TOXICIDAD DE LOS ALIMENTOS, 2

Autor: ALONSO DIAZ JULIAN.
Año: 2000.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTADE DE VETERINARIA-LUGO.

Resumen: Los macromicetos representan en Galicia una importante riqueza de nuestros espacios naturales, por su abundancia, apreciación culinaria y que se ha convertido en una fuente de recursos económicos. Además, la polución metalica del medio ambiente ha determinado que la captación de metales pesados tóxicos por los carpóforos de macromicetos comestibles sea cada vez más importante, y en consecuencia tenga repercusiones sanitarias. En este trabajo se ha pretendido poner a punto un metodo analitico, voltamperometria de redisolución anódica para la determinación del contenido de los metales: cadmio, plomo, mercurio, cobre y zinc. Por otra parte se ha estudiado como influyen los factores medioambientales y ecologicos en su captación y su posible utilización como biomonitores, asi como la valoracion del riesgo toxicológico y el interes alimentario de los mismos. Finalmente, se ha ponderado la capacidad de la biomasa fúngica de macromicetos como biosorbente de metales contaminantes y se han considerado las posibilidades de aplicación de los macromicetos acumuladores de los metales pesados para la extracción de los mismos en substratos sólidos como una nueva estrategia de biorrecuperación. Como resultados a destacar, las especies que mostraron más acumuladoras fueron: -Agaricus macrosporus para el cadmio -Macrolepiota procer para el cobre -Lactarius deliciosus para el zinc -Boletus pinicola para el mercurio -Coprinus comatus para el plomo De todas ellas, Agaricus macrosporus fue la especie que mostró mayor capacidad de bioacumulación lo cual hace aconsejable reducir al máximo su consumo. Esta especie fue seleccionada para los estudios de biosorción y de cultivo sobre compost presentado una gran capacidad extractora.

Autor: ROSA CARRILLO LAURA ALEJANDRA ARDILLA DE LA.
Año: 2000.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: Se estudiaron mecanismos de acción de las siguientes toxinas marinas: acido ocadaico, yessotoxina, maitotoxina y azaspiracidos. Estos estudios se llevaron a cabo empleando como modelo celular el linfocito humano y señales celulares como el calcio y pH citosólicos determinadas mediante el uso de tecnicas de fluorescencia. Para llevar a cabo estos estudios fue necesario también caracterizar los mecanismos reguladores del pH citosólico de estas celulas, así como la interacción entre rutas celulares de transducción. Los resultados mas importantes generados por la presente tesis son: 1)Los linfocitos humanos poseen un intercambiador Na+/H+ y un transportador de HC3 dependiente de Na+, que alcalinizan, y un intercambiador CI/HCO3 independiente de Na+, que acidifica el citosol. 2)La activación de la PKA e inhibición de la tirosin kinasas y PI 3-Kinasa inhiben al intercambiador Na+/H+ y al transportador de HCO3 dependiente de Na+. La activación de PKC estimula especificamente el intercambiador Na+/ H+ mientras que la ruptura de la red de microtubulos estimula la alcalanización citosólica dependiente de bicarbonato. 3)El acido ocadaico estimula la actividad de los intercambiadores CI/HCO3 independiente de Na+ y Na+/H+. 4)La yessotoxina produce entrada de Ca2+ no capacitativa, a través de una ruta sensible a SKF 96365 y nifedipina. La PKC y la toxina colerica inhiben este efecto. 5)La maitotoxina produce entrada de CA2+ por un mecanismo sensible a SKF 96365 e insensible a antagonistas de canales tipo L, que es estimulado por yesotoxina, una baja concentracion de Ni2+ y por inhibición de PKC, y es parcialmente dependiente de la activación de PI 3-kinasa. 6)La estimulacion e inhibición de la actividad basal de PKA inhiben la entrada capacitativa de Ca2+. El AMPc reduce la liberación de Ca2+ de reservorios sensibles a tapsigargina, a través de un mecanismos independiente de la activacion de PKA. 7)La mezcla de azaspirácidos 1,2 y 3, pero no el azaspiracido 1, produce vaciamiento de reservorios, entrada de Ca2+ y alteración de la homeostasis del pH intracelular mediante un mecanismo dependiente del Ca2+ extracelular.

Autor: PARDO MARTÍNEZ MERCEDES.
Año: 2000.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: QUÍMICA.
Centro de realización: FACULTAD DE QUÍMICA, UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Resumen: En primer lugar se optimizan los procedimientos para la determinación de los metales tóxicos arsénico, plomo, cadmio, selenio y mercurio en alimentos infantiles utilizando la técnica ETAAS y la introducción directa de las muestras en forma de supensiones. A continuación se aborda la determinación de los metales esenciales cobre, manganeso,,cobalto, níquel, aluminio y cromo en alimentos infantiles y utiliznado la misma metodología. Los procedimientos desarrollados se aplican al análisis de alimentos infantiles o potitos de diferentes composición, realizando un estudio estadístico para comprobar si existen diferencias signficativas en los contenidos de los diferenes elementos en los diversos tipos de alimentos infantiles. Se aborda también el análisis de diferentes productos lácteos, que también son componentes esenciales en la alimentación infatil. En ese caso, el estudio se ha restringido a un metal esencial característico como es el cobre y aumenta el tóxico, cuya presencia está muy limitada en los productos lácteos, que es el plomo. La técncia ETAAS se aplica también para la puesta a punto de procedimientos de análisis de los metales tóxicos arséncio, plomo, cadmio y mercurio en aditivos utilizados en la industria alimentaria. Los resultados permiten estraer importantes conclusiones ya que implican que la adición al colorante de hidróxido de aluminio o dióxido de titanio hace variar signficativamente su contendio en elementos tóxicos. Finalmente, se hace una breve introducción a la especiación de las diferentes formas químicas en que se pueden encontrar los elementos metálicos y se aborda en detalle la especiación de arsénico en alimentos infantiles usandola hibridación LC-ICPMS. Se optimiza un procedimiento para la separación de AsB, MMAA, DMMA y As(V) mediante elución por gradiente utilizando como fase móvil una disolución de sulfato potásico.

