HISTOLOGIA ANIMAL

Autor: SERRANO SOTO ANTONIO MARÍA.
Año: 2004.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: En la actualidad no existe descrito un modelo animal detallado para la práctica de la toracoscopia en el que poder ensayar todas las aplicaciones que han ido surgiendo en los últimos quince años. En este trabajo se considera al cerdo (sus scrofa), como un modelo animal útil para la cirugía humana en el ámbito de la cirugía torácica vídeo asistida. Se han empleado cerdos con pesos comprendidos entre 25-35 Kg. de peso vivo en los que se han llevado a cabo diversas intervenciones quirúrgicas mediante técnicas de videotoracoscopia rígida bajo anestesia general inhalatoria, con y sin intubación selectiva. Entre los procedimientos realizados destacan la disección aóritca con arteriotomía, pericardiectomía, clampaje de vasos coronarios, ligadura del conducto arterioso, neumectomía, disección esofágica y esofagotomía, biopsia de linfonodos torácicos, ligadura del conducto torácico, disectomía total, creación de hernias diagragmáticas y herniorrafia y la toma de biopsias de diversos órganos, como el pulmón o el timo. Se describe detalladamente la anatomía del tórax porcino, prestando particular atención en el especto de topografía, el equipamiento e instrumental necesario para su práctiva, la técnica quirúrgica básica y particular para cada procedimiento, las singularidades anestésiscas en el cerdo y las dificultades y complicaciones que se han registrado en esta experiencia. Los resultados permiten concluir que el cerdo resulta un buen modelo para la aplicación de las técnicas toracoscópicas, y que la toracoscopia representa un metodo quirúrgico que permite la exploración total de la cavidad torácica porcina, con una gran magnificación de los detalles anatómicos y que permite la realización de intervenciones torácicas mínimamente inveaivas, algunas tan complicadas como la neumectomía o timectomía totales con precisión y seguridad. el protocolo anestésico propuesto se ha revelado como seguro y eficaz para la consecución de este tipo de técnicas en el modelo procino. Las complicaciones halladas han sido escasas, incluso a pesar de tratarse de un equipo quirúrgico poco experimentado en este tipo de técnicas. Por último, destacamos el elevado potencial didáctico e informativo de la técnica, al permitir el registro de las secuencias visionadas en formato de vídeo o digital.

Autor: ARMARIO HITA JOSÉ CARLOS.
Año: 2003.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE CÁDIZ.

Resumen: OBJETIVOS 1,- Observar y valorar las posibles modificaciones agudas y crónicas en la estructura y composición química de la piel del Oncorhynchus mykiss provocadas por la acción del Dodecil-sulfato sódico (SDS) y del Alquil-benceno-sulfonato sódico (ABS). 2,- Estudiar la posibilidad de utilizar peces como modelo experimental en la investigación en Dermatología comparada. MATERIAL Y MÉTODOS Los animales de experimentación utilizados fueron Oncorhyncus mykiss de tres meses de edad. Los especimenes, divividos en lotes fueron sometidos a distintas concentraciones de SDS y ABS. Las muestras se fijaron en formol 10% v/v tamponado con fosfatos 0,1M pH 7.0-7.2 y se incluyeron en parafina semisintética. Las técnicas histomorfológicas utilizadas fueron hematoxilina-eosina y hematoxilina de Harris modificada VOF de Gutiérrez; y las histoquímicas, las específicas para la demostración y localización de carbohidratos y proteínas. RESULTADOS La CL50 fue de 19.4 mg/L para SDS y de 1.8 mg/L para ABS. Los efectos de los tensioactivos sobre los órganos estudiados dependen de la dosis y del tiempo de exposición, manifestándose una mayor alteración en aquellos especimenes sometidos a mayores dosis y tiempos de exposición. Ambas moléculas producen los cambios histomorfológicos clásicos de la dermatitis de contacto irritativa, consistentes en edema intercelular e intracelular inflamatorio de predominio mononuclear, necrosis de queratinocitos y descamación. Existen diferencias regionales a la acción irritativa de los detergentes sobre la piel de la trucha arco iris. Siendo más resistente la zona dorsal frente a la ventral y la posterior frente a la anterior. A nivel histoquímico se observa una modificación en el patrón de degranulación de los mucocitos que puede estar relacionada con un intento de protección de las capas más superficiales de la epidermis. CONCLUSIONES El modelo de experimentación animal de dermatitis de contacto irritativa sobre piel de trucha arco iris nos permite el estudio de los efectos directos de los tensioactivos sobre la piel de un animal de vida acuática evitando otros mecanismos de irritación como cambios de temperatura, pH o fenómenos de oclusión.

Autor: JUAREZ MARTÍN LUIS .
Año: 2003.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: La teratología es una parte de la ciencia que estudia los defectos del desarrollo embrionario y las anomalías congénitas que padece el enonato. El teratógeno, es el agente causante de tales anomalías. Esta tesis está dentro del área de la Teratología Inmunitaria donde el teratógeno es la molécula IgG, que pasa a través de la placenta o se va almacenando en la yema del huevo (IgY). Las anomalías inducidas por un anticuerpo teratógeno pueden ser debidas a alteraciones en un órgano/tejido indispensable para la totalidad del organismo (anomalía estructural), o bien al bloqueo de un enzima que efecte a una ruta metabólica de carácter vital (anomalía funcional); cualquiera de ambas puede finalmente llevar a la muerte fetal. La hipótesis de partida es que pueden existir antígenos solubles fetales y transitorios (sF-TrAg) cuyo periodo de expresión y almacenamiento finalice antes de la aparición de sus LB específicos, entonces el embrión en su etapa adulta, no reconocería sus propios sF-TrAg. Si algún sF-TrAg pasa a la madre de forma experimental (en este trabajo llevado a cabo en aves) o natural (mamíferos), esta va a sintetizar anticuerpos que podrían pasar al embrión. Si los sF-TrAg se siguen expresando y/o almacenando en este momento, se producirá su neutralización y por tanto la detención de sus funciones biológicos. Igual ocurriría con cualquier aloantígeno (sAlloAg) presente en el embrión que siempre es extraño a la madre. Por tanto el objetivo ha sido probar si la neutralización de sF-TrAg y sAlloAg en el embrión de pollo de 53h.origina alteraciones en el desarrollo embrionario, o retraso en el crecimiento, o anomalías congénitas o muerte fetal, o varias de estas alteraciones. El resultado ha sido positivo porque de 81 embriones experimentales, 60 fueron anormales. Se escogieron tres de ellos para su análisis anatómico e histológico, y otros tres para el estudio de su anomalías congénitas. El presente trabajo abre la puerta a ulteriores investigaciones que ayuden a aclarar el problema del alto % de abortos recurrentes espontáneos y de anomalías congénitas en humanos.

