GENETICA ANIMAL, 2

Autor: LLAMBI DELLACASA M. SILVIA.
Año: 2001.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: En la presente Tesis efectuamos el estudio de: A,- Fragilidad cromosómica en hembras de la raza bovina Holando-Uruguayo (Holstein-Friesian) utilizando afidicolina como inductor químico. Se identificaron mediante bandeo RBG los sitios de fractura localizados en autosomas y en el cromosoma sexual X de placas metafásicas en cultivos linfocitarios. Particularmente centralizamos el estudio en el cromosoma sexual X por los antecedentes de investigaciones previas sobre la relación entre la fragilidad de este cromosoma con problemas reproductivos y reordenamientos a nivel evolutivo. En este cromosoma identificamos 5 sitios de fracturas (tres en el brazo q y dos en el brazo p). Se utilizaron técnicas de citogenética-molecular (microdisección cromosómica-DOP-PCR, PRINS, FISH, Southern-blot) con el objetivo de conocer características moleculares de los sitios fragiles del X bovino. Se tomó como modelo al gen FMR-1 I humano del FRAXA evidenciándose homologías del 87-89% en las secuencias estudiadas. Se identificó la presencia del triplete CGG en las secuencias homologas al FMR-1 sin evidencia de expansión. La microdisección cromosómica de región de fragilidad Xq3.1-3.4 en bovinos, el PRINS con cebadores del FRAXA y el FISH con sonda CGG permitieron conocer aspectos del mapeo génico comparativo y estudio de regiones pericentroméricas y ricas en CG en esta especie. B,- Se analizó una muestra poblacional de hembras y machos con el objetivo de estudiar por PCR-RFLP la presencia de alelos mutantes para las enfermedades hereditarias BLAD, DUMPs y citrulinemia bovina. Para la enfermedad BLAD se identificó la presencias de animales portadores con una frecuencia del gen mutante de q=0.029. Para el DUMPs y citrulinemia no se identificaron animales portadores. Se discuten los resultados obtenidos y las ventajas de esta técnica para el control de enfermedades hereditarias.

Autor: PÉREZ CABAL M. ÁNGELES.
Año: 2001.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: E.T.S.I. AGRÓNOMOS.

Resumen: A partir de los datos históricos de control lechero oficial del País Vasco y Navarra, de los datos de calificación morfológica y de los datos económicos se calcula la rentabilidad por vaca y año, realizándose un análisis genético del carácter rentabilidad y se estudian las relaciones con caracteres productivos y funcionales. La heredabilidad de la rentabilidad obtenida fue de 0,25. Los caracteres de producción, kilos de leche, kilos de grasa y kilos de proteína, obtuvieron correlaciones genéticas con el carácter rentabilidad de 0,79, 0,83 y 0,85 respectivamente. La correlación genética entre rentabilidad y peso adulto resulto ser de 0,25. Casi todos los caracteres de tipo obtuvieron correlacionados genéticas positivas con la rentabilidad excepto el tamaño, la profundidad corporal y la profundidad de la ubre que resultaron negativas. Se estudió la capacidad de predicción de la rentabilidad real utilizando un análisis multicarácter en el que se incorpora el carácter rentabilidad y diversos caracteres de producción y tipo o utilizando diversos índices de selección (ICO, MEG y MEG modificado). Todos los pesos económicos obtenidos a partir de la función de beneficio definida para establecer los índices de selección MEG y MEG modificado, resultaron ser positivos, excepto el peso adulto y el intervalo entre partos. El carácter más importante fue los kilos de proteína, con un peso económico de 2,74 euros/kg por vaca y año, seguido por los kilos de grasa y el peso adulto (-0,48 euros/kg por vaca y año). A partir de estos pesos económicos y de las cov-varianzas entre los caracteres se definieron los índices MEG y MEG2002. En el índice MEG, el 66% de la importancia correspondió a la producción y un 34% a la longevidad, obteniendo una correlación con el objetivo de selección de 0,37. El nuevo índice MEG2002 quedó compuesto por un 52% de producción, el 29% de longevidad funcional, el 7% de peso adulto y el 12% de fertilidad. Este índice explica el 40% de la variabilidad del mérito genético total, consiguiendo una mejora del 3% respecto al MEG. Entre los índicesde selección, el MEG2002 es el que mejor predijo la rentabilidad con una correlación de 0,51, superando al ICO y al MEG, cuyas correlaciones fueron de 0,49 y 0,50, respectivamente. La predicción del valor genético de rentabilidad obtuvo una correlación con la rentabilidad igual a la obtenida con el ICO.

