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PARASITOLOGIA ANIMAL



216 tesis en 11 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11
  • Actividad larvicida de aceites esenciales de plantas aromáticas y sus componentes principales frente a larvas L3 de Anisakis simplex s.l.
    Autor: Hierro Marín Ignacio.
    Año: 2004.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: Facultad de Farmacia.
    Centro de realización: Facultad de Farmacia.
    Resumen: La anisakiosis es la afección parasitaria producida por larvas L3 de nematodos del género Anisakis que el hombre adquiere por el consumo de pescado crudo o insuficientemente cocido. El tratamiento más recomendado es la retirada tanto de la larva del nematodo como de la zona afectada con gastrofibroscopio o laparotomía. La mayoría de los tratamientos farmacológicos que no requieren intervención quirúrgica y, por tanto, no retiran las larvas, no acaban con el problema en sí, sino con los síntomas de la enfermedad, pudiendo en ocasiones darse con posterioridad un "síndrome de larva migrans visceral", o sufrir una encapsulación las larvas (en pared gastrointestinal, vísceras o musculatura abdominal), quedando el paciente sensibilizado ante un futuro contacto con nuevas larvas, motivo por el cual son cada vez más frecuentes los casos de reacciones anafilácticas. Distintos trabajos realizados con aceites esenciales y/o sus principales componentes, han puesto de manifiesto el creciente interés de los mismos dentro del ámbito de la Parasitología. En relación con la posible actividad de aceites esenciales y de sus principales componentes frente a larvas L3 de Anisakis simplex s.l., destacan los trabajos realizados por Kasuya et al. (1988 y 1990), quienes ponen de manifiesto la actividad larvicida in vitro del aceite esencial de Perilla frutescens y de su principal componente, el perillaldehído. Habida cuenta de la no disponibilidad de tratamientos farmacológicos eficaces frente a la anisakiosis humana, abordamos el estudio de la posible actividad larvicida de los aceites esenciales de comino, palmarrosa, lemongrass, geranio de Egipto, litsea cubeba, orégano y citronela de Java, cuyos componentes principales, determinados por cromatografía de gases acoplada a un espectrómetro de masas, presentan analogías estructurales con el perillaldehído; así como de dichos componentes principales (carvacrol, timol, geraniol, citronelol, citral y aldehído cumínico, utilizando perillaldehído como compuesto de referencia por su contrastada acción larvicida), frente a las larvas L3 de A. simplex s.l., identificadas morfológicamente y mediante electroforeis de isoenzimas, provenientes del hospedador Micromesistius poutassou (bacaladilla); tanto in vitro como in vivo, y valorar así su posible uso en el tratamiento de esta enfermedad. De forma paralela, medimos la actividad MPO (mieloperoxidasa) tisular de los componentes de los aceites esenciales en ratas Wistar, así como la actividad antioxidante in vitro de los mismos. Conclusiones: 1. Todos los aceites esenciales ensayados poseen actividad larvicida in vitro frente a L3 de A. simplex s.l. a la concentración de 125 µg/mL. Destaca el aceite esencial de lemongrass, con una letalidad máxima desde las 4 horas.2. Los principales componentes de dichos aceites esenciales mostraron una alta actividad larvicida in vitro a la mayor concentración ensayada. En el caso de carvacrol, timol, citronelol y citral, el porcentaje de larvas muertas fue del 100 % a las 4 horas del inicio de la experiencia.3. El estudio histológico y los resultados del experimento in vivo permiten afirmar que la actuación de los derivados monoterpénicos ensayados tiene lugar en el tracto intestinal del parásito y, en menor medida, en la cutícula del mismo.4. Geraniol, perillaldehído, citral y citronelol administrados a la dosis de 46,90 mg/0,5 mL a la vez que los nematodos, impiden la fijación y/o penetración de las larvas de A. simplex s.l. en las paredes gastrointestinales de las ratas. 5. Ninguno de los componentes ensayados in vivo producen irritación sobre las mucosas gastrointestinales de los animales de experimentación. 6. La consideración conjunta de los resultados obtenidos con el geraniol y el perillaldehído frente a L3 de Anisakis simplex s.l., y la ausencia de daño sobre las células de la mucosa intestinal, hablan en favor del uso preventivo de estos compuestos y/o de las plantas aromáticas que los contienen frente a la anisakiosis, siempre a expensas de los imprescindibles y necesarios estudios clínicos.
  • PATOLOGIA (TUBERCULOSIS Y ELAFOSTRONGILOSIS) DEL CIERVO (CERVUS ELAPHUS) EN CASTILLA LA MANCHA. PROBLEMÁTICA ASOCIADA A SU GESTION .
    Autor: VICENTE BAÑOS JOAQUIN.
    Año: 2004.
    Universidad: MURCIA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA DE MURCIA.
    Resumen: Esta Tesis aborda el estudio de los aspectos sanitarios relacionados con la gestión de ciervo (Cervus elaphus) en el centro y sur de España (provincias de Ciudad Real, Toledo y áreas adyacentes). Se ha seleccionado el sistema macroparásito-hospedador compuesto por el ciervo naturalmente infestado por Elaphostrongylus cervi (Nematoda: Protostrongylidae). Como microparásito se estudia la infección por micobacterias causantes de la tuberculosis. En el primer estudio se describe el patrón estacional de excreción de L1 de E. cervi. La intensidad media mensual de excreción más baja se dio durante los meses estivales, con maximos otoño-invernales. Este ritmo, asociado positivamente con las precipitaciones, puede ser debido a una adpatación del parásito a las condiciones ambientales mediterráneas. Por otra parte, durante la temporada de caza se estandariza un periodo de comparación entre individuos que evita variaciones estacionales. En un segundo estudio se aborda la distribución y la epidemiologia de la excreción de L1 de E. cervi en el centro sur de España. La presencia de L1 del parásito fue generalizada en todas las poblaciones de estudio. Las prevalencia se asoció positivamente al número de ciervos por charca de agua en cada finca, evidenciando el importante papel epidemiológico de estos puntos en los habitats mediterráneos. Seguidamente, se evidenciaron las relaciones a escala individual entre las tasas de excreción de L1 de E. cervi, la condición corporal y el peso del bazo (como estimador de competencia inmune) en las diferentes clases de sexo y edad del ciervo. Los resultados apoyaron la idea de que diferentes papeles de las diferentes clases de sexo y edad en esta especie poligínica pueden afectar a la dicotomía entre la inversión en reproducción y la defensa frente a los parásitos. El siguiente trabajo describió la distribución geográfica de los tipos moleculares (espoligotipado y tipado VNTR-MIRU) correspondientes a 77 aislamientos del Complejo Mycobacterium tuberculosis en ciervo y jabalí. La distribución de los diferentes tipos moleculates esta espacialemte estructurada. Ambas especies compartieron los mismos patrones de espoligotipado en 4 de 5 localidades. Las cepas de origen bovino y caprino circulan en las mismas poblaciones locales de ciervo y jabalí. Seis de los 11 espoligotipos fueron similares a algunos descritos previamente en humanos. El aislamiento de cepas en poblaciones sin contacto con el ganado doméstico durante varias décadas sugiere fuertemente que el complejo Mycobacterium tuberculosis es capaz de persistir en estas poblaciones. El estudio epidemiológico de la presencia de lesiones macroscópicas compatibles con tuberculosis reveló mayores prevalencias en las poblaciones de jabalí que de ciervo. Así, hubo una prevalencia media de un 42,51 % en las poblaciones de jabalí del área de estudio, siendo de un 13,70 en el ciervo. El jabalí mostró prevalencia de lesiones macroscópicas compatibles con tuberculosis en poblaciones donde no existía otro ungulado silvestre o doméstico, sugiriendo un papel como reservorio. Posteriormente se estudiaron los factores de riesgo asociados a la presencia de lesiones macroscópicas compatibles con tuberculosis en las poblaciones de ciervo y jabalí del centro y sur de España. La agregación del jabalí en los puntos de agua se asoció positivamente con la probabilidad individual de presentar lesiones tanto en ciervo como en jabalí. La agregación de jabalies en los puntos de alimentación se asoció con la probabilidad de presentar lesiones en ciervo. Así, las características particulares de los hábitats mediterraneos del centro y sur de España, y los manejos cinegéticos intensivos en estas zonas, podrían haber favorecido la difusión y mantenimiento de la Tuberculosis en los ciervos y jabalíes de estas zonas. Finalmente, ambos sistemas agente infectocontagioso-ciervo fueron integrados en un mismo estudio para elucidar las relaciones existentes entre las tasas de infección o infestación, los parámetros de condición corporal, capacidad inmune y de dinamica poblacional en 25 poblaciones de ciervo del centro y sur de España. Las prevalencias de excreción de L1 de E. cervi y de presencia de lesiones compatibles con tuberculosis se asociaron negativamente a lo largo de las poblaciones. Ambas se relacionaron a su vez de diferente forma con los demás parámetros. Asi, nuestros resultados sugieren que el manejo cinegético que se efectúa en nuestra área de estudio genera una disyuntiva entre las tasas de infección e infestación de estos macroparásitos y microparásitos. Aunque el balance entre exposicióin y susceptibilidad no debe de ser interpretado en términos absolutos, las tasas de parasitación podrían indicar la capacidad de los ciervos para afrontar la parasitación, mientras que los parámetros de difusión de la tuberculosis pueden ser principalmente dependientes del número de eventos de transmisión en una población dasda. El uso de los patógenos, condición corporal y estatus inmune en las poblaciones, junto con los parámetros de la dinámica poblacional, puede ser útil como estimadores cuantitativos para comprobar y valorar situaciones de sobreabundancia y deficiencias de manejo.
