FISIOLOGIA ANIMAL, 4

Autor: MOHAMED KAMAL ELSAID ABOU-ELELLA AMIRA.
Año: 2001.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIA DE CÓRDOBA.

Resumen: La citotoxidad por D-galactosamina (D-Ga1N) es un modelo experimental adecuado de lesión hepatocelular aguda. Se ha demostrado que PGE1 reduce la citotoxicidad inducida in vivo por D-Ga1N mediante el aumento de la expresión de TNF-alfa y óxido nítrico sintasa inducible (iNOS) en hepatocitos. El presente estudio se diseñó para determinar el papel del TNF-alfa en la apoptosis y necrosis inducida por D-Ga1N y su protección por PGE1 en el cultivo primario de hepatocitos de rata en co-cultivo con células de Kupffer. Los hepatocitos y las células de Kupffer se aislaron de ratas macho mediante la perfusión con colagenasa y la purificación por centrifugación diferencial y elutriación, respectivamente. Los hepatocitos se co-cultivaron con las células de Kupffer en una relación de 3,5:1 con la utilización de insertos de cultivo. Para determinar el papel del TNF-alfa, se añadieron anticuerpos anti-TNF-alfa (0,3 mg/ml) 2h antes que la PGE1 ó 4h antes que la D-Ga1N. La apoptosis celular se evaluó con la aparición de fragmentación del DNA, y la necrosis mediante la liberación de lactato deshidrogenasa (LDH) al medio de cultivo. La producción de óxido nítrico (ON) se determinó por la cuantificación de los productos finales, nitrito+nitrato (Nox), mediante el reactivo de Griess. TNF-a, IL-1a, IL-6, e IFN-g fueron cuantificados por ELISA en el medio de cultivo. La lipoperoxidación se determinó mediante la valoración de malondialdehído (MDA) en el medio de cultivo. Se observó que la inducción de apoptosis y necrosis por D-Ga1N en los hepatocitos se asoció con un aumento de ON, TNF-alfa y MDA en el medio de cultivo. La protección por PGE1 de la apoptosis por D-Ga1N se asocia con una reducción de la concentración de ON en el medio de cultivo. El co-cultivo de los hepatocitos con células de Kupffer exacerba la necrosis y apoptosis inducida por D-Ga1N. La muerte celular dependiente de células de Kupffer no se relacionó con el aumento del TNF-alfa ni el ON sino probablemente con la inducción de estrés oxidativo en los hepatocitos.

Autor: FERNÁNDEZ FERNÁNDEZ MIRIAM.
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: IGF-I y VIP son dos factores mitotróficos sintetizados en la hipófisis donde ejercen una acción mitotrófica mediada por receptores que se expresan en las células hipofisarias. El objetivo de este trabajo es en primer lugar, establecer si IGF-I y VIP tienen acción mitotrófica sobre un tipo celular concreto, las células lactotropas hipofisarias. En segundo lugar definir los mecanismos de señalización de IGF-I y VIP en su acción proliferativa y los mecanismos de la interacción en las rutas de señalización de ambos factores. Hemos establecido la acción de IGF-I y VIP sobre la proliferación de las células lactotropas. En estudios previos hemos evidenciado que tanto IGF-I como VIP son factores liberadores de prolactina y además que la cción de IGF-I está mediada por el VIP hipofisario cuya expresión induce. También hemos observado que ambos factores tienen una acción mitotrófica sobre las células lactotropas y que IGF-I necesita la presencia de VIP para ejercer totalmente su acción proliferativa. IGF-I ejerce sus acciones proliferativas a través de la ruta de señalización Ras/MAPK/ERK mientras que VIP señaliza a través de la vía AMPc/PKA. Nuestros resultados indican la dependencia de IGF-I en la activación de la vía de señalización AMPc/PKA para inducir su acción mitotrófica. Además, VIP es capaz de inducir la activación de la vía MAPK, necesaria para promover la expresión génica inducida por VIP y la proliferación celular. IGF-I y VIP inducen la expresión de ciertos genes a través de la activación de factores transcripcionales como CREB el cual se une al elemento CRE que está presente en el promotor de numerosos genes de expresión temprana y de expresión tardía implicados en la proliferación celular. IGF-I y VIP requieren la activación de las vías de señalización MAPK y AMPc/PKA para ejercer sus acciones mitogénicas sobre las células lactotropas. Además hemos definido una acción anti-apoptótica de IGF-I sobre las células hipofisarias, a través de la regulación de componentes implicados en este proceso.

