MICROBIOLOGIA CLINICA

Autor: VALLE TURRILLAS JAIONE.
Año: 2003.
Universidad: PUBLICA DE NAVARRA.
Centro de lectura: INS. DE AGROBIOTECNOLOGIA Y RECURSOS NATURALES.
Centro de realización: INSTITUTO DE AGROBIOTECNOLOGIA Y RECURSOS NATURALES.

Resumen: Staphylococcus aureus es una de las bacterias que con frecuencia causa infecciones asociadas al uso de implantes en el ámbito hospitalario. La bacteria es capaz de adherirse a la superficie del implante y formar comunidades de microorganismos que crecen embebidos en una matriz de exopolisacáridos denominada comúnmente "Biofilm". Dentro del biofilm la bacteria es más resistente a los tratamientos antibióticos y a la acción del sistema inmune. Como consecuencia, las infecciones asociadas a biofilms bacterianos sólo se resuelven con la sustitución del implante contaminado. El desarrollo de nuevos fármacos que o bien eviten la formación del biofilm o desestabilicen un biofilm ya formado requiere la identificación de los genes esenciales implicados en el proceso de formación o mantenimiento del biofilm. Con este objetivo final en mente, iniciamos un proyecto de investigación dedicado al estudio genético del proceso de formación del biofilm por S. aureus. Para llevar a cabo este trabajo necesitábamos seleccionar un aislado clínico de S. aureus que fuese manipulable genéticamente y con una fuerte capacidad de producir biofilm in vitro y por otro lado establecer la metodología y las condiciones óptimas de formación del biofilm en el laboratorio. Para ello analizamos la capacidad de formación del biofilm de 63 aislados clínicos de S. aureus utilizando cinco ensayos diferentes. En base a los resultados obtenidos seleccionamos el aislado clínico 15981 como bacteria modelo para el estudio de la formación del biofilm y desarrollamos la metodología de análisis del biofilm en condiciones de laboratorio. Utilizamos la técnica de mutagénesis por transposición para identificar mutantes deficientes en la formación del biofilm en un ensayo sobre placas microtiter. Sorprendentemente, de los 10.000 mutantes analizados, sólo tres mutantes perdían la capacidad de formar biofilm en las distintas condiciones utilizadas. De los tres mutantes, en este trabajo de tesis nos hemos centrado en analizar como afecta la mutación del gen sarA al proceso de formación del biofilm. Nuestros resultados demuestran que SarA es un activador transcripcional del operón icaADBC. En su ausencia, se produce una disminución de los niveles de transcripción del operon ica y, en consecuencia, de la cantidad de exopolisacarido PIA/PNAG producido. Por otro lado, al estudiar el papel de otros reguladores globales en el proceso de formación del biofilm encontramos que la deleción completa del factor de transcripción sB no afecta al proceso de formación del biofilm. Observamos que al subcultivar el mutante en sB en el laboratorio el fenotipo de formación del biofilm se vuelve inestable. En este trabajo demostramos que tanto sB como el stress osmótico actúan como reguladores negativos de la actividad de transposición del elemento de inserción IS256. En ausencia de sB hay un aumento de transcripción de la transposasa de IS256 que provoca un aumento de la actividad de inserción/excisión del elemento IS256 en el gen icaC del operón icaADBC. La secuenciación de los genomas bacterianos ha demostrado que la presencia de elementos de inserción está muy extendida en todas las bacterias. El proceso de variación fenotípica del biofilm provocado por la inserción/excisión de un elemento de inserción representa un nuevo mecanismo de regulación del proceso de formación del biofilm. En conjunto, los resultados de este trabajo indican que la formación del biofilm de S. aureus es dependiente de las condiciones de crecimiento y esta dirigido por un estricto mecanismo de regulación genética y por un mecanismo controlado de variación de fase

Autor: MIR FONT CECILIA.
Año: 2003.
Universidad: INTERNACIONAL DE CATALUÑA.
Centro de lectura: UNIVERSITAT INTERNACIONAL DE CATALUNYA.
Centro de realización: UNIVERSITAT INTERNACIONAL DE CATALUNYA.

Resumen: Esta tesis destaca dos aspectos, por un lado describe seis nuevas mutaciones causantes de la deficiencia de HMG-CoA liasa. La baja frecuencia en el diagnóstico de esta enfermedad hace que sean pocos los casos estudiados a nivel molecular, este trabajo aporta una información importante y necesaria para una mejor comprensión del proceso. Por otro lado, la tesis profundiza a través de las mutaciones en el conocimiento funcional de la enzima HMG-CoA liasa. Es muy meritorio, al presentar por primera vez un modelo estructural de esta enzima, abalado por su publicación en una revista del prestigio de Journal of Biological Chemistry. Plantea como objetivos los siguientes: - Identificación de las mutaciones responsables de la aciduria 3-hidroxi3-metilglutárica diagnosticada en 10 pacientes de diferentes nacionalidades. -Estudio a nivel molecular de los efectos de tales mutaciones en la actividad de la enzima HMG-CoA liasa. -Generación de un modelo estructural para la enzima que permita el estudio de las mutaciones missense descritas y su efecto en la estructura de la misma.

Autor: CANTUDO MUÑOZ PURIFICACIÓN.
Año: 2003.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: HOSPITAL CLÍNICO DE GRANADA.

