HEMATOLOGIA, 4

Autor: ESQUIVEL BENITO FATIMA.
Año: 1999.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Del estudio realizado sobre las celulas B purificadas de sangre periferica de pacientes con LLC-B se deducen las siguientes conclusiones: 1)La respuesta proliferativa de las celulas B es heterogenea. Se identifica de forma mayoritaria un estado de refractariedad al estimulo blastogenico dado por ligandos de inmunoglobulinas y/o esteres del forbol. De forma ocasional la asociacion de ambas señales es capaz de inducir una blastogenesis relevante. 2) La concentracion celular en el cultivo es una variable que determina la respuesta proliferativa a señales mitogenicas en una proporcion relevante de pacientes, 69%. Este efecto de la concentracion celular esta mediado, al menos en parte, por la secrecion de factores solubles. El heterogeneo efecto de la concentracion celular entre los clones leucemios analizados no esta asociado con las variables clinicas analizadas. 3) La muerte celular en los cultivos de celulas leucemicas no depende unicamente del fenomeno de apoptosis. Asimismo, la muerte por apoptosis no esta asociada a la produccion de radicales de oxigeno. 4)Las celulas B tienen una reducida capacidad de moviliar Ca 2+ en respuesta a ligandos de inmunoglobulinas, que no correlaciona con el estadio, las caracteristicas clinicas de los pacientes, el perfil fenotipico, la capacidad blastogencia, la viabilidad ni la apoptosis celular. 5) en condiciones basales la expresion intracitoplasmatica de TNF-alfa, IFN-gamma, IL-6 o IL-10 es heterogenea entre los pacientes. De forma mayoritaria unicamente un bajo porcentaje de las celulas expresan niveles detectables de las mencionadas proteinas, sin embargo, de forma aislada se puede econtrar un amplia expresion de TNF-alfa o de IL-6. La estimulacion con ligandos de inmunoglobulinas o estimuladores de la proteina quinas C inducen la produccion de TNF-alfa e IL-l intracitoplasmatica en un porcentaje mayor del 50% de los casos estudiados. La ausencia o muy limitada deteccion basal de celulas que expresen a nivel proteico las citoquinas referidas tambien se asocia a su falta anivel de ARNm. 6) La deteccion de ARNm de c-myc en las celulas ex vivo y su modulacion por estimulos policlonales tras cultivo in vitro indica que no son linfocitos inertes in vivo y que son sensibles a la accion moduladora de señales activadoras de celulas B.

Autor: CERVERO SANTIAGO CARLOS JAVIER.
Año: 1999.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: CONCLUSIONES.1)Entre las diferentes poblaciones de celulas mononucleadas presentas en las leucoaféresis utilizadas en el trasplante autologo de progenitores hematopoyéticos de sangre periferica, es posible detectar la presencia de linfocitos T, y celulas NK susceptibles de actuar como celulas efectoras de la actividad antitumoral mediante su activacion con interleucina 2.2) Tras su crioconservacion, des-congelacion y cultivos de altas concentraciones (1000UI/ml) de interleucina -2 durante 48 horas, no se detecta una respuesta proliferativa de celulas NK o T, aunque es posible observar un incremento en la expresion de antigenos marcadores de activacion celular en dichas celulas. Los estudios de citotoxicidad ponen de manifiesto un aumento de la actividad litica de las celulas incubadas con interleucina-2 frente a ciertas lineas de celulas tumorales NK-sensibles como K562. La incubacion de 48 horas no es suficiente para garantizar un aumento significativo de la actividad litica frente a celulas de linea tumoral NK-resistente como Raji. 3)Tras la incubacion de 14 dias con concentraciones bajas de interleucina-2 es posible observar un aumento en la proporcion de linfocitos NK y en la expresion de dicha poblacion celular, de antigenos marcadores de activacion. Los estudios de citotoxicidad demuestran un incremento de la actividad litica frente a celulas de lineas tumorales NK-sensibles como K562 yNK-resistentes como Raji, tras 14 dias de incubacion con concentraciones de 10 UI/ml de interleucina-2. Este hecho corrobora que el proceso de activacion celular,iniciado con concentraciones altas de interleucina-2, puede ser mantenido con el tiempo e incluso incrementado con concentraciones bajas de dicha citocina, susceptibles de ser alcanzadas "in vivo" en el paciente sometido a trasplante. 4) La citometria de flujo ha demostrado ser un metodo valido y reproducible para llevar a cabo estudios de citotoxicidad. 5) Los progenitores hematopoyeticos de sangre periferica, movilizados, criopreservados, descongelados, cultivados durante 48 horas con 1000 UI/ml de interleucina-2 y durante 14 dias con 10 UI/ml, retienen un adecuado potencial proliferatvo la reconstitucion hematopoyetica del paciente trasplantado.

Autor: CASTILLO VALERO INMACULADA.
Año: 1998.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Debido al mal pronóstico de las pacientes con cáncer de mama localmente avanzado (estadios II y III) se plantea tratamiento con quimioterapia a altas dosis (QAD) seguido de trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos de sangre periférica. OBJETIVOS: Estudiar los factores implicados en la recuperación hematológica (RH) precoz y tardía en 71 pacientes. METODOS: Se analiza la celularidad obtenida después de movilización con G-CSF (10mcg/Kg) mediante células nucleadas, células CD34+ y CFU-GM. Se administró 2 tipos de QAD y 52 pacientes recibieron G-CSF postrasplante (5mcg/Kg). Se estudia el efecto de la cifra de CD34+ y de la administración de G-CSF en la RH y en las complicaciones y cuidados de soporte. Además se estudia el efecto de la radioterapia (RT) complementaria. RESULTADOS: Las células CD34+ y las subpoblaciones comprometidas CD34+/CD13+ CD34+/CD33+ CD34+/CD38+ y CD34+/HLA-DR+ mostraron correlación con la RH precoz. El G-CSF acortó el período de neutropenia únicamente en las pacientes con CD34+ menor de 4.5 millones/Kg. Las pacientes que recibieron una cifra de CD34+ superior a 5 millones/Kg mostraron un acortamiento significativo de la recuperación plaquetar. Las complicaciones hematológicas y cuidados de soporte se redujeron en las pacientes con mayor cifra de CD34+ y en las que recibieron G-CSF. El 60% presentaron infecciones generalmente bacteriemias por Gram+. Confirmamos la evolución ascendente de los recuentos hematimétricos durante el año postrasplante salvo un descenso transitorio tras la RT (día +90) especialmente en las pacientes con menor cifra de CD34+ reinfundida y en las que no recibieron G-CSF. Las subpoblaciones menos comprometidas CD34+/CD33- CD34+/CD38- y CD34+/HLA-DR- no se correlacionaron con la RH tardía. CONCLUSIONES: El G-CSF es un buen agente movilizador de progenitores hematopoyéticos. La determinación por citofluorometría de las CD34+ es el mejor método de estudio de los progenitores por su correlación con la RH precoz y tardía. Las pacientes que reciben mayor cantidad de CD34+ y las que reciben G-CSF postrasplante (día +5) tienen una RH más rápida menores complicaciones hematológicas toleran mejor la RT y mantienen recuentos hematimétricos en el día +360 similares al pretrasplante. Es necesario disponer de otros métodos de cuantificación de progenitores inmaduros para conocer su contribución en la fase tardía de la RH.

