FISIOLOGIA ANIMAL, 2

Autor: AYADI MOEZ.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIO.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Esta tesis tiene por objeto estudiar los efectos de la frecuencia e intervalo entre ordeños en la producción de leche, así como su relación con el tamaño de las cisternas mamarias y con la eyección de leche durante el ordeño. Para ello se realizaron 3 experiencias y se utilizaron un ttoal de 42 vacas de raza Holstein. En la Experiencia 1 (n=13) se estudió la respuesta a la supresión de 1 ordeño/sem, en dos ensayos/sem produjo una pérdida de leche inferior al 4% (-1,1 1/d), sin afectar a su composición, recuento celular o persistencia de la lactación. La pérdida de leche no se relacionó con la producción diaria de leche, ni con la leche alveolar. Sin embargo, se relacionó negativamente con el área cisternal (r=-0,70). En el Ensayo 1.2 (n=4), se estudiaron los efectos de la supresión de 1 ordeño/sem en la variación de la composición diaria de leche. El día de la supresión disminuyeron la leche, grasa y células somáctias, que se vieron aumentadas de forma compensatoria en los 2 d siguientes. La lactosa y proteína de la leche no variaron. La composición de la leche regresó a sus niveles 3d después del día de la supresión, lo que debe tenerse en cuenta a efectos de control lecher. La Experiencia 2 (n=4) estudió los efectos de distintos intervalos entre ordeños (4,8,12,16 y 24 h) en la composición de la leche cisternal y alveolar en vacas. Las fracciones de leche cisternal y alveolar aumentaron de forma distinta según el intervalo entre ordeños. El contenido en grasa de la leche alveolar se mantuvo constante hasta las 16h, aumentando hasta las 24h. Al contrario, la grasa de la leche cisternal disminuyó desde las 4h hasta las 16h, para mantenerse después constante. La proteína de la leche cisternal y alveolar aumentó con el intervalo entre ordeños, sin observarse diferencias entre fracciones o cuartos de urbe. La Experiencia 3 (n=25) consistió en dos ensayos en los que se estudió la evolución de la leche cisternal a lo largo de la lactancia y según el tiempo transcurrido desde la estimulación con oxitocina (OT). En el "Ensayo 3.1" (n=18), se estudió la evolución del tamaño de la cisterna de la ubre (ecografía) y de las fracciones de leche a lo largo de la lactación. Se observó una correlación positiva (r=0,80) entre la leche cisternal y el área de las cisternas para diferentes estados de lactancia. El área cisternal, y los volúmenes de leche cisternal y alveolar, disminuyeron al avanzar la lactación. En el "Ensayo 3.2" (n=7), se utilizó la ecografía para demostrar el retorno de la leche desde la cisterna a los alvéolos, cuando las vacas no son ordeñadas inmediatamente después de la eyección de leche. Para ello, después de una inyección iv. De OT se midió el tamaño de las cisternas a distintos tiempos (0,3,15,30 y 60 min). El área de las cisternas aumentó por efecto de la OT, alcanzando su máxima distensión a los 3 min, y disminuyendo posteriormente hasta los 60 min. La disminución del área cisternal sin evacuación de leche, evidencia la existencia del llamado "reflujo cisternal". En conclusión todo parece indicar que existen nuevas posibilidades para modificar las estrategias convencionales de ordeño en vacuno lechero y que el estudio de las cisternas mamarias por ecografía puede ser una herramienta de especial utilidad en la práctica.

Autor: MINGARRO MARTÍ MÓNICA.
Año: 2003.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.

Resumen: La acuicultura es el sector de la producción de alimentos que ha experimentado un mayor crecimiento. España es un pais con gran tradición de productos pequeros y es uno de los primeros consumidores a nivel mundial. La acuicultura es el único medio para aumentar nuestro abastecimiento. En este sentido, la dorada es la especie más importante en la acuicultura mediterránea. Sin embargo, una de las materias pendientes es la adecuación de las pautas de alimentación al potencial de crecimiento y época del año en que se desarrolla el cultivo. Para lograr este objetivo es fundamental conocer los mecanismos endocrinos de regulación del crecimiento a ingesta, así como el efecto que estas pautas de alimentación puedan tener en el estado inmunopatológico y la calidad del producto final. En la presente tesis doctoral se alcanzaron los siguientes objetivos: 1,- Caracterización de la regulación endogenea del crecimiento, ingesta y grado de adiposidad de la dorada en tres ciclos de engorde con inicio en distinta época del año (primavera, verano y otoño). El estudio se centró en el eje somatrópico (GH-IGF-I) y la somatolactina (SL), con la determinación de los ciclos estacionales. 2,- Estudio del efecto de una estrategia de alimentación restringida y el inicio del ciclo de engorde sobre las tasas de crecimiento y conversión. Se utilizó el mismo modelo de tres engordes con inicio en distinta época del año, y se determinó también su efecto sobre la estacionalidad hormonal de GH y SL. 3,- Estudio del efecto de una alimentación restringida sobre el estado inmunopatológico de las doradas en cultivo. Para ello se realizaron análisis bacterianos, parasitológicos, hisotpatológicos e inmunológicos (lisozima, actividad del complemento por la vía alternativa y estallido respiratorio). 4,- Caracterización del receptor de la hormona del crecimiento de dorada. También se llevó a cabo la determinación de la estructura genómica del receptor de GH de rodaballo y dorada y estudio de las isoformas y sus mecanismos de generación. Asi mismo, se desarrolló un PCR en tiempo real para el estudio del RGH e IGF-I en dorada. Se comprobó que las variaciones estacionales del RGH de dorada estuvo en consonancia con los aumentos en las tasas de crecimiento de los animales en esa misma época.