Autor: ZOTTO BUSTOS SILVINA BEATRIZ DAL.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Resultados previos de nuestro laboratorio han mostrado que una sola exposición a un estímulo estresante de elevada intensidad como la inmovilización (IMO) reduce la respuesta del eje hipotalámico-pituitario-adrenal (HPA) al mismo, pero no a un nuevo estímulo estresante, aplicado días o semanas más tarde. Puesto que la menor respuesta al mismo estímulo sugiere que una exposición previa a la IMO es capaz de inducir un cierto nivel de adaptación frente al mismo estímulo, cabría pensar que la adaptación observada en respuesta al estrés crónico podría ser consecuencia del tiempo transcurrido entre la primera y la última exposición al estrés y no de la repetición del estímulo. Por otro lado, se desconocen los mecanismos implicados como un nuevo tipo de aprendizaje ligado a estímulos estresantes de elevada intensidad. Los objetivos del presente trabajo han sido: A,- Comparar los efectos a largo plazo de una sola exposición al estrés con los efectos de la exposición repetida, utilizando dos estímulos estresantes de diferente intensidad: el nado forzado y la IMO. B,- Estudiar si los glucocorticoides liberados durante la primera exposición a la IMO o el miedo generado en dicha situación juegan un papel relevante en la inducción de los efectos a largo plazo del estrés. Se utilizaron ratas macho adultas como animales de experimentación y se analizaron los niveles plasmáticos de ACTH, corticosterona y glucosa. Los resultados obtenidos indican que no existe adaptación biológicamente significativa del eje HPA (aunque sí de otras variables conductuales y fisiológicas) al nado crónico, ni tampoco efectos a largo plazo sobre el eje HPA similares a los observados con la IMO. Puesto que el nado no indujo efectos a largo plazo similares a los de la IMO, decidimos comparar los efectos de una exposición única con la exposición repetida, utilizando este estímulo estresante y estudiar el papel de los glucocorticoides. Para ello, utilizamos animales intactos y animales adrenalectomizados suplementados con corticosterona en el agua de bebida (ADX+B). En los intactos, los efectos de la exposición repetida a la IMO sobre el eje HPA fueron muy similares a los de una sola exposición, pero en los ADX+B, una sola exposición a la IMO no modificó la respuesta de la ACTH al mismo estímulo aplicado 8 días más tarde, mientras que sí se observó reducción de la respuesta tras la exposición crónica. Estos resultados sugieren que los glucocorticoides no serían necesarios para la adaptación a la IMO crónica, pero estarían implicados en la inducción o en la expresión de los efectos a largo plazo de la IMO sobre el eje HPA. Al objeto de estudiar más específicamente el papel de los glucocorticoides en la inducción de los efectos a largo plazo, se manipularon los niveles de glucocorticoides durante la primera exposición a la IMO inhibiendo su síntesis con metirapona, bloqueando sus receptores con el RU38486 o potenciando su liberación con la administración de ACTH. Tomados en conjunto, los datos sugieren que los glucocorticoides podrían estar parcialmente implicados en la inducción de los efectos a largo plazo sobre el eje HPA, pero su papel podría ser más bien permisivo. Por lo tanto, otros factores deberían estar implicados. Entre estos posibles factores estaría el nivel de miedo/ansiedad generado durante la primera exposición a la IMO. Por ello decidimos manipular los niveles de ansiedad, potenciándolos con la administración del fármaco ansiogénico FG7142 antes de una situación estresante de moderada intensidad (nado) o reduciéndolos con el ansiolítico diazepam antes de la exposición a la IMO. Sin embargo, ninguna de las manipulaciones modifició el efecto del estrés per se, lo que sugiere que el miedo/ansiedad no es un factor importante en la inducción de los efectos a largo plazo de la IMO sobre el eje HPA. Finalmente, aunque la exposición previa a la IMO protegió parcialmente de la anorexia asociada a una nueva exposición al mismo estímulo, ninguna manipulación experimental fue capaz de modificar el efecto, indicando que los efectos a largo plazo de una sola exposición a la IMO sobre la ingesta vienen regulados por mecanismos diferentes de los efectos sobre el eje HPA. En resumen, los efectos a largo plazo de una sola exposición al estrés aparecen con un estímulo estresante de alta intensidad (IMO) pero no con uno de intensidad intermedia (nado). Una sola exposición a la IMO es capaz de reducir la respuesta endocrina (eje HPA) y la anorexia causada por una nueva exposición al mismo estímulo estresante aplicado días más tarde. Este efecto a largo plazo parece explicar, al menos parcilamente, la adaptación del eje HPA tras la exposición repetida al estímulo y por lo tanto podría tner un valor adaptativo para el animal. Sin embargo, no es descartable que este efecto protector, que también se observa en la ingesta de comida, no sea extensible a otros aspectos. De hecho, la respuesta fisiológica a la IMO es de tal intensidad que esta situación estresante podría constituir un modelo experimental del síndrome de estrés postraumático en humanos (PTSD). No obstante, la validación de la exposición a la IMO como un modelo de PTSD requerirá una profunda caracterización de las consecuencias de la IMO a nivel conductual, así como un mejor conocimiento de los mecanismos neurobiológicos implicados.

Autor: ALONSO ALVAREZ CARLOS.
Año: 2000.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA DE LUGO. UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.

Resumen: Se han abordado diferentes aspectos de la ecología y el comportamiento de las gaviotas partiendo de un conocimiento de la fisiología de la especie objeto de estudio. Para ello en un primer bloque se analizó el organismo del ave independiente del medio ambiente mediante experimentos en cautividad y trabajo de laboratorio. Así, se estudió el efecto de los procesos de ayuno, subalimentación y la recuperación en las gaviotas, mediante el análisis de la bioquímica del plasma y el peso durante un experimento con aves en cautividad. Se hallaron diferencias en los cambios sufridos entre aves que alcanzaban un nivel crítico de perdida de peso mediante un ayuno total y aquellas que lo hacían mediante una dieta subóptima sostenida en el tiempo. Se propone el uso del cociente entre las concentraciones plasmáticas de urea y colesterol como indicador de condiciónfísica, reflejando la proporción de peso perdida por el individuo respecto a su óptimo. Tal indicador serviría para ser usado en el campo evitando la recaptura de las aves o su sacrifico para estimar el estado de sus reservas. Se estudio además el impacto del ayuno y la subalimentación en la respuesta inmune meediada por linfocitos T durante el experimento antes citado, hallándose una relación causal entre el porcentaje de perdida de peso y esta respuesta pero también influida por la cantidad de alimento ingerido. Por otro lado, se estudió que variables podían estar relacionadas con el desarrollo de la madurez sexual en esta especie, considerando esta como volumen gonadal, pero también como actividad esteroidogénica en tejido mediante una técnica inmuno-histoquímica. Para ello se sacrificaron aves de distintas edades. Se observó que, independientemente de la edad del ave, en los machos el desarrollo parece estar influido por el estado de condición física, mientras que en las hembras este incremento parece relacionado con la densidad de la zona frontal de su cráneo. Esta última relación podría explicarse por la relación existente entre dicha zona y la percepción de la luz, y su efecto en la activación del eje hipotálamo-hipófisis-gónada. Como último objetivo del primer blouqe, se analiza, mediante un experimento con machos en cautividad, del efecto de mantener altos niveles de testoterona en la condición física (peso, ingesta, bioquímica del plasma y tiroides) y la respuesta inmune(mediada por linfocitos T), no observándose diferencias entre aves implantadas con testoterona y aves control. En un segundo bloque de la tesis se pusieron a prueba diferentes cuestiones relacionadas con el comportamiento y la ecología pero en las aves en la colonia de reproducción. Se observó que el hecho de criar o no por vez primera en gaviotas jóvenes parece estar relacionado con la composición de la dieta de estas evas, y que los adultos sufren menos la reproducción que los individuos jóvenes. Durante la incubación, que se prolonga alrededor de un mes las hembras incrementan su peso y la concentración de algunas variables de plasma, reflejando una recuperación tras la puesta, cambios no observados en los machos. Además las madres en mejor condición física produjeron una mayor proporción de pollos machos en sus nidadas(midiendo también embriones no eclosionados). Se discute la importancia adaptativa de dicho fenómeno ya que los machos demandan más energía durante su crecimiento, pesan más de adulto y tienen mayor varianza reproductiva que las hembras. Por último se estudió el efecto de sosterner altos niveles de testosterona en la colonia por machos. Se analizó su comportamiento en dos experimentos uno, durante el cortejo y otro durante la incubación. Durante la incubación las aves implantadas mostraron mayor frecuencia de comportamientos agresivos y sexuales, e incrementaron el tamaño de sus territorios. Este último podría considerarse beneficioso en términos de supervivencia de los pollos, ya que se sabe que en áreas de alta densidad de nidos la muerte de estos por adultos vecinos es muy importante. Durante la incubación los machos con altos niveles de andrógenos inviertieron menos tiempo en la incubación que los controles y que su pareja, lo que afectó a la temperatura de los huevos. Además exhibieron más comportamientos sexuales y cópulas. Se sugiere un conflicto entre sexos en la inversión durante en la incubación. El macho con altos niveles de testosterona podría dedicarse a buscar cópulas extra-pareja en un periodo de tiempo en que su hembra ya no es fértil y no hay que defenderla, y por su parte la hembra se vería obligada a invertir más tiempo en el nido, si bien esto último no se observó. Así, la disminución abrupta de la concentración de testosterona en machos tras la puesta, descrita en gaviotas y otras aves monógamas, podría ser adaptativa, evitando la posible falta de compensación de la pareja en tales circunstancias.