Autor: ARMENDARIZ RECALDE CARMEN.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA .
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Se estudian los contenidos de los principales plaguicidas organoclorados (hexa-clorociclohexano, isomeros alfa, beta, gamma y delta), hexaclorobenceno, heptacloro epóxido, aldrin, DDT,DDE,DDT, con sus respectivos isómeros 2,4 y 4,4) en leche de vaca de explotaciones navarras, la relacion con los valores encontrados por otros autores en la poblacion Navarra,principalmente en tejido adiposo y leche materna, y la posible repercusión para la salud de esta. Se selecciona, pone a punto y valida un metodo analitico por extraccion con disolventes y purificacion de los plaguicidas y posterior determinacion de estos por cromatografia de gases con columna capilar y detector de captura de electrones. A continuación se aplica este metodo a la leche procedente de una serie de granjas lecheras que suponen más del 60% de la produccion de leche en Navarra. Los valores de los parametros analiticos de validacion del metodo indican que este es adecuado a los fines propuestos. Los resultados obtenidos al evaluar las muestras permiten llegar a las siguientes conclusiones: se puede considerar que la contaminacion por residuos de plaquicidias organoclorados en leches de vaca, procedentes de granjas de Navarra es moderada. En muy pocos casos se superan las concentraciones maximas permitidas por la legislacion de los distintos plaguicidas estudiados. Las ingestas estimadas de los plaguicidas estudiados son muy bajas y siempre inferiores a los valores de la Ingesta Diaria admisible propuesta por la FAO/OMS. Los mayores valores de ingesta diaria estimada corresponden al HCB y al 4,4 DDE, plaguicidas que tambien se han detectado en la poblacion Navarra en mayores tasas tanto en leche materna como en tejido adiposo.

Autor: FERNÁNDEZ FRANZÓN MONICA.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FACULTAT DE FARMACIA.

Resumen: La utilización de palguicidas en las prácticas agrícolas ha supuesto un beneficio incuestionable para la agricultura y la salud pública, sin embargo, su presencia en los alimentos puede producir a medio y largo plazo efectos tóxicos en la salud de los consumidores. La cromatografía gaseosa ha sido la técnica más utilizada en el análisis de palguicidas en frutas y verduras. Sin embargo, la aparicion en el mercado de neuvos plaguicidas más polares, poco volátiles y termolábiles, pone de relieve la necesidad de técnicas alternatvas. La cromatografía líquida acoplada a la espectrometría de masas permite la identificación y confirmación de estos compuestos además de los que se han considerado características de la cromatografía gaseosa. En los últimos años se ha incrementado los métodos de análisis basados en la cromatografía líquida-espectrometría de masas, a este auge ha contribuido la aparición de las nuevas fuentes de ionización a presión atmosférica como es la ionización química a presión atmosférica y al ionización por electrospray. El objetivo de esta tesis fue poner el manifiesto la capacidad de la cromatografía líquida espectometría de masas en el análisis de palguicidas pertenecientes a distintas familias químicas: carbamatos, organoclorados, organofosforados y derivados del imidazol. Para ello, se ha adaptado ésta técnica a métodos de extracción clásicos como la extracción con disolvente y a otros más innovadores, como la dispersión en matriz en fase sólida. Los métodos estudiados se aplicaron directamente a los productos hortofrutícolas a las abejas. En primer lugar se optimizó los parámetros que afectan a la ionización a presión atmosférica de cada uno de los plaguicidas estudiados. Para la mayoría de los compuestos, los espectros de masas presentaron como ion mayoritario, el ion molecular. El voltaje de fragmentación fue el parámetro que más afecta a la fragmentación y a la sensibilidad. Se seleciono el voltaje de fragmentación y el ion que proprocionaban mayor respuesta para la cuantificación de dichos plaguicidas. Los límites de detección obtenidos mediante procesos simples de extracción como son la dispersión de matriz en fase sólida y la extracción con disolventes en frutas y hortalizas al están por debajo de los LMR establecidos con el Codex Alimentario y la legislación de la Unión Euorpea. Los resultados obtenidos en abejas por los métodos de microextracción y detección por cromatografía de gases y por extracción líquido-líquido con cromatógrafo líquido fueron comparables. Además se detectó la presencia de algunos plaguicidas organos fosforados, demostrando que estas pueden actuar como bioindicadores de los plaguicidas aplicados en los campos de cultivos que circundan las colmenas. La determinación de residuos de plaguicidas en 150 muestras de mandarinas y naranjas procedentes de la Comunidad Vlenciana utilizando cromatografía líquida y cromatografía gaseosa ambos acopladas a la especometría de masas, demuestra la utilidad de ambas técnica en el análisis rutinario de los plaguicidas en muestras de frutas y hortalizas.

Autor: SORIANO DEL CASTILLO JOSÉ MIGUEL.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FACULTAT DE FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAT DE FARMACIA.