Autor: ALTET SANAHUJES LAURA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Autor: BEJAR ALVARADO JULIA.
Año: 2000.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La dorada es la especie de peces marinos que más se cultiva en los países mediterráneos. Por sus características, es una especie muy atractiva a la hora de aplicarle técnicas de Ingeniería Genética. Por eso el objetivo de este trabajo consitió en desarrollar sistemas celulares para la manipulación genética de esta especie. Se ha obtenido una línea celular de tipo fibroblastoide a partir de aleta caudal de dorada, a la que se denominó SAF-1; esta linea seha caracterizado en detalle y constituye la primera línea celular de esta especie. Por sus características de estabilidad, euploidía y fácil manipulación es una herramienta muy útil en este y otros campos de la biología de la dorada. Se ha obtenido también una línea de células "ES" de esta especie, denominada SaBE-1c, la cual ha demostrado invitro poseer todas las características de este tipo de células, tales como actividad fosfatasa alcalina y telomerasa, auplidía, capacidad de diferenciación a distintos tipos celulares o formación de cuerpos embrioideos. Así mismo, se ha demostrado su capacidad de colonizar distintos linajes celulares en embriones quimera, una vez que la técnica de inyección de células se ha puesto a punto. Por tanto es una línea de células totipotentes de dorada, es decir, una herramienta muy útil en el diseño de estrategias para la manipulación genética de esta especie.

Autor: BELLO PIGEM NATALIA.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCOLA DOCTORAT I FORMACIO CONTINUADA.

Resumen: La cría de avestruces en España se viene desarrollando desde hace algo más de 10 años. Esta tesis trata del desarrollo de marcadores de ADN de utilidad en la cría de estos animales. La tesis desarrolla 5 puntos: Obtención de ADN a partir de plumas: La utilización de plumas para la obtención de ADN facilita la recogida de muestras por parte de los criadores, como alternativa a la sangre. Se realizó una extracción mediante lisis celular, purificación con fenol y cloroformo y precipitación con sales y etanol. El ADN obtenido es de gran calidad y en cantidad mayor que el obtenido en otros trabajos publicados. Además se optimizó para cualquier tamaño de pluma. Este trabajo ha sido aceptado en Journal of Veterinary Diagnostic Investigation y actualmente esta en prensa. Identificación de un marcador de sexado: Para poder determinar el sexo de los avestruces desde cualquier edad y con total fiabilidad. La aproximacion genetica se baso en el rastreo al azar con marcadores polimórficos (RAPDs:Random Amplified Polymorphic DNA) y conversión en un marcador específico, que permite sexar a los avestruces mediante PCR. Se optimizó una PCR multiple con un control positivo de ampliaacion para todos los animales. Este ha sido el primer marcador de sexado por PCR en avestruces y el trabajo se publico en Molecular Ecology(1999)8,667-669. Identificación individual, test de paternidad y control de genealogías: Para ello se optimizó la amplificación,mediante dos PCR multiples de un set de ocho marcadores tipos microsatelite. Estos marcadores son muy polimórficos y presentan herencia mendeliana y codominante. Se analizaron 152 animales y se obtuvieron datos de numero de alelos, sus frecuencias, e indices de polimorfismo PIC(polimorfismo del marcador), PE(probabilidad de exclusión) y PS(probabilidad de similitud). Los resultados demuestran que el set de ocho marcadores es suficiente para esos fines y que el nivel de polimorfismo genético en la población estudiada es equivalente a la de las especies silvestres. Identificacion genetica de subespecies: Existen cuatro subespecies de avestruz: S. C.camelus, S.c.massaicus, S.c.molybdophanes y S.c. Australis, clasificadas por criterios morfológicos. A partir de ADN genomico de individuos en pureza se adoptaron dos estrategias. Por un lado el análisis por microsatélites permitió identificar alelos nuevos y,por otro lado, el calculo de las frencuencias alélicas fue útil para estimar sus distancias genéticas y construir un arbol filogénetico, aunque el bajo numero de especimenes analizados para alguna subespecie supuso que los resultados no sean estadisticamente significativos. Identificacion de SNPs en el gen de la hormona del crecimiento:Mediante la aproximacióndel diseño de cebadores sobre regiones del gen muy conservadas evolutivamente se indentificó un fragmento entre el exon 2 y 3 de este gen.En el estudio de su polimorfismo se detectaron 2 SNPs(single nucleotide polymorphism) presentes unicamente en los dos individuos puros de S.c. Molybophanes, lo que los convierte en potenciales marcadores de subespecie.

Autor: SANZ BALL-LLOSERA NURIA.
Año: 2000.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAT DE CIENCIES, UNIVERSITAT DE GIRONA.

