducción de la placoda ótica y su desarrollo posterior hasta originar una vesícula ótica. Los experimentos se han llevado a cabo utilizando diversas técnicas de manipulación genética incluyendo la transferencia génica mediante un vector basado en el virus herpes tipo I. Partiendo de nuestras observaciones y las de otros autores se propone un modelo en el que el FGF3, asociado a otros FGF3, juega un papel central en la inducción ótica y en el que se resalta el hecho de que la conservación de los mecanismos de inducción no está asociada a la de las moléculas, sino que los miembros de la misma familia molecular se intercambian para desempeñar funciones semejantes en diferentes especies.

Autor: MORANTE ORIA JAVIER.
Año: 2001.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de realización: INSTITUTO DE NEUROCIENCIAS CSIC-UMH.

Autor: MINGUILLÓN GIL CAROLINA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA .
Centro de realización: FACULTAT DE BIOLOGIA - UNIVERSITAT DE BARCELONA.

Resumen: El objetivo de esta Tesis ha sido el estudio de los mecanismos que posibilitaron la adquisición de algunas características morfológicas que observamos en los vertebrados y que les son únicas. Para este fin, se debe escoger un organismo modelo que, aunque carezca de estas características bajo estudio, sea su pariente más próximo. Estudios de filogenia, anatomia y embriologia comparada así como datos del registro fósil demuestran que este organismo es el anfioxo (Cephalochordata). Dado que en la base de los cambios morfológicos se encuentran cambios en los programas de desarrollo, se han caracterizado los genes del desarrollo idóneos para las innovaciones morfológicas bajo estudio. En concreto, se ha caracterizado y estudiado la expresión a lo largo del desarrallo del anfioxo de los genes del grupo extended Hox (Hox, Evx y Mox) y de la familia hairy, y se han comparado sus patrones de expresión con las mismas familias génicas en vertebrados. Esta aproximación comparativa nos ha permitido por una parte elucidar algunas de las funciones que estas familias génicas presentan únicamente en vertebrados y por lo tanto pueden estar en la base de las innovaciones morfológicas bajo estudio, y por otra, estudiar algunos aspectos propios del desarrollo del anfioxo que habían sido controvertidos entre los morfólogos clásicos. En resumen, los resultados obtenidos son los siguientes: El estudio de los genes Hox y Evx, nos ha permitido evidenciar el carácter prototípico de la parte anterior y medial del cluster Hox del anfioxo y de la disposición de ligamiento de los genes Evx a la región más 5' del complejo Hox. Sin embargo, la caracterización del mismo cluster nos ha permitido documentar la existencia de un gen Hox posterior (AmphiHox14) en el genoma del anfioxo, que no había estado descrito hasta el momento en ningún otro organismo. El estudio de la expresión de los genes Evx durante el desarrollo del anfioxo nos permitió demostrar que uno de los tres patrones de expresión de esta familia génica que se creían únicos de vertebrados (el del tail bud) había surgido antes en la evolución y ya lo presentaba el ancestro común de anfioxo y vertebrados. Por lo tanto, tan sólo a las funciones que estos genes llevan a cabo en la frontera entre el cerebro medio y posterior y en las extremidades de vertebrados se les puede atribuir alguna innovación morfológica. El estudio de los genes Mox y hairy nos permitió caracterizar el proceso de somitogénesis del anfioxo, así como evidenciar la existencia de diferencias sustanciales en el mismo proceso entre cefalocordados y vertebrados. Así, hemos demostrado el carácter asimétrico inherente a la somitogénesis del anfioxo que es evidente incluso antes de que el primer par de somitos sea morfológicamente visible. Asímismo, el estudio de la expresión de estas familias génicas en anfioxo, tras la comparación con los patrones que estos mismos genes presentan en vertebrados, nos ha permitido documentar similitudes y diferencias entre los mismos. En concreto, hemos evidenciado su similitud a nivel de expresión en el mesodermo presomítico y en somitos epiteliales. Por el contrario, a nivel de somitos en diferenciación y derivados somíticos, estos genes presentan patrones de expresión que son únicos de vertebrados. Cabe destacar que muchos de los caracteres morfológicos que parecen haber sido "inventados" por los vertebrados surgen tras la diferenciación de los somitos, entre ellos la columna vertebral (que define al grupo) o la musculatura de las extremidades. Por lo tanto, la co-opción de estas dos familias de genes (Mox y hairy) después de las duplicaciones génicas que ocurrieron muy pronto durante la evolución de los vertebrados puede haber sido instrumental en la adquisición de estas innovaciones.