Resumen: El consumo alimentario en los servicios de restauración se ha visto incrementado en los últimos años debido a la creciente tendencia a comer fuera del hogar. Los alimentos pueden ser vehículos de diversos tóxicos, destacando los contaminantes biológicos y los tóxicos derivados, que son los que se forman durante le procesado, preparación y almacenamiento de los alimentos y/o en el propio consumidor. Este trabajo tiene por objeto estudiar la presencia de microorganismos y sus toxinas en alimentos procedesntes de los servicios de resturación, así como determinar el estado de degradación de los aceites en el proceso de fritura. En los estudios previso a la implantación del sistema ARCPC en restaurantes universitarios, se aisló E. Coli en el 25,7% de muestras de lechuga, en el 1,7% de tortilla de patatas y en el 8,8% de productos cárnicos. La presencia de Enterococcus fue de un 84.4, 12.3 y 24.6% en muestras de lechuga, tortilla de patatas y productos cárnicos, respectivamente. En el caso del S. Aureus el porcentaje de aislamiento fue del 22,9% en muestras de lechuga, 17,7% en tortilla de patatas y 7,6% en productos cárnicos. La incidencia de estafilococos enterotoxigénicos en diversas muestras fue del 3,9% y las enterotoxinas más frecuentemente detectadas con las del tipo D. Segudio del C y, por último, del A. No se encontró Escherichia coli O157:H7, Slamonella spp., Shigella spp., Clostridium perfringens, Yersinia enterocolitica en ninguna de las muestras analizadas. En cafeterías se han encontrado que un 11,1% de las muestras contenía S. Aureus y un 3,8% estafilococos enterotoxigénicos. Las enterotoxinas más abundantes fueron del tipo C seguido del D, delB y, por útlimo, del tipo S. Se ha encontrado Listeria monocytogenes en lechuga antes y después del tratamiento con hipoclorico sódico, lo que indica que este microorganismo puede resistir la acción de las sustancias oxidantes. Tmabién se ha encontrado este microorganismo en lomo de cerdo crudo,pero no en la muestra lista para ser consumida debido a que L. Monocytogenes es sensible al calor. El uso de hipoclorito sódico (70 ppm) o de permanganato potásico (25 ppm) presenta una eficacia similar en la reducción de la carga microbiana presente en las muestras de lechugas, recomendándose su aplicación como desinfectantes en los servicios de restauración. La presencia de aerobios mesófilos, E. Coli, S. Aureus, estafilococos enterotoxigénicos y sus toxinas pueden utilizarse como indicadores para garantizar la seguridad alimentaria en las comidas preparadas y para comprobar si el esistema ARCPC ha sido correctamente implantado. Tras la aplicación de unas buenas prácticas de manipulación y del sistema ARCPC se observa una clara disminución en la carga microbiana, además de permitir una completa elimianción de S. Aureus, estafilococos enterotoxigéncios y sus enterotoxinas.

Autor: BOTELLA ORTS BEGOÑA.
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FARMACIA.

Resumen: La memoria de Tesis Doctoral se encuadra dentro de un proyecto FIS 95/1959 en el que se estan estudiando la potencial relación entre cancer de mama y exposición a pesticidad organoclorados (PO) con efecto estrogenico. Los objetivos planteados son: - Optimizar metodología analítica para extracción de P.O. De tejido adiposo y suero humano. Extracto susceptible de ser ensayado en test biológicos de estrogenicidad. - Determinación de P.O. Conefecto estrogénico mediante GD/DCE. - Estimar la idoneidad del tejido adiposo o del suero para establecer la carga estrogénica de un individuo. - Cuantificar la actividad hormonal de los extractos del tejido adiposo y establecer la carga hormonal debida a xenobióticos estrogénicos. De desarrolla una metodología adecuada para el análisis de pesticidas organoclorados en muestras biológicas. El método cromatrográfico permite la cuantificación de los pesticidas organoclorados en las muestras, tanto de tejido adiposo como de suero. El contenido medio de pesticidas determinados en tejido adiposo es superior al de suero en todos los casos excepto para el endosulfán-éter, que presenta mayor concentración media en suero. El valor medio del cociente grasa/suero confirma la alta afinidad de los P.O. Por el tejido adiposo. Estos datos concuerdan conlos recogidos en la lieteratura científica. A la vista de estos resultados, el tejido adiposo será el de elección para determinar la carga estrogéncia en el proyecto en realización, al permitir un mayor rango de respuesta en el test biológico, y al ser un indicador de exposición cronica o antigua a estos pesticidas. Estos resultados muestran alta exposición de la población en estudio a xenobióticos con acción hormonal. Por último, las conclusiones que se deducen del trabajo son: 1- Que se dispone de una metodología útil para extraer xenoestrógenos deltejido adiposo y separarlos de estrógenos endógenos. 2- La positividad de las muestras indica que se trata de un método sensible para asignar un valor de carga estrogénica a un número significativo de muestras. 3- El alto porcentaje de positividad en la fracción b significa que el reservorío de estrógenos en tejido adiposo es importante.