Autor: ARRIAZU NAVARRO RIÁNSARES.
Año: 2003.
Universidad: SAN PABLO CEU.
Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.

Resumen: El cadmio es un potente agente tóxico carcinogénico para el ser humano que se utiliza en multitud de procesos industriales. Algunos estudios epidemiológicos han asociado la exposición al cadmio con el cáncer de próstata humano. El trabajo realizado pretende determinar la potencia real del cadmio para inducir tumores, así como estudiar, caracterizar y correlacionar los patrones morfológicos, estereológicos e inmunohistoquímicos de las lesiones inducidas en la próstata ventral de la rata, tras la administración de cloruro de cadmio vía oral. Asimismo, se trata de correlacionar lo antes expuesto con el comportamiento biológico de las lesiones, con el fin de detectar asociación entre los cambios de expresión de diversos marcadores y una mayor agresividad de las lesiones detectadas. De igual manera, se trata de determinar si el zinc en administración conjunta con el cadmio, modifica la incidencia de displasias en la próstata. Los marcadores utilizados para caracterizar las lesiones displásicas son: PCNA, Apoptosis, Ubiquitina, CerbB2, GSTP1, Receptores de Andrógenos, Bcl-2 y TGFß1. También se determinó la densidad numérica de células epiteliales y el contenido de ADN. se concluye que la administración crónica, vía oral, de cloruro de cadmio origina lesiones intraepiteliales en la próstata ventral de la rata, tanto cuando se administra solo como asociado a cloruro de zinc, que se caracterizan por modificaciones en la expresión de diferentes marcadores (aumento de proliferación celular, Bcl-2 y GSTP1, disminución de apoptosis).

Autor: DIMEY GALINDO CAROLINA.
Año: 2003.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Tras la destrucción producida por la administración de glutamato, se produce un proceso de reparación y regeneración en el núcleo arcuato del hipotálamo. Este proceso incluye la repoblación parcial del núcleo por nuevas neuronas así como una gliosis reactiva de larga duración. Hipótesis: Planteamos que tanto las nuevas neuronas como buena parte de los astrocitos reacitvos se originan por proliferación a partir de células progenitoras multipotenciales que podrían situarse en las paredes ventriculares de la zona lesionada (tercer ventrículo). Objetivos: 1) Avanzar en el conocimiento de los mecanismos de regeneración en el sistema nervioso central de mamíferos in vivo. 1a) Cuantificar el proceso de regeneración. Para ello contaremos los núcleos que incorporen BrdU en toda la extensión rostrocaudal del territorio lesionado; 1b) Analizar la posible proliferación celular en el territorio del núcleo arcuato y la eminencia media; 1c) Dilucidar el destino de las células que han proliferado estableciendo su relación con la repoblación neuronal o la gliosis reactiva. Resultados y conclusiones: En las ratas control la proliferación detectable es muy escasa, después de la lesión la proliferación celular se incrementa de manera extraordinaria en relación con la observada en los animales control. En el epéndimo sorprende la permanencia e intensidad de la reacción a la bromodesoxiuridina, incluso en las ratas tratadas de treinta días de vida. Este hecho indica que las células ependimarias abandonan rápidamente el cilco de división celular pasando a un estado de reposo. La mayoría de dichas células son tanicitos y son los mejores candidatos para constituir una reserva de células stem neurales que abandonan su estado quiescente en respuesta a la lesión. La mayoría de las células que proliferaron contienen proteína glial fibrilar ácida, lo que demuestra el importante papel de la proliferación en la respuesta glial. Algunas de las neuronas arcuatas reactivas a tirosina hidroxilasa, se han producido y diferenciado después de la lesión y a través de proliferación de células precursoras. Creemos, sin embargo, que la cantidad de neuronas producidas en insuficiente para conseguir la recuperación funcional completa del núcleo.

Autor: CASTLE RAMÍREZ LUISA M. MAR.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: El objetivo del presente trabajo fue estudiar la posición del núcleo parafascicular del tálamo )PF) en los circuitos de los ganglios basales analizando la topografía de las proyecciones tálamoestriadas y tálamo-subtalámicas, sus presuntas dianas postsinápticas y su posible influencia sobre las vías directa e indirecta mediante el empleo de técnicas de trazado neuronal múltiple. Teniendo en cuenta la distribución de las proyecciones procedentes del PF en el estriado y núcleo subtalámico (STN) identificamos cuatro área sde proyección en el PF donde las neuronas de una misma región proyectan de forma organizada sobre las neuronas del estriado y del STN que a su vez proyectan sobre la misma región del globo pálido externo (GPe) y de la sustancia nigra reticula (SNR); la distribución de las proyecciones tálamoestriadas y tálamo-subtalámicas encajan con la topografía descrita para los diversos núcleos de los ganglios basales sugiriendo que el PF puede participar en los diferentes circuitos que fluyen a través de los ganglios basales. Los aferetnes talámicos en estriado se relacionan con neuronas de proyección al GPe, SNR y los diferentes tipos de interneuronas. El PF podría modular la actividad del STN ipsilateral a través de proyecciones tálamo-subtalámicas directas sobre las neuronas de proyección subtálamo-palidales y subtálamo-nígricas y del NST contralateral por medio de proyecciones monosinápticas contralateral o bien por contactos sobre neuronas de proyección subtálamo-palidales contralaterales. Por otro lado el PF recibe aferentes del NST ispi y contralateral. Estos circuitos permitirían al PF así modular la salida de los ganglios basales.