Autor: BAL ALVAREDO M. JESUS.
Año: 1998.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El trabajo ha sido suscitado por la necesidad de disponer de métodos analíticos adecuados para el diagnóstico de intoxicaciones, tanto clínicas como forenses, que cursan con hipoxia tisular importante, y que suelen estar en relación con la exposición al gas monóxido de carbono (CO), o bien a agentes metahemoglobinizantes. Debido a la complejidad de las muestras de sangre, en que suelen estar presentes varias subformas de la hemoglobina así como otros componentes propios del plasma, como la bilirrubina o los lípidos, se ha optado por la espectrofotometría de derivadas como técnica de elección, obteniendo los siguientes resultados: Para el caso de la intoxicación por monóxido de carbono, la cuantificación de la carboxihemoglobina se puede efectuar midiendo la amplitud del pico observado a 565 nm en D3. No se han observado interferencias significativas a nivel espectral en este punto de medida. Para el caso de la metahemoglobinemia, ésta es proporcional al pico observado en D1 a 645 nm, no presentando interferencias importantes otras subformas de la hemoglobina ni por otros componentes del plasma. En ambos casos, los métodos propuestos permiten determinar no sólo el porcentaje de saturación de la hemoglobina por el agente tóxico concreto, sino también conocer la concentración total de hemoglobina y saber de ese modo la repercusión funcional que tendrá ese porcentaje para un paciente concreto. Asimismo se han efectuado estudios de conservación de las muestras a largo plazo (hasta 6 meses), observando una tendencia a la pérdida progresiva en el caso de la carboxihemoglobina, con formación simultánea de metahemoglobina, y a un comportamiento más errático en el caso de la metahemoglobina. Finalmente se han sometido a calentamiento muestras de ambos especímenes, observando que la conservación depende de la temperatura alcanzada y el tiempo de calentamiento. Destaca la importante formación de metahemoglobina en las muestras de sangre sometidas a altas temperaturas.

Autor: RUIZ AYALA M. LUISA.
Año: 1998.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Con el estudio titulado "Parámetros hemocoagulativos en pacientes con infarto agudo de miocardio y familiares directos", presentado por María Luisa Ruiz Ayala para optar al grado de Doctor en Medicina y Cirugía, se pretende valorar la relación familiar de los infartos agudos de miocardio, determinar la influencia de varios parámetros hemocoagulativos como marcadores en la génesis de esta patología y observar la relación con la herencia de los parámetros hemocoagulativos. Para llevar acabo este Trabajo hemos estudiado 153 componentes familiares, de los que 51 son pacientes diagnosticados de infarto agudo de miocardio en el Hospital San Millán de Logroño, el resto de los datos pertenecen a los hermanos e hijos de los propósitus, a quienes se les pidió colaboración, para la participación en el estudio, durante la estancia hospitalaria del paciente. En todos ellos hemos analizado datos referentes a la edad y al sexo y hemos valorado la existencia de antecedentes clínicos como infarto agudo de miocardio, accidente cerebrovascular isquémico o ángor. A su vez hemos llevado a cabo un estudio en un grupo control constituido por 22 voluntarios sanos, sin antecedentes personales ni familiares de procesos isquémicos cardiacos, en ellos también se han recopilado datos pertenecientes al sexo y a la edad. Tanto en los componentes familiares como en el grupo control se han determinado los siguientes parámetros hemocoagulativos: fibrinógeno intacto, fibrinógeno funcional, índice fibrinógeno funcional/fibrinógeno intacto, activador tisular del plasminógeno antigénico, inhibidor del activador tisular del plasminógeno antigénico, proteína C, proteína S total, proteína S libre, antitrombina III, resistencia a la proteína C activada y fibrina soluble. El estudio estadístico de los datos se ha realizado mediante un test de Student comparando la media de dos muestras suponiendo distintas la varianzas, considerándose estadísticamente significativo cuando p