Autor: VILLARROEL UTRILLAS M. JOSÉ.
Año: 2003.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MATEMÁTICAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: La contaminación ambiental debida a la utilización de plaguicidas ha hecho aumentar dramáticamente la presencia de estas sustancias tóxicas en el medio ambiente. Debido la problemática implícita en el uso de plaguicidas se hace necesario el estudio de los efectos tóxicos, que estos tienen en los organismos no diana. Estos compuestos van a ejercer efectos tóxicos considerables sobre pequeños organismos, pertenecientes al zooplancton, que desempeñan un papel fundamental dentro de las cadenas tróficas acuáticas, por tanto un efecto negativo sobre estas poblaciones repercutirá considerablemente en eslabones suuperiores de la cadena trófica. Dentro del zooplancton, el crustáce o Daphnia magna constituye una pieza clave en los estudios de toxicología acuática. En la Comunidad Valenciana se encuentra muy extendido el uso del acaricida Tetradifón en los cultivos de cítricos y el herbicida Propanil es ampliamente utilziado en los arrozales que rodean el parque natural de la Albufera. Para evaluar los posibles efectos de estos plaguicidas sobre la fisiología del crustáceo D.magna se han realizado los siguientes estudios: ensayos de toxicidad aguda, estudios de toxicidad crónica, efectos sobre el comportamiento filtrador y efectos sobre el metabolismo energético (niveles tisulares de glucógeno, lípidos, proteínas y contenido calórico tanto por individuo como por peso seco). Para ello se han utilizado concentraciones sub letales, de cada uno de los plaguicidas evaluados, en el caso del metabolismo energético se realizaron estudios a diferentes tiempos de exposición. En los ensayos de toxicidad crónica se evaluó la reproducicón, crecimiento y superviencia de D.magna expuesta a diferentes concentraciones subletales de Tetradifón y Propanil, estos parámetros sufrieron una disminución ante la presencia de los tóxicos en el medio, siendo la reducción directamente proporcional ante lapresencia de los tóxicos en el medio, siendo la reducción directamente proporcional a la concentración de plaguicida. Las tasas de filtración e ingestión del alimento por parte de D.gamma se vieron reducidas por la presencia de Tetrdifón y el Propanil en el medio. Los niveles tisulares de glucógeno, lípidos y proteínas se vieron reducidos al aumentar la concentración de plaquicida así como al aumentar el tiempo de exposición. El descenso observado en el contenido calórico se debió al efecto que los plaguicidas tuvieron sobre los niveles de glucógeno lípidos y proteínas.

Autor: RODRÍGUEZ MURUETA-GOYENA AMAIA.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La hormona leptina, sintetizada fundamentalmente por los adipocitos, participa en la homeostasis de la presión arterial, ya que es capaz de activar el sistema simpático a través de sus receptores cerebrales, aumentando la presión arterial y frecuencia cardiaca, mientras que, por otro lado, también induce la liberación de un potente vasodilatador endotelial, el óxido nítrico (NO). Dada la importante estimulación del sistema renina-angiotensina en la hipertensión arterial, la hipótesis de este trabajo se centró en el estudio del efecto de la leptina sobre las acciones de la angiotensina (Ang) II sobre la musculatura lisa vascular y la posible participación del NO en este efecto. En primer lugar, se detectó la expresión de ARNm del receptor de leptina (OB-R) en células de músculo liso vascular (CMLVs) de ratas Wistar mediante RT-PCR. Los análisis de Western-blot e inmunocitoquímica confirmaron la expresión proteica de OB-R en CMLVs. A continuación, se analizó la producción de NO en CMLVs estimuladas con leptina (10-8 mol/L) durante 24 h. La cuantificación de los NO-3 y NO-2 en los medios de cultivo mediante el método de Griess mostraron que la leptina inducía un ligero aumento de la producción de NO (P menor 0,05) en las CMLVs desde la primera hora del estímulo. Tras el estímulo, las CMLVs fueron lisadas para determinar la actividad de las sintasas de O (NOS) mediante la conversión de [3H]arginina en [3H]citrulina. Los homogenados de CMLVs estimulados con leptina (10-8 mol/L) presentaron un aumento de la actividad NOS (P menor 0,05) respecto a los controles sin estímulo. La ausencia de calcio en la reacción no modificó este efecto de la leptina (P=0,443). Finalmente, se estudió el efecto de la leptina sobre las acciones vaculares de la Ang II. La leptina (10-8 mol/L) inhibió el aumento de Ca2+ citosólido inducido por la Ang II (10-7 mol/L) . En un medio sin Ca2+ extracelular, la leptina continuó siendo capaz de inhibir hasta el 65% de la liberación de Ca2+ de los depósitos intracelulares inducida por la Ang II. En anillos aórticos sin endotelio de ratas Wistar, la leptina (10-8 mol/L) no modificó la tensión basal. Sin embargo, la leptina (10-8 mol/L) inhibió la contracción inducida por la Ang II (10-7 mol/L). El estudio del efecto de la leptina sobre la proliferación inducida por la Ang II en CMLVs mostró un efecto inhibidor de la homona (P menor 0,05) sobre la respuesta a la Ang II,. La leptina per se indujo una disminución (P menor 0,01) de la proliferación basal de las CMLVs. Los experimentos funcionales se repitieron en ratas Zucker (fa/fa), carentes de receptores funcinales de leptina. No se observó efecto de la leptina sobre el aumento de Ca2+ citosólico, la vasoconstricción o la respuesta proliferativa inducida por la Ang II en ratas Zucker. En un último bloqueo de experimentos, se analizó la implicación del NO en el efecto inhibitorio de la leptina sobre las acciones vasculares de la Ang II. Tanto el bloqueo de la actividad de la NOS inducible (iNOS) con el inhibidor L-NIL revirtieron la inhibición de la leptina sobre las acciones vasculares inducidas por la Ang II en ratas Wistar. En resumen, la leptina inhbie el aumento de Ca2+ citosólico, la respuesta contráctil y proliferativa inducida por la Ang II. Este efecto inhibitorio requiere la presencia de OB-R funcionales y está mediado por mecanismos dependientes de NO, tras la activación de la isoforma inducible de las NOS.