Autor: ARIZCUN ARIZCUN MARTA.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA, UNIVERSIDAD DE MURCIA .

Resumen: El dentón es un teleósteo marino potencialmente idóneo para su cultivo en acuicultura. Sin embargo, los conocimientos sobre su biología y sobre los requerimientos del cultivo intensivo, todavía son escasos para permitir su producción a nivel industrial. Los objetivos de la presente tesis doctoral son definir de forma precisa los aspectos morfológicos e histoquímicos fundamentales que caracterizan el desarrollo y crecimiento de la musculatura axial del dentón, así como contribuir a la optimización de las condiciones medioambientales del cultivo larvario de esta especie. Para ello se han realizado dos experimentos (Exp'98 y Exp'00), a partir de sendas puestas seleccionadas, que fueron distribuidas en tanques mantenidos en diferentes condiciones de temperatura. En el Exp'98 se emplearon cuatro combinaciones de temperatura: temperatura ambiente (F, tanque de referencia'98), temperatura caliente (C), F (incubación)/C (alimentación con rotífero), F (incubación)/C (alimentación con artemia). En el Exp'00, las combinaciones de temperatura empleadas fueron cinco: F (tanque de referencia'00), C,F (incubación)/C (alimentación con rotífero), C (incubación)/F (alimentación con rotífero), C (incubación)F/ (alimentación con artemia). La larvas de este último tanque murieron el día 24 tras la eclosión. A partir de los ejemplares de los tanques de referencia'98 y '00 se ha estudiado el desarrollo de la musculatura axial mediante microscopía electrónica de transmisión. Además, también se han empleado técnicas histoquímicas (mATPasa y NADH-TR) para caracterizar los tipos fibrilares. El crecimiento muscular ha sido cuantificado en las larvas de todos los tanques, así como en los alevines y juveniles del tanque de referencia'00. Los parámetros musculares cuantificados fueron el área total del miotomo, el area media de las fibras blancas y el número total de fibras blancas. Además, se ha medido la longitud de las larvas y se ha observado el desarrollo de las aletas, las escamas, la vejiga natatoria y los somitos. A la eclosión, la muscultura axial está integrada por dos estratos musculares con evidentes signos de inmadurez: una monocapa de fibras rojas superficiales y un estrato profundo de varias capas de fibras blancas. Durante la fase vitelina continúa el desarrollo de ambos estratos musculares pero apenas se incrementa su crecimiento. Con el inicio de la alimentación externa aumenta el crecimiento de estas fibras y se activa una segunda fase miogénica localizada en el septo horizontal, entre los músculos rojo y blanco, y en los extremos epi e hipoaxial del miotomo. Como consecuencia de esta 2ª miogénesis, además de aumentar el número de fibras rojas superficiales y blancas, se forman tres nuevos tipos fibrilares: fibras rojas propias, fibras tónicas y fibras intermedias. En este periodo, y como resultado no esperado, se han observado células degenerativas entremezcladas entre las fibras blancas. El significado de estas células, denominados mioblastos claros degenerativos, ha sido presuntamente relacionado, bien con una posible apoptosis, bien con una falta de inervación o una inervación inadecuada. Durante la fase postlarvaria se adquiere la madurez definitiva de la musculatura axial, que según sus características histoquímicas está integrada por cuatro tipos de fibras: rojas, tónicas, intermedias y blancas. Las diferentes temperaturas de incubación y cultivo larvario influyen sobre el desarrollo general de las larvas y también sobre el crecimiento de la musculatura axial. El efecto de la temperatura difiere a lo largo de los estadios de la fase larvaria. Durante la fase vitelina, las larvas mantenidas a mayor temperatura presentan un desarrollo más rápido. Sin embargo, durante esta etapa el crecimiento muscular es escaso, y apenas se muestra sensible al efecto de la Temperatura. Tras la fase vitelina se inicia una etapa de rápido crecimiento larvario en el cual la musculatura crece por hipertrofia e hiperplasia fibrilar. Esta última predomina respecto al hipertrofia, y se incrementa por efecto de la temperatura. Además, la temperatura aplicada en fases más tempranas del desarrollo influye en el posterior crecimiento muscular de las larvas. Así, las larvas del tanque C(incubación)/F(alimentación con rotífero) presentaron mayor área total del miotomo y mayor número de fibras a mitad de la fase larvaria (14 días), que las del tanque F. La mortalidad ha sido muy elevada en todos los tanques experimentales, lo que dificulta la valoración del efecto la temperatura sobre los índices de supervivencia. No obstante, la mortalidad fue mayor en los tanques a mayor temperatura.

Autor: POTO REMACHA ÁNGEL.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA - UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Resumen: Se estudian 31 cerdos de raza Chato Murciano pertenecientes al Centro de Capacitación y Experiencias Agrarias de Lorca, procedentes del programa para su recuperación. El diseño experimental se planteó con todos los cerdos castrados que llegaron al peso adulto (media de 124,9 kg) en 10,6 meses de vida. Se analizaron seis variables de las características de la canal y diez variables morfométricas, así como el peso promedio de 15 piezas cárnicas resultantes del despiece tradicional y, preferentemente, el porcentaje sobre la canal de las llamadas piezas nobles (% Lomos con cabeza, % Jamones y % Paletas). Paralelamente se estudian cuatro variables características de la calidad de la carne: tipo de fibra muscular (tipos metabólicos, porcentajes dentro de los músculos elegidos, área y diámetro mínimo), pH, color y % de grasa intramuscular. Los tipos de fibras musculares fueron estudiados utilizando las técnicas mATPasa (preincubaciones alcalinas y ácidas). También fueron utilizadas las técnicas NADH-TR y a-MGPDH Se presentan los estadísticos descriptivos de todas las variables y las correlaciones entre ellos, así como el nivel de confianza estadística. Además, se reflejan los gráficos e histogramas de frecuencia de los distintos tipos de fibras e información fotográfica sobre algunos resultados. De los resultados obtenidos concluimos con una clara especialización de la raza porcina Chato Murciano hacia transformados cárnicos genuinos, tanto por la buena evolución del pH de la carne, por su color y % de grasa intramuscular, así como por los tipos de fibras musculares que la integran y su morfología. Se observa también que la canal del cerdo Chato Murciano pertenece a una raza con acúmulo de grasa subcutánea, con buenos rendimientos y gran porcentaje de piezas cárnicas de alto valor añadido en la transformación.

