CARCINOGENESIS

Autor: PASCUAL CARPE FERNANDO.
Año: 2004.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Hemos desarrollado dos modelos experimentales "in vitro" e "in vivo" de tratamiento de melanomas murinos. En el modelo "in Vitro" estudiamos los efectos citotóxicos y antiproliferativos de los tres agentes ensayados Melfalán, Interferón alfa y Lymphomyosot sobre la línea de melanoma murino B16F10. El Melfalán demostró los mayores efectos citotóxicos y antiproliferativos, con una curva dosis-respuesta, seguido del Interferón alfa, aunque este sólo con las concentraciones más altas, mientras que el Lymphomyosot no presentó acción citotóxica ni antiproliferativa a ninguna de las concentraciones utilizadas. El modelo "in vivo", fue desarrollado mediante la inoculación subcutánea de melanocitos de las líneas B16F10 y B16 en la región inguinal izquierda a ratones de la cepa C57BL/6J. Nuestro modelo ha demostrado ser eficaz ya que los tumores prendieron en todos los animales implantados y a todas las concentraciones de células inoculadas ( 1x106, 5x105 y 1x105). Investigamos los efectos de los tratamientos, individual y combinado, con Interferón alfa y Lymphomyosot a través del estudio macroscópico (pesos tumorales), microscópico (características morfológicas, citológicas, necrosis, infiltrados inflamatorios), inmunohistoquímico (índice de proliferación celular) e inmunológico (poblaciones celulares sanguineas). En todos los experimentos realizados observamos que los pesos tumorales eran significativamente mayores en el grupo Control (animales no tratados) que en los grupos tratados, siendo los de menor peso, significativamente, los tratados con Lymphomyosot, así como los del Interferón alfa y combinado respectivamente. Lo que demuestra el efecto antitumoral de ambos agentes estudiados. La necrosis tumoral, excepto en el último experimento, era menor en los tratados con Lymphomyosot y Combinado que con Interferón alfa, lo que apoya la ausencia de toxicidad del Lymphomyosot y el efecto citotóxico y antitumoral del Interferón alfa. Del mismo modo los infiltrados inflamatorios eran de mayor extensión en los tumores tratados con Lymphomyosot y Combinado que con el Interferón alfa, aunque también en éstos eran mayores que en los de los grupos Control, lo que consideramos que demuestra también la acción estimuladora del sistema inmune por el Lymphomyosot así como la inmunomoduladora del Interferón alfa, complementándose ambas funciones cuando actúan en combinación. El estudio imnunohistoquímico, confirma el efecto antiproliferativo del Interferón alfa al observarse menor índice proliferativo. Desde el punto de vista inmunológico, el efecto de los diferentes tratamientos parece activar la médula ósea, al observarse un aumento de monocitos y granulocitos, así como una estimulación de la respuesta inmune por el aumento de leucocitos totales a expensas de los linfocito T, B. Hecho que demuestra la acción estimulante de la respuesta inmune por el Lymphomyosot y el Interferón alfa.

