ONCOLOGIA, 2

Autor: RUZA PAZ-CURBERA ELENA.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: Los tumores óseos constituyen la sexta causa de tumores malignos durante la infancia y la tercera en los adolescentes, de los cuales, los más frecuentes son el osteosarcoma (OS) y el sarcoma de Ewing (SE). En las últimas décadas, se han producido importantes cambios en los protocolos terapéuticos que han supuesto un aumento significativo de las tasas de supervivencia de estos pacientes, así como un mayor conocimiento delos efectos a largo plazo de los tratamientos antitumorales recibidos, entre los que destaca la osteoporosis. Las características clínicas de estos tumores han suscitado la hipótesis de que el aceleramiento del crecimiento que se produce durante el periodo puberal, momento de máxima incidencia de tumores óseos, parece estar implicado en su patogénesis. Tanto el crecimiento como la adquisición de masa ósea parecen estar sujetos a factores genéticos. OBJETIVOS Analizar los datos antropométricos al diagnóstico de pacientes pediátricos afectos de OS y SE y compararlos con los de la población española de referencia; analizar el metabolismo óseo en sueprvivientes de OS y SE; caracterizar los polimorfismos de los genes Receptor de la Vitamina D (RVD), Receptor de Estrógenos (RE) y Colágeno tipo Ialfa 1 (COL IA 1) en estos pacientes y en un grupo control pareado en edad y sexo. MATERIAL Y MÉTODOS Se obtuvieron la talla, peso, índice de masa corporal (IMC) y estadio de desarrollo puberal (según Tanner) en 58 pacientes con OS y 36 con SE, y se expresaron en función de los de la población española de referencia de igual edad y sexo como estándares de la desviación estándar (SDS). Se cuantificó la densidad mineral ósea (DMO) en 38 supervivientes de OS y 24 de SE mediante DEXA (Dual-energy X-ray absorptiometry) a nivel lumbar y en cuello de fémur, se expresó en SDS, y se relacionó mediante regresión lineal múltiple con aquellos factores clínicos potencialmente implicados en su adquisición. SE determinaron los marcadores séricos bioquímicos y hormonales de metabolismo óseo en distintos momentos evolutivos de 59 OS y 36 SE, según instrucciones de los proveedores. Se caracerizaron mediante digestión con endonucleasas de restricción diferentes polimorfismos de los genes RVD (Fok I, Apa I, Taq I), RE (Pvu II y Xba I) y COL IA 1 (Msc I) en 72 OS y 54 SE, y en un grupo control formado por 143 niños sanos. El análisis estadístico se realizó con el programa SPSS v 10.0. RESULTADOS Los niños afectados de OS y SE son significativametne más altos al diagnóstico que la población española de referencia. Los supervivientes de estos tumores presentan una DMO significativamente menor que lo esperado para su edad y sexo, independientemente del tiempo transcurrido desde el final del tratamiento. Dicha DMO parece estar relacionada con el peso o IMC y, a nivel lumbar, con la edad y sexo al diagnóstico y en el momento de su cuantificación. La afectación del metabolismo óseo se refleja desde el momento del diagnóstico por la disminución de los marcadores séricos bioquímicos y hormonales, y persiste a lo largo del tiempo asociada a la alteración del metabolismo de la vitamina D y déficit de hormona de crecimiento. El genotipo heterocigoto para el polimorfismo Fok I (Ff, gen RVD) se halla sobre-representado en los pacientes con OS de nuestra serie, y parece asociarse con diferencias en la talla de estos pacientes. No se han detectado difernecias en la DMO en función de los genotipos para los polimorfismos analizados. CONCLUSIONES La elevada talla que presentan al diagnóstico los pacientes afectos de OS y SE, junto con la máxima incidencia de los tumores óseos superponible al momento del estirón puberal y su preferencia por la metáfisis de los huesos largos de las extremidades inferiores, parece sugerir la implicación de la aceleración puberal del crecimiento en la patogenia de estos tumores. La propia enfermedad y los tratamientos antitumorales adminsitrados a estos pacientes pueden afectar el metabolismo óseo e interferir el momento de máxima aposición ósea de forma persistente, con reisgo para el desarrollo precoz de osteoporosis en la vida adulta. El polimorfismo Fok I del gen RVD podría estar implicado en el crecimiento y en la talla alcanzada por los pacientes afectos de osteosarcoma.

Autor: GUAN MIN.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: En este estudio se ha desarrollado un nuevo vector híbrido de adenovirus-alfavirus que es capaz de expresar genes heterólogos específicamente en células derivadas de hepatocarcinoma humano (HCC). Este vector está basado en una denovirus dependiente de helper (HD-Ad) que porta la secuencia de un replicón de alfavirus derivado delcirus del Bosque de Semliki (SFV) bajo el control transcripcional del promotor de alfaproteína (AFP). El gen heterólogo que se desea expresar con este sistema se inserta bajo el control del promotor subgenómico de SFV dentro del replicón de SFV. Este vector reune varias ventajas, como una alta infectividad proporcionada por el sistema adenoviral, un alto nivel de expresión del transfén y la capacidad de inducir apoptosis, ambas proporcionadas por el replicón de SFV, y una alta especificidad tumoral, conferida por el promotor específico AFP, que dirige la transcripción el replicón de SFV. Se han construido vectores híbridos que portan el gen LacZ como gen marcador y el gen mIL-12 como gen terapéutico, bajo el control transcripcional del promotor subgenómico de SFV, respectivamente. También se han construido vectores HD-Ad control en los que LacZ y mIL-12 están clonados directamente bajo el control del promotor AFP. Los estudios in vitro han mostrado que los vectores híbridos son capaces de producir un nivel de expresión de proteína heteróloga hasta 300 veces mayor que el obtenido con los vectores control en células HCC. Además, la infección con el vector híbrido fue capaz de inducir muerte celular en células HCC a los 3-4 días postinfección. Cuando el vector híbrido que porta el gen LacZ se usó in vivo para infectar nódulos tumorales humanos de HCC xenografíados en ratones "nude" dio lugar a una elevada expresión de beta-galactosidasa en las células del tumor, que también resultó en la muerte de las mismas. Finalmente, el vector híbrido que porta el gen mIL-12 mostró una gran potencia antitumoral cuando se usó para tratar tumores ortotópicos derivados de la línea McA-RH7777 implantados en el hígado de ratas Buffalo. La inyección intratumoral con dicho vector indujo regresión o inhibición del crecimiento tumoral en la mayor parte de los animales, sin que se observase ningún tipo de toxicidad.