Autor: AZACETA REINARES GEMMA.
Año: 1998.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La Insuficiencia Venosa Crónica (IVC), constituye una de las patologías más frecuentes en la sociedad occidental. Además de un problema estético y de salud, conlleva consecuencias socioeconómicas y laborales de primer orden. Existen numerosas teorías etiopatogénicas, sin embargo, ninguna ha podido justificar de manera completa su origen y fisiopatología. En la última década las teorías patogénicas más novedosas en la IVC, han concedido al comportamiento reológico de la sangre, y por tanto a las características del flujo sanguíneo y su interacción con la pared vascular, un papel relevante en la génesis y evolución de la enfermedad. El punto de partida de los estudios hemorreológicos en la IVC, lo constituye el hecho de que en este sector se dan las menores tasas de cizallamiento del árbol vascular, y que el comportamiento no newtoniano de la sangre condiciona que su viscosidad se incremente conforme disminuye el cizallamiento. En 1987 Dormandy y Nash, postularon de forma teórica la existencia de anomalías hemorreológicas en la IVC, que mediante un mecanismo de círculo vicioso participarían en la fisiopatología de esta entidad agravándola y perpetuándola. Dichas alteraciones tendrían su base en una hiparagregabilidad ertrocintaria. El origen del disturbio hemorreológico se ha relacionado con las lesiones microcirculatorias ligadas a la estasis. Los objetivos de este estudio han sido el estudio del perfil hemorreológico en los pacientes afectos de IVC, y su comportamiento con la evolución de la enfermedad y tras el tratamiento quirúrgico. Se ha determinado en 147 sujetos diagnosticados de IVC y carentes de factores modificadores de la hemorreología, la viscosidad sanguínea y plasmática (viscosímetro rotacional Brookfield DVIII), y el índice de agregación eritrocitaria (agregómetro fotométrico Myrenne MA-1). Un subgrupo de 45 sujetos fue sometido a safenectomía, tras la cual se realizó un seguimiento de los parámetros hemorreológicos a los 7, 60 y 180 días. El grupo control lo constituyeron 76 sujetos sanos, aplicando los mismos criterios de exclusión que en el grupo de pacientes. Tras el análisis estadístico, los resultados obtenidos indican que la IVC se acompaña de un perfil hemorreológico alterado respecto a la población sana, y caracterizado por un incremento de la agregabilidad eritrocitaria (AE). La hiperagregabilidad se detecta desde estadios precoces y aumenta conforme avanza la gravedad clínica, estando influida por el grado evolutivo, edad, fibrinógeno plasmático, presión venosa y etiología de la enfermedad. Asísmismo, la viscosidad sanguínea a alto cizallamiento aumenta con la evolución de la IVC, no hallando diferencias para la plasmática. En cuanto a la evolución hemorreológica tras el tratamiento quirúrgico, se observa un empeoramiento debido a aumento de AE en el período postoperatorio inmediato, atribuible a un incremento de fibrinógeno. Posteriormente, a los 2 y 6 meses de la intervención, los valores regresan a la línea basal patológica previa a la cirugía, persistiendo así el perfil hemorreológico alterado a pesar del tratamiento quirúrgico.

Autor: LOZANO AKMELA M. LUISA .
Año: 1998.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Los objetivos de esta Memoria fueron, en primer lugar, analizar si durante el almacenamiento de Concentrados de Plaquetas (CPs) se produce una pérdida de la reactividad de las células a la trombina, y la posible relación con la disminución de sitios de alta afinidad para el agonista localizados en el complejo glicoproteico Ib/IX/V. En segundo lugar, se valoró la utilidad de diversos agentes en la prevención del daño plaquetario por almacenamiento: (1) Sustancias moduladoras del AMPc (PGE1, forscolina, teofilina e isobutil-metilxantina IBMX ), y aniones orgánicos (piruvato y acetato sódicos) en la conservación a 22 grados C; (2) ThromboSol (combinación de los efectores de segundos mensajeros adenosina, nitroprusiato sódico, dipiridamol, ticlopidina, quinacrina y amiloride) en el almacenamiento a 4 grados C; (3) Solución modificada de ThromboSol (nitroprusiato sódico, dipiridamol y amiloride) y dimetilsulfóxido DMSO al 2%, en la criopreservación de las células. Para ello se utilizó metodología estándar de laboratorios de Hematología y Bioquímica en el análisis de recuentos celulares, volúmenes plaquetarios medios, pH, concentraciones de dióxido de carbono, oxígeno, bicarbonato, glucosa y lactato deshidrogenasa. Los niveles de lactato se valoraron mediante análisis enzimáticos, y las de tromboxano B2 y AMPc con inmunoensayos. La expresión en superficie plaquetaria de glicoproteínas (GP) se evaluó con citometría de flujo. La unión de trombina y de ligandos (factor von Willebrand y fibrinógeno) a las plaquetas se estudió con análisis de unión en "frío" y "caliente", respectivamente. De los estudios realizados en este trabajo, se obtuvieron los siguientes resultados/conclusiones: 1. A lo largo del almacenamiento estándar de CPs se produjo una progresiva disminución de las respuestas de las células a la trombina. Durante dicho periodo se observó una reducción en la expresión superficial de GPIba, lo que correlacionó con la pérdida de sitios de unión de alta afinidad al agonista. 2. La adición a CPs de moduladores del nivel celular de AMPc resultó ineficaz en la prevención de lesiones plaquetarias relacionadas con el almacenamiento. Aunque el suplemento de aniones orgánicos ejerció un efecto beneficioso en la preservación de parámetros metabólicos plaquetarios, dichas sustancias no evitaron ni el daño en la integridad celular, ni las alteraciones cuantitativas a nivel de GPs de membrana. 3. El complemento farmacológico de CPs con la solución compuesta de efectores de segundos mensajeros denominada ThromboSol, favoreció de un modo significativo el mantenimiento de la integridad y respuesta plaquetares, durante almacenamientos de hasta nueve días a 4 grados C. Dicho efecto protector parece ser consecuencia del mantenimiento de mayores niveles de AMPc, junto a una menor generación de AMPc durante dicho período. 4. La utilización de ThromboSol y DMSO al 2% podría simplificar el procedimiento de criopreservación de CPs, al no precisar control de la velocidad de infusión del producto, de la velocidad de congelación, y no precisaría del lavado exhaustivo de células tras la descongelación. Sin embargo, a nivel de integridad, daño y reactividad celulares tras el procedimiento, el uso de la sustancia compuesta de efectores de segundos mensajeros y concentraciones reducidas de DMSO no ofreció ventajas adicionales sobre el método de congelación estándar, utilizando como crioprotector DMSO al 6%.

Autor: CALAVIA LACARRA JESUS JAVIER.
Año: 1998.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se administro rhGM-CSF a pacientes con leucemia mieloblastica aguda en la fase de aplasia posterior al trasplante autologo, observandose una recuperación granulocitaria más precoz, y una reducción de la incidencia de infecciones y de mortalidad infeciosa. En los estudios de laboratorio para valorar los posibles cambios inmunes, se observó un incremento de la actividad citotóxica no restringida al complejo mayor de histocompatibilidad, una recuperación acelerada de la subpoblación CD4, y un descenso de la producción de factor de necrosis tumoral y de interferon-g atribuibles al tratamiento. También se evidenció una relación entre el nivel de actividad citotóxica alcanzado y el riesgo de recaidas leucémicas.