Resumen: INTRODUCCIÓN:La gripe es una enfermedad de distribución universal que afecta a personas de todas las edades, de naturaleza epidémica y con una gran morbilidad y mortalidad que puede derivarse de sus complicaciones. Estos aspectos justifican los esfuerzos para prevenir y controlar la enfermedad mediante los Sistemas de Vigilancia epidemiológica y Virológica de la gripe. El diagnóstico de la gripe es fundamentalmente clínico, tanto por los médicos de Atención Primaria como por parte de los Sistemas de Vigilancia de la Gripe. En España se utilizan los criterios WONCA(World Organization of Nacional Colleges and Academia Associations of General Practitioners/Family Physicians). La red de Vigilancia de la gripe a nivel de las Comunidades Autónomas se lleva a cabo a través de médicos centinela que se encargan de la recogida semanal de información clínico-epidemiológica y de seleccionar aquellos pacientes a los que se les toma muestra par cultivar y aislar el virus Influenzae (siguiendo los criterios WONCA). A nivel nacional el centro coordinador de la Vigilancia es el Instituto de Salud Carlos III. OBJETIVOS:1. Evaluar la utilidad de los criterios recomendados por la WONCA a la hora de seleccionar los pacientes a los que se les toma muestra en los Programas de Vigilancia de la gripe. 2. Valorar qué signos y síntomas clínicos predicen mejor la enfermedad. 3. Examinar si existen diferencias en cuanto a utilización de los criterios de gripe típica dependiendo del tipo de virus Influencia que se aísla y la edad de los pacientes. 4. Evaluar diferencias clínicas con respecto al estado de vacunación de los pacientes y 5. Examinar el impacto en la prescripción de antibióticos. MATERIAL Y MÉTODOS Muestras respiratorias de pacientes antendidos en Atención Primaria (20 centro de salud distribuidos por las 8 provincias andaluzas) con diagnóstico de Infección respiratoria aguda o gripe (criterios WONCA) en 2 temporadas de Vigilancia de la gripe en Andalucía que fueron procesadas en el laboratorio de Microbiología del Hospital Universitario Virgen las Nieves de Granada. CONCLUSIONES 1,- Utilizando los criterios de clínica de gripe recomendados por la WONCA para la selección de pacientes en la toma de muestras en campañas de Vigilancia de la gripe, sólo se diagnosticaron el 57,4% de los casos de gripe. 2,- La utilidad del criterios es mayor cuando la gripe es producida por Influencia A y los enfermos son mayores de 15 años. 3,- De los síntomas estudiados, sólo la fibre mayor 38,5ºC y la tos tuvieron una asociación significativa con el aislamiento del virus. 4,- Sólo la tos se asoció de manera significativa con el aislamiento de influencia A. 5,- En el análisis de regresión logística, el conjunto de Fiebre mayor 38,5ºC + tos + evolución menor 72 horas, sería el principal criterio para seleccionar los pacientes a los que tomar muestra con el mínimo riesgo de perder pacientes con gripe. 6,- Los pacientes vacunados tuvieron menor porcentaje de cultivos positivos que los no vacunados. 7,- La clínica fue similar en pacientes vacunados con cultivo positivo y en pacientes no vacunados con cultivo positivo. 8,- No existió diferencias en la prescripción de Antibióticos en pacientes con gripe y en aquellos con infección respiratoria de otro orgien. 9,- Los pacientes con Influenza A recibieron más tratamiento antibiótico que aquellos con Influenza B.

Autor: Murcia Aranguren Marttha Isabel.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA..
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE MEDICINA PREVENTIVA Y SALUD PÚBLICA Y MICROBIOLOGÍA.

Resumen: El complejo Mycobacterium avium pertenece al grupo denominado Micobacterias no tuberculosas. Está constituído por un grupo heterogéneo de micobacterias de crecimiento lento no pigmentadas. comprende 2 especies bien definidas: Mycobacterium avium y Mycobacterium intracellulare, hay una especie de reciente descripción M. chimaera y además un grupo importante de micobacterias que no pueden ser incluídas en ninguna de las especies conocidas y que recientemente ha recibido el nombre de MAC other. Mediante métodos fenotípicos solo se llega a la identificación de complejo, tardando semanas en obtener el resultado. El complejo M. avium causa infección diseminada en pascientes infectados por el VIH, está implicado en el sindrome de reconstitución inmune, en linfoadenitis cervical, mastitis, infecciones pulmonares, osteomielitis, etc. En este estudio se han caracterizado 70 aislados clínicos pertenecientes al complejo Mycobacterium avium, 27 aislados españoles y 43 aislados colombianos, obtenidos de 50 pacientes, 28 de los cuales estaban infectados por el VIH. Se utilizaron los siguientes métodos moleculares: sondas comerciales AccuProbe; secuenciación de regiones genómicas de interés taxonómico: gen ADRr 16S, gen hsp65, ITS; PRA; detección mediante PCR de zonas específicas del genoma como IS145, IS 1311, IS1613, IS900 y gen mig; tipificación molecular mediante RFLP, utilizando las secuencias de inserción IS1245 e IS1311; RAPD utilizando los iniciadores OPA 2, OPA 18, INS2 y M13. Cincuenta y nueve aislados correspondieron a la especie M. avium, 3 a la especie M. intracellulare y 8 al grupo denominado MAC other. El método molecular que ofreció un mejor rendimiento fue la secuenciación de la ITS. Por este método los 70 aislados se distribuyeron en 3 sequevars de M. avium seq Mav-A, Mav-B y Mav-F, una sequevar de M. intracellulare Min.A y se detectó una nueva sequevar perteneciente al grupo MAC other, la que se denominó MAC-"V". Por PRA los 70 aislados de estudio se distribuyeron en 4 variantes PRA, 3 de M. avium (variantes 1, 2 y 3) y una variante de M. intracellualre (variante 1). Por PCR fueron positivos para IS 1245, IS1311 y para el gen mig todos los aislados pertenecientes a la especie M. avium, pero también fueron positivos algunos aislados pertenecientes al grupo MAC other y a la especie M. intracellulare. Mediante RFLP utilizando la secuencia de inserción IS1245, se pudieron tipificar 59 aislados, obteniéndosen 19 patrones y 6 clusters para una variabilidad de un 32%, cerca del 50% de los aislados presentó escasas copias de la IS y solo un 27% presento patrón multibandas, algunas cepas presentaron patrón único. Mediante RFLP utilizando la IS1311, se obtuvieron 18 patrones y 7 clusters, para una variabilidad del 30%. En general las cepas colombianas se agruparon en clusters diferentes a las cepas españolas, solo una cepa española se agrupó en un cluster formado por cepas colombianas, lo que indica que los genotipos circulantes varían con el área geográfica. Por RAPD se tipificaron 47 aislados, se obtuvieron 16 patrones y 5 clusters con una variabilidad del 34%.