Autor: RUBIO GARCIA EVA.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGIAS.

Resumen: La muerte celular programada es un proceso esencial durante las etapas tempranas del desarrollo del sistema nervioso. Su estudio, sin embargo, ha sido muy escaso comparado con el detallado análisis de la muerte neuronal. Los modelos de embrión de pollo en neurulación y de la retina durante la neurogénesis proporcionan un marco ideal para el estudio de la muerte neural ya que en ambos se han caracterizado la presencia de factores de la familia de la insulina y de sus correspondientes receptores en estos estadios tempranos del desarrollo, así como el papel antiapoptótico de los mismos. Además, la chaperona Hsc70 está presente en el embrión de pollo en neurulación y durante la neurogenesis de la retina y es regulada por la insulina, sugiriendo su participación en el mecanismo antiapoptótico. Por todo ello, utilizando ambos modelos de desarrollo del sistema nervioso hemos llevado a cabo a )la determinación in vivo e in vitro de la incidencia y distribución de la apoptosis en el embrión de pollo en neurulación,b) el estudi in vivo e in vitro de la regulación de la muerte celular programada por la insulina, c) la caracterización del papel antiapoptótico de la Hsc70 y su regulación por la insulina, y por último, d) hemos establecido la naturaleza de las células apoptóticas , en especial respecto a las fases del ciclo celular.

Autor: BLANCO PORTILLO JUAN MANUEL.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: En el presente trabajo, hemos investigado las características ultraestructurales normales y alteraciones de la cáscara y membranas testáceas en el huevo del águila perdicera (Hieraaetus fasciatus). Hemos establecido la variación de estos parámetros morfológicos de referencia, en función de factores: Fisiológicos, individuales y geográficos. Utilizando el embrión y su desarrollo como bioindicadores, estudiamos el grado de correlación de los hallazgos exotoxicológicos, con la presencia y magnitud de las alteraciones ultraestructurales, elaborando hipótesis. Un total de 52 muestras de cáscara correspondientes al periodo 1997-1999, procedente de tres poblaciones: Castilla-La Mancha, algave y Arribes del Duero fueron procesdas y analizadas mediante microspocpía electrónica de barrido. Los niveles de mercurio, organoclorados y PCBs en embriones, se determinaron mediante espectrofotomería de absorción atómica de vapor frío en el primer caso, y croamtografía de gases yc aptura de electrones en los dos últimos. La superficie externa de la cáscara se caracteriza por una cutícula y área de diferente densidad de poros irregularmente distribuidas. El grosor de la capa de cristalización externa es irregular siendo surcada por canales rectilíneos que convergen en infudibulares. El grosor de la capa de empalizada es proporcionalmente superior en comparación con otras especies de águila, ocurriendo lo contrario con la capa mamilar. Las fibras de las membranas testáceas son bifurcadas y no se entrelazan sino que se a posicionan, aumentando en densidad y disminuyendo en grosor según se profundiza. El aumento del grosor total de la cáscara, se relaciona con un aumento de la superficie total de intercambio gaseoso. La presencia del fenómeno de fusión de fibras da lugar a una disminución de área de nucleación, con un patrón irregular en la distribución de mamilas y un aumento del área entre las mismas. Estos aspectos pueden estar contibuyendo notablemente al aumento de la fragilidad de la cáscara. Los parámetros con menor variación individual son el área mamilar y la distancia entre mamilas.