Autor: SOLER VALLS ANA JOSEFA.
Año: 2003.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: ESCUELA TÉCNICA SUPERIOR DE INGENIEROS AGRONOMOS.

Resumen: En este trabajo se ha estudiado que factores afectan a la congelabilidad espermática en el ciervo ibérico. Esta subespecie de ciervo solamente se encuentra en la península ibérica. En los últimos años la explotación de estos ungulados se lleva a cabo en fincas las cuales se encuentran valladas. Ello puede suponer un problema puesto que se interrumpe de forma natural el flujo genético, pudiendo incrementar las tasas de consanguinidad con consecuencias negativas para determinadas características reproductivas. Por otra parte, las poblaciones de esta subespecie pueden verse diezmadas por la presencia de determinados patógenos. Por todo ello, es de graninterés conservar el material espermático de estos ungulados. La congelación seminal nos permite mantener los espermatozoides durante largos periodos de tiempo. Sin embargo, antes de establecer un protocolo de congelación es necesario conocer que factores influyen en la superviviencia espermática después de dicho proceso. En ciervo ibérico ha sido estudiado el mejor protocolo de congelación de las muestras espermáticas procedentes de epidídimo. Sin embargo, existen otros factores que influyen en la congelabilidad espermática y que no han sido estudiados. Por todo ello, se plantearon como objetivo de este trabajo estudiar como afecta el mes de recogida de las muestras espermáticas y los parámetros intrínsecos al macho, variabilidad genética (medida mediante la d2 media), condición corporal (medida mediante el índice de grasa renal) y grado de estrés (medida mediante el psoe de las adrenales sobre la congelabilidad espermática. Para ello, se realizó un análisis de componentes principales con el objeto de obtener una variable indicativa de resistencia a la congelación a la cual se le denominó "congelabilidad global". De este modo, se obtuvo que las muestras espermáticas tuvieron una mayor "congelabilidad global" durante los meses de noviembre y diciembre que en octubre, enero y febrero. Por otra parte, se encontraron relaciones negativas entre la d2 media, el índice de grasa renal y el peso de las adrenales y la "congelabilidad global".

Autor: BLANCO BUAINAIN RODRIGO.
Año: 2002.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.

Resumen: La Leptina posiblemente esté relacionada entre otras cosas, con la reserva corporal y con la reproducción. Por este motivo decimos estudiar tanto in vitro como in vivo las posibles relaciones de esta hormona con la especie ovina. En los estudios in vitro hemos querido averiguar la influencia de determinadas sustancias en la secreción de leptina procedentes de tejido adiposo ovino en medio de cultivo. Los adipositos fueron incubados hasta 96 h, procediendo de la recogida de este medio a cada 24h. No hubo diferencias en la secrección basal con respecto a la estimulada con estradiol o con insulina, tampoco hubo diferencias en la secreción basal entre el sexo de los corderos. Sin embargo, si hubo diferencias significativas entre la secreción basal de leptina con respecto a la secreción estimulada con dexametasona en adipositos procedentes de hembra. También fueron evidentes diferencias cuanto a morfometria de adipositos con respecto al sexo, en donde las hembras presentan dimensiones más grandes pero menos redondas. En estudios in vivo hemos podido analizar los niveles séricos de leptina en corderos desde las 2 semanas hasta los 9 meses de edad, en donde, pudimos correlacionar estos niveles con distintos factores como pueden ser, niveles de horas de sol, pero, el sexo, el tipo de parto y crianza, etc. Los resultados obtenidos nos permitieron relatar un claro dimorfismo sexual en los niveles séricos de leptina, también observado en otras especies. Sugerir una relación entre leptina y un posible "efecto maternal". Además, pudimos correlacionar de forma significativa concentraciones de leptina con algunas características de las canales estudiadas, como pueden ser el peso de la canal caliente, el peso de la canal fría, el rendimiento de la canal, el peso del costillar, el despiece de la espalda, etc. En donde, hay que resaltar que estas correlaciones se dieron fundamentalmente en el caso de la hembra.

Autor: AGUILAR LEPE JUAN REYES.
Año: 2002.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA (UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA).

Resumen: En la primera parte del trabajo se estudió la influencia de la corteza cerebral sensoriomotora sobre las respuestas de las neuronas de proyección del núcleo cuneatus (NC) y del núcleo ventral posterior lateral del tálamo (VPL). Se realizaron registros intracelulares y extracelulares, de neuronas cuneolemniscales (CL) y tálamocorticales (ThC) durante la estimulación cutánea en gatos anestesiados en condiciones control y en ausencia de actividad cortical. De estos experimentos se concluye que la corteza modula el procesado de la información cutánea que llega a las neuronas CL y ThC incrementando tanto las excitaciones como las inhibiciones que se producen por la estimulación cutánea. En la segunda parte del trabajo se estudiaron en el NC las posibles relaciones entre las neuronas CL y las interneuronales locales GABAérgicas y glicinérgicas, así como los tipos de receptores glutamatérgicos (NMDA y No-NMDA) a través de los que actúan las aferencias primarias y corticales sobre las neuronas del NC. Se registraron extracelulares neuronas CL e interneuronas del NC. Se aplicaron iontoforéticamente sobre las neuronas agonistas y antagonistas de los principales neurotransmisores que actúan a ese nivel. Los resultados obtenidos nos permiten proponer un circuito donde las excitaciones (desde el campo receptor o la corteza) están mediadas tanto por receptores NMDA como no NMDA. Las inhibiciones sobre las neuronas CL son GABAergicas y existe la posibilidad por parte de las aferencias primarias y corticales de generar desinhibiciones por medio de la disposición en serie de interneuronas glicinérgica-GABAérgica sobre las neuronas CL.

