HEMATOLOGIA, 3

Autor: PUENTE GUTIEREZ JUAN JESUS.
Año: 2000.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE CORDOBA.

Resumen: INTRODUCCION: En los pacientes con ictericia obstructiva (IO) existe una elevacion de los niveles plasmáticos de péptido natriurético atrial (ANP), consecuencia de un aumento en la secreción cardiaca del peptido, recientemente la determinacion en sangre periferica de ANP y BNP constituye un marcador de disfuncion cardiaca subclinica. OBJETIVOS: 1.-Determinar la funcion cardiaca y los parametros hemodinamicos basales en la ictericia obstructiva. 2.-analizar si estos se correlacionan con ANP y BNP.3.- Estudiar la repercusion del drenaje biliar interno. METODO: Estudio clinico prospectivo longitudinal antes-despues sobre 13 pacientes con ictericia obstructiva sometidos a drenaje biliar interno (percutaneo 7, endoscopico 6). Se realizaron determinaciones hormonales (ANP, BNP, renina, aldosterona) y un estudio hemodinamico 24 horas antes del drenaje biliar y 72 horas despues de este. El estudio hemodinamico consistia en la insercion de un cateter Swan-Ganz. A su vez, cada medición cosntaba de 2 fases: una basal y otra tras una sobrecarga de volumen hasta una PCP 14 mmHg. RESULTADOS: Los niveles de ANP (104 pg/ml)y de BNP (47 pg/ml) se encontraron elevados respecto del grupo control. En la comparacion basal con los rangos de normalidad no hubo alteraciones en los parametros de funcion cardiaca, si bien el trabajo sistolico ventricular izquierdo (TSVI) guardo correlacion con la colemia (r=-0.78,p=0.002) y con el tiempo de ictericia (r=-0.73, p=0.005). En el analisis multivariante fueron pedictores del TSVI la bilirrubinemia, el tiempo de ictericia y los niveles de BNP. Tras el drenaje biliar se produce una mejora en el I.Cardiaco 3.4 vs 3.8 L/min.m2, p=0.03), I.Sistolico (48 vs 52 ml/m2) y TSVI (94 vs 112 g.m/m2). Esta mejora se acentuó comparando la respuesta a la sobrecarga de volumen tras el drenaje (TSVI 6 vs 14%), asi como el volumen requerido durante la sobrecarga (427 vs 703 mL). CONCLUSIONES: En la IO existe una disfuncion cardiaca subclinica, siendo factores determinantes la colemia, el tiempo de ictericia y los niveles de BNP. La restauración del flujo biliar consigue un descenso de ANP y BNP a la vez que mejoran los parametros de funcion cardiaca.

Autor: QUEROL GINER SERGIO.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACION CONTINUADA.

Resumen: Introducción: La evoluación de las experiencias clinicas iniciales han permitido demostrar la correlación entre dosis de PH comprometidos infundidos y velocidad de injerto mieloide. Además, la rapida recuperación de granulocitos y plaquetas disminuye la morbimortalidad relacionada con el procedimiento. La hemopoyesis puede mantenerse in vitro aplicando unas condiciones de cultivo especificas. Mediante la utilizacion de citoquinas selectivas se pueden generar celulas in vitro con caracteristicas funcionales definidas, en unos cultivos llamados de expansión. Hipotesis: la coinfusión de PH obtenidos mediante expansión reducirá el tiempo de neturopenia tras trasplante de SCU. Objetivos: La evolucón de la eficacia, aplicabilidad y resultados de un metodo de generacion de PH mediante expansion. Resultados: La amplificación de PH es significativamente mayor partiendo de células seleccionadas que de celulas monocucleadas. La adición de citoquinas de acción temprana, de acción intermedia y/o tardia promueve una mayor generación de PH comprometidos. En cultivos de 6 dias, existe un mayor rendimiento si se adicionan citoquinas diariamente, y/o se utilizan formas glicosiladas que aumentan su vida media. Es posible substituir la función del suero de ternera fetal utilizado medios libres de suero comerciales y se disminuye el coeficiente de variación (107% frente 61%). Mediante el análisis de las CAFC, se ha podido de terminar que la combinación más beneficiosa incluye SCF, FLT3-L, IL6,IL3 y MIP-1a(recuperación del 95%de CAFC a los 6 dias de cultivo). La substitución de IL3 y MIP por TPO mejora los resultados y permite recuperar hasta un 145% de CAFC. Se ha adaptado un método de uso clinico (Isolex-300i de Baxter) para pequeñas muestras de SCU criopreservadas. Tras 6 dias de cultivo en medio libre de suero en presencia de SCF,FLT3-L,IL6 y TPO, las celulas CD34+ iniciales se incrementan 7 veces. Este metodo se utilizo en 5 procedimientos clinicos : doble trasplante de SCU (una unidad expandida, otra no manipulada). Se incrementó el nº de PH en un 100% aproximadamente (0,23