Autor: YAÑEZ AMOROS ADELA.
Año: 2003.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: DPTO. PRODUCCIN VEGETAL Y MICROBIOLOGIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

Resumen: En este trabajo se estudian las secuencias de tres genes (DNA ribosómico 16S, gyrasa B y rpoD) de todas las cepas tipo y otras aisladas del género Aeromonas. Dentro de este género se incluyen microorganismos patógenos de humanos y peces. Gracias a estas secuencias se ha pretendido mejorar la clasificacion taxonómica de este complejo género bacteriano. Además, el análisis de estas secuencias también ha permitido el desarrollo de sondas específicas para la detección rápida de miembros del género Aeromonas en hortalizas y aguas. El análisis de las secuencias de los genes ribosómicos 16S indica que este género es muy conservado, y que claramente se diferencia de otras bacterias marinas, como Vibrio o Marinomonas. También muestra que a partir exclusivamente de las secuencias de los genes ribosómicos no es posible separar a la perfección todas las especies de este género, aunque existe una cierta variación entre especies, entre cepas, y entre distintos operones dentro de la misma cepa. Para establecer difencias entre las especies en las cuales el gen ribosómico 16S no es útil, se han secuenciado otros genes imprescindibles o house-keeping, en este caso el de la gyrasa B y el del factor de elongación rpoD. AL tratarse de proteinas, cabria esperar mayor divergencia en la secuencias. Las secuencias de estos dos genes han sido muy útiles en el estudio filogenético del género Aeromonas. Las agrupaciones que se forman son totalmente congruentes con los obtenidos con la secuencia del gen ribosómico 16S y con estudios de hibridación DNA-DNA. Además. cada uno de estos genes ha servido para diferenciar con claridad distintas especies de Aeromonas. Por último, la parte final de la tesis desarrolla el diseño de sondas de DNA para la amplificación específica de miembros del género Aeromonas de una forma rápida, sencilla y fiable.

Autor: RUIZ BREMON ANA.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: OBJETIVO Estudiar el consumo de los grupos de antibacterianos arriba mencionados en España durante los años 1985 a 1999. MATERIAL Y MÉT ODOS Se recogen las ventas de antimicrobianos de los grupos macrólidos, quinolonas, teraciclinas, aminoglucósidos y anfenicoles procedentes de la base de datos del Ministerio de Sanidad y Consumo denominada FAR90. A partir de estos datos se construyen tres indicadores: el peso en miligramos de cada principio activo. Número de envases y la dosis diaria por mil habitantes y día de cada principio estudiado. Se construyeron las tablas, las gráficas de evolución temporal y los mapas de distribución provincial. RESULTADOS A,- Durante el período estudiado, Macrolifos y Quinolonas aumentan sus ventas y Tetraciclinas, aminoglucósidos y anfenicoles disminuyen. B,- Todos los grupos presentan diferencias importantes según el indicador que se utilice. C,- Existen importantes diferencias geográficas en España entre los grupos estudiados. CONCLUSIONES 1,- Deben estudiarse los tres indicadores para una mejor comprensión del consumo de antimicrobianos en España. 2,- Existen diferencias entre los grupos y entre las provincias en España. 3,- El patrón es diferente a otros paises de nuestro entorno.

Autor: TENA GÓMEZ DANIEL .
Año: 2003.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL PRÍNCIPE DE ASTURIAS (ALCALÁ DE HENARES)..

Resumen: Objetivos: conocer las características microbiológicas y los factores de riesgo asociados a la infección por el virus del papiloma humano (VPH) en mujeres con lesiones escamosas intraepiteliales del cérvix uterino, y determinar la utilidad clínica de la detección del VPH mediante Hibridación de Captura (HC) como procedimiento de cribado secundario asociado a la citología para el diagnóstico de lesiones escamosas intraepiteliales de alto grado (HSIL). Resultados: La prevalencia de la infección por el VPH dependió del grado de las lesiones citológicas e histológicas. El principal factor de riesgo asociado a la infección fue el número de parejas sexuales a lo largo de la vida. Un resultado positivo para los genotipos de alto riesgo oncogénico no implicó necesariamente la existencia de HSIL, mientras que un resultado negativo permitió descartar con moderada seguridad la existencia de HSIL. Se comprobó una relación directa entre el grado de las lesiones histológicas y la presencia de cargas virales altas. Conclusiones: El VPH está directamente relacionado con la presencia de lesiones precursoras del carcinoma escamoso de cérvix. Se confirmó la naturaleza sexual de la infección. La HC es una técnica sensible para la detección del VPH pero sería necesario utilizar técnicas más sensibles con el fin de poder descartar la existencia de HSIL con mayor seguridad cuando no se detecte el virus. En el futuro, la medición de la carga viral con técnicas más exactas y reproducibles podría utilizarse como un marcador de progresión de la enfermedad.

Autor: GONZÁLEZ PALACIOS Mª ROSARIO.
Año: 2003.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL PRÍNCIPE DE ASTURIAS (ALCALÁ DE HENARES)..