Autor: MUÑOZ ARANDA JORGE.
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS.

Resumen: Nuestro objetivo fue el estudio de la etiología genética de astrocitomas y tumores neuroblásticos bajo tres puntos de vista diferentes: Hicimos una búsqueda de pérdidas homocigóticas de PTEN y DMBT1 en 56 tumores astrociticos, 45 tumores neuroblásticos y 21 líneas celulares. PTEN estaba alterado tan sólo en 2 GBM (7%), y DMBT1 en 4 GBM (13%) y 3 AII (19%). Esto está de acuerdo con otros resultados previos (asociación entre alteraciones de PTEN y un mal pronóstico), y apunta la posibilidad de que DMBT1 pueda tener un papel en los primeros estadios de la tumorigénesis en astrocitoma. PTEN y DMBT1 mostraron pérdidas homocigóticas en un 7 y un 10% de neurobastomas, respectivamente. Se estudió el estado de hipermetilación de los promotores de p14/ARF, p16/INK4A, MGMT, PTEN y RASSF1A en 58 astrocitomas y 21 líneas celulares.p14/ARF y p16/INK4A no estaban metilados en ningún caso analizado. En cuanto a PTEN, éste sólo presentó metilación en 2 muestras. MGMT yRASSF1A mostraron las más elevadas frecuencias de hipermetilación en todos los grados de astrocitoma. La metilación de RASSF1A parecía estar asociada al fenotipo de GBM secundario, y además, este gen apareción metilado en una elevada proporción de glioblastomas pediátricos (44%). La pérdida de expresión de RASSF1A estaba correlacionada con la metilación del promotor en un 100% de los casos analizados. Estudiamos las alteraciones genómicas globales en 17 tumores neuroblásticos y 9 astrocitomas por AP-PCR. No encontramos diferencias significativas entre ninguno de los grupos tumorales. Las alteraciones discretas pueden ser más importantes que la acumulación de muchas alteraciones genómicas en la etiología de los tumores neuroblásticos.

Autor: ELIZEGUI TELLECHEA EIDER .
Año: 2003.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: El cáncer de pulmón es uno de los problemas de salud pública más importantes a nivel mundial. Existen una serie de tumores que presentan diferenciación neuroendocrina (NE): los carcinoides típicos (TC), los carcinoides atípicos (AC), los carcinomas NE de células grandes (LCNEC) y los carcinomas microcíticos (SCLC). Actualmente no se conoce a partir de qué tipo celular se originan estos tumores, aunque se cree que, al menos los carcinoides, pueden derivar de las células NE normales del pulmón. Estas células aparecen como células NE solitaria s(PNEC) o agrupadas en cuerpos neuroepiteliales (NEB), y ejercen funciones muy diversas, como la quimiorrecepción o la regulación de la proliferación del epitelio pulmonar. La adrenomedulina (AM) es un péptido de 52 aminoácidos que forma parte de la familia de péptidos a la que pertenecen la calcitonina, el CGRP y a la amilina. Se forma a partir del mismo precursor que da lugar al péptido de 20 aminoácidos N-terminal de la proadrenomedulina (PAMP). Ambos péptidos tienen el extremo C-terminal amidado. Esta amidación es producida por la monooxigenasa alfa-amidante de peptidilglicinas (PAM). Se ha demostrado que la AM y el PAMP pueden actuar como factores de crecimiento y que favorecen la angiogénesis. Además, la AM es un factor protector frente a la apoptosis. En cuanto al enzima amidante PAM, es necesario para la amidación de numerosos péptidos con actividad biológica que segregan las células tumorales, y en determinados tipos de tumores como los prostáticos, se ha visto que su expresión aumenta con la diferenciación NE. En este trabajo se ha utilizado un modelo animal de carcinogénesis pulmonar basado en la instilación intratraqueal de cristales de sílice en rata. Se han estudiado las células NE utilizando el CGRP como marcador en técnicas inmunocitoquímicas, y se ha encontrado una hiperplasia de los NEB situados en los alveolos producida por el tratamiento. Estas células NE hiperplásicas expresan además PAMP y PAM, pero no AM. Por lo tanto, PAMP y PAM pueden ser considerados marcadores de células NE pulmonares hiperplásicas. Se han estudiado 43 carcinomas humanos, la mayoría NSCLC (adenocarcinomas (ADC) y escamosos (SQC)). El marcaje para AM, PAMP y PAM es difuso y muy poco intenso en todos los casos. Además, no difere entre ADC y SQC. Sin embargo, en los 103 tumores NE estudiados se han observado diferencias significativas en el marcaje para el PAMP y el PAM, aunque no para la AM. El PAMP se expresa con intensidad en los carcinoides (TC y AC) a diferencia de los carcinomas (LCNEC y SCLC), mientras que se detecta mucho PAM en los TC, y muy poco en AC, LCNES y SCLC. Por lo tanto, PAMP podría ayudar a distinguir los AC de los LCNEC, mientras que PAM podría ser útil para el diagnóstico diferencial de TC y AC. Después de caracterizar la expresión de AM, PAMP y sus receptores en una colección de 15 líneas celulares de carcinoma pulmonar, se seleccionaron dos de ellas, una con diferenciación NE (H446, de tipo SCLC), y otra no-NE (H441, ADC) para los estudios de transfección. Se transfectaron cuatro plásmidos con distintas partes del gen de la preproAM. Una vez caracterizada la sobreexpresión de AM y de PAMP, se observó que ambos péptidos estimulan la proliferación y protegen de la apoptosis a la línea H446, mientras que ejercen un efecto opuesto en la línea H441, inhibiendo su proliferación y favoreciendo su apoptosis. Por lo tanto, parece que el efecto de ambos péptidos sobre el comportamiento del tumor depende del as características intrínsecas de cada tipo celular.

Autor: SANDOVAL CORREA M. PILAR.
Año: 2002.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGÍA.
Centro de realización: HOSPITAL GRAL. UNIVERSITARIO GREGORIO MARAÑÓN.

