INMUNOPATOLOGIA, 2

Autor: ECHECHIPÍA MADOZ SUSANA.
Año: 2002.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: INTRODUCCIÓN La pauta convencional de administración de la inmunoterapia subcutánea (IT) con extractos alergénicos es lenta en su fase inicial de incremento de dosis hasta alcanzar la dosis de mantenimiento y, aunque resulta segura, supone un gran consumo de tiempo. OBJETIVOS Comparar la eficacia y la seguridad de una pauta de IT subcutánea con extracto Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) agrupada en 6 semanas en la fase de incremento de dosis con las de la pauta convencional de 12 semanas de duración. MATERIAL Y MÉTODOS 239 pacientes diagnosticados consecutivamente a lo largo de un año de rinitis y/o asma bronquial alérgica por Dp con indicación de IT consintieron en particular en el estudio. A 120 se les asignó de forma aleatoria la pauta agrupada (x edad 19,34 años y 62,5% hombres) y a 119 la convencional (x edad 18,47 años y 59% hombres). La fase de inicio del tratamiento se administró enmascarando la pauta, agrupada o convencional, de forma doble ciego controlada con placebo, haciendo un registro informático de las dosis y una graduación de las reacción adversas. Se evaluaron: la eficacia clínica (puntuación de gravedad clínica, registro de cartilla de síntomas, consumo de medicación y PEF, escala visula analógica y cuestionarios de calidad de vida) y la evolución de la reactividad cutánea a Dp (ensayo de líneas paralelas) antes del inicio de la IT, al alcanzar la dosis máxima en las pautas agrupada y convencional, y al año de tratamiento.Se determinaron IgE, IgG total e IgG4 específicas séricas frente a DP antes de iniciar el tratamiento, cada dos semanas hasta la semana 16 y al año de IT. RESULTADOS No hubo diferencias en las características demográficas y clínicas de los pacientes de ambos grupos. La pauta agrupada redujo en un 46% el tiempo necesario para alcanzar la dosis de mantenimiento, produciendo reacciones adversas sitémicas, todas leves, en sólo un 0,15% inyecciones de tratamiento activo, sin diferencias con respecto a la pauta convencional. Aunque la eficacia clínica de ambas pautas de IT fue similar al año de tratamiento, la pauta agrupada indujo la mejoría clínica en la gravedad de la enfermedad y en el registro de síntomas, medicación y PEF desde que se alcanzó la dosis de mantenimiento de la IT, 6 semanas antes que con la pauta convencional. Paralelamente, la pauta agrupada también adelantó en 6 semanas la disminución de la reactividad cutánea a Dp y los cambios en los parámetros in vitro. CONCLUSIÓN La pauta agrupada en la fase de incremento de dosis de la IT con Dp es una alternativa segura a la pauta convencional, con un menor consumo de tiempo (mayor comodidad) y, con respecto a la pauta convencional, adelanta la aparición de la mejoría clínica y de los cambios inmunológicos que la IT induce.

Autor: MARTINEZ ESCRIBANO JORGE ANTONIO.
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSITAT DE VALENCIA.

Resumen: En general, el curso clínico de un tumor está influenciado por la interacción entre las células tumorales y el sistema inmunitario. El melanoma se caracteriza por la capacidad de desencadenar una respuesta inmunitaria humoral y celular tanto innata como específica de antígeno. En el control de esta respuesta, pueden ser de suma importancia las variaciones en el repertorio de linfociots,la expresión de moléculas coestimuladoras y la acción de distintas citocinas. En esta tesis se ha pretendido analizar la relevancia que determinadas características histológicas del melanoma cutáneo primario, así como clínicas e inmunológicas de los enfermos portadores del tumor, pueden tener sobre la evolución y pronóstico de dicha enfermedad. Para ello se han estudiado distintas subpoblaciones de células mononucleares de sangre periférica, incluyendo la expresión o no de moléculas implicadas en la transmisión de segundas señales. También se han analizado los niveles séricos de citoquinas representativas de los fenotipos Th1 y Th2, y el polimorfismo en regiones reguladoras de su expresión. Según nuestros resultados, en pacientes con melanoma, parecen asociarse con un peor pronóstico y/o menor supervivencia: - La ausencia de infiltrado inflamatorio peritumoral y el predominio de celularidad atípica en el melanoma. - El descenso en el cociente CD4/CD8 y en el número de células con fenotipo CD4+CD28+, CD19+CD80+, CD14-CD40+ con alta expresión de HLA de clase I y CD3-CD16/56+CD8+, así como el aumento de las subpoblaciones con fenotipo CD8+CD28- y CD3+CD16/56+CD8-, en sangre periférica. - Los niveles séricos elevados de IL-10 al comienzo de la enfermedad o de IL-6 de modo más tardio. El genotipo ACC/ATA en el promotor de la IL-10, considerando las posiciones (-1082), (-819), (-592) de dicho promotor.

Autor: RODRIGUEZ PEREZ M. ROSA.
Año: 2001.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: SERVICIO DE INMUNOLOGIA. H U VIRGEN DEL ROCIO.