Resumen: La tuberculosis (TBC) sigue siendo un problema de salud a escala mundial en la actualidad. Debido principalmente a factores socioeconómicos, sanitarios y relacionados con la asociación tuberculosis e infección VIH. El trabajo se ha realizado en el Área Sanitaria 3 de la Comunidad de Madrid durante un periodo de 15 años (1989-2003). Se han estudiado todos los pacientes con aislamiento para el complejo Mycobacterium tuberculosis. El número de pacientes estudiados fue 945 el 88,4% corresponden a pacientes nacionales y el resto pacientes inmigrantes. La tasa de incidencia media anual fue de 25 casos/ 100.000 habitantes (rango 17-41,6 casos/ 100.000 hab.). La edad media de los pacientes fue de 38,9 años, en cuanto a la distribución por sexo la frecuencia media fue del 65,1% de varones (rango 76-47,6%). El número de pacientes inmigrantes con TBC fueron 110, en el año 1992 un 1,7% de las TBC eran de pacientes inmigrantes, hasta alcanzar la máxima frecuencia en el año 2003 con un 42,6%. En cuanto a la tasa de incidencia de TBC en la población inmigrantes presenta un rango de 23,2-162/ 100.000 hab. y en la población nacional el rango es de 40,3 a 12,9/100.000 hab. Los pacientes con TBC e infección por VIH fueron 207, de estos 20 eran inmigrantes. La mayor frecuencia de pacientes VIH fue en el año 1995 con un 31%, a partir de ese año la frecuencia empieza a disminuir hasta llegar en el año 2001 al 8,8%. Encontramos un total de 11 pacientes asintomáticos, siendo la tos, fiebre y expectoración los síntomas más frecuentes. Los pacientes VIH presentan de forma significativa mayor frecuencia de fiebre, postración, adenopatías y diarrea que los no VIH (p menor que 0,001). En cuanto a la radiografía de tórax, presentaron un patrón radiológico patológico el 89% de los pacientes, en el caso de la TBC respiratoria el 97,6% tenían signos indicativos de enfermedad y en la TBC diseminada el patrón radiológico fué normal en el 20,2%. Presentaron de forma significativa una mayor frecuencia de baciloscopia positiva 86,8% los pacientes con patrón radiológico con cavitación frente al resto de pacientes con un 59,6% (p menor que 0,001). La localización más frecuente de TBC en el trabajo fué la respiratoria con 77, 8%, seguida de forma diseminada con 8,9%. Durante los 15 años del estudio se diagnosticaron 58 pacientes con TBC pleural, el 65,5% correspondieron a cuatro años (1993-1996), este hecho se asoció con los años de mayor tasa de incidencia para el grupo de edad 15-24 años, lo que implica que en esos años existió una alta transmisión reciente de la enfermedad. Es importante conocer el retraso sufrido en el diagnóstico de TBC; el 29,8% de los pacientes presentan una demora diagnóstica atribuible al enfermo superior al mes. Los pacientes con TBC pulmonar con baciloscopia positiva presentan de forma significativa mayor retraso diagnóstico (48,1 días) que los pacientes con baciloscopia negativa (28 días). El porcentaje de ingreso fué de 65,5% (rango: 57,1-83,7%); se observa mayor porcentaje de ingresos de forma significativa en los primeros años del estudio con un 67,5% frente al 57,1% (p menor que 0,01). De los 945 pacientes con TBC estudiados, 4,9% presentaron algun tipo de resistencia tanto primaria como adquirida, las resistencias fueron: ISN 3,3%, RMP 2,3% y TBC multirresistentes 1,4%. Los resultados del tratamiento fueron los siguientes: curación 70,2%, exitus 7, 1% y no satisfactorios el 22,7%.

Autor: VAZQUEZ DE PARGA DE JUAN ELENA.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se realiza el estudio más amplio en cuanto a número de muestras analizadas y de diversas zonas geográficas dentro de la exUnión Soviética. (Rusia, Ucrania, Bielorussia y Kazajistán) siendo los resultados obtenidos los que más reflejan la situación de la epidemia en estos países. De 265 muestras de ARN analizadas, 228 (86%) agrupan con el subtipo viral A, 21 (7,9%) con el subtipo B, 2 (0,7%) con el subtipo C (3 (1,1%) con el subtipo G, 8 (3%) con la forma recombinante originada en Kaliningrado (CRF03_AB), 1 (0,4%) con la CRFo1_AE, y 3 (1,1%) son nuevas formas recombinantes, constituídas por los subtipos virales mayoritarios en la zona, el A y el B, pero no patrón de recombinación distinto al que presenta la CRF03_AB. Dos son iguales; A/B en pol (PR y TI parcial) y A en V3. Son muestras de Jamal y Noyabrsk, respectivamente. El punto de recombinación en pol respecto a la CRF03_AB está localizado en un lugar distinto. Además agrupa con A en V3, mientras que la CRF03_AB es B. La tercera agrupa con subtipo A en pol (PR y TI parcial) y con subtipo B en V3. Es completamente diferente a los dos patrones anteriores. Describimos un caso de doble infección en un paciente procedente de Samara que contrajo la infección por vía nosocomial, con los subtipos B y C, aisladas estas variantes por medio de clonación. Describimos en San Petersburgo el segundo caso dela bibliografía, de infección con la CRF01_AE en el segmento TI. Además se realizó un estudio amplio de mutaciones asociadas a resistencia realizado en un gran número de muestras en estos paises. Cuarenta y seis de las 257 secuencias de TI analizadas (17,9%) presentaban mutaciones de resistencias frente a los inhibidores nucleosídicos y no nucleosídicos de la TI. Sin embargo, 35 de los 46 correspondían a pacientes que no habían sido tratados, según los datos de que disponemos. Ocho de los 35 pacientes sin tratamiento presentaban alta resistencia a NVP (4 pacientes), EFV + NVP (1 paciente) y 3TC (3 pacientes), lo que plantea si estos pacientes han podido tratarse en algún momento y esto no conste en los datos epidemiológicos recibidos. Dieciocho de 263 muestras analizadas en PR (6,8%) presentaban mutaciones de resistencia a los inhibidores de proteasas. Catorce de los 18 pacientes no habían recibido tratamiento (5,3%). En este caso, ningún paciente presentó alta resistencia al tratamiento. Existe una importante proporción de pacientes no tratados que presentan resistencia tanto a inhibidores de PR como de TI.

Autor: RUIZ TOVAR MARIA.
Año: 2003.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: OBJETIVO Estudiar el consumo de los antimicrobianos del grupo betalactamicos en ESPAÑA DURANTE los años 1985 a 1999. MATERIAL Y MÉTODOS Se recogieron los datos del Sistema de INFORMACIÓN DEL MEDICAMENTO que comprenden el número de envases vendidos, el número de unidades de dosificación de cada envase. La composición de principio activo y el peso en miligramos de principio activo de cada unidad de dosificación. Se transformo esta información en su equivalencia en peso de cada principio activo y en el número de dosis diarias definidas de cada principio activo. Se construyeron las gráficas de evolución temporal para todos los años del estudio y se presentó la información provincial en mapas provinciales. RESULTADOS A,- Según el indicador utilizando el consumo de antimicrobianos betaláctamicos presenta tendencias diferentes. B,- Las cefalosporinas ocupaban el sexto lugar de las ventanas de antibióticos en 1985 situándose en 1999 en cuarto lugar. C,- Las ventas de penicilinas ocupan el primer lugar en los tres indicadores estudiados muy por encima de los otros grupos. D,- El grupo miscelanéo de otros antibióticos ocupa el sexto lugar en 1985 y el quinto en 1999 en el indiador peso. En todos los indicadores disminuyen las ventas de este grupo entre un 52 por ciento y un 85 por ciento. CONCLUSIONES A,- El consumo de penicilinas destaca sobre todos los demás antibióticos. B,- El consumo de cefalosporinas se duplica en el mismo período. C,- Deben ser estudiados los tres indicadores tanto en el grupo de cefalosporinas como en el de penicilinas. Existen grandes diferencias regionales.