Autor: RODRIGUEZ LEON JOAQUIN.
Año: 1999.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE EXTREMADURA.

Autor: PEREZ POMARES JOSE M..
Año: 1999.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En esta tesis se ha realizado un estudio conjunto del desarrollo del epicardio y de las primeras fases de la vascularización cardiaca en cuatro modelos de vertebrados: dos mamíferos(el hámter y el ratón) y dos aves(el pollo y la codorniz). Epicardio y plexo vascular primario del corazón estan estrechamente relacionados durante su desarrollo ya que los esbozos del sistema coronario aparecen en la interfase epicardio-miocardio (espacio subepicárdico). La metodología usada incluye métodos histológicos convencionales, inmunicitoquímicos y estudios de linajes celulares a través de vectores retrovirales, transplantes interespecíficos pollo-codorniz y cultivos de epicardio y diversos telidos cardiacos sobre gel de colágeno. Los resultados indican que el epitelio epicárdico sufre una transición epitelio-mesénquina para dar lugar al mesénquima subepicárdico. Epicardio y mesénquima subepicárdico colocalizan marcadores proteicos indicativos de la transformación epitelial y otros que los relacionan estrechamente. En el seno de este mesénquima subepicárdico aparecen los primeros precursores del sistema vascular coronario. Estos precursores colocalizan moléculas propias del linaje vascular y restos de citoqueratina que los relacionan con el epitelio epicárdico; además se organizan según un proceso activo de vasculogénesis para dar lugar a una red de vasos coronarios coherente que vasculariza todo el corazón.

Autor: PAZ FERNANDEZ FELIX JESUS DE.
Año: 1999.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El objetivo de la tesis doctoral realizada consiste en el establecimiento del patrón de crecimiento y expansión de las vesículas cerebrales primarias (PROSENCFALO, MESENCFALO Y ROMBENCFALO) gracias al incremento tanto de su cavidad (principalmente a expensas de ésta) como de su pared neuroepitelial, en las etapas iniciales del desarrollo del SNC, en las cuales acontece un período denominado de: "crecimiento cerebral rápido". Se realizó el estudio tanto del esbozo cerebral en su conjunto como de cada una de las vesículas individualizadamente y tanto en embriones de ave (pollo) como en embriones de mamífero (rata) puesto que esperábamos encontrar diferencias evolutivas tanto en el desarrollo intervesicular como interespecies dando, de esta forma, un componente filogenético al estudio. Se utilizaron 130 embriones de pollo y 60 embriones de rata, los cuales tras fijarlos y procesarlos adecuadamente, fueron morfometreados con una cámara clara modelo GMBH y medidos sus volúmenes con un sistema de análisis de imagen Videoplan Vidas 2.1. trazando, posteriormente, sus gráficos evolutivos correspondientes y analizando individualmente y comparativamente su comportamiento, tanto entre vesículas, como interespecies o en una misma vesícula en función del tiempo. Se hizo, también, una parte experimental (BDX).

Autor: DOLDÁN DANS M. JESUS.
Año: 1999.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS-UNIV. VIGO.

Resumen: El trabajo de tesis que se propone supone un análisis de la morfogénesis e histogénesis temprana del encéfalo de un teleósteo filognéticamente avanzado, el rodaballo. De forma complementaria al estudio del desarrollo inicial del sistema nervioso central (SNC), se ha llevado a cabo un seguimiento de la aparición secuencial de los primeros tractos axonales que se constituyen en el encéfalo embrionario de esta especie, así como del ontogenia de algunos sistemas neurotransmisores (Gaba, 5HT, Catecolominas) y la distribución espacio temporal de otras sustancias (Calretinina) relacionadas con el proceso de desarrollo en el SNC. Los resultados obtenidos demuestran que el aspecto general del encéfalo del Rodaballo, durante estos estadios de desarrollo es bastante indiferenciado. Los datos obtenidos con respecto al establecimiento de los sistemas neurotransimisores estudiados coinciden, en general, con aquéllos obtenidos en otros teleósteos, si bien existen diferencias interespecíficas en relación a la ausencia de determinadas estructuras, o a las discrepancias en la secuencia de aparición de otras. El escaso desarrollo del encéfalo y la morfología corporal general durante este periódo y la simplicidad en la organización de los sistemas neurotransmisores permiten considerar al rodaballo como una especie de desarrollo indirecto, con un programa de diferenciación realizado, óptimo para llevar a cabo estudios de aspectos relacionados con el desarrollo del SNC.