Autor: FERNANDEZ LOPEZ ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se realizó un estudio prospectivo para definir el perfil evolutivo de los cambios fenotípicos y funcionales de los leucocitos sanguíneos en el curso postraumático no complicado, buscando diferencias con el que aparece en pacientes complicados con SDRA. Se incluyeron 25 pacientes postoperados de cirugía torácica y 48 pacientes politraumatizados con ISS> 10. Se controló la aparición de SDRA precoz. Durante la 1. semana postagresión se estudió la frecuencia de los diferentes fenotipos de células inmunocompetentes (por citometría de flujo), se analizaron las concentraciones plasmáticas de IL-1beta, IL-6, IFN-gamma y TNF/alfa, y se evaluó la capacidad de producir estas citocinas tras estímulos "ex vivo" con PHA. En las primeras 24-48 horas postagresión se observó una linfopenia T y un descenso porcentual de los monocitos activados. También se produjo una elevación de los níveles plasmáticos de IL-6 y una menor producción de IFN-gamma y de TNF-alfa tras estimulación de 24 horas con PHA. Estos cambios presentaron una tendencia hacia la normalidad en el 7. día postagresión, siempre que el curso evolutivo no se complicara. Por el contrario, el desarrollo de SDRA conllevó un perfil evolutivo diferente, presentando en el 7. día una severa afectación del porcentaje de monocitos activados, unos níveles plasmáticos elevados de IL-6 y TNF-alfa y una marcada incapacidad para generar estas citocinas en respuesta a la estimulación de 24 horas con PHA.

Autor: SALAZAR SOLER RAMON.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Autor: LAHUERTA PALACIOS JUAN JOSE.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Para estudiar retrospectivamente la eficacia y accesibilidad al procedimiento de TAPH en nuestros pacientes con LMA, el análisis se plantea en una doble perspectiva. En primer lugar se analizan todos los pacientes diagnosticados de la enfermedad coetáneos al inicio del programa de TAPH y potencialmente años): desde esta perspectiva el TAPH es considerado un factor pronóstico mas y estudiado junto a otros presentes al diagnóstico o emergidos como resultado de la intervención terapéutica (leucocitosis, ECOG, citogenética, tipo FAB, LMA 1a/2a, tratamiento de inducción/consolidación). Por otra parte se estudian los casos que recibieron un TAPH, analizando tanto los resultados como los factores pronósticos que los afectan. Toda la serie. Entre 1981 y 1997 (período del estudio) se diagnosticaron 80 casos de mortalidad inicial o durante el tratamiento de inducción alcanzó el 13% de los casos. De los 67 casos evaluables para remisión completa (RC), 43 (54%) lograron 1aRC con la 1a línea de tratamiento y 16 (20%) con la 2a. Todos los casos con refractariedad absoluta fallecieron. Entre los 59 casos con RC, 41 recibieron un TAPH acondicionado con BUCY2. Entre los casos sin TAPH solo sobreviven 2 pacientes que fueron sometidos a un TPH alogénico y 5 mas con tipo Fab M.3 en tratamiento con un protocolo específico. Ningún caso tratado con terapias convencionales (salvo los M-3 refericos) ha sobrevivido. La mediana de la SG de toda la serie es de 19.8 meses y del 32.7% a los 8 años. La SLE finalmente alcanzada, incluyendo los casos recaídos y rescatados es del 35.3% sin embargo los casos con 1aRC mantienen una perspectiva de SLE del 51% con una meseta en el perfil actuarial que sugiere curación a partir del 2o año de evolución. La diferencia entre los casos con TAPH vs. no TAPH es del 47.7% al 31% (p=0.0003). En el análisis de factores pronósticos los resultados finales de un modelo multivariable definen a la leucocitosis al diagnóstico (+/- 30.000/ L) p=0.006 , al ECOG (p=0.0003), a al obtención de RC con la 1a linea de tratamiento (p=0.007) y a la realización de un TAPH (p=0.0002) como los factores fundamentales tanto para SG como SLE. Particularmente llamativa es la ausencia de impacto de la citogenética y de la intensidad de la consolidación. Casos con TAPH. De los casos finalmente trasplantados (se valoran 40 de 41 casos) el 48.2% se encuentran vivos y el 44.3% libres de enfermedad a los 6 años. Los factores de impacto significativo en el pronóstico (uni/multivariable) fueron el status de la LMA preTAPH (SG p=0.004, SLE p=0.03), la leucocitosis al diagnóstico (SG p=0.06, SLE p=0.01) y la Enfermedad Mínima Residual(EMR)I antes del trasplante en los 15 casos en los que el dato estuvo disponible (SG p=0.005, SLE p=0.003). Ningún caso con mas de 0.8% de EMR en la médula ósea ha sobrevivido, aunque todos ellos fueron considerados en RC antes del TAPH. De los 25 casos trasplantados en 1aRC el 64% están vivos y el 61% libres de enfermedad a los 6 años, estas cifras caen al 28% en los 9 pacientes que recibieron el TAPH en 2aRC y al 16% y 0% respectivamente en los 6 enfermos con enfermedad activa al trasplante. 6 casos que habían alcanzado 1aRC recayeron antes del TAPH y fueron trasplantados en 2aRC (3) o con enfermedad activa (3). Conclusiones: 1o. la posibilidad de recaída aconseja establecer prioridad para la accesibilidad al procedimiento a los enfermos afectos de esta enfermedad. 2o. El impacto de los factores pronósticos detectados es tan relevante que aconseja la puesta en marcha de protocolos terapéuticos de intensidad variable e individualizada. La EMR finalmente conseguida tras la consolidación convencional podría ser un indicador válido para este propósito. 3. El TAPH realizado tras la consolidación conven cional es el factor pronóstico (positivo) con valor independiente de mas impacto en el análisis de la serie. El status de la LMA antes del TAPH afecta de forma fundamental a los resultados. Este método de consolidación es probablemente superior a la quimioterapia convencional y desde luego no inferior a los resultados que se obtienen con TPH alogénico, por lo que probablemente es el de elección incluso en el caso de pacientes con menos de 55 años y donante HLA-idéntico disponible. 4. El carácter histórico del análisis realizado limita la intensidad de las evidencias encontradas.