  • APROXIMACIÓN AL CONOCIMIENTO DE LOS ENDOPARÁSITOS DE LAS AVES RAPACES DEL ÁREA SUR-OCCIDENTAL DE CASTILLA Y LEÓN .
    Autor: CORRALES JIMÉNEZ JOSÉ ANTONIO.
    Año: 2004.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: El objetivo de la tesis es el conocimiento de los endoparáistos que albergan las aves rapaces en el área sur-occidental de la Comunidad de Castilla y León, de su prevalencia de sus relaciones ecológicas. Los estudios se han elaborado en las aves rapaces que ingresaron en el Centro de Recepción de Fauna Silvestre "Las Dunas", dependiente de la Junta de Castilla y León entre 1997 y 2002. La prevalencia de las hemoparasitosis en las aves rapaces del área es del 40% (leucocytozoonosis: 27%; hemoproteosis: 23%; tripanosomosis: 3%; microfilariosis: 2%; y plasmodiosis no fue identificada en ningún ave. Encontrando una diferencia significativa entre las prevalencias de las aves rapaces en especie, género, familia, orden, etc., en el mismo estudio y en otros similares, explicada desde una óptica multicausal: como consecuencia de los diferentes factores epidemiológicos que mantienen los vectores biológicos para con los parásitos y para con las aves rapaces, debido a la diferente capacidad inmunitaria de las aves rapaces; y a los factores que afectan a la validez interna del estudio, como son los sesgos sitemáticos que afectan al diagnóstico. En el segundo estudio sobre triquinelosis, al no encontrar ninguna muestra positiva, no se probó el protagonismo de las aves rapaces en el ciclo epidemiológico silvestre de la zona templada. En cuanto a las parasitosis respiratorias, se observó una indicencia del 0,034% de la singamosis. En el estudio relativo a la tricomonosis, la infección es ubicuista y generalista, es decir, que afecta a gran parte de las aves rapaces, de todas las edades, y a lo largo de todo el año, aunque se denuncia un aumento de la incidencia durante el período de cría, siendo una de las causas de mortalidad más importantes entre los pollos de las rapaces. En el último estudio sobre endoparasitosis digestivas y filariosis, el 33% de las aves rapaces estudiadas están infestadas. Los más prevalente son nematodos (23%), seguido de cestodos (10%) y acantocéfalos (8%). Están más afectadas las aves rapaces falconiformes (51%), que las strigiformes (12%). Los cestodos y los acantocéfalos están asociados a paisajes o ecosistemas pseudoesteparios, de cultivos agrícolas cerealísticos, y en esta relación se cree que tienen mucho que ver, sus hospedadores intermediarios, principalmente artrópodos. Por primera vez, se han denunciado los siguiente sprásitos en las rapaces de la Península Ibérica: Gongylonema sp. en Tyto alba, Pseudidiogenes sp. en Milvus migrans, y Unciunia sp. en Falco naumanni.
  • "PARASITOFAUNA BRANQUIAL DE DENTEX DENTEX (LINNEO, 1758) (PISCES: SPARIDAE)" .
    Autor: GONZÁLEZ GONZÁLEZ PATRICIA.
    Año: 2004.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: BIBLIOTECA DEL CAMPUS DE BURJASSOT .
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGOCAS.
    Resumen: Se ha llevado a cabo un estudio sobre el parasitismo branquial de 91 dentones (Dentex, dentex), 61 salvajes y 30 cautivos. Se encontraron 8 especies paràsitas, de las cuales sólo Amyloodinium ocellatum apareció en los peces cautivos. El resto de especies halladas en los salvajes han sido: un microcotílido (Microcotyle Erytrini), un udonellido (Udonella caligorum), un trematodo digenea (Stephanostomum sp. metacercariae), tres copépodos (Caligus productus), Caligus diaphanus, Callevotis fallax), y un isópodo (Gnathia vorax). El udonélido Udonella caligorum fue hallado como hiperparásito o foronte de los tres copépodos. Se describen las prevalencias, intesidades y abundancias medias. Así como la distribución especial de cada parásito sobre el tejido branquial. También se examinan las combinaciones multiparásitas, así como un estudio de las comunidades parásitas halladas, los parámetros de diversidad encontrados y por último se ha realizado un estudio de los factores Peso/Talla del hospedador, con tal de estudiar en que manera el parasitismo afecta a dichos factores. No se ha encontrado ninguna correlación entre la presencia de los diferentes parásitos y la talla o peso de los hospedadores. Al estudiar el parasitismo según el peso de los hospedadores no se ha encontrado ningún patrón de comportamiento común a los diferentes parásitos. Tampoco parece que los parásitos afecten negativamente a la salud de los hospedadores. El multiparasitismo ha resultado ser una condición normal en el parasitismo de D. dentex.
  • BUSQUEDA DE GENES QUE CODIFICAN PROTEINAS UTILES PARA LA INMUNOPROTECCION FRENTE A LEISHMANIASIS .
    Autor: GONZALEZ GARCIA ANA CRISTINA.
    Año: 2003.
    Universidad: LA LAGUNA.
    Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: SE ESTUDIO LA RESPUESTA HUMORAL DE LA PROTEINA RIBOSOMAL L14 DE LEISHMANIA BRAZILIENSIS EN EL MODELO MURINO, OBTENIENDOSE COMO RESULTADO QUE DICHA PROTEINA ES CAPAZ DE SER EMPLEADA COMO MOLECULA CONTROL PARA EL ESTUDIO DE PROTEINAS INMUNOMODULADORAS. SE AISLO EL EXTREMO AMINO Y CARBOXILO TERMINAL DE LA PROTEINA RIBOSOMAL L25 DE L. BRAZILIENSIS Y SE ESTUDIO INDEPENDIENTEMENTE LA ANTIGENICIDAD E INMUNOGENICIDAD DE LA PROTEINA L25 COMPLETA, ASI COMO DE LA L25 AMINO Y CARBOXILO, IBTENIENDO QUE LA PROTEINA L25 NO SIRVE COMO MOLECULA DIAGNOSTICA POR LA ELEVADA REACTIVIDAD QUE PRESENTA Y QUE DICHA INESPECIFICIDAD SE DEBE A SU EXTREMO CARBOXILO TERMINAL. LA PROTEINA L25 COMPLETA DESENCADENA EN MODELOS MURINOS UNA ELEVADA RESPUESTA HUMORAL DE TIPO IgG1 Y UNA ESCASA PROLIFERACION LINFOCITARIA POR LO QUE PRODUCE LA INDUCCION DE UNA RESPUESTA CELULAR DE TIPO Th2 AL MISMO TIEMPO QUE GENERA UNA LIUGERA PROTECCION. LA PROTEINA L25 AMINO PRODUCE UNA POLARIZACION DE LA RESPUESTA HUMORAL HACIA EL TIPO IgG2a Y LA ESTIMULACION DE CELULAS ESPLENICAS POR LO QUE DETERMINA EN MODELOS MURINOS UNA RESPUESTA DE TIPO Th1 AL MISMO TIEMPO QUE PRODUCE UNA REDUCCION EN EL TAMANO DE LA LESION DEL 31%. SE IDENTIFICA POR PRIMERA VEZ UNA PROTEINA HELICASA QUE PERTENECE A LA SUPERFAMILIA 2 CONCRETAMENTE UNA DEVH-BOX HELICASA DE L. BRAZILIENSIS QUE GENERA UNA RESPUESTA HUMORAL MIXTA IgG1-IgG2A Y PRESENTA UNA LOCALIZACION CITOPLASMATICA
  • CARACTERIZACION DE LAS EXPLOTACIONES DE PEQUEÑOS RUMIANTES EN LA COMUNIDAD VALENCIANA .
    Autor: HERNANDEZ DE LUJAN SEBASTIAN.