Autor: HERRERO VILLEGAS M. ASUNCION .
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: Numerosos estudios indican que un factor que relaciona el estrés oxidativo y la longevidad es la intensidad de producción de radicales libres. Sin embargo, los estudios realizados en mamíferos de distinto tamaño que siguen la regla metabólica no permiten discriminar si las correlaciones observadas son un fenómeno debido a causas del envejecimiento distintas a los radicales libres y correlacionadas con la alta intensidad metabólica de las especies de pequeño tamaño y longevidad. Para aclarar esto es preciso estudiar especies de homeotermos conlongevidades y metaboblismo simultáneamente alto, como ocurre en las aves. Estos animales escapan a la teoría de velocidad de vida, mostrando una longevidad máxima 2-4 veces superior a la esperada por su tamaño y metabolismo. Según los resultados de este estudio, la producción de radicales libres es menor en animales longevos que en animales de vida corta, de manaera que éste parámetro correlaciona mejor con la longevidad que con la tasa de consumo de oxígeno mitorcondrial. Por otro lado, realizamos estudios de localización del generador de radicales libres dentro de la cadena respiratoria mitocondrial y obtuvimos que éste se encuentra dentro del Complejo I, y más concretamente en los centros hierro-sulfurados. El bajo contenido en dobles enlaces de los lípidos de las membranas es una característica común de las aves estudiadas. Este fenómeno se debe a una restreibución de los ácidos grasos desde los más insaturados hasta los menos insaturados sin variar el porcentaje final de poliinsaturados. Existe una correlación negativa entre el contenido en dobles enlaces (DBI) de los ácidos grasos el corazón de los mamíferos y la longevidad máxima (MLSP) por lo que las especies longevas presentan una mayor portección de sus tejidos frente al daño oxidativo. La longevidad máxima correlaciona de manera negativa con el marcador del daño oxidativo al ADN (8-oxodG) en el caso del ADN mitocondrial, pero no existe correlación si estudiamos el ADN nuclear. Los animales longevos (aves o mamíferos) presentan bajos nivels de 8-oxodoG en el ADN mitocondrial. Este fenómeno no es consecuencia de su lento metabolismo sino que se debe a su lenta tasa de producción de radicales libres en las mitocondrial. El daño oxidativo al ADN no correlaciona de manera positiva con la edad, solo en etapas más avanzadas del envejecimiento aparece un aumento del mismo. Sólo existen dos parámetros relacionados con el estrés oxidativo que correlacionan con la longevidad máxima en el sentido adecuado: la producción mitocondrial de radicales libres y el grado de insaturación de los ácidos grasos de las membrans en los tejidos post-mitódicos. Ambos son tanto más bajos cuanto mayor es la longevidad. Esto está de acuerdo con el concepto de que la velocidad de envejecimiento no depende de los niveles de antioxidantes ni de los mecanismos de reparación del ADN.

Autor: LEÓN MARTÍ ANA DE.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD CC BIOLOGICAS, UCM.

Resumen: La presente tesis doctoral se centra en el estudio del posible valor adaptativo y funcional de algunos de los patrones ecológicos, etológicos y fisiológicos del pingüino Barbijo(Pygoscelis antarctica) en su medio natural. En primer lugar se aportan datos observacionales sobre distintos parámetros poblacionales a lo largo de 8 años de estudio, y se analizan variaciones interanuales en el tamaño de la población reproductora, en el éxito reproductor y en la fenología. A continuación, y tratando de profundicar en las causas de variación de dicha fenología pero a nivel individual, se estudia la relación entre el estado de salud y la respuesta inmune con la fecha reproductora de los individuos, variable clave sobre el éxito reproductor por la brevedad de la estación de cría. En otro de los capítulos se analizan los resultados de los experimentos sobre la posible función de la conducta de recolección de piedras para el mantenimiento del nido. Otro objetivo de la tesis es determinar algunos de los factores que afectan a la asincronía de eclosión de los huevos. Se presentan conjuntamente dos estudios sobre selección fenotípica en el tamaño corporal: uno de ellos analiza la mortalidad diferencial que existe sobre los pollos en el momento de la emancipación en función de su tamaño corporal; y el otro analiza la capacidad de los adultos de acarrear alimento a sus pollos dependiendo también de su tamaño. En último lugar se estudia la posible relación entre las agresiones de los adultos hacia los pollos y la tendencia de estos a formar agrupaciones durante la fase de posguarda.