Autor: ABAD GOSALBEZ ANA GUADALUPE .
Año: 2000.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La transfusion perioperatoria es un area bien delimitada en la Medicina Transfucional, su valoracion es imprescindible para poder determinar la reserva en cirugia programada. La finalidad del estudio fue valorar la reserva/transfusion y la reserva/transfusion adecuada de concentrados de hematies en algunos procedimientos quirurgicos con la finalidad de: 1º determinar el test de reserva y 3º, analizar, a partir de datos demograficos, clinicos y analiticos, algunos de los factores predictores de trasfusion perioperatoria, para asi poder realizar una estrategia personalizada desde el Banco de Sangre. Para ello, realizamos el presente trabajo en el Hospital marina Alta, un hospital comarcal de 120 camas de hospitalizacion, perteneciente al Servicio Valenciano de Salud. Se trata de un estudio observacional, retrospectivo y prospectivo y analitico de la transfusion perioperatoria de concentrados de hematies en cirugia programada. Se estudio a 1034 pacientes entre enero 1995 y octubre de 1998 sometidos a diferentes procedimientos quirurgicos con anestesia general y reserva preoperatoria de sangre, previamente se emitió desde el comité Hospitalario de Transfusion un protocolo de indicaciones de transfusion perioperatoria de concentrados de hematies. Las conclusiones de nuestro estudio son las siguientes. 1-Se detecta un exceso de reserva de unidades y un exceso de test de reserva en cirugia programada, el test de reserva global de eleccion es el tipaje y escrutinio de anticuerpos irregulares. 2-el nivel de hemoglobina postoperatoria mas bajo se detectó en los pacientes en los que se realizó resección abdominoperineal. 3-Se realizó transfusion periopertoria en: mastectomias (1,2%), histerectomias (10,4%), cirugia urológica (11%), cirugia ortopedica y traumatologica (37,7%), cirugia colorrectal (46,7%). La incidencia de transfusion no se modifico en los años de estudio, pero si aumento el porcentaje de transfusiones adecuadas. Ninguno de los pacientes colecistectomizados recibió transfusion.4-Proponemos como tests de reserva de eleccion: a)tipaje y escrutinio en histerectomias, reseccion transuretral vesical y prostatectomias, b) tipaje y escrutinio con o sin PCM en la cirugia ortopedica, c)tipaje y escrutinio junto con la prueba cruzada mayor en cirugia colorrectal, siendo necesario valorar en los grupos b y c la inclusion en programas de autotransfusión. 5-Proponemos la eliminacion del test de reserva preoperatorio en las colecistectomias por patologia beniga de vias biliares.6-Los pacientes con mayor riesgo de recibir transfusion fueron aquellos en los que se realizo cirugia colorrectal, con nivel de hemoglobina preoperatoria inferior a 11 g/dl y con edad superior a 60 años. 7-Mediante analisis multivariado de regresion logistica, el riesgo de recibir transfusion se relaciona con el grupo de intervencion quirurgica y el nivel de hemoglobina preoperatoria. El riesto ajustado de recibir transfusion adecuada es significativo ademas para la edad. Resulta imprescindible corregir la anemia preoperatoria para reducir la incidencia de trasfusion perioperatoria.

Autor: FERNÁNDEZ ABELLAN PASCUAL.
Año: 2000.
Universidad: MIGUEL HERNANDEZ.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Una de las complicaciones más graves en el paciente infartado es la nueva lesión isquémica. El estado hemostático del paciente puede ser un factor pronóstico en esta situación. Se estudió si ciertos parámetros de hemostasia son capaces de predecir la repetición de accidentes isquémicos en supervivientes de un infarto, con criterios clínicos de bajo riesgo. Se valoró si los hallazgos son independientes de los factores de riesgo cardiovascular. Se incluyeron en el estudio pacientes consecutivos supervivientes de un primer infarto ingresados en un servicio de Cardiología, durante un año. Todos tenían una prueba de esfuerzo de bajo riesgo. Se determinó los factores de riesgo cardiovascular a los que se encontraban expuestos. Medición los siguientes parámetros de homostasia: fibrinógeno, t-PA antigéncio, PAI-1 antigénico, factor von Willebrand, factor risular, TFPI total y libre. Seguimiento clínico durante un mínimo de cuatro años, valoración como mala evolución sufrir muerte súbita, reinfarto o ángor inestable. Valoración pronóstica uni y multivariante, con estimación de riesgo relativo. De los 55 pacientes estudiados 8 tuvieron evolución desfavorable (1 muerte, 2 infartos y 5 ángor inestable). El único factor de riesgo cardiovascular que resultó predictivo fue la cifra de HDL-Colesterol con RR; 0,8(0,6-0,9), p: 0,01 y como parámetro de hemostasia, el t-PA antigénico, con RR: 1,2 (1-1,6), p de 0,05. En el estudio multivariante las dos variables positivas en el univariante mantuvieron su significación estadística. Observamos que el t-PA antigénico es un marcador de pronóstico desfavorable en pacientes supervivientes de un infarto, dentro de los considerados de bajo riesgo, según criterios cardiológicos . El t-PA antigénico no parece estar influenciado por los factores de riesgo cardiovascualar clásicos.

Autor: ELIZALDE FERNANDEZ JOSEP IGNASI.
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAT MEDICINA U. BARCELONA.

Resumen: Puesto que la hemoglobina, in vitro, es capaz de modular la actividad biológica del oxido nitrico, se postuló que, in vivo, cambios en la concentración sanguinea de hemoglobina serían capaces de modular el tono vascular en la hipertensión portal. Para contrastar esta hipótesis, ratas con hipertensión portal o sometidas a una operación ficticia se trataron con eritropoyetina o placebo y se evaluaron diversos parámetros hemodinamicos dos semanas más tarde. El aumento de masa eritrocitaria atenuó el aumento en los flujos esplácnicos y los descensos en la presión arterial y resistencias vasculares propios de este modelo experimental. Además, tambien frenó las respuestas frente a la administración de nitroprusiato y L-NAME, lo que indica que el cuadro de vasodilatación esplácnica asociado a la hipertensión portal puede atenuarse aumentando la concentración sanguinea de hemoglobina, a través de mecanismos que incluyen la inactivación del NO. Un estudio de cohortes reveló que, en la cirrosis hepática humana, la coexistencia de anemia empeora la circulación hiperdinámica asociada a la hipertensión portal ya que, respecto a los casos sin anemia, los pacientes anémicos presentaron un gasto cardíaco más elevado y unas resistencias vasculares sitmémicas más bajas. El análisis de regresión logística reveló, que además de la edad, el sexo, el flujo sanguíneo de la vena acígos y la concentración de albumina, la concentración de hemoglobina es un factor con valor predictivo independiente sobre el grado de vasodilatación sistémica en estos pacientes. Además, los reultados obtenidos en un estudio prospectivo mostraron que un aumento en la masa eritrocitaria en pacientes con cirrosis y anemia aguda atenua su circulación hiperdinámica de forma, en parte, independiente de la variaciones en la viscosidad sanguinea.