Autor: GARCÍA FERRERAS FRANCISCO JAVIER.
Año: 2002.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FAC. VETERINARIA - UNIVERSIDAD DE LEÓN.

Resumen: En la presente investigación se ha llevado a cabo el estudio, caracterización fisiopatológica y evaluación de la idoneidad de un modelo experimental producido en conejos mediante infección controlada con el virus de la enfermedad hemorrágica vírica, con el fin de poder ser utilizado para el desarrollo y la evaluación de terapias potencialmente aplicables en personas con fallo hepático fulminante. Los resultados obtenidos se han basado en el estudio de parámetros plasmáticos (AST, ALT, LDH), glucosa, aminoácidos, amoniaco, bilirrubina y factores de la coagulación), la influencia de la enfermedad hemorrágica vírica sobre la inmunohistoquímica e histopatología hepática, sobre los cambios en la presión intracraneal y sobre parámetros hepáticos (GSH, GSSG, SOD, CTA, GPx, NF-kB y expresión génica de iNOS y HGF). Se ha demostrado que la enfermedad hemorrágica vírica del conejo induce un fallo hepático fulminante que utilizando agentes infecciosos satisface la mayor parte de los criterios para ser considerado un modelo animal adecuado.

Autor: CANCELAS NAVIA JESÚS.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FUNDACIÓN JIMÉNEZ DÍAZ.

Resumen: Es conocido que en condiciones fisiológicas, la secreción y biosíntesis de insulina están reguladas por la concentración de nutrientes circulantes, principalmente la D-glucosa. Y que en la diabetes no dependiente de insulina, o tipo 2, la célula Beta pancreática se manifiesta parcialmente insensible al estímulo del azúcar. La existencia de nutrientes -ésteres de monosacáridos y de metabolitos no glucídicos- capaces de atravesar la membrana plasmática, sin la intervención de un sistema específico de transporte, que permiten a la célula beta diabética mantener su capacidad secretora, y el hecho de que determinados agentes, como el GLP-1 -péptido intestinal insulinotrópico, antidiabético y con efectos insulino-mimétricos sobre el metabolismo de la glucosa en tejidos extrapancreáticos-, necesiten de la presencia de glucosa para ejercer su acción insulinotrópica, nos condujo a estudiar el efecto in vivo de algunos de estos nutrientes sobre la respuesta secretora de la célula beta al GLP-1, y a péptidos, estructural y funcionalmente, relacionados con él -las exendinas-. También exploramos el efecto de alguno de los ésteres sobre el metabolismo de la glucosa en el hepatocito de la rata, así como algún posible efecto del GLP-1 sobre el metabolismo de la glucosa a nivel periférico. Observando que, tanto el éster pentaacetato de D-glucosa, como determinados ésteres no glucídicos -el metil piruvato, el dimetil glutamato o el dimetil succinato-permitían al GLP-1, y a otros agentes secretagogos de insulina como la exendina-4 expresar su potencial. Con lo que la utilización conjunta de ambos, ésteres y péptidos secretagogos, se constituye en prometedora herramienta para el tratamiento de la diabetes tipo 2. Por su parte, la Ex(9-39), suprimía la respuesta de la célula beta al GLP-1, y reducía la acción hipoglucemiante del péptido, sin modificar la respuesta del páncreas a nutrientes circulantes, por lo que la exendina truncada podría ser utilizada en el tratamiento de la hipoglucemia reactiva o alimentaria. La glucosa pentaacetato no sólo potencia la respuesta secretora de la célula beta al GLP-1 en estados diabéticos, sino que además previene la acumulación del lactato en el hígado. Y no detectamos efectos claros del GLP-1 sobre la sensibilidad a la insulina a nivel periférico, tan sólo a nivel de tejido adiposo marrón, el péptido modificó significativamente la captación de glucosa. Por otro lado, sabíamos por criterios morfológicos que la hiperglucemia prolongada provoca una acumulación de glucógeno en el páncreas, mayor en la célula Beta que en el resto de tipos celulares. En base a ello, tratamos de cuantificar la contribución de la célula beta al acúmulo de glucógeno en el páncreas de la rata en condiciones de hiperglucemia sostenida. Observando, que un estado de hiperglucemia aumenta el contenido en glucógeno de la glándula pancreática, y que la administración de glucagón -capaz de incrementar el contenido en AMPc- no modifica este contenido, pensamos que la molécula de glucógeno, apropiadamente marcada, podría ser un buen utensilio para la imagen y cuantificación del páncreas endocrino.

Autor: GUAYERBAS VALERO NOELIA.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: En la presente Tesis se ha desarrollado un modelo murino de envejecimiento prematuro, que permite diferenciar la edad biológica de ratones con idéntica edad cronológica, basándose en la capacidad de llevar a cabo una prueba de exploración espontánea, el laberinto en T. Los ratones prematuramente envejecidos (PAM), muestran un número de modificaciones en su neuroquímica cerebral similares a las encontradas en animales viejos, este deterioro, se relaciona con una deficiente respuesta emocional y de adaptación al estrés, además de con una alterada función motora o de coordinación neuromuscular. Los animales PAM también presentan un claro deterioro de las principales funciones leucocitarias, que incluye desde una deficiente respuesta fagocítica, hasta una reducida respuesta linfoproliferativa, liberación de interleuquina 2 y actividad citotóxica o NK. Así mismo, en esos animales se aprecia una alteración de la liberación de ciertas citoquinas, como el TNFalfa y la IL-1beta. Todas estas disfunciones llevan a que los PAM tengan una esperanza de vida media inferior a la de los controles o NPAM (no prematuramente envejecidos), por lo que se podría sugerir los parámetros comentados como indicadores de edad biológica. La ingestión de dos antioxidante tiólicos (n-acetilcisteína y tioprolina) en dos momentos de la vida de los animales resulta en una mejora de la función nerviosa, y de la función de las principales células del sistema inmunitario, macrófagos, linfocitos y células con actividad NK acompañada de un aumento de la esperanza de vida, y tanto en machos como en hembras y en dos cepas de ratones. Este efecto positivo se da de forma más evidente en los PAM que "rejuvenecen" presentando una edad biológica menor.