    Año: 2003.
    Universidad: CARDENAL HERRERA CEU.
    Centro de lectura: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La metodología empleada en la recogida de datos en las explotaciones de pequeños rumiantes de la Comunidad Valenciana nos ha permitido su caracterización. Estas son explotaciones familiares, carentes de infraestructura básica, poco tecnificadas y deficientes en tecnología productiva y sanitaria. El análisis multivariante aplicado a los datos obtenidos ha permitido la diferenciación de las explotaciones ovinas y caprinas en cuatro tipologías. En el ganado ovino y caprino más de la mitad de las explotaciones desaparecerán en los próximos 10 años, lo que produciría un incremento en el tamaño de los rebaños. Los resultados obtenidos muestran que la frecuencia de las infecciones por nematodos parásitos, especialmente aquellos de localización gastrointestinal y pulmonar, en los rebaños de pequeños rumiantes de la Comunidad Valenciana es muy elevada. Sin embargo, suelen ser parasitosis de baja intensidad cuya presencia se traduce en proceso de carácter subclínico que normalmente pasan inadvertidos para el ganadero. La información obtenida indica, la falta de estrategias básicas en el control de los helmintos parásitos, la elección y administración de fármacos apropiados, así como el peligro de las resistencias a los antihelmínticos entre los productores.
  • HELMINTOFAUNA DE LA GAVIOTA PATIAMARILLA (LARUS CACHINNANS) EN GALICIA: ASPECTOS DESCRIPTIVOS Y ECOLÓGICOS .
    Autor: CORDEIRO PAREDES JOSÉ ANTONIO.
    Año: 2003.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: En este trabajo se lleva a cabo el estudio de los helmintos parásitos de la gaviota patiamarilla (Larus cachinnans) y de distintos aspectros relativos a su ecología parasitaria. Hemos examinado 324 ejemplares de estas aves, capturadas en distintas zonas de Galicia, desde Junio de 1994 a Febrero de 1996. Se han encontrado 37 especies de helmintos, entre los cuales 25 son de trematodos (Brachylaima sp. Brachylecithum microtesticulatum, Cardiocephaloides longicollis, Cryptocotyle lingua, Cryptocotyle concavum, Diplostomum spathaceum, Echinostephilla virgula, Galactosomum phalacrocoracis, Gigantobilharzia acotyla, Gymnophallus deliciosus, Gynaecotyla longiinstesinata, Himasthla elongata, Himsthla quissetensis, Knipowitschiatrema nicolai, Levinseniella (L.) propinqua, Maritrema gratiosum, Maritrema linguilla, Microphaullus primas, Microphallus similis, Ornithobilharzia canaliculata, Parochis acanthus, Phagicola minuta, Psilostomum brevicolle, Renicola sp., Stephanoprora denticulata), 5 son de cestodos (Alcataenia micracantha, Microsomacanthus ductilis, Tetrabothrius (O.) erostris, Wardium cirrosa, Cestoda sp.), 6 son de nematodos (Anisakis simplex, Contracaecum rudolphii, Cosmocephalus obvelatus, Eucoleus contortus, Pracuaria adunca, Tetrameres (T.) skrjabini) y 1 de acantocéfalos (Arhythmorhynchus longicollis). 22 especies son citadas por primera vez en España (C.concavum, E.virgula, G.phalacrocoracis, G.acotylea, G.delociosus, G.longiintestinata, H.elongata, H.quissetensis, L.propinqua, M.gratiosum, M.linguilla, M.similis, P.acanthus, P.minuta, P.brevicolle, S.denticulata, A.micracantha, M.ductilis, W.cirrosa, C.rudolphii, T.skrjabini y A.longicollis). Tetrabothrius erostris fue la especie más prevalente, con un 79,6% de parasitación, seguida por Cosmocephalus obvelatus (47,8%), Cryptocotyle lingua (37,4%), Gymnophallus deliciosus (30,9%), Gynaecotyla longiintestinata (22,8%), Paracuaria adunca (21,9%), Brachylecithum microtesticulatum (17,6%), Eucoleus contortus (14,5%) y Microphallus similis (9,3%). Las restantes especies presentaban prevalencia inferiores al 7%. En cuanto a su abundancia numérica, la especie dominante fue M.similis, con 5909 ejemplares, seguido por T.erostris (1920), B.microtesticulatum (1893), C.lingua (1836), G.longiintestinata (1753), G.deliciosus (1309) y M.primas (506). De las restantes especies se obtuvieron menos de 500 ejemplares. Todas las especies presentaron una distribución agregada excepto G.acotylea y G.phalacrocoracis, que se distribuyen al azar. En general, los ejemplares juveniles presentaban un prevalencia y una intensidad de parasitación menores que las de los inmaturos y adultos. Son excepciones las siguientes especies: C.obvelatus, G.deliciosus, A.micracantha, C.lingua, M.linguilla y Brachylaima sp. En la mayoría de los casos, las diferencias en prevalencia, intensidad de parasitación y abundancia media en relación con el sexo del hospedador fueron poco significativas. Han presentado patrones estacionales más o menos definidos las siguientes especies: C.longicollis, G.deliciosus, M.similis, M.linguilla, G.longiintestinata, H.elongata y P.adunca.
  • PATOGENIA DE LA NEOSPOROSIS EN EL FETO BOVINO Y EN UN MODELO MURINO EXPERIMENTAL .
    Autor: COLLANTES FERNÁNDEZ ESTHER.
    Año: 2003.
    Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: Neospora caninum es un protozoo parásito considerado como uno de los principales agentes implicados en el aborto bovino. El desenlace de la enfermedad depende múltiples factores no muy bien conocidos, siendo fundamental disponer de las herramientas necesarias para investigar la influencia de estos factores y que permitan la detección y cuantificación del parásito. El primer objetivo consistió en el desarrollo de una PCR en tiempo real utilizando SYBR Green I o sondas TaqMan para la cuantificación y detección de N.caninum en los tejidos infectados. Un método similar fue desarrollado para la cuantificación del gen 28S ARNr del ADN del hospedador. El método más sensible fue el SYBR Green I el cual se aplicó con éxito en una batería de muestras de encéfalo, lográndose una elevada repetitividad y precisión. El segundo objetivo fue el desarrollo de un modelo murino experimental para el estudio de la patogenia de la infección por N.caninum. Para su cumplimiento se propusieron dos subobjetivos. El primer subobjetivo due el estudio del efecto de los factores dependientes del hospedador y del parásito en el desarrollo de la infección crónica por N.caninum en el modelo murino. Los resultados obtenidos sugieren que la infección crónica por N.caninum en el modelo murino estuvo influenciada por (i) la estirpe del ratón: BALB/c fue más apropiada para el desarrollo de la infección crónica que la estirpe ICR; (ii)tratamiento inmunodepresor; el acetato de metilprenisolona fue más efectivo que la ciclofosfamida o vinblastina y (iii) la dosis infectiva: la dosis más alta produjo una mayor gravedad de la infección. No se observaron diferencias en relación con las vías de inoculación. En los ratones de la estirpe BALB/c existió una asociación entre la gravedad de la lesión y la carga parasitoria en el cerebro. En el segundo subobjetivo se caracterizó la distribución temporal y la cinética de la carga parasitaria en la sangre y en diversos órganos durante el curso de la infección de N.cainum. La diferencia en virulencia entre aislados también se estudió. Se pudieron diferenciar tres fases. La primera (desde el día 1 al 5-7 PI) caracterizada por una diseminación sistémica de los taquizoítos y su multiplicación en diferentes órganos. El segundo periodo (desde el día 5-7 hasta el 11-13 PI) el parásito se detectó en pulmón y cerebro. En la tercera fase (a partir del día 13 PI) el parásito permaneció en cerebro hasta el final del experimento. Se observaron diferencias en la virulencia de los aislados NC-Liv y NC- y se demostró una asociación entre la carga parasitaria en cerebro y la presencia de sintomatología. El último objetivo consistió en el estudio de la infección por N.caninum en fetos bovinos abortados, investigando la influencia de la edad fetal (primer, segundo y tercer periodo) y las características epidemiológicas del aborto (epidémico, endémico, y esporádico) sobre la distribución-carga parasitaria y sobre la presencia y gravedad de las lesiones en los diferentes órganos. Se observó una mayor distribución y cargas parasitarias, así como lesiones más graves en los fetos correspondientes a primer y segundo periodo de gestación. En el último período de gestación, el feto fue capaz de controlar la infección. Los fetos de abortos epidémicos mostraron una mayor diseminación y cargas del parásito, principalmente, en corazón, así como lesiones más graves. Este estudio también demostró una relación entre la gravedad de la lesión y la carga parasitaria en el corazón y en el hígado. En el SNC no se encontró esta asociación y en algunos fetos se observaron lesiones moderadas o graves y bajas cargas parasitarias, principalmente, en los fetos del tercer periodo.