Autor: BERNABEU GARCIA JAIME ALEJANDRO.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Dentro del Plan Nacional de Investigaciónde Residuos (PNIR) en alimentos para detectar, y a veces cuantificar la posible presencia de residuos de antibactrianos en diferentes alimentos de origen animal se recurre frecuentemente a las técnicas microbiológicas. Con el fin de verificar la adecuada sensibilidad de los microorganismos inoculados en las placas de cultivo frente a los diferentes antibióticos, en las técnicas de difusión en agar se utilizan comocontroles discos de papel impregnados con una solución, de concentración conocida, del antimicrobiano. Si se obtine el tamño del halo de inhibicióndel crecimiento del microorganismo que previamente se ha establecido,indica que todo ha funcionado correctamente, con lo que se reduce el riesgo de que se informen falsos positivos y/o negativos en el análisis de las muestras. El objetivo del presente trabajo es el desarrollo galénico de comprimidos de diferentes antibacterianos para su utilización como controles de sensibilidad de las técnicas microbilógicos de difusión agar palicadas den la investigación de residuos de antibacterianos en alimentos. Estos comprimidos podrían sustituir a los discos control permitiendo reducir la variabilidad en los resultados asociada a la necesidad de su frecuente y diferente preparación por cada uno de los laboratorios implicados en el PNIR. Para el cumplimiento de este objetivo el trabajo experimental se planea y desarrolla, para cada uno de los antimicrobianos, en una secuencia temporal que comprende las siguientes fases o etapas: Fase I: Formulación y elaboración de los comprimidos Fase II: Variabilidad interlotes Fase III: Estudio de estabilidad Fase IV: Ejercidios de omparación interlaboratorios. De las técnicas de elaboración de comprimidos utilizadas, las que proporcionan una distriubción mas homogénea del principio activo son aquellas en las que éste se incorpora en disolución: Granulación húmeda con el pricnipio activo disuelto en la disolución de aglutinante Atomatización de una disolución del principio activo sobre la mezcla de diluyente y aglutinante. Respecto a los discos de papel utilizados actualmente, los comprimidos que se proponen, además de ser un control normalizado y estable para los distintos laboratorios del PNIR, podrían permitir, delimitar la fuente de variaciónd e los resultados y discernir, sin lugar a dudas, métodos de trabajo que se alejan del protocolo establecido por el Centro Nacional de Alimentación, designado por la Unión Europea como Laboratorio Nacional de Referencia.

Autor: ARDILA BENAVIDES CLAUDIA LEONOR.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FAC. DE BIOLOGIA,DPTO ECOLOGÍA.

Resumen: Se analizaron las concentraciones de mercurio en sangre y cabello de tres poblaciones altamente consumdoras de pescado de la costa Pacífica Colombiana. Se tomaron muestras de 122 pescadores de Buenaventura, de 129 pescadores de Guapi y de 292 pescadores de Tumaco. Los medias de los niveles en sangre oscilaron entre 4.65 y 36.15 mg/L. De acuerdo con el análisis de varianza y el análisis de varianza y el análisis de Newman Keuls, existe diferencia significativa(P 0,01) entre las medias de las concentraciones de mercurio tanto en sangre como en cabello de las tres poblaciones. Los principales síntomas encontrados en la población espuesta al mercurio a través de la dieta fueron parestesia distal y perioral,cefalea, temblores, anorexia y pérdida de peso, sin embargo, estos síntomas no pudieron ser atribuidos a una intoxicación con mercurio. También se analizaron las concentraciones de catorce especies de peces y de seis especies de moluscos, que son la de mayor consumo en las tres poblaciones estudiadas. Las especies capturadas en Buenaventura presentaron las concentraciones mayores, Las comparaciones entre los niveles de mercurio hallados en las especies de peces y moluscos, y de sangre y cabello de los pobladores de las tres zonas permiten estableces que la contaminación de los esteros y de los ríos que desembocan en la Bahia de Buenaventura y la Ensenada de Tumaco, está causando un rápido incremento de las concentraciones de mercurio en las especies de peces y moluscos y de los pescadores quienes basan su dieta en un 70% en el consumo de estos productos marinos I.

Autor: GARCIA SANTOS M. PILAR.
Año: 1999.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DPTO. DE QUIMICA FISICA.

Resumen: Se ha estudiado el mecanismo de las reacciones de nitrosación de nueve aminoácidos con grupo amino primario en medio ácido: seis -aminoácidos(glicina, alanina, acido -aminobutírico, ácido -aminoisobutírico, valina y norvalina), dos B-amino ácidos(B-alanina y ácido B-aminobutírico) y un y-aminoácido (ácido y-aminobutírico). El mecanismo de nitrosación propuesto implica al trióxido de dinitrógeno como agente nitrosante de las formas neutra y básica del aminoácido, y conduce a la ecuación de velocidad: v=ka K M Ke [AA][Nit]2 [H+]2 + kb kI kII KM [AA][Nit]2[H+] ---------------- -------------- (kI+[H+])(ka+[H+])2 (kI+[H+])(ka+[H+])2 K M es la constante de formación de N2O3, kI y KII son las constantes macroscópicas de disociación del aminoácido, Ke la constante de disociación del éster del aminoácido y Ka es la constante de desprotonación del ácido nitroso. Todas las reacciones estudiadas satisfacen relaciones isocinéticas, apoyando la idea de un mecanismo común. El orden de magnitud(10 7-10 8 M-1 s-1) encontrando para los coeficientes de velocidad de nitrosación, es propio de mecanismos controlados por difusión. La secuencia de reactivadas es : -aminoácidos< B-aminoácidos < y-aminoácidos. Los resultados se han interpretado a través del efecto -I del grupo carboxilo sobre el sitio nucleófilo- NH2 del aminoácido. Se ha estudiado el mecanismo de las reacciones de alquilación de la molécula 4-(p-nitrobencil)piridina(NBP) en medio neutro por los productos de nitrosación de cada uno de los aminoácidos indicados y del ácido aspártico. En todos los casos se comprobó la formación del aducto NBP-productos de nitrosación. Mediante espectografía de RMN e IR se ha demostrado que los agentes alquilantes son las correspondientes lactonas. La secuencia de potencial alquilante observada es: -lactonas> B-lactonas> y-lactonas. Puesto que: a) El índice de potencial alquilante (test de NBP) de derivados de la nitrosación de precursores(aminoácidos, aminas, etc) sigue el mismo patrón que el índice de mutagenia (test de Ames). Y b) El NBP tiene características nucleófilas similares a las bases del ADN, los resultados obtenidos en este trabajo permiten hacer predicciones sobre la efectividad mutágena de los productos de nitrosación de aminoácidos con grupo amino primario.

Autor: RIVAS VELASCO ANA M..
Año: 1999.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: FARMACIA.