Autor: REGIDOR LUENGO CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El objetivo tirncipal de la Tesis es la elección de un método conjunto de fraccionamiento y almacenamiento de la sangre de cordón umbilical para su aplicación a gran escala. Para ello se comparan el método de concentración celular mediante hidroxietilalmidón (HES) usado tradicionalmente para fraccionar médula ósea y dos métodos de separación de células mononucleadas con Ficoll y Percoll. Se evalúa la criopreservación en tubo para todas las unidades fraccionadas y se estandarizan las condiciones de criopreservación en bolsas de volumen pequeño (50 ml.) con un sistema específico de placas y gradillas, diseñado comercialmente durante la realización del estudio que se aplica a las unidades fraccionadas de mayor volumen, las del método de HES. El uso de bolsas permite procesar las unidades en sistemas cerrados, aunque requiere más espacio de almacenamiento que la cripreservación en tubos. El método de HES ha resultado significativamente más eficaz que los otros dos métodos en la recuperación de células y progenitores y menos en la reducción de volumen y hematíes. La criopreservación en tubos y bolsas ha dado lugar a una recuperación adecuada de células viables y progenitores. El coste del fraccionamiento es mucho menor con el método de HES que con los otros dos métodos y, para un Banco de 5.000 unidades, sería capaz de compensar respecto a ellos su coste mucho mayor de almacenamiento y el de nitrógeno líquido de mantenimiento, durante un número de años que variaría en función del tipo de vial criogénico utilizado. En conclusión, el fraccionamiento con HES y la criopreservación en bolsas de 50 ml. son los métodos de elección en términos de coste-eficacia y garantías biológicas..

Autor: GUTIERREZ GUTIERREZ NORMA CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS: 1. Mejorar las condiciones de cultivo citogenético en el MM. 2. Explorar las alteraciones cromosómicas mediante citogenética convencional en el MM. 3.Investigar el valor pronóstico de las alteraciones citogenéticas en el MM. 4. Estudiar las ganancias y pérdidas de material genómico mediante HGC en el MM. CONCLUSIONES MAS RELEVANTES: 1. La IL-4 es el estimulante más idóneo para el cultivo de células plasmáticas en pacientes con MM. 2. Las alteraciones más frecuentes en el MM son las trisomías de los cromosomas 3, 5 y 9, las monosomías del 8 y el 13 y las alteraciones estructurales del 1 y el 14. 3. Algunas anomalías citogenéticas tales como las monosomías del cromosomas 13 y las alteraciones de 11q tienen una clara influencia adversa en el pronóstico del MM, por lo que el análisis citogenético debería ser incluido en la evaluación diagnóstica de los pacientes con MM. 4. La HGC a diferencia de la citogenética convencional, ha puesto de manifiesto que prácticamente la totalidad de los MM muestran cambios de material genómico..

Autor: GALMES LLODRA ANTONIO.
Año: 1998.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se investiga el trasplante de Células Progenitoras Hemopoéticas (CPH) criopreservadas a -80ºC, utilizando como crioprotector el DMSO al 10% y al 5%, y el tiempo máximo de almacenamiento de las mismas a -80ºC. Se realizan 11 trasplantes de CPH criopreservadas a -80ºC con DMSO al 10%,10 trasplantes de CPH criopreservadas a -80ºC con DMSO al 5% y se investiga el periodo máximo de almacenamiento en muestras de aferesis de 24 pacientes en programa de Trasplante de CPH criopreservadas a -80ºC con DMSO al 5% y se investiga el periodo máximo de almacenamiento en muestras de aféresis de 24 pacientes en programa de Trasplante de CPH, 5 de los cuales se infunden a largo plazo. Los pacientes trasplantados con CPH criopreservadas con DMSO al 10 y al 5% muestran un periodo de granulopenia y plaquetopenia post infusión similar a los trasplantados utilizando el método de congelación programada con DMSO al 10%. Las CPH criopreservadas al 5 y 10% de DMSO muestran buena viabilidad y recuperacion de CFU-GM y BFU-E hasta los 6 meses de almacenamiento a -80ºC.

Autor: ABELLA MONREAL EUGENIA.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA INTERNA.

Resumen: Introducción: Los pacientes afectados de anorexia nerviosa (AN) pueden desarrollar citopenias. En el estudio morfológico de la médula ósea (MO) puede observarse la existencia de distintos grados de afectación medular, siendo la degeneración gelatinosa (DGMO) la forma más grave. En dicho trastorno se observan áreas medulares con desaparición de la hematopoyesis normal y atrofia de los adipocitos, así como la presencia de una sustancia de color rosado constituida por un mucopolisacárido acido. el estudio de las variaciones individuales de los adipocitos medulares puede realizarse mediante el análisis morfométrico y estereológico de los mismos. Objetivos: Realizar estudios cualitativos de la MO de los pacientes con AN con la intención de clasificar en distintos grados la afectación medular. Averiguar si hay correlación entre los hallazgos medulares y los parámetros clínicos, hematológicos y bioquímicos. Efectuar el estudio histomorfométrico y estereológico de las células grasas de la MO en la AN. Material y métodos: Se ha estudiado la MO de 40 mujeres y 4 varones con AN cuya edad media +/- DE ha sido de 22+/5 años y con un tiempo medio de evolución de la enfermedad de 4,5+/-5 años. Se han recogido los datos clínicos (sexo, edad, talla, peso ideal, % pérdida ponderal y tipo de conducta) y los parámetros hematológicos y bioquímicos. A cada paciente se le ha efectuado un aspirado medular (AMO) y una biopsia de médula ósea (BMO). Mediante un estudio morfométrico y estereológico se han evaluado los siguientes parámetros: fracción grasa (FG), diámetro medio real adipocitario (DMR) y número de células grasas por unidad de volumen de tejido medular (Nv). Resultados: El valor medio de cada uno de los parámetros hemoperiféricos y bioquímicos ha sido normal. Los estudios morfológicos de la MO han permitido establecer 4 patrones diferentes: MO normal: 5 casos (11%), hipo/aplasia: 17 casos (39%), pre-DGMO: 13 casos (29%) y DGMO: 9 casos (20%). En los pacientes con DGMO la cifra media de leucocitos presentó una disminución significativa (p=0,0189) con respecto al resto de grupos. Se observó una buena correlación entre los hallazgos cualitativos del AMO y de la BMO. El único parámetro clínico relacionado con el tipo de afectación medular ha sido la pérdida ponderal, la cual fue más intensa en los casos con DGMO (F=4,93 y p=0,005). La FG y el DMR se hallan aumentados en las formas hipo/aplásicas y disminuidos en las formas con DGMO (p=0,0072). El Nv no presenta diferencias significativas entre los distintos grupos histológicos. Conclusiones: En la AN se observan diversas alteraciones de la médula ósea, independientemente de los valores hemoperiféricos. Los más frecuentes son la hipoplasia/aplasia y la DGMO. La presencia de DGMO se acompaña de leucopenia y se halla en relación con la intensidad de la pérdida ponderal. El DMR y la FG se hallan aumentados en las formas hipo/aplásicas y disminuidos en las formas con DGMO.