Autor: MATEOS MANTECA M. VICTORIA .
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA. UNIV. SALAMANCA.

Resumen: El gen p16 es consdierado como un gen supresor tumoral clave en la regulación del ciclo celular, más concretamente en la fase G1 y transición de la fase G1 a la fase S, críticas en el desarrollo del mismo. Por ello, la investigación acerca de alteraciones que lo inactiven supone avances importantes en el conocimiento de la patogenia y desarrollo de neoplasia. A diferencia de lo que ocurre con otros genes supresores tumorales, las mutaciones puntuales como mecanismo de alteración del gen p16 son muy raras o inexistentes en muchos tumores, siendo las deleciones homozigotas y la metilación de la isla CpG localizada en la región promotora del exón E1 alfa los principales mecanismos de inactivación del mismo. En primer lugar, describimos la prevalencia de metilación del exón E1 alfa del gen p16 en 101 pacientes con MM y 5 Leucemias primarias de células plasmáticas, todos ellos al momento del diagnóstico, utilizando el método de digestión con enzimas de restricción sensibles a la metilación y PCR o Southern-blot. La prevalencia encontrada, 40%, pone de manifiesto que la metilación es un evento oncogénico frecuente en el MM ya descrito anteriormente, aunque los trabajos publicados hasta el momento en MM incluían un número reducido y seleccionado de casos. En segundo lugar, exponemos una comparación entre tres técnicas diferentes para e estudio de metilación del gen p16: dos de ellas, PCR y Southern-blot, utilizan enzimas de restricción sensibles a la metilación y la tercera está basada en la modificación que induce el bisulfito sódico sobre el ADN. Cualquiera de las tres es válida aunque esta última aporta ventajas ya que es una técnica sensible y específica que actúa sobre todo el ADN, evitando resultados falsos positivos y negativos. En tercer lugar, ampliamos la serie de nuestro estudio a un grupo amplio de pacientes con diferentes formas de GM, incluyendo formas indolentes y formas más agresivas, estableciendo una asociación entre la presencia de metilación del gen p16 y las formas más agresivas de GM. Por último, en el grupo de pacientes más numerosos (MM sintomático), analizamos la relación existente entre la metilación del gen p16 y las características clínico-biológicas de los pacientes, demostrando la asociación de metilación del gen p16 con una elevada fase S de las células plasmáticas, así como un peor pronóstico, corroborando e papel que el gen p16 tiene como gen supresor tumoral implicado en la transición de la fase G1 a la fase S del ciclo celular.

Autor: MORENO MIRALLAS M. JESÚS.
Año: 2000.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN Los nuevos conocimientos fisiopatológicos de las lesiones locales por frío han hecho que los criterios de tratamiento hayan sido modificados en los últimos años. La búsqueda de un tratamiento eficaz para las congelaciones es uno de los objetivos de este experimiento, intentando que sean fármacos que se administren con facilidad, de forma precoz y con pocos efectos secundarios. En nuestro estudio analizamos la eficacia de un antiagregante plaquetario, la ticlopidina, en comparación con una heparina de bajo peso molecular, las enoxaparina. METODOLOGÍA Se empleó el protocolo de producción de congelaciones bajo control informático, original de nuestro grupo de trabajo, con análisis de la variación de temperatura a 3 niveles tisulares. Los sujetos de estudio fueron 30 conejos albinos raza Nueva Zelanda, que se dividieron en 3 grupos de estudio: el grupo A (10 animales) fue el grupo control, el grupo B (10 animales), fue tratado con ticlopidina, una dosis previa a la congelación y luego 5 días después de razón de 14 mg/kg/v.o., y un grupo C (10 animales), con el mismo protocolo de tratamiento pero a dosis de 1 mg/kg/s.c., para un control de las lesiones se estudiaron diferentes parámetros clínicos, analíticos e histológicos. RESULTADOS Las variaciones de temperatura en los tejidos lesionados se encuentran en valores similares a los de anteriores experimentos, con una temperatura de congelación ósea de -4,8'C. En los grupos tratamientos B y C, existió una menor pérdida tisular respecto del grupo control. En el grupo tratado con ticlopidina existió una mayor tendencia hemorrágica respecto a los otros grupos. La actividad de tromboplastina parcial activida fue menor en el grupo tratado con heparinas de bajo peso molecular. CONCLUSIONES 1,- El empleo de protocolo de congelaciones se ha mostrado fiable y eficaz, obteniendo congelaciones de 3º grado en todos los sujetos de experimentación. 2,- El empleo de la enoxaparina es capaz de reducir el nivel de amputación postocongelación. 3,- La ticiopidina, administrada por vía oral, también reduce la pérdida tisular, si bien existe una mayor tendencia a la anemización en los animales tratados con ella. 4,- No existieron fenómenos hemorrágicos graves en ninguno de los grupos de experimentación.