Resumen: El presente trabajo de investigación se encuadra dentro de un estudio epidemiológico de tipo caso:control, de base hospitalaria, cuyo objetivo general es el análisis de posibles factores de influencia en la carcinogénesis mamaria. Entre estas variables destaca por su novedad y singularidad la medida de la carga hormonal estrogénica, entendida como la expresión cuantitativa de la acitvidad estrogénica atribuible a xenoestrógenos bioacumulados en el organismo humano. Los objetivos han sido 1) desarrollar una metodología analítica para la extracción de xenobióticos estrogénicos a partir de tejido adiposo con la obtención de un extracto susceptible de ser testado en ensayo biológico adecuado. 2) Definir el mejor test in vitro con células MCF-7, para emplear en la estimación de la carga estrogénica. 3) Cuantificar la actividad hormonal de los extractos de tejido adiposo y estimar la carga hormonal estrogénica inducida por los mismos 4) Analizar por CG/DCE los extractos de tejido adiposo. Se han explorado cuatro test, utilizando compuestos con actividad estrogénica (bisfenoles): a) estimación de la proliferación celular en el sistema MCF-7 (test E-SCREEN), b) medida de luminiscencia por la actividad de un enzima expresado en las células MCF7 transfectadas permanentemente (Test MVLN) c) la inducción de la síntesis y secreción de la proteína estrógeno dependiente pS2 d) la cuantificación del RNA mensajero específico para la síntesis de pS2. El bioensayo E-SCREEN ha sido de elección por sensibilidad, especificidad y amplitud de respuesta. Se demuestra la actividad hormonal estrogénica de los pesticidas organoclorados que son analizados en el tejido adiposo. Se desarrolla una metodología para extracción de xenoestrógenos de tejido adiposo y posterior ensayo biológico. La purificación de la muestra se realiza por HPLC preparativa. Se obtienen tres fracciones: una contiene pesticidas organoclorados libres de las hormonas naturales y otra fenoles potencialmente contaminantes. Es una técnica precisa que permite la estimación de la carga hormonal estrogénica y la cuantificación de xenobióticos estrogénicos, fundamentalmente pesticidas organoclorados, en muestras de tejido adiposo humano y su aplicación a de estudios caso:control. Los cien casos y cien controles analizados en el bioensayo E-SCREEN con objeto de estimar el efecto proliferativo permiten evaluar la carga estrogénica. Se ha obtenido para las dos fracciones niveles de concentración de estradiol que presentan actividad biológica in vivo. En el análisis de la frecuencia de positividad del ensayo pudieron verse diferencias estadísticamente significativas entre la frecuencia de la fracción correspondiente a los pesticidas de los casos y de los controles siendo superior para loscasos el número de fracciones con actividad biológica medible. La positividad de las muestras indica método sensible para asignar un valor de carga estrogénica a un número significativo de muestras. Se han analizado los contaminantes químicos por CG/DCE. Se determinan 16 pesticidas y metabolitos. Los valores medios de residuos de pesticidas organoclorados establecen diferencias significativas entre casos y controles, siendo más elevadas las concentraciones medias de los compuestos aldrín, p,p'-DDT y endosulfán y metabolitos en las muestras de tejido adiposo extraídas de las pacientes con cáncer mamario. El análisis estadístico de los resultados ha permitido estimar que los pesticidas estudiados, a excepción del o,p'-DDT y dieldrín, se encuentran con mayor frecuencia en las muestras correspondientes a las enfermas integrantes del grupocontrol que en las procedentes de enfermas. El presente trabajo avanza algo más en la hipótesis que liga xenoestrógenos y cáncer de mama puesto que se ha obtenido la evidencia científica suficiente para: 1) afirmar la alta exposición medio ambiental existente a organoclorados, 2) demostrar la estrogenicidad de estos compuestos y 3) posibilitar la medida de la actividad estrogénica del conjunto de compuestos bioacumulados.#

Autor: LOPEZ LOPEZ LEYTON TERESA DE JESUS .
Año: 1999.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: En este trabajo se investiga la presencia de residuos de hidrocarburos alifáticos, policlorobifenilos (PCBs) y policloroterfenilos (PCTs) en muestras de 3 especies diferentes de aves rapaces: Buteo buteo, Tyto alba y Strix aluco, ya que éstas desempeñan un papel importante en el mantenimiento del equilibrio ecológico. El objetivo de esta memoria consiste en la puesta a punto de un método de extracción mediante fluidos supercríticos que permita separar los hidrocarburos alifáticos, policlorobifenios y policloroterfenilos de forma simultánea, identificándolos mediante cromatografía gaseosa con detectores de ionización de llama y de captura de electrones. Los límites de detección y cuantificación se calculan según el método propuesto por Knoll. Los resultados obtenidos para los hidrocarburos oscilan entre 8.2 ug/L para el pristano y 44 ug/L para el C36 (LD) y un LQ entre 24 y 113 ug/L para los mismos hidrocarburos. Los Aroclor presentan LD y LQ más bajos siendo el PCB206 es el que mejor se detecta con un LD de 0.47 ug/L y LQ de 1.37 ug/L. Los porcentajes de recuperación son siempre superiores al 88% excepto para el pristano y C18 con valores de RSD siempre inferiores al 9% menos en el caso del pristano, C28 y C32. Se han determinado los niveles de concentración de 9 hidrocarburos alifáticos (Pristano, C18, C19, C20, C22, C28, C32 y C36) presentes en las muestras analizadas encontrando que la mayor concentración media corresponde al C18 con un valor de 1.24 mg/kg seguido de C20 (1.16 mg/kg), mientras que el que aparece en menor cantidad es el C19. En cuanto a compuestos organoclorados se ha investigado la presencia de Aeoclor1260 y Aroclor5460 así como de los congéneres 101,206,180 y 138. El PCB individual que aparece en mayor cantidad es el 180 con un valor medio de 1.05 mg/kg en materia seca. El valor medio para el Aroclor1260 es de 5.069 mg/kg en materia seca. Por especie, los hidrocarburos presentan los valores más elevados en el ratonero, en cuanto a los PCBs, lo valores más altos corresponden a la lechuza, siendo por tanto el cárabo la especie menos polucionada. Las provincias más polucionadas son A Coruña y Pontevedra.