Autor: MACÍAS GONZÁLEZ M. CARMEN.
Año: 2002.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE CÁDIZ.

Resumen: La utilización, de los tensioactivos está muy extendida en la agricultura, alimentación, cosméticos, farmacia, etc. Esto contribuye a la creciente contaminación biológica y química a través de las aguas residuales, constituyendo una agresión impactante e irrecuperable en los ríos. Por ello se ha estudiado el efecto biológico de tensioactivos aniónicos (ABS y SDS) sobre alevines de trucha arcoiris (Salmo gairdneri rich) para determinar: La toxicidad aguda, mediante la CL50 a las 96 horas. Las alteraciones histológicas en branquia, tubo digestivo e hígado. Variaciones histoquímicas de carbohidratos en branquia, tubo digestivo e hígado. Según los resultados obtenidos a través de las experiencias realizadas y de una discusión con diferentes autores se ha llegado a las siguientes conclusiones. El ABS es más potente que el SDS, basándose en la CL50 a las 96 horas. Con el ABS no se presentan dosis-dependencia, excepto para hígado e intestino. Se han detectado alteraciones macromoleculares en función de las dosis de tensioactivos.

Autor: RIVERA SILVA GERARDO FRANCISCO.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La neurogénesis en el cerebro de los vertebrados era considerada como un fenómeno exclusivo de la etapa de desarrollo, sin embargo en años recientes, el proceso de neurogénesis postnatal ha sido encontrado en peces, anfibios, reptiles, pájaros y mamíferos. Se ha demostrado la existencia de neurogénesis en el cerebro de los mamíferos adultos en los bulbos olfatorios y en el hipocampo. Evidencias recientes sugieren que la neurogénesis podría ocurrir en otras zonas con potencial neurogénico como las células progenitoras localizadas en las paredes ventriculares, por ejemplo: la médula espinal. Nosotros hemos realizado un estudio en el tercer ventrículo (paredes), en el hipotálamo medio basal y en el núcleo arcuato con la finalidad de analizar la posibilidad de que fuese una zona potencial de neurogénesis. Hemos usado las técnicas de microscopía electrónica convencional, microscopio de luz, estudios de imnuflourescencia e inmunohistoquímicos y cultivos organotípicos de la eminencia media. Los marcadores utilizados son NeuN, Neurogenina, GFAP, BrdU y 3HT. Esta investigación ha sido dividida en tres experimentos, nosotros usamos ratas (P4), los tiempos de sacrificio fueron a las 12h, 10d y 30d. EXPERIMENTO A Administramos a los animales BrdU (50 mg/g, ip) y detectamos que la proliferación celular (células marcadas) en las paredes del tercer ventrículo fueron 3 células de 358 (4d+12h), 4 células de 366 (4d+10d) y 3 células de 363 (4d+30d); las células marcadas en el territorio del núcleo arcuato fueron 5 células de 3806 (4d+12h), 4 células de de 4156 (4d+10d) y 4 células de 4215 (4d+30d). EXPERIMENTO B Usamos animales con glutamato (4mg/g,sc) y BrdU, las células marcadas con BrdU en las paredes del tercer ventrículo fueron 10 células de 331 (4d+12h), 8 células de 325 (4d+10d), 6 células de 384 (4d+30d) y en el NARC se detectaron 5 células de 312 (4d+12h), 4 células de 2256 (4d+10d) y 5 células de 3895 (4d+30d). EXPERIMENTO C Usamos ratas inyectadas con GMS+EGF (5ng/g)+BrdU. Las células marcadas para BrdU en las paredes del tercer ventículo, fueron 112 células de 353 (4d+12h), 94 células de 376 (4d+10d) y 105 células de 368 (4d+30d); en el núcleo arcuato fueron 54 células de 350 (4d+12h), 90 células de 2200 (4d+10d) y 82 células de 3925 (4d+30d). Los resultados indican que nosotros podemos inducir la regeneración neuronal del núcleo arcuato del hipotálamo por medio del uso del EGF, así como identificamos al tercer ventrículo como una zona de neurogénesis y al tanicito como célula madre.