Autor: FERNÁNDEZ VALDÉS REMEDIOS.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Esta Tesis estudia la participación de la neurotensina en el sustrato neuroquímico del proceso de autoestimulación obtenido en la corteza prefrontal de la rata. Así, mediante la utilización de inhibidores de las enzimas que inactivan la neurotensina, como el tiorfano y de la bestatina que inhibe las enzimas que inactivan la neuromedina N, un análogo de la neurotensina, se muestra una potenciación de los efectos de dichos neuropeptidos sobre esta conducta. Por otra parte y mediante la utilización del SR-48692, un antagonista de los receptroes neurotensinérgicos, se demuestra que los efectos de la neurotensina se deben a la implicación de estos receptores y no a otros posibles mecanismos como la formación de complejos extracelulares neurotensina-dopamina. La metodología utilizada ha consistido en la implantación estereotáxica en la corteza prefrontal medial de ratas albinas de electrodos monopolares para la esimulación eléctrica cerebral y de cánulas para la administración intracerebral de la neurotensina, neuromedina N y de los inhibidores tiorfano y bestatina. Tras diversas sesiones de entrenamiento para obtener la conducta de autoestimulación se procedió a la administración de los neuropéptidos y de las drogas anteriores, estudiándose sus efectos sobre dicha conducta. El interés de la presente tesis doctoral radica en: 1,- El creciente papel de la corteza prefrontal en la fisiopatología de la esquizofrenia. 2,- La participación de la neurotensina en la neuroquímica de esta enfermedad. Estudios recientes muestran que la corteza prefrontal es una de las áreas cerebrales especialmente alterada en la esquizofrenia y que determinan la aparición y desarrollo de los signos negativos y déficits cognitivos característicos de la esquizofrenia. Por otra parte, estudios neurofarmacológicos muestran que la neurotensina tiene propiedades similares a los antipsicóticos atípicos. En este sentido, la presente tesis doctoral demuestra la implicación de la neurotensina en la autoestimulación de la corteza prefrontal, y por lo tanto su participación en procesos motivacionales, que se ven especialmente afectados en los pacientes esquizofrénicos.

Autor: GARRIDO GRACIA JOSE CARLOS.
Año: 2002.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOLOGÍA BÁSICA Y APLICADA.

Resumen: En este trabajo hemos analizado el fenómeno de la heterogeneidad celular de las somatotropas de rata, en un contexto fisiológico dinámico, como es el envejecimiento. Así, hemos demostrado que existen diferencias en la respuesta de las dos subpoblaciones de somatotropas a sus reguladores hipotalámicos. En particular las somatotropas con mayor secreción basal de GH, la células de alta densidad, son más sensibles tanto al estimulador GHRH como al inhibidor SRIF que las somatotropas de baja densidad. Concretamente, en el caso del GHRH, esta distinta sensibilidad de los subtipos de somatotropas podría estar causada por la diferente dinámica de aumento de calcio (Ca2+) libre citosólico que hemos observado en respuesta a este péptido. En este sentido, tanto el Ca2+ de origen extracelular como el almacenado en los reservorios intracelulares contribuyen al aumento de la concentración de Ca2+ libre citosólico inducido por GHRH en las somatotropas de rata. En las somatotropas de baja densidad, cada fuente de Ca2+ está asociada con una fase de la respuesta al GHRH, mientras que la respuesta de las células de alta densidad requiere necesariamente de la participación conjunta del Ca2+ de origen extra- e intracelular. Por otra parte, en mamíferos, el envejecimiento se caracteriza por una reducción en la secreción hipofisaría GH. Nuestros resultados indican que esta reducción estaría causada además de por la disminución de la secreción basal de las somatotropas en general y de la proporción de somatotropas más activas o HD, a una pérdida de sensibilidad de estas últimas al GHRH asociada a la edad, tanto a nivel de secreción como de respuesta de CA2+. Por último, hemos demostrado que la administración de GHRH o SRIF in vivo induce cambios recíprocos en la proporción de somatotropas de alta y baja densidad que sugieren que las células de una subpoblación pueden modificar sus características morfofuncionales y adquirir las propias de la otra subpoblación en respuesta a los reguladores hipotalámicos primarios. Estos factores podrían estar por tanto implicados en los cambios observados en las proporciones y en la respuesta secretora de las subpoblaciones durante el envejecimiento.