Autor: CEBRIÁN GARCÍA CARMELO .
Año: 2003.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: FACULTAD DE MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Introducción: Diferentes estudios han demostrado que los radicales libres de oxígeno, especialmente el anión superóxido, están involucrados en la patogenia de la enfermedad por reflujo gastroesofágico que deriva en adenocarcinoma. Se desconoce si la administración de barredores de radicales libres tiene algún efecto protector en la progresión del esófago de Barrett (EB) a adenocarcinoma. Por su parte, al óxido nítrico (ON) también se le ha involucrado en esta secuencia, sin embargo, se desconoce el efecto de la inhibición de su síntesis en la transformación neoplásica. Métodos: En un modelo experimental de EB mediante la creación de una esófago-yeyunostomía con preservación del estómago se evalúa el desarrollo de EB y adenocarcinoma por meses a lo largo de 3-4 meses de evolución en cuatro grupos: Grupo 1 = Operación ficticia sin reflujo; Grupo 2 = Esófago-yeyunostomía (E-Y) sin tratamiento; Grupo 3 = E-Y + tratamiento con SOD (Ontosein = 0.3 mg/100 g de peso/ 3 días); y Grupo 4 = E-Y + tratamiento con L-NAME (inhibidor no selectivo síntesis de ON: 10 mg/Kg/día). Los resultados se evalúan mediante análisis de covarianza y test no paramétricos (Kruskall-Wallis y Mann-Whitney) para las variables cuantitativas. Para las variables cualitativas, se ha ajustado un modelo logístico, que evalúa conjuntamente el efecto del fármaco y los meses de evolución. Resultados: El reflujo gastro-duodeno-esofágico creado induce una secuencia de lesiones superponible a la ERGE del humano, con inflamación, ulceración e hiperplasia escamosa en todos los casos, desde el primer mes. Se observa aparición de metaplasia intestinal en el esófago distal en continuidad con el yeyuno e incremento de su longitud en el tiempo en sentido ascendente, así como metaplasia intestinal (células caliciformes) sin relación con la anastomosis que alcanza valores cercanos al máximo ya en el segundo mes (70%). Por último, se constata la pronta aparición de casos de adenocarcinoma, alcanzando cifras cercanas al máximo en el 3er mes (87,5%). Con respecto al efecto preventivo ejercido por ambos tratamientos, ninguno de los dos ha logrado modificar la inflamación, ulceración, la hiperplasia escamosa ni la metaplasia intestinal en continuidad. Sí han conseguido un leve descenso de la incidencia de metaplasia sin relación con la anastomosis no significativa, y una evidente menor frecuencia de adenocarcinoma en todos los meses de estudio con ambos tratamientos, concretamente, tanto SOD como L-NAME, se asocian con una reducción del riesgo del desarrollo de adenocarcinoma superior al 85% en ambos casos, con una odds ratio de 0,119 para L-NAME y de 0,133 para la SOD. Se ha establecido un incremento significativo de los niveles mucosos de anión superóxido en todos casos con anastomosis (media global de 69,41 CPM/mg vs. 5,81 CPM/mg en los controles sin anastomosis, p=0,000), y niveles, así mismo, significativamente superiores en todos los casos con lesiones frente a los controles sin anastomosis (p menor que 0,005). En los sucesivos meses de evolución hay una tendencia a disminuir los niveles del anión superóxido, no significativa, más próxima a una meseta, y tampoco hay diferencias significativas en función del grado lesional alcanzado, aunque se apunta a unos mayores niveles en los casos que presentan metaplasia sin displasia, es decir, mayor en la lesión preneoplásica que en la neoplásica. También se ha constatado significativa reducción de la actividad SOD en todos los casos con anastomosis (media global de 8.73 Unidades/g vs. 28,86 Unidades/g en los controles sin anastomosis, p=0,002), niveles, así mismo significativamente inferiores, en todos los casos, con lesiones frente a los controles sin anastomosis (p menor que 0,05). En los sucesivos meses de evolución hay una tendencia a disminuir la actividad de la SOD, no significativa y tampoco hay diferencias significativas en función del grado lesional alcanzado. La disminución de actividad SOD puede deberse a disminución de expresión del gen y/o inactivación del enzima. Dado que se constata un incremento progresivo en el tiempo de la expresión dela SOD-2 medido con western-blot en los casos de anastomosis y frente a los controles sin reflujo (la SOD-1, por su parte, permanece constante), la inactivación del enzima es lo más probable, circunstancia que se ha demostrado ante la constatación de aumento de la SOD-2 que ha sufrido nitrosilación de la tirosina, creciente con el tiempo. El análisis del daño oxidativo del ADN medido en niveles de 8OHdG, se ha mostrado significativamente elevado respecto de los niveles basales enlos tres meses de evolución estudiados (1.2 y 4), lo que indica que el daño oxidativo del ADN es un hecho precoz en este modelo. Aunque permanece aumetnado todo el tiempo de evolución, no muestra diferencias significativas entre los tres meses de evolución analizados entre si. Sí se constata mayor daño nitrosativo o niveles de peroxinitritos, aunque no representativo, en los casos con reflujo frente a las controles sin reflujo, medido por la determinación inmunohistoquímica de nitrotirosina. El efecto preventivo de la administración de SOD se relaciona con disminución de niveles mucosos de O2-, y aumento de actividad SOD, frente a las no tratadas. Por su parte, los casos con L-NAME muestran los niveles más elevados de O2- y de actividad SOD. Puede deducirse que, fundamentalmente el efecto de SOD es por disminución del daño oxidativo y el de L-NAME por disminución del daño nitrosativo. No se constata, por el contrario, efecto de ninguno de los tratamientos en la disminución del daño oxidativo del ADN. CONCLUSIÓN Tanto el tratamiento antioxidante con SOD como la inhibición de la síntesis de ON previenen el desarrollo de adenocarcinoma en el esófago de Barrett inducido experimentalmente en rata.

Autor: Leyva Rodríguez Francisco.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: Facultad de Medicina.
Centro de realización: Hospital La Paz.

Resumen: Valoración de un nuevo oncogén en la patología tumoral humana. Dicho oncogén se ha comprobado que interviene en los procesos de carcinogénesis mediante un proceso de disregulación y pérdida de expresión, probablemente dejando de inhibir la via ras. Se estudia y valora la expresión en los mencionados tumores asi como su pérdida de expresión.

Autor: MATILLA RODERO M. CARMEN.
Año: 2003.
Universidad: MALAGA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE MALAGA.

Resumen: El melanoma uveal constituye un tumor relativamente infrecuente, cuya histopatología y clínica son bien conocidos. No obstante, existe gran controversia en cuanto a las opciones terapéuticas, su comportamiento biológico resulta ciertamente enigmático quizás por el desconocimiento de aspectos básicos referidos a la iniciación, transformación y progresión neoplásica en estas lesiones melanocíticas del globo ocular. En este trabajo -realizado en una amplia serie de melanomas uveales primitivos (diagnosticados y tratados, mediante enucleación, en diferentes centros)-se pretende: a) Comprobar si el inmunofenotipo del melanoma uveal es semejante al del melanoma en otras localizaciones. b) Conocer la interrelación entre los diferentes aspectos cito-histopatológicos del tumor y diferentes parámetros patobiológicos, tales como el perfil inmunohistoquímico de proliferación (Ki-67), de expresión de oncogenes (Bcl-2, c-erbB2) y genes supresores (p53). En la serie estudiad, la edad de los pacientes con melanoma de la úvea oscila entre 20 y 82 años, con una media global de 64,1años, existiendo un ligero predominio en el sexo femenino. La localización del melanoma del tracto uveal muestra una marcada preferencia por la coroides, seguida a gran distancia por el cuerpo ciliar y por el iris. El tamaño, establecido con criterios anatomopatológicos (según su diámetro mayor), es menor en los melanomas de coroides que en los ubicados en el iris o en el cuerpo ciliar. En los melanomas uveales, se advierte un predominio del tipo celular fusiforme, seguido en frecuencia por el mixto y, a continuación, por la variante epitelioide. La disparidad de estos datos con algunas otras series se debe a la falta de consenso entre los patólogos para catalogar un melnoma uveal como tipo mixto. Estimamos que el porcentaje de células epitelioides superior al 5% es el requisito más adecuado para clasificar como mixto a un melanoma uveal. La melanina muestra mayor tendencia a presentarse en las neoplasias uveales fusocelulares. Este hallazgo está en relación con el mayor grado de diferenciación celular de los mismos. El número de mitosis es mayor en los melanomas detipo epitelioide y menor en los constituidos por células fusiformes. El perfil inmunohistoquímico de los melanomas uveales (positividad a la vimentina, HMB-45 y melan-A) es semejante al de los melanomas primitivos cutáneos. En los melanomas uveales existe correlación entre el número de mitosis y la inmunotinción positiva para Ki-67/MIB-1, si bien el índice no es elevado. La escasa o nula expresión inmunohistoquímica de p53 y c-erb-b2, en los casos estudiados, no permite establecer ninguna relación con otros mercadores de comportamiento biológico del melanoma uveal. La inmunotinción con Bcl-2, aunque positiva en un elevado número de casos (sobre todo cuando existe mayor atipia y pleomorfismo celular) presenta una distribución e intensidad heterógenea. Su valor es, pues, muy limitado en el melanoma uveal, puesto que además no se correlaciona con otros parámetros histopatológicos de probable significado pronóstico.