Resumen: El estudio de la diversidad y la diferenciacion genetica de las poblaciones de trucha comun (Salmo truffa L.) en la Peninsula Iberica ha confirmado la elevada observada en trabajos anteriores y la divergencia, ya descrita, entre las poblaciones de las vertiente atlantica y la mediterranea. Pero los resultados obtenidos nos permiten observar patrones de estructura poblacional tanto en las poblaciones atlanticas como en las mediterraneas. En la vertiente atlantica se observa un marcado patron hidrografico en la distribucion de la diferenciacion genetica, que claramente contrasta con la distribucion de esta diferenciacion entre linajes durante las expansiones de las poblaciones en los periodos pleniglaciales y una fuerte divergencia local consecuencia de su marginalidad y aislamiento en los periodos interglaciales. La conservacion de esta diferenciacion e individualidad descrita en las poblaciones de trucha de la peninsula, esta seriamente comprometida por las repoblaciones continuadas de los rios con ejemplares exogenos de origen norte europeo. La substitucion de los genomas autoctonos debida a la introduccion de genes extraños provoca una erosion de los patrimonios geneticos nativos y una homogeneizacion de las poblaciones, destruyendo los patrones de diferenciacion existentes. Asi mismo, nuestros resultados demuestran que las consecuencias de las repoblaciones no son siempre iguales. En concreto, se constata un fracaso de las repoblaciiones en rios intensamente repoblados sometidos a pesca intensiva, que contrasta con una gran erosion de las poblaciones cuando las repoblaciones se efectuan sobre areas protegidas y sin presion pesquera. Esto sugiere que multiples factores como la gestion de los rios posterior a las repoblaciones, el estado de las poblaciones o las condiciones del habitat son determinantes de la introduccion efectiva de los ejemplares liberados,hecho que dificulta la prediccion sobre actuaciones particulares. A pesar de esta introgresion de genes exogenos detectada en una gran numero de poblaciones analizadas los genes nativos predominan en casi todos los rios de la Peninsula. La conservacion de esta elevada riqueza genetica que aun mantienen las poblaciones de trucha de la Peninsula Iberica debe ser el objetivo final de cualquier programa de gestion. Por eso, defendemos una gestion basada en el propio rio, mediante una pesca sostenible por la reproduccion natural de las poblaciones salvajes, acompañada de una mejora y recuperacion de habitats adecuados para la trucha, evitando, por encima de todo, la introducion de ejemplares exogenos en los rios, debido a los efectos perjudiciales e incontrolables que conlleva este proceso.

Autor: GENERO ENRIQUE RUBEN.
Año: 2000.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONÓMOS.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: En la República Argentina existe una raza de ganado que se puede denominar autóctona, el denominado ganado bovino Criollo Argentino (Bos taurus, L.). Dentro de esta raza hay un grupo poblacional reducido, asilvestrado, aislado y que son los únicos descendientes del ya extinto bovino Criollo Pampeano, al cual denominamos bovino Criollo Argentino Patagónico. Con objeto de conocer mejor las características de este ganado, nos propusimos, como primer paso, el estudio citogenético sistemático de esta población, por mantener a nuestro entender las características raciales originales. Así se han analizado un total de 52 animales, de los cuales, 32 fueron hembras y 20 machos. Para este estudio se aplicaron las técnicas habituales en citogenética animal, pero además se han estudiado los bandeos obtenido con enzimas de restricción, evaluándose, al mismo tiempo, los resultados obtenidos en su uso en el ganado vacuno. En este sentido algunas enzimas usadas producen un bandeo diferencial entre los cromosomas, mientras otras presentan una actividad muy variable. Entre las primeras se encuentran la enzima de restricción Hae III, que produjo un patrón de bandas similar al obtenido con las técnicas clásicas bandas GTG y entre las segundas podemos citar a Alu I, con una actividad muy diferente. No se han encontrado animales aportadores de cambios cromosómicos tanto numéricos como estructurales, particularmente la translocación Robertsoniana 1/29. Sí se ha observado, por primera vez en ésta raza, un polimorfismo en el cromosoma Y de dos toros, apareciendo mucho mayor y más submetacéntrico.