Autor: GONZALEZ ATUGO SUSANA.
Año: 1999.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: En esta memoria, se realiza un estudio en visceras de Aves Rapaces (Buteo buteo, Tyto alba y Strix aluco), procedentes de los Centros de Recuperación de Fauna Salvaje de la Xunta de Galicia, para la determinación de 10 hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs): Antraceno, Fluoranteno, Pireno, Benzo(a)antraceno, Criseno, Benzo(b)fluoranteno, Benzo(k)fluoranteno, Benzo(a)pireno, Benzo(ghi)perileno e Indeno(1,2,3-cd)pireno. La presencia de estos compuestos en las aves, situadas en los últimos eslabones de la cadena trófica, representa una gran amenaza para el bienestar de los organismos, incluido el hombre, de ahí el gran interés de us utilización como bioindicadores del medio ambiente. Estas aves corresponden a especies protegidas y catalogadas de interés especial, lo que dificulta la obtención de especímenes para su estudio científico. Para ello se ha puesto a punto un método de extracción mediante fluidos supercríticos (SFE), identidicándolos mediante cromatografía líquida de alta resolución con detector de fluorescencia (HPLC-FL). Se ha determinado el contenido de humedad y grasa en las diferentes vísceras para poder establecer una relación con los compuestos estudiados. Se propone la utilización de la espectrofluorimetría sincrónica para la selección de las landa sub exc y landa sub em óptimas para estos PAHs. Los límites de detección (LD) y cuantificación (LQ) de los diez PAHs estudiados en ACN, se han calculado según las normas de la ACS (1980), y se encuentran recogidos comprendidos en un rango de 0.039-0.080 ug/L para el ANT, y 12.4-30.6 para el IndP, respectivamente. Los porcentajes de recuperación presentan valores de precisión relativa del orden de 5% y recuperaciones superiores al 90%. De los diez hidrocarburos aromáticos policíclicos estudiados no se han encontrado en la 133 muestras analizadas: Criseno, Benzo(ghi)perileno e Indenol(1,2,3-cd)pireno. El Benzo(a)pireno y Benzo(k)floranteno, sólo se encuentran en una muestra (ratonero y lechuza, respectivamente), y el Benzo(b)fluoranteno en dos muestras de lechuza. Se encuentran en mayor concentración (valor medio, expresado de mug/kg materia seca), el Fluoranteno (3.249) y Pireno (1.867), seguidos de Benzo(a)antraceno (0.778) y en menor concentración el Antraceno (0.2066). Por especie, la menos polucionada es el cárabo y la más polucionada la lechuza. En función de las muestras, la más polucionada es el pulmón, seguida del intestino y riñón, y la menos el músculo. Por sexo, las hembras, con niveles más altos de grasa, presentan cantidades más altas de los PAHs analizados, salvo para el Fluoranteno, aunque no se observan diferencias significativas. Finalmente, el Fluoranteno, Pireno y Benzo(a)antraceno, PAHs de cuatro anillos, presentan niveles más elevados en el pulmón. Esto, unido a que son los que se forman más facilmente en los procesos de combustión, parece indicar que la principal fuente de polución de estas aves es el aire.

Autor: LEIRA SANMARTIN FRANCISCO.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: En el presente trabajo se ha desarrollado y optimizado un ensayo de inhibición enzimática aplicable al control sanitario de toxinas DSP utilizando PP2A y DDAO o FDP como substratos fluorogénicos del enzima. Los resultados obtenidos con el nuevo ensayo muestran significativas ventajas en términos de rapidez, especificidad y sensibilidad (IC50: 1nM) frente al bioensayo en ratón (método oficial), cuyo límite de detección se sitúa por encima de las disposiciones recogidas en la normativa vigente. Se han evaluado también diferentes parámetros de respuesta celular al ácido okadaico (0,1-1.000 nM) en fibroblastos normales de pulmón humano, observándose una correlación significativa con la tasa de captación-metabolismo celular de la glucosa y la formación de especies reactivas de oxígeno. En el modelo celular utilizado, los parámetros citados son indicadores válidos de la actividad de las toxinas diarreicas, por lo que serían susceptibles de ser utilizados en una prueba biológica in vitro para cuantificar las toxinas DSP. Adicionalmente, se ha estudiado el efecto del procesado industrial sobre la toxicidad PSP, DSP y ASP en moluscos bivalvos, monitorizando la evolución de los niveles tóxicos a lo largo de las diferentes etapas implicadas en la elaboración de productos en conserva. Los resultados obtenidos muestran una significativa reducción de la concentración de toxinas DSP (54% con respecto al nivel tóxico de la materia prima) y PSP (detoxificación superior al 50%) en la vianda de mejillón como consecuencia de la destrucción de toxinas durante el tratamiento térmico y su dilución en los exudados de cocción y líquidos de cobertura del producto en conserva. En el caso de las toxinas PSP, se observan procesos de interconversión asociados al tratamiento térmico y dependientes del pH del medio de cobertura. El ácido domoico (toxina ASP) se concentra mayoritariamente en el hepatopáncreas de los bivalvos, reduciéndose su concentración durante el almacenamiento a temperatura de congelación. La esterilización en autoclave favorece la transferencia del ácido domoico al líquido de cobertura de los productos en conserva, sin que se observe una reducción significativa de la concentración de toxina.