Autor: PALLARÉS QUIXAL JUDIT.
Año: 2003.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El proceso de angiogénesis es encesario para el crecimiento de los tejidos más allá de 2-3 mm, y para el desarrollo de metástasis a distancia. Los tejidos tumorales producen diferentes factores angiogénicos, fundamentalmente el Factor de Crecimiento Vascular Endotelial (VEGF) y el Factor de Crecimiento Fibroblático Básico (bFGF), que actúan sobre receptores situados en las células endoteliales dónde estimulan la angiogénesis. Estudios anteriores han demostrado un aumento de la angiogénesis en el cáncer de próstata y lo han relacionado con una mayor agresividad tumoral. Existen escasas referencias en la literatura respecto a la angiogénesis en la lesión precursora del cáncer prostático o neoplasia intraepitelial de alto grado (PINAG). Nuestro trabajo ha demostrado un aumento de angiogénesis en la neoplasia intraepitelial de alto grado, junto a un aumento en la expresión de los factores angiogénicos VEGF y bFGF y de sus receptores Flt-1 y FLK/KDR. En el cáncer prostático hemos demostrado una correlación entre la angiogénesis, mediante la valoración de la densidad vascular y la expresión de los factores angiogénicos y de los receptores y los parámetros clínico-patológicos de agresividad y pronóstico del cáncer prostático.

Autor: GONZÁLEZ DE LA TAJADA IRANZU.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: El tumor de Ewing está constituido por un conjunto de neoplaisas entre las que se encuentran el sarcoma de Ewing y los tumores neuroectodérmicos primitivos. Estos tumores afectan fundamentalmente a niños o adultos jóvenes y son, tras los osteosarcomas, los segundos tumores más frecuentes en este grupo de edad y en esta localización. Presentan un comportamiento muy agresivo y la tasa de supervivencia a 5 años es de tan solo el 50% a pesar del uso de uan terapéutica multimodal. La histogénesis de estos tumores es por el momento desconocida. Algunos autores han apuntado hacia un origen neural del tumor, dado que muchos tumores expresan marcadores neurales y algunas líneas celulares pueden diferneciarse hacía un fenotipo neural bajo determinados estímulos. No obstante, muchos otros indican un origen mesenquimático primitivo, dado que el tumor aparece en muy diversas localizaciones y no todos los tumores presentan marcadores neuronales y algunas líneas celulares pueden diferenciarse hacía un fenotipo neural bajo determinados estímulos. No obstante, muchos otros indican un origen mesenquimático primitivo, dado que el tumor aparece en muy diversas localizaciones y no todos los tumroes presentan marcadores neurales. A nivel molecular están caracterizados por la presencia de translocaciones específicas que fusionan el gen EWS junto con un gen de la familia ETS. En más del 90% de los casos este gen es FLI-1. La alta prevalencia de fusiones EWS-ETS y un número abundante de evidencias experimentales indican que la proteína es determinante para la génesis y el mantenimiento del tumor. De hecho, se sabe que la proteína facilita el crecimiento en independencia de anclaje y la formación de tumores en ratones inmunodeprimidos. No obstante, todavía se desconocen muchos aspectos acerca del impacto del fusión quimérica sobre la biología tumoral por lo que es necesario el desarrollo de nuevos modelos para el estudio de este tumor. Además del impacto del afusión quimérica en la biología tumoral, la proliferación y supervivencia tumoral parecen depender también de factores autocrinos y paracrinos. El circuito desencadenado por KIT y su ligando el factor de células madre (SCF) parece ser importantes para la proliferación y supervivencia en el tumor de Ewing. En 1998 Ricotti y colaboradores describieron por primera vez el circuito en relación con el tumor de Ewing, posteriormente en el año 2000 Landuzzi y colaboradores relacinaron el loop con la proliferación y la supervivencia en el tumor de Ewing. Ambos artículos establecían las bases para considerar el circuito como un sistema importante en el tumor de Ewing e instaban a estudiarlo en mayor profundidad. En la pasada década, la compañía farmacéutica Novartis desarrollo un fármaco capaz de inhibir selectivamente la actividad Kinasa de KIT, por lo que en el presente estudio nos plantemos si KIT tendría un papel relevante en el tumor Ewing y podría convertirse por tanto en una diana terapéutica susceptible de ser tratada con Imatinib. Para caracterizar el papel del circuito en el tumor de Ewing, se han llevado estudios de proliferación y apoptosis tras el bloque del receptor. Además, también se han realizado estudio combinados con Imatinib y quimioterápicos convencionales sobre líneas celulares de tumor Ewing. También se ha desarrollado un sistema de expresión inducible por doxicilina para el tránscrito quimérico, qu eha sido introducido en una línea mesenquimal primitiva con el fin de recapitular la histogénesis del tumor y los mecanismos moleculares implicados en la biología tumoral.