Resumen: El cáncer de pulmón es actualmente la neoplasía con mayor índice de mortalidad en los países industrializados. Los programas de educación pública, así como los nuevos avances terapéuticos, intentan en la medida de lo posible combatir la elevada incidencia de la enfermedad. No obstante, el pronóstico de los pacientes constituye una indiscutible meta de estudio. Junto a parámetros histoanatomopatológicos convencionales (tamaño del tumor, afectación ganglionar, tipo histológico, grado de diferenciación y estadiaje) como útiles herramientas en la caracterización de una neoplasia, se abren nuevas vías de investigación que envuelven a un amplio conjunto de marcadores capaces de predecir el comportamiento evolutivo del tumor. Nuestras perspectivas están puestas en la posible implicación pronóstica que determinadas proteínas de estrés (HSP's) puedan ejercer en el cáncer de pulmón. La respuesta de estrés se concibe como un mecanismo de defensa natural definido por una específica expresión de proteínas de choque térmico que median la invulnerabilidad y protección frente a diversas formas de daño celular. Este trabajo se plantea bajo la hipótesis de que el cáncer de pulmón se ve afectado por fenómenos de sobrexpresión de algunas proteínas de estrés en comparación con el tejido pulmonar normal y que dichos cambios en los patrones de expresión guardan relación con distintos factores pronósticos considerados de modo habitual en este tipo de tumores. Así,hemos analizado mediante la aplicación de específicos anticuerpos monoclonales como marcadores en técnicas inmunohistoquímicas la expresión de las proteínas de choque térmico HSP 70 y HSP 27 en 90 tumores broncopulmonares y su relación con parámetros histoanatomopatológicos de probado interés pronóstico en este tipo de neoplasias. Asimismo, hemos determinado su asociación con la supervivencia de los individuos estimados. Completando el trabajo estudiamos las mismas HSP's en los tejidos pulmonares normales adyacentes con la seguridad de que contribuirá a un mejor entendimiento de las funciones biológicas en las que se les ha implicado.

Autor: JIMÉNEZ FERNÁNDEZ ANA JOSEFA.
Año: 2002.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE GRANADA Y FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE MÁLAGA.

Resumen: El hepatocelular es uno de los pocos ejemplos de neoplasias humanas estrechamente relacionadas con infecciones virales. En España se ha relacionado la infección por VHC con el 62% de los hepatocarcinomas, mientras la infección por VHB es descrita entre un 0 y un 60% de los casos. En series orientales la mutación del gen supresor p53 interviene decisivamente en la progresión del hepatocarcinoma, aunque este hecho no se reproduce en la mayoría de los estudios occidentales. Este resultado apunta a una posible inactivación funcional de p53, posiblemente por fijación a proteínas virales. Este bloqueo podría estar determinado por factores individuales (polimorfismos), tal y como se ha descrito recientemente en otras enoplasias. Por otro lado, una segunda posibilidad sería la inactivación de un segundo gen supresor de tumores de función equivalente a p53 en el control del ciclo celular y la apoptosis, como el aún poco conocido p73. Se ha estudiado un grupo de 106 hepatocarcinomas de nuestro medio geográfico, encontrando que la incidencia real de mutaciones de p53 y p73 ha sido del 20'8% y el 21'7% de los casos. Observamos una relación con la infección por el VHB en 27,4% de nuestros casos detectándose el genoma del VHB en el 10'4% de los tumores, sin que exista ninguna correlación con las alteraciones o polomorfismos de p53 y p73. Existe una relación de la infección por VHC con el hepatocarcinoma en el 55'3% de nuestros casos, sinq ue hayamos detectado ninguna asociación con alelos de p53 o alteraciones de p53 y p73. Descubrimos, sin embargo, una tendencia a la mutación de p53 en aquellos pacientes homocigotos para el codon 72 en alelos A1-A1 y una fuerte sensibilidad aumentada a la mutación en alelos de p53 versión A1, aunque no relacionada con infecciones virales. En cuanto al pronóstico encontramos que la variable más relacionada con la sueprvivencia de nuestros enfermos fue el tipo de tratamiento recibido superado en eficacia el transplante hepático a cualquier otro.

Autor: NAVEROS SÁNCHEZ ESPERANZA.
Año: 2002.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En este trabajo se presenta la información de los nuevos casos de cáncer diagnosticados y/o tratados en el Hospital Clínico Universitario, entre el 1 de enero de 1996 y el 31 de diciembre de 1997. En algunas de las localizaciones tumorales (estómago, cólon-recto, laringe, melanoma cutáneo, mama, próstata, vejiga y tiroides) se procede a una recogida de datos más exhaustiva y se realizan seguimientos, al menos, una vez al año para conocer su estado último control, la evolución de la enfermedad, si el paciente ha fallecido, etc... Los objetivos que nos planteamos conseguir son: 1,- Generación y valoración anual de datos sobre la asistencia al paciente, en el periodo 1996-1997. 2,- Estudios de supervivencia global a los cinco años de seguimiento (1996/97-2002) en las localizaciones anteriormente señaladas. El Registro Hospitalaria de Tumores del Hospital Clínico Universitario desde su creación (11 años) permite comparar parámetros de calidad asistencial, tendencias de demoras (consulta, diagnóstica y terapéutica), supervivencia, etc. Destaca el incremento del número de neoplasias registradas por el Registro de Tumores del HCU, desde las 1273 iniciales (año 1993) hasta los 1760 casos en el año 1997. El rango de edad con más incidencia de tumores es de 71 a 80 años. La distribución global por sexos es de 1980 (60,2%) en hombres y 1306 mujeres (39,8%). La media de demora de consulta, diagnóstica y terapéutica de todos los casos con seguimiento (cercana a siete meses, dos meses y dos meses y medio, respectivamente) señalan que el nivel de educación sanitaria y al accesibilidad al sistema sanitario deben mejorarse, mientras que es aceptable el retraso terapéutico. En nuestro estudio la supervivencia global es del 76,5% a los 5 años, observándose una alta mortalidad (60%) en los dos primeros años de seguimiento en el cáncer gástrico; mientras que en el resto de las localizaciones ésta no supera el 30%. Observamos en la primera revisión, que la proporción de pacientes vivos, es cercana al 70% y el de fallecidos es de aproximadamente el 11%. En la última revisión, esos porcentajes disminuyen al 35-40% en el caso de los vivos y son de 24-26% en el caso de los fallecidos. Desde el RHT, en el bienio 1996-97, se constatan dos hechos; la existencia de varios subregistros (que hace que la información sea de difícil manejo y adquisición) y la imprecisión a ciertos datos de la historia clínica (como el intervalo entre el primer síntoma y el diagnóstico, la profesión, la clasificación de los tumores según su grado de extensión, etc.).