Autor: MÉNDEZ GONZÁLEZ M. ASUNCIÓN .
Año: 2000.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En la presente tesis se hace un estudio de lso mecanismos moleculares y fisiopatológicos que modulan la ciruculación hiperdinámica gástrica en la uremia, basándose, principalmente, en el óxido nítrico y su relación con la anemía crónica y el hiperparatiroidismo secundario. La introducciónrcoge una amplia inforamción sobre el NO, tal como su biosíntesis y regulación, su bioquímica, y su apapel fisiológico y fisopatológico. También hay un capítulo dedicado a la microcirculación gástrica y otros que versan sobre la insuficiencia renal crónica y su relación con la anemia. Dado que antes de la realización del presente trabajo, las técnicas para medir la formación de NO en mucosa gástrica se basaban en mediciones indirectas, el primer objetivo fue la validación de la técnica de la voltametría para medir NO en mucosa gástrica. El segundo objetivo fue medir la concentración basal de NO en mucosa gástrica y los mecanismos moleculares que regulan su síntesis. Y el tercer objetivo fue evaluar el papel de la anemia crónica y el hiperparatiroidismo secundario en la ciruculación hiperdinámica gástrica de las ratas urémicas. Las conclusiones más importantes derivadas de este estudios fueron las siguientes; - La técnica de Voltametría permite monitorizar la formación y degradación de NO en la mucosa gástrica de la rata. - La hiperemia gástrica asociada a la uremia se produce de forma lentra y progresiva, y está directamente modulada por la producción local exaterada de NO. - El incremento de la producción de NO en la mucosa gástrica de ratas urémicas está inducido por un aumento en la actividad de la ncNOS, efecto que probablemente está modulado por un mecanismo post-traduccional. - La anemia crónica puede jugar un papel improtante en la patogenia de la hiperemia gástrica urémica, bien estimulando la biosíntesis local de NO o bien reduciendo el efcto inhibidor de la hemoglobina sobre el NO libre.

Autor: VELARDE CALVO ANTONIO.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y FORMACION CONTINUADO.

Resumen: Los objetivos de tesis fueron, para la especie porcina evaluar en condiciones comerciales la efectividad del aturdimeinto electrico con fibrilacion cardiaca y el aturdimiento con CO2 sobre la perdida de sensibilidad, la calidad de la carne y la presencia de hemorragias. Para la especie ovina, evaluar el efecto de la posición de los electrodos, la presencia de lana y la humedad de la piel y lana sobre la efectividad del aturdimiento electrico solo-cabeza, caracterizar la insensibilidad provocada por el aturdimiento electrico solo-cabeza, y valorar el efecto del aturdimiento electrico solo cabeza sobre la calidad de la carne y la presencia de hemorragia. En condiciones comerciales, el aturdimiento electrico automatico con fibrilacion cardiaca es mas eficaz que la exposición al dioxido de carbono debido a que provoca la insensibilidad de una forma inmediata e irreversible. El sistema de aturdimiento por dioxido de carbono es más susceptible a los errores causados por un manejo incorrecto por parte del operario. En condiciones comerciales, el sistema de aturdimiento con dioxido de carbono reduce la incidencia de carnes PSE y la presencia de petequias en lomos y jamones respecto al aturdimiento electrico. Para mejorar la calidad de la carne de cerdos aturdidos con dioxido de carbono, debe eliminarse el gen de halotano de la poblacion. Debido a la gran incidencia de carnes PSE en cerdos aturdidos electricamente, la incidencia de carnes PSE no se reduce significativamente si se elimina el gen del halotano. Para reducir la incidencia de petequias en el lomo y equimosis enla espalda en cerdos aturdidos electricamente, deberia eleminarse el gen del halotano de la poblacion. En la especie ovina, la posicion de los electrodos, la presencia o ausencia de lana y la humedad de la piel o de la lana son parametros determnantes para garantizar un aturdimiento efectivo. Se recomienda aplicar los electrodos entre el angulo lateral del ojo y la base de la oreja a ambos lados de la cabeza, preferiblemente con piel humeda. Otros tratamientos pueden provocar en el animal un aturdimiento incorrecto. El espectro de frecuencias es el metodo mas adecuado para la valoracion objetiva del estado de inconsciencia tras el aturdimiento electrico. Este metodo permite cuantificar los cambios observados en el registro electroencefalografico mejorando la consistencia de la interpretacion de la evaluacion de la capacidad de respuesta del cerebro. El aturdimiento electrico solo-cabeza provoca un periodo de insensibilidad reversible que dura como media 28 s. Para evitar la recuperacion de animal antes de la muerte cerebral se deben seccionar las dos arterias carotidas comunes durante la fase tonica. En condiciones comerciales, la ausencia de ritmicidad respiratoria es el signo más objetivo para evaluar la inconsciencia tras el aturdimiento electrico. En cambio, la ausencia de reflejo corneal no garantiza el estado de inconsciencia en ovino. El aturdimiento electrico solo-cabeza aplicado con un voltaje de 250 V y 50 Hz durante 3 s no tiene efectos negativos sobre la calidad de la canal y de la carne.

Autor: AGUADO SAEZ DE GUINOA MIRIAM.
Año: 2000.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: El descubrimiento del gen ob, reveló que codifica una proteína circulante denominada leptina, que es secretada principalmente por los adipocitos y que participa activamente en la regulación del peso corporal y del gasto energético. La leptina informa al cerebro, a través de receptores hipotalámicos (OB-Rb), de los depósitos de grasa corporal para que este centro nervioso realice los "ajustes" compensatorios adecuados en el metagolismo energético. Posteriormente, la localización de receptores funcinales de la leptina en una gran variedad de tejidos, incluyendo el WAT, sugiere que la leptina podría tener efectos sobre tejidos periféricos, además de los efectos centrales. En este sentido, con este estudio se pretendió evaluar el posible papel de la leptina como activador de la lipolisis in vitro en adipocitos aislados de ratones Swiss, ratones ob/ob, ratones db/db, ratas Wistar y humanos (varones y mujeres). Una vez comprobado que la lepptina ejerce un efecto lipolítico directo en adipocitos aislados de WAT, se realizó un experimento con ratones delgados, ratones ob/ob y db/db para determinar la influencia de la administración previa de leptina ex vivo sobre la actividad lipolítica basal. En un tercer grupo de experimentos se pretendió evaluar el efecto de la incubación de adipocitos aislados de rata y de humanos, tanto de varones como de mujeres, con diferentes sustancias moduladoras de la movilización lipídica (insulina, GH, testosterona, cortisol, TNF, NPY, SA 0205 (antagonista delNPY) y tres agonistas adrenérgicos beta3 (BRL 37344, tertatolol y S11.001). Los resultados evidenciaron que todas las sustancias empleadas, a excepción de la insulina y el NPY, originaron un efecto lipolítico. Posteriormente, se estudió el efecto de la leptina de la regulación hormonal de la lilpolisis. Para llevar a cabo este propósito se incubó cada una de las moléculas citadas anteriormente en un intervalo de dosis de 10-12 a10-6M, con una dosis fija de leptina (CE50) y se comparó el efecto originado con la respuesta obtenida tras la administración de cada una de estas sustancias sólas. Finalmente, se estudió la influencia de diferentes moduladores de la movilización lipídica en la respuesta lipolítica desencadenada por la leptina. Para conseguir este objetivo, se incubaron los adipocitos en leptina (10-12 a 10-6M) en combinación con una dosis única (CE50) de insulina, GH, testosterona, cortisol, TNF, NPY, SA 0204 y tres agonistas adrenérgicos (BRL 37344, tertatolol y S11.001). El efecto lipolítico originado se comparó con la respuesta obtenida tras la incubación de adipocitos con leptina sóla.