Autor: CAPILLA LUQUE JAVIER.
Año: 2003.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: UNIVERSITAT ROVIRA I VIRGILI.

Resumen: En los últimos años se ha experimentado un incremento en la frecuencia y gravedad de micosis sistémicas causadas por hongos filamentosos oportunistas. Algunos de estos hongos, los que han sido objeto de estudio en la presnete tesis, presentan una elevada resistencia a los antifúngicos convencionales utilizados en clínica. Por ello es necesario realizar estudios sobre la eficacia de nuevos compuestos con el fin de que éstos sean útiles an nivel clínico. En la presente tesis doctoral se han desarrollado modelos animales de infección causada por hongos filametnosos oportunistas en animales en ratones, cobayas y conejos que reproducen las manifestaciones clínicas observadas en humanos. El desarrollo de estos modelos nos han permitido evaluar la eficacia de nuevos compuestos. Hemos realizado modelos reproducibles de infecciones sistémicas ocasionadas por Aspergillus fumigatus, Scedosporiium prolificans, Scedosporium apiospermum, Paecilomyces lilacinus y Fusarium spp. Se ensayaron terapias experimentales con antifungicos clásicos tales como anfotericina B (desoxicolato y liposomal), terbinafina o itraconazol y antifungicos de recientes síntesis como son micafungina, ravuconazol, nikomicin Z y voriconazol. Los modelos de scedosporiosis sistémica en conejos y cobayas así como de paecilomicosis en ratón o de aspergilosis cerebral en ratón han sido descritos por primera vez en la presente tesis doctoral. Hemos demostrado la eficacia de voriconazol en el tratamiento de la infección sistémica por S.apiospermum en ratón y cobaya así como de S.prolificans en conejos. También hemos demostrado la eficacia de la micafungina administrada sola o en combinación con anfotericina B, itraconazol o nikomicina Z en el tratamiento de la aspergilosis sistémica en ratones.

Autor: FERNÁNDEZ SÁNCHEZ FERNANDO.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN Desde hace varios años se ha relacionado la infección por Chlamydophila pneumoniae (C.pneumoniae) con diversos procesos arterioscleróticos, utilizando para ello estudios serológicos y de detección directa. OBJETIVOS Nuestro trabajo estudió la seroprevalencia de la infección y realizó pruebas de detección directa de la bacteria o su ADN sobre diversos grupos de población, intentando realizar aportaciones a esa posible relación. MATERIAL Y MÉTODOS Los casos fueron 2 grupos de pacientes con enfermedad oclusiva de arterias periféricas: en uno se realizó PCR y ELISA de LPS sobre biopsia arterial (ATBS) y al otro PCR de células mononucleares de sangre periférica (CMSPs) y cultivo celular (ATCS). El tercer grupo era de pacientes con neumonía atípica (RES). Los controles eran un grupo de controles patológicos no arterioscleróticos (VNAT), controles sanos del banco de sangre (CS) y pacientes con esclerosis múltiple (EM). Se realizaron 5 pruebas de serología a todos los grupos: para la prueba de MIF se diluyeron los sueros a 1/32, se usó como base antigénica CEs de C.pneumoniae purificados y un conjungado marcado con isotiocianato de fluoresceína. Los ELISAs utilizaron como antígenos proteínas purificadas de los CEs y LPS recombinante, respectivamente, y los sueros se diluyeron a 1/20 para la IgG y la IgA, y a 1/50 para la IgA y 1/100 para la IgG, en cada caso. Se realizó un ELISA de LPS sobre biopsia arterial, para lo que se extrajo el LPS con una solución enzimática y se usó en conjugado marcado con peroxidasa. Se efectuó una heminested PCR sobre biopsias arteriales, seleccionando regiones de 437 pb y 229 pb de la región PSt 1 con las parejas de primers HL-1/HR-1 y HM-1/HR-1. Se usó un control interno de la beta-actina humana y la detección mediante electroforesis en gel de agarosa. En la PCR de CMSPs el control interno era de la interleucina 1-alfa humana. Para el cultivo celular se empleó la técnica de shells-vials con monocapas de células Hep-2, basado en la inoculación de la muestra en monocapas celulares y su posterior observación con anticuerpos monoclonales específicos de género. RESULTADOS La MIF de IgG frente a los CEs presentó frecuencias de resultados positivos significativamente superiores en los casos (72% los arterioscleróticos y 71% de los neumonía atípica) que en los controles, que fue inferior al 45%. El ELISA de IgG frente a los CEs también dio lugar a una diferencia de frecuencias de resultados positivos relevante en los casos (arterioscleróticos un 74% y RES un 79%) que en los controles (inferior al 50%). Los resultados de MIF y ELISA de IgG frente a los CEs fueron concordantes. El ELISA de IgA frente al LPS presnetó un 39% de positividad en el grupo EM. La PCR de biopsia arterial presentó un resultado significativo y diferente entre los casos (60%) y los controles (12%). No se detectó ADN en ninguna muestra de CMSPs ni se obtuvo ningún aislamiento de cepas de C.pneumoniae en cultivo celular. Se realizó un ELISA de LPS sobre muestras de biopsia arterial (esta Tesis Doctoral es el primer estudio en el que se lleva a cabo esta prueba sobre ese tipo de muestras). Solo se obtuvo un resultado positivo de las 80 muestras empleadas, y no apoyaron este resultado las pruebas serológicas ni de PCR.

Autor: YUSTE LOBO JOSE ENRIQUE.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL MICROBIOLOGÍA. INSTITUTO DE SALUD CARLOS III.