Autor: SAMSAM MOHTASHEM.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La duramadre está principalmente inervada por las terminaciones del trigémino (sistema trigéminovascular). Tanto la duramadre como las terminaciones del trigémino intervienen en el dolor de cabeza. El ganglio del trigémino contiene neuronas sensoriales primarias que poseen neuropéptidos, entre otros, el péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP), la sustancia P (SP) y la neuroquinina A (NKA). Estos neuropéptidos aumentaron en la sangre durante los ataques de migraña. La inflamación neurogénica en el sistema trigéminovascular ha sido propuesta como responsable de las alteraciones que se producen en las cefaléas vasculares, incluida la migraña. La estimulación eléctrica del ganglio del trigémino produce inflamación neurogénica en la duramadre debido a la liberación de los neuropéptidos. Hemos estimulado eléctricamente el ganglio del trigémino para inducir dicha inflamación en la duramadre y así trabajar en un modelo experimental de dolor semejante al que se produce durante la cefaléa. La estimulación eléctrica del ganglio del trigémino produjo la liberación de CGRP, NKA, SP, somatostatina, neurotensina y metionina-encefalina a partir de las terminaciones ipsilaterales centrales trigeminales del núcleo caudal del trigémino (NCT) de la rata. La liberación de los mencionados neuropéptidos en dicho núcleo activaría a las neuronas del NCT que transmitirían la información dolorosa hacia centros superiores. Además, observamos al mismo tiempo la coliberación de CGRP, SP y NKA en el lado ipsilateral del NCT. Esta observación indica que los tres neuropéptidos cooperan en la nocicepción. La SP, así como el glutamato, podrían activar a las neuronas secundarias en el NCT y el CGRP inhibir la degradación de la SP. Además, observamos una liberación de los neuropéptidos CGRP, SP y NKA no sólo en el lado ipsilateral, sino también en el lado contralateral, tras estimular unilateralmente el ganglio del trigémino. Esto significa que la vía dolorosa es activada en ambos lados del NCT. Además, indica que la sensación dolorosa sería en éste caso bilateral y generalizada, debido a que las neuronas de ambos lados del NCT son activadas. Debido a una posible cooperación de los neuropétidos en el NCT y a la función del glutamato en activar a las neuronas sensoriales secundarias del NCT, proponemos la administración de un combinado de drogas que bloquean los receptores de las sustancias neuroactivas implicadas a nivel de la primera sinapsis (en el NCT) con el fin de controlar el dolor producido durante las cefaléas.

Autor: CASCÓN PÉREZ-TEIJÓN SARA M..
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Hemos realizado un estudio de la lesión inducida por el glutamato monosódico (GMS) en el núcleo arcuato del hipotálamo (NARC), centrando nuestra atención en el proceso de muerte celular y en la supervivencia neuronal. Se han utilizado ratas controles (inyectadas con suero salino) y experimentales, a las que en el cuarto día de vida postnatal se les administró una única dosis de GMS (4mg/g peso corporal) por vía subcutánea. Los animales sueron sacrificados a las tres, seis y doce horas de la administración del suero salino o del neurotóxico. Para el estudio del territorio lesionado se han empleado la tinción de Nissl modificada, la microscopía electrónica convencional, la inmunofluorescencia para caspasa 9 y la doble tinción inmunohistoquímica para PCNA (marcador de proliferación celular) y para neurogenina o NEuN (marcadores de neurona madura). El territorio del NARC de los animales inyectados con GMS sufre una destrucción generalizada y progresiva, con muerte de más del 90% de sus células a las doce horas de la administración del neurotóxico. Hemos comprobado la existencia de apoptosis en el territorio del NARC de los animales lesionados. Las células apoptóticas muestran los signos característicos de este tipo de muerte celular: mantenimiento de la integridad de la membrana nuclear, condensación periférica de la cromatina y escisión internucleosomal del ADN. Cuantitativamente, la apoptosis es el tipo de muerte celular predominante en el territorio lesionado, representando un 85% de las células que muere; el 15% restante corresponde a muerte por necrosis. Además, el porcentaje de células apoptóticas se va incrementando entre las tres y las doce horas tras la administración del neurotóxico. Todo ello nos lleva a concluir que la apoptosis es el principal mecanismo implicado en la lesión causada por el GMS en el NARC. Como consecuencia de la progresiva destrucción celular se produce una disminución paulatina del número de células que no muestran signos de lesión. A las 12 horas de la inyección del GMS las células de aspecto normal son poco más del 9%. Si tenemos en cuenta que muchas de ellas corresponden a células microgliales que llegan al NARC procedentes de otros territorios, concluimos que las células microgliales que llegan al NARC procedentes de otros territorios, concluimos que las células supervivientes a la lesión son muy escasas. El uso de marcadores de neuronas indica, asimismo, que la supervivencia neuronal es muy reducida. En los animales a los que se administró el neurotóxico hemos observado células marcadas para el antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) tanto en el epéndimo como en el territorio del núcleo arcuato, lo que nos lleva a plantear que la proliferación celular puede estar implicada en los mecanismos de reparación tras la lesión.

Autor: CLEMENTE LÓPEZ DIEGO.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La participación del óxido nítrico potenciado o impidiendo la regeneración nerviosa tras una lesión traumática es controvertida, ya que existen evidencias a favor y en contra de ambas posibilidades. Uno de los modelos más utilizado para el estudio de la regeneración nerviosa dentro del Sistema Nervioso Central de los vertebrados es la vía visual de los peces Teleósteos ya que ésta regenera eficaz y espontáneamente tras una lesión en cualquiera de sus partes. En esta Tesis Doctoral analizamos la distribución de las células productoras de óxido nítrico en el sistema visual de la tenca en condiciones normales y tras los procesos de degeneración y regeneración de la vía inducidos por la lesión del nervio óptico. Para ello estudiamos la distribución de las células positivas a NADPH-diaforasa como marcador de células productoras de óxido nítrico. Las células positivas a este marcador son de naturaleza glial y las clasificamos en 5 tipos atendiendo a su morfología, localización y tiempo de aparición durante el proceso degenerativo/regenerativo. Las células de tipo I aparecen en la retina, cabeza del nervio óptico y nervio óptico mientras que las de tipo II lo hacen exclusivamente en el nervio óptico y nervio óptico mientras que las de tipo II lo hacen esclusivamente en el nervio óptico. En ambos casos estan presentes tanto en los animales control como en los lesionados. En todas las regiones de la vía visual postquiasmática únicamente observamos células del Tipo III. Tras la lesión, el nervio óptico presenta los tipos IV y V lo que viene acompañado de un descenso del número o la desaparición de las células de tipo I. El estudio de doble marcaje de NADPH-diaforasa con diversos marcadores gliales (S-100, GFAP. Vimentina, glutamina sintetasa y lectina de tomante) muestra que los cinco tipos presentan al menos uno de los marcadores astrocitarios analizados. Además, la homogeneidad morfológica de las células de tipo III contrasta con la heterogeneidad neuroquímica regional que muestran tras el análisis de los dobles marcajes.