Autor: ACOSTA ORTEGA JESÚS M..
Año: 2002.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Los objetivos del estudio son: 1,- Analizar el curso clínico y las características histológicas e inmunohistoquímicas de los casos de CMT intervenidos en la Ciudad Sanitaria Virgen de la Arrixaca en el período comprendido entre los años 1971 y 1997. 2,- Determinar si existen diferencias morfológicas, inmunohistoquímicas o de evolución clínica entre los casos de CMT esporádicos o familiares. 3,- Evaluar el valor predictivo de las diferentes características histológicas en cuanto a la supervivencia y/o recidiva de la enfermedad. 4,- Establecer la importancia de los marcadores inmunohistoquímicos como factores pronósticos en los casos estudiados. Para ello se estudiaron los 55 casos de carcinoma medular de tiroides (19 esporádicos y 36 familiares) intervendios en el H.I. "Virgen de la Arrixaca" entre 1971 y 1997; se recogieron los datos de las historias clínicas y de los informes de Anatomía Patológica; se revisaron las preparaciones histológicas conservadas y se realizaron nuevas tinciones de inmunohistoquímica. Los resultados obtenidos fueron: 1,- Las características generales de los casos de CMT revisadas en nuestros estudios son: A,- La tasa global de supervivencia de los pacientes estudiados es del 81,8%, con unas tasas de recurrencia del 26,92%. B,- Desde el punto de vista histológico se observa predominantemente patrón de crecimiento sólido y células plasmocitoides, con presencia frecuente de sustancias amiloide, hiperplasia de células C, multicentricidad y neovascularización. C,- La inmunorreactividad para calcitonina, CEA, bcl-2 fue alta en la mayor parte de los casos mientras que fue baja para Ki-67 e intermedia para p53 y C-erb-B2. 2,- La comparación de casos esporádicos y familiares revela que: A,- La hiperplasia de células C y la multicentricidad se observan con más frecuencia en el CMT familiar, aunque no son exclusivas de éste, ni se encuentran en todos los casos. B,- En nuestra serie, el CMT esporádico muestra con más frecuencia presencia de focos de necrosis, hemorragia invasión vascular y neovascularización. C,- Existe un mayor índice de inmunorreactividad alta para p53 en el CMT de tipo esporádico y de inmunorreactividad baja en los casos familiares. D,- El CMT tipo familiar muestra mayores tasas de supervivencia que el CMT esporádico, pero no se observan diferencias entre ambos tipos con respecto a las tasas de recurrencia. 3,- El análisis del valor predictivo de las diferentes variables histológicas en cuanto a la supervivencia y/o recidiva de la enfermedad muestra que: A,- La necrosis es la única variable morfológica que influye de forma independiente en la supervivencia. B,- Las características morfológicas asociadas, de forma significativa, a unas mayores tasas de recurrencia son la presencia de neovascularización e invasión vascular, pero únicamente esta última tiene un valor significativo en el estudio multivariante. C,- El estadio, el tamaño tumoral y la aparición de metástasis a distancia influyen de forma significativa en las tasas de supervivencia, pero sólo el tamaño tumoral lo hace de manera independiente. D,- El estadio y las variables que lo determinan, tamaño tumoral y presencia de metástasis ganglionares, están relacionadas con las tasas de recurrencia, pero ninguna de estas variables influye de forma independiente. 4,- Al intenatar establecer una relación entre el grado de reactividad con diferentes marcadores inmunohistoquímicos y las tasas de superviviencia y recidiva observamos: A,- De las variables inmunohistoquímicas estudiadas, solamente la inmunorreactividad para p53 y C-erb-B2 están relacionadas con las tasas de supervivencia. No obstante, ninguna de ellas influye de forma independiente. B,- LA diferente inmunorreactividad para los marcadores inmunohistoquímicos estudiados no influye de forma significativa en las tasas de recidiva.

Autor: SANTOS GARCÍA ANTONIO.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS Se ha llevado a cabo una amplia revisión de la literatura de las alteraciones genéticas que integran las bases moleculares para la cancerización del campo en cavidad oral. Basándonos en este estudio, hemos pensado que la expresión proteica de las alteraciones genéticas se altera de forma secuencial en la cancerización de cavidad oral. Y que la detección de esta expresión proteica mediante inmunohistoquímica puede ayudar al diagnóstico y tratamiento de las lesiones orales. Para ello hemos estudiado la expresión proteica de oncogenes (EGFR, C-erbB-2, Ciclina D1, MIB-1, y c-myc), genes supresores de tumor (p16 y p53), alteraciones en la apoptosis (Bcl-2), capacidad de invadir los tejidos (E-cadherina, Laminina y Colágeno IV) mediante tecnología de tissue-microarrays como un medio eficaz para la realización de técnicas inmunohistoquímicas en el estudio de los tejidos orales. MATERIAL Y MÉTODOS Se ha realizado un estudio mediante tecnología de tissue-microarrays y mediante técnica inmunohistoquímica de 124 muestras de pacientes con diagnóstico de displasias leves y moderadas, incluyendo zonas de epitelio normal, carcinomas in situ, carcinomas microinvasores, carcinomas epidermoides de cavidad oral incluyendo metástasis ganglionares en aquellos pacientes en los que se dispusiese de tejido suficiente para la realización del estudio. Se describe el procedimiento de construcción de tissue-microarrays y se prepara para el estudio inmunohistoquímico. RESULTADOS Encontramos pérdida de expresión de p16 como alteración más precoz en el paso de las muestras de epitelio normal a displasias leves y moderadas, en carcinomas in situ y microinvasores podemos ver sobreexpresión de MIB-1, Ciclina D1, p53 y perdida de expresión de E-cadherina. Entre estas lesiones precancerosas y el carcinoma epidermoide hay sobreexpresión de EGFR, estando el resto de marcadores alterados incluyendo pérdida de expresión de Laminina y Colágeno IV. En metástasis ganglionares hay pérdida de expresión de E-cadherina, Laminina y Colágeno IV. CONCLUSIONES En el proceso de cancerización del campo, la proliferación celular se incrementa en momentos clave en la evolución desde displasias a carcinoma epidermoide oral intensificándose en las metástasis ganglionares. La modificación más precoz es la reducción de expresión de p16 seguida de incremento de Ciclina D1 y p53, y posterio pérdida de E-cadherina. Las alteraciones proteicas iniciales se mantienen o incrementan en los carcinomas epidermoides. También se acumulan más alteraciones como sobreexpresión en los carcinomas epidermoides. También se acumulan más alteraciones como sobreexpresión de EFGR y otras de menor relevancia, como c-erb-2, c-myc y Bcl-2. En los ganglios linfáticos con metástasis de carcinoma epidermoide de cavidad oral, el fenotipo es similar al observado en el turmor primario, pero además, se han detectado pérdidas de expresión de E-cadherina, Laminina y Colágeno IV. La tecnología de tissue-microarrays ha resultado útil en el estudio de la patología oral, tanto de muestras endoscópicas como de material quirúrgico, al permitir la valoración de un número elevado de lesiones y anticuerpos en condiciones homogéneas.