Autor: HOMS GIMENO CARLOS ALBERTO.
Año: 2000.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCIÓN Se han descrito una diversidad de alteraciones hemorreológicas en pacientes con síndrome coronario agudo, que probablemente están al menos en parte exhibiendo aspectos de los efectos producidos por el proceso inflamatorio. Dichas alteraciones pueden desencadenar un círculo vicioso que agrave la isquemia en pacientes con síndrome coronario agudo. Se han planteado como objetivos el estudio del perfil hemorreológico en un grupo de pacientes con síndrome coronario agudo sometidos a revascularización percutánea y de su comportamiento en función de la evolución clínica de los pacientes, así como los efectos que provoca la revascularización percutánea sobre dichas variables. MATERIAL Y MÉTODO Se ha realizado un estudio de tipo objetivo descriptivo y longitudinal, con un Grupo Control constituido por 76 sujetos, Donantes de Sangre del HCU de Zaragoza, voluntarios sanos y sujetos > 65 años pendientes de intervención de cataratas sin patología asociada. La población a estudio la han constituido 114 pacientes ingresados en la UCI del HCU de Zaragoza y sometidos a revascularización coronaria en el periodo de tiempo comprendido entre Diciembre-97 a Junio-2000. RESULTADOS El estudio estadístico confirma la existencia de alteraciones hemorreológicas en pacientes con síndrome coronario agudo, aunque los parámetros hemorreológicos estudiados no se asocian a un curso desfavorable. La elevación del fibrinógeno plasmático se correlacionó positivamente con la gravedad inicial de la presentación clínica, así como con una mayor incidencia de eventos coronarios en los 2 años de seguimiento. La extensión angiográfica de enfermedad coronaria se correlacionó con la viscosidad plasmática y con los niveles de fibrinógeno. El tratamiento revascularizador en el síndrome coronario agudo induce una mejoría inmediata del perfil hemorreológico de los pacientes, manifestado por descenso tanto de la viscosidad sanguínea como de la agregabilidad eritrocitraria.

Autor: RIVERA GALLEGO ALBERTO JOSE .
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: INTRODUCCIÓN El síndrome antifosfolípido (SAF) es una entidad caracterizada por la asociación de trombosis, tanto arterial como venosa, y/o pérdidas fetales de repetición y la presencia de anticuerpos anticardiolipina (aCL) y/o anticoagulante lúpico (AL). El factor tisular (FT) es una glicoproteína de membrana presente en múltiples células del organismo. Entre sus diferentes propiedades, se considera el principal indicador de la coagulación in vivo. Al producirse la modificación oxidativa de la lipoproteína de baja densidad (LDL) adquiere una serie de propiedades que favorecen el desarrollo de aterosclerosis. HIPOTESIS El suero de pacientes con SAF primario produciría la expresión de FT en monocitos. En el suero de los pacientes con SAF existen anticuerpos anti LDL oxidasa (Ac anti LDL ox). OBJETIVOS Valorar la presencia de Ac anti LDL ox, objetivar la expresión de FT por el suero de pacientes con SAF primario, correlacionar los anteriores parámetros con los AC característicos de ésta enfermedad y buscar una relación con los episodios trombóticos. PACIENTES Y MÉTODOS Estudio multicéntrico (Hospital Xeral de Vigo y Vall d'Hebrón de Barcelona) comparativo de casos-control, formado por 35 pacientes con diagnóstico de SAF primario con trombosis vascular y aCL positivo y 40 controles. A todos los sujetos de los distintos grupos se evalúan la presencia de factores de riesgo para trombosis, aCL, AL, LDL ox y expresión de FT. RESULTADOS No existieron diferencias con respecto a la edad y sexo entre pacientes y controles. Se registró una mayor incidencia de fumadores, obesos e hipertensos en el grupo control. Entre los controles, únicamente un paciente fue positivo para aCL, alcanzándose una mediana y amplitud de 27 GPL y 35 en los pacientes. Un 88% de los pacientes presentaron valores positivos para Ac anti beta2-GPI, siendo la mediana y amplitud de 14 y 14; sólo un control fue positivo; las medianas entre los casos con trombosis venosa y arterial fueron de 13,5 y 14, con amplitud de 13 y 17,5 respectivamente. Los valores obtenidos (mediana y amplitud) en los Ac anti LDL ox fueron de 97 OD y 75 OD entre los controles y de 240 OD y 158 OD entre los pacientes (p

Autor: ROJAS CONTRERAS RAFAEL.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: MEDICINA.

Resumen: Estudiamos los efectos radioprotectores de rh-G-CSF, rm GM-CSF y rm IL-3 en el rescate de la muerte post-irradiación de ratones BALB/C letalmente irradiados (DL100/30). La administración de una dosis única de rh-G-CSF de 1 g/2h post-ICT ( irradiación Corporal Total) de 700 cGy es capaza de rescatar hasta una reconstitución hematopoyética completa un 80% de los animales. Dosis de 0,25 caració de efecto.Dosis de 0,5 y 2 /g fueron menos radioprotectoras. Cuando el rh-G-CSF se administra 24 h y 2 h pre-ICT el efecto radioprotector es menor. Administrado 24 h post-ICT carece de efecto radioprotector. A dosis de0,25; 0,5; 1 y 2 g/g en dosis única post-ICT ni el rm-GM-CSF ni la rm-IL-3 protegen de la muerte post-irradiación. Ratones BALB/C inoculados con leucemia murina LSTRA pueden ser curados de leucemia tras ser sometidos a una ICT letal y rescatados conG-CSF dependiendo de la concentración de células leucémicas inyectadas. Ratones inoculados con 10 elevado a 4 no son curados. La inmunoterapia combinando rh-IL-2 a dosis bajas (4.000 ui/ratón/día desde el dia +1 a +28) más rm-GM-CSF ( 1/kg/día desde día +7 a +28) post-ICT más rescate con rh-G-CSF aumenta el rango de curabilidad hasta rartones inoculados con 10 elevado a 4 y un 40% de ratones inoculados con 10 elevado a 5. Este efecto se debe a un aumento de la actividad LAK sin aumento de NK detectado en los días +21 y +28 del tratamiento. Utilizando una metodología empleada en humanos consciente en amplificación por PCR de la región complementaria determinante 3 del gen de la cadena pesada de las Ig con cebadores consenso par la región Vh y Jh hemos encontrado una banda de amplificación undicadora de clonalidd enlas líneas leucémicas L1210 y LSTRA. Hemos secuenciado ambas bandas y corresponden a un trozo de cadena pesada de inmunoglobulina de ratón, no descrito previamente y por lo tanto útil como marcador tumoral de dichas líneas para estudios de enfermedad mínima residual.

