ONCOLOGIA, 4

Autor: CASADO COBO SUSANA.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Los tumores de cabeza y cuello suponen el 5% del total y generalmente se diagnostican en estadíos avanzados, siendo en estos casos el tratamiento standard la cirugía y/o radioterapia, según las características del Centro y paciente, con una supervivencia a los 5 años inferior al 20%. En los últimos años se incorpora la quimioterapia, aportando los tratamientos convinados una alta tasa de respuesta pero con una gran toxicidad. Sin embargo estos tratamientos no aumentan de una forma global la supervivencia, aunque sí es beneficioso en los pacientes respondedores. Se trata, pues, de identificar factores de respuesta que permitan seleccionar a aquellos pacientes respondedores. Teniendo en cuenta al cáncer como una enfermedad genética, y con el desarrollo emergente en las últimas décadas de la biología molecular, son numerosos los intentos en detectar las inestabilidades genéticas que se relacionan con el pronóstico tumoral tanto en su biología natural como en la respuesta de diferentes tratamientos. Sobre esta base analizamos 43 pacientes diagnosticados de carcinoma epidermoide de cavidad oral y orofaringe localmente avanzados, 3 oncoproteínas implicadas en la apoptosis: p53, PAX y BCL2. Los pacientes fueron tratados con quimioterapia (3 ciclos con cispletina y 5 fluoracilo, esquema alsarraf) y radioterapia con intención neoadyuvante y posterior cirugía. La respuesta al tratamiento de abducción fue del 83%, presentando los pacientes respondedores una supervivencia 8,9 veces mayor a los 80 meses que los no respondedores. Por inmunohistoquímica se obtuvo una expresión de p53, BAX y BCL2 del 47,5%, 19,5% y 10,8% respectivamente. No tuvimos relación significativa entre la expresión de las proteínas con la respuesta al tratamiento ni supervivencia. Probablemente las diferentes técnicas de determinación de las oncoproteínas, tejidos analizados, pequeño número de muestras incluídas … hacen que los prometedores resultados de laboratorio aún no puedan tener una traducción y aplicación rutinaria positiva en la clínica diaria.

Autor: GÓMEZ CUÑARRO MONTSERRAT.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Trabajo de investigación sobre un estudio observacional de carácter prospectivo y tipo transversal en el que se estudiaron ciento cincuenta enfermas de cáncer de mama y a sus familias, con un seguimiento medio de doce años en un área de la ciudad de Vigo. Se hizo un estudio de factores pronósticos en el cáncer de mama con una comparación del tamaño del tumor, de los ganglios de la axila, de los factores estrogénicos, de los tumores familiares, también el índice de pronóstico de Nottingham, tipo histológico, receptores hormonales, expresión de C-erbB-2, y antigogénesis tumoral. Las conclusiones más importantes son las siguientes: el tamaño tumoral, afectación de ganglios linfáticos axilares y el estadio TNM mostraron una buena correlación con la supervivencia global del cáncer de mama. Los receptores hormonales presentaron una relación significativa solamente en la secuencia global. Hubo una demora de diagnóstico superior a cuatro meses y un veintidós por ciento de las pacientes una demora superior a un año. Los cánceres de mama axila negativa se comportaron más agresivos que el resto.

Autor: GUERRERO CAUQUI ROSARIO.
Año: 2001.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: CADIZ.

Resumen: En este estudio hemos determinado las concentraciones sericas de tres marcadores tumorales en 109 mujeres sanas y 199 enfermas de cáncer de mama confirmados histológicamente como ductal infiltrante. Dichos marcadores han sido: Datepsina D, Ceruloplasmina y alfa-1 antitripsina. Las enfermas se han estudiado en base a su estadiaje tumoral. El tratamiento de los datos se realizó a partir de una base de datos con el programa estadístico SPSS y se llegaron a las conclusiones que la Catepsina D esta significativamente más elevada en las enfermas con cáncer de mama que en las mujeres sanas y lo mismo podemos decir con respecto a los otros dos marcadores estudiados, la Ceruloplasmina y la Alfa-1 antitripsina.

Autor: TEJERINA GÓMEZ ARMANDO.
Año: 2001.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE CÁDIZ.

Resumen: Las pacientes de cáncer de mama, cuando fallecen a causa de su cáncer a causa del tumor primario, sino a causa de las metástasis que éste pueda originar. El primer paso en la cadena metastática prácticamente siempre es la invasión ganglionar de la axila. Por tanto, es fundamental conocer que factores biológicos son aquellos que van a determinar si un tumor va a producir metástasis o no, ya en los estadios iniciales de su desarrollo. En el presente trabajo se analizaron 229 tumores de mama en estadio quirúrgico T1. Se incluyeron tumores de cualquier variante histológica, con la condición de que presentaran un único foco tumoral. Las pacientes no debían haber recibido ningún tratamiento previo, y en la pieza operatoria debían haber sido identificados al menos 10 ganglios axiliares. Como factores pronósticos de primera generación se estudiaron en dichos tumores los siguientes: tamaño, variedad histológica, grado histológico, grado nuclear y la presencia o no de ganglios exiliares invadidos en la pieza operatoria. Como factores pronósticos de segunda generación se estudió la expresión de receptores de estrógenos y de receptores de progesterona, y finalmente, como factores pronósticos de tercera generación, fueron estudiados la expresión del oncogen c-erbB-2, del gen oncosupresor p53, del antígeno de proliferación Ki 67, de CD44std y de complejos uPA-PAI. Se empleó para ello la técnica de la inmunohistoquímica y el método de la estreptavidina-biotinaperoxidasa sobre cortes de parafina. Se analizó la presencia o no de ganglios axilares invadidos en la pieza operatoria en función de todas las variables pronósticas arriba enumeradas. Para el análisis estadístico de los datos obtenidos, se utilizó en primer lugar un análisis univariante, mediante tests de correlación no paramétrica, y posteriormente se incluyeron los resultados en un análisis multivariante de regresión logística. En el análisis univariante se identificaron como factores significativamente asociados a la presencia de invasión axilar los siguientes: el grado histológico (p=0,013), un índice de Ki 67 superior al 10% (p=0,008) y la ausencia de expresión de CD44 (p