Autor: GAVA RICHARD RAFAEL.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE SALAMANCA.

Resumen: FUNDAMENTO La importancia de la edad como factor pronóstico en el cáncer de mama, lo cual podría tener importantes implicaciones en el tratamiento y manejo clínico de las pacientes. MATERIAL Y MÉTODOS Estudio retrospectivo de 846 pacientes intervenidas quirúrgicamente por cáncer de mama (1983-2001). En los hospitales: Jose de Gijón y Central de Asturias en Oviedo. Se analizaron parámetros clásicos del cáncer de mama, así como de la biología molecular, pronóstico de la enfermedad y tipo de tratamiento aplicado. RESULTADOS La edad media de las 846 pacientes fue de 59 años, y la década de mayor presentación del cáncer de mama fue la de los 60 años (24,9%). Encontramos una asociación estadísticamente significativa entre la edad de las pacientes y el tamaño tumoral (p

Autor: CORTE TORRES M. GABRIELA.
Año: 2002.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD DE SALAMANCA.

Resumen: OBJETIVOS Investigar en una población de pacientes de nuestro ámbito clínico con cáncer colorrectal la distribución de sus edades, posibles diferencias en cuanto a los síntomas de presentación, características clínico-biológicas de sus tumores, nuevos parámetros de la biología molecular, diferencias en el tratamiento y en el pronóstico. DISEÑO Estudio restrospectivo, descriptivo. MATERIAL Y MÉTODOS 748 pacientes intervenidos quirúrgicamente de adenocarcinoma colorrecta. Se investigaron las características clásicas de los pacientes y de sus tumores así como su contenido de ADN, porcentaje de células en fase S, parámetros de biología molecular y tipo de tratamiento recibido. RESULTADOS La edad media de los pacientes fue de 66,5 años, (intervalo: 24-96 años). La década de mayor presentación fue la de los 60 años (32,5%) seguida de los 70(29,9%) y la incidencia más baja correspondió a los

Autor: GUERRERO CABALLERO SÍLVIA.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: El gen K-ras, es muy importante clínicamente ya que se encuentra mutado en un 90% de los casos de cáncer de páncreas y en un 40% de los casos de carcinoma colorectal, que constituyen la 2n y 4arta causa de muerte en el mundo occidental y juega un papel importante en el desarrollo de los sarcomas. Debido a la importancia clínica del gen K-ras, cualquier modelo que mejore su conocimiento en el ámbito molecular, ayudará a predecir el comportamiento biológico del tumor antes de decidir el tratamiento más adecuado para un paciente concreto. Estos conocimientos, llevarán a una mejora substancial desde el punto de vista terapéutico. Las mutaciones activantes del oncogen K-ras, se han localizado en el codón 12 ó 13 del mismo. Previamente se ha asociado la presencia de mutaciones en el codón 13 con un fenotipo tumoral menos agresivo que cuando estas se localizan en el codón 12. Concretamente, presentan claras diferencias en capacidad invasiva local y capacidad metastásica. El objetivo de esta tesis es encontrar una explicación molecular a este diferente comportamiento clínico descrito con anterioridad en tumores humanos según si la mutación activamente se encontraba en el codón 12 o en el codón 13 del gen K-ras. También se pretendía encontrar una explicación molecular a la transformación producida por el gen normal sobreexpresado, que previamente se había descrito que en determinados modelos era tumorogénico. Estos estudios se realizaron en un modelo in vitro (fibroblastos NIH3T3 de ratón), transfectados establemente con el gen K-ras humano conteniendo las distintas mutaciones y en un modelo in vivo, injectando subcutáneamente los transfectantes generados en ratones atímicos. Las conclusiones de este trabajo son que en nuestro modelo de estudio la mutación en el codón 12 de K-ras confiere un fenotipo más transformante que la mutación en el codón 13 o la sobrexpresión del gen normal. La causa principal de estas diferencias en transformación es la mayor activación de la vía de supervivencia celular PI3K/AKT en los transfectantes con mutación en el codón 12 que les confiere mayor resistencia a la apoptosis, tanto en el modelo in vitro como in vivo. Por último, la posición del codón mutado en K-ras confiere especificidad histológica a los tumores generados que como provienen de fibroblastos (NIH3T3) serán sarcomas. Los tumores generados con mutación en el codón 12 del gen K-ras constituyen un posible modelo de fibrosarcoma y los tumores generados con mutación en el codón 13 del gen K-ras constituyen un posible modelo de histioctioma fibroso maligno, dos tipos de sarcomas humanos.

Autor: GARCÍA GARCÍA JUAN FERNANDO.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIONES ONCOLÓGICAS.