Autor: MATINEZ BURGOS M. ALBA.
Año: 2000.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO FISIOLOGIA/INSTITUTO DE NUTRICION.

Resumen: La ingesta de dietas aterogenicas, caracterizadas por su alto contenido en grasa saturada y colesterol, es un determinante clave en el desarrollo del proceso aterosclerotico. Sin embargo, las consecuencias que este tipo de dietas pueden ocasionar a nivel pancreatico son practicamente desconocidas. Con el objetivo de evaluar la influencia de la aterosclerosis inducida por la ingesta de un dieta aterogénica sobre el pancreas, en conejos, asi como el efecto de la administracion posterior de distintos tipos de aceites dieteticos girasol, oliva y pescado, se han empleado conejos de raza New Zealand(n=30) y han sido alimentados con la dieta ateroenica durante un periodo de 50 dias. Transcurrido este tiempo, un grupo (n=6) fue sacrificado y el resto dividido en cuatro grupos, a los que se les suministraron diferentes aceites: girasol, oliva virgen, oliva y pescado. A lo largo de todo el periodo experimental(80 dias), se alimento paralelamente un grupo control sano (n=6) con una diet estándar para conejos. Los resultados muestran que la aterosclerosis inducida por la dieta no afecta al peso del pancreas ni a su contenido en proteina, por lo que no parecen provocarse, en consecuencia, alteraciones morfologicas importantes, que cursen con hipertrofia o hiperplasia glandular. El contenido en colesterol de la glandula si incrementa de forma significativa en los animales ateroscleróticos. Asimismo, la enfermedad provoca en la glandula pancreatica una adaptacion a los niveles de grasa dietetica, que afecta a las actividades de lipasa, colipasa, quimiotripsina y amilasa. Tambien se pone de manifiesto que la actividad del pancreas exocrino se adapta de forma diferencial a la calidad de la grasa de la dieta, observando patrones de adaptacion diferentes en los grupos que ingieren dietas ricas en aceites de girasol y oliva frente a los que ingieren aceites de oliva virgen y pescado. Los acidos grasos poliinsaturados de la serie n-6 dieteticos son los que inducen un mayor contenido en enzimas pancreaticas. Las membranas pancreaticas analizadas reflejan en su composición, en gran medida, el acido graso mayoritario presente en la dieta, lo que indica una adaptación de estas membranas, probablemente debido a que el mecanismo de regulacion de su fluidez sea prioritario sobre el de adaptacion.

Autor: MARTIN LOPEZ JOSE FERNANDO.
Año: 2000.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGIA .

Resumen: Este trabajo pretende identificar genes que codifican para elementos de las rutas de recepcion y transducción olfatoria a nivel de neurona olfatoria primaria en Drosophila melanogaster, mediante el estudio de lineas enhancer trap. Estas lineas poseen mutaciones por la insercion de un elemento P modificado que pone de manifiesto la expresión del gen afectado. En primer lugar, se estudiaron 30 lineas enhancer trap cuya insercion afectaba a genes con expresion en los organos olfatorios para determinar cuales eran mutantes funcionales de recepcion olfatoria. Varias de estas lineas resultaron defectivas en electrofisiologia y comportamiento, y en una de ellas se identificó al gen responsable. En segundo lugar, se identificó un gen de la ruta de transduccion del IP3 que interviene en la recepción olfatoria por el estudio funcional de deficiencias generadas con la movilizacion del elemento P. Por ultimo, estudiamos la expresion de alelos enancer trap de genes conocidos. En varios de ellos encontramos expresion B-Gal en los organos receptores olfatorios por lo que podrian intervenir en el olfato. Esto se confirmo en dos genes de la ruta de transduccion del AMPc.

Autor: LLORENS FOLGADO SILVIA.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA DE LA UNIVERSIDAD DE VALÉNCIA.

Resumen: En el presente trabajo se estudia el efecto de las diabetes sobre la respuesta vascular de la arteria carotida común de conejo a tres sustancias vasocativas, acetilcolina, 5-hidroxitiriptamina y endotelina-1. Analizamos también el posible efecto que la diabetes pudiera tener sobre la función moduladora que ejerce el endotelio en estas respuestas, centrando el estudio en la acción del óxido nítrico y de los derivados del ácido arquaquidónico. Para ello utilizamos un modelo experimental de diabetes química en el conejo, empliando como agente diabetógeno el aloxano. Tras la inducción de la diabetes, los animales se mantienen estabulados durante seis semanas. Los experimentos se realizaron utilizando segmentos de arteria carótida procedente de conejos control y de conejos diabéticos. La metodología utilizada consiste en un modelo experimental in vitro, que registra los cambios de tensión isométrica que se producen en la pared del vaso. Los principales resultados obtenidos en el presente trabajo son los siguientes: Acetilcolina: el estado diabético disminuye la potencia relajante de la Ach en la arteria carótida común de conejo. Además, la diabetes alterna los mecanismso entoteliales que modulan esta respuesta vascular, provocando una mayor participación del óxidonítrico y una menor participación de un porstanoide vasoconstrictor. 5-Hidroxitriptamina: la diabetes aumenta la potencia contráctil de la 5-HT en la arteria carótida común de conejo, alterando también los mecanismos endoteliales que modulan dicha respuesta. Concretamente, la diabetes induce una mayor pariticpación del óxido nítrico y una manera participación de un prostanoide vasoconstrictor. Endotelina-1: también la diabetes aumenta la contracción inducida por la ET-1 en la arteria carótida común de conejo. En cuanto a los mecanismos endoteliales que modulan esta respuesta, la diabetes provoca una menor participación del óxido nítrico y una mayor participación del prostanoide vasoconstrictor.