Autor: SERRANO GOMEZ FERNANDO.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL BIOTECNOLOGIA.

Resumen: La terapia génica humana ofrece perspectivas de tratamiento para diversas enfermedades genéticas hereditarias o adquiridas. Entre las diversas dianas para la inserción de genes terapéuticos el tejido hematopoyético ha recibido la máxima atención debido a su facilidad de obtención, su capacidad de injerto en la médula ósea del receptor y, sobre todo, a su potencialmente ilimitada capacidad de autorenovación. Con el fin de desarrollar un protocolo de transferencia génica preclínico se han realizado transplantes de progenitores hematopoyéticos humanos, utilizando como modelo el ratón NOD/scid. Estos resultados muestran la presencia de células capaces de injertar en el ratón NOD/scid que ocurren en la fracción mononuclear y en la fracción CD34+ y sugiere la existencia de un tipo celular (SRC) capaz de producir un injerto con propiedades de renovación y automantenimiento típicos de la célula troncal hematopoyética. El modelo de xenotransplante humano en ratón NOD/scid mimetiza los aspectos fundamentales de transplante de progenitores hematopoyéticos humanos. Se seleccionaron diversos vectores retrovirales para la tranferencia génica de las células hematopoyéticas utilizando el marcador superficie de seguridad biológica AhuGHR+ desarrollado por nosotros la exposición múltiple a sobrenadantes retrovirales concentrados de este vector produce transferencia génica de la célula que repuebla al animal scid.

Autor: BORNSTEIN SANCHEZ RAFAEL.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL UNIVERSAL DOCE DE OCTUBRE.

Resumen: El objetivo principal de este estudio ha sido la evaluación y estandarización de protocolos para la creación de un Banco de Sangre de Cordón Umbilical(SCU), habiendo sido desglosado en dos objetivos parciales: la caracterización de la SCU mediante estudio experimental de las propiedades hematopoyéticas e inmunológicas de la misma, y la puesta a punto del procesamiento de SCU para su validación como unidades trasplantables. Se ha realizado un análisis fenotípico y de clonogenicidad de células hematopoyéticas, así como un estudio fenotípico y funcional de poblaciones linfocitarias de SCU, comparándose con muestras control de médula ósea(MO) y sangre periférica de adultos(SPA). Respecto al segundo objetivo del trabajo, se ha hecho un estudio comparativo de diferentes protocolos de obtención, fracionamiento y congelación con el fin de preservar la máxima celularidad y viabilidad en las unidades procesadas. Asimismo, para su validación definitiva, se han definido criterios normalizados que incluyen la tipificación del complejo HLA con técnicas de alta resolución y la detección de posibles enfermedades transmisibles que garantice la seguridad en los eventuales receptores de trasplante. Las conclusiones globales de este estudio son:1) la proporción de células progenitoras hematopoyéticas es superior en SCU que en MO y SPA movilizada, lo que sugiere un mayor potencial de repoblación hematopoyética;2) los linfocitos de SCU muestran una relativa inmadurez fenotípica y funcional que permite predecir un menor potencial de enfermedad injerto contra huesped asociado a la SCU;3) la combinación de venopunción y perfusión de la placenta enriquece significativamente la celularidad de las unidades; 4) la SCU conservada a 4º C más de 12 horas sufre una reducción importante en la clonogenicidad y viabilidad celular;5) se ha optimizado la estandarización de métodos de procesamiento basada en el empleo de hidroxietil almidón para el fraccionamiento, bolsas de congelación de 24 ml. Inmersión en nitrógeno líquido y solución de albúmina/dextrano en la descongelación de las unidades, con los que se consigue preservar casi la totalidad de su potencial hematopoyético; 6) los criterios aplicados en la validación garantizan su idoneidad y una óptima selección de parejas donante/receptor. Como consecuencia de este estudio,se ha establecido un Banco de SCU en el Hospital 12 de Octubre de Madrid con la inclusión, hasta el momento, de 139 unidades validadas y potencialmente elegibles, en el contexto del REDMO, para su utilización como fuente de células progenitoras hematopoyéticas para trasplante.