Autor: EGEA CASTILLO FERNANDO.
Año: 1998.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .

Resumen: Se ha realizado la caracterización de algunos de los principales marcadores epidemiológicos así como de factores de virulencia presentes en cepas de Salmonella productoras de toxiinfecciones alimentarias en cepas en estado natural y sometidas a estrés. Los resultados obtenidos muestran que los perfiles plasmídicos y de proteínas de membrana externa no son adecuados para discriminar aislados de origen alimentario de los de origen clínico. El espectro de resistencia a antimicrobianos es mayor en cepas aisladas de muestras clínicas respecto a las aisladas de alimentos. Además, la resistencia a estreptomicina, cefalotina y tetraciclina puede ser considerada de origen plasmídico en las cepas estudiadas. La hidrofobicidad está relacionada con la capacidad de adhesión a mucus intestinal, aunque no sea el único factor responsable de la adhesión. Por otro lado, la capacidad hemolítica y hemaglutinante no están relacionadas con la citotoxicidad de Salmonella. Los LPS y la actividad fosfolipasa no son fundamentales en la capacidad cititoxica de las cepas de Salmonella estudiadas, siendo las cepas de origen clínico las que mostraron una mayor capacidad citotóxica. La permanencia en agua de mar y el posterior contacto con moluscos no modifica las actividades enzimáticas ni la capacidad citotóxica de los productos extracelulares de Salmonella. Por el contrario, el paso por animales de experimentación susceptibles sí varía estas actividades. Las células de Salmonella sometidas a estrés prolongado en agua de mar ven disminuída su capacidad de adhesión, agregación y citotoxicidad, aunque estas capacidades no desaparecen por completo y los animales de experimentación susceptibles muestran síntomas histopatológicos idénticos a los producidos por las mismas cepas no estresadas.

Autor: COSTABEBER IJONI HILDA.
Año: 1998.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: Para la presente investigación se recogieron tanto datos de las encuestas y muestras de tejido graso mamario de mujeres donantes. Las muestras fueron sometidas a un proceso de extracción y purificación con n-hexano y florisil y posteriormente los residuos fueron determinados por cromatografía de gases con detector de captura de electrones. El objetivo central de la investigación fue correlacionar los residuos organoclorados con los datos de las donantes para poder establecer diferencias estadísticamente significativas, así como estudiar las concentraciones de los compuestos y los datos de las encuestas en los grupos control y con patología maligna, tras la clasificación según el informe anatomopatológico de las donantes. Los resultados mostraron una relación significativa entre los datos de las donantes como la edad, meses de lactancia, talla, índice de masa corporal, antecedentes personales y el peso, así como los niveles de uno o más de los compuestos estudiados. Igualmente se observó que los PCBs números 2, y 52 y el Aldrín presentaron concentraciones más elevadas en las donantes del grupo con patología maligna que en las del grupo control, con diferencias significativas, lo que nos conduce a pensar que estos compuestos pueden actuar como promotores del cáncer de mama.

Autor: MEDIAVILLA BRAVO CARLOS.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: VETERINARIA.

Resumen: Elcadmio es un tóxico medioambiental, que en condiciones normales se introduce en el organismo por la vía alimentaria y como consecuencia es un problema de Salud Pública. En ese aspecto se ha estudiado su toxicidad a nivelde: DL50' toxicocinética por via sanguínea, toxicidad crónica con su correspondiente estudio de anatomía patológica y los niveles en diversos organos de canales porcinas. Los objetivos se completan con la puesta a punto de un método contrastado y optimizado de Absorción Atómica en Horno de Grafito para el control de calidad de las concentraciones de cadmio en diversos órganos.

Autor: SIMON SALVADOR CARMEN M..
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA E HISTOLOGIA HUMANAS PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS: ORGANIZACION MORFOFUNCIONAL DEL SISTEMA NERVIOSO.

Resumen: Se ha realizado un estudio ultraestructural del territorio del núcleo arcuato de ratas Sprague-Dawley a las que se administró a los 4 días de edad por vía subcutánea 4 mg de glutamato monosódico por gramo de peso corporal, siendo sacrificadas 6, 12, 24, 36 horas y 4 días después de la inyección. Como controles se han utilizado ratas inyectadas con agua bidestilada. En los animales sacrificados seis horas después de la administración de glutamato monosódico la degeneración afecta a todas las neuronas del núcleo arcuato del hipotálamo, sin que puedan detectarse neuronas intactas. A partir de las 12 horas del tratamiento neurotóxico se constata ya la existencia de neuronas normales, cuyo número va incrementándose progresivamente hasta las 36 horas de supervivencia. En este periodo coexisten neuronas de aspecto normal con las degeneradas cuyo número va disminuyendo. La recuperación comienza en las porciones dorsales del núcleo y se va extendiendo hacia los territorios ventrales. El aspecto ultraestructural del territorio del núcleo arcuato a los 4 días de la lesión es similar al que se aprecia en los animales controles y las neuronas de los animales experimentales muestran signos de hiperactividad, entre los que destaca la abundancia de cuerpos gránulo-filamentosos citoplasmáticos. Sólo en los animales sacrificados 6 horas después de la administración del agente neurotóxico se han observado signos de lesión, si bien no severa, en los ependimocitos del territorio del núcleo arcuato, en especial en los del labio dorsal de la prolongación lateral del receso infundibular. Las imágenes ultraestructurales de animales sacrificados 6 y 12 horas después de la administración de glutamato monosódico permiten suponer que algunos ependimocitos participan en la gacocitosis de los restos celulares originados por la lesión. En las ratas tratadas la reacción microglial es patente entre las 6 y las 36 horas, si bien durante este período se producen cambios notables en su morfología y actividad fagocitaria. Así, a las 6 horas de la lesión, las células microgliales son escasas y no contienen residuos; a las 12 horas se incrementa su número y la cantidad de material fagocitado. A las 24 y 36 horas el número de células microgliales es muy elevado, sobre todo en los territorios ventrales. La máxima actividad fagocítica, expresada por la presencia de residuos en el citoplasma, tiene lugar a las 24 horas. A los 4 días de edad las células microgliales de los animales experimentales no muestran diferencias con los controles. Las observaciones permiten sugerir que las células microgliales que participan en la fagocitosis de los detritus neuronales pueden proceder de la activación de la microglia quiescente, de proliferación (mitosis) de este tipo celular en el foco de lesión y de células microgliales procedentes de la luz ventricular. Algunas de estas últimas podrían llegar a través de la prolongación lateral del receso infundibular. Las imágenes ultraestructurales son indicativas de que los astrocitos del territorio del núcleo arcuato de los animales experimentales participan tanto en la eliminación de los residuos neuronales, hecho ya patente a las 6 horas de la lesión, como en la repoblación neuronal por posible emigración desde otras zonas, fenómeno en el que los astrocitos podrían actuar mediante laminillas que rodean y pueden servir de guía a las nuevas neuronas.