  • CAPACIDAD INMUNOPOTENCIADORA E INMUNOMODULADORA DE ADYUVANTES DE DIFERENTE NATURALEZA SOBRE LA PROTEÍNA Q DE L.INFANTUM. ESTUDIOS DE PROTECCIÓN EN RATONES BALB/C FRENTE A LA INFECCIÓN POR L.INFANTUM .
    Autor: PARODY DE LA FUENTE NURIA.
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTONOMA DE MADRID.
    Resumen: En este trabajo se analizara la respuesta inmune en el modelo ratón (Balb/c) generada por la administración de cuatro antígenos recombinantes (LiPs2a, LiP2b, HsA y LiP0) de Leishmania infantum fusionados en una proteína sintética (Proteína Q), y como esta respuesta es modulada por el empleo de una colección de adyuvantes de diferente naturaleza. Además, se analizara como esta respuesta varia cuando la Q se inocula en forma de DNA o de proteína. El fin de estos ensayos es el diseño de estrategias de vacunación frente a la infección con L.infantum basadas en la administración de la Q. Se llevan a cabo dichos ensayos de protección frente a la infección con L infantum en el modelo Balb/c, se observa una protección (valorada como reducción de la carga parasitaria) si empleamos como vacuna la Q junto al OA (oligonucleótido rico en secuencias CpG diseñado por el laboratorio). Así mismo se analizó la variación de diferentes poblaciones celulares inducida por la administración de esta vacuna.
  • HETEROGENEIDAD GENÉTICA DE BLASTOCYSTIS HOMINIS: IMPLICACIONES PATOGÉNICAS .
    Autor: DOMÍNGUEZ MÁRQUEZ M. VICTORIA.
    Año: 2003.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: MEDICINA.
    Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
    Resumen: B.hominis es el productor de la blastocistosis, una parasitosis intestinal humana de significación clínica incierta. Con el objetivo de detectar variación genética intraespecífica y establecer asociaciones entre las variantes encontradas y diferencias de patogenicidad se obtuvieron 51 aislados procedentes de muestras fecales clínicas, que se cultivaron y axenizaron de acuerdo con el protocolo descrito por Lanuza et al (1997). Dichos aislados fueron sometidos a restricción con tres actividades enzimáticas (Alu I, Hinf I y Rsa I) tras amplificación del gen 16 S con los cebadores RD3 y RD5 (protocolo de Clark 1997) y F1 y R1 (protocolo de Böhm-Gloning et al 1997). El resultado conjunto de estos métodos de RFLP (polimorfismo de fragmentos de restricción) definió 5 ribodemas, uno de los cuales se asoció significativamente con procesos diarréicos agudos. Se evaluó la eficacia del estudio de secuencias repetitivas de ADN como marcadores de diversidad (protocolo de Init et al, 1999) demostrando ser útiles en cultivos puros de Blastocystis hoinis y también se demostró la existencia de poblaciones isoenzimáticas en estos aislados. Blastocystis hominis es una especie genéticamente heterogéna con diferencias intraespecíficas a nivel de patogenicidad.
  • ECHINOSTOMA FRIEDI TOLEDO ET AL., 2000 (TREMATODA: ECHINOSTOMATIDAE): ESTUDIO EXPERIMENTAL DEL BINOMIO MIRACIDIO-GASTEROPODO Y CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DEL ADULTO .
    Autor: TRELIS VILLANUEVA MARIA.
    Año: 2003.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: Echinostoma friedi es un echinostomátido con 37 espinas en el collar cefálico, de ciclo biológico triheteroxeno acuático e incluido en el problemático grupo "revolutum". En el presente trabajo, se ha caracterizado biológicamente al miracidio estudiando el efecto que pueden tener sobre la eclosión del huevo y la longevidad y capacidad infectante del miracidio factores tales como especie y tamaño del gasterópodo, edad y dosis miracidial, pH y salinidad del medio acuático, y presencia de otros gasterópodos y miracidios de otros echinostomátidos. A pesar de las condiciones fisicoquímicas del medio acuático y las interferencias en la infectividad miracidial, con una dosis de 5 miracidios y gasterópodos de tamaño juvenil se consigue el mayor éxitoo de infección. Además, se ha conseguido la infección tanto en caracoles de la misma localización geográfica que el parásito (lymneidos, como Radix peregra, y planórbidos, como Gyraulus chinensis), como en caracoles de otras procedencias geográficas (Biomphalaria glabrata). Mediante el análisis de cinco parámetros (infectividad, mortalidad, duración de los periodos prepatente y patente, y producción cercariana) se ha podido valorar el grado de compatibilidad entre esta especie parásita y los distintos gasterópodos primeros hospedadores intermediarios, quedando R.peregra como hospedador requerido y G.chinensis y B.glabrata como hospedadores adecuados. Además, se ha evaluado los efectos de la parasitación en el crecimiento, supervivencia y fecundidad del gasterópodo primer hospedador intermediario. Finalmente, se ha caracterizado molecularmente al verme adulto de E.friedi mediante el análisis de distintos marcadores moleculares (gen 28S e ITS1-gen 5,8S-ITS2 del ADNr y gen ND1 del ADNmt), y se confirma confirmando la posición de E.friedi dentro de la familia Echinostomatidae y más concretamente dentro del grupo "revolutum".
  • CONTROL DE ACAROS CONTAMINANTES DEL JAMÓN IBÉRICO .
    Autor: SÁNCHEZ LÓPEZ JAVIER.
    Año: 2002.
    Universidad: EXTREMADURA .
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: Con el presente trabajo se realiza un estudio sobre los acaros contaminantes del jamón curado. A este respecto, se pretende ampliar el conocimiento de esta plaga desde determinados aspectos biológicos y fisiológicos que no habían sido tratados anteriormente con profundidad, así como establecer pautas para el control de las poblaciones de ácaros en los secaderos y bodegas mediante el estudio de diferentes estrategias que incluyen métodos químicos naturales y métodos físicos. Con objeto de conocer la etiología de la plaga, se recogieron muestras de ácaros directamente de los jamones infestados, y se procesaron para su identificación en el microscopio. Paralelamente, a fin de disponer de especímenes suficientes para la realización de pruebas de control en laboratorio, se procedió al cultivo in vitro de los ácaros utilizando dos medios de cultivo diferentes, pienso-levadura y jamón. Por lo que a diseños experimentales se refiere, se plantaron dos protocolos de actuación para el control de los ácaros: en laboratorio y a escala industrial. Las pruebas de laboratorio comprenden diferentes tipos de ensayo. En primer lugar, se trató de estudiar el efecto acaricida por inhalación de determinados aceites esenciales (romero, menta, eucalipto, geranio, melisa, clavo y lavanda) y de algunos de sus principios activos (linalol, timol, acetato de linalilo, alfa-terpineol, gamma-terpineno y carvacrol), pero en este último supuesto tanto por inhalación como por contacto directo, valorando la eficacia de su empleo sobre muestras de jamón contaminado y, asimismo, su posible influencia en las características organolépticas del producto a través de una prueba de valoración sensorial. Se estudió también la eficacia de la manteca de cerdo al ser aplicada sobre las piezas. Finalmente, se plantearon dos experiencias encaminadas a conocer los efectos que producen las microondas y los ultrasonidos sobre los ácaros. La totalidad de los ensayos en laboratorio se realizaron sobre Tyrophagus putrescentiae.
  • CONTRIBUCIÓN AL CONOCIMIENTO DE LA BIONOMÍA DE DIGÉNIDOS DE LA FAMILIA BRACHYLAIMIDAE JOYEUX ET FOLEY, 1930 EN EL DELTA DEL LLOBREGAT (BARCELONA) .
    Autor: GONZÁLEZ-MORENO PORTUGAL OLGA .