Resumen: En la presente Tesis Doctoral se ha desarrollado un estudio de tipo dosis-respuesta para investigar los efectos in vivo tras la presencia de anticuerpos específicos en la eficacia de los antibióticos beta-lactámicos para el tratamiento de la sepsis causada por Streptococcus pneumoniae (aislado de serotipo 6B no susceptible a beta-lactámicos) utilizando un modelo murino con ratones BALB/c. El suero hiperinmune se obtuvo de ratones inmunizados con la cepa inactivada por calor. La tasa de mortalidad fue del 100% en los animales no tratados en ausencia de anticuerpos específicos. Una única inyección de la dilución 1/2 ó 1/4 de suero hiperinmune produjo unas tasas de supervivencia del 60% y 40% respectivamente. En ausencia de anticuerpos específicos, las mínimas dosis efectivas de amoxicilina y cefotaxima que permitieron tasas de supervivencia del 100% y del 80% fueron 25 y 50 mg/Kg de peso corporal (tres veces al día hasta un total de seis dosis), respectivamente. Esas dosis produjeron tiempos en los que los niveles en suero permanecieron por encima de la CMI (AT>CMI) de aproximadamente el 30% del intervalo de dosificación. Cuando los anticuerpos estuvieron presentes (mediante administración de una dosis de suero hiperinmune diluida al 1/2 ó 1/4), las mínimas dosis efectivas de los antibióticos fueron 3,12 mg/Kg y 6,25 mg/Kg (aproximadamente 8 veces menos), siendo el AT>CMI aproximadamente del 3% y 5% del intervalo de dosificación para amoxicilina y cefotaxima, respectivamente. Este efecto farmacodinámico combinado "in vivo" ofrece posibilidades que pueden ser utilizadas para combatir la resistencia a penicilina. Por otra parte, hemos investigado la relación entre mortalidad y el perfil bacteriémico producido por la cepa anterior encontrando una relación estadísticamente significativa (P=0,012) entre la máxima ufc/ml en sangre y la mortalidad. Un máximo Log ufc/ml de 6,5 se asoció con un 84% de probabilidad de muerte. Los dos antibióticos beta-lactámicos redujeron las tasas de mortalidad mediante reducción del recuento de colonias en el perfil bacteriémico. También hemos investigado la relación entre mortalidad y el perfil bacteriémico cuando los animales recibieron protección mediante suero hiperinmune específico. El suero hiperinmune redujo la mortalidad en una tendencia dosis-dependiente. Los perfiles bacteriémicos con unos recuentos máximos de colonias en sangre > 5 x 10(7) ufc/ml durante el periódo de seguimiento se relacionaron con > 65% de probabilidad de muerte, independientemente de la dilución de suero administrada. En conclusión, en este estudio, la protección con el suero hiperinmune específico provocó un cambio en el perfil bacteriémico, esta variación implicó una reducción en la mortalidad sobre el tiempo y por tanto disminuyó la virulencia bacteriana.

Autor: VELA BOZA ALICIA.
Año: 2002.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIV. DE SANTIAGO DE COMPOSTELA.

Resumen: El análisis de resistencia a antirretrovirales puede realizarse por técnicas de genotipado y de fenotipado. Estas últimas utilizan métodos biológicos complejos, de no muy alta eficacia y limitada seguridad. Kellam, P., y Larder, B.A. (1994) desarrollaron métodos utilizando virus recombinantes y Boucher, C.A., y cols. (1996) han desarrollado esta metodología utilizando el ensayo con MTT tratando de simplificar y ajustar el procedimiento para usarlo con virus recombinantes generados a partir del suero de pacientes. La adaptación de la proteína verde fluorescente de Aequorea victoria (GFP) a técnicas de ingeniería genética y citometría de flujo, supone una importante alternativa en las construcciones que pueden utilizarse para el trabajo con retrovirus. De este modo creemos en la posibilidad de lograr un diseño experimental ajustado que permita la expresión a títulos detectables de GFP y de esa forma mejorar la cuantificación de los efectos fenotípicos de las construcciones de VIH-1. El objetivo de este trabajo fue la construcción de vectores basados en virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-1) para poder: I,- Desarrollar modelos adecuados de valoración de resistencias fenotípicas a antirretrovirales. II,- Construir pseudotipos basados en VIH-1 que mejoren los títulos de virus obtenidos, el rango de células hospedadoras y la seguridad. El vector original para este trabajo es el pNL4.3 y como sistema marcador hemos utilizado la proteína fluorescente (EGFP) cuya expresión hemos valorado por citometría de flujo. III,- Comparación de la efectividad del marcador fluorescente en la célula o en el vector. IV,- Comparación de la infección en dos líneas celulares diferentes CEM-SS y MT2. CONCLUSIONES 1,- La inserción del gen EGFP en el gen env de VIH-1 genera vectores retrovirales infectivos y capaces de expresar la proteína verde como consecuencia de la replicación viral al ser contrasfectados con un gen de envoltura externo (VSV-G). 2,- De los vectores obtenidos derivados de pCHUS, el construido con la inserción directa del gen de la proteína verde (pCHUS-EGFP), es el que mejor funcionamiento ofrece n las infecciones realizadas en nuestro estudio, de forma que es el que consideramos más adecuado para los posteriores usos de análisis de resistencia fenotípicas a antirretrovirales. 3,- La comparación de las infecciones realizadas en las líneas celulares CEM-SS y MT2 sugieren que la capacidad funcional y aplicabilidad de las construcciones obtenidas no sólo depende de sus características como vector, sino también del entorno molecular y de las características genéticas intrínsecas de la línea celular en las que vaya a ser utilizada. 4,- Los pseudotipos lentivirales generados podrían ser de utilidad para la expresión de proteínas en células, así como para usos en terapia génica.