Autor: TORRENT PÉREZ AYOSE.
Año: 2002.
Universidad: LAS PALMAS DE GRAN CANARIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: En el presente trabajo se ha realizado un estudios sistemático de las patologías y causas de mortalidad en las tortugas marinas varadas en las Islas Canarias desde Enero de 1998 hasta Diciembre de 2001. En total se necropsiaron 94 tortugas (89 Caretta caretta; 2 Dermochelys coriacea; 3 Chelonia mydas). En los ejemplares necropsiados se observaron lesiones afectando a los sistemas digestivo, respiratorio, excretor, reproductor, muscular, óseo, cardiovascular, inmune, sistema nervioso, piel y anexos, y órganos de los sentidos. A su vez se realizó un estudio toxicológico en busca de metales pesados (Al, As, Cd, Cu, Fe, Ni, Hg, Pb y Zn) de muestras de hígado, riñón, músculo y hueso de los ejemplares necropsiados. A nivel de sistema inmune, destaca el hallazgo de un linfoma linfoblástico multicéntrico en un espécimen de tortuga boba (C.caretta), primera neoplasia linfoide descrita en tortugas marinas. A nivel del sistema cardiovascular destaca un caso de miocarditis purulenta y pericarditis purulenta difusa asociadas al aislamiento de Staphylococcus xylosus. Cabe destacar el hallazgo de un divertículo esofágico de gran tamaño en una tortuga boba a nivel de la unión esófago-estómago. La muscosa del divertículo presentó una inflamación fibrinonecrótica asociada al aislamiento de Aerococcus viridans. Se estimó que en la muerte del 29,79% de los ejemplares (28/94) concurrieron causas espontáneas de origen "natural". El 67,02% de las tortugas necropsiadas (63/94) mostraron lesiones enmarcadas dentro de la patología medioambiental derivada de actividades humanas, es decir, traumatismo por embarcaciones (23,40%), enmallamientos en redes de pesca (24,47%), ingestión de anzuelos y monofilamentos de pesca (19,15%), e ingestión de crudo y plásticos (2,13%).

Autor: SOLERA SUAREZ MANUEL JOSÉ.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD ALCALÁ DE HENARES.

Resumen: El presente trabajo de tesis doctoral se centra en estudiar el papel que la Sustancia Gris Periacueductal (SGP) desempeña en los mecanismos de control de la transmisión nociceptiva. El objetivo fundamental del trabajo consistió, por un lado, en estudiar la expresión del proto-oncogén c-fos, considerado como un buen marcador de actividad neuronal, tras un estímulo nociceptivo, tanto somático superficial (test de la formalina) como visceral (test de las contracciones abdominales). Y por otro lado, en evaluar las posibles alteraciones que sobre esta expresión pudiera ejercer la administración previa de una sustancia analgésica, siendo la morfina y el metamizol los dos analgésicos utilizados. El animal de experimentación fue la rata macho de la cepa Sprague-Dawley. Resumiendo todos los datos obtenidos señalaremos que se observó la existencia de inmunorreactividad frente a Fos en la SGP de los animales de todos los grupos. En los animales del grupo control simulado la inmunorreactividad frente a Fos fue baja en todos los niveles y subregiones. La administración de morfina en ausencia de estimulación algésica se caracterizó por inducir la expresión de c-fos especialmente en la subregión L de la SGP, mientras que en el grupo control metamizol fue en la VL. La apliación a los animales de experimentación de un estímulo nociceptivo de tipo somático superficial provocó de forma clara un aumento del número de células marcadas en la subregión L. Sin embargo, la aplicación de un estimulo nociceptivo visceral provocó un mayor número de células marcadas en la subregión VL. El tratamiento, previamente al estímulo doloroso somático superficial, con morfina bloqueó en los niveles intermedios y caudales de la SGP la expresión de c-fos en la subregión L. Cuando el analgésico empleado de forma previa al estímulo doloroso fue el metamizol el resultado fue similar al que obtuvimos con la morfina, es decir, inhibición (almenos parcial) del marcaje en la subregión L. Por el contrario, cuando el metamizol lo aplicamos de forma previa a un estímulo nociceptivo visceral apenas obtuvimos diferencias estadísticamente significativas con respecto al grupo estimulado con dolor visceral. Por último, la naloxona tuvo efectos dispares según el nivel estudiado. Así pues, el seguimiento a lo largo del eje rostro caudal de la SGP del marcaje Fos-positivo en los diferentes grupos experimetnales confirmó la existencia de una distribución columnar del mismo, apoyando la teoría de columnización de la SGP propuesta pro Bandler y cols (1991). Los resultados vienen a apoyar la existencia de una organización colomnar longitudinal de la SGP y aportan nueva información sobre el número, distribución y extensión de las diferentes columnas. Asimismo, señalan a la subregión L de la SGP como enlace entre la información nociceptiva somática superifical y la respuesta antinociceptiva que esta estimulación desencadenaría, bien de forma directa o bien de forma indirecta a través de alguna otra de las subregiones de la SGP, como la VL.

Autor: TOMAS AGUIRRE FRANCISCO.
Año: 2002.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGÍA.