Autor: FERNÁNDEZ CAPO JOSÉ .
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCOLA DE DOPTORATS I FORMACIÓ CONTINUADA.

Resumen: Aprovechando la aparición de una nueva tecnología (el suministrador automático de consumo alimentario) y motivados por la disminución del apetito (consumo diario de alimento) observado en la especie porcina durante los últimos años, decidimos explorar el comportamiento alimentario del cerdo para después relacionarlo con otros factores. Los objetivos se estudiaron fueron: la influencia de la luz sobre la conducta circadina alimentaria, las relaciones internas (correlaciones) entre los parámetros de comportamiento alimentario, el patrón alimentario de cada raza, al influencia del gen del halotano y la jerarquías social sore el comportamiento alimentario y la relación entre la conducta alimentaria y la productividad. Analizamos 205 cerdos machos enteros de cuatro razas distintas: 47 de raza Duroc, 60 de raza Landrace, 69 de raza Large White y 29 de raza Piétrain. Realizamos dos experimentos de 50 días, uno en otoño de 1995 y otro en la primavera de 1996. La alimentación fue ad libitum y el ciclo de iluminación fue el natural. El registro de la información se hizo por medio de los suministradores automáticos de consumo alimentario IVOG -station. Se permitió la competencia entre los cerdos en el momento de visitar el comedero. A partir de la información recogida por el suministrador se construyeron los parámetros alimentarios: consumo de alimento diario, consumo de alimento por visita, tiempo de ingestión diario, tiempo de ingestión por visita, número de visitas diarias y velocidad de ingestión diaria. El gen del ahalotano se identificó a partir de muestras de sangre de cada animal. El estudio de la jerarquís se realizó con la técnica de la filmación, únicamente en la raza Large White. La conducta circadiana del cerdo fue sensible a la luz. Los dos parámetros alimentarios de mayor correlación con el apetito fueron el tamaño y la velocidad. El consumo y la velocidad se relacionaron positivamente y el tiempo y la velocidad presentaron relación negativa. Existió relación positiva entre la duración y el tiempo diario, y entre el tamaño y el consumo diario. La frecuencia simpre presentó relación inversa con el tamaño y con la duración y estos dos parámetros se relacionaron entre sí de forma estrecha y positiva. El estudio del efecto raza sobre los parámetros alimentrios permitió describir el patrón alimentario de cada raza. El genotipo halotano recesivo y la jerrquía social afectaron el comportamiento alimentario de manera significativa. Los parámetros alimentarios que presentaron mayor relación con el crecimiento fueron, de más o menos, el consumo diario, el tamaño y la velocidad.

Autor: CARRASCO TRANCOSO JAVIER.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCOLA DE DOCTORAT I FORMACIÓ CONTINUADA (UAB).

Resumen: Las metalotioneínas (MTs) son unas proteínas de bajo peso molecular con capacidad para ligar metales pesados. En los roedores existen cuatro isoformas denominadas MT-I, -II, -III y IV. Las MT-I+II se expresan casi en todos los tejidos y son inducibles por varios tratamientos, entre ellos la inflamación y el estrés. Por el contrario, la MT-III y la MT-IV se localizan en el SNC y el epitelio escamoso estritificado respectivamente y no responden a inguno de los tratamientos que afectan a las MT-I+II. Se ha propuesto que las MT-I+II protegen frente a metales pesados y estrés oxidativo. La MT-III fue descrita como factor inhibidor del crecimiento neuronal implicado en la patología de la enfermedad de Alzheimer. Posteriormente se observó que tanto la MT-III como las MT-I+II se inducen durante enfermedades y lesiones del SNC. Se cree que las MTs podrían participar en la patogenia y/o protección durante enfermedades neurodegenerativas y/o lesiones, aunque no existen confirmación experimental acerca de este punto. El objetivo de esta tesis ha sido el estudio de la regulación de las MTs cerebrales y hepáticas, especialmente durante situaciones de inflamación, y de las posibles funciones de las MTs en el SNC. Hemos estudiado el papel que la IL-6 y el TNF-alfa juegan en la regulación de las MTs en situaciones de inflamación y de estrés. Para ello hemos utilizado animales con expresión sostenida de estas citoquinas en el SNC y animales con expresión sostenida de estas citoquinas en el SNC y animales Knokout (KO) para las mismas. La expresión crónica de la IL-6 en el SNC provoca inducción de la expresión de MT-I+II y MT-II. Por el contrario la deficiencia de IL-6 disminuye la inducción de las MT-I+II durante la inflamación pero no durante el estrés. A nivel hepático la deficiencia de IL-6 bloquea la inducción de las MT-I+II durante la inflamación y retarda la respuesta al estrés. Esots resultados demuestran que las IL-6 es un factor fundamental en el control de la regulación de las MT-I+II cerebrales y hepáticas durante la inflamación y que participa en el contro de la expresión de estas proteínas a nivel hepático durante el estrés. Los resultados obtenidos con el TNF-alfa en el SNC son muy similares a los comentados para la IL-6, por consiguiente tanto la IL-6 como el TNF-alfa son elementos clave en la regulación de las MT-I+II cerebrales, al menos durante la inflamación. Posteriormente nos propusimos estudiar el posible papel que las MT-I+II pudiesen jugar en situaciones de lesión cerebral (criolesión y administración i.p de ácido kaníco). Las MT-I+II se inducen en las zonas lesionadas mientras que la MT-III no. La IL-6 parece ser un factor clave en el control de la respuesta de las MT-I+II, al menos durante la criolesión. Las discrepancias en la regulación de las MT-I+II y la MT-III sugieren que estas isoformas tienen funciones diferentes, al menos en este contexto. Para estudiar la contribución de las MT-I+II en situaciones de lesión hemos valorado la respuesta a lesiones cerebrales en animales con deficiencia de MT-I+II. La deficiencia de MT-I+II provoca mayor astrocitosis y menor microgliosis, incremento de la muerte celular por apoptosis, mayor estrés oxidativo e incremento de las concentraciones locales de Zn. Estos resultados sugieren que las MT-I+II podrían intervenir en la defensa frente al daño tisular, probablemente gracias a su acción como antioxidantes celulares y su capacidad para ligar metales.