Resumen: La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria cronica de naturaleza autoinmune que presenta un curso clinico muy variable. La relacion de las moleculas de clase II del Complejo Mayor de Histocompatibilidad humano (sistema HLA) con la enfermedad esta bien establecida. Sin embargo, se han propuesto dos modelos diferentes de asociacion AR y HLA,ambos atribuyen un papel fundamental a las moleculas de clase II, pero difieren el locus concreto que consideran como primariamente asociado. Se sabe que deben existir otros factores geneticos implicados en la enfermedad, pero estos factores no se conocen bien en la actualidad. En el presente trabajo, hemos utilizado un estudio de casos y controles para comparar los dos modelos actualmente propuestos de asociacion HLA y AR. Por otro lado se ha estudiado la posible implicacion de los genes CTLA-4,VDR y NRAMP1 ya que la funcion de estas moleculas determina que puedan ser considerados genes candidatos para la susceptibilidad a la enfermedad. Ademas, en un estudio longitudinal prospectivo a diez años hemos estudiado la posible influencia de los factores geneticos antes mencionados en la afectacion radiologica de las articulaciones al comienzo de la enfermedad y despues de diez años de evolucion.

Autor: NOGUERA ENNASER FRANCISCA ANA.
Año: 2001.
Universidad: ISLAS BALEARES.
Centro de realización: UIB.

Autor: CRUZ MOSARRIETA JULIA CECILIA.
Año: 2001.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE VALENCIA.

Resumen: Los sarcomas de partes blandas constituyen un reto diagnóstico para los patólogos quirúrgicos por su diversidad en tipos y subtipos con similitud morfológica que se superponen haciendo muy dificil el diagnóstico diferencial entre ellos, por lo cual es necesario el uso de técnicas diagnósticas auxiliares como la inmunohistoquímica para poder tipificar correctamente estas neoplasias. En nuestro estudio hicimos una correlación entre el diagnóstico realizado por nosotros en 200 casos de Sarcomas de partes blandas en el Departamento de Patología del Instituto Nacional de Oncológia de la Habana, con técnicas de H&E (se excluyeron 23 por ausencia de datos en las historias clínicas y mala fijación de algunas muestras) y los resultados obtenidos al realizarle un panel de inmunohistoquímica en el Departamento de patología de la Universidad de Valencia. Nuestro objetivo fue determinar la coincidencia diagnóstica entre el diagnóstico morfológico y analizar las discrepancias y divergencias entre ambos métodos. Además hicimos un análisis univariado para identificar posibles factores pronóstico que influyen en la supervivencia de este grupo de pacientes. La clasificación morfológica de los tumores de partes blandas de nuestra serie muestra una predominancia de los sarcomas pleomórficos, seguidos por los sarcomas fusocelulares y a continuación y en orden decreciente los sarcomas de células redondas, los sarcomas mixoides y los sarcomas epitelioides. La inmunohistoquímica resultó ser una técnica útil para confirmar el diagnóstico en más de la mitad de los pacientes, n=116 (66%), observando el porcentaje más alto de modificación del diagnóstico en los fusocelulares, seguido por los epitelioides y pleomórficos. En el 29% de los casos sirvió para modificar el diagnóstico y resultó esencial para definir el diagnóstico en aquellos casos en los que no se pudo precisar su tipo histológico (9%) por técnicas de H&E. El porcentaje de coincidencia diagnóstica mas alto se obtuvo para los sarcomas mixoides, aunque en todos los casos existió una asociación estadísticamente significativa entre ambas. El análisis univariante de los factores pronósticos para la supervivencia global a los dos años puso de manifiesto el tipo histológico como factor pronóstico constante para los sarcomas fusocelulares, mixoides, de células redondas y epitelioides. La supervivencia en los sarcomas pleomórficos y sarcomas de células redondas de adultos no esta asociada a ninguno de los factores pronósticos que analizamos. Demostramos el valor de la aplicación de técnicas inmunohistoquímicas para tipificar tumores malignos de partes blandas con el fin de aplicar estrategias diagnósticas específicas para cada tipo tumoral y definir los factores pronósticos de cada tumor. Finalmente todos los hospitales de referencia que estudian y tratan a los pacientes afectos de SPB (incluidos países con problemas de desarrollo tecnológico, como la nación donde se ha desarrollado parcialmente el presente trabajo), han de contar con la infraestructura impresindible histológica e inmunohistoquímica para efectuar el correcto diagnóstico de dichos casos.

Autor: BARADO HUALDE JESUS.
Año: 2001.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA.

Resumen: La Esclerosis Multiple (EM), es una enfermedad inflamatria crónica del SNC que se caracteriza por la presencia de placas de desmielinización. No se conoce la etiología de la enfermedad pero su patología se define como una enfermedad autoinmune. El objetivo de este estudio es realizar un estudio de la inmunidad celular en un grupo de enfermeos de Esclerosis multiple. Este estudio se ha realizado a tres niveles: 1. Análisis de marcadores de superficie y de la producción de citicinas en un grupo de pacientes con EM y en un grupo control sano. 2. Estudio de la producción de citocinas y su posible modulación hacia un patrón TH1 en líneas celulares obtenidas a partir de linfocitos de sangre periférica de enfermos de EM y controles sanos. 3. Análisis longitudinal de la producción de citocinas en enfermos de EM tratados con IFN-beta. No hemos encontrado un marcador fenotípico que caracterice a los pacientes con EM o sirva para diferenciar las distintas formas de la enfermedad. La producción de IL-6 se relaciona con una forma de EM de peor evolución. La producción de citocinas TH1 se correlaciona con un peor estado clínico de los pacientes y la utilización de la Prostanglandina 2 "in vitro" modula es espectro de citocinas hacia una respuesta TH2. En un grupo de pacientes tratados con IFN-beta la mayoría de los brotes clínicos de la enfermedad se producen o vienen precedidos con una relación I1-20-10 alta.

Autor: LÁZARO DEL NOGAL MONTSERRAT.
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD MEDICINA - UNIVERSIDAD COMPLUTENSE.