Resumen: La glándula pineal es una estructura sometida a la influencia de los factores medioambientales, fundamentalmente las variaciones de intensidad lumínica diaria y estacional y esta influencia se traduce en cambios morfofuncionales. Se postula la existencia de una relación sincrónica entre el entorno y el organismo. La pineal es idónea para la realización de estudios cronobiológicos. El objetivo de este trabajo va a ser realizar un estudio de las variaciones de los índices cariométricos de la corteza y de la médula, a lo largo de las 24 h., y en cada estación, tanto en la porción distal como en la intermedia de la pineal del conejo, para conseguir un patrón de funcionamiento morfológico básico que permita comprobar si el comportamiento de cada zona es uniforme o diferente. Los animales de experimentación fueron sometidos a diferentes condiciones ambientales de luminosidad, sacrificándose en lotes iguales. En cada estación el proceso se realizó siguiendo el mismo ritmo horario: 6 puntos horarios equidistantes por cada día: 06, 10, 14, 18, 22 y 02 horas. Las muestras y preparaciones microscópicas se han obtenido manteniendo siempre la misma sistemáticas. El índice cariométrico va a ser el elemento de estudio. Es una expresión del volumen nuclear, por lo que sus variaciones pueden ser valoradas como la manifestación de los cambios en la actividad celular. Se seleccionaron 50 índices de cada una las áreas a estudiar: para cada región cortical y medular, zona beta y C, hora y estación del año. Un total de 4800 valores que se sometieron a análisis estadístico: Análisis de la Varianza, considerándose interacciones de segundo orden y que estudie las relaciones entre la hora, la estación, la zona y la región. Tras la descripción de los resultados y las consideraciones planteadas, de los estudios realizados en el presente trabajo, se pueden extraer las siguientes conclusiones: * Globalmente, los índices cariométricos de la zona periférica de la pineal del conejo son mayores en la parte distal e intermedia que los de la zona central. * Existen diferencias estadísticamente significativas circadianas y estacionales entre las zonas periféricas y central tanto en la porción distal como en la intermedia de la pineal del conejo. * Existen diferencias estadísticamente significativas en el estudio comparativo de los índices cariométricos del binomio día/noche a nivel medular y cortical en ambas porciones estudiadas. * En virtud de las conclusiones anteriores se puede afirmar que las porciones intermedia y distal de la pineal del conejo son fucionalmente diferentes a lo largo del ciclo circadiano y estacional.

Autor: VICENT CAMBRA SILVESTRE.
Año: 2002.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: En este estudio evaluamos el papel de MKP-1/CL100 y de las MAPK, ERK y JNK, en el cáncer de pulmón. Estudiamos la expresión de MKP-1/CL100 y el estado de activación de estas MAPK en 18 líneas celulares epiteliales de carcinoma de pulmón (11 de CNMP y 7 de CMP) y en células del epitelio bronquial normal. Además, estudiamos un modelo de carcinogénesis pulmonar periférica de rata instilada con sílice y muestras clínicas (121 tumores de pulmón 113 correspondientes a CNMP y 9 a CMP). Al analizar las líneas celulares observamos que los niveles de expresión del mRNA y de la proteína de CL100/MKP-1 son mayores en la líneas celulares correspondientes a CNMP que a las de CMP. Además, encontramos activación de ERK en un porcentaje mayor de líneas celulares de CNMP que de CMP, y solo encontramos activación de JNK en un porcentaje bajo de líneas celulares de CMP. Las células que presentan altos niveles de MKP-1/CL100 también tienen activación de ERK. Al tratar estas células con un inhibidor específico de la vía de activación de ERK (U0126), observamos que los niveles de mRNA y de proteína de MKP-1/CL100 disminuyen, lo que sugiere que ERK regula la expresión de esta fosfatasa a nivel transcripcional. Los resultados en el modelo animal indican la existencia de una alta expresión de la proteína de MKP-1 en lesiones preneoplásicas (hiperplasias alveolares, bronquiales y lesiones adenomatosas) y niveles bajos o indetectables de estas fosfatasa en el tejido normal y tumoral. En las muestras clínicas, los niveles de expresión de MKP-1/CL100 son bajos o indetectables en el tejido epitelial normal y en los CMP y elevados en los CNMP. En segundo lugar, en el tejido epitelial normal y en CMP no encontramos activación de ERL y sí en CNMP pero no en tejido normal y en CMP. Finalmente, observamos que la activación de ERK1/2 correlaciona postivamente con un estadio avanzado y con tumores de mayor tamaño y con metástasis ganglionares mediastínicas. La fosforilación de JNK2 correlaciona de modo inverso con estas variables. Además, la expresión de MKP-1/CL100 y la activación de ERK1/2 parecen poseer valor pronóstico en pacientes con CNMP.

Autor: LLOPIZ KHATCHILKIÁN DIANA ISABEL.
Año: 2002.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA .

Resumen: La adrenomedulina (AM) y el péptido de 20 aminoácidos del extremo NH2 terminal de la proadrenomedulina (PAMP) son dos péptidos reguladores amidados que derivan de un precursor proteico común denominado la preproadrenomedulina. La presencia de estos péptidos ha sido descrita en numerosos órganos de mamíferos, incluyendo entre ellos la hipófisis de rata. En dicha glándula se cree que tanto la AM como el PAMP son capaces de regular la secreción hormonal, principalmente la realizada por las células endocrinas de la pars distalis. Sin embargo, en esta región aún no se conoce el tipo celular que sintetiza la AM, por lo cual uno de los principales objetivos del presente trabajo es la identificación de las células productoras de este péptido. Para ello, se ha realizado un estudio inmunocitoquímico de colocalizaciones entre la AM y las hormonas clásicas de la pars distalis. Dicho estudio ha permitido detectar que la AM se encuentra tanto en las células somatotropas como en las tirotropas de la hipófisis de rata. Además de la inmunorreactividad encontrada en la pars distalis, también se ha demostrado la presencia de la AM en abundantes axones de la pars nervosa y ocasionalmente, en algunos pituicitos. Por otra parte, mediante las técnicas Western blot se detectaron dos formas inmunorreactivas para la AM de pesos moleculares mayores que la molécula bioactiva de 6 kDa, concretamente de 13 y 15 kDa. Con respecto al PAMP, estudios previos demostraron su presencia en las células gonadotropas de la hipófisis de rata. En concordancia con estos resultados, en el presente trabajo no se ha encontrado colocalización entre la AM y el PAMP en el mismo tipo celular. Además, por Western blot se ha detectado una forma inmunorreactiva para el PAMP diferente de las encontradas para la AM, en concreto de 18 kDa. Los resultados obtenidos por inmunocitoquímica y por Western blot sugieren una posible expresión diferencial de ambos péptidos en la hipósisis de rata. Por otro lado, se ha detectado la presencia del ARNm de la preproadrenomedulina en abundantes células endocrinas de la pars distalis en tanto que no se ha demostrado su presencia ni en la pars nervosa ni en la pars intermedia. Por último, dado a la localización del PAMP en las células gonadotropas, se ha estudiado su expresión a lo largo del ciclo estral en la rata. Por esta razón, se realizó un estudio cuantitativo para conocer si existía una variación en el número de células gonadotropas positivas para PAMP a lo largo del ciclo reproductor. Los resultados obtenidos de estos estudios indicaron que no existían diferencias significativas ni el número absoluto de células positivas para PAMP ni en el número de células positivas por mm3 de tejido en la pars distalis de la hipófisis de rata a lo largo del ciclo.