Autor: TRUCCO M. INES.
Año: 2000.
Universidad: VIGO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Los mejillones de la costa atlantica de Sudamérica han sido identificados como diferentes especies tales como Mytilus edulis, M.platensis, y M.chilensis o como subespecies de M.edulis basados, principalmente, en ragos morfologicos. Hasta la fecha, el status taxonómico de los mejillones atlánticos sudamericanos sigue siendo objeto de controversia y estructura genetica poblacional es desconocida. Se estudiaron rutinariamente treinta loci enzimaticos y cinco marcadores de DNA, 4 nucleares( Glu-8, Fp-1, Its y Mac-1)y uno mitocondrial (CoIII) en 11 muestras de mejillón a lo largo de la coste atlántica de Sudamerica y en muestras puras de M.edulis, M.galloprovincialis y M.trossulus para su comparación. Los marcadores de DNA, las frecuencias alélicas para los loci diagnósticos (Est-D, Lap-1,Mpi y Odh) y los analisis de ordenación y agrupamiento a partir de las distancias geneticas mostraron que los mejillones de la costa atlántica de Sudamérica son próximos a M.edulis del hemisferio norte con un valor de distancia genetica tipica de poblacionies conespecíficas (D=0.07+- 0.02). Sin embargo, también mostraron frecuencias alélicas diferentes y caracteristicas en 10 loci, incluyendo loci diagnosticos como Gpi, Lap-2 y Pgm-2. Ademas, los analisis filogeneticos mostraron que conforman un grupo monofilético y que comparte un acestro en común con M.edulis. Asi, los mejillones de la costa atlantica de Sudamérica pueden considerarse como pertenecientes a Mytilus edulis, pero diferentes del taxón del hemisferio norte y, consecuentemente, designarse como Mytilus edulis platensis. Por otro lado, los análisis de agrupamiento y ordenación mostraron que los mejillones atlánticos sudamericanos no poseen una distribución homogénea y que existen al menos de los grupos definidos en M.edulis platensis. Un grupo que incluye las muestras nórdicas uruguayas y la argentina mas austral, y otro grupo formado por las muestras centrales argentinas. Se detectó una abrupta discontinuidad en las frecuencias alélicas de 7 loci alozímicos ( y en menor grado en 4 loci mas) asi como en dos marcadores de DNA (Glu-5 y Fp-1) entre el grupo nórdico y central. Esta discontinuidad parece estar asociada con la presencia del Rio de la Plata, el cual actuaría como barrera oceanografica al flujo génico entre ambos grupos. Una discontinuidad similar en alozimas y marcadores de DNA se observó entre el grupo central argentino y la muestra más meridional, sin embargo la naturaleza de esta diferenciacion podria resolverse con un muestreo más amplio del sector meridional.

Autor: PUJOLAR CASTANYER JOSEP MARTÍ.
Año: 2000.
Universidad: GIRONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAT DE CIENCIES.

Resumen: Se ha realizado la caracterización genética del atún rojo (Thunnus thynnus), atún blanco (Thunnus alalunga), bonito (Sarda sarda) y pez espada (Xiphias gladius) utilizando electroforesis de proteínas. Para cada una de las especies estudiadas se han descrito los Zimogramas obtenidos y su interpretación genética. Los valores de polimorfismo y heterzogosidad observados en las cuatro especies se encuentran dentro del rango descrito en especies marinas y revelan una variabilidad genética moderada en atún rojo y bonito y una variación genética inferior en atún blanco y pez espada. En el atún rojo, la baja diferenciación encontrada al comparar 16 muestras mediterráneas y una muestra capturada en el golfo de Vizcaya sugiere la existencia de un único grupo de individuos en el área estudiada. Por otro lado, se han hallado diferencias significativas al comparar estas muestras con una muestra obtenida en el Atlántico occidental, sugiriendo la existencia de dos grupos de individuos en base a la distribución heterogénea de las frecuencias alélicas de los loci G6PDH* y SOD-1*. El nivel de subestructuración encontrado dentro del Atlántico se relaciona con la existencia de dos áreas de puesta separadas para los grupos del Mediterráneo/Vizcaya occidental y un flujo génico reducido entre las áreas. En el atún blanco, la baja diferenciación encontrada al analizar cuatro muestras mediterráneas sugiere la existencia de un único grupo de indiviudos en el área estudiada.La homogeneidad observada al comparar las muestras mediterráneas con una muestra capturada en las Islas Azores supone la existencia de un importante flujo géncio entre el Mediterráneo y el Atlántico. El nivel de subestructuración más alto de nuestro estudio se ha observado en el bonito. La heterogeneidad encontrada al analizar tres áreas mediterráneas sugiere la existencia de dos grupos de individuos, un primer grupo que incluiría el mar Ligur y el mar Jónico y un segundo grupo que incluiría el mar Egeo. La diferenciación encontrada se relaciona con un flujo génico reducido entre las áreas y con la existencia de áreas de puesta separadas para los dos grupos. En el pez espada, el análisis de un total de 10 muestras mediterráneas ha indicado un cierto grado de subestructuración entre las muestras, al hallar pequeñas diferencias entre las áreas del Medietrráneo oriental y occidental. La existencia de una única área de puesta en el Mediterráneo para el pez espada y la fidelidad al área de puesta exhibida por esta especie explicaría porqué la diferenciación genética encontrada ha sido baja. La homogeneidad encontrada entre las muestras del Mediterráneo occidental y una muestra capturada en el golfo de Cádiz sugiere que el estrecho de gibraltar no es una barrera para el desplazamiento de la especie y que el límite entre los grupos del Mediterráneo y del Atlántico tiene lugar en aguas más oceánicas. Los distintos patrones de diferenciación observados podrían estar relacionados con el comportamiento migratorio diferencial de cada una de las especies. La capacidad migratoria limitada del bonito, motivada por su menor tamaño corporal y ausencia de endotermia, supone una restricción al flujo génico dentro del Mediterráneo. En cambio, la mayor capacidad migratoria de las otras tres especies supone un flujo más importante dentro del Mediterráneo para el atún rojo, atún blanco y pez espada.