Resumen: OBJETIVOS A,- Valorar los principales componentes del sistema inmunitario en un grupo de jubilados. B,- Correlacionar sus niveles en función del género. C,- Valorar tras cinco años de seguimiento las modificaciones acaecidas. D,- Valorar la influencia sobre los parámetros analizados de determinados factores (hábitos tóxicos, enfermedades). MATERIAL Y MÉTODOS Periodo de estudio: 1990-1999; Muestra: 249; 102 hombres (H): 147 mujeres (M). Edad media: 67,03 (4,2) años. Protocolo (base de datos Excel). Subpoblaciones de linfocitos medidas mediante Citómetro: EPICS-Profile II. Análisis estadísticos: SPSS versión 10.0. RESULTADOS ESTUDIO BASAL Parámetros inmunológicos: Leucocitos: 6349,0 (1556,1); Linfocitos B(%): 10,5(4,6); IgG: 1132,3 (285); Ig M: 126,9 (80,1); Ig A: 263,0 (119,1); CD 4%:45,2 (9,6); CD 8%: 27,2 (10,7) Cociente CD4/CD8: 2,0 (1,2); Natural Killer (NK%): 11,0 (8,2) Score: 11,4 (7,5); C3:120,0 (27,1); C4:26,9 (8,7). Influencia del género Linfocitos B(%): H9,4 (5,0); M: 11,3(4,1) p

Autor: PANTOJA ROSSO SERVANDO.
Año: 2001.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CÁDIZ.

Resumen: La agresión quirurgica es un modelo apropiado para la investigación de la respuesta fisiológica al estrés en el niño. El sistema hormonal e inmunológico principales responsables de la respuesta común organica a la agresión, experimenta un proceso de maduración que se completa a lo largo de la edad pediátrica. Se investiga en este trabajo las variaciones de la respuesta hormonal (ACTH, cortisol, GH; IGH; IGF1, Prolactina, TSH, T3L, T4L) y de mediadores endógenos inflamatorios (IL1; IL2, IL6 y TNF) al estrés quirúrgico en el niño de distintas edades, con la hipótesis de que sus distintos momentos madurativos podrían condicionar diferencias cualitativas y cuantitativas en sus respuestas a la agresión y asi como factores como la infección y analgesia influyen o modifican la respuesta. La respuesta hormonal en el niño se caracteriza por una rápida elevación de la ACTH, cortisol y GH; la respuesta de prolactina es más precoz pero quizas influenciada por el estrés psicológico y el dolor. La agresión quirúrgica no supone un estímulo para la activación del eje hipofisiario tiroideo. Tampoco va a suponer un estimulo para la liberación de IGF1; por tanto no existen diferencias en la respuesta hormonal entre el adulto y el niño mayor de un mes de vida. La respuesta de las citoquinas se caracteriza por una elevación de la IL6 y TNF tras la intervención, la magnitud de la respuesta de la IL6 le confiere un papel preponderante en la respuesta inmunológica a la cirugía; mientras que la elevación del TNF puede estar mas en relación con la contaminación bacteriana que conlleva muchos de los procesos y procedimientos de la cirugía abdominal. La IL1 y 2 no deben jugar un papel importante en la respuesta, al no producirse modificaciones. Los resultados obtenidos no apoyan la hipótesis de un proceso madurativo de la respuesta orgánica la etres. La relación entre el sistema endocrino e inmunológico solo se ha evidenciado en la correlación entre Somatomedida e IL2. La utilización de analgésico como tratamiento del dolor postoperatorio no parece influir en la calidad de la respuesta. Para un mismo estrés no existen diferencias en la respuesta de hormonas y citoquinas.

Autor: GÓMEZ MORENO GERARDO.
Año: 2001.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: ODONTOLOGÍA .
Centro de realización: FACULTAD DE ODONTOLOGÍA.

Resumen: INTRODUCCIÓN La melatonina (MLT) es una hormona, pero no en el sentido clásico, ya que a parte de ser sintetizada y secretada en la glándula pineal, se puede producir en otros lugares del organismo, y además no actúa en un órgano o tejido específico, sino que puede llegar a cualquier célula del organismo, ya que es muy lipofilica y atraviesa todas las membranas celulares, y se ha demostrado que a veces para ejercer su acción no necesita la interacción con un receptor, además es soluble en agua. La MLT se encuentra en saliva y es posible cuantificar sus niveles. Entre las acciones más importantes de la MLT destacan que es capaz de sincronizar algunos ritmos biológicos endocrinos y no endocrinos, potencia la actividad del sistema inmune a través de los linfocitos T CD4 principalmente y de la inteleukina-2 (IL-2), regula la actividad neuronal y actua como un protector celular debido a su capacidad antioxidante y depurador de radicales libres. La patología sobre la cual se ha realizado este trabajo de investigación es la diabetes mellitas (DM). En la cavidad oral de los pacientes con DM se producen algunas lesiones, como la enfermedad periodontal, en parte favorecidas por el aumento de radicales libres. OBJETIVOS Determinar los niveles plasmáticos y salivales de MLT (y comprobar el grado de fiabilidad en la cavidad oral de los niveles de MLT en saliva respecto las cifras plasmáticas), subpoblaciones linfocitarias e IL-2, y correlacionar los niveles de estos parámetros con el estado oral de los pacientes, así como valorar su posible aplicación clínica. MATERIAL Y MÉTODOS Se estudió una población de 50 pacientes con DM-1 y DM-2, y 20 controles, a los que se le realizó una historia médica y buco-dental según los criterios de la encuesta de la OMS simplificada. Se estudió el índice CAO, índice gingival, índice de placa, pérdida de inserción, profundidad de bolsa periodontal, volumen salival estimulado e índice CPI. Para la determinación de la concentración plasmática de MLT en plasma se realizó un Radioinmunoanálisis (RIA) de última generación. Para cuantificar los niveles de MLT en saliva se utilizó un RIA específico con diferencias sustanciales al usado para la MLT en plasma. Para estudiar las subpoblaciones linfocitarias usamos la citometría de flujo. Para determinar los niveles de IL-2 se realizó un enzimo inmuno ensayo tipo sándwich (ELISA). Se aplicaron Test de Mann-Whitney, Kruskall Wallis y test de Spearman según los distintos tipos de variables que se relacionaron con el programa SPSS 10.0. RESULTADOS En nuestro estudio los niveles medios de MLT en plasma fueron de 8.56 pg/mL, que son cifras inferiores a las de sujetos adultos sanos que están en torno a 10pg/mL. La concentración media de MLT en saliva fue de 2.56 pg/mL que está dentro de los intervalos normales que son de