Autor: ZUAZAGOITIA MOLINERO JOSE IGNACIO .
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCION: Diversos organismo internacionales (Organización Mundial de la Salud, Comisión Europea), nacionales y organizaciones de referencia en numerosos bancos de sangre postulan que el acto de donar sangre total no debe tener una duración superior a los 8-10 min. Las donaciones que druren más de ese tiempo se recomienda que no seanutilizadas para la preparación de concentrados de palquetas ni de plasma fresco congelado. La larga duración se postula que puede provocar una activación plaquetaria excesiva y la puesta en marcha de los mecansimo de la coagulación. OBJETIVO PRINCIPAL: Estimar el riesgo que supone la larga duración de la donación de unidades de sangre para la calidad de los concentrados de plaquetas y del plasma fresco congelado. MATERIAL Y METODOS: El estudio se llevó a cabo en dos fases. Diseño: Estudio descriptivo transversal con muestreo probaliblístico por conglomerados (Colectas de sangre organizadas por el Centro de Transfusión de la Comunidad de Madrid) en ambas fases. Población diana: donaciones realizadas en dicho centro en el años 1,997, aproximadamente 70.000. Primera fase: Objetivo: estimar la proporción de unidades de sangre donadas en un tiempo superior a los 10 min. Muestra: 72: 36 unidades de larga duración y 36 de duración normal. Variable independiete: tiempo de donación. Variables dependientes, entre otas:b-tromboglobulina y factor plaquetario 4, factor-VIII, fibrionógeno, variables implicadas en el control de calidad de los concentrados de palquetas. ANALISIS DE LOS DATOS: Se caluclaron medias, desviaciones estándar e intervalos de confianza al 95% par las variables cuantitavias, y proporciones de las diferentes categorías de las variables cualitativas con intervalos de confianza al 95%. Para comprobar la existencia de diferencias significativas de las variables dependientes según los diferentes niveles de las variables independientes se construyeron modelos de análisis de la varianza. Cuando las submuestras eran mendores de 30 lo análisis se lelvaron a cabo mediante prubeas cde contraste de hipótesis no paramétricas. En todas las fases la hipótesis nula fue la no existencia de diferencias. El nivel de significaciónpara rechazar la hipótesis nula fue del 0,05. Todos los contrastes fueron de dos colas. RESULTADOS: Primera fase: Proproción de donaciones de más de 10 min.: 10,8% (IC95%: 7,80-14,67), donan más hombres que mujeres y el 25% de los donantes lo hacen por primera vez. La edad media se situó en 31 años (IC95%: 29,80-32,23). En el análisis de la varianza y en la regresión logística sólo la variable sexo explicaba la variación de la variable dependiente por el hecho de que las donaciones de larga duración o no. CONCLUSIONES: No existen pruebas suficientes, según el prsente estudio, para pensar que una duración superior a los 10 minutos del acto de donar sangre suponga un factor de riesgo para la calidad de las plaquetas y el plasma fresco congelado y, por tanto, no hay pruebas suficientes para recomendar la no utilización de estos hemoderviados.

Autor: NIETO REGUEIRA YAGO.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La presente Tesis Doctoral ha evaluado 23 variables con potencia capacidad de predecir la recurrencia tumoral tras tratamiento conquimioterapia intensiva en una serie de 176 pacientes con cáncer de mama primario de alto riesgo. El tamaño tumoral, es estatus hormonal combinado. El cociente ganglionar (definido como el número de ganglios afectos dividido por el número de ganlios desecados), y la sobreexpresión del oncogén Her-2/neu fueron factores asociados, con carácter independiente, la riesgo de recaída tras esta terapia. El modelo resultante, basado en estos factores, se puso a prueba en una segunda muestra de 244 pacientes de similares características, sometidas al mismo tratamiento en otro centro. Mediante este procedimeinto de validación externa se verificó la robustez del modelo. El modelo segrega res grupos de pacientes condiferentes probabilidades de supervivencia libre de enfermedad (SLE) a largo plazo: 1- Grupo de bajo riesgo: puntuación predictiva (basada en el tamaño tumoral, estatus hormanoal y cociente ganlionar) bja, Her-2/neu negativo (SLE superior al 90%). 2- Grupo de riesgo intermedio; puntuación baja, Her-2/neu negativo (SLE de aprox. 70%). 3- Grupo de riesgo alto: puntuación alta, cualquier Her-2/neu (SLE de aprox. 30%).

Autor: SUBIRA PEREZ DOLORES.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Autor: FERRER MARIN FRANCISCA.
Año: 1999.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La preocupación por los efectos indeseables de los leucocitos contaminantes está conduciendo al uso generalizado de concentrados de plaquetas (CPs) desleucocitados. Sin embargo, el impacto que los procedimientos de leucodepleción (LD) por filtración tienen en la calidad global de las plaquetas, así como, el mejor momento para su realización, antes o después del almacenamiento, no ha sido suficientemente evaluada. Por tanto, el objetivo general de este trabajo ha sido "Evaluar la calidad de los CPs desleucocitados mediante filtración en diferentes momentos de su preparación y almacenamiento". Para ello, nos planteamos los siguientes objetivos específicos: 1o) Evaluar la calidad global de los CPs leucorreducidos durante su preparación mediante un nuevo filtro "in-line", y 2o) Evaluar las posibles diferencias derivadas del momento de la LD por filtración de mezclas o "pooles" de CPs, prealmacenamiento (día 1) vs. postalmacenamiento (día 5), en relación con la calidad de los "pooles" resultantes. Para desarrollar nuestro primer objetivo, veinte unidades de sangre total se distribuyeron aleatoriamente para su fraccionamiento, estándar o mediante LD "in-line" del plasma rico en plaquetas (PRP) a través del filtro ATS PL-Pall. En nuestro segundo estudio, "pooles" de CPs fueron leucorreducidos antes o después de 5 días de almacenamiento, usando para ello un filtro PXL-8 (Pall). En ambos estudios, a lo largo del almacenamiento, se tomaron muestras para evaluar la eficacia de la LD en términos de desleucocitación y recuperación plaquetaria postfiltración, metabolismo plaquetar, expresión de glicoproteinas plaquetarias (CD62, CD 63, Ib y IIb/IIIa), contenido de citocinas y anafilotoxinas, así como, marcadores de coagulación y generación de trombina. De acuerdo a los objetivos planteados y a los resultados obtenidos, podemos concluir que: 1o) La filtración "in-line" del PRP mediante el filtro ATS-PL es un procedimiento sencillo y eficaz de LD que no afecta la viabilidad, metabolismo o funcionalidad plaquetarias, ni tiene un impacto relevante en la generación de trombina en los CPs. Por contra, previene la acumulación de las inteleucinas (IL) IL6 E IL8, citocinas potencialmente implicadas en reacciones febriles. Sin embargo, la filtración "in-line", no previene, o incluso aumenta, la acumulación de otras sustancias biorreactivas, potencialmente peligrosas para los receptores, como el TGF-beta 1 o las anafilotoxinas C3a y C4a. 2o) El momento de la filtración de "pooles" de CPs, a través del filtro PXL-8, pre o postalmacemiento, tiene poco impacto en la eficacia de la LD o en la recuperación plaquetaria post-filtración y no parece afectar de forma relevante la calidad "in-vitro" de las plaquetas o la generación de trombina en los CPs. Si es determinante en la acumulación de sustancias biorreactivas. Así, la LD precoz (día 1) reduce la acumulación de la IL6 e IL8, lo que podría reducir la frecuencia y/o severidad de las reacciones transfusionales febriles. Por el contrario, debido a las propiedades de retención de algunas sustancias biorreactivas con el filtro PXL-8, la filtración postalmacenamiento, podría reducir la cantidad infundida de anafilotoxinas en los receptores. Finalmente, el procedimiento de filtración, independientemente del momento de su realización, pre o post- almacenamiento, produce un incremento discreto y transitorio en el estado de activación plaquetaria y en el caso de filtración con PXL-8, induce un incremento significativo del tiempo de tromboplastina parcial activada.