Autor: TAULER VAILLET JORDI.
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAT DE BIOLOGIA, U. DE BARCELONA.

Autor: HERRANZ CARNERO MICHEL.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS. BIOLOGIA.

Resumen: El análisis alelotípico de una muestra significativa de linfomas tímicos inducidos mediante radiación gamma en híbridos de ratón, nos ha permitido identificar tres nuevas regiones candidatas a contener genes supresores: dos en el cromosoma 4(TLSR 2 y 3) y una en el cromosoma 19(TLSR8). El gen p73 puede ser el gen candidato en la region TLSR3. El análisis funcional de este gen demostró la ausencia de expresión en la practica totalidad de los linfomas analizados, aunque una pequeña fracción de los mismos tenian sobre-expresada una variante (DeltaN) de efecto posiblemente anti-apoptótico. Pten y Cd95/Fas podrían ser los genes candidatos de la región TLSR8 al aparecer inactivados en una fracción muy significativa de los tumores. La perdida simultánea de expresión de los genes Cd95/Fas, Pten y del proto-oncogen Jak2, situado entre los mismos, en más del 70% de los tumores, sugiere la existencia de un mecanismo de control regional de tipo epigenético en el cromosoma 19 de raton. La activación de c-myc parece constituir el estímulo oncogénico más importante en este tipo de linfomas, se manifiesta por la sobre-expresión de su proteina, y sucede mediante un mecanismo de amplificación de dosis génica. El análisis global de los resultados sugiere un modelo donde el estimulo oncogénico de c-myc es canalizado hacia proliferación celular al abortarse todas las rutas apoptóticas esenciales.

Autor: EXTAVOUR CASSANDRA.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGIA MOLECULAR "SEVERO OCHOA".

Resumen: La sincronía del ciclo celular de las células germinales de las hembras de Drosophila melanogaster es heterogénea a lo largo del Desarrollo. Durante la migración embionaria, están sincronizadas en G2. A partir de la eclosión de la larva, proliferan motóticamente hasta llegar al número final de células por gónada, cuando quedan mitóticamente quiescentes y sincronizadas en G2, hasta el comienzo de la oogénesis. Clones de células germinales Çhomocigóticas silvestres en un fondo genético heterocigótico ovoD1 tienen una ventaja proliferativa sobre las células vecinas heterocigóticas. El alelo ovoD1 en heterocigosis no afecta a la identidad de las células germinales en cuanto a las expresiones de los genes vasa, hu-li-tai-shao, BicD y bam. En fondos mutantes heterocigóticos para deficiencias recesivas en adultos, clones homocigóticos silvestres contribuyen preferentemente a las gónadas. Cambios en la dosis de los muchos genes requeridos por la línea germinal son detectados por las células germinales, resultando en fenotipos dominantes de alelos que son recesivos a nivel de individuo y conduciendo a la selección celular. Como muchos de los genes utilizados en la línea germinal también son requeridos para la morfogénesis somática, su selección en la línea germinal es simultáneamente una selección para los mismos genes en el soma. Esta selección es anterior a la selección natural de los organismos, ya que tiene lugar precigóticamente.

Autor: GARCIA POZO SONIA GEMA.
Año: 1999.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Dada la importancia económica de la dorada así como los avances en manipulación genética logrados en otras especies de peces, tanto modelo como comerciales, el objetivo global de este trabajo consiste en analizar la respuesta de esta especie marina a la introducción de ADN exógeno, para en una etapa posterior utilizar la técnica de la transgenia en la mejora de esta especie. De los resultados obtenidos y la posterior discusión proponemos la microinyección frente a la electroporación como método más adecuado para introducir ADN en embriones de dorada en condiciones de fecundación natural. Por otro lado, el destino de los cuatro tipos de plásmidos inyectados fue simila en todos ellos, en cuanto a configuración y persistencia; y el inicio de la expresión ocurió alrededor de las 7-8 horas de desarrollo marcando la fase de Transición de Media Blástula. En cuanto a las secuencias reguladoras se demostró una potencia similar entre promotores de origen vírico y el promotor de origen psicícola y respecto a los genes marcadores se confirmó la mayor sensibilidad del CAT, la importancia del LazZ como marcador espacial, y la validez de la GFP como marcador in vivo. Por tanto este trabajo demuestra la utilidad de la dorada para analizar la expresión de genes relacionados con su producción en acuicultura.

Autor: CEBRIA SANCHEZ FRANCESC.
Año: 1999.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FAC. BIOLOGIA.