Autor: ARCE TERROBA YOLANDA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - HOSPITAL CLÍNIC.

Resumen: HIPÓTESIS La apoptosis, como mecanismo de muerte celular fisiológica, debe mostrar valores diferentes en los diversos substratos morfológicos de la situación clínica de daño pulmonar agudo. En tal caso, el índice de apoptosis pulmonar puede ser un parámetro de ayuda en el manejo clínico y durante el diagnóstico diferencial de los enfermos con daño pulmonar agudo. OBJETIVOS Estudiar el índice de apoptosis pulmonar en las diferentes lesiones histopatológicas que pueden observarse en el pulmón de los enfermos sometidos a ventilación mecánica. Determinar la relación del índice de apoptosis pulmonar con la respuesta inflamatoria sistémica y local en los enfermos con daño pulmonar agudo. Establecer el valor del índice de apoptosis pulmonar como marcador clínico de neumonía o de síndrome de distrés respiratorio del adulto, en el contexto del paciente con daño pulmonar agudo. Comprobar el valor pronóstico del índice de apoptosis pulmonar en el paciente afecto de daño pulmonar agudo. MATERIAL Y MÉTODOS FASE RETROSPECTIVA Realización de la técnica de TUNEL para identificar células apoptóticas sobre tejido pulmonar de enfermos fallecidos después de >72 horas de ventilación mecánica. FASE PROSPECTIVA Fluido de lavado broncolveolar de enfermos con daño pulmonar agudo: Realización de la técnica de TUNEL y determinación mediante ELISA de los niveles de interleuquinas en suero y en fluido de lavado broncoalveolar. CONCLUSIONES 1,- El índice de apoptosis pulmonar es diferente según el tipo de lesión histológica del pulmón estudiada en este trabajo. Existen diferencias significativas al comparar del índice de apoptosis de la neumonía, el daño alveolar difuso, la lesión intersticial asociada a la ventilación mecánica y el pulmón normal. 2,- El índice de apoptosis pulmonar es significativamente superior en la neumonía al compararlo con el daño alveolar difuso, la lesión intersticial asociada a la ventilación mecánica, y el pulmón normal. 3,- Una lesión activa del parénquima pulmonar, debida a neumonía o a daño alveolar difuso se asocia con un incremento del índice de apoptosis. 4,- El patrón histológico de lesión intersticial asociada a la ventilación mecánica no se asocia a un incremento en el índice de apoptosis pulmonar. 5,- Aunque existe una relación significativa entre el índice de apoptosis pulmonar y la probabilidad de la presencia de neumonía, éste índice de apoptosis por si solo no permite diagnósticar la presencia de neumonía con alta sensibilidad y especificidad simultáneas. 6,- El índice de apoptosis en fluido broncoalveolar no tiene valor como prueba diagnóstica de la presencia de neumonía o de síndrome de distress respiratorio del adulto en los enfermos con daño pulmonar agudo. 7,- El índice de apoptosis pulmonar no tiene valor pronóstico en los enfermos con daño pulmonar agudo. No hay diferencias en este índice de apoptosis entre los enfermos que sobreviven y los que no. 8,- En los enfermos con daño pulmonar agudo existe un incremento en los niveles de interleuquinas en suero y en fluido broncoalveolar que reflejan una respuesta inflamatoria sérica y local pulmonar. La respuesta inflamatoria se desarrolla fundamentalmente en el pulmón. 9,- Existe una relación inversa entre los niveles de IL6, TNFalfa y el índice de apoptosis en fluido de lavado brocoalveolar, lo que indica que la apoptosis pulmonar está modulada por alguno de los mediadores químicos de la inflamación durante el daño pulmonar agudo. 10,- En la neumonía y el daño alveolar difuso, existe una expresión superior y concordante de promotores de la apoptosis como Bax y Caspasa 3, en el epitelio alveolar. 11,- La expresión del Bcl-2 no varía en la neumonía, el daño alveolar difuso, la lesión intersticial asociada a la ventilación mecánica y el pulmón normal.