    Año: 2002.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: El delta del Llobregat es un espacio natural periurbano próximo a la ciudad de Barcelona. La diversidad natural de este entorno ha sido estudiada desde el punto de vista de sus especies parásitas, por cuanto los impactos antropogénicos y los cambios ambientales derivados pueden afectar a la existencia de sus poblaciones y al conocimiento futuro de sus especies. Se detectaron dos especies no descritas anteriormente de trematodos digénidos adscribibles al género Brachylaima Dujardin, 1843 y a la familia Brachylaimidae Joyeux et Foley, 1930, Brachylaima mascomai Gracenea y González-Moreno, 2002 y Brachylaima sp.2, tanto en sus formas larvarias de esporocisto, cercaria y metacercaria como en su forma adulta. Especies pertenecientes al mismo género han sido detectadas parasitando seres humanos en Australia. Los ciclos biológicos de ambos digénidos son de tipo triheteroxeno presentándose la forma infestante para los hospedadores vertebrados (metacercaria) en gasterópodos terrestres de interés gastronómico. El helícido Pseudotachea splendida actúa como primer hospedador intermediario para Brachylaima mascomai y diversas especies de gasterópodos terrestres Helicoidea (Cermuella cesptium, Helix (C.) aspersa, Otala punctata, Pseudotachea splendida y Theba pisana) como segundos hospedadores intermediarios. Rattus rattus y R.norvegicus actúan como hospedadores definitivos naturales en tanto que Mus musculus, M.spretus, Apodemus sylvaticus, Meriones unguiculatus, R.norvegicus y el insectívoro Crocidura russula permiten el desarrollo a nivel experimental del adulto. Brachylaima sp.2 presenta como primer hospedador intermediario Helix (C.) aspersa y como segundos hospedadores intermediarios las especies Helix (C.) aspersa y Otala punctata. El múrido Mus spretus y el sorícido Crocidura russula actúan en el delta del Llobregat como hospedadores definitivos naturales para la especie, en tanto que Mus musculus permite la evolución experimental del digénido. Estudios de impregnación argéntica o quetotaxia efectuadas a cercarias de ambas especies ha revelado la presencia de diferencias en el número de papilas de los niveles SII y SIII del acetábulo y en los niveles PII y PIII del cuerpo. Las observación de las papilas a microscopía electrónica de barrido ha permitido su caracterización morfológica y constatar el carácter argentofílico o no argentofílico de las mismas: papilas con proceso digitiforme (Argentofílicas), papilas en cúpula (no argentofílicas) y papilas con orificio central y base en forma de toro (argentofílicas). La comparación estadística de las poblaciones de adultos naturales y experimentales de las dos especies simpátridas del delta del Llobregat ha permitido su discriminación estadística. Fueron establecidas las funciones discriminantes considerando las variables anchura corporal, distancia entre ventosa, anchura y longitud de los huevos. Asimismo el análisis fenético considerando diversas especies del género Brachylaima con orígenes diversos ha posibilitado las valoración de las similitudes o proximidades morfológicas globales y su discriminación respecto a las especies comparadas. Los estudios de crecimiento realizados con los adultos de ambas especies mostraron alometría positiva respecto a la variable distancia entre la ventosa ventral y el primer testículo en Brachylaima mascomoai y en Brachylaima sp.2 presentando además esta especie alometria positiva para la variable distancia entre ventosas. Las variables morfométricas longitud corporal, anchura corporal, anchura de la faringe y distancia entre la ventosa ventral y el primordio genital ha permitido la discriminación de las poblaciones naturales y experimentales de las cercarias Brachylaima mascomai y Brachylaima sp.2. La ultraestructura del tegumento y las metacercarias de Brachylaima mascomai concuerda con el patrón arquitectónico característico del tegumento de los trematodos digénidos. A nivel de estadio adulto, se constata la presencia de espinas dentadas con estructura paracristalina y un único tipo de vesículas discoides bicóncavas. El tegumento de la metacercaria resulta similar al del adulto y presenta un glucocálix amplio que lo recubre en toda su superficie a excepción de las ventosas y el poro excretor. Los procesos de espermatogénesis y espermiogénesis en los adultos son consistentes con los observados en otras especies de digénidos. El cuerpo intercentriolar de las espermátidas presenta densificaciones en su cara externa coincidentes con las estriaciones transversales de las raíces ciliares. La ultraestructura del espermatozoide muestra una región no nuclear conformada por dos axonemas flagelares con estructura 9+"1" y abundante glucógeno, presentando en la región no nuclear, núcleo, mitocondria, dos axonemas flagelares y abundante glucógeno. Se constata que la mitocondria finaliza antes que el núcleo, el cual finaliza antes que el segundo axonema. La realización de inmunomarcajes para la localización de actina permitió su detección en las espinas tegumentarias de adultos y metacercarias Brachylaima mascomai, así como en las capas de musculatura circular, longitudinal y transversal en los adultos, presentándose éstas dos últimas entrecruzadas. Se detecta la presencia de actina a nivel del bulbo nervioso y de los microvilis intestinales de los adultos. La realización de inmunomarcajes para alfa-tubulina permitió su localización a nivel de los conductos parenquimáticos, en el citoplasma de las células parenquimáticas y en el espacio intratesticular asociada al citoplasma de las espermatocitos, a la periferia de las es permátidas jóvenes y a los axonemas flagelares y microtúbulos corticales de los espermatozoides. La proteina alfa-tubulina se evidencia en las metacercarias como una banda de 52-53 KDa al realizar electroforesis (SDS-Page).
  • VARIACIÓN GENÉTICA Y MORFOLÓGICA EN POBLACIONES NATURALES DE HEMIÚRIDOS MARINOS (DIGENEA) .
    Autor: VILAS PETEIRO ROMÁN.
    Año: 2002.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: Las poblaciones de helmintos endoparásitos se caracterizan por altas tareas reproductivas que muchas veces son el resultado de mecanismos de reproducción clonal y autofecundación generalizada. La génesis de una progenie muy numerosa en un breve espacio de tiempo, junto con la dispersión de su fuente de recursos, la población hospedadora, favorecen la existencia de grandes fluctuaciones demográficas en las poblaciones del parásito. Factores tales como la reproducción asexual, la inestabilidad demográfica de la población y una estructura reproductiva muy influenciada por la fragmentación del hábitat, que es inherente al parasitismo, deberían dar lugar a tamaños de población eficaces relativamente bajos y, por consiguiente, estar sometidas a fuertes efectos de deriva genética. En estas condiciones son previsibles poblaciones genéticamente homogéneas, aunque considerablemente distanciadas desde el punto de vista genético, incluso a una escala microespacial, siempre que pueda presuponerse un flujo génico interpoblacional escaso, lo cual es algo admisible para muchos parásitos porque muestran pocas posibilidades de dispersión. Sin embargo, la complejidad de ciclos vitales y la diversidad ecológica de los helmintos parásitos, podrían explicar una mayor variedad de estructuras genético-poblacionales. En este trabajo se estudia la forma en que el ciclo heteroxeno de un trematodo parásito de teleósteos marinos (Conger conger y Anguilla anguilla) afecta a la distribución espacio-temporal de la variabilidad genética de la población parasitaria. Concretamente se ha analizado el efecto homogeneizante de una eventual participación de hospedadores paraténicos. Para ello se ha estudiado mediante marcadores alozímicos por electroforesis en gel de almidón la variación genética de 7 poblaciones de tres especies del género Lecithochirium, así como de 12 infrapoblaciones de la especie L.fusiforme. Se ha extendido el estudio de la variabilidad poblacional a asepctos morfológicos, y se ha analziado el grado de parasitación a lo largo del tiempo, con el fin de encontrar claves en las características demográficas de la población que sirvan para interpretar los datos genético-poblacionales. Hasta la fecha no existen estudios que analicen la estructura genética de poblaciones de platelmintos que parasitan peces marinos, por lo que este trabajo explora por primera vez la variación genética a nivel tanto poblacional como infrapoblacional en este tipo de organismos. Los resultados obtenidos contradicen, en parte, las previsiones del modelo teórico de Price, descrito anteriormente. Así, las poblaciones estudiadas revelaron grados de variabilidad genética relativamente elevados y similares a los mostrados por poblaciones de invertebrados de vida libre. No obstante, se caracterizaron también por profundas desviaciones del equilibrio Hardy-Weinberg, siempre hacia un déficit de heterocigotos. Tales desviaciones se produjeron además dentro de cada una de las infrapoblaciones estudiadas y no parecen deberse al modo de