Resumen: Los avances en los conocimientos sobre la etiopatogenia y mecanismos moleculares implicados en el desarrollo y transformación neoplásica en el Lonfoma de Hodgkin (LH) han resultado lentos y rodeados de controversia. Las herramientas convencionales empleadas en biología molecular han mostrado una utilidad limitada en el estudio de este tumor, fundamentalmente debido a la escasez de células neoplásicas en los tejidos afectos. La población clonal maligna representada por las células de Hodgkin y Reed-Sternberg (H/RS) en la mayoría de los casos constituye menos del 1-5% de la masa tumoral, mientras que el resto del tejido está constituido por una heterogénea población celular, considerada reactiva, formada por linfocitos T, células plasmáticas, histiocitos y granulocitos. En los últimos años hemos podido aisistir a un avance sustancial en el conocimiento de esta enfermedad, debido a la mejora en las técnicas de inmunohistoquímica e hibridación in situ, a la disponibilidad de nuevas técnicas de patología molecular con alta sensibilidad, y a los avances en el campo de la micromanipulación y aislamiento de poblaciones celulares puras. Estas herramientas han aportado extenso conocimiento sobre el origen de las células de H/RS y su naturaleza. Ha sido demostrado que este tumor es la consecuencia de la proliferación clonal de una subpoblación de linfocitos B del centro germinal. Esta evidencia ha sido reconocida en la actual clasificación de la OMS, proponiéndose el cambio de nomenclatura de "Enfermedad de Hodgkin" a "Linfoma de Hodgkin". Pero todavía existen numerosas incógnitas respecto a los mecanismos de desregulación de la maquinaria normal del ciclo celular y apoptosis empleados por estas células y que posibilitan su proliferación y expansión clonal. El objetivo de este trabajo es el análisis de los mecanismos implicados en alteraciones del control del ciclo celular y apoptosis o muerte celular programada en el LH. Para ello, se han estudiado tanto líneas celulares derivadas de esta neoplasia como un gran número de tumores primarios. Se han analizado las alteraciones moleculares que afectan a numerosas proteínas que componen las diferentes rutas de control, empleando para ello técnicas de análisis proteíco como inmunohistoquímica, inmunofluorescencia, western-blot e inmunoprecipitación, técnicas de análisis de ADN como reacción en cadena de la polimerasa (PCR), PCR sensible a metilación (MSP) y análisis mutacionales mediante secuenciación directa, o técnicas de estudio de ARN como hibridación in situ y RT-PCR. Como resultado de estos estudios se plantea un modelo en el cual múltiples y concurrentes alteraciones en los mecanismos de control celular participan en promover proliferación e inhibir apoptosis en las células de H/RS. Estas alteraciones afectan a todos los puntos de control del ciclo (fases G1, S, G2 y M) así como las distintas vías de inducción a apoptosis: vía extrínseca (rutas de transducción de señales extracelulares) y vía intrínseca o mitocondrial. Probablemente el aspecto más relevante y práctico de estos estudios es el análisis final de las reaciones existentes entre las alteraciones moleculares encontradas y el comportamiento clínico de los tumores. Así, se ha demostrado como las alteraciones en la expresión de varias de las proteínas reguladoras del ciclo celular y la apoptosis guardan una asociación estadísticamente significativa con una peor respuesta al tratamiento y una supervivencia global reducida. Estas observaciones aportan una base para el futuro desarrollo y diseño de modelos predictivos de pronósticos que proporcionaran importants datos para tener en cuenta en las decisiones terapeúticas.

Autor: FERNÁNDEZ FLORES ÁNGEL.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FUNDACIÓN JIMÉNEZ DÍAZ.

Resumen: La enfermedad de Hodgkin fue descrita por primera vez por Thomas Hodgkin, quien publica en 1832 una serie de siete casos procedentes de autopsias, seis de ellas realizadas por él. La entidad se consolidará como tal, gracias a las contribuciones de Richard Bright en 1839, y Sir Samuel Wilks en 1956. Este último acuñaría el epónimo que se ha conservado hasta nuestros días. Aunque Wilks realizó estudios histológicos de la enfermedad, no encuentra hallazgos específicos. Será Greenfield en 1878, el primero en publicar sus dibujos histológicos sobre la enfermedad, describiendo unas células gigantes que ya habían sido mencionadas por Billroth, Virchow y Langhans previamente. Ninguno de ellos, incluido Greenfield, piensan que el cuadro morfológico sea típico de la enfermedad de Hodgkin. Lo contrario que Carl Sternberg, que opinará tras sus estudios en 1896, que el cuadro histológico es peculiar, aunque lo interpreta erróneamente como una forma atípica de tuberculosis, eror este corregido por Dorothy Reed en 1902, quien además catalogará el cuadro morfológico de la enfermedad y las células gigantes, como diagnóstico. Dichas células se conocerían hasta nuestros días como células de Reed-Sternberg. La Segunda Guerra Mundial trabajo consigo el inicio de la quimioterapia aplicada a la enfermedad, así como el traspaso de medios científicos-técnicos de Europa a América, desde donde nos llegarán las fundamentales contribuciones terapéuticas (avances en radioterapia de Vera Peters y Kaplan), y en el campo de la morfología (Clasificación de Jackson y Parker 1947, de Lukes 1963, de Rye 1965). En el aspecto etiológico, la enfermedad fue ligada en los años 70 al virus de Epstein-Barr, en parte como consecuencia de las investigaciones epidemiológicas del grupo de De Vianna. Más tarde, con el advenimiento de las técnicas inmunohistoquímicas y de patología molecular, se pudo comprobar que la enfermedad de Hodgkin era un linfoma (B centrofolicular en casi todos los casos) y que guardaban una relación etiopatogénica con el virus de Epstein-Barr en aproximadamente la mitad de los casos. Además se establecerá una distinción entre el predominio linfocítico y el resto de los subtipos, cambio ya presente en las clasificaciones REAL (1994) y la más reciente de la OMS. El futuro presenta expectativas sobre todo terapéuticas, que van desde las pautas quimioterápicas actuales, a la inmunoterapia en investigación.

Autor: DÍAZ GONZÁLEZ JUAN ANTONIO.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTA DE MEDICINA.