Autor: CHIANINI FRANCESCA .
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: En esta tesis se estudió la distribución normal de las células del sistema inmunitario mediante técnicas inmunohistoquímicas en tejidos fijados en formol e incluidos en parafina de cerdos convencionales, usando cuatro anticuerpos comerciales y dos anticuerpos monoclonales, reactividad de los cuales en tejidos incluidos en parafina no se había caracterizado previamente. Los resultados de este trabajo permitieron estudiar las lesiones microscópicas en el sistema inmunitario de cerdos afectados de forma natural con el síndrome de adelgazamiento post-destete. Con el primer estudio estandarizamos dos protocolos inmunohistoquímicos para la utilización de los anticuerpos BL2H5 y 3C3/9 en tejidos porcinos fijados en formol e incluidos en parafina. Con el segundo trabajo se estudió la distribución de las diferentes poblaciones celulares del sistema inmunitario en tejidos de cerdos convencionales sanos fijados en formol e incluidos en parafina, mediante técnicas inmunohistoquímicas. Se tomaron las siguientes muestras: pulmón, tonsilas, linfonodos (mediastínico, mesentérico, inguinal y submandibular) páncreas, bazo, hígado, riñón, glándula adrenal, íleon y estómago. Se utilizaron seis anticuerpos primarios (anti-CD3, anti-CD79alfa, Mac387, anti-lisozima, anti-CD45RA (3C3/9) y anti-SLA-II-DQ (BL2H5)) con el método de ABC, Anti-CD3 y anti-CD79alfa marcaron células en áreas T y B respectivamente. Mac387 reconoció granulocitos polimorfonucleares, mientras que el anti-lisozima marcó macrófagos residentes en todos los tejidos estudiados. 3C3/9 y BL2H5 se detectaron por primera vez en tejidos fijados en formol e incluidos en parafina. 3C3/9 identificó linfocitos B, en los folículos primarios y en la corona de folículos secundarios, una subpoblación de células T, especialmente localizadas en la zona marginal del bazo y un número variable de linfoblastos en los centros germinales. BL2H5 marco células B en la corona de los folículos de los tejidos linfoides, células dendríticas e interdigitantes en todos los tejidos linfoides estudiados y un número variable de células T en el PALS, zona marginal y pulpa roja. Además marcó células de Kupffer y macrófagos perivasculares en el hígado. En el tercer trabajo se estudiaron las lesiones linfoides, renales, pulmonares y hepáticas en casos naturales de síndrome de adelgazamiento post-destete mediante técnicas inmunohistoquímicas. Se seleccionaron diez cerdos convencionales con sintomatología aguda típica del síndrome de adelgazamiento post-destete, provenientes de una granja seronegativa frente el virus del síndrome respiratorio reproductivo porcino y el virus de Aujeszky. Todos los cerdos resultaron positivos frente al circovirus porcino tipo 2 con las técnicas de ISH y IP. Se utilizaron los mismos marcadores del segundo estudio para caracterizar el tipo celular en las lesiones por síndrome de adelgazamiento post-destete. Los cambios más significativos fueron una reducción o pérdida de células B, disminución de células T, aumento de macrófagos y pérdida parcial y redistribución de las células presentadoras de antígeno en los tejidos linfoides. La caracterización de las lesiones linfoides de este tercer estudio sugieren que los animales afectados con el síndrome de adelgazamiento post-destete padecen un estado de inmunosupresión

Autor: GUILLEN FERRARO MORELLA LUCIA.
Año: 2000.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Se estudió la expresión de la Glicoproteína P y del gen MDR1 en linfocitos de sujetos sanos y pacientes sometidos a inmunosupresión. Para ello se analizaron 280 muestras de sangre periférica de donantes de sangre (n=125), pacientes en hemodiálisis (n=83) y pacientes con trasplante renal (n=72), mediante inmunofluorescencia directa con el AcMo JSB-1-FITC por citometría de flujo. Se investigó también la expresión del ARNm del gen MDR1 por RT-PCR y se realizó la amplificación del ADN por PCR y posterior secuenciación de la regiónpromotora de dicho gen. Los resultados mostraron variación interindividual en la expresiónd e Glicoproteína P y su ARNm en la poblaciónde indiviuos sanos y variación en el porcentaje de células positivas y en el IMFE de las diferentes subpoblaciones celulares analizadas. Que de los tres grupos de indiviudos estudiados, los inflocitos de los pacientes contrasplante renal fueron los que presentaronlos nivles más elevados de expresión de Glicoproteína. P. El estudio de la región promotora de este gen no mostró ninguna mutación o delección. Se obrservó la inducción de expresión en los pacientes sometidos a hemodiálisis y con trasplante renal tanto de proteína comode su ARNm. Ambas sobreexpresiones proteína y ARNm mostraron correlación estadísticamente significativa. Los resultados expuestos permiten concluir que la inducción de la expresión Glicoproteína P está regulada por mecanismos postranscripcionales en la realción con la sobrecarga farmacológica, especialmente de fármacos inmunosupresores como la ciclosporina A.

Autor: PUENTE LUNA M. BELEN.
Año: 2000.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE VALLADOLID (FACULTAD DE MEDICINA).