Autor: ESTEBAN GAVIN RAMÓN.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: La raza del toro de lidia es una raza autóctona española con unas características que la hacen distinta a otras razas bovinas. Debido a la importancia de la lidia en nuestra sociedad y cultura, hace además que la explotación de esta raza sea de una gran importancia económica. Uno de los principales problemas que tiene el mundo taurino es la falta de fuerza, nobleza y embestida que presentan muchos animales durante la corrida. Por ello, nos hemos planteado el estudio de diferentes parámetros hormonales durante la lidia, para valorar la respuesta que tiene el ganado bravo ante el estrés y el intenso ejercicio físico que supone la lidia. Para la determinación de las concentraciones hormonales se utilizó la técnica enzimunoenzimática EIA de competición en el caso de las hormonas cortisol, coritcosterona, testosterona, 17-beta estradiol, androstenodiona, triiodotironina y tiroxina. Para la hormona estimulante del tiroides se empleó el sistema EIA Sandwich. Tanto los toros como los novillos se clasificaron en tres grupos: campo, rechazo y lidiado. El primero de ellos estaba formado por las muestras sanguíneas obtenidas en novillos y en toros que estaban en el campo. Por otro lado, se extrajo sangre de la yugular en los animales sacrificados en el desolladero de la plaza de toros. Se denominó grupo rechazado a los animales que salieron a la plaza para ser lidiados, pero fueron devueltos a los corrales por no reunir las condiciones mínimas para su lidia. Y el grupo lidiado lo constituyeron los novillos y toros que fueron lidiados completamente hasta su sacrificio en la plaza. A la vista de los resultados obtendios se observa que la lidia provoca un aumento significativo de las concentraciones de cortisol y de corticosterona, tanto en novillos como en toros. Respecto a las hormonas gonadales, la lidia completa también produce un incremento en los niveles de testosterona y de 17-beta estradiol en novillos y en toros; y de androstenodiona en los toros. En el caso de las hormonas tiroideas, los valores plasmáticos de T3 y T4 tienden a incrementarse con la lidia. La TSH aumenta durante la corrida en el caso de los novillos, y en el caso de los toros el incremento no llega a ser estadísticamente significativo. Debido a las variaciones hormonales que se obtienen en el estudio, se comprueba que la lidia representa para el ganado bravo un estrés y un ejercicio muy intenso que, además, se produce en un corto periodo de tiempo. Los animales intentan adaptarse a la lidia no sólo con una respuesta del eje hipotálamo-hipófisis-adrenal, sino con la estimulación de otros órganos endocrinos.

Autor: GREDILLA DÍAZ RICARDO .
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD BIOLOGÍA. UCM.

Resumen: Varias líneas de investigación confirman la teoría mitocondrial de envejecimiento por radicales libres. Las especies reactivas de oxígeno son consideradas las principales determinantes de la tasa de envejecimiento, y la cadena de transporte electrónico, localizada en la membrana interna mitocondrial, la más importante fuente de generación de radicales libres en tejidos sanos. Actualmente, la restricción calórica es la única manipulación experimental capaz de reducir la tasa de envejecimiento y prolongar tanto la longevidad media como la longevidad máxima, así como retrasar la aparición de enfermedades asociadas al envejecimiento. En los trabajos que conforman la presente tesis doctoral se observó que la restricción calórica a largo plazo reduce la tasa de generación mitocondrial de radicales libres específicamente a nivel de complejo I en corazón, hígado y probablemente músculo esquelético. Tal descenso no se debe a una reducción del consumo de oxígeno mitocondrial, sino a un descenso en la fuga porcentual de radicales libres en los animales restringidos. Tras estos estudios queda reforzado el papel que este complejo parece jugar en los procesos de envejecimiento mediados por radicales libres. La restricción calórica también redujo el daño oxidativo al ADN mitocondrial. La magnitud de tal descenso fue muy similar a la observada en la generación mitocontrial de radicales libres, sugiriendo una relación de casualidad entre ambos procesos. El daño oxidativo a proteínas también se redujo en los animales sometidos a restricción calórica en relación a los alimentos ab libitum. Aunque la producción mitocondrial de radicales libres es aceptada como una de las principales determinantes de la tasa de envejecimiento, no está claro el comportamiento de dicha producción con la edad. Nuestros resultados coinciden con investigaciones previas que han mostrado que no existe un incremento de la producción mitocondrial de radicales libres con la edad. Ello estaría de acuerdo con el carácter progresivo del envejecimiento, cuyas causas son generadas a una velocidad constante a lo largo de la existencia de los individuos, conduciendo a una pérdida progresiva de la funcionalidad máxima.

Autor: SALA RABANAL MÓNICA.
Año: 2002.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA .
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: Con la intención de caracterizar el síndrome de invierno desde el punto de vista funcional, se consideró oportuno establecer previamente los valores de referencia de una serie de variables hematológicas y plasmáticas indicadoras y estudiar su evolución a lo largo del año, comparando dos sistemas de estabulación diferentes. Durante el invierno, el hematocrito, el número de eritrocitos circulantes y los niveles plasmáticos de albúmina y los de los diferentes alfa-aminoácidos disminuyeron, mientras que la concentración de sodio y la de las globulinas de síntesis hepática tendieron a incrementar, siendo la magnitud de los cambios observados mayor en las doradas mantenidas en balsas terrestres que en las estabuladas en jaulas marinas. En los ejemplares afectados por el síndrome de invierno se produjo una caída del hematocrito, causada por la disminución del número de eritrocitos en circulación, una reducción de los niveles plasmáticos de globulinas alfa2, magnesio y calcio, y un incremento de los de potasio, alfa-aminoácidos esenciales, alanina y globulinas beta y gamma. Por ser el intestino uno de los órganos más afectados por el síndrome de invierno, se decidió realizar una aproximación a su fisiología mediante la caracterización cinética del sistema de transporte apical de D-glucosa, para lo que se puso a punto una técnica de aislamiento de vesículas de ribete en cepillo basada en la precipitación selectiva por cloruro de magnesio. Se comprobó que el transportador implicado, dependiente de sodio y sensible a la florrizina, a la D-galactosa y al metil-alfa-D-glucopiranósido y, por tanto compatible con el SGLT1 descrito para los vertebrados superiores, es único a lo largo de todo el intestino, aunque el número de transportadores es mayor en el segmento proximal. Finalmente, se realizaron una serie de experimentos para evaluar los efectos fisiológicos de las bajas temperaturas (8 y 12ºC), de las fluctuaciones térmicas (agudas y crónicas) y del ayuno a temperaturas superiores a 13ºC (14 y 18ºC). Aunque todos los tratamientos aplicados, en especial el mantenimiento a 8ºC, alteraron en mayor o menor grado los niveles de las variables indicadoras estudiadas y la funcionalidad del intestino, ninguno de ellos consiguió desarrollar los síntomas del síndrome de invierno. En parte, algunas de las variaciones observadas en las doradas expuestas al frío, como la disminución de los niveles de las diferentes fracciones proteicas y el incremento de la concentración de aminoácidos esenciales, fueron debidas al ayuno, mientras que las hiperglicemia y el aumento de los niveles de alanina fueron consecuencia del estrés, siendo todos estos cambios independientes de la tasa de descenso térmico. A diferencia de los que se observó en los ejemplares sometidos a un ayuno forzado, en el intestino de las doradas mantenidas a 8ºC se produjo un incremento de la actividad Na+-K+-ATPásica y se mantuvo elevada la capacidad de absorción de D-glucosa. Una vez restablecidas la temperatura y la alimentación, las doradas que habían partido de un estado fisiológico adecuado se recuperaron en poco tiempo del frío, del ayuno y del estrés provocado por las fluctuaciones térmicas.