Autor: ANDRES MARTINEZ IGNACIO.
Año: 1999.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.UNIVERSIDAD DEL PAIS VASCO.

Resumen: La presente tesis se comenzó a realizar partiendo de una problemática muy habitual en los Bancos de Sangre de nuestro país: la escasez de plaquetas debido a su corto período de caducidad. Partiendo de esta base y después de una consulta bibliografica se comenzo a realizar el estudio para ver si se podría prolongar el periodo de caducidad de los C.P. En teoría los C.P. Se desechan al 5 día por el riesgo de contaminación. Así que nuestro primer parámetro a valorar fue si existia o no contaminación. Para verificar esto se hicieron cultivos de plaquetas al 5 y 7 día. Una vez comprobado que las plaquetas eran estériles se pasó a comprobar una serie de parámetros para ver si además eran viables y se podrían transfundir con garantias. De acuerdo a la bibliografía se midieron como parámetros más destacables el Ph, el número de plaquetas por ml y por bolsa, la turbidez, el numero de leucocitos por ml y por bolsa y el número de hematíes de todos los C.P.De tal forma observamos que al 7 día de conservación la calidad y viabilidad de las plaquetas era similar que al 5 día y que no había diferenciación estadística. Por último se realizó una prueba de funcionabilidad para ver si las plaquetas conservadas durante 7 días eran capaces de realizar bien su función, para este estudio se utilizó agregaciones con ADP siendo los resultados al 5 y 7 dia equiparable y sin significacion estadistica.

Autor: PITARQUE MARTÍ MARIA .
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: GRUP DE MUTAGÉNESI.

Resumen: Se realizó la evaluación de los posibles efectos genotóxicos que podrían aparecer en diversos colectivos de trabajadores como consecuencia de la exposición laboral a algunos derivados del petroleo, como por ejemplo los vapores de la gasolina y las emisiones de los motores de combustión, así como los disolventes orgánicos. Para alcanzar este objetivo fundamental, se llevo a cabo el monitoreo ambiental de los escenarios escogidos (gasolineras y aeropuerto de Barclona, y dos fábricas de manufacturación del calzado en Bulgaria), junto con la medición de los niveles de exposición interna de los trabajadores a partir del análisis de algunos biomarcadores (metabolitos del benceno y tolueno en orina, hemoglobina en sangre). Finalmente, se intentaron correlacionar estos datos conlos resultados obtenidos en los ensayos de genotoxicidad SCE y MN en linfocitos de sangre periférica, ambos comúnmente utilizados en nuestro laboratorio. Además, otro ensayo recientemente adaptado y asimilado por el Grupo de Mutagénesis, el ensayo del Cometa, se aplicó a estos estudios de biomonitorización y a los estudios degenotocidad in vitro, aprovechando su sensibilidad, versatilidad i rapidez, características que lo convierten en una herramienta muy interesante para estudiar los efectos de una exposición que posiblemente podría inducir daño oxidativo en el DNA, como la que encontramos en estos colectivos de trabajadores. En el análisis estadístico de los resultados se incluyeron diversos factores de confunsión que podían influir en la respuesta genotóxica de los individuos. Entre estos factores, algunos están relacionados con el estilo de vida (edad, tabaco y consumo de alcohol) y otros tienen que ver con la posible susceptibilidad indiviudal determinada por los polimorfismos genéticos de los enzimas metablizadores de xenobióticos. En este sentido, en la biomonitorización de las trabajadores de la industria del calzado expuestas a disolventes orgánicos, se analizó el posible efecto modulador de los genotipos GSTM1 y GSTT1. Por otro lado, en un estudi in vitro, utilizando los ensayos SCE y MN enlinfocitos humanos de sangre periférica, se evaluaronlos efectos genotóxicos de algunas muestras de gasolina comercial. Además, se estudió la inducción de daño oxidativo de un metabolito del benceno, el bencenotriol,mediante el ensayo del Cometa.

Autor: VILA LOLO M. CARMEN.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCOLA DE DOCTORAT.