reproducción, ya que algunos loci reflejaron frecuencias genotípicas que no se desviaron significativamente de las esperadas por el modelo de Hardy-Weinberg, que asume panmixia. Por otro lado, poblaciones distanciadas por más de 1000 Km no manifestaron disferencias sustanciales en sus frecuencias génicas. La explicación más probable de estos resultados reside en una importante influencia de los hospedadores paraténicos sobre la estructura genética de las poblaciones del parásito. Dichos hospedadores exhiben una alta movilidad que podría poner en contacto poblaciones parasitarias relativamente distantes. Un incremento del flujo génico interpoblacional, como consecuencia del aumento de la dispersión parasitaria, favorecido por la movilidad del hospedador, en conjunción con una intensa selección natural estabilizadora, parecen ser suficientes para contrarrestar la diversificación causada por la deriva genética en el espacio. Dado que los hospedadores paraténicos albergan formas parasitarias de resistencia, la constitución de la infrapoblación correspondiente al hospedador definitivo, se llevaría a cabo no sólo a partir de muestras geográficas genéticamente distintas, sino también por la incorporación de diferentes genotipos pertenecientes a distintas generaciones. El efecto Wahlund resultante explicaría el defecto de heterocigotos detectado en las infrapoblacional. Aunque las diferencias en el espacio son relativamente pequeñas, la constatación de cierto efecto temporal a la hora de explicar la variación en heterocigosis entre infrapoblaciones recolectadas en una misma localización geográfica, sugiere que el flujo génico temporal posibilitado por los hospedadores paraténicos es insuficiente para imponerse a la variación aleatoria de las frecuencias génicas causada por el error de muestreo que entraña cada generación. Las desviaciones del equilibrio Hardy Weinberg parecen ser esencialmente producto de un efecto Wahlund temporal. Si bien la homogeneización genética poblacional que cabe esperar bajo semejantes circunstancias debería conducir al equilibrio Hardy-Weinberg, es probable que las infrapoblaciones carezcan del tiempo necesario para alcanzar dicha estabilización genética. De hecho, el grado de parasitación de L.fusiforme en C.conger fluctuó considerablemente a lo largo del tiempo, de manera tal que los parámetros de intensidad y abundancia revelaron una pauta claramente estacional, indicando que este parásito se reproduce por fecundación cruzada básicamente durante los meses de invierno, y que las infrapoblaciones de adultos, en general, no duran más de tres meses. Desde el punto de vista genético la infrapoblación supone, por consiguiente, un sistema muy efímero. Esta inestabilidad demográfica explicaría fuertes efectos de deriva genética que causan principalmente diferenciación en el tiempo, a pesar de la existencia de hospedadores de espera. El flujo génico incrementado por la participación de hospedadores paraténicos contribuiría además a explicar los altos niveles de variabilidad genética que se han estimado. En cualquier caso, la complejidad del ciclo vital de Lecithochirium es la responsable de que la estructura genética de sus poblaciones no se corresponda con las previsiones del modelo de Price. Las dos poblaciones de L.rufoviride que se han estudiado también revelaron grados de variabilidad genética relativamente elevados y fuertes desviaciones del equilibrio Hardy-Weinberg, hasta el punto de que algunos loci polimórficos mostraron ausencias de heterocigotos estadísticamente muy significativas. La explicación más probable para los resultados obtenidos es la existencia de al menos una especie críptica en tales poblaciones. El locus idh permitió diagnosticar todas las especies del género Lecithochirium que se han descrito en el Atlántico Norte, incluida la supuesta especie gemela. La existencia de un nuevo grupo no interfecundante es simpatía con L.rufoviride se ve apoyada por la correlación encontrada entre un morfotipo, particular respecto al lóbulo preoral, no descrito con anterioridad, con determinados marcadores alozímicos de los loci Pgd e ldh que protagonizaron la subdivisión genética detectada en las poblaciones de L.rufoviride. La única población que se ha estudiado de L,musculus también reveló ausencias de heterocigotos estadísticamente muy significativas para varios loci polimórficos, así como dos morfotipos diferentes. Debido a que no se ha logrado establecer relación alguna entre tal variación morfológica y la subdivisión genético-poblacional, es posible que ambas morfologías sean el resultado de plasticidad fenotípica inducida por el hospedador, pues la forma menos común fue la más frecuente en C.conger. El análisis filogenético llevado a cabo sugiere que las especies más próximas entre sí son aquellas que manifiestan una mayor similitud en la predilección por el hospedador definitivo, es decir, L.rufoviride y L.fusiforme. Estos resultados proporcionan un fundamento evolutivo a la decisión de no clasificar a L.rufoviride en un génro particular sobre la base de la ausencia de hoy presomático, corroborando así la clasificación morfológica actual.
  • DESARROLLO DE UN SISTEMA PARA CONCENTRAR Y DETECTAR CRYPTOSPORIDIUM PARVUM EN AGUAS .
    Autor: MÉNDEZ HERMIDA FERNANDO.
    Año: 2002.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
    Resumen: Utilizando la unidad de filtro desarrollada denominada Genera, se consiguieron altos porcentajes de retención de ooquistes de C.parvum. Esta unidad de filtro presenta la siguientes características: está compuesta por 60 anillos de gomaespuma con un diámetro externo de 55 mm por 15 mm de diámetro interno, una compresión en altura de 25 mm., lograda por dos discos plásticos con el mismo diámetro externo que los anillos. La compresión de los anillos se reveló como un factor muy importante a la hora de retener los ooquistes. Los anillos están comprimidos a nivel superior e inferior por dos discos plásticos con el mismo diámetro externo que los anillos. Las unidades de filtrado (anillos de gomaespuma y discos) se diseñaron para ser usadas dentro de una cápsula hermética. El agua entra en la cápsula, entre la unidad de filtrado y la pared de la misma, atravesando los anillos de gomaespuma desde su diámetro externo hasta el espacio central, siguiendo una dirección tangencial en su paso a través del filtro, y saliendo finalmente por las perforaciones del anillo de salida. Este diseño permitió obtener una velocidad de flujo de 4 l/min y porcentajes de captura superiores al 99%, tras filtrar 100-1.800 l de agua contaminada con ooquistes de C.parvum en los 500 ml iniciales. Se utilizaron dos tipos de cápsulas para ensayar al modelo de filtro denominado Genera (tipo 1 y tipo 2). Para el modelo tipo 1 se evaluaron dos protocolos distintos para procesar las muestras hídricas: (i) una elución de tipo A, seguida del proceso de concentración 1, utilizando un concentrador magnético por agitación. Los porcentajes de recuperación ooquística en este ensayo oscilaron entre 68,7-100%; y (ii) para el segundo protocolo se utilizó una modificación del proceso anteriormente descrito que permite la elución de la muestra con una menor manipulación de las unidades de filtro (elución C), seguida de una concentración del eluyente utilizando, de nuevo, un concentrador magnético por agitación especialmente desarrollado (concentración 2). La recuperación media de ooquistes fue aproximadamente del 89,2% en aguas destinadas al consumo y del 88,8% en aguas fluviales con distintos niveles de turbidez. Este protocolo permite filtrar 10- 4.000 l de agua destinada al consumo y 10-20 l de agua turbias. El sistema está aprobado como método estándar para la detección de Cryptosporidium en medios hídricos en el Reino Unido (Drinking Water Inspectorate, 1999) y en los EEUU (USEPA, 2001). Los resultados obtenidos, demuestran que la compresión de los anillos de gomaespuma es muy eficaz para la captura de ooquistes y que la descompresión de los mismos y su posterior lavado, permite eluir las formas parasitarias de la matriz adecuadamente. Por otra parte, el modelo de filtro denominado Genera tipo 2, permitió la elución de las formas ooquístas (elución B), descomprimiendo parcialmente la unidad de filtro dentro de la cápsula y recirculando la solución de elución a través de la misma con una bomba peristáltica, para seguidamente ser concentrado el eluyente obtenido (concentración 1). Aunque la manipulación de la muestra es muy reducida utilizando este protocolo, los porcentajes de recuperación ooquística oscilaron entre 23,3-47,5%. Estos datos pueden ser consecuencia de una ineficaz elución de la muestra, ya que la unidad de filtro no se descomprime completamente durante el proceso, dificultando así, la elución efectiva de las formas parasitarias presentes en la muestra.
  • LA RESISTENCIA DE LOS TRICOSTRONGÍLIDOS OVINOS A LOS ANTIHELMÍNTICOS. SITUACIÓN EN LA PROVINCIA DE LEÓN Y DESARROLLO DE NUEVOS MÉTODOS DE DETECCIÓN .
    Autor: ÁLVAREZ SÁNCHEZ MIGUEL ÁNGEL .
    Año: 2002.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA DE LEÓN.