Autor: ALDEA DORADO CARMEN.
Año: 1997.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA Y PSIQUIATRIA.

Resumen: El trabajo plantea conocer los factores de riesgo cardiovascular y las características de la dieta de la población mayor de 75 años de la "alta Ribagorza" comarca pirenaica de la provincia de Huesca. METODO: Estudio mediante encuesta dietética y toma de muestras sanguíneas de forma estandarizada y por un mismo observador de la población total de mayores de 75 años de la comarca en estudio. Se determino: edad, sexo, hábito tabáquico, peso, talla, tensión arterial, colesterol total, colesterol-HDL, colesterol-LDL y apolipoproteinas A-I y B. Se realizó una encuesta alimentaria "recuerdo de 24 horas" durante tres dias consecutivos y un año completo. RESULTADOS: Se estudiaron un total de 145 ancianos con una edad media de 81,6 años. El porcentaje de fumadores fue del 2% la hipertensión arterial del 46%. Los lípidos sanguíneos estudiados fueron: colesterol total de 219 +/- 39 mg/dl, triglicéridos de 116+/- 43 mg/dl, col-HDL de 57+/-12,3 mg/dl, col-LDL (Friedewald) de 139+/- 36,4 mg/dl. La apolipoproteina A-I fue de 170+/- 47 mg/dl y la apolipoproteina B de 119+/-33mg/dl. La encuesta sobre alimentación mostró un alto consumo de cereales, frutas, verduras y cereales. CONCLUSIONES: Los parámetros antropométricos pueden ser considerados como normales, encontrandose la mayor talla media de los estudios publicados en nuestro país. El factor de riesgo cardiovascular más común es la hipertensión arterial (45%), la prevalencia de tabaquismo muy baja, el 2% son fumadores. La concentración media de lípidos es similar a la de otros trabajos; el colesterol-HDL se encontró en un 4% de la población por debajo de 35 mg/dl. El análisis de la dieta identifica una elevada ingesta de alimentos de origen vegetal y bajo consumo de grasa saturada pudiendo considerarse semejante a la denominada "dieta mediterránea". No se ha encontrado relación con la ingesta elevada de grasas y con las dislipemias.

Autor: AMIGO LOZANO M. LUZ.
Año: 1997.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS: ORGANIZACION MORFOFUNCIONAL DEL SISTEMA.

Resumen: Este trabajo se divide en dos partes diferentes: En la primera parte los objetivos eran conocer la incidencia de los Síndromes mielodisplásicos (SMD) y Leucemias agudas (LA) secundarias postrasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos en nuestro medio, las características de estos pacientes y los factores que podían contribuir a su aparición. En aquellos casos con SMD ó LA secundarios que tuvieran alteraciones citogenéticas, se investigó si la alteración clonal podía existir en las células hematopoyéticas antes del trasplante mediante la técnica de Hibridación in situ. La incidencia en nuestro medio (1,12%) es similar a la de la literatura. Los pacientes que desarrollaron estas complicaciones habían recibido una dosis de agentes alquilantes significativamente mayor que el resto de los pacientes. Cuando se utilizaron progenitores de sangre periférica el tiempo transcurrido desde el trasplante al diagnóstico del SMD ó LA fue más corto que cuando se utilizó médula ósea. Al menos en algunos casos, la alteración clonal existe en los progenitores hematopoyéticos antes del trasplante. En la segunda parte se realizó un estudio retrospectivo en una serie de 214 pacientes sometidos a trasplante autólogo en el Hospital Universitario de Salamanca. Comprobamos que el trasplante autólogo aumenta el número de casos con citopenias periféricas y es la cifra de plaquetas sobre la que ejerce mayor influencia. El número de células infundido condiciona las características del injerto a largo plazo. Tanto pre como postrasplante existen dishemopoyesis y alteración en el crecimiento in vitro de los progenitores hematopoyéticos, por lo tanto, estos datos no nos sirven para la detección precoz de los SMD postrasplante. Los criterios del Grupo Cooperativo Franco- Americano-Británico no son válidos para el diagnóstico de los SMD postrasplante y se hacen necesarios otros parámetros como estudios citogenéticos ó de clonalidad.

Autor: ESCUDERO SOTO ANTONIO.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA.

Resumen: Se analizan 86 casos de cancer de mama de alto riesgo tratados con transplante autologo de celulas progenitoras hematopoyeticas realizados entre mayo 1992 y diciembre 1996. La toxicidad fue aceptable con solo 3 casos con complicaciones grado III comprometiendo la vida y una mortalidad toxica de 1,2% en los 100 primeros dias. Aceleraron el injerto leucoplaquetario la utilizacion de progenitores de sangre periferica frente a medula osea y la infusion de una cifra de celulas CD34+ superior a 3x10E6/Kg. Esto se tradujo en una reduccion significativa del numero de concentrados de hematies y plaquetas transfundidos, disminucion del numero de dias con antibioticos y acortamiento de la estancia media hospitalaria en 4 dias. Las cifras estimadas de supervivencia actuarial a 5 años fue para la supervivencia global 73% (IC95%: 50-81%) y 66% (IC95%: 58-74%) para la supervivencia libre de enfermedad, interviniendo negativamente sobre esta ultima la ausencia de receptores hormonales y la afectacion de 20 ó mas ganglios axilares ipsilaterales en la cirugia. Con una mediana de seguimiento de 2,5 años han recaido 18 de las 86 pacientes de la serie, demostrando el analisis multivariante una probabilidad de recaida de 2,75 (IC95%: 1,63- 4,66) veces superior en las pacientes con receptores hormonales negativos. Durante el periodo del estudio se realizaron en el Hospital Universitario de la Princesa y Clinica Ruber 446 transplantes autologos, de los cuales 147 (32,2%) fueron por cancer de mama, aumentando el porcentaje de 23,9% en 1992 a 47,7% en 1996. Finalmente los autotransplantes para situaciones de alto riesgo representaban en 1992 23,5% de todos los realizados para cancer de mama, aumentando hasta 74,4% en 1996.