Autor: ARIAS QUINTELA BEGOÑA.
Año: 2000.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: En 1990, el ácido domoico fue identificado en mejillones cultivados e nla Isla Prince Edward (Canadá), como el contaminante tóxico responsable de un grave envenenamiento. Biscoe (1975) clasificó a esta toxina como un aminoácido tricarboxílico, análogo estructural al ácido glutámico.El síndrome ocasionado por el ácido domoico se denominó intoxicación amnésica, caracterizado por síntomas gastrointestinales y neurológicos. Los signos neurológicos provodados por esta toxina son comparables a los que se producen en un estado epiléptico, por lo que resulta especialmente interdante estudiar la posible interrelación entre esta neurotoxina y la neurotransmisión deopaminérgica. No obstante, hay pocos estudios que aborden, desde un punto de vista in vivo, la relación entre el ácido domoico y la liberación de la dopamina y sus metablotios, en el núcleo estriado de rata consciente y en libre movimiento. Por ello, el objetivo de esta tesis doctoral se centró en caracterizar el mecanismo de acción de la neurotroxina, ácido domoico, sobre los niveles estriatales de la dopamina en rata. La técnica de microdiálisis cerebral fue utilziada para la administración y recogida de muestras del líquido extracelular del núcleo estriado. Para la cuantificación de la dopamina y sus metabolitos ácidos en las muestras de dailizado, se optimizarón las características analíticas de la Cromatografía Líquida de Alta Eficacia (HPLC) unida a detección electroquímica. Además, se caracterizó que tipo de receptor glutamatérgico interactúa con el ácido domoico en las neuronas dopaminérgica mediante la aplicación de diversos tipos de antagnoistas glutamatérgicos. Y por último, se determinó el mecanismo de acción de esta toxina sobre la liberación estriatal de la dopamina mediante la administración de distintos fármacos dopaminérgicos.

Autor: ROPERO LARA ANA BELÉN.
Año: 2000.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En esta tesis se describe el receptor de estrógenos de membrana que media los efectos no genómicos del 17beta-estradiol sobre dos tipos celulares del islote de Langerhans pacreático de ratón: las células alfa, que son las encargadas de secretar glucagón, y las células beta, liberadoras de insulina en respuesta a niveles elevados de glucosa. Así mismo, se estudia el segundo mensajero implicado en el efecto del estrógeno sobre la célula beta pacreática. En un trabajo anterior a esta tesis, nuestro laboratorio había demostrado que el 17 beta-estradiol producía un aumento en la secreción de insulina inducida por glucosa en islotes de Langerhans pancreáticos de ratón. Este efecto era rápido y, a diferencia de los efectos clásicos a través de mecanismo genómicos producidos por las hormonas esteroideas a través de receptores intracelulares, estaba mediado por mecanismos no genómicos a través de la interacción del estrógeno con un sitio de unión en la membranas plasmática. En esta tesis se estudia la participación de dos de los segundos mensajeros más empleados por el estrógeno para producir efectos rápidos, AMPc y GMPc. Con la utilización de diversas técnicas, medida de la concentración de calcio intracelular, registros de "patch-clamp" y medida de nucleótidos cíclicos, se demuestra que es el GMPc el segundo mensajero que media el efecto del 17beta-estradiol sobre la célula beta pacreática. A continuación se caracteriza el receptor de estrógenos de membranas implicado y se demuestra que, lejos de tratarse de los mismos receptores de estrógenos intracelulares localizados en la membrana plasmática, se tiene que el responsable de ese efecto es un receptor distinto que es compartido por catecolestrógenos y por los neurotransmisores dopamina, adrenalina y noradrenalina. La participación de laguno de los receptores clásicos para estas tres catecolaminas se descarta con la utilización de ligandos específicos y se demuestra que es un receptores nuevo que había sido llamado receptor gamma-adrenérgico. El siguiente objetivo es determinar si el efecto del 17beta-estradiol es exclusivo de la célula beta pacreática o si además se produce en otro tipo celular del islote. Para ello se estudia el acoplamiento estímulo-secreción en la célula alfa pancreática localizada dentro del islote de Langerhans. De esta forma se ve que el estradiol produce la inhibición de las oscilaciones de la concentración de calcio intracelular en las células alfa, indicativo de una disminución en la secreción de glucagón. Al estudiar la naturaleza del receptor de membrana implicado, se ve que se trata del mismo presente en la célula beta. En esta tesis se demustra el efecto rápido, a través de mecanismos no genómicos, de concentraciones fisiológicas de 17 beta-estradiol en varias poblaciones celulares del islote de Langerhans pancreático. Este efecto es producido en ambos tipos celulares a través del mismo receptor de estrógenos de membrana. Si bien la naturaleza de este receptor no está muy estudiada, sí se puede decir que no es ninguno de los receptores de estrógenos clásicos intracelulares, alfa o beta, sino que se trata de un nuevo compartido por catecolestrógenos y catecolaminas.

Autor: MIRET CATALÁN SILVIA .
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGÍA.

Resumen: El objetivo de esta tesis fue estudiar el mecanismo por el que la ingesta de dietas que contienen aceites de pescado (rico en ácidos grasos poliinsaturados, AGPI, de tipo n-3) afecta al metabolismo del hierro e incrementa su absorción. Una primera hipótesis de trabajo consideró una posible interacción entre los AGPI y el hierro en el lumen intestinal. Sin embargo, los resultados obtenidos descartaron esta hipótesis. Una segunda hipótesis de trabajo consideró que el aumento de la abosrción de hieerro respondía a un incremento del estrés oxidativo derivado de la oxidación lipídica y a una reducción de los niveles de vitamina E tisulares. Para evaluar esta hipótesis, alimentamos a ratas con dietas ricas en aceite de oliva, maíz o pescado, ésta última con diferentes niveles de vitamina E, y observamos que se incrementaba la absorción en aquellas que recibieron la dieta rica en aceite de pescado. Los resultados indicaron que en estas ratas aumentaba el porcentaje de reticulocitos, que en el eritrocito disminuía la defensa antioxidante y que en plasma aumentaba la presencia de productos derivados de la oxidación lipídica. Además, en hígado y bazo las reservas de hierro se veían drásticamente disminuidas, así como incrementaba la actividad y expresión de Iron Regulatory Protein 1 (IRP1) y se alteraba la defensa antioxidante. De ello concluimos que el incremento de la absorción de hierro observado al administrar dietas ricas en aceite de pescado se debe a un incremento del estrés oxidativo que no es compensado por los niveles de vitamina E en los tejidos. La oxidación de los tejidos, en particular de la membrana eritrocitaria, conduce a su retirada de la circulación, lo que supone la formación de nuevos eritrocitos y la rápida movilización de las reservas de hierro en hígado y bazo, lo que implica, no sólo la activación a la IRP1, sino también un aumento de la absorción de hierro.