Autor: PÉREZ FERNÁNDEZ ELENA.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Los osteoblastos humanos son las células encargadas de sintetizar la matriz colágena que posteriormente es mineralizada para formar el tejido óseo. Clásicamente se les ha atribuido exclusivamente esta función de síntesis. Sin embargo, antecedentes bibliográficos recientes nos llevan a pensar que los osteoblastos pueden desempeñar una función adicional en el tejido óseo y que pueden ser los factores de crecimiento y citoquinas presentes los que regulan su papel. Con objeto de estudiar esta nueva función en este trabajo se ha estudiado la expresión en los osteoblastos de distintas citoquinas propias de las células estudiadas. Por otro lado, se ha determinado la modulación de la expresión de estas citoquinas por diversos factores de crecimiento como FGF, TFG-beta1, PDGF, IL-1 e IFNgama. También se determinó la capacidad fagocítica de los osteoblastos frente a partículas de diversa naturaleza. Los resultados obtenidos apuntan a que los osteoblastos inmaduros poseen funciones típicamente inmunológicas, como capacidad fagocítica, capacidad de estimular alogénicamente a los linfocitos T y de sintetizar citoquinas. Todo esto hace pensar que ante una situación no fisiológica, como un traumatismo o la inserción de un material aloplástico en el tejido óseo que conlleve una respuesta inflamatoria los osteoblastos pueden comportarse como células inmunocompetentes, dando lugar a una respuesta inmunológica como la que se lleva a cabo por las células presentadoras de antígeno.

Autor: PÉREZ DOMÍNGUEZ ANA FLORA.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: GREGORIO MARAÑON.

Resumen: El objetivo del estudio ha sido determinar la frecuencia, etiología y factores de riesgo de la neumonía y traqueobronquitis purulenta en pacientes sometidos a cirugía cardiaca. Del mismo modo se ha estudiado el papel predictivo de los cultivos de seguimiento para determinar la etiología de una neumonía próxima en el tiempo. Se incluyeron un total de 356 pacientes sometidos a cirugía cardiaca. La frecuencia de neumonía fue de 7,87% (34,5 casos/1.000 días de ventilación mecánica). La frecuencia de traqueobronquitis purulenta fue de 8,15% (31,1 casos/1.000 días de ventilación mecánica). Las variables asociadas independientemente con infección del tracto respiratorio inferior fueron alteración del SNC, enfermedad ulcerosa, NYHA>III, necesidad de soporte mecánico circulatorio, la duración de la VM y la reintubación. La mortalidad fue la siguiente, pacientes con neumonía: 57,1%, traqueobronquitis purulenta: 20,7%. Se realizaron en total 1626 cultivos de seguimiento y solamente 2 episodios de infección respiratoria habrían sido anticipados con este método. Conclusiones: los pacientes sometidos a cirugía cardiaca presentan una alta posibilidad de desarrollar neumonía. En este estudio los cultivos de seguimiento han fallado como predictores de la etiología de una neumonía próxima en el tiempo.

Autor: RODRÍGUEZ NÓVOA SONIA M..
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS.

Resumen: Debido al creciente interés en el estudio del genotipo del virus de la hepatitis B se han diseñado diversos métodos del genotipado del mismo. En este trabajo se ha realizado una evaluación comparativa de cuatro de éstos métodos, siendo uno de ellos diseñado por nosotros. Estos métodos de genotipado se basan en polimorfismos de longitud de fragmentos de restricción (RFLP), PCR específica de genotipo, secuenciación y LIPA. En base a los resultados obtenidos de los análisis anteriores se establece una prevalencia de genotipos del VHB encontrados en nuestra área. Otros aspectos de importancia en el estudio del VHB es la aparición de resistencias al tratamiento de Lamibudina. Para este estudio se comparan los métodos de LIPA y secuenciación de la región de la polimerasa viral implicada en la resistencia. Asimismo se describen las mutaciones encontradas en pacientes sometidos a tratamiento.

Autor: LÓPEZ LOZANO JOSÉ M..
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN El tiempo como variable a considerar en el estudio de la relación entre uso de antibióticos y resistencia bacteriana ha sido poco analizado en la literatura científica. El Análisis de Series Temporales es un conjunto de técnicas cuyo origen se sitúa en el terreno de la Econometría y cuyas aplicaciones en las ciencias sociosanitarias conocen últimamente un crecimiento notable suspiciado por la disponibilidad de herramientas informáticas que facilitan los cálculos. El objetivo de la presente tesis es proponer un enfoque estocástico para el análisis de la relación entre uso de antibióticos y resistencia bacteriana a los antibióticos y sus posibles aplicaciones en la práctica diaria: OBJETIVOS El objetivo de la presente tesis es proponer un enfoque estocástico para el análisis de la relación entre uso de antibiótico y resistencia bacteriana, así como mostrar las posibles aplicaciones del Análisis de Series Temporales al estudio y comprensión del problema de la resistencia bacteriana a los antibióticos y sus posibles aplicaciones en la práctica diaria: 1,- Para el análisis de la relación uso de antibiótico-resistencia. 2,- Como ayuda a la terapia antimicrobiana empírica. 3,- En la evaluación del impacto de medidas de control. 4,- Como ayuda a la estrategia antimicrobiana del hospital y del área de salud. MATERIAL Y MÉTODOS Datos utilizados: 1,- Series mensuales de resistencia (al menos 5 años: 60 observaciones del porcentaje de cepas resistentes (+ intermedias). 2,- Series mensuales de uso de antibiótico (periodo similar) del nº de gramos convertido posteriormente en Dosis Diaria Definida. 3,- Nº mensual de estancias hospitalarias. Ambito y Periodo, desde 1991 en algunos casos se analizan todos los datos de microbiología y uso de antibióticos de 5 hospitales y areas de Salud de la Comunidad Valenciana y 3 hospitales extranjeros. Metodología Estadística. 1,- Series univariantes: modelos ARIMA para predecir la resistencia esperada a partir de los datos anteriores de resistencia, idem el uso esperado de antibióticos. 2,- Series multivariantes: modelos de Función de Transferencia (FT) (similares a ARIMA pero añadiendo otras series independientes), para estudiar la relación entre uso de antibióticos y resistencia, para la evaluación de intervenciones y para predecir con más fiabilidad la resistencia teniendo en cuenta el uso de antibióticos. RESULTADOS Se presentan los siguientes resultados: 1,- Descripción de las aplicaciones del Programa ViResiST (www.viresist.org) 2,- Aplicación I: Descripción detallada del ajuste de dos modelos de Análisis de Series Temporales: A,- Ejemplo 1: Relación entre uso de ceftazidima y resistencia a ceftazidima en Bacilos Gram negativos. B,- Ejemplo 2: Relación entre uso de fluorquinolonas y resistencia de Pseudomonas aeruginosa a ciprofloxacino en cepas hospitalarias. 3,- Aplicación II: Descripción resumida del resultado de otros dos ajustes: A,- Ejemplo 3: Relación entre uso de Cefalosporinas de 3ª generación, macrólidos y fluorquinolonas y resistencia de S.aureus a meticilina en un hospital escocés. B,- Ejemplo 4: Relación entre emergencia de Staphilococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) en un Hospital escocés y emergencia en el Área de Atención Primaria circundante. CONCLUSIONES Del trabajo realizado y del análisis de los modelos estudiados se deduce que; 1,- La resistencia bacteriana a los antibióticos es un proceso estocástico que no se puede modelizar por medio de técnicas de regresión clásicas. 2,- Asimismo el uso de antibióticos, medido a trabés del tiempo y en forma de datos agregados es también un proceso estocástico. 3,- El análisis conjunto de ambos fenómenos permite detectar una relación dinámica entre ambos, siendo este enfoque una novedad en la literatura cientírica relacionada. 4,- El enfoque propuesto permite cuantificar el riesgo de generación de resistencia en diversos ecosistemas asociado a la decisión individual de un médico cuando decide tratar a un paciente concreto. 5,- Una red de vigilancia de la rsistencia bacteriana y del uso de antibióticos a nivel local, similar al Proyecto ViResiST descrito, permite: A,- Ayudar a la terpia antimicrobiana empírica disminuyendo la incertidumbre de este momento clínico crucial para la salud del paciente. B,- Orientar la política antibiótica de Hospitales concretos. C,- Proporcionar datos históricos para el análisis del fenómeno que nos interesa a través de herramientas potentes tales como el Análisis de Series Temporales.