Resumen: La silicona ha sido considerada como un material biológicamente inerte, por lo que se ha utilizado en multitud de aplicaciones médicas. Sin embargo, desde hace varios años diversos estudios la han relacionado con la aparición de posibles efectos adversos, tanto locales como generales, no habiéndose estudiado dichos efectos generales con implantes de silicona localizados a nivel del globo ocular. HIPOTESIS Los pacientes portadores de implantes ocualres de silicona forman anticuerpos (AC) frente a dicha sustancia, los cuales pueden ser detectados en suero mediante una técnica de elisa. OBJETIVOS 1- Detectar AC frente a la silicona en pacientes sometidos a cirugía ocular en los que se hayan utilizado: bandas, esponjas y/o aceite de silicona. 2- Determinar si existe relación entre la presencia de dichos AC, el tipo de implante y el tiempo de permanencia del mismo en el globo ocular. 3- Determinar si exiten niveles elevados de FR, ANA y AC ANTI-SCL-70. 4- Averiguar si algún paciente presentaba enfermedades inmunológicas. PACIENTES, MATERIAL Y MÉTODOS Se analizó el suero de 101 pacientes divididos en 3 grupos: G I - control (N=36), G II - con bandas y/o esponjas (N=28) y G III - cona ceites de silicona intraocular (N=37) determinando los niveles de FR, ANA y AC ANTI-SCL-70 así como la presencia de AC (igC) anti-silicona (mediante técnica de elisa). También se determinaron las 4 subclases de IgC en aquellos pacientes con AC positivos. Se compararon las medias de los resultados obtenidos en los 3 grupos y se estudió el porcentaje de pacientes de cada grupo que presentaban AC Anti-silicona, así como si existía alguna relación con el sexo, edad, tipo de implante y tiempo de permanencia del mismo. También se realizó un test de correlación de spearman para determinar de qué subclases dependía fundamentalmente la elevación de la IgG total. RESULTADOS Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre las medias d elos 3 grupos. Respecto al porcentaje de pacientes con AC + este fue: G I 0%, G II 39,29% y G III 86,48% (diferencias significativas). No se encontró elevacióndel FR,ANA o AC ANTI-SCL 70. Ningún paciente presentó signos y/o síntomas de enfermedades inmunológicas. Con relación a las significativa entre las subclases 1 y 2 y la IgG total.

Autor: ARÓSTEGUI GOROSPE JUAN IGNACIO.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO.

Resumen: El antígeno menor de histocompatibilidad HA-1 es un sistema dialélico, de tal manera que el fenotipo HA-1 positivo es conferido por el péptido codificado por el alelo HA-1h, mientras el fenotipo negativo lo es por el alelo HA-1r. En los artículos presentes en la literatura científica las únicas diferencias entre ambos alelos se encuentran en las posiciones 500 y 504 del cDNA. En el primer objetivo de la presente tesis se analizan las frecuencias alélicas del antígeno menro HA-1 en individuos no emparentados extraídos de la población catalana. En él se pone de manifiesto un fenotipo HA-1 positivo del 55,2% , lo cual contrasta con el 68 y 69% encontrados en poblaciones caucásticas estadounidense y holandesa respectivamente. El segundo objetivo se centra en la aplicación de la técnica de análisis conformacional del DNA de doble hebra RSCA para la asignación alélica del antígeno menor HA-1. Los resultados de este estudio ponen de manifiesto la exigencia de la secuencia TTTAT en la posición intrónica 214-218, asociada al alelo HA-1r y ausente en el alelo HA-1h. Igualmente se ha identificado 2 nuevas variantes alélicas (HA-1rdel5 y HA-1hins5) y polimorfismos en las posiciones intrónicas 65 y 130. El análisis comparativo de los resultados obtenidos por los métodos PCR-SSP y RSCA, en las mismas muestras, ha puesto de manifiesto una correlación superior al 99% entre ambos métodos. En el tercer objetivo de la tesis se presenta un estudio multicéntrico (14 hospitles españoles) y retrospectivo, que engloba 225 emparejamietnos donante-receptor, para analizar el papel de la disparidad en el antígeno menor HA-1 entre donantes y receptor con las complicaciones post-trasplante en el transplante alogénico de progenitores hematopoyécticos a partir de donante emparentado HLA-idéntico. Este estuido pone de manifiesto el papel de factor de riesgo de dicha disparidad para el desarrollo de grados II-IV de enfermedad del injerto contra el huésped EICH aguda, no demostrándose asociaciones estadísticamente significativas con otras complicaciones como EICH crónica, recidiva de la enfermedad ó supervivencia libre de enfermedad.

Autor: CASAMITJANA PONCES NATALIA.
Año: 2000.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSITAT AUTÓNOMA DE BARCELONA-ESCUELA DE DOCTORADO I FORM. CONT..

Resumen: En la realización de esta tesis se llevó a cabo el análisis de ciertas moléculas de superfície de los linfocitos T citotóxicos, que tienen la capacidad de unirse a las moléculas de MHC de clase I. Estas moléculas son: el correceptor CD8, presente en linfocitos T citotóxicos y también en células NK, y que tiene la función principal de facilitar e incrementar la activación del TCR (Receptor de la Célula T); el otro tipo de moléculas son los receptores inhibidores, descritos inicialmente en células NK, pero que también se expresan en poblaciones linfocitos T citotóxicos, y en otros tipos celulares. De estos receptores inhibidores existen diferentes familias, algunos de los cuales son proteínas de tipo I que pertenecen a la SuperFamilia de las Inmunoglobulinas (como los llamados KIRs en humanos), y otros son proteínas de tipo II de la Familia de las Lectinas de tipo C (como los heterodímeros CD94/NKG2). Se analizó el papel de estas moléculas en la modulación de la activación de las células T producida por su receptor específico, el TCR. Para ello se plantearon 2 objetivos: El primero era el establecimiento de un sistema celular donde realizar los análisis,y demostrar sus eficacia estudiando el papel de CD8. El segundo objetivo era,una vez establecido el sistema, usar éste para analizar si los receptores inhibidores eran capaces de inhibir la activación del TCR. El sistema celular estaba compuesto por una célula T murina, a la que se le transfectaron las diferentes moléculas de MHC de clase I (Kd) para la cual el TCR de la célula T era específico. La APC podía presentar a la célula T dos péptidos diferentes Cw3 y A24. Finalmente, se planteó un tercer objetivo, el estudio molecular de un nuevo defecto genético que causa la ausencia completa de células CD8+ en algunos individuos de una misma familia. Se caracterizó molecularmente el defecto genético y se realizaron diferentes experimentos para demostrar su importancia.