    Resumen: No siempre que se desparasita un rebaño, se obtinen los resultados esperables; a veces se producen fallos terapéuticos que dificultan el control antiparasitario. Uno de los más importantes es la resistencia antihelmíntica, que está ampliamente distribuida a nivel mundial afectando a los principales antihelmínticos de amplio espectro. Por ello, los objetivos que nos hemos planteado en nuestro estudio han sido obtener información sobre la prevalencia de la resistencia antihelmíntica en la provincia de León, sobre los factores asociados su aparición y desarrollar nuevos métodos para su detección. El 36,5% de los rebaños estudiados en la provincia de León presentaron algún tipo de resistencia antihelmintica, lo que supone un porcentaje similar al observado en otros países como el Reino Unido, Australia o Nueva Zelanda, donde la resistencia es el factor limitante más importante de la producción en los pequeños rumiantes. La información obtenida de las fichas de establo demostró que algunos factores, como la raza, el número de tratamientos, la carga parasitaria, la mala elección del antihelmíntico, el cálculo incorrecto de la dosis, el tipo de manejo, etc, están estrechamente asociados con la resistencia antihelmíntica. Por tanto, antes de desparasitar o de diseñar programas para el control de la resistencia antihelmíntica y, en definitiva, de la tricostrongilidosis, debería de hacerse una buena anamnesis del rebaño. El primer método de detección desarrollado fue el ensayo de inhibición de la ingestión larvaria, que detecta resistencia frente a lactonas macrocíclicas e imidazotiazoles. Es una técnica fácil de realizar y de rápido desarrollo tanto en condiciones experimentales como de campo. Puede diferenciar cepas resistentes en cualquier momento de la infección y presenta una buena correlación con otras técnicas, lo que hace que sea una prueba idónea para el diagnóstico rápido en condiciones de campo, así como para el seguimiento de rebaños que han presentado algún problema de resistencia. El segundo método de diagnóstico desarrollado detecta resistencia frente a los bencimidazoles. Para ello, realizamos una PCR en tiempo real a partir del isotipo 1 de la beta-tubulina, diferenciando cepas susceptibles y resistentes de las principales especies de tricostrongílidos. Además, esta técnica muestra una buena sensibilidad, detectando los primeros parásitos resistentes que aparecen en la población.
  • CONTRIBUCIÓN AL CONOCIMIENTO DE LOS MALÓFAGOS PARÁSITOS DE AVES RAPACES EN LA ZONA SUR-OCCIDENTAL DE CASTILLA Y LEÓN .
    Autor: FERNÁNDEZ PÉREZ M. PILAR.
    Año: 2002.
    Universidad: LEON.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: Se ha realizado un estudio sobre la parasitación por malófagos (Insecta: Phthiráptera) en rapaces que habitan en la zona Sur-occidental de la Comunidad de Castilla y León. El estudio se realizó sobre un total de 228 aves rapaces que por diversos motivos ingresaron en el Centro de Recepción de Fauna Silvestre "Las Dunas", dependiente de Junta de Castilla y León (Servicio Territorial de Medio Ambiente de Salamanca), durante los años 1998, 1999 y 2000. Se incluyeron seis especies de rapaces de hábitos nocturnos y 17 de hábitos dirunos, con objeto de estudiar los malófagos. Se determinaron los géneros y especies de toda la población de malófagos recogida, citándose siete especies por primera vez en España, constituyendo una de ellas, Strgiphilus laticephalus, la primera cita mundial sobre Asio otus. También se citaron por primera vez nueve especies de aves como hospedadores de ciertas especies de malófagos. La prevalencia media de parasitación en la población de rapaces alcanzó el 64,47%, variando el número de malófagos recogido por animal parasitado entre 1 y 335. Se presentan datos sobre el análisis de la influencia que sobre la tasa de infestación han tenido los factores siguientes: fecha de recogida del ave (estacionalidad), sexo y edad del ave, carácter migrador o sedentario, hábitos diurnos o nocturnos, ingreso vivo o muerto, y causa por la que se produce el ingreso en el Centro. Los hábitos de vida diurna o nocturna a pesar de no haber dado lugar a diferencias significativas, han mostrado un mayor número de aves parasitadas en especies diurnas (68,75%) que en nocturnas (59%). Analizando detenidamente todos los factores anteriores, se concluye que únicamente el carácter migratorio o sedentario aparece como el factor significativamente a la prevalencia y a la intensidad de parasitación en estas aves.
  • ESTUDIO MOLECULAR INTEGRADO DE LAS OSTRAS Y DE SU PARÁSITO MARTEILIA REFRINGENS MEDIANTE EL ANÁLISIS DEL ADN REPETIDO .
    Autor: LÓPEZ FLORES INMACULADA.
    Año: 2002.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: DPTO. BIOLOGÍA EXPERIMETNAL, FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMETNALES - UNIVERSIDAD DE JAÉN.
    Resumen: La familia Ostreidae incluye a un número de especies altamente productivas e importantes, distribuidas en diversas regiones del mundo, algunas de las cuales han sido cultivadas para el consumo humano desde la época del Imperio Romano. A pesar de los numerosos estudios morfológicos, el conocimiento de la posición taxonómica de las principales especies de ostras de interés comercial sigue siendo superficial. La elevada plasticidad de la concha de estos bivalvos, que varían incluso dentro de la misma especie dependiendo de las características del hábitat en el que se desarrolla el animal, hace muy difícil el reconocimiento de características morfológicas que permitan identificar la especie a la que pertenecen los individuos en el medio natural. Debido a la confusión que a menudo generan los caracteres morfológicos en este grupo de moluscos bivalvos, en los últimos años se han aplicado técnicas de biología molecular en un intento de llevar a cabo la identificación de individuos basándose en diferentes marcadores genéticos. En este sentido, la utilización de un tipo de secuencias de evolución rápida, como es el ADN satélite, podría contribuir al conocimiento de las relaciones existentes entre las especies este grupo, así como a la identificación de especies estrechamente relacionadas entre sí, ya que este marcador ha demostrado capacidad resolutiva entre especies incluso a nivel de población. En este trabajo se ha llevado a cabo la caracterización de la familia Hind III de ADN satélite y de la familia de ADN repetido Bcl I en dos especies de ostras pertenecientes al género Ostrea, I.edulis y O.stentina, y en cinco especies del género Crassostrea, C.angulata, C.gigas, C.gasar, C.rivularis, C.virginica. Las secuencias nucleotídicas de este ADN satélite han sido utilizadas para llevar a cabo un análisis filogenético de estas especies y para la identificación molecular de algunas de ellas. Además, se ha desarrollado un método de diagnóstico molecular mediante PCR para determinar la presencia del protozoo Marteilia refringens, parásito de O.edulis, la especie de ostra comestible de mayor calidad y de consumo más extendido en el mundo. Este parásito ha sido también localizado en el mejillón M.galloprovincialis, otra especie de amplio consumo. Para el desarrollo de este método se ha identificado una secuencia específica del parásito, localizada en el espaciador (IGS) existente entre los genes que codifican para los ARNs ribosómicos 28S y 18S. El grado de sensibilidad del metodo de diagnóstico diseñado se ha determinado mediante la amplificación de un fragmento de la secuencia del espaciador IGS a partir de ostras con diferente grado de infección y a partir de diluciones de ADN del parásito. Finalmente, el fragmento del espaciador IGS utilizado para el diagnóstico molecular se ha caracterizado en el parásito purificado a partir de ostras (O.edulis) y mejillones (M.galloprovincialis) infectados, con el objetivo de determinar si se trata de la misma especie de protozoo o de especies distintas.
  • CARACTERIZACIÓN DE MOLÉCULAS RELACIONADAS CON LA MULTIPLICACIÓN DE LOS QUISTES DE BESNOITIA BESNOITI .
    Autor: IRIGOYEN JIMENEZ MERCEDES.
    Año: 2002.
    Universidad: ZARAGOZA.
    Centro de lectura: VETERINARIA .
    Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
    Resumen: La besnoitiosis bovina es una enfermedad parasitaria que se caracteriza por desencadenar una esclero dermia a la vez que produce esterilidad y enormes pérdidas económicas. En este trabajo se han aplicado técnicas de inmunohistoquímica, inmunoblot, citométria de flujo y microscopía confocal con la finalidad de caracterizar las moléculas implicadas en la multiplicación de los quistes cutáneos de Besnoitia besnoiti. Nuestros resultados demuestran que los quistes de Besnotia besnoiti experimentan un proceso de multiplicación, que están dirigido por moléculas producidas por el parásito y por el hospedador. Las células parasitadas comienzan un proceso de división celular con la síntesis de una proteína similar al factor básico de proliferación celular (bFGF). En el curso de los acontecimientos que se desencadenan como consecuencia de la síntesis de esta molécula, las células parasitadas expresan ciclinas (B, E y M), quinasas dependientes de las ciclinas y antígeno de proliferación celular. Cuando los bradizoítos están completamente separados y delimitados por la célula hospedadora, sintetizan una molécula similar al factor ácido de proliferación celular (aFGF). La síntesis de esta molécula determina la proliferación del parásito. La célula parasitada pone fin a la multiplicación de los bradizoítos, mediante la síntesis de una proteína similar al factor de transformación celular (TGF). La síntesis de esta proteína determina un proceso de activación celular, que implica la expresión de moléculas relacionadas con la maduración e infectividad de los bradizoítos, como son: ATPasa fosfatasa, calmodulina, proteína S-100, HSP 70 y 60, integrina y fibronectina. La realización de este trabajo se enmarca en el intento de obtener una vacuna frente a la besnoitiosis que sea capaz de impedir la multiplicación de los quistes y por tanto detener el desarrollo de las manifestaciones clínicas.