Autor: RODRÍGUEZ RAMOS M. ROSARIO.
Año: 2001.
Universidad: SAN PABLO CEU.
Centro de lectura: CIENCIAS EXPERIMENTALES Y TÉCNICAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD SAN PABLO-CEU.

Resumen: Las células neuroendocrinas y la inervación peptidérgica están implicadas en el desarrollo de las patologías prostáticas como son la hiperplasia benigna y el cáncer de próstata. Para poder profundizar acerca de los mecanismos que desencadenan la proliferación celular, es necesario ampliar los conocimientos sobre la intervención de las células neuroendocrinas y las fibras peptidérgicas en el desarrollo de la próstata normal. Ante la dificultad de manejar muestras humanas en condiciones fisilógicas este estudio se ha realizado en la próstata de rata. Mediante técnicas inmunohistoquímicas y de cuantificación estereológicas se han determinado la presencia y distribución de estas células y fibras. También se han analizado las variaciones en su concentración a lo largo de todo el desarrollo postnatal. Los maracadores neuroendocrinos utilizados son: cromogranina A y serotonina y los maracadores de inervación: PGP 9.5, NPY, VIP, sinaptosfisina y sustancias P. Las células neuroendocrinas se han localizado exclusivamente en la región de los conductos y expresan un incremento significativo en la pubertad. Se da la circunstancia de una máxima densidad de inervación sinapsis en esta misma región por lo que estos resultados manifiestan la presencia de un sistema neurohomonal que intervendría en la excreción de fluido prostático hacia la uretra pudiendo a su vez modular la acción de los andrógenos.

Autor: FABREGAS BATLLE PERE JORDI.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACION CONTINUADA.

Resumen: La hipotesis en que se basa el presente trabajo es que el desarrollo y el cancer comparten mecanismos de funcionamiento y que ello es debido a que comparten los genes que los rigen. Se ha diseñado un plan de trabajo dividido en dos fases: 1. Deteccion de genes que se expresan en el periodo fetal de la rata y 2. Estudio de la implicación en el cancer de genes detectados en la primera fase. Esta tesis doctoral tiene como objetivo llevar a cabo la primera parte de este plan de trabajo. El abordaje metodologico se ha realizado de forma secuencial. En primer lugar se ha utilizado la tecnica RNA arbitrarily primed PCR (RAP-PCR) para detectar secuencias genicas diferencialmente expresadas. Para ello fueron microdisecados segmentos de tubo digestivo abdominal en fetos procedentes de 7 ratas de 17 a 20 dias de gestacion. Se efectuo la extracción del ARN para posteriormente realizar su conversion a ADNc mediante Retrotranscripcion. La amplificacion de los ADNc se realizó mediante PCR, que en la RAP-PCR se caracteriza por la utilización de un solo primer de secuencia aleatoria, una mayor concentracion de sales en la mezcla y bajas temperaturas de anillamiento (50ºC) en los 5 primeros ciclos, obteniendose la amplificacion de multiples secuencias que se disponen en un patrón de bandas cuando se analizan mediante electroforesis en geles de secuenciacion. Diez bandas fueron clonadas y secuenciadas. Las secuencias obtenidas fueron analizadas con el programa BLAST en las bases de datos de NCBI y UCSC. Finalmente, se realizó la tecnica de la hibridación "in situ" sobre cortes sagitales obtenidos con microtomo de congelacion, de fetos de rata, utilizando ribosondas marcada con digoxigenina, construidas a partir de clones de bacterias que contenian el plasmido con una de las bandas (hsp86). Los resultados obtenidos en este trabajo pueden resumirse en tres niveles. 1.RAP-PCR: Los patrones de expresión no puede ser considerados como concluyentes pero si fueron utilizados para decidir las bandas a secuenciar. 2. Secuenciacion: Se obtuvieron tres ARNs ribosomales, dos mitoconfriales, tres mensajeros, dos secuencias desconocidas y una con multiples homologias. Cabe destacar las siguientes homologias: banda F8 con Rattus norvegicus hsp86, la banda GO con Mus Musculus Chaperonin subunit 5(epsilon) (Cct5), que a su vez muestra homologia con el clon TSAP-9, probable gen supresor de tumores y la banda M2 con Homo sapiens optic atrophy 1(autosomal dominant)(OPA1). 3. Hibridación "in situ". No se observaron diferencias entre las edades estudiadas, observandose expresión en testículo, celulas hematopoyeticas en el higado, epitelio de las fosas nasales y de los bronquios de mayor tamaño, capa ependimaria de los plexos coroideos, grasa parda, timo, corteza renal, corteza suprarrenal y capas epitelial y serosa de intestino delgado y grueso. Hsp86 se expresa en celulas que producen cilios o flagelos, constituidos por microtubulos formados por tubulina, proteina plegada por hsp90(Homo s.), homologa a hsp86 de la rata. La marcada expresion de hsp86 en testiculo se explica por la mayor sensibilidad al calor de las celulas germinales masculinas. Se conoce la relación de proteinas de la familia de las hsp90 con cancer, pues colaboran el plegamiento de proteinas relacionadas con proliferacion y division celular y se ha detectado su expresion genica en diferentes procesos neoplasicos. El hecho de que una de las secuencias estudiadas se asocie con proliferacion celular (hsp86) y otra (chapronin subunit 5)muestre homologia co un gen supresor de tumores, esta en acuerdo con la hipotesis inicial de relacionar desarrollo y cancer.