Autor: BLANCO BARRENECHEA DAVID.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: En este estudio hemos analizado los cambios fenotípicos y genéticos en un modelo de carcinogénesis pulmonar inducida por sílice en rata. La pérdida progresiva de moléculas del complejo de adhesión E-cadherina, alfa y beta-catenina se ha detectado desde las lesiones preneoplásicas adenomatoides hasta los tumores, y en estos últimos también se ha observado la pérdida del marcador de uniones estrechas ZO-1. Concomitante con la pédida de moléculas de adhesión y polaridad celular, se observaron áreas tumorales con características fenotípicas mesenquimales. El estudio de los marcadores mesenquimales vimentina y N-cadherina nos permitió identificar el fenómeno de la EMT precisamente en lesiones tumorales, pero no en las preneoplásicas. El estudio de coexpresión de marcadores mesenquimales con marcadores epiteliales ha demostrado que las células que componen estos focos de transición de epitelio a mesénquima, mantienen todavía algunos rasgos fenotípicos epiteliales. También hemos estudiado in vitro el efecto de dos factores relacionados con la EMT, TFG-Beta1 y TFG-2, sobre dos líneas celulares de pulmón de rata. Ningunto de los dos factore sinduce la transición a un fenotipo mesenquimal de la línea epitelial RL65, sin embargo, el factor FGF-2 induce un cambio en la morfología de la línea L2, neumocito tipo II, a un tipo celular más fusiforme. También hemos identificado alteraciones epigenéticas en los tumores que se producen en nuestro modelo. Estas alteraciones pueden afectar a los mecanismos de adhesión a través de E-cadherina, H-cadherina y APC. Asimismo, hemos observado alteraciones de genes supresores de tumores, como mutación de p53 y la acumulación de su proteína, así como la metilación del promotor de p16. De manera complemetnaria, hemos descrito mediante el empleo de los marcadores específicos pro-SPC y CC10 que, el tipo celular principal de origen de la carcinogénesis pulmonar inducida por sílice parece ser el neumotico tipo II. En un intento de dilucidar los mecanismos de carcinogénesis asociados a la inflamación hemos estudiado el efecto de la sílice sobre una línea de macrófagos alveolares y dos líneas celulares de pulmón normal. El aumento en la expresión de las citoquinas proinflamatorias IL-1beta, TNF-alfa e IL-6 en los macrófagos alveolares, así como de las moléculas del complejo de adhesión e IL-6 en la línea L2, sugieren un papel activo de la sílice sobre estas poblaciones celulares. Todos estos resultados tomados en su conjunto sugieren que este modelo representa una herramienta útil para el estudio de la carcinogénesis, en especial la carcinogénesis asociada a la inflamación crónica, y permite avanzar en el conocimiento de las etapas iniciales y del desarrollo de la carcinogénesis pulmonar.

Autor: LINARES TORRES PEDRO.
Año: 2002.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: VETERINARIA .
Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.

Resumen: El objetivo de este estudio fue determinar si el tratamiento con el inhibidor de la angiogénesis TNP-470 producía alguna alteración sobre los marcadores de estrés oxidativo, los sistemas de defensa antioxidantes enzimáticos, la producción de oxido nítrico (ON) a través de la enzima óxido nítrico sintetasa inducible (ONSi) y sobre la activación del factor de transcripción nuclear kappa B (FN-kB) en un modelo experimental de hepatocarcinoma en ratas. Para ello se utilizaron ratas macho de la raza Wistar en las que se indujo un hepatocarcinoma según el modelo de Solt y Farber, que consta de un iniciador que es la dietilnitrosamina o (DEN), un inhibidor selectivo del crecimiento de los hepatocitos normales, que es el acetilaminofluoreno (AAF) y un potente estímulo de la regeneración hepática como es la hepatectomía parcial. El TNP-470 fue administrado a razón de 30 mg/Kg peso/tres veces por semana, de forma subcutánea, desde la semana 20 a la28, fecha en que terminó el experimento tras el sacrificio de los animales. En el 100% de las ratas con inducción de hepatocarcinogénesis se confirmaron signos histológicos de malignidad y las muestras hepáticas mostraban un incremento significativo de la enzima glutatión S-transferasa placentaria (GST-P), que es un conocido marcador tumoral asociado a hepatocarcinogénesis. Asimismo se halló un incremento en la concentración hepática de productos derivados del ácido tiobarbitúrico (TBARS), en la concentración hepática de glutatión reducido (GSH), en la de glutatión oxidado (GSSG) y en la relación GSSG/GSH. En el grupo de animales con inducción de hepatocarcinogénesis existía una disminución en la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa, glutatión peroxidasa (GPx) citosólica y mitocondrial, y en la superóxido dismutasa (SOD) citosólica y mitocondrial. Los animales con heptaocarcinoma mostraban también un aumento en la expresión de la enzima ONSi, un incremento en la activación del FN-kB y un disminución en su proteían inhibidora IkB. Sin embargo, en el grupo de animales con inducción de la hepatocarcinogénesis que fueron tratados con TNP-470, ninguno de los animales presentó datos histológicos de malignidad, apreciándose únicamente cambios displásicos leves, y una disminución significativa de la GST-P. Asimismo los marcadores de estrés oxidativos fueron revertidos a la situación basal, y el inhibidor de la angiogénesis evitó el descenso en la actividad de los sistemas antioxidantes enzimáticos. El TNP-470 fue capaz de disminuir la expresión de la ONSi así como de inhibidr la activación del FN-kB. Por tanto, el TNP-470 además de ejercer su efecto antitumoral a través de la inhibición de la angiogénesis, se comporta como un fármaco quimiopreventivo y antioxidante. Parte de los efectos beneficiosos que produce en el tratamiento del cáncer podrían estar también mediados por la inhibición de la producción de ON a partir de la ONSi y de la inhibición de la activación del FN-kB.

Autor: CARBONELL MESEGUER PABLO.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGÍA .
Centro de realización: DEPTO. DE GENÉTICA. FACULTAD DE BIOLOGÍA. UNIVERSIDAD DE MURCIA.

Resumen: En las sociedades occidentales, el riesgo de desarrollar cáncer colorrectal (CCR) a lo largo de la vida se estima que es del 5-6%. Aproximadamente la mitad de los afectados fallecen a consecuencia del mismo, lo que lo sitúa, tras los cánceres de pulmón y de mama, como la tercera causa más frecuente de muerte por cáncer en los países desarrollados. En el origen y evolución del CCR están implicados tanto factores hereditarios como medioambientales y de dieta. El 90% de todos los CCR se diagnostican en individuos mayores de 55 años y aproximadamente las tres cuartas partes de ellos se consideran de origen esporádico, es decir, causados por mutaciones de novo. Sin embargo, la aparición de la enfermedad a una edad temprana (antes de los 55 años), así como el desarrollo frecuente del mismo tipo de tumor en varios individuos de una familia, hace suponer que entre un 20% y un 30% de estos tumores podrían tener un componente genético de susceptibilidad. De hecho, el CCR es, de todos los cánceres conocidos en humanos, el que se asocia con un mayor riesgo familiar. Diversos trabajos han puesto de manifiesto la existencia de una clara relación entre el número de parientes de primer grado afectados y el riesgo de desarrollar CCR. En ellos se observa que este riesgo se incrementa al disminuir la edad de diagnóstico del pariente afectado. En el CCR se han descrito 2 formas de inestabilidad genética: la inestabilidad cromosómica y la inestabilidad de microsatélites. Ambos tipos se han considerado mutuamente excluyentes y representan expresiones fenotípicas surgidas como consecuencia de las alteraciones genéticas que guían la evolución del tumor hacia la malignización. La inestabilidad cromosómica caracteriza aproximadamente al 80% de los CCR y de ellos se dice que expresan el "fenotipo CIN". Esta inestabilidad se evidencia en la elevada frecuencia con que se producen pérdidas de distintas regiones cromosómicas, siendo frecuentes y específicas las que afectan a las regiones 5q, 17p y 18q. La inestabilidad de microsatélites se observa en aproximadamente el 20% de los CCRs, a los que se les ha atribuido por tanto un "fenotipo MIN". Este tipo de inestabilidad afecta a las secuencias repetitivas del ADN formadas por unidades de entre 1 y 3 pares de bases (secuencias microsatélites). Ambos tipos de inestabilidad son rasgos distintivos de los dos principales síndromes hereditarios que cursan con el desarrollo de CCR. La poliposis adenomatosa familiar o FAP, representa el modelo CIN en el proceso de tumorogénesis. Este síndrome está en el origen de menos del 1% del total de los CCRs y es consecuencia de la herencia de un alelo mutado del gen APC. Los individuos afectados por la FAP desarrollan cientos de pólipos en el colon y el recto que, si no se eliminan, terminan invariablemente evolucionando hacia el carcinoma. El cáncer de colon hereditario no polipósico o HNPCC está en el origen de aproximadamente entre el 3% y el 5% del total de CCRs y representa el paradigma del modelo MIN. En este caso la enfermedad es consecuencia de la presencia, en la línea germinal, de un alelo mutado de alguno de los genes del sistema de reparación postreplicativa del ADN (MMR), fundamentalmente hMLH1 o hMSH2. En el HNPCC, a diferencia de lo que ocurre en la FAP, la enfermedad evoluciona rápidamente a partir de uno o pocos pólipos. Los objetivos de este trabajo fueron por una parte analizar la sensibilidad y especificidad de la expresión del fenotipo MIN como carácter indicador de mutaciones germinales en hMLH1 y hMSH2, en una población de personas diagnosticadas de CCR primario a una edad temprana (hasta los 50 años). Asimismo, investigar la existencia de diferencias en la expresión del fenotipo MIN, así como en los patrones de metilación somática de las regiones promotoras de los genes hMLH1 y hMSH6, entre los tumores inestables considerados esporádicos y los hereditarios ligados al síndrome de Lynch. La familia de factores de transcripción E2F juegan un papel fundamental en la regulación de la expresión de genes que se consideran esenciales en el desarrollo del ciclo celular. E2F4 contiene una serie de 13 residuos de serina consecutivos en su dominio de transactivación. Estos están codificados por una serie de tripletes (AGC) cuyo número se encuentra muy frecuentemente alterado en los CCR con fenotipo MIN. Esta región repetitiva es polimórfica en línea germinal en aproximadamente el 5% de la población general, lo que permite especular con la posibilidad de que la presencia de alelos de E2F4 con un número de tripletes distinto de 13 en la línea germinal, pudiera aportar una cierta susceptibilidad al desarrollo del CCR. BAX ex otro de los genes que contiene una secuencia repetitiva codificadora, que aparece frecuentemente alterada en los tumores con fenotipo MIN. Las expansiones y contracciones de la misma, tienen como consecuencia la síntesis de una proteína truncada que es inactiva. En general se produce una reducción en la expresión de este gen en la mayoría de los CCR independientemente de que muestren o no inestabilidad de microsatélites. La falta de expresión de la proteína puede explicarse por el efecto de la inestabilidad de microsatélites. La falta de expresión de la proteína puede explicarse por el efecto de la inestabilidad sobre la secuencia repetitiva de ambos alelos del gen, aunque no se puede descartar la posibilidad de que, como ocurre con otros GSTs, se pierda uno de los alelos por deleción.

Autor: YÁÑEZ GASCON M. JOSEFA.
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Realizamos el estudio de los posibles citotóxicos (tratamientos durante 24 horas) y antiproliferativos (tratamientos 72 horas) de trece compuestos fenólicos sobre las líneas de melanoma B16F10 y SK-MEL-1 y de melanocitos no neoplásicos Melan-a comparándolos con el melfalán. Los compuetos fenólicos no eran solubles en el medio de cultivo siendo necesario disolverlos en DMSO, obteniendo una solución stock a partir de la cual se prepararon las soluciones de trabajo. La máxima concentración ensayada en los compuestos fenólicos (50 uM) estuvo condicionada por la solubilidad de las sustancias y para que la concentración de DMSO en los cultivos no superara el 1%. Cuantificamos la viabilidad celular de los cultivos tratados y controles mediante el ensayo colorimétrico con MMT adaptando los métodos de Carmichael y Alley, que implica el uso de la sal de tetrazolio MTT que es metablizada a una sal coloreada (formazán) por la actividad de la enzima mitocondrial succinato deshidrogenasa. El método estadístico empleado consistió en un análisis de la varianza de medidas repetidas complementando con contraste de igualdad de pares con el método de la mínima diferencia significativa. Los valores de LD50 han sido obtenidos a partir de la curva ajustada a los promedios de los cocientes de absrobancia respecto al control. Nuestros resultados mostraron que ninguno de los compuestos ensayados, sobre las líneas de melanoma utilizadas, originó un efecto citotóxico comparable al del melfalán que mostró diferencias significativas (p