  • ANÁLISIS MORFOMÉTRICO DE LOS ESTADIOS DE ADULTO Y HUEVO DE ESPECIES DE FASCIOLA (LINNAEUS, 1758) (TREMATODA: FASCIOLIDAE) .
    Autor: PANOVA MIRKOVA MIROSLAVA.
    Año: 2002.
    Universidad: VALENCIA.
    Centro de lectura: FARMACIA.
    Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA. UNIVERSIDAD DE VALENCIA.
    Resumen: En la presente memoria se analiza la influencia que ejercen distintos factores sobre la morfología de las formas adultas y los huevos de Fasciola hepática (Linnaeus, 1758) y F.gigantica Cobbold, 1855 (Trematoda: Fasciolidae). El material analizado fue: 1,- F. HEPATICA: A,- Adultos experimentales de distintos aislados procedentes de distintas localizaciones geográficas y distinta especie hospedadora definitiva emisora de huevos del parásito: 227 adultos de F.hepatica en 112 ejemplares de rata de laboratorio Rattus norvegicus Wistar y 10 adultos de F.hepatica en 7 ejemplares de Rattus rattus. B,- 749 adultos de procedentes diferentes especies hospedadoras (bovina, ovino y porcino) infestadas de forma natural procedentes del Altiplano Boliviano, de España, de Francia y de Egipto. C,- 300 huevos procedentes infestaciones experimentales en rata albina de laboratorio con distintos aislados procedentes del Altiplano Bolivianno. D,- 619 huevos obtenidos en diferentes hospedadoras infestadas de forma natural procedentes del Altiplano Boliviano. 2,- 10 F. GIGANTICA: Adultos procedentes de diferentes especies hospedadoras (bovina y búfalo) infestadas de forma natural procedentes de Egipto. Las ratas se infestaron con 20 metacercarias y fueron diseccionadas para la obtención de los adultos a los 30,40,50,75,100,150,200,225,261,300,310,350,420 y 450 días postinfestación. Los huevos han sido obtenidos por método de filtración de bilis o heces. Todos los trematodos adultos analizados se fijaron con Bouin entre porta y cubreobjetos. Los huevos de F.hepatica se analizaron en fresco. Las medidas utilizadas, calculadas mediante un analizador de imágenes fueron: A,- ADULTOS: A: medidas lineares: longitud corporal (LoC), anchura corporal (AnC), perímetro (AnC), perímetro corporal (PC), distancia entre la ventosa ventral y el extremo posterior del cuerpo (VV-P), perímetro del ovario (P(OV)), longitud del ovario (Lo(OV)), anchura de ovario (An(OV)), perímetro del intestino para ovárica (P(lov)) y parte no ovárica (P(lsov)), perímetro del intestino total (P(ltot), longitud del intestino parte ovárico (Lo(lov)) y parte no ovárica (Lo(Lsov)), longitud del intestino total (Lo (ltot)), anchura del intestino para ovárica (An(lov)) y parte no ovárica (An(Lsov)), anchura del intestino total (An(ltot)). B: superficies corporal (SC), superficie del útero (SU), superficie del ovario (S(OV)), superficie del intestino parte ovárico (S(lov)) y parte no ovárica (S(lov)), superficie del intestino total (S(ltot)). C: dimensión fractal: dimensión fractal del ovárico (DF(OV)), dimensión fractal del intestino parte ovárica (DF(lov)) y parte no ovárica (DF(lsov)), dimensión fractal del intestino total (DF(ltot)). B: HUEVOS: A,- Características biométricas linares; longitud del huevo (LoH), anchura del huevo (AnH), perímetro del huevo (PH). B,- Superficies: superficie del huevo (SH). C,- Relaciones: relación entre la longitud y anchura del huevo (loH/AnH). Para el análisis estadístico de los datos obtenidos se utilizó el paquete SPSS 10.0 para Windows. Para las medidas se ha comparado cada valor individual en cada grupo con un ANOVA de una tres vías con interacción y para la comparación de curvas alométricas se ha utilizado análisis de covarianza ANCOVA (análisis de una vía de la varianza diseñado con una covariable). Los resultados obtenidos han sido los siguientes: A,- Patrones morfométricos entre adultos y huevos de F.hepática y sus especies hospedadoras: para el estudio de la relación entre dos variables morfométricas (y1 e y2) fue utilizada la función alométrica (y2m - y2) /y2 = c[(y1m - y1) /y1]b, donde ym es el máximo para cada variable estudiada; b y c con constantes. Los pares de variables analizados fueron: SC respecto LoC, SC respecto AnC, SC respecto PC, SC respecto VV-P, LoC respecto AnC, SC respecto PC, SC respecto VV-P, Loc respecto AnC, Loc respecto PC y LoC respecto VV-P. El análisis estadístico comparativo de los modelos alométricos demuestra que las poblaciones de parásitos adultos de ovino, bovino y procino presentan diferencias significativas en las funciones: LoC respecto AnC y LoC respecto VV-P. El análisis estadístico del tamaño de los huevos de F.hepática muestra la existencia de rasgos morfométricos característicos en cada especie hospedadora definitiva. En el caso de ratas experimentalmente infestadas, las alometrías de los parásitos adultos y el tamaño de los huevos no dependen del aislado de la especie hospedadora definitiva. Nuestro estudio revela que la especie hospedadora definitiva influye decisivamente en el tamaño de los adultos y los huevos de F.hepatica, si bien está influencia no persiste en un modelo experimental murino. B,- Modelo de crecimiento del útero del adulto de F.hepática: la evolución de la SU en función del tiempo nos muestra que estamos ante un modelo amortiguado en todos los aislados. Los factores influyentes sobre las trayectorias ontogénicas del útero de F.hepática en adultos obtenidos experimentalmente son: influencia del aislado de origen, la edad de las metacercarias infestantes, el crowding efecct y la existencia de litiasis. C,- Diferencias en el desarrollo del útero de adultos de F.hepática entre diferentes poblaciones, procedentes del Altiplano Norte Boliviano y de zonas costeras europeas: se ha comparado la SU de los parásitos adultos obtenidos de infestaciones naturales de ovino, bovino y porcino procedentes de la zona endémica de Fascioliasis del Altiplano Norte Boliviano entre si y con las obtenidas de ovino y bovino de España y de bovino de Francia respectivamente. La SU de los trematodos ha sido examinada utilizando modelos alométricos. La comparación de las alometrías de las SU de los parásitos adultos obtenidos de diferentes especies hospedadoras con la misma procedencia geográfica nos revela diferencias significativas. Sin embargo las poblaciones de trematodos de bovino y ovino del Altiplano Norte Boliviano demuestran tener una SU menor que en las poblaciones Europeas. D,- Geometría fractal en patrones de las ramificaciones del ovario y los ciergos intestinales de adultos de especies de género Fasciola: el patrón de una estructura geométrica que se repite independientemente de la escala de aumento o resolución está caracterizado frecuentemente por la dimensión fractal (DF). La DF es una medida cuantitativa objetiva de la complejidad morfológica. El presente estudio analiza los patrones de ramificación en ovario DF(OV) y ciegos intestinales DF(I) de adultos de F.hepática y F.gigantica tratándoles como fractales. Los adultos de F.hepática obtenidos experimentalmente en rata Wistar (desde 40 hasta 420 dpi), muestran una DF(OV) (media+/-SE) de 1.24+/-0.06 (n=38) y una DF(ltot) de 1.47+/-0.04(n=54). Los datos de DF para los adultos de F.hepatica de infestaciones naturales son similares a los experimentales, con una DF(OV) = 1.26+/-0.04(n=36) y DF(I) = 1.49+/-0.03(n=19). Los datos de DF obtenidos en el caso de F.gigantica son: DF(OV) es 1.33+/-0.33 (n=9) y la DF(I) de 1.45+/-0.02 (n=8). En los adultos obtenidos experimentalmente la DF(I) parece no depender de la edad, ni de SC, si bien DF(OV) disminuye al aumentar la edad o la SC. La DF(I) presenta los mismos valores en los adultos de F.hepatica con distinta procedencia geográfica (América, Africa, Europa) y hospedadores definitivos (ovino, bovino, porcino). La relación para los ciegos intestinales S(I)1/2 =[P(I)/2]DF y para el ovario S(OV)1/2 =[P(OV)/2]DF presenta un buen ajuste. El análisis estadístico comparativo de DF(OV) y DF(I) demuestra diferencias en la complejidad en F .hepatica y F.gigantica. El tratar como fractales los contornos lineales de los ovarios y los ciegos intestinales de F.hepatica y F.gigantica abre la posibilidad de nuevos criterios taxonómicos en estas especies Trematodos.
216 tesis en 11 páginas: 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11
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