Autor: BLANCO COSTA M. ISABEL.
Año: 2002.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS Comparar las eficacia de un tratamiento con dosis de inducción diaria de interferón alfa 2b recombinante (IFN-alfa2b) y ribavirina con el tratamiento combinado estándar, en pacientes con hepatitis crónica C (HCC) no tratados previamente. PACIENTES Y MÉTODOS Se realizó un estudio prospectivo en 84 hospitales españoles, con inclusión de 508 pacientes, que se dividieron en dos brazos: Grupo A (n=246) tratamiento experimental con dosis de inducción diaria de 5 MUI de IFN-alfa2b durante un mes, seguido de 5 MUI tres veces por semana, más ribavirina (1000-1.200 mg/día, según peso) hasta completar un año. Grup B (n=262) tratamiento estándar con 3 MUI de IFN-alfa2b tres veces por semana durante un año más ribavirina (1000-1.200 mg/día, según peso). Ambos grupos fueron totalmente comparables en cuanto a sus características basales. Se recogio un suero basal, en el que se determinó el genotipo y la carga del virus de la hepatitis C (VHC); sueros en los meses 1,3,6 y 12 de tratamiento, y en el mes 18 (6º mes postratamiento), en los que se detectó cualitativamente el ARN viral, cuantificándose en caso positivo. La detección cualitativa se realizó por Cobas Amplicor (Roche®) y la cuantificación genómica por Monitor HCV (Roche®) y Quantiplex (Bayer®); el genotipo mediante Innolipa HCV II (Innogenetics®). La eficacia del tratamiento se valoró por la negativización persistente del ARN-VHC en el mes 18 (respuesta viral sostenida, RVS). RESULTADOS La respuesta en el primer mes fue mejor en el Gr A (49,7%) que en el B (36,7%) (p=0,004), pero estas diferencias desaparecieron a partir del tercer mes (65,5% vs 60,1% respectivamente). Los pacientes con genotipo 1 y viremia basal alta (>2x10 6 copias/ml) tuvieron mejor RVS con la pauta de inducción (45,9%) que con la estándar (30,2%) (p=0,01), diferencia no observada en aquéllos con carga viral baja (

Autor: PÉREZ HERNÁNDEZ CARMEN XIOMARA.
Año: 2002.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La presión selectiva ejercida por el uso de los antibióticos así como la gran capacidad de las bacterias para adquirir e intercambiar información genética ha conducido a la aparición y expansión de distintos mecanismos de resistencia. Los enterococos constituyen uno de los grupos bacterianos cuya importancia como patógeno ha aumentado en las últimas décadas precisamente debido a razones de resistencia más que de virulencia, siendo la resistencia a glucopéptidos la que más preocupa en estos momentos, tanto por su rápida expansión como por el peligro de transmisión a especies más virulentas. Teniendo en cuenta la evolución del problema en otros lugares del mundo así como el aislamiento previo de algunas cepas de enterococos resistentes a vancomicina (ERV) en la Provincia de las Palmas (datos no publicados), se ha realizado un estudio por un período de nueve meses (de Abril a Noviembre de 2000) en los cuatro mayores hospitales de la Comunidad Autónoma Canaria sobre la prevalencia de aislamiento del género Enterococcus en pacientes hospitalizados, su resistencia a antibióticos y en particular su resistencia a glucopéptidos. Esta última se ha estudiado a través de métodos moleculares comparándolos con los métodos tradicionales. Adicionalmente se ha realizado un estudio de colonización intestinal por ERV en pacientes sometidos a hemodiálisis. Como resultado se ha desarrollado un nuevo método de PCR capaz de identficiar simultáneamente tanto género como genotipo de resistencia y que hemos denominado PCR-Múltiple. Se registró una media de 120 aislamientos por hospital, encontrándose diferencias estadísticamente significativas en la respuesta a ampicilina y a alto nivel de aminoglucósidos entre los hospitales participantes. Se detectaron sólo tres ERV, un E.faecalis vanA y dos E.gallinarum vanC1, lo que implica una prevalencia total del 0,7%. En cuanto al estudio de colonización, y utilizando la PCR-Múltiple aquí descrita, no se detectaron ERV en la muestra estudiada. Es el primer estudio de prevalencia de ERV llevado a cabo en los hospitales de la Comunidad Autónoma de Canarias.