Autor: TOLEDO SANTANA GEMMA ROSA.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA - UNIVERSIDAD DE NAVARRA.

Resumen: El cáncer de pulmón es la causa más frecuente de mortalidad por cáncer en el mundo. Clásicamente, por las diferencias en su comportamiento clínico y respuesta al tratamiento, se consideran dos grandes grupos: carcinoma microcítico y no microcítico. Este último incluye a los carcinomas escamosos, adenocarcinomas y carcinomas de células grandes. Los dos primeros son los más frecuentes y aunque se agrupen, muestran rasgos epidemiológicos y de comportamiento diferentes. No se conocen con certeza las vías de carcinogénesis del carcinoma no microcítico. En los últimos años se han ido describiendo alteraciones moleculares en oncogenes y genes supresores en relación con la patogenia de este tipo de tumores. El brazo corto del cromosoma 3 (3p) es una de las zonas del genoma en que se describen frecuentes alteraciones (deleciones, pérdidas de heterocigosidad) en el cáncer de pulmón. Esto sugiere la existencia de candidatos a genes supresores de tumores en dicha región. Uno de éstos, el gen FHIT, localizado en 3p14.2, está alterado en muchos tumores sólidos incluyendo el carcinoma de pulmón. Incluye a una de las regiones frágiles del genoma (FRA3B) y se localiza junto al punto de rotura de la traslocación t(3,8) de los carcinomas renales familiares. Codifica una proteína de la familia de las HIT (tríada de la histidina) que parece tener un papel importante en el control de la proliferación celulares. Hemos estudiado, en una serie de 54 c., escamosos y 44 adenocarcinomas, la frecuencia de las pérdidas de expresión de la proteína Fhit y de LOH en 3p14.2 y la correlación entre ambas alteraciones; la relación de estas alteraciones con el tipo tumoral, datos clínicos, la expresión (mediante inmunohistoquímica) de algunas de las proteínas que se describen alteradas en el carcinoma no microcítico (p53, c-myc, bcl-2, c-mos, ciclina D1) y la relación con el indice de proliferación de estos tumores (ki67 y citometría en flujo). Para el estudio de las LOH amplificaciones (PCR) una zona amplia de la región 3p14.2 utilizando dos marcadores de microsatélites internos al locus de FHIT (D3S1300, D3S1234) y tres flanqueantes (D3S1210, D3S1312, D3S1313) del gen. Las LOH en 3p14.2 son frecuentes en ambos tipos histológicos. Aunque el 80% de los casos con LOH muestran ausencia de proteína, existe un 39% de casos en que no se asocian ambas alteraciones. Esto sugiere la existencia de otros mecanismos de inactivación proteica post-transcripcionales. La pérdida de expresión de la proteína Fhit, se observa en el 96% de los carcinomas escamosos y sólo en el 45% de los adenocarcinomas (p

Autor: SORIANO GIL-ALBARELLOS PABLO.
Año: 2001.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: HOSPITAL DE NAVARRA.

Resumen: OBJETIVO Tratamos de localizar factores que expliquen por qué dos pacientes que presentan un carcinoma mamario del mismo tipo histológico (Carcinoma ductal infiltrante) y el mismo estadio, presentan una evolución tan dispar que unas presentan recidiva y fallecen por la enfermedad, mientras otras permanecen muchos años sin presentar recidiva. MATERIAL Y MÉTODOS Hemos seleccionado todas las pacientes con carcinoma ductal infiltrante de mama estadío II (T2, N1, M0), intervenidas en el Hospital de Navarra y en la Clínica Universitaria antes de 1 de enero de 1992, y que presenten un seguimiento mínimo de 5 años. Hemos encontrado 87 pacientes válidas para el estudio. Recuperamos las historias clínicas y los bloques de material fijado y parafinado. Presentaron una media de 56 años de edad, con un seguimiento medio de 93 meses (mediana de 90 meses, rango de 14 a 338 meses). Se realizaron estudios histológicos para conocer el grado histológico, inmunohistoquímicos con analizador de imágenes para p53, MIB1 y receptores hormonales, inmunohistoquímico con cuantificación semicuantitativa para c-erb-B2 y contenido de DNA y fase-s mediante citometría estática. En cuanto a estudios estadísticos se realizaron correlaciones numéricas, comparaciones de medias con test de análisis de la varianza y la U de Mann-Whitney, comparación de variables cualitativas mediante Chi2, curvas de supervivencia para intervalo libre de enfermedad y supervivencia y un análisis multivariado de Cox. RESULTADOS P53 no mostró relación con ninguna de los factores pronósticos conocidos, ni con la supervivencia en estudios univariados, incluyendo las curvas de supervivencia, ni en el estudio multivariado. MIB1 no se presentó como factor pronóstico en los estudios univariados, salvo en sