HEMOPATOLOGIA, 2

Autor: MUÑOZ TURRILLAS M. CARMEN.
Año: 2000.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD MEDICINA. LABORATORIO DE HEMATOLOGIA.

Resumen: La coagulación intravascular diseminada (CID) es un síndrome caracterizado por la activación de la coagulación conformación de fibrina en la microvasculatura con el consiguiente daño multiorgánico. La sepsis es la enfermedad que más frecuentemente cursa con CID. Analizamos en un modelo experimental de CID inducida por endotoxina en conejos, en el que se estudian diversos parámetros de la hemostasia, los depósitos de fibrina renales y la mortalidad a las 24 horas, el efecto de dos grupos de tratamiento: 1)un antitrombótico, la hirudina y un profibrinolítico, el t-PA, administrados de forma individual y combinada;2) un tratamiento contra la inhibición de la fibrinolosis: anticuerpos monoclonales contra el PAI-1 (NOV25 sintetizado en nuestro propio laboratorio y MA33B8, cedido por el Dr Declerck de la Universidad de Lovaina). En el estudio "Hirudina /t-PA", la administración de r-hirudina sola ofreció buenos resultados pero los mejores se obtuvieron con la combinación de hirudina y t-PA en cuanto a la reducción del consumo de plaquetas, proteina C, a la reducción del incremento de PAI-1 de los depositos de fibrina. La mortalidad a las 24 horas descendió desde el 70% en el grupo control endotoxina a 40%,10% y 0% en los grupos "t-PA", "Hirudina" e "Hirudina +t-PA", respectivamente. En el estudio anti-PAI-1, tanto NOV25 como MA33B8 redujeron significativamente el incremento de PAI-1 plasmático, aunque el segundo lo hizo con más intensidad. Solo MA33B8 redujo significativamente los depósitos de fibrina y esta reducción mostro una correlación positiva con los niveles de PAI-1 plasmáticos y se acompañó de una reducción del marcaje de PAI local a nivel renal, estudio realizado mediante imunohistoquímica. No obstante, no se obtuvieron resultados satisfactorios en cuanto a la reducción de la mortalidad, lo que nos lleva a pensar que ésta no solo se debe el desequilibrio hemostático sino también a los mecanismos inflamatorios que acontecen en este sindrome.

Autor: GARCIA ARIAS-SALGADO ELENA.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLOGICAS (CSIC).

Resumen: La tromboastenia de Glanzmann es una enfermedad hereditaria caracterizada por un defecto cuantitativo o funcional del receptor plaquetario de fibrinogeno (GPIIb/IIIa). Por ello, nos ha servido de modelo para ampliar los conocimientos acerca de este receptor. Hemos estudiado cinco familias de pacientes con diagnostico clinico de tromboastenia de Glanzmann, en las cuales hemos hallado cuatro nuevas mutaciones, todas ellas localizadas en la subunidad GPIIb. El analisis cuantitativo del RNAm de GPIIb y GPIIIa en plaquetas y el estudio funcional de las mutaciones halladas demuestran que los mecanismos moleculares responsables de la falta de expresion y/o funcion de complejos GPIIb/IIIa han sido: ausencia de RNAm, incapacidad de la subunidad mutada para formar heterodimeros, alteracion en la velocidad de transito y/o ensamblaje en la membrana plasmatica de complejos GPIIb/IIIa, alteración de los mecanismos de señalización intracelular. Hemos demostrado que la disponibilidad de RNAm de GPIIb es limitante para la expresión superficial de receptores GPIIb/IIIa. Tambien observamos que la disminución en la tasa de expresión de GPIIb/IIIa en mutaciones heterocigotas puede ser debida a un efecto "dominante negativo" de las formas mutadas de estas proteinas o el resultado de interacciones anomalas con chaperonas del reticulo endoplasmatico. Realizamos estudios de mutagenesis especifica como metodo experimental para establecer una correlacion precisa entre estructura y función de estas proteinas. Los resultados obtenidos nos permiten afirmar: (a) el puente disulfuro intracateriano 674-687 de GPIIb es esencial para mantener una tasa de expresion superficial de GPIIb/IIIa normal. (b) La carga negativa del residuo 324 E de GPIIb es fundamental para la correcta formacion de heterodimeros con GPIIa. © Los segmentos transmembranar y citoplasmico de GPIIIa son imprescindibles para la expresión de GPIIb/IIIa. (d) la deleción de los residuos 616-690 del extemo carboxi-terminal extracelular de GPIIIa confiere activacion constituva al receptor GPIIb/IIIa.

Autor: ALCORTA LOYOLA IGNACIO.
Año: 2000.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La refractariedad a la transfusión de plaquetas es la principal complicación de esta terapeútica. En el estudio caso control que realizamos los factores significativamente asociados con la refractariedad fueron la presencia de anticuerpos anti-HLA, el trasplante de medula ósea por leucemia mieloide crónica y la presencia de fiebre. El análisis de la clase de anticuerpos mostró IgG en 9/18 pacientes estudiados, IgM en 6/18 e IgG+IgM en 3/18. La subclase de IgG fue IgG1 en 10, IgG1+IgG1+IgG4 en otro. No hubo diferencias significativas en el rendimiento de la transfusión de plaquetas en función de la clase de anticuerpo. Tampoco se encontró correlación entre el rendimientode la transfusión y la concentración de anticuerpos. Los mecanismos de acción de los anticuerpos anti-HLA son hetereogéneos. En algunos pacientes son capaces de producir trombocitolisis y de activar las plaquetas (6 de los 17 pacientes estudiados), efectos que probablemente estén mediados por la activación del complemento. Sin embargo, en la mayoría de los pacientes alinmunizados la destrucción de las plaquetas transfundidas está mediada por otros mecanismos. Ninguno de los 36 pacientes refractarios sin anticuerpos anti-HLA tenia anticuerpos antiplaquetarios especificos, mientras que unicamente 2 de los 52 pacientes refractarios con anticuerpos anti-HLA tenian anticuerpos antiplaquetarios especificos: un autoanticuerpo dirigido frente a un epitopo de la GP Iib/IIIa y un anticuerpos con especificidad anti-HPA-5b(Br a).

Autor: FERNANDEZ FERRERO SILVIA M..
Año: 1999.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Hemos evaluado los hallazgos cito-histológicos de dishemopoyesis en muestras de médula ósea (MO) obtenidas de personas sanas mayores de 50 años sincitopenias en sangre periférica (grupo control) y los hemos comparado con pacientes diagnosticados de síndrome mielodisplásico (SMD). Las personas incluidas en el grupo control mostraron hallazgos diseritropoyéticos y disgranulopoyéticos hasta en el el 15% y 27%, respectivamente, de las células consideradas (P90), superponiéndose en parte con los hallazgos de los pacientes diagnosticados de SMD. Evaluamos también la concordancia interobservador enlos hallazgos citológicos, observando que el recuento de blastos y de sideroblastos patológicos en MO son los parámetros donde la concordancia es mayor y por tanto, los más reproducibles. Incluyendo ambas variables, diseñamos un nuevo algoritmo diagnósitco que fue verificado en 613 pacientes procedentes de diferentes centros hospitalarios españoles y que demostró su utilidad para mejorar la reproductibilidad en el diagnóstico de los SMD (área bajo la curva ROC: 0,923). También hemos cuantificado los hallazgos dishemopoyéticos en la MO de personas sanas menores de 50 años sincitopenias. Detectamos una correlación positiva estadísticamente significativa entre la edad y los hallazgos diseritropoyéticos y disgranulopoyéticos (r=+0,70. P-0,001 y r=+0,275, p-0,044, respectivamente), así como una correlación negativa entre la edad y el recuentro de blastos en MO (r=0,329, p= 0,016). Después de considerar otras covariables, se puso de manifiesto que los fumadores, a cualquier edad, mostraban en su MO una proporción de hallazgos diseritropoyécticos, 3,73% superior y un porcentaje de blastos 0,28% mayor que los no fumadores.

Autor: RODRIGUEZ CALVILLO MERCEDES .
Año: 1999.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El transplante alogénico de progenitores hemopoyéticos se encuentra limitado por la escasez de donantes HLA-compatibles y por la frecuente aparición de enfermedad injerto contra huésped. El estudio de las células de la sangre de cordón umbilical (SCu) y de su capacidad de expansión in vitro podría ampliar la posibilidad de realizar trasplantes a un mayor número de individuos. Para el estudio empleamos 21 muestras de SCU y con el fin de recrear las condiciones idóneas de los ensayos de expansión, estudiamos la capacidad de purificación de células CD34+ de dos sistemas comercializados, uno basado en un método inmunomagnético y el otro en la inmunoadsorción. Además, comparamos la expansión inducida en las dos poblaciones de células CD34+ obtenidas por estos sistemas y la comparamos con la producida en la población mononuclear al incubarlas con suero de ternera fetal y factores de crecimiento (SCF, IL-3 y/o G-CSF) a lo largo de 7, 14 y 21 días de cultivo, transcurridos los cuales se estudió la celularidad total y la capacidad clonogénica de las muestras. La recuperación y pureza media de la fracción CD34+ fue significativamente superior en las muestras procesadas mediante el método inmunomagnético que en las que se empleó el sistema de inmunoadsorción. En cuanto a los ensayos de expansión, fue posible obtener adecuados crecimientos celulares en todos los ensayos iniciados. Sin embargo, el crecimiento de las células CD34+ obtenidas mediante el método inmunomagnético se mostró superior, con todas las combinaciones y en todos los periodos analizados,al observado en la población CD34+ obtenida mediante el método de inmunoadsorción y al observado en la población mononuclear.#

Autor: ANGUITA MANDLY EDUARDO.
Año: 1999.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El incipiente desarrollo del conocimiento molecular el que ha nos dado la esperanza de lograr una clasificación molecular de las leucemias agudas, con valor pronóstico y terapéutico, y de obtener marcadores propios de la enfermedad que nos puedan indicar si existe una verdadera curación o avisarnos de una recaída. Objetivos: Implantar en el Hospital Universitario San Carlos las técnicas de estudio molecular de los reordenamientos y las deleciones de genes supresores de tumor más frecuentemente observados en las leucemias agudas. Describir la frecuencia y correlación morfológica e inmunofenotípica de estas alteraciones moleculares. Describir la utilidad de la RT-PCR para detectar enfermedad mínima residual (EMR) a través del análisis de los reordenamientos BCR/ABL y PML/RARalfa. Comparar la detección de alteraciones genéticas mediante técnicas de biología molecular con los hallazgos obtenidos a través de la citogenética convencional. Relacionar la presencia de estos marcadores moleculares con las características clínicas de los pacientes al diagnóstico y con su evolución. Material y métodos: Se han estudiado 113 pacientes con leucemia aguda. Se han estudiado los genes MLL, p16 y p15 mediante Southern blot. Se han analizado mediante RT-PCR los reordenamientos BCR/ABL, TEL/AML1, E2A/PBX1, MLL/AF4, MLL/AF6, MLL/AF9, MLL/ENL, MLL/ELL, duplicación del gen MLL, PML/RARalfa, AML1/ETO y CBFB/MYH11. Resultados y conclusiones: Sobre un total de 113 pacientes con leucemia aguda, el análisis molecular se ha podido realizar en la inmensa mayoría de los casos, 110 (97.3%). El estudio de las alteraciones moleculares investigadas ha permitido detectar algún reordenamiento y/o deteción en casi la mitad de los pacientes, 43.6% del total y 47,4% de los casos en edad pediátrica. Es más de la mitad de los casos con alteraciones moleculares en los que el cariotipo fue valorable (57.9%)no se encontró la alteración cariotípica equivalente. Se ha observado una perfecta correlación entre la detección de EMR a través de los reordenamientos BCR/ABL y PML/RARalfa con la recaída hematológica. El pseudorreordenamiento del gen MLL es un fenómeno relativamente frecuente en las leucemias agudas, aunque se procesen las muestras de forma inmediata, pero no participa en la recaída de todos los pacientes con esta alteración. Los casos infantiles con leucemia aguda y presencia de los reordenamientos BCR/ABL, E2A/PBX1 o del gen MLL, o con deleción homocigota de p16, tienen una mayor prevalencia de leucocitos y de blastosis en sangre periférica, asícomo una peor supervivencia libre de enfermedad con independencia de estas dos variables. Se ha identificado un subgrupo de casos con TEL/AML1 de posible mal pronóstico: aquéllos que además tienen deleción de homocigota del gen de p16.#

Autor: RUBIO MARTÍNEZ ARACELI.
Año: 1999.
Universidad: ZARAGOZA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE ZARAGOZA - FACULTAD DE MEDICINA.

Autor: RODRIGUEZ RODRIGUEZ JUAN N..
Año: 1998.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se realizan sucesivos metaanálisis del uso de la EPOrHu en monoterapia y combinada con otros factores de crecimiento hematopoyético (G-CSF, GM-CSF, IL-3) con objeto de intentar identificar posibles parámetros que permitan predecir la respuesta en los pacientes sometidos a estos tratamientos. Paralelamente se realiza un estudio farmacoeconómico (minimización de costes) comparando el coste el tratamiento con EPOrHu y la terapéutica transfusional. Los porcentajes de respuesta en esas diferentes opciones de tratamiento fueron respectivamente 37'1%, 37'8%, 37'1% y 18'2%. En cualquiera de los análisis realizados, el parámetro que mejor sirve para predecir una posible respuesta a tratamiento fue el nivel de EPO sérica previa al tratamiento, con un punto de corte de 550 mU/ml por encima del cual, los pacientes presentan un menor porcentaje de respuestas. Los tratamientos, tanto de EPOrHu en monoterapia como de ésta en combinación con G-CSF han sido bien tolerados, presentando las otras combinaciones un mayor número de efectos indeseables. Desde el punto de vista farmacoeconómico el tratamiento no resulta coste efectivo en ningún caso. Sólo por motivos éticos estaría justificada la realización de un ensayo de tratamiento con EPOrHu en monoterapia.

Autor: BARRAGAN GONZALEZ EVA.
Año: 1998.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.

Resumen: La leucemia promielocítica aguda (LpA) se caracteriza por la translocación de los cromosomas 15;17 tLas; 17 que a nivel molecular supone el reordenamiento de los genes PML y RARa. Este reordenamiento (PIL/RARa) constituye una marca molecular específica de la LPA por lo que puede utilizarse al diagnóstico para descartar errores de clasificación y en la detección de Enfermedad Minima Residual (EMR). En el nuevo protocolo de tratamiento de la LpA propuesto por el grupo español para el tratamiento de hemopatias malignas se ha incluido la detección sistemática del reordenamiento PMLIRARx en todos los pacientes; junto con un programa de control de calidad externo para valorar la equivalencia de los resultados proporcionados por los diferentes hospitales. En los resultados de la detección de PMLIRARx se ha observado que todos los ponentes con LpA presentan el reordenamiento, sin embargo éste desaparece después del tratamiento y en aquellos pacientes en los cuales persiste o vuelve a aparecer significa una recaida.

Autor: GONZALEZ FERNANDEZ ATAULFO F..
Año: 1998.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La leucemia mieloide crónica (LMC) es un síndrome mieloproliferativo crónico que se caracteriza por presentar, en más del 90% de los casos, un cromosoma anormal denominado cromosoma Philadelphia (Ph'), que se origina por la traslocación recíproca entre los cromosomas 9 y 22. El cromosoma Ph' esta considerado un marcador diagnóstico de la enfermedad y constituye la primera alteración cromosómica detectada en una enfemedad neoplásica en humanos. La introducción de las técnicas de biología molecular, en los últimos años, ha permitido profundizar en los mecanismos patogénicos de la enfermedad. De esta forma se ha podido determinar que el protooncogén ABL, localizado en el brazo largo del cromosoma 9(9q;34), se trasloca al cromosoma 22(22q;11) a la zona denominada breakpoint cluster region (BCR) o región de agrupamiento de los puntos de corte. De esta forma se origina un gen híbrido o de fusión BCR-ABL que va a codificar una proteína BCR-ABL que presenta una fuerte actividad tirosín-kinasa, y que está involucrada en la regulación del crecimiento, diferenciación, apoptosis y adhesión celular, jugando un papel primordial en la transformación celular maligna de las células progenitoras hematopoyéticas en la LMC. Se ha estudiado el reordenamiento BCR-ABL mediante la técnica de Southern blot, en 57 pacientes con el diagnóstico clínico del LMC, que han sido diagnosticados y/o tratados en el Servicio de Hematología y Hemoterapia del Hospital Clínico de Madrid, con el objetivo de demostrar su utilidad en los diferentes aspectos clínicos (diagnóstico, pronóstico y evolución) y en el conocimiento biológico de la enfermedad. De esta forma se ha realizado un análisis comparativo con los resultados del estudio citogenético convencional; se ha estudiado la posible evolución clonal a nivel molecular cuando se desarrolla la crisis blástica y cuando aparecen alteraciones cromosómicas complejas; y se ha investigado la posible influencia de la localización del punto de corte en la región M-BCR y de la deleción del extremo 3' de la región M-BCR en la presentación y evolución clínica de la enfermedad. Además se han incluído en el estudio 21 pacientes con el diagnóstico de leucemia aguda linfoblástica, así como 15 pacientes con otros síndromes mieloproliferativos crónicos diferentes a la LMC y 30 pacientes con alfa-talasemia como grupo control. La técnica de Southern blot en el análisis del reordenamiento del gen BCR-ABL constituye un método sensible y específico en el diagnóstico de la LMC. Sin embargo no permite demostrar dicho reordenamiento en al menos la mitad de los casos de las leucemias agudas linfoblásticas de novo con cromosoma Philadelphia. Representa una alternativa válida e incluso más sensible que el estudio citogenético, ya que puede detectar la traslocación 9;22 a nivel molecular en los casos en que el cromosoma Philadelphia no se objetiva en el estudio citogenético convencional. Posibilita analizar el ADN en células sin capacidad de división como los neutrófilos de sangre periférica, incluso con cifras bajas de leucocitos, lo que facilita el seguimiento de la clona leucémica durante y después del tratamiento. Los puntos de corte en el cromosoma 22 y 9 son diferentes en cada paciente, originando fragmentos de restricción de ADN anómalos distintos. Estos fragmentos constituyen huelles genéticas de cada enfermo, de forma que todas las células tumorales obtenidas de sangre periférica y médula ósea presentan los mismos puntos de corte en cada paciente, lo que reafirma que la LMC se origina por una mutación o mutaciones adquiridas en una sola célula progenitora hemopoyética. Cuando se desarrolla la fase aguda de la enfermedad, en la mayoría de los pacientes, no se detectan cambios en los fragmentos de restricción de ADN y por lo tanto en el gen BCR-ABL, por lo que probablemente, la activación de otros genes localizados en otros cromosomas son los responsables del cambio del comportamiento de las células leucémicas en esta fase de la enfermedad. La localización del punto de corte en la región M-BCR no parece que influya de forma significativa en la presentación y evolución clínica de la enfermedad. La deleción del extremo 3' de la región M-BCR se produce aproximadamente en un tercio de los pacientes y no determina ninguna característica especial a la enfermedad, apoyando la hipótesis del nulo papel que representa el gen de fusión ABL-BCR del cromosoma 9 en la leucemogénesis de la LMC.

Autor: STEEGMANN OLMEDILLAS JUAN LUIS.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA .

Resumen: Objetivos del estudio. Análisis de la eficacia del IFN alfa en la fase crónica de la LMC Ph1 positiva. Diseño del estudio.- Estudio prospectivo de única rama, sin grupo control. Pacientes.- Se incluyeron 132 pacientes, 72 hombres y 60 mujeres. Mediana de edad: 43 años (12,2 - 79,4). Estadios (Sokal): 1(BR): 52 %, 2(RI): 26%, 3 (AR): 20%. Métodos estadísticos. Incluyeron regresión logística y modelos de regresión de Cos. Esquema de tratamiento: La hidroxiurea se utilizaba para descender la cifra de leucocitos al intervalo de 15-20 x 10 elevado a 9/L, momento en el que se suspendía y se comenzaba al IFN alfa, como único tratamiento. Esto ocurrió un 67% de los pacientes. Un 30% de los pacientes comenzaron directamente con IFN alfa. Posología: 3 MU/d/s.c. la 1a semana, 6 MU/d/s.c., la 2a y 9 MU/d/s.c. la 3a y siguientes. Dosis recibida: 5,8 Mu/d. Tiempo de tratamiento: 431 días (rango: 18-2597). Respuesta hematológica (RH) y citogenética (RG): un 72% obtuvo RH en el primer semestre del tratamiento. Un 47% de pacientes obtuvo RG: fueron mayores el 27% (19% completas). La mediana de obtención de RG fue de 7, 9 y 18 meses para la Rgm, RGP y RGC, respectivamente. El análisis multivariante demostró que un mayor porcentaje de basófilos se asociaba a peor respuesta hematológica (p=0,001) (OR: 1,23) y a una peor respuesta genética en el primer año (p=0,018) (OR:1,4). Toxicidad. Un 13% de los pacientes tuvieron que abandonar el estudio, por efectos secundarios (más frecuentes: s. pseudogripal y parkinsonismo). La toxicidad crónica más frecuente fue la hematológica. Supervivencia. En el período de observación de 8 años y tres meses han fallecido un 35,6% y continuaban vivos 85 pacientes (64,4%), conmediana de seguimiento de 42 meses (3,7 - 98). Las probabilidades de supervivencia (SG) y supervivencia libre de transformación (SLT) a los seis años han sido de 0,61+-0,07 y 0,54+-0,07. Las variables asociadas con mejor SG han sido: estadio precoz de Sokal (p=0,001) o Kantarjian (p=0,07), obtención de respuesta hematológica en el primer semestre (p=0,05; HR=0,33) y obtención de respuesta genética en el primer año (p=0,05; HR=0,21). En cuanto a SLT, las variables asociadas con mejor SG han sido: estadio precoz de Sokal (p=0,015) o Kantarjian (p=0,009), obtención de respuesta genética en el primer año (p=0,005; HR=0,14) y obtención de respuesta genética mayor en el primer año (p=0,015; HR=0,06). Conclusión. El IFN alfa logra un 48% de respuestas genéticas (27% mayores, 19% completas). En el análisis multivariado sólo el porcentaje de basófilos al diagnóstico tenía un efecto - desfavorable sobre la obtención de la respuesta genética. Los estadíos menos avanzados tienen mayor probabilidades de SG y SLT. El obtener RHC en el primer semestre de tratamiento se asocia de forma independiente y favorable con la SG. El obtener alguna respuesta genética en el primer año con IFN se asocia de forma independiente y favorable con la SG y la SLT. La obtención de una RG mayor en disminuye el riesgo de transformación 16 veces. Nuestros resultados apoyan el pensar que el efecto del IFN sobre la supervivencia es directo e independiente de las variables pronósticas clásicas.

Autor: CASTEJON DIAZ RAQUEL.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: La leucemia linfoide crónica de células B es la forma de leucemia más común en el mundo occidental. Es una enfermedad hematológica oncológica que se caracteriza por la acumulación clonal y lentamente progresiva de linfocitos B aparentemente maduros, detenidos en fase G0 del ciclo celular que expresan la molécula CD5 en la membrana junto a bajos niveles de Ig de superficie y altos niveles de Bcl-2. La mayoría de las cbelulas circulantes no se dividen y se ha sugerido que la supervivencia tan prolongada se debe basicamente al fracaso del mecanismo de muerte celular programada o apoptosis con la consiguiente acumulación de linfocitos B con morfología parecida a los normales, pero con función anormal en sangre periférica, médula ósea, ganglios y bazo. A diferencia de lo que ocurre in vivo, cuando se incuban las células de LLC-B durante periodos cortos se produce muerte celular por apoptosis, a pesar de la presencia de suero bovino fetal o de suero autólogo en el medio de cultivo. Este hecho sugiere que la prolongada supervivencia in vivo de los linfocitos de LLC-B puede atribuirse a factores humorales o celulares capaces de proteger a estas células de la muerte por apoptosis. Los resultados obtenidos indican que tanto IL-2 como IL-4, pero no IL-6, inhiben la apoptosis in vitro en un alto porcentaje de células de LLC-B. La IL-10 aumenta el número de células apoptóticas in vitro de pacientes en estadios tempranos de la enfermedad. Estos datos apoyan la hipótesis de que IL-2 e IL-4 pueden ser factores de supervivencia celular in vivo y que IL-10 podría ser un candidato para la inmunoterpia de pacientes en fases tempranas de la LLC-B. Los resultados obtenidos de inducción de apoptosis de linfocitos B de LLC-B in vitro por agentes quimoterápicos.

Autor: PEREZ RUS GLORIA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se examinan 133 pacientes en los que se disponía al diagnóstico de estudio citogenético medular, diagnósticados de síndrome mielodisplásico (SMD) en una única institución en un periodo de 10 años, analizando mediante estudio univariante y multivariante los factores pronósticos que muestran influencia sobre la supervivencia y evolución a leucemia aguda. Se analizan 43 variables, clínicas, analíticas, citomorfológicas, citogenética medular y clasificación FAB. El estudio univariante mostró como significativas para la supervivencia las siguientes variables: clasificación FAB, estadio de Bourmenouth, tiempo de evolución previo al diagnóstico, edad, presencia de síndrome anémico o síndrome constitucional, cifra de hemoglobina, leucocitos, neutrófilos, plaquetas, presencia de células inmaduras y blastos en sangre periférica (SP), signos de disgranulopoyesis en SP, volumen corpuscular medio eritrocitario, porcentaje de blastos en médula ósea (MO), presencia de dishemopoyesis en más de una línea celular, porcentaje de sideroblastos en anillo, presencia de alteraciones citogenéticas, ausencia de metafases normales en el cariotipo medular, cariotipos complejos, desarrollo de leucemia aguda, desarrollo durante los primeros 6 meses postdiagnóstico de clínica hemorrágica, infeccionsa, necesidades transfusionales, presencia durante este periodo de tiempo de agravación de las citopenias, evolución citogenética o a otros subtipos de la clasificación FAB. Las variables que resultaron significativas en el análisis univariante con respecto al desarrollo de leucemia aguda fueron: clasificación FAB, estadio de Bournemouth, tiempo de evolución previo al diagnóstico, edad menor de 40 años, presencia de síndrome anémico, leucopnia menor de 2500/mm3, monocitopenia menor de 200/mm3, trombopenia severa, signos de disgranulopoyesis o distrombopoyesis en SP, presencia de blastos en SP, porcentaje de blastos medulares, presencia de cariotipos complejos +8 ó -7, agravación de las citopenias, aumento del porcentaje de blastos o necesidades transfusionales en los primeros 6 meses postdiagnóstico. El análisis multivariante mostró influencia pronóstica independiente sobre la supervivencia para las siguientes variables y en este orden: agravación de las citopenias, porcentaje de blastos medulares, cifra de plaquetas, presencia de células granulocíticas inmaduras en SP, y necesidades transfusionales en los primeros 6 meses postdiagnóstico. Al considerar únicamente las variables presentes al diagnóstico el estadio de Bournemouth, presencia de células granulocíticas inmaduras en S.P., porcentaje de blastos en MO, edad y cifra de plaquetas fueron seleccionados; al excluir el estadio de Bournemouth (combinación de varias variables) lo fueron el porcentaje de blastos en MO, cifra de plaquetas presencia de células inmaduras en SP, edad y cifra de hemoglobina. El análisis multivariante de la influencia sobre la evolución a leucemia aguda de todas las variables mostró como factores pronósticos independientes la presencia de alteraciones citogenéticas de alto riesgo (cariotipos complejos, -7, +8) y evolución en la clasificación FAB en los primeros 6 meses postdiagnóstico. Eliminadas las variables no conocidas al diagnóstico el porcentaje de blastos en MO, presencia de alteraciones citogenéticas de alto riesgo y de síndrome anémico demostraron tener valor predictivo..

Autor: PINILLA FERNANDEZ M. INMACULADA.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La hepatopatía es una complicación frecuente en los pacientes supervivientes a un tmo, y frecuentemente de difícil filiación por su complejidad. En este trabajo se estudiaron retrospectivamente 106 pacientes que sobrevivieron más de 2 años tras un trasplante alogénico de médula ósea. Se revisaron las historias clínicas, transfusionales, determinaciones analíticas y biopsias hepáticas. La prevalencia de la hepatopatía crónica ha sido del 57,5%. La etiología ha sido completa, identificándose en el 47,3% de los casos más de un factor. Las causas más frecuentes fueron: la sobrecarga férrica, la hepatitis crónica C y la enfermedad injerto entra huésped crónica. Un 6,5% de los pacientes con hepatopatía-crónica presentaron hepatitis B, la mayoría debido a reactivaciones de infecciones latentes. Otras entidades, como la esteatomepatitis no alcohólica y la hepatitis antonmume deben ser incluidas en el diagnóstico diferencial. Ninguno de los pacientes evolucionó a cirrosis..

Autor: CASADO MONTERO LUIS FELIPE.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: El traspalnte de médula ósea (TMO y el interferón alfa son actualmente los dos tratamientos más eficaces para la Leucemia Mieloide Crónica (LMC). El TMO consigue una superviencia a largo plazo en torno al 50%, mientras el interferón lo realiza en un número mbas reducido de pacientes que consiguen respuesta citogenética. Los resultados del TMO han experimentado en los últimos años una importante mejoría, gracias a la disminución de la mortalidad relacionada con el propio procedimiento y mantenerse la relacionadas con la recaída de la enfermedad. Dada la posibilidad de realizar un tratamiento muy eficaz en el caso de recaídas tras TMO, es necesario determinar qué grupo de pacientes tiene altas posibilidades de sufrirlas para mantener así un control más estrecho. Realizamos un estudio en 71 pacientes sometidos a TMO y en 20 tratados con IFNalfa, intentando descubrir enfermedad mínina residual (EMR) con el fin de descubrir el grupo de pacientes con alto riesgo de recaída. De nuestro estudio se desprende que la detección de la EMR mediante técnicas que detectan los correlatos moleculares del Ph1 es un sistema eficaz. La RT-PCR fue una técnica fiable y repetitiva que permitió detectar el trascrito BCR-ABL en situaciones de desaparición del Ph1 tanto después del TMO como de la respuesta citogenética tras interferón alfa, con lo que permite determinar un grupo de pacientes con alto riesgo de recaída. En nuestro estudio la detección del BCR-ABL mediante RT-PCR no tuvo valor predictivo al no detectar recaídas precoces, siendo la mayoría de las detecciones esporádicas y no presistentes. La determinación del BCR-ABL en sangre periférica o médula ósea obtuvo resultados equiparables aunque ligeramente superiores en el caso de la médula ósea. No se encontró ninguna variable del TMO que se relacione de forma significativa con la positividad para la RT-PCR del BCR-ABL, aunque encontramos menor incidencia en los pacientes con EICH de presentación crónica. Otra técnica molecular, como es el quimerismo realizado mediante PCR de VNTR, permite demostrar la existencia de un buen injerto procedente de la médula ósea del donante pero en nuestro caso no detectó médula enferma hasta el momento de la recaída confirmada citogenéticamente. No obstante ningún paciente con quimerismo completo ha recaído. El Interferón alfa es capaz de inducir respuesta citogenéticas e incluso moleculares en pacientes en fase crónica, aunque puedan ser estas últimas esporádicas. La RT-PCR de BCR-ABL es prácticamente positiva en todos los pacientes tratados con Interferón sin respuesta citogenética completa, por lo que al no ser una técnica cuantitativa únicamente sirve para valorar el tipo de trascrito. Como conclusión final al estudio, vemos como los pacientes traspalntados RT-PCR negativos y quimerismo completo del donante tienen muy pocas posibilidades de recaer al largo plazo..

Autor: ACOSTA ALMEIDA TERESA.
Año: 1998.
Universidad: LA LAGUNA.
Centro de lectura: MEDICINA .

Resumen: La búsqueda de alteraciones en los genes p16 y p53 sólo mostró mutación en un paciente con LMA del subtipo M1 y de novo, que mostró la transversión de timina por guanina en el codón 158. También se observó alteración a nivel de los SSCP en la crisis blástica no medular de una LMC y debido a que no observamos ningún cambio en la secuencia nucleotídica del gen, las hemos considerado como un falso positivo. En ambos genes se observó la presencia de varios polimorfismos. Para el gen p16 se encontró asociación estadisticamente significativa (p:0.037) cuando se compararon los genotipos para el polimorfismo situado en la región 3'UTR del gen con la población sana. En el caso del gen p53 también se observó asociación entre las leucemias agudas infantiles y el polimorfismo del codón 213. Por otro lado, en el caso de las LMA, el haplotipo constituído por los alelos arginina o prolina del codón 72 y el polimorfismo del intrón 3 de p53 mostró una alta significación estadística cuando se comparó con la población contro, y esta asociación se describe por primera vez en una enfermedad hematológica. Por último, se detectó el tránscrito bcr-abl en el 91% de los pacientes con LMC mientras que el tránscrito recíproco abl-bcr se detectó en el 65.5% de los pacientes con rotura en la región mayor. El 26.6% de los pacientes con LLA fueron bcr-abl positivos.

Autor: SERRANO LOPEZ JOSEFINA.
Año: 1998.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La principal causa de fallo del trasplante en LMC es la recidiva de la enfermedad, cuya respuesta a tratamiento inmunomodulador parece depender del tamaño de la masa tumoral. Esto implicaría que el establecimiento de un grupo de pacientes con alto riesgo de recaída y la detección precoz de la misma permitiría a dichos pacientes el poder beneficiarse de las ventajas de un tratamiento aplicado de forma precoz. Nos propusimos la monitorización conjunta de Enfermedad Mínima Residual post-trasplante mediante el estudio semicuantitativo del quimerismo hematopoyético en sangre total y en subpoblaciones altamente purificadas (CD15, CD19, CD3 y CD56), así como de marcadores tumorales p210/p190 BCR-ABL empleando RT-PCR en 60 pacientes (49 trasplantados con un injerto no manipulados y 11 con depleción selectiva de linfocitos T), con un seguimiento minimo de 12 meses. La progresión de la enfermedad que conduce a la recaída observada en 14 pacientes, objetivamos sigue una dinámica común iniciada con la detección del híbrido tumoral p210 BCR-ABL, seguida de la reaparición de hematopoyesis procedente del receptor en la celularidad mioloide CD15+, independientemente del perfil presentado en las líneas linfoides y acompañándose de positividad para el transcrito p190 BCR-ABL en las semanas o meses precedentes a la detección por citogenética del Cromosoma Philadelphia, que conduce finalmente a la recaída hematológica. La respuesta al tratamiento de la recaída tras infusión de linfocitos del donante siguió una cinética similar de orden inverso, mientras que el tratamiento con alfa-interferón no parece influir en la detección de los parámetros moleculares.

Autor: VARGAS PABON MANUEL.
Año: 1998.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Se ha realizado un estudio de tipo casos y controles para valorar algunos parámetros de reciente aparición, asociados con Trombofilia: Hiperhomocisteinemia moderada, concentraciones elevadas de Factor VIII y mutación G20210A en el gen del Factor II. No se encontró asociación entre los niveles plasmáticos elevados de homocisteína y la presencia de trombosis, la homocisteinemia se encontró relacionada con el genotipo para el polimorfismo C677T en el gen de la metilenetetrahidrofolato reductasa, con la edad, con los niveles de ácido fólico, creatinina sérica, gammaglutamil transpeptidasa y transaminasa glutámico-oxalacética. Las concentraciones de Factor VIII coagulante fueron significativamente más altas en los pacientes que en los controles pero no se pudo descartar que este hallazgo fuese secundario al fenómeno trombótico como lo demuestra el hecho de encontrar asociación entre el Factor VIII y el nivel de fibrinógeno, una proteína que actúa como reactante de fase aguda. La mutación G20210A en el gen del Factor II se observó más frecuentemente tanto entre los pacientes con trombosis venosa como arterial, y el riesgo relativo de padecer trombosis fue de 3,71 para los portadores. Los pacientes con Trombofilia Hereditaria presentaron con más frecuencia trombosis de repetición.#

Autor: ESPAÑOL MORALES JOSÉ IGNACIO.
Año: 1998.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La trombopoyetina (TPO) es un factor de crecimiento hematopoyético considerado como el principal regulador de la megacario-trombocitopoyesis. Mediante técnicas de ELISA se cuantificó la TPO sérica en una muestra de población sana y en pacientes con trombocitosis o trombocitopenias. La concentración de TPO en el grupo control fue de 121+ - 58 pg/mL. Los niveles de TPO fueron ligeramente altos en las trombocitosis primarias y secundarias. Los pacientes con trombocitopenias periféricas mostraron niveles de TPO normales o legeramente elevados, destacando un mecanismo de trombocitopoyesis ineficaz como un causa de trombocitopenia en pacientes con púrpura trombocitopénica autoinmune o con infección por el virus de la inmunodeficiencia humana. Además, la presencia de una concentración de TPO baja en los pacientes con cirrosis hepática sugiere un déficit de producción de TPO como una causa adicional de su trombocitopenia. Los pacientes con trombocitopenias centrales debidas a aplasia medula o a trasplante de progenitores hematopoyéticos mostraron valores de TPO muy elevados, hecho que no sucedió en los pacientes con síndromes mielodisplásicos. La TPO parece un arma diagnóstica útil para descubrir un componente central en el origen de una tromocitopenia.

Autor: MARTÍNEZ MUÑOZ M. CARMEN.
Año: 1998.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: La restauración de la hematopoyesis tras la administración de altas dosis de quimioterapia y radioterapia, mediante la infusión de progenitores hematopoyéticos se conoce como trasplante de progenitores hematopoyéticos (TPH) y constituye uno de los procedimientos más eficaces de la lucha contra el cáncer. Uno de los avances más importantes en este campo en los últimos años ha sido el empleo de los progenitores hematopoyéticos recolectados de la sangre periférica (PHSP) en lugar de la médula ósea, ya que se obtienen de una forma sencilla y la recuperación hematológica después del trasplante es muy rápida. La evolución de este procedimiento ha sido tal que en la actualida, más del 90% de los trasplantes autogénicos y el 50% de los trasplantes alogénicos en España se realizan mediante la infusión de PHSP. El uso clínico del trasplante alogénico de PHSP (aloTSP) plantea sin embargo algunas cuestiones aún por resolver. En primer lugar, para obteneer una cantidad suficiente de PHSP es preciso administrar al donante un factor de crecimiento hematopoyético capaz de movilizar los progenitores desde la médula ósea a la sangre periférica. Los posibles efectos secundarios de la administración del factor de crecimiento y de la donación de PHSP deben ser perfectamente conocidos, antes de que se generalice el aloTSP. En segundo lugar, aunque actualmente existe mucha información acerca del G-CSF y la movilización de PHSP, poco se sabe sobre el efecto de esta citocina en la médula ósea. En tercer lugar, se ha sugerido que la reconstitución del sistema inmunitario tras el aloTSP puede ser más rápida que tras el aloTMO debido a que el inóculo de sangre periférica contiene una cantidad de linfocitos T muy superior a la médula ósea; sin embargo, por el mismo motivo, la incidencia de la EICH crónica podría ser también superior. Si bien la eliminación de los linfocitos T es un método muy eficaz en la prevención de la EICH,no se conoce su influencia sobre la reconstitución inmune tras el aloTSP. Estos aspectos han sido el objeto fundamental de estudio en esta Tesis Doctoral. Los resultados de esta investigación han sido publicadas en Annals of Hematology 1996; 72: 269-272, Bone Marrow Transplantation (en prensa) y Experimental Hematology (en prensa).