Autor: GIL FERNANDEZ JUAN JOSE.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS: 1.- Tratamiento convencional: analizar los resultados del tratamiento convencional de la enfermedad de Hodgkin (EH) en un grupo de 95 pacientes consecutivos diagnosticados en nuestro servicio desde 1979 a 1997; analizar los factores pronósticos para la respuesta y la supervivencia; analizar las complicaciones inmediatas y tardías relacionadas con el tratamiento. 2.- Calidad de vida y del bienestar psicológico: Valorar el impacto psicológico y las repercusiones sobre la calidad de vida de los pacientes vivos y sin enfermedad a largo plazo. 3.- Trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos (TAPH): analizar los resultados del TAPH en un grupo de 47 pacientes en un período de 10 años; analizar el papel del tratamiento citorreductor pre-TAPH; comparar dos regímenes de acondicionamiento (CBV estándar y escalado); analizar los factores con implicación pronóstica en las funciones de supervivencia. *PACIENTES Y METODOS: 1.- Tratamiento convencional: Entre 1979 y 1997, 107 pacientes fueron diagnosticados de EH en nuestro servicio. El diagnóstico fue realizado en biopsia ganglionar y las preparaciones histológicas fueron revisadas. Se seleccionaron 95 pacientes; 68 hombres y 27 mujeres con una mediana de 37 años (12-79) y las siguientes características: 49 (52%) estadios III-IV, 18 (19%) afectación extranodal, 28 (30%) afectación mediastínica voluminosa y 44 (46%) síntomas B. Esquema de tratamiento: 11 con estadios IA clínicos o I-IIA patológicos recibieron sólo radioterapia, dosis mediana de 36 Gy (34.2-40); 84 recibieron quimioterapia sóla o combinada con radioterapia (Mopp entre 1979-86; Mopp/Abvd entre 1987-93 y Abvd desde 1994); 36 con estadios IIB, III o IV sin afectaciones voluminosas recibieron sólo quimioterapia, mediana de 8 ciclos (6-12); 32 con estadios I-II con síntomas B, afectación voluminosa y/o estadiaje clínico, recibieron quimioterapia, mediana de 5 ciclos (1-10) seguidos de radioterapia sobre áreas afectas (36Gy) o voluminosas (40Gy); 16 con estadios III-IV y algún área ganglionar masiva, recibieron quimioterapia, mediana de 7,5 ciclos (5-12) y radioterapia adyuvante sobre dichas áreas (40Gy); sólo 6 pacientes no siguieron este esquema general de tratamiento por progresión, toxicidad o criterio médico. 2.- Calidad de vida y del bienestar psicológico: Se seleccionaron 67 pacientes vivos sin EH activa y que no habían desarrollado 2 neoplasias. Se enviaron por correo los cuestionarios de "calidad de vida de la European Organization for Research and Treatment of Cancer (EORTC-QLQ 30) y el cuestionario " Hospital Anxiety and Depression (HAD) scale". 3.- Trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos (TAPH): 47 pacientes consecutivos con EH avanzada que fueron sometidos a TAPH en nuestro servicio fueron analizados: 28 varones y 19 mujeres con una mediana de edad de 28 años. El estado de la enfermedad en el momento del trasplante fue: 15 (32%) pacientes estaban en RC (5 en 1 RC tras 2 lineas completas de quimioterapia y 10 en 2 RC), 8 (17%) en RP (7 en 1 RP), 22 (51%) en recidiva (19 con recidiva sensible) y 2 tenían enfermedad primariamente refractaria. Se empleó el régimen CBV como acondicionamiento pre-trasplante en todos los casos, con utilización secuencial de dos esquemas: 22 (47%) pacientes recibieron el régimen CBV estándar (CY 6 gr/m2, BCNU 300 mg/m2 y etopósido 600 mg/m2) y 25 (53%) el régimen CBV escalado (CY 7.2 gr/m2, BCNU 440 mg/m2 y etopósido 2 gr/m2). *RESULTADOS: 1.- Tratamiento convencional: los 95 pacientes fueron evaluables para la respuesta: 80 (84%) obtuvieron RC, 7 RP y 8 RMin o progresión en el seno del tratamiento. En el momento de realizar este estudio, 23 han fallecido: 12 por EH, 7 por 2 neoplasias y 4 por infecciones intercurrentes. Con una mediana de seguimiento de los vivos de 5,42 años (0,87-21,3), la probabilidad de SVG y SDL proyectadas a 10 años fue del 58+-7% y 80+-5%; la probabilidad de SLP para todos los enfermos y de SLE para los que alcanzaron la RC proyectadas a 6,7 años fue del 65+-5% y 79+-6%. En el análisis multivariado de las variables con impacto sobre las funciones de supervivencia se observó que la ausencia de obtención de la RC afectó adversamente a la probabilidad de SVG (p=0,00001) y de SDL (p=0,00001), la edad al diagnóstico 45 años tuvo impacto adverso en la SVG (p= 0,01) y la edad 60 años en la SL2Neo (p=0,02). La divergencia entre la SVG y SDL a largo plazo se debió a la mayor probabilidad de mortalidad no relacionadas con la EH (infección o 2 neoplasias) en pacientes de edad avanzada. 2.- Análisis de la calidad de vida y del bienestar psicológico: participaron en el estudio 46 de los 67 pacientes seleccionados (68,6%). Estudio de calidad de vida: Se observaron puntuaciones medias 70 para todas las escalas funcionales y puntuaciones medias < 25 para todas las escalas sintomáticas. La escala de funcionamiento físico fue peor en las mujeres (p=0,01) y en los 45 años (p=0,02) y la apreciación global del estado de salud fue peor en los 45 años (p=0,04) con una mayor pérdida del apetito (p=0,03), más problemas diarreícos (p=0,04) y un incremento no significativo de la fatiga (p=0,08). Estudio psicológico se observaron casos de ansiedad y de depresión en un 17,4% y 4,3% de los pacientes; asociándose los casos de ansiedad con el sexo femenino (p=0,01) y los de depresión con la edad 45 años (p=0,03). 3.- Trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos (TAPH): la respuesta antitumoral post-trasplante para los 28 pacientes con enfermedad activa que fueron evaluables fue similar comparando los 2 regímenes con CBV: 87% y 75% (p=0.39). La probabilidad de SVG, SLP y SLEv proyectada a 7 años fue del 51,7+-8%, 34+-9% y 28+-8%, con una mediana de seguimiento para los pacientes vivos de 3 años (0.7-7.6). No se observaron diferencias en la probabilidad de SLP al comparar los 2 acondicionamientos (p=0,57). En el análisis univariante, afectaron favorablemente a la probabilidad de SLP post-trasplante: una historia pre-trasplante de RC (p=0,003), la duración de la 1 RC 1 año (p=0,04), la ausencia de enfermedad ganglionar voluminosa al trasplante (p=0,054), la ausencia de enfermedad extranodal al trasplante (p=0,01) y un estado de RC al trasplante (p=0,0006). En el análisis multivariante, el estado de RC al trasplante fue el único factor favorable que mantuvo significación (p=0,05). Los pacientes en 2 RC y 1 recidiva sensible fueron homogéneos en relación a sus características pre-trasplante y tratamiento recibido, sin embargo la SLP fue superior en aquellos enfermos trasplantados en 2 RC (p=0.01). *CONCLUSIONES: 1.- Tratamiento convencional: El esquema de tratamiento ajustado a las características al diagnóstico, ha logrado excelentes resultados con un índice de RC del 84,2% y ha aminorado el impacto pronóstico de variables consideradas como adversas. El factor más desfavorable con repercusión sobre la SVG y la SDL ha sido la falta de obtención de la RC con el tratamiento (p=0,00001). La edad 45 años afectó adversamente a la probabilidad de SVG, debido al incremento de la mortalidad no relacionada y al desarrollo de 2 neoplasias. 2.- Análisis de la calidad de vida y del bienestar psicológico: el estudio de la calidad de vida reveló una excelente capacidad funcional y una sintomatología muy poco relevante. Las mujeres son susceptibles de tener peor escala de funcionamiento físico (p=0,01) y sintomatología de ansiedad (p=0,01), mientras que los 45 años son susceptibles de tener peor escala de funcionamiento físico (p=0,02), peor apreciación global de su salud (p=0,04), más problemas de apetito (p=0,03), diarrea (p=0,04) y síntomas depresivos (p=0,03). 3.- Trasplante autólogo de progenitores hematopoyéticos (TAPH): La obtención de un estado de RC al trasplante fue necesaria para optimizar los beneficios del TAPH en la EH, con independencia del régimen de acondicionamiento empleado (CBV estándar o escalado).