Resumen: Las planarias de agua dulce (Platelmintos) son organismos sencillos, acelomados, triblásticos y de simetria bilateral. Debido a su gran capacidad regenerativa las planarias han sido largamente utilizadas para el estudio de este aspecto del desarrollo. A lo largo de su historia, el estudio de la regeneración de planaria ha planteado 3 cuestiones fundamentales: cual es el origen de las celulas del blastema? Como se diferencian los diferentes tipos celulares dentro del blastema ?, y , como se restituye el patrón corporal?. Aunque se han realizado numerosos trabajos a nivel ultraestructural, hace relativamente poco tiempo que sehan aplicado aproximaciones claramente moleculares para resolver este problema biológico. Por tanto, hay pocos estudios que analizen la diferenciacion celular de tipos individuales utilizando marcadores moleculares especificos. Con el objetivo de suplir esta falta de información hemos estudiado la diferenciacion muscular durante la regeneración y renovación celular de la musculatura corporal y faríngea utilizando marcadores moleculares especificos: 1) TMUS-13, un anticuerpo monoclonal previamente aislado en nuestro grupo y especifico de fibras musculares y miocitos en diferenciación; 2)Gtmch, un gen de la cadena pesada de la miosina especifico de la musculatura faringea; 3)Smmhc, un gen de la cadena pesada de la miosina especifico de la musculatura corporal, y 4) Smhlh-1, un homólogo en planaria de la familia MyoD de factores de transcripción miogénicos. Las planarias tienen una musculatura corporal compleja constituida por 4 capas de fibras musculares subepidérmicas (una capa externa de fibras circulares, una capa de fibras longitudinales, una capa de fibras diagonales, y finalmente, una capa interna de fibras longitudinales). Este patrón muscular complejo se encuentra en las superficies dorsal y ventral, las cuales están concectadas por numerosas fibras dorsoventrales. Durante la regeneración, y en el primer dia, los neoblastos (celulas indiferenciadas y totipotentes de planaria) quedan determinadas hacia el linaje miogénico en la region del postblastema fuera del blastema, ya que expresan el gen de la cadena pesada de la miosina. Este mRNA, sin embargo, no se traduce a proteina en la mayoria de estos miocitos que, a medida que la regeneracion avanza, migran al interior del blastema donde la proteina de la miosina sera sintetizada y donde se diferenciaran en nuevas fibras musculares necesarias para reestablecer el patron muscular, probablemente a través de una bastida muscular inicial. Por otro lado, unos pocos miocitos no migran al blastemasino que se diferencian en al postblastema intercalándose entre fibras musculares preexistentes. Estos resultados indican que la determinación y diferenciacion muscular están separadas temporal y espacialmente durante la regeneración de la musculatura corporal. Esta separación ha sido tambien encontrada durante la regeneración de la musculatura faringea. Finalmente, la renovación de las celulas musculares de la faringe tiene lugar a través de una intercalación de las nuevas celulas musculares por todo este organo.

Autor: SCHIFFERLI RIQUELME CARLOS ANTONIO.
Año: 1999.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA .
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: Se estudió la citogenética y la Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Bovina, en toros pertenecientes a la Cooperativa de Inseminación Artificial del Venado Tuerto (CIAVT) en Argentina y en toros de Movera. España. Se estudiaron los cromosomas de 25 Holstein argentino y 1 Polled Hereford por técnicas manuales y de análisis digital de imágenes, cuya eficiencia se compara. De ésta población dos toros (7,49%) presentaron alteraciones cromosómicas, una de tipo numérica correspondiente a un toro con quimerismo linfocitario 30,XY/XX, con un 2,5% de mitosis linfocitarias con cariotipo 60,XX. Analizadas las tasas de no retorno al estro 60/90 días y el porcentaje de eyaculados descartados frescos y postdecongelados del toro quimérico, se estableció que el rendimiento de dicho reproductor estaba disminuído respecto a los valores medios de la cooperativa de inseminación artificial. De toro presentó una fractura de cromátida en un cromosoma del par nº 12 en un 3% de las mitosis analizadas. La tasa de fertilidad en primeros servicios de inseminación artificial sobre vacas, de este toro coincidió con el promedio general del centro de inseminación, aunque el porcentaje de eyaculados descartados en fresco y posdecongelados fueron mayores a los valores promedios del centro de inseminación artificial. Por las razones señaladas, la CIAVT sacrificó y eliminó el semen congelado ambos toros. Los resultados obtenidos demuestran que los estudios citogenéticos en reproductores son de gran utilidad para la detección y eventual eliminación de portadores de anomalías cromosómicas que se transmiten a la descendencia y/o que afecten su rendimiento reproductivo. Para estudiar la Deficiencia de Adhesión Leucocitaria Bovina (BLAD se amplificó la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) un fragmento de 159 pares de bases, del gen secuenciado BOVCD18A o ITG (2, se concluye que no existían toros portadores o enfermos de la BLAD en la población de toros de la CIAVT, Argentina y en los toros analizados de Movera, España. Asimismo, se estudió el marcador microsatélite BM2113 recomendado por la ISAG (International Society of Animal Genetics) citado en el proyecto "Cattle Diversity Dabasei" del programa BovMap de la Comunidad Europea (1999), para determinar un test de paternidad en 39 bovinos de la raza Criolla Argentina (8 toros y 31 hembras). Se obtuvo un 79,92% de Contenido de Información Polimórfica (PIC) para éste único microsatélite, por lo que de realizar el estudio con los otros 2 microsatélites BM1824 y SPS115 que recomienda el ISAG, en el proyecto Cattle Diversity Database (1999) para disponer de un test de paternidad cercano al 100% para la raza Criolla, lo que sería muy útil para el Libro Genealógico de la raza.