Autor: OLIART DELGADO DE TORRES SOLEDAD.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En una serie conocida de cáncer colorrectal, se han estudiado las alteraciones genéticas típicas de las dos vías de tumorogénesis colorrectal y que caracterizan los dos tipos "clásicos" de síndromes hereditarios: Poliposis Adenomatosa Familiar (vía supresora) y síndrome de Lynch (vía mutadora). La inestabilidad de microsatélites tumoral se ha analizado siguiendo los criterios estandarizados y se ha estudiado la relación de los tumores inestables (MSI-H) con alteraciones (LOH) en los genes de la vía mutadora: hMLH1 y hMSH2 y de la vía supresora, en la que se han estudiado tanto perdidas de heterocigosidad (LOH) de genes supresores: APC, TP53 y DCC, como mutaciones del oncogen K-Ras, llegando a distintas conclusiones entre las que destacaría que los tumores esporádicos MSI+, aún siendo poco frecuentes (8,4%), pueden constituir un subgrupo diferenciado respecto a sus características clínico-patológicas: pacientes más jóvenes, localización preferente en colon derecho, se suelen asociar con tumores B y C de Dukes, rara vez metastatizan y suelen tener una mayor supervivencia; se asocian significativamente a LOHs en el gen reparador hMSH2, y además, muestran una asociación a LOHs del gen supresor iniciador de la vía supresora, el APC; sin embargo es independiente de las perdidas de heterocigosidad en TP53 y DCC, y de las mutaciones del oncogén K-Ras, lo cual resalta, que también en tumores esporádicos existen dos vías de tumorogénesis. Los tumores que presentan mutación en el oncogén K-Ras y las distintas variables clínico-patológicas estudiadas, en el estudio se comprueba que los tumores mutados tienden a darse en pacientes de mayor edad, a localizarse en el colon distal, y suelen detectarse en tumores con estadios de Dukes más avanzados. Al estudiar la supervivencia de los pacientes cabe destacar que tanto las mujeres con mutación K-Ras (p=0,05), como los tumores proximales con mutación K-Ras (p

Autor: MIYAR DE LEON ALBERTO.
Año: 2000.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE CIRUGIA-UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID.

Resumen: Se estudia la expresion de la metalotionina en tejido tumoral de tumores colorrectales y en tejido metastasico en ganglios linfaticos. Se correlaciona la expresión con parametros epidemiologicos, extensión tumoral, recurrencia y supervivencia. Resultados: La metalotionina se expresa tanto en el citoplasma como en el nucleo de las celulas tumorales. En la mucosa normal proxima al tumor se expresa con mayor intensidad que en la mucosa alejada. No se han encontrado correlaciones con parametros epidemiologicos. No se ha encontrado correlación con el grado de infiltracion tumoral. Existe correlacion entre la expresion del tumor primario y de las metastasis ganglionares. No se ha encontrado correlación con la aparición de recidivas. La correlacion con la supervivencia es casi significativa en el sentido de menor supervivencia a mayor expresión. No se ha encontrado correlación entre la expresión en metastasis ganglionares y la supervivencia.

Autor: BAYO ACERO ANGEL BASILIO.
Año: 2000.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Se trata de un estudio observacional y descriptivo sobre la incidencia de cáncer en la provincia de Guadalajara y en cada una de sus zonas geográficas, para lo cual se estructura dicha provincia en dos distribuciones incluyendo una de ellas la zona denominada "Centrales nucleares". Una vez calculada la incidencia ajustada de todos y cada uno de los tumores, en Guadalajara y en cada una de sus zonas, se comparan los resultados de cada distribución entre sí, con el total de la provincia y de ésta con otras poblaciones. Para ello, se utiliza el estadístico conocido como ANOVA. Entre las principales conclusiones destacan: las zonas urbanas presentan mayor riesgo tumoral que las rurales, el cáncer de pulmón en hombres y el de mama en mujeres son los de mayor incidencia, el cáncer de vejiga en hombres destaca por sus altísimas tasas de incidencia.

Autor: GOMEZ-CASERO ESTEBAN ELENA.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CIEMAT.