Resumen: La paracentesis evacuadora asociada a expansión del volumen plasmática es un tratamiento seguro y eficaz para la ascitis tensa en los pacientes con Cirrosis Hepática. Cuando se realiza sin expansión del volumen plasmático, se produce una disfunción circulatoria(DCPP), que se traduce por una marcada activación del sistema renina-angiotensina-aldosterona y que puede asociarse con frecuencia a un deterioro de la función renal. Este fenomeno puede prevenirse con la utilización de albumina ev. La utilización de expansores plasmáticos sintéticos, de menor coste económico,se halla controvertida. La relevancia clínica de la DCPP es desconocida. La seguridad de la paracentesis evacuadora de grandes cantidades de volumen en pacientes con ascitis tensa y enfermedad hepática avanzada con severo deterioro hemodinámico, tal como hiponatremia dilucional severa y/o insuficiencia renal, no ha sido evaluada. El mecanismo por el cual se produce la DCPP todavia permanece desconocido. Esta tesis doctoral comprende 3 protocolos de estudio cuyos objetivos son: Investigar la eficacia de la seroalbúmina y de los coloides artificiales en la practica de las paracentesis de gran volumen, y establecer la trascendencia clinica real de la aparición de DCPP; investigar las alteraciones de los sistemas vasoactivos endógenos en los pacientes con hiponatremia dilucional, y los cambios hemodinámicos que se producen en los pacientes que desarrollan DCPP. En el primer protocolo, realizado como estudio multicéntrico, se incluyeron 289 pacientes cirróticos ingresados en el hospital por un episodio de ascitis tensa y sodio urinario 130 mE/L. Todos los pacientes fueron tratados mediante parecentesis evacuadora total y administración ev de albúmina coloides artificiales. Se realizaron determinaciones para función hepatica, renal e ionograma, ARP, aldosterona, en condiciones basales, 2 y 6 dias postparacentesis. La enfermedad hepática y el deterioro hemodinámico fue más severa en el grupo 1. No hubo diferencia en cuanto a la incidencia de DCPP y de complicaciones. En el protocolo 3 fueron incluidos 46 pacientes cirróticos ingresados en el hospital para el tratamiento de un episodio de ascitis tensa. Todos los pacientes fueron sometidos a paracentesis evacuadora total asociado a la administración ev de albúmina o coloides artificiales. Se realizaron determinaciones para función hepática y renal, electrolitos, ARP, aldosterona, asi como estudio hemodinamico incruento con GC y RVS, determinación de FC,TAM,PVC en condiciones basales y a las 3,6 horas y 6 dias postparacentesis. Se produjo DCPP en 20 pacientes (43.4%). En estos pacientes en la fase precoz postparacentesis se produjo un descenso de la ARP, ALD,TAM,PVC y de las RVS, estos cambios persisten a los 6 dias de la paracentesis. Existió una correlación inversa entre las variaciones registradas en la ARP y RVS al sexto dia y basal. Conclusión: la DCPP no es un fenómeno reversible espontaneamente y se asocia a un descenso en la supervivencia. La albúmina es más eficaz que los expansores sintéticos en la prevención del desarrollo de DCPP. La Paracentesis evacuadora total asociada a expansion del volumen plasmatico es un metodo seguro y eficaz para el tratamiento de la ascitis tensa en pacientes con hiponatremia dilucional severa. La DCPP es debida predominantemente a una acentuación de la vasodilatacion arterial que ya presentan estos pacientes, que podria estar en relacion con un mecanismo local relacionado con la movilización brusca de la ascitis.

Autor: MORALES SANZ M. DOLORES.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se realiza el estudio retrospectivo de 119 casos de Enfermedad de Hodgkin diagnosticados y tratados en el Servicio de Hematología del Hospital Universitario San Carlos de Madrid. El diagnóstico se obtuvo mediante biopsia de un ganglio periférico en el 86.6% de los casos. Los subtipos histológicos más frecuentes fueron la EN y la CM. El 55,5% de los pacientes presentaron síntomas B y el 28,8% mal estado general. La laparotomía modificó el estadío en el 27,5% de los casos en los que se realizó. El 15,9% de los pacientes presentaron estadío I, el 31,9% estadío II, el 31% estadío III y el 21,2% estadío IV. El plan terapéutico inicial incluyó RT en el 26,3% de los pacientes, quimioterapia en el 60,2% y tratamiento combinado en el 13,5%. La tasa global de RC del conjunto de la serie fue del 90%. Presentaron valor pronóstico negativo independiente en relación con la obtención de la RC, la presencia de afectación extraganglionar, de anemia, y de linfopenia al diagnóstico. La probabilidad acumulada de SLE de la serie global a los 5 años fue del 67.1% y a los 10 años del 55.6%. De los factores pronósticos analizados en relación con la SLE, el tratamiento inicial fue el único con significación estadística. La mediana de supervivencia global del conjunto de la serie fue de 13.48 años con una probabilidad de SG a los 5 años del 75,1% y a los 10 años del 58,2%. Los factores con significado pronóstico adverso independiente en relación con la SG fueron el sexo masculino, la presencia de afectación extraganglionar, de anemia y de linfopenia. El porcentaje de recaídas de la serie global fue del 28,3%. Con el tratamiento de rescate se obtuvo una segunda RC en el 66,7% de los pacientes. La probabilidad de SLE de los pacientes que alcanzaron una segunda RC fue del 73% a los 10 años. La probabilidad de SG de los pacientes que recayeron fue del 71% a los 5 años y del 48,4% a los 10 años. La probabilidad de SG de los 20 pacientes que obtuvieron una segunda RC fue del 88,1% a los 5 años y del 80,1% a los 10 años.#