Autor: MARTIN HERNANDEZ M. PAZ.
Año: 1997.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: MEDICINA.

Resumen: La congelaci]on de precursores hemopoyéticos mediante introducci]on directa en congelador a -80C y utilizaci]on de HES como criopreservante consigue tasas de enfriamiento de 1C/min si se utilizan volúmenes de muestra mayores de 100 ml. El volumen de la suspensi]on celular obtenida tras selecci]on positiva es menor de 5-10 ml. Ante estos volúmenes la congelaci]on no programada es de inaceptable riesgo. HIPOTESIS La inmersi]on de estos hemoderivados con medios de criopreservaci]on libres de HES, en 3 L de metanol homogeneizará la velocidad de enfriamiento (VE) a 1 grado C/min permitiendo la realizaci]on de transplantes hemopoyéticos en condiciones seguras. MATERIAL Y METODOS Tras obtenci]on de las células mediante aféresis de sangre periférica, se purificaron mediante selecci]on positiva con el método de inmunoadsorci]on de biotina-avidina. Se realiz]o un estudio físico en el que mediante introducci]on de un termocoupler en el interior de la muestra se determin]o la VE y la duraci]on de la fase de transici]on para muestras de 2 ml criopreservadas con DMSO y DMSO/HES en 3, 4 L de metanol y sin metanol a -80 grados C para obtener seis tipos de curvas. En segundo lugar se realiz]o un estudio biol]ogico en el que se determin]o si existían diferencias estadísticamente significativas en la recuperaci]on de células, células CD34+ y unidades formadoras de colonias CFU-GM, BFU-E Y CFU-GEMM, entre el método que utiliza HES/DMSO y el método que utiliza DMSO como criopreservante y ambos a su vez congelados con congelaci]on programada y con congelaci]on no programada. RESULTADOS La pureza obtenida con el método de selecci]on fue del 61%, recuperaci]on 89% y enriquecimiento 68 veces. Se demostr]o correlaci]on entre el porcentaje de CD34+ inicial y la pureza obtenida. En el estudio de los parametros de la curva de congelaci]on la muestra congelada con 10% DMSO y 3 L de metanol, obtuvo los resultados más ]optimos con VE de aproximadamente 1 grado C/min y duraci]on de la fase de transici]on de 2 min. La mezcla que utiliza HES/DMSO presentaba una duraci]on de la fase de transici]on de 4 min y la congelaci]on no programada sin metanol presenta una VE mayor de 3 grados C/min. En el estudio comparativo no se demostraron diferencias estadísticamente significativas entre la congelaci]on programada y la no programada con baño de metanol, cuando se utiliza DMSO. Sin embargo la adici]on de HES produjo diferencias estadísticamente significativas entre el grupo de congelaci]on programada y no programada para la recuperaci]on de células, células CD34+ y unidades formadoras de colonias BFU-E Y CFU-GEMM. CONCLUSIONES La inmersi]on del producto de selecci]on positiva con medios de criopreservaci]on libres de HES, en 3 L de metanol homogeneiza la velocidad de enfriamiento a 1 grado C/min con escasa duraci]on de la fase de transici]on. Este método no presenta diferencias estadísticamente significativas con el método de congelaci]on con programaci]on en cuanto a la recuperaci]on de células, células CD34+ y unidades formadoras de colonias CFU-GM, BFU-E Y CFU-GEMM. El conjunto de estos hallazgos permite la realizaci]on de transplante hemopoyético con células CD34+ y utilizaci]on de un método no programado de congelaci]on en condiciones estandarizadas y seguras.