Resumen: En este trabajo se han aplicado tecnicas de differential display (RAP-PCR) para identificar genes regulados por la radiación UVB en queratinocitos, con el fin de estudiar su posible alteración en los tumores de piel. Uno de los genes identificados fue el gen DO/DRG1, el cual ha sido caracterizado ampliamente en el presente estudio. DO/DRG-1 es un gen expresado en queratinocitos y regulado negativamente por la radiacion UVB. Se ha observado la induccion del gen en los procesos de diferenciación terminal epidérmica. In vitro, su expresión se incrementa en cultivos de queratinocitos de ratón cuando éstos son inducidos a diferenciar por calcio y en hunanos se ha observado que la expresión del gen DO/DRG-1 aumenta en las células de la linea HaCaT cuando son inducidas a diferenciar por ausencia de suero. In vivo, la expresión del gen DO/DRG-1 en la piel se localiza principalmente en las capas más suprabasales. El mismo patrón se observa en los papilomas diferenciados. Se ha determinado la variación de su expresión durante el ciclo celular. Concretamente se ha determinado que los niveles de expresión del gen varian durante el ciclo celular, siendo mas elevados cuando las celulas estan sincronizadas, Go y sufriendo un incremento adicional en la fase G1 temprana (3-6 horas). Varios genes, como curcumina, PDTC y NiCl2, inducen fuertemente la expresión del gen DO/DRG-1. La inducción por PDTC se produce, al menos en parte, por la via de las MAP-quinasas y parece independiente del nivel rédox celular y de la activaciono de NF-kB. El gen DO/DRG-1 es un gen regulado por el oncogen Ha-ras activado y por tratamiento con el agente promotor tumoral TPA. Se ha observado que en los tumores de piel de ratón inducidos por el modelo de carcinogénesis quimica en dos fases DMBA/TPA, la expresión de gen DO/DRG-1 esta elevada. Ademas, se ha determinado la sobreexpresión del gen DO/DRG-1 en el 40% de los carcinomas basocelulares humanos (BCC) estudiados. En estos tumores se ha observado que la proteina puede translocarse al nucleo de las celulas tumorales. En la piel normal la localización de la proteina ha sido citoplasmatica y suprabasal, sin embargo en los tumores presentaba translocación nuclear. La sobreexpresión del gen en los tumores de ratón como en tumores humanos y su localización nuclear en las celulas tumorales sugiere que podria tener alguna función relevante en la expresion genica tumoral. Del conjunto de los resultados obtenidos se deduce que DO/DRG-1 juega un papel en los procesos de diferenciación epidermica y posiblemente este implicado en la tumorigenesis de piel.

Autor: ALGUACIL OJEDA JUAN.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCOLA DE DOCTORAT.

Resumen: Los objetivos del presente trabajo fueronanalizar la relación entre los antecedentes de exposiciones laborales y el riesgo de CPE en España, por un lado, y analizar la asociación entre estas exposiciones y la presencia de mutaciones en el gen K-ras en pacientes con CPE, por otro. Para abordar estos objetivos el presente trabajo se ha enmarcado dentro del estudio PANKRAS II, en el que se reclutaron 164 casos incidentes de CPE y 238 controles. El estudio caso-caso se basa en los 107 pacientes en cuyo material histológico se pudo analizar la presencia de mutaciones en el gen K-ras. La información sobre dieta, consumo de tabaco, alcohol y café, y factores clínicos, socio-demográficos y laborales se obtuvo mediante entrevista directa con el paciente. Se obtuvo así la historia laboral de cada paciente, y laa ocupaciones referidas se clasificaron según la CNO94. Dos expertos higienistas industriales evaluaron la exposición laboral a 22 agentes químicos potencialmente asociados al CPE. Además también se evaluó la exposición laboral a 22 agentes químicos, dos físicos, y uno ernonómico mediante la matriz de exposición laboral FINJEM. En el análisis caso-caso se compararon las exposiciones laborales entre los pacientes con CPE mutado y los pacientes con CPE nomutado. El estimador de riesgo fue la razón de ods ajustada, calculada por regresión logística no condicional. Respecto a al análisis caso-control, los resultados de este estudio apoyan la hipótesis de una asociación entre exposición a ciertos tipos de plaguicidas, anilinas y derivados y benzo(a)pireno y el riesgo de cáncer de páncreas exocrino. En cuanto al análisis caso-caso, las asociaciones encontradas entre exposición a disolventes orgánicos metales y PAHs, y la activación del gen K-ras merecen especial atención y estudios con mayor profundidad. Ninguna de estas exposicones se asoció a una sóla mutación específica en el gen K-ras. La exposición a disolventes orgánicos se asoció fuertemente a las dos mutaciones más frecuentes en el gen K-ras en CPE (cambio a ácido aspártico y a valina).

Autor: OKRUZHNOV YURY.
Año: 1999.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: El presente trabajo evalua el papel del virus Epstein-Barr (EBV) asi como el patrón de expresión de sus genes virales en muestras de pacientes afectos de melanoma primario asi como en melanocitos de donantes sanos y lineas celulares de melanoma. En el genoma de este virus se han encontrado genes bcl-2 analogos(BHRF1) cuyo papel se estudia en este trabajo asi como la expresión del gen antiapoptótico bcl-xl. Se confirma en este trabajo la presencia del virus EBV en lesiones melanocíticas neoplásicas de forma diferencial con melanocitos normales sugiriendo un papel potencial de este virus en la carcinogénesis de esta neoplasia. Asi mismo, el gen homólogo BHRF1 está expresado en un elevado numero de melanomas de forma muy significativa. Por otra parte, de forma asociada a la infección latente por EBV se constata un significativo incremento de la expresión de bcl-xl.

Autor: SALGADO PASCUAL JOSE ESTEBAN.
Año: 1999.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CLINICA UNIVERSITARIA DE NAVARRA.

Resumen: El gen p16/CDKN2A es un gen supresor tumoral que codifica la proteina p16. Esta proteina regula la proliferacion celular al inhibir la fosforilación de pRb por el complejo catalítico cdk4/ciclina-D en la transición G1-S del ciclo celular. La deleción homocigota y la mutación son mecanismos que provocan su inactivación, aunque en algunas estirpes tumorales, como en el carcinoma colorrectal, no han sido descritos. La metilación de la isla 5´-CpG, situada en la región promotora del gen, puede constituir un mecanismo alternativo de inactivación. Analizamos la metilación del gen p16/CDKN2A mediante la tecnica de MSP(metilación especifica de PCR) en 86 tumores colerrectales, así como 17 muestras de mucosa normal emparejadas con sus respectivas muestras tumorales. Ninguna de las muestras de mucosa normal mostró metilacion mientras que 18/86 (20,9%, CI 95% 12,9%-31%) de las muestras tumorales mostraron metilación del gen. Se observó una significativa correlación entre la metilación génica y la ausencia de expresión, analizada por inmunohistoquímica, de la proteina p16 (p