Resumen: En el momento actual, parece suficientemente establecido que un abordaje adecuado del cáncer de recto localmente avanzado implica una cirugía de máxima radicalidad complementada por radioterapia con técnicas de precisión y homogeneidad dosimétrica y quimioterapia sistémica basada en fluoropirimidinas. No está plenamente definida la secuencia óptima para conseguir el mejor índice terapéutico respecto a resultados de control local, supervivencia, funcionalidad y preservación esfinterina y calidad de vida. El desarrollo terapéutico en cáncer de recto se impulsa en el eje de la quimio-irradiación preoperatoria. El objetivo prioritario es conseguir la máxima regresión tumoral sin aumentar la toxicidad. El presente trabajo estudia una experiencia clínico-asistencial amplia y homogénea integrada por pacientes tratados con quimio-irradiación preoperatoria, cirugía programada diferida y radioterapia intraoperatoria presacra con electrones. La originalidad del estudio se asienta en la integración en un mismo análisis de dos elementos de intensificación terapéutica, quimio-irradiación preoperatoria y radioterapia intraoperatoria (RIO), seguidos de adyuvancia con quimioterapia. Una cohorte relevante de pacientes recibe la quimioterapia simultánea del segmento preoperatorio de irradiación con Tegafur, una fluropirimidina de administración oral. Se introdujo un criterio patológico complementario de evaluación de la respuesta al tratamiento preoperatorio: además del downstaging se establece el tipo de respuesta por la cantidad de residuo tumoral en el estudio patológico (categorías mic y mac). Las conclusiones del presente trabajo son: 1,- El esquema terapéutico de quimio-irradiación preoperatoria (tanto con 5-fluoruracilo en infusión continua intravenosa como con Tegafur oral) y cirugía programada a las 4-6 semanas con radioterapia intraoperatoria, es un tratamiento eficaz y bien tolerado en pacientes con cáncer de recto localmente avanzado. 2,- La tasa global de descenso de estadificación es del 65%. Un 43,5% de los pacientes presentaron una acusada respuesta patológica con enfermedad tumoral residual mínima, consistente en nidos microscópicos aislados de células tumorales en el seno de tejido de reparación sano (Categoría mic). 3,- La toxicidad grado 3-4 del tratamiento con quimio-irradiación preoperatoria se produjo en forma de efectos adversos gastrointestinales en el 20% de los pacientes, cutáneos en el 22% y hematológicos en el 1,7% de los pacientes. 4,- En el análisis multivariante se identifica el estadio clínico como factor pronóstico explicativo en la predicción de descenso de estadificación (downstaging). La edad y especialmente el tipo de quimioterapia utilizada con la irradiación preoperatoria (superior con Tegafur) son las variables independientes que predicen una mayor respuesta atendiendo al residuo tumoral microscópico. 5,- La tasa de recaídas locales es del 6,1% y la de metastasis del 21%. La tasa de recidivas dentro de la región de sobreimpresión con RIO es del 1,7%. La topografía de las recidivas pélvicas tras quimio-irradiación preoperatoria y sobreimpresión con electrones es: 29% sobre área presacra (2), 57% en la anastomosis (4) y un 14% en la pared posterior de la vagina (1). 6,- En el 60% de los pacientes se realizó cirugía con preservación del esfinteriana amorrectal. El diseño del programa de tratamiento y la variabilidad de factores quirúrgicos no permiten obtener conclusiones más definidas sobre la preservación de esfínter. 7,- Con una mediana de seguimiento de 36,9 meses no se ha alcanzado la mediana de tiempo a la progresión (70+ meses), ni la mediana de supervivencia global (70+ meses). Se identificaron un 4% de progresiones durante el segmento de tratamiento preoperatorio. La supervivencia libre de enfermedad a los 3 años es del 73%, la supervivencia global del 74% y el control local del 94%. 8,- En el análisis multivariante las mujeres y los pacientes que hayan tenido una respuesta patológica tipo mic presentan, de manera independiente, una menor tasa instantánea de progresión oncológica en nuestro estudio.

Autor: GÓMEZ CARRERA LUIS .
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: HOSPITAL UNIVERSITARIO "LA PAZ" UAM.

Resumen: Se estudia el componente celular y las concentraciones de los marcadores tumorales Antígeno Carcinoembrionario, Enolasa Neuronal Específica, Antígeno Polipeptídico Tisular, Antígeno Polipeptídico Tisular, Antígeno Polipeptídico Específico Tisular y Cyfra, en las dos fracciones del Lavado Broncoalveolar: fracción bronquiolar y fracción alveolar, tanto del pulmón con cáncer como del pulmón sano en 37 enfermos diagnosticados histológicamente de cáncer de pulmón. Se comparan las concentraciones de estos marcadores, en las dos fracciones del lavado broncoalveolar, entre los dos pulmones, para determinar si su secreción cooresponde qa un fenómeno local o general. Se demuestra que la concentracción del marcador tumoral Cyfra están más elevado en el pulmón con cáncer que en el pulmón sano. Mientras que el resto de los marcadores tumorales no muestran diferencias significativas entre los dos pulmones.

Autor: SILVA LEAL FRANCISCO JAVIER.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD MEDICINA UAM.

Resumen: El cáncer de mama constituye la primera neoplasia en incidencia entre las mujeres del mundo occidental, estimándose que 1 de cada 10 mujeres va a desarrollar esta enfermedad a lo largo de su vida. A pesar de que entre un 5-10% de todos los casos de cáncer de mama pueden atribuirse a la herencia de mutaciones en genes de predisposición para esta neoplasia (BRCA1 y BRCA2), la gran mayoría de los casos no tienen un componente hereditario, y se deben a alteraciones genéticas adquiridas de forma espontánea a lo largo de la vida. La parte central de este trabajo se llevó a cabo para determinar cómo afectaban en el desarrollo de cánceres de mama esporádicos, distintas alteraciones genéticas en una de las regiones cromosómicas más frecuentemente implicadas en los procesos tumorigénicos humanos. El locus INK4a/ARF, localizado en la región cromosómica 9p21, codifica dos proteínas supresoras de tumores, p16INK4a y p14ARF, que participan en las dos principales vías reguladoras del ciclo celular, las vías de Rb y p53, respectivamente. Nosotros hemos analizado los niveles de expresión de ARNm de ambos genes para determinar su estado de alteración en una serie de 100 carcinomas primarios de mama. El 32% de los tumores estudiados presentaba niveles disminuidos por p16INK4a, y un 17% mostró elevados niveles de expresión. En el caso de p14ARF, observamos pérdida de su expresión en un 26% de los casos, mientras que su expresión fue descrita en un 17% de los tumores analizados. Además, para cada uno de los dos genes, analizamos los tres principales mecanismos asociados a inactivación conocidos: mutaciones intragénicas, pérdidas de material cromosómico e hipermetilación de zonas promotoras, y evaluamos su influencia en la pérdida de expresión de los ARNm de p16INK4a y p14ARF. Nuestros resultados mostraron que, la hipermetilación de islas CpG en las zonas promotoras de p16INK4a y de p14ARF fue el principal mecanismo asociado a inactivación encontrado en nuestras muestras de cánceres primarios de mama, observándose en un 31% y en un 50% de los casos con niveles disminuidos de p16INK4a y de p14ARF, respectivamente. Las pérdidas de heterozigosidad fueron el segundo mecanismo de silenciamiento genético más frecuentemente observadas en los tumores con pérdida de expresión de p16INK4a y de p14ARF, presentándose en un 22% y en un 27% de los casos, respectivamente. Finalmente, la presencia de deleciones homozigotas fue escasamente descrita, y las mutaciones específicas de cada uno de los dos genes no fueron observadas. Por el contrario, en la gran mayoría de los tumores donde se detectaron niveles normales o sobreexpresión de ARNm, la ausencia de mecanismos inactivamente era la nota predominante. Además, intentamos clarificar si en carcinomas primarios de mama, las alteraciones de p16INK4a y de p14ARF era independientes o si, por el contrario, seguían un patrón conjunto y contaminante. Nuestros resultados mostraron que ambos tránscritos están a menudo co-alterados y no presentan un comportamiento indpendiente, ya que sus niveles de expresión se encontraban disminuidos o sobreexpresados de forma simultánea con una correlación estadísticamente significativa. Finalmente, cuando comparamos los resultados obtenidos en el análisis de las alteraciones moleculares en el ADN frente a los obtenidos en el estudio de las alteraciones de la expresión del ARN, observamos que, el estudio de las alteraciones en la expresión del ARN detecta un mayor número de casos positivos y una mayor relación con parámetros clínico-patológicos considerados de mal pronóstico que el análisis de los mecanismos inactivantes en el ADN.