Autor: EIRAS MARTINEZ PABLO ANDRES.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCION: Los linfocitos intraepiteliales representan un comportamiento linfoide singular por su localización, extensión, fenotipo y ontogenia. En la enfermedad celiaca se ha documentado que existen alteraciones permanentes de estos linfocitos. MATERIALES Y METODOS: Biopsias endoscopicas de 113 pacientes (51 celiacos). Desepitelización mediante incubación con DTT y EDTA. Análisis por citometria de flujo tricolor. RESULTADOS Y CONCLUSIONES: 1-Contrariamente a lo comunmente establecido el comportamiento intraepitelial humano contiene, el menos de edad pediatrica, una importante poblacion de i-LIE CD3-CD7+.(>40 %). 2-Los marcadores fenotípicos de esta población hacen pensar en su pertenencia a un linaje NK(CD161+,CD122+,CD56+/-), aunque con sensibles diferencias con los NK perifericos. 3-Esta población muestra un perfil de moléculas de adhesión peculiar resaltando sobre todo la ausencia de CD18 y de CD44. 4-Todas las caracteristicas anteriores han sido previamente documentadas en una población NK-like recientemente descrita en útero y decidua humana (u-NK) que ha sido implicada en los fenómenos de tolerancia materno-fetal. A modo de hipótesis postulamos que la extrecha similitud fenotípica existente entre ambas poblaciones pudiera extenderse al ámbito funcional si los i-LIE CD3-CD7+ participasen en los mecanismos de tolerancia oral a antígenos de la dieta. 5-En la enfermedad celiaca existen alteraciones permanentes en los i-LIE que se concretan, ademas de en el previamente documentado aumento de i-LIE TcRy , es una virtual ausencia de i-LIE CD3-CD7+. 6-La determinacion de las subpoblaciones de i-LIE tiene una excelente sensibilidad (94,4%) y especificidad (94,9%) en el diagnostico de la EC. 7-El valor clínico de esta prueba es especialmente valioso en aquellas situaciones clínicas en las que fallan los marcadores serológicos clásicos, tales como : EC Latente, EC sin gluten, EC asociada a deficit selectivo de IgA. 8-La citometría de flujo tricolor es, por su rapidez, objetividad y moderado coste, la técnica de elección para su determinación seriada con fines de diagnóstico clínico.

Autor: GALINDO IZQUIERDO MARIA.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y HOSPITAL 12 DE OCTUBRE.

Resumen: EN ESTE ESTUDIO SE ANALIZAN LAS DIFERENCIAS EN EL PATRON DE EXPRESION BASAL DE QUIMIOQUINAS ENTRE FIBROBLASTOS DERMICOS SANOS Y DE PACIENTES CON ESCLEROSIS SISTEMATICA, ASI COMO EN LA RESPUESTA A LOS ESTIMULOS REDOX Y EN SU REGULACION. LOS RESULTADOS QUE SE PRESENTAN DEMUESTRAN QUE LOS FIBROBLASTOS DERMICOS SON CAPACES DE EXPRESAR CONSTITUTIVAMENTE MCP-1 E IL-8, Y QUE LA SINTESIS DE ESTAS QUIMIOQUINAS AUMENTA TRAS LA EXPOSICION A HIPOXIA/REOXIGENACION. A DIFERENCIA DE LOS SANOS, AQUELLOS QUE PROCEDEN DE PIEL ESCLERODERMICA PRESENTAN UNA EXPRESION CONSTITUTIVA DE MCP-1 AUMENTADA, QUE NO SE MODIFICA TRAS LA EXPOSICIÓN AL ESTRÉS OXIDATIVO Y, QUE NO PARECE DEPENDENTE DE LA ACTIVACION DE NF-KB Y AP-1, EN AMBOS TIPOS DE FIBROBLASTOS SE HA DEMOSTRADO QUE LA PROTEINA MCP-1 SECRETADA ES QUIMIOTACTICA PARA CELULAS MONONUCLEARES Y, DE MANERA MUY HETEROGENEA, PARECE ESTAR IMPLICADA EN LA EXPRESIÓN DE PROCOLAGENO ALFA-1. ESTOS RESULTADOS SE HAN CONFIRMADO IN VIVO POR INMUNOHISTOQUIMICA, YA QUE SOLO SE HA OBSERVADO EXPRESION DE MCP-1 EN LAS MUESTRAS DE PIEL ESCLERODERMICA. LA EXPRESIÓN DE MCP-1 EN ESTAS MUESTRAS SE EXTIENDE A LOS QUERATINOCITOS DE LAS CAPAS PROFUNDAS DE LA EPIDERMIS Y A LAS CELULAS MONONUCLEARES ADEMAS DE A LOS FIBROBLASTOS.