Autor: GÁNDARA GARCÍA FERNANDO DE LA.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: CENTRO OCEANOGRÁFICO DE MURCIA.

Resumen: Se ha estudiado el efecto la temperatura, el peso de los individuos, la hipoxia, la alimentación, las manipulaciones y el tratamiento con formol, sobre el consumo de oxígeno se Seriola dumerili en condiciones de cultivo. Para la estimación del consumo de oxígeno dos métodos: el método de flujo cerrado, que consiste en medir el descenso de la concentración de oxígeno que se produce como consecuencia de la respiración de los peces una vez se ha detenido la renovación de agua, y el método de flujo abierto, que consite en estimar el metabolismo, con una medida simultánea en un tanque de idénticas características pero sin peces. Los resultados muestran que la temperatura aumenta de forma muy significativa el metabolismo, siendo este efecto más acusado tras la alimentación. Así mismo, los juveniles de esta especie parecen ser capaces de aclimatarse térmicamente, y se comportan como oxirreguladores frente una hipoxia gradual. El consumo específico de oxígeno en rutina disminuye de forma muy marcada al aumentar el tamaño de los individuos. El consumo de oxígeno total diario de los juveniles de seriola mediterránea se muestra independientemente del número de tomas de alimento, aunque es menor en los peces en ayunas. El pico de máximo consumo es superior en los peces alimentados con tres tomas al día que en los alimentados con dos. El retorno a los niveles de prealimentación se produce alrededor de las siete horas después del inicio de la alimentación, independientemente del número de tomas. No se ha observado ningún efecto de anticipación al alimento. En situación de ayuno se produce una variación significativa del patrón rutinario diario de consumo de oxígeno en juveniles de seriola sugiriendo la existencia de un ritmo endógeno. Cuando la seriola es alimentada con una ración diaria no limitarse, ésta puede ser distribuida con distintas frecuencias sin que se vean afectados ni el crecimiento ni el consumo de oxígeno, pero los perfiles diarios de consumo se ven significativamente suavizados, con una amplitud menor y una duración más prolongada del efecto de la alimentación. Ésta, realizada a saciedad con dietas con un nivel proteico no limtante y altos niveles de grasa, no afecta al crecimiento ni al consumo de oxígeno de esta especie, lo que sugiere que la energía excedentaria se acumula directamente en los tejidos corporales desplazando al agua. Frente a ciertas manipulaciones, esta especie muestra un aumento metabólico semejante al que se produce como consecuencia de la alimentación, con tiempos de recuperación inferiores a las 7 horas por lo que las manipulaciones propias de un cultivo pueden ser realizadas sin que afecten severamente a los rendimientos de esta especie. En el rango de temperaturas testado (19,7 - 25,8ºC), el tratamiento con 300 ppm de formol no afecta ni al consumo de oxígeno, ni a la concentración de oxígeno del agua, por lo que puede realizarse sin un aporte suplementario de oxígeno.

Autor: RUEDA GONZÁLEZ FRANCISCO MIGUEL.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: Se estudió el efecto de la duración del ayuno sobre el crecimiento posterior en la realimentación de Pagrus Pagrus (L). Para ello se plantearon dos experimentos: en el primero los peces fueron sometidos a 7,14 y 28 días de ayuno y posteriormente se realimentaron hasta un total de duración del experimento de 15 semanas; en el segundo las duraciones del ayuno fueron 14, 28 y 42 días y la posterior realimentación se llevó hasta un total del experimento de 10 semanas. En este segundo experimento los peces pudieron elegir su alimento entre dos dietas de diferente energía suministradas mediante sistemas de autodemanda. En los diferentes muestreos se determinaron parámetros de crecimiento, utilización nutritiva del alimento, comportamiento alimentario, alimento suministrado, biometría y somatometría, composición corporal, parámetros hematológicos, metabólitos sanguíneos, hormona del crecimiento en plasma, composición de ácidos grasos de lípidos tisulares. Los resultados y su discusión permitieron concluir que el pargo presenta crecimiento compensatorio, tras un periodo de ayuno de 42 días, que le permite recuperar el peso que debería tener si hubiese estado alimentándose continuamente sin que se produzca una modificación de la composición final. Durante el ayuno el pargo presenta una primera fase de pérdida de peso muy acusada por la deshidratación de los tejidos, seguida de una fase de cierta estabilidad con pérdidas de peso reducidas y de una última fase de gran pérdida de peso por la movilización de reservas proteicas. El aporte de energía procede en una primera fase, de las proteínas y/o de lípidos, en función del estado de sus reservas grasas, para utilizar a continuación mayoritariamente lípidos hasta agotar dichos depósitos y posteriormente de la oxidación de proteínas. La movilización de lípidos durante el ayuno provoca disminución del porcentaje de ácido grasos poliinsaturados de la serie n-3. También se modifica el comportamiento alimentario aumentando el periodo de comidas que se realizan también por la noche. La recuperación del peso se basa en la combinación de la hiperfagia y mejora de la utilización del alimento con la duración y magnitud de éstas. El tiempo de recuperación se puede ver reducido cuando el pargo tiene acceso a una dieta más rica en energía. En la realimentación cuanto mayor es el periodo de ayuno, mayor es la incorporación de proteína y mayor es la cantidad de lípidos dedicados a fines energéticos, retrasando la recuperación de los depósitos grasos.