Autor: MARTÍNEZ CARPIO PEDRO ANTONIO.
Año: 1999.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La línea celular MDA-MB-231 constituye uno de los modelos más utilizados para el estudio in vitro del cáncer de mama. Estas células presentan gran cantidad de receptores para el Factor de Crecimiento Epidérmico (EGF) y para el Factor Transformante del Crecimiento beta1 (TGF-beta1), pero carecen de receptores para el estradiol (E2). Se ha estudiado el crecimiento de esta línea celular, en cultivos de 42 horas y de 11 días, bajo el estímulo del EGF, TGF-beta1 y E2, comprobando un efecto inhibitorio en los tres casos, en función del tiempo de exposición al factor. Se ha comprobado, por primera vez, que estas células son capaces de secretar al medio de cultivos EGF y TGF-beta1 inmunoreactivos y que además pueden cuantificarse utilizando procedimientos de concentración del medio (liofilización) e inmunoanálisis. El EGF inhibió la secreción de TGF-beta1 en todos los experimentos realizados,mientras que el TGF-beta1 activó o inhibió la secreción de EGF en función de las condiciones experimentales. Se demuestra por primera vez a nivel de secreción proteica una doble regulación entre estos dos factores (EGF y TGF-beta1), hasta ahora nunca estudiada en ningún tipo de células. Se propone un modelo experimetnal aplicable a otras líneas celulares.

Autor: FANLO VILLACAMPA ANA JULIA.
Año: 1998.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La exposición a arilaminas como colorantes en la industria textil o por consumo de tabaco está asociada con un aumento del riesgo de padecer cáncer vesical. En el metabolismo de arilaminas intervienen dos vías metabólicas competitivas. Por un lado, la N-hidroxilación vía CYP1A2 considerada como una reacción bioactivadora y, por otro lado la N-acetilación vía NAT2 polimórfica considerada como un mecanismo detoxicador. El objetivo del presente estudio, integrado por 133 trabajadores del textil expuestos laboralmente a arilaminas y 115 controles, fue determinar si la combinación de fenotipo acetilador lento y alta actividad CYP1A2 esta asociada con un mayor nivel de exposición a sustancias mutagénicas en orina. El estudio de la actividad NAT2 y CYP1A2 lo realizamos con el test de cafeína, mediante el estudio de diferentes cocientes formados por metabolitos de cafeína obtenidos en orina evaluados por HPLC. El estudio de la mutagenicidad urinaria se llevó a cabo por el test de la microsuspensión utilizando una cepa de Salmonella TA98, extrayendo los mutágenos de la orina con resina C18/metanol e incorporando enzimas activadores: beta-glucuronidasa, S9-mix y ambos componentes. Incorporamos el estudio por PCR de los genotipos GSTT1 y GSTM1 en un subgrupo de individuos fumadores con el fin de evaluar si los genotipos nulos de ambas enzimas, en principio con menor capacidad detoxicadora, están asociados a un aumento en los niveles de mutagenicidad urinaria observando un aumento en este sentido. Nuestro resultados mostraron que la combinación de fenotipos metabólicos no influyen en los niveles de mutagenicidad urinaria en trabajadores aun cuando, la exposición vesical a sustancias mutagénicas es mayor respecto al grupo control a pesar del ajuste en la ley que prohibió el uso de tres arilaminas carcinógenas. La adición de S9 y beta-glucuronidasa aumenta la sensibilidad del test permitiendo la discriminación en la intensidad de exposición ocupacional. Entre los trabajadores el tabaquismo sólo determinó aumentos en la excreción de mutágenos con S9 indicando la presencia de una exposición uniforme a otras mezclas en el medio laboral. En lo que respecta a la actividad NAT2 polimórfica no observamos su influencia sobre los niveles de mutagenicidad. Por el contrario, la coincidencia de alta actividad CYP1A2 inducida por el consumo de tabaco y exposición ocupacional a arilaminas determinó un mayor nivel de exposición vesical a sustancias mutagénicas. En conclusión, los resultados de este estudio respecto a los de un trabajo similar realizado previamente al ajuste en la ley, revelan que los trabajadores del textil están expuestos a sustancias mutagénicas entre las que arilaminas y sus derivados parecen estar presentes a menor concentración por el cambio legislativo.

Autor: GAVILANES PLASENCIA JAVIER.
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La proteína p53, relacionada en los últimos años con multitud de neoplasias, está involucrada en la apoptosis celular, mecanismo de acción de los principales agentes quimioterápicos. La sobreexpresión de la proteína p53 se ha relacionado, en estudios in vitro, con menor respuesta a la quimioterapia. Sin embargo, aún no existen estudios clínicos que hayan establecido el verdadero valor de la sobreexpresión de la proteína p53 en tumores de cabeza y cuello tratados con quimioterapia. Con el objetivo de determinar el valor predictivo y pronóstico de la expresión de proteína p53, así como el de los principales parámetros clínico-patológicos, hemos realizado el estudio de una serie de casos histórica, formada por 99 pacientes tratados con quimioterapia neoadyuvante (cisplatino+5-fluoracilo), con diagnóstico de carcinoma epidermoide de laringe, hipofarienge y orofaringe en estados avanzados. La expresión de proteina p53 fue determinada mediante inmunohistoquímica, en las biopsias previas al tratamiento. El 75% de los pacientes expresarion la proteína p53. El único factor clínico-patológico asociado a la expresión de p53 fue el consumo de alcohol. Los principales factores predictivos de respuesta a la quimioterapia en nuestra serie fueron: el Performance Status (indicador del estado general), el grado T clínico y en grado N clínico. Los principales factores pronósticos en nuestra serie fueron la respuesta a la quimioterapia, el Performance Status y la edad. La expresión de la proteína p53 se asoció a la respuesta a la quimioterapia, pero sobre todo a la supervivencia a los 5 años, tanto global como libre de enfermedad, de los pacientes con tumores de orofaringe e hipofaringe. Los pacientes que no expresaron la proteína p53 vivieron más tiempo y sin recidiva que aquellos que expresaron la proteína. Esta asociación no se produjo en los tumores de laringe.