Autor: SEVILLA NAVARRO JULIAN.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: NIÑO JESÚS.

Resumen: Los progenitores hematopoyéticos extraídos de sangre periférica han desplazado a los de médula ósea como fuente para el trasplante hematopóyetico autólogo. Sin entrar en otros puntos de controversia, es aún motivo de preocupación la seguridad de los donantes y el estudio de los efectos secundarios acaecidos a los mismos. De manera especial los niños han sido poco estudiados con respecto a la seguridad de todos los procedimientos relacionados con la obtención de PHSP, tanto la movilización con factores de crecimiento como el propio procedimiento de recolección de PHSP a través del separador celular. Conclusión del trabajo: La recolección de PHSP basada en la movilización con factores de crecimiento y leucaféresis es eficaz y segura en la población pediátrica. La cosecha final se puede predecir con el recuento de células CD34+ en sangre periférica al inicio de la leucaféresis y el volumen procesado por kilo de peso del niño, beneficiándose en muchos casos está del fenómeno de reclutamiento.

Autor: VALLE BENÍTEZ NOELIA.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: CENTRO DE BIOLOGÍA MOLECULAR SEVERO OCHOA.

Resumen: En este trabajo se ha demostrado que el parvovirus diminuto del ratón (MVM) es capaz de abandonar las células infectadas antes de la lisis por un mecanismo activo de transporte a través del complejo de poro nuclear. Se ha establecido además dos mecanismos de transporte diferentes dependientes de transformación celular. La fosforilación del dominio aminoterminal de la proteína mayoritaria de la cápsida, VP2 expuesta en la partícula llena de ADN, es una señal de salida (NES) en las células transformadas humanas donde la fosforilación es elevada. En las células procedentes de su hospedador natural, donde la fosforilación es menor, el virus sale del núcleo por la unión el dominio aminoterminal no fosforilado a la proteína no estructural NS2, que actúa como adaptador al transportador celular CRM1. Un segundo bloque de experimentos ha permitido determina la importancia de la fosforilación de la cápsida viral en la salida nuclear del virus, y la identificación de la kinasa celular que realiza esta función. Puesto que la vía de señalización celular implicada en la fosforilación de la cápsida está inducida en células cancerosas humanas, estos resultados son especialmente importantes para la comprensión a nivel molecular de la interacción privilegiada de los parvovirus con células neoplásicas humanas.

Autor: BELDA INIESTA CRISTÓBAL.
Año: 2002.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID.

Resumen: La resistencia a la quimioterapia es la causa fundamental de la ineficacia de los tratamientos frente al cáncer de pulmón de células no pequeñas (CPCNP) en estadios avanzados (IIIB y IV). Paclitaxel está considerado como uno de los tratamientos de primera línea en estos tumores. A pesar de ser un agente eficaz en los primeros meses de administración, el tratamiento a medio plazo invariablemente se asocia con una selección de clones celulares resistencias a su actividad. Se han descritos múltiples mecanismos de resistencia a éste fármaco pero uno de los mejor caracterizados in vitro es la aparición de mutaciones en la diana del fármaco, esto es una beta tubulina. En el único estudio clínico realizado hasta la fecha se asoció la presencia de mutaciones de beta tubulina (la mayoría localizados en el exón 4) con una ausencia completa de respuesta al paclitaxel en monoterapia. Aunque estos datos eran concordantes con los aportados en estudios in vitro posteriores trabajos sugerían que una mezcla de pseudogenes de beta tubulina podrían estar produciendo artefactos en los resultados obtenidos in vivo. Por estos motivos hemos secuenciado mediante PCR el exón 4 del isotipo más frecuente de beta tubulina (HM40) utilizando por un lado las parejas de primeras empleadas en el único estudio clínico existente (exónicas) y por otro parejas similares a las empleadas en los estudios que sugerían la presencia de pseudogenes de beta tubulina (intrónica). Los resultados de nuestro estudio con parejas intrónicas son similares a los obtenidos en el único estudio clínico publicado hasta la fecha. Aunque no se alcanza significación estadística la presencia de mutaciones en el exón 4 de beta tubulina se corresponde con una tendencia a la resistencia en todos los casos evaluados. Los resultados obtenidos con primers intrónicos son idénticos a los publicados utilizando este tipo de parejas. Al descartar el error técnico como causa de estas diferencias en función de los distintos tipos de primers, la explicación más razonable es la presencia de pseudogenes de beta tubulina que artefactan los resultados empleando exclusivamente parejas exónicas. Aun así no parece probable que la tendencia observada hacia la resistencia al paclitaxel en paciente con alteraciones en la secuencia de beta tubulina obtenida con parejas exónicas pueda ser explicada por el azar. Independientemente de que el análisis realizado demuestre que los hallazgos sobre beta tubulina sean mutaciones o pseudogenes no es posible rechazar de forma texativa los hallazgos sobre resistencia que emanan desde el estudio previo o del muestro. Se precisan nuevos estudios para explicar estos resultados ya que existen múltiples evidencias que implican a los pseudogenes en la actividad de los genes de los que se originan.