Autor: RUA TARIN M. PILAR DE LA .
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: El objetivo principal del trabajo es caracterizar al nivel molecular la variabilidad poblacional de la abeja doméstica, Apis mellifera Linneo, 1758, corroborando de esta manera varias hipótesis de trabajo. Una de ellas se refiere a la estructura poblacional de las abejas en la Región de Murcia y al efecto racial que se deriva de la importación de reinas y del proceso de la trashumancia de las colmenas. Otra hipótesis se refiere a la singularidad de las abejas de las Islas Canarias, cuyos antecesores se sitúan en el norte de frica (poblamiento antiguo de las islas por causas naturales) o en la Península Ibérica (poblamiento antrópico a partir del siglo XVI). Se trata de determinar si existe una raza peculiar de estas islas y sus posibles ancestros. Como población de referencia a efectos comparativos se incluye en el estudio una de Tetuán, que presenta las características propias de las razas norteafricanas. El planteamiento del trabajo comprende el estudio de los haplotipos del ADNmt, mediante secuenciación de la región intergénica entre el gen del ARNtleu y el de la citocromo oxidasa II (COII). También se estudia el polimorfismo de dicha región intergénica, puesto de manifiesto al tratarla con la enzima de restricción Dral. Otra aproximación consiste en estudiar la variabilidad de los numerosos alelos que presentan ocho loci de microsatélites del genoma nuclear, ya que proporcionan una detallada información sobre la estructura poblacional. Estas poblaciones han mostrado distintos niveles de variabilidad genética en el ADNmt. En total se han encontrado 7 haplotipos, algunos de ellos restringidos a una de las regiones muestreadas. Un alto porcentaje de las muestras de Murcia pertenece al linaje de subespecies y razas africanas (linaje A: haplotipos A2, 88'8% y A1, 8'8%) y un tercer haplotipo pertenece al linaje de abejas de Europa del Este (linaje C, que incluye a A. m. ligustica, haplotipo C1, 2'2%) lo que indica que ha habido introgresión de genes de otras razas debido a la importación de reinas. Estas colmenas son bastante homogéneas a pesar de la existencia de colonias cercanas trashumantes y de otras en las que se han introducido reinas italianas. Entre las posibles explicaciones de estos resultados figuran una menor adaptabilidad de las reinas importadas y la baja tasa de las importaciones. En las Islas Canarias se han encontrado 5 haplotipos diferentes, dos de ellos pertenecen al linaje de subespecies africanas (linaje A: haplotipos A1, 25'4% y A9, 0'9%), otro pertenece al linaje de Europa del este (haplotipo C1, 15'5%) y otros tres haplotipos podrían formar parte de un segundo linaje africano (haplotipos A11, 1'4%, A14, 9'1% y A15, 47'7%). Los haplotipos A14 y A15 han sido descritos por primera vez. Estos haplotipos y el A11, tienen una nueva secuencia P en su región intergénica llamada P1. La alta frecuencia de distribución del haplotipo A15 y el hecho de que junto con el A14 no se hayan descrito en otras regiones, sugiere que estos haplotipos pueden ser característicos del archipiélago canario. Diferentes olas de colonización desde frica, la importación de reinas y la diversificación de hábitat son factores que pueden explicar la variabilidad del ADNmt de las abejas de las Islas Canarias. El análisis filogenético de los datos de la variación del ADNmt indica que las poblaciones de las Islas Canarias han sufrido procesos de diversificación genética y que se encuentran más cercanas a la población peninsular que a la africana. Este resultado concuerda con análisis morfológicos previos, que inciden en la estrecha relación de las poblaciones de abejas insulares y peninsulares españolas, hecho posiblemente debido a importaciones de reinas en tiempos históricos. El nivel de variación genética de los microsatélites es distinto en las poblaciones muestreadas. Se han observado un total de 98 alelos de distinto tamaño en el conjunto de los 8 loci analizados en las 241 muestras. La heterocigosidad observada media es 0'385 0'314 en la población de Murcia, 0'416 0'291 en las Islas Canarias y 0'603 0'323 en Tetuán. De entre todas las poblaciones, la de Tetuán es la que presenta mayor variación genética en términos de número medio de alelos por locus (6'6 1'1) y de heterocigosidad esperada (0'738 0'068). Algunos de los 8 loci muestran alelos con una alta frecuencia en algunas poblaciones que, sin embargo, están ausentes o son poco frecuentes en otras. Los loci de microsatélites tienen algunos alelos en la población de Murcia cuya distribución y frecuencia relacionan esta población bien con poblaciones africanas bien con europeas, lo cual confirma el estatus de A. m. ibérica como raza híbrida entre las subespecies A. m. intermissa y A. m. mellifera. El bajo nivel de variabilidad de los loci de microsatélite, junto con los datos mitocondriales, sugiere que esta población ha sufrido recientemente una reducción de su tamaño poblacional (efecto cuello de botella). El análisis de la variación de los microsatélites en las poblaciones de abejas de las Islas Canarias, revela cierto grado de diferenciación poblacional, lo cual permite considerar a cada isla como una población diferente de abejas. En estas poblaciones insulares el nivel de diversidad genética es bajo, lo que coincide con datos previos sobre la variabilidad genética de poblaciones de organismos aislados en islas. Este hecho puede deberse al efecto fundador de organismos provenientes de otras zonas, que en el caso de las Islas Canarias pueden ser el continente africano o el sur peninsular. La distribución de los alelos de microsatélites en estas poblaciones sigue el modelo de evolución de los infinitos alelos (I.A.M.) en todos los casos, mientras que no se ajusta tan bien a las predicciones del modelo de la mutación paso a paso (S.M.M.). El análisis de los estadísticos F así como del número de emigrantes (Nm), indican que aparentemente no se están produciendo mecanismos de aislamiento por distancia entre las poblaciones canarias y el continente africano, y que aquellas poblaciones están más relacionadas con las del sudeste peninsular. La introgresión de genes nucleares a partir de reinas y zánganos introducidos es evidente en la isla de Tenerife y provoca que esta población ocupe una posición separada respecto a las otras islas en el cladograma obtenido con el método "neighbour-joining". El análisis filogenético basado en la variación de los microsatélites apoya la hipótesis que describe una estrecha relación entre las poblaciones canarias y la población de Murcia, así como la posición ancestral que ocupa la población de Tetuán.