Autor: PEREZ VILLEGAS EVA M..
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El trabajo que hemos llevado a cabo proporciona la evidencia de que la especificación de los progenitores neuroepiteliales oligodendrocíticos en el desarrollo embrionario de pollo, muestra un patrón segmental desde el día 3 de desarrollo (E3) a estadios posteriores, en dominios ventriculares que expresan los transcriptos de la isoforma del gen PLP (mRNAs DM-20). Los progenitores oligodendrocíticos son primeramente generados en dominios basales del rombencéfalo, mesencéfalo y diencéfalo caudal. En estadios más tardíos del desarrollo, se observa que aparecen dos regiones alares que expresan los transcriptos DM-20, la zona limitans en el diencéfalo y la región entopeduncular en el prosencéfalo secundario. Con un anticuerpo monoclonal para la proteína plp, hemos estudiado como se distribuyen los oligodendrocitos migrando así como los procesos de maduración en relación con su origen segmental. Mediante quimeras codorniz-pollo y pollo-pollo hemos mostrado que las regiones alares se comportan como una fuente precursora de oligodendrocitos, capaces de llevar a cabo procesos migratorios para posteriormente iniciar la mielinización. En el desarrollo del cerebro de pollo, los progenitores oligodendrocíticos son especificados en un patrón espacio-temporal preciso. Y las vías migratorias de la línea oligodendrocítica durante el desarrollo están relacionadas con el origen regional de los progenitores. Los procesos generales de regionalización neural en la base de la morfogénesis cerebral, influencia de manera decisiva la generación y migración de precursores oligodendrogliales. Demostramos y proponemos pues, un modelo de desarrollo de las células mielinizantes en relación con los procesos generales que regulan todos los eventos moleculares y celulares que dirigen el desarrollo del sistema nervioso central.

Autor: DIAZ FERNANDEZ BEGOÑA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: Este trabajo estudia en detalle la incidencia y distribución de la muerte celular programada durante la neurogénesis en el modelo de la retina embrionaria de pollo. Demuestra, además, que dicha muerte celular programada es regulada en cultivo e "in vivo" por insulina, que en estadíos neurogénicos tempranos actúa como factor de supervivencia. La protección de aopotosis por insulina se relaciona con procesos neurogénicos proliferativos y diferenciativos. Además, se ha iniciado la caracterización preliminar de la posible implicación de la chaperona Hsc 70 en la protección de apoptosis mediada por insulina y el papel de la señalización delta-notch en la relación entre Hsc 70 y aopotosis "in vivo"..

Autor: QUESADA MORAGA ENRIQUE.
Año: 1998.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: Se estudian distintos aspectos de la reproducción de la langosta mediterránea, Dociostaurus maroccanus (Thunberg), de la anatomía y fisiología de su aparato reproductor y de los factores implicados en el desarrollo embrionario. Se ha observado que la parada que tiene lugar en el estado XIV del desarrollo es una diapausa y que la intercalación de un período de enfriamiento permite acelerar y adelantar la finalización del mismo, de forma que el período embrionario puede reducirse a 90 días. La incubación a ciertas temperaturas constantes origina una diapausa débil que permite completar el desarrollo sin intercalar el período de enfriamiento. Se analiza el valor insecticida sobre esta especie de la cepa EADm492 de Bacillus thuringiensis serovariedad mexicanensis y del entomapatógeno Steinernema sp. (grupo glasseri), así como la del hongo Beauveria bassiana. Finalmente, se estudia la actividad tóxica sobre esta langosta del RCI diflubenzuron.