Autor: ESTEVEZ PUERTO M. ISABEL .
Año: 2002.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE CÁDIZ.

Resumen: En este trabajo se han cuantificado la cantidad de antioxidantes totales de los tipos de vinos más significativos de Jerez, obteniéndose que el vino oloroso resultó el de mayor concentración, siguiendo en concentración el vino amontillado y el vino fino. En el modelo biológico formado por 120 ratas wistars sometidas a un consumo moderado de estos vinos y de un extracto soluble en disolución alcohólica de las semillas de uva Palomino, con y sin ejercicio físico moderado, se ha obtenido lo siguiente: - La concentración de antioxidante en suero no ha sufrido variaciones estadísticas en ninguno de los grupos ensayados. - El consumo de alcohol no ha inducido hipertransaminasemia. - El consumo moderado de los vinos a reducido significativamente el colesterol sérico total, entre 20% y 29%. - El extracto ha tenido una potente actividad biológica, manifestada por el mayor contenido de antioxidantes, un 17% superior y se ha comportado como el más potente hipocolesteromiante. - La reducción de colesterol en los animales tratados con extracto de semillas y sometidos a ejercicio ha llegado a ser de un 34% frente a un 28% que se obtuvieron con los vinos.

Autor: GARCÍA HERRERA JOSEFINA.
Año: 2002.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA .
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA - UNIVERSIDAD DE ZARAGOZA.

Resumen: Las bacterias pertenecientes a la especie Escherichia coli se encuentran frecuentemente en la flora intestinal del hombre y de los animales. Sin embargo, ciertas cepas pueden ser causantes de importantes alteraciones digestivas relacionadas con las motilidad y la absorción intestinales tanto en jóvenes como en adultos. La E.coli enterotoxigénica se considera como la causa principal de diarrea en niños y en viajeros. El lipopolisacárido (LPS), componente de la membrana externa de las bacterias Gram negativas actúa como una endotoxina y es el responsable de los síntomas que se desarrollan en las infecciones por este tipo de bacterias. Las respuestas sistémicas a la infección por bacterias Gram negativas son mediadas por citoquinas derivadas de macrófagos/monocitos producidas por el hospedador en respuesta al LPS. El factor de necrosis tumoral alfa (TNF-alfa), se considera la citoquina inflamatoria inicial que ejerce poderosos efectos celulares y moleculares en el hospedador durante las sepsis. Además, se ha demostrado que la administración de esta citoquina en animales produce cambios hematológicos, hemodinámicos y otros síntomas similares a los inducidos por el LPS. El objetivo del presente trabajo fue el estudio del efecto del LPS y del TNF-alfa sobre la absorción intestinal de D-fructosa, segundo monosacárido más abundante en la naturaleza, y por lo tanto, un componente importante en el consumo de azúcar en la dieta actual de los mamíferos. Se eligió al conejo como modelo animal de experimentación dado la importancia económica que tiene la cunicultura en Aragón, lugar donde se ha realizado la presente investigación, además de que esta especie posee un aparato digestivo monocavitario, lo cual permitiría, teniendo en cuenta las limitaciones propias de un modelo animal, extrapolar al humano los resultados obtenidos. Se utilizó el yeyuno por ser la porción del intestino delgado que presenta máxima absorción. Para el desarrollo de la investigación se utilizaron dos protocolos de trabajo: * La exposición directa del tejido a la endotoxina (efecto local). * Administración intravenosa de LPS o TNF-alfa (efecto sistémico), con la finalidad de crear un estado séptico. El transporte intestinal de D-fructosa fue estudiado mediante las siguientes técnicas de experimentación in vitro: * Acumulación tisular de sustrato en tejido entero de Crane-Mandelstam. * Medida de flujos transepiteliales mediante cámaras tipo Ussing. * Preparación de vesículas membranosas intestinales del borde en cepillo. * Medida de la expresión de la proteína de D-fructosa (GLUT5) por Western blot. Los resultados obtenidos mostraron que el LPS añadido directamente al tejido produce reducción del transporte de D-fructosa a través del borde mucosal. En este efecto podrían estar implicados mediadores intracelulares relacionados con la proteína quinasa C y el complejo calcio-calmodulina. Por otra parte, la administración intravenosa del LPS en el estudio sistémico, se llevó a cabo para inducir en el animal un estado séptico o infección generalizada. En estas condiciones, se observó una clara elevación de la temperatura corporal del animal de aproximadamente 1.4ºC, cambios hematológicos relacionados con el número de leucocitos e incrementos en los niveles séricos de glucosa y cortisol, éste último relacionado con el estrés y con estados de inflamación. En relación a los estudios sobre el transporte intestinal, los resultados mostraron que el LPS administrado intravenosamente, produce inhibición en la absorción de D-fructosa, debido a una reducción en el número de transportadores GLUT5 con la posible implicación de las proteínas quinasas A y C. Asimismo, la acción secretagoga de la endotoxina sobre el intestino ejercida a través de citoquinas como el TNF-alfa, podría contribuir a este efecto. De igual manera, la administración intravenosa de TNF-alfa también indujo un estado séptico en el animal, con la consiguiente modificación de los parámetros hematológicos y séricos antes mencionados y elevación de la temperatura corporal. El transporte intestinal de D-fructosa fue igualmente inhibido por reducción del número de transportadores GLUT5 y por la acción secretagoga de esta citoquina sobre el intestino, estando implicados es este caso mediadores como el óxido nítrico y las prostaglandinas.

Autor: MURUGAVEL KAILASAM.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.