Autor: BARROSO RODRIGUEZ ANGEL.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: En este trabajo, se ha utilizado la técnica de PCR-SSCP con un doble objetivo: La optimización de protocolos moleculares alternativos a los ya existentes para el genotipado de las variantes genéticas más frecuentes de las caseínas bovina K(A; B; C; E) y B (A1, A2, A3, B); así como para la búsqueda de polimorfismo genético en las caseínas homólogas de la especie ovina, hasta el presente consideradas monomórficas.

Autor: PAREJO ROSAS JUAN CARLOS.
Año: 1998.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Autor: FOLCH LOPEZ PILAR.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA .

Resumen: La raza asnal Catalana es una población en peligro de extinción. En el último censo realizado se contabilizaron 150 animales, una tercera parte de los cuales son machos. Estas cifras clasifican a esta raza en la categoría de Raza "rítica (3 años de edad) y el cálculo de 12 índices biométricos. El análisis mostró poco dimorfismo sexual. La caracterización hematológica y bioquímica clínica dieron ... unos rangos de referencia pa parámetros analizados muy similares a los reportados en otros estudios hechos en poblaciones asnales mundiales. Sólo se encontraron diferencias significativas para el efecto tipo de manejo atribuyéndose dichas diferencias al tipo de alimentación de los dos grupos de asnos analizados. La caracterización genética se realizó con el análisis de 7 marcadores proteicos y enzimáticos y 12 marcadores ADN microsatélite. En este primer estudio todos los marcadores mostraron equilibrio Hardy-Weinberg excepto para el marcador MPZ002 (P

Autor: ERILL SAGLES NADINA.
Año: 1998.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: En el hámster, la adminstración de BOP induce adenocarcinomas pancreaticos muy similares a los humanos, tanto a nivel biologico como inmunológico e histológico. Es por esta razón que el modelo de hámster es una buena aproximación al estudio de los tumores pancreaticos humanos. El objetivo de nuestro trabajo fue el analisis de las alteraciones genéticas más frecuentes en los tumores humanos en tumores inducidos mediante BOP en el hámster. Asi, se estudiaron los genes k-ras, p53, smad4, smad2 y la proteina P15 en tumores y en lineas celulares derivadas de tumores inducidos. También se analizo la presencia de inestabilidad genetica en forma de ganancias y pérdidas alélicas y en secuencias microsatélite en estos tumores. Nuestros resultados sugieren que las alteraciones géneticas involucradas en la carcinogénesis pancreática humana y en el hámster no son las mismas, si bién exiten algunos paralelismos importantes.