Autor: SANCHEZ-CARPINTERO ABAD IGNACIO.
Año: 2000.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: Estudiamos la implicación de la vía de los fosfoinosítidos en la acantolisis en el pénfigo vulgar (PV), mediante experimentos de transferencia pasiva en ratones Balb/c, empleando IgG purificada de pacientes con PV variedad cutáneo-mucosa y mucosa. Unicamente la administración de IgG de PV con afectación cutáneo-mucosa indujo lesiones. Para su estudio previamente administramos intradérmicamente los siguientes inhibidores: Genisteína, Herbimicina A, Bisindolilmaleimida, U-73122 y W-7. En todos los casos no apreció una inhibición de la acantolisis a pesar de detectarse depósitos de IgG en el estudio de inmunofluorescencia directa(IFD). La administración de los sueros de PV variedad mucosa no indujeron la enfermedad, independientemente de la dosis de anticuerpo administrado, del título de anticuerpos o de la localización de la afectación mucosa. El estudio de IFD fue negativo en todas estas muestras. Asimismo, se determinó en la piel murina la expresión de la proteín-kinasa p125FAK, mediante inmunohistoquímica, observándose su expresión en el interior de los queratinocitos, unicamente en los casos en los que se produjo acantolisis. La administración de los inhibidores junto a IgG de PV no indujo esta proteína. Se ha estudiado el fenotipo linfomonocitario de sangre periférica en 38 muestras obtenidas de 5 pacientes con PV cutaneo-mucoso y en 6 con variedad mucosa. En los casos con afectación cutáneo-mucosa se observó un mayor porcentaje de células presentadoras de antígenos, tanto monocitos que expresaban altos niveles de HLA-DR como linfocitos B activados, junto a una disminución de linfocitos T naive y de células CD8+CD11b, en comparación con los pacientes con afectación exclusiva de mucosas.

Autor: LOPEZ RODRIGUEZ M. JOSEFA.
Año: 2000.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA U. ENFERMERIA Y TERAPIA OCUPACIONAL.

Resumen: La enfermedad celiaca (EC) es una intolerancia permanente al gluten que produce en individuos geneticamente predispuestos una lesion severa de la mucosa del intestino delgado. Se ha estudiado la incidencia de EC en la población infantil de Extremadura en el periodo 1981-1999, la presentacion clínica, edad de diagnóstico, enfermedades autoinmunes asociadas, realizandose screening de EC silente en familiares de primer grado mediante marcadores serológicos de EC. Estudio genetico (HLA DR y HLA DQ2) a 138 pacientes y 109 donantes sanos del misma area geografica, para determinar los antígenos asociados en esta población, asi como el posible efecto dosis-gene DQ2. El DNA se obtuvo de leucocitos procedentes de sangre periferica. Se ha valorado la ingesta de nutrientes mediante encuesta recordatorio de siete días a los pacientes y a un grupo control sano de la misma edad, sexo y area geografica; asi mismo, se determinó, con ultrasonido oseo cuantitativo, la velocidad del sonido amplitud dependiente (Ad-SoS) para valorar la masa osea. La incidencia de EC fue significativamente más elevada en el periodo 1991-1999(16,04/100000 habitantes, CI 95%: 12,99-19,59) respecto al periodo 1981-1990(6,87/100000 habitantes, CI 95%:5,26-8,83)(p

Autor: GARCIA CABANILLAS JUAN ANTONIO.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La Inmunodeficiencia Comun Variable(CVID) es un sindrome muy heterogeneo caracterizado por una hipogammaglobulinemia de etiologia desconocida. Aunque el defecto primario permanece desconocido, varios trabajos previos describen disfunciones en los linfocitos T de sangre periferica en una importante proporcion de pacientes con CVID, que pueden afectar a la colaboracion entre celulas T y B. Con la intención de investigar si tales defectos putativos son intrinsecos a las celulas T o por el contrario, secundarios a diferencias cuantitativas en la distribución de subpoblaciones T o a otros desordenes descritos, hemos utilizado el Herpesvirus saimiri(HVS) para la transformacion de linfocitos T CVID CD4+ y CD8+ T y para la posterior evaluación funcional, mediante citometria de flujo, de su capacidad para inducir moleculas de superficie (CD154,CD69) o de factores solubles(IL-2,TNF-a,IFN-y) implicados en la colaboracion con las celulas B. Inesperadamente, los resultados mostraron que la exposicion de 40 diferentes muestras de sangre de pacientes con CVID al HVS dio lugar a la obtencion de lineas transformadas de linfocitos T CD4+ con una frecuencia significativamente mayor que la obtenida con la exposición de 40 muestras de sangre de donantes sanos, pareados en sexo y edad (24% vs.3%,p=0,00002). Esto sugiere la existencia de una señal especifica en los CVID que afecta a la eficacia de transformacion de la subpoblacion CD4+. El analisis funcional de 10 lineas CD4+ y 15 lineas CD8+transformadas puras de linfocitos T de pacientes CVID no reveló ninguna diferencia estadisticamente significativa comparando con sus controles. Sin embargo, la mitad de las lineas de celulas CD4+ transformadas mostro una inducción de la molecula de superficie CD154(pero no de CD69) (valor medio de 46,8%) por debajo de la inducción mas baja conseguida en los controles tras estimulacion con anti-CD3(valor medio de 73,6%,p=0,004). Exactamente las mismas 5 lineas mostraron, ademas, una significativa reducción en la inducción del factor soluble IL-2(p=0,008), pero no de otras citocinas como TNF-a o IFN-y. Ninguna de estas diferencias fue observada en el resto de lineas CD4+ ni en ninguna de las lineas CD8+ transformadas analizadas. Por lo tanto, un subgrupo de pacientes CVID muestras una incapacidad selectiva e intrinseca de las celulas T CD4+ para la induccion tanto de moleculas de superficie (CD154) como factores solubles(IL-2) directamente implicados en la cooperación con los linfocitos B, lo que puede estar directamente afectando a la capacidad de produccion de inmunoglobulinas por parte de estas ultimas. Los linfocitos T transformados pueden ayudar para establecer los mecanismos bioquimicos responsables de los defectos descritos.