Autor: TORRES ESCRIBANO CARMEN M..
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PREVENTIVA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDIOAMBIENTE Y SALUD, 265 A.

Resumen: EL OBJETO DE LA PRESENTE TESIS ES EL DESARROLLO DE UN METODO DE ANALISIS MULTIRRESIDUO PARA LOS PLAGUICIDAS MAS UTILIZADOS EN LOS CULTIVOS HORTOFRUTICOLAS DE LA COMUNIDAD VALENCIANA, Y SU APLICACION PARA EL CONTROL DE LOS RESIDUOS FITOSANITARIOS.LA PARTE EXPERIMENTAL, CONSTA DE UN PRIMER APARTADO DONDE SE PONE A PUNTO EL METODO DE ANALISIS MULTIRRESIDUO PARA PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS Y ORGANOFOSFORADOS.SE OPTIMIZAN LAS VARIABLES DEL METODO, Y DESPUES SE VALIDA CON TRES METODOS CLASICOS DE EXTRACCION LIQUIDO-LIQUIDO. EN EL SIGUIENTE APARTADO, SE INTENTA DEMOSTRAR QUE LA DMFS, SE PUEDE EMPLEAR PARA EL ANALISIS DE FRUTAS Y VEGETALES, EMPLEANDO CUALQUIER DETECTOR SELECTIVO DE CROMATOGRAFIA GASEOSA. EL TERCER APARTADO, ESTA DEDICADO A LA APLICACION DEL METODO A UN NUMERO MAS AMPLIO DE PLAGUICIDAS. SE REALIZA UN ESTUDIO COMPARATIVO ENTRE LA DMFS Y LA EXTRACCION EN FASE SOLIDA, EMPLEANDOSE COMO SOPORTE SOLIDO APOLAR OCTADECILSILICE Y CARBON GRAFITO. LA PARTE FINAL DE ESTA TESIS, ESTA DEDICADA A LA APLICACION DEL METODO DESARROLLADO A LA EVALUACION DE LA EVENTUAL TOXICIDAD DE ALGUNAS VARIEDADES DE CITRICOS CULTIVADOS EN LA COMUNIDAD VALENCIANA, CAUSADA POR LA PERSISTENCIA DE PLAGUICIDAS.

Autor: CANGA RODRIGUEZ VALCARCEL FERNANDO.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA.

Resumen: EL SAT ES UNA ENFERMEDAD SISTEMICA, RELACIONADA CON LA TOMA DE ACEITE DESNATURALIZADO Y ADULTERADO, Y QUE APARECIO EN ESPAÑA EN MAYO DE 1981. OBJETIVO: ESTUDIAR LA HISTORIA NATURAL DE LA HEPATOPATIA ASOCIADA AL SAT. PACIENTES Y METODOS: EN LA FASE AGUDA DEL SAT EL 24% DE 842 ENFERMOS TENIAN HEPATOPATIA. ELLOS FUERON SEGUIDOS HASTA ABRIL DE 1993. RESULTADOS: EN LA FASE AGUDA DEL SAT SE DETECTO HEPATITIS COLESTASICA TOXICA (91%), CBP (3%), SINDROME DE BUDD-CHIARI (3%) Y HEPATOPATIA NO SAT (3%). LA MORTALIDAD FUE DEL 0.5%. EN LA FASE CRONICA DEL SAT SE HALLO:29% DE LESIONES LEVES (HEPATITIS COLESTASICA TOXICA, CAMBIOS INFLAMATORIOS INESPECIFICOS), 22% DE LESIONES IMPORTANTES (ESTEATOHEPATITIS, HIPERPLASIA NODULAR, HEPATOPATIA CRONICA ACTIVA, CIRROSIS BILIAR, ENFERMEDAD VENO-OCLUSIVA Y ADENOMA), 29% DE REMISIONES, 15% DE LESIONES NO SAT, Y 5% DE LESIONES DESCONOCIDAS. EN BIOPSIAS SERIADAS SE OBSERVO PROGRESION DE LESIONES LEVES A IMPORTANTES. LA MORTALIDAD FUE DE 0.94%. CONCLUSION: LA EVOLUCION DE LA HEPATITIS COLESTASICA TOXICA FUE BENIGNA, PERO LA APARICION DE LESIONES POTENCIALMENTE GRAVES (22%) OBLIGA A MANTENER EL SEGUIMIENTO DE ESTOS ENFERMOS.