Autor: FALCONI GUERRA ATILIO LUIGI.
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA-UNIVERSIDAD DE SALAMANCA.

Resumen: Los resultados de esta tesis doctoral se han obtenido a partir de 34 experimentos llevados a cabo con ratas pigmentadas (Rattus norvergicus) en los cuales hemos realizado registros extracelulares de unidades neuronales únicas tras la estimulación con tonos puros. Hemos registrado un total de 74 neuronas de las cuales, 24 perteneces al aNRT33 al CGM y las restantes 17 no fue posible determinar el sitio al que pertenecian y las hemos desechado del estudio a pesar de responder a estímulos sonoros. Analizamos en detalle los diferentes aspectos que caracterizan a estas neuronas, a saber: latencias, histogramas peri-estiímulo, funciones intensidad-respuesta, mapas de frecuencia, interacciones biauriculares y la presencia de oscilaciones.

Autor: PERUZZO LEISCHNER BRUNO FORTUNATO.
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA. UNIV. SALAMANCA.

Resumen: Se ha realizado un estudio sobre los tanicitos beta-1 y beta-2 de la eminencia media de la rata con el objeto de analizar el sustrato morfológico de una posible secreción tanicitaria, la capacidad de transporte de estas células y su participación en las barreras existentes en el hipotálamo mediobasal. Para ello se utilizó la microscopía electrónica convencional, la histoquímica de lectinas a nivel óptico y ultraestructural, la administración de trazadores en el ventrículo lateral y la cisterna magna, el cultivo organotípico de eminencia media en presencia de WGA, así como la detección inmunocitoquímica del transportador de glucosa Glut-I. La histoquímica con las lectinas demuestra que las terminaciones basales de todos los tanicitos contienen formaciones tubulares y granulares que son positivas a WGA y Con-A y negativas a LFA. Las estructuras citadas y el material que contienen pueden representar el sustrato de una secreción tanicitaria. Por otro lado, el gran número de inclusiones lipídicas acumuladas en los tanicitos beta-1 y su relación con las cisternas de retículo liso apoyan la idea de que estos tanicitos secretan compuestos lipídicos. En cuanto a la capacidad de transporte de los tanicitos beta, la administración por vía ventricular de las lectinas WGA y LFA y la ferritina catiónica demuestra que existen diferencias en la dinámica del transporte por los tanicitos ya que, en los beta-1, las lectinas persisten durante más tiempo en su superficie apical y en sus terminaciones basales. Se postula que las diferencias en el transporte son el reflejo de diferencias funcionales entre los dos tipos de tanicitos beta. Los resultados obtenidos indican que, tanto los tanicitos beta-1 como los beta-2, son capaces de absorber y transportar sustancias desde el ventrículo hacia los espacios perivasculares de los vastos porta, así como de secretar desde sus pies terminales hacia estos espacios: por el contrario, los tanicitos beta carecen de la propiedad de absorber y transportar desde los espacios perivasculares citados hacia el líquido cefalorraquídeo ventricular. Además se ha comprobado que, en cultivo, los tanicitos no son capaces de absorber ni transportar la lectina. La ausencia de inervación en este modelo experimental puede ser responsable de la inhibición del transporte. El Glut-I marca exclusivamente los tanicitos beta-1, mientras que los beta-2 son negativos. A nivel ultraestructural el Glut-I se localiza sólo en la membrana plasmática de los tanicitos citados. La presencia de Glut-I en los tanicitos beta-1 se interpreta como un argumento más a favor del papel de barrera que cumplen estos tanicitos separando, a cada lado, los territorios de la eminencia media y el núcleo arcuato.

Autor: FELIP EDO ALICIA.
Año: 1999.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS - UNIVERSITAT DE VALENCIA.

Resumen: En esta tesis se desarrolló la metodología para la inducción de la triploidía y la ginogénesis en la lubina con la finalidad de estudiar el efecto de estas manipulaciones sobre el crecimiento, la fisiología reproductiva y la proporción de sexos en la lubina. Para la producción de triploides se utilizó un choque frío de 0ºC, aplicado a los 5 min. Después de la fetilización durante 10m. Ello dio lugar a una tasa de triploidización del 95-100% con una supervivencia del 70-80% respecto a los controles. A pesar de la esterilidad de las lubinas triploides, la triploidía no favoreció el crecimiento en peso de los animales, ni aún cuando éste se comparó con el de los peces diploides en pleno período de reproducción (meses de invierno). Ello surgió que el menor crecimiento de esta especie durante la época de puesta depende más de las bajas temperaturas que del coste energético asociado a la reproducción. La triploidia afectó de forma diferencial el desarrollo gonadal según el sexo. Asi, los ovarios en las hembras triploides eran rudimentarios mientras que el desarrollo testicular de los machos triploides fue similar al de los diploides. Sin embargo, en comparación a los controles, los machos triploides no produjeron esperma. Por tanto, puesto que bajo condiciones de cultivo el porcentaje de machos diploides y triploides fue muy elevada, la esterilidad de los triploides puede tener obvias aplicaciones prácticas para los cultivos marinos de esta especie. En cuanto a la inducción de la ginogénesis, ésta se llevó a término mediante la fertilización de los huevos con esperma cuyo ADN había sido inactivado con anterioridad usando radiación UV. La diploidía se restauró en los huevos mediante la prevención de la meiosis II con tratamientos similares a los utilizados en la inducción de la triploidía. Dicho tratamiento dio lugar a un 95% de meioginogenéticos con una supervivencia del 30-35% respecto a controles. El análisis de marcadores genéticos (AFLPs) corroboró el origen genético materno en estos animales. El porcentaje de machos ginogenéticos fue similar al de los controles (1o.1o). Ello evidenció que la hembra no era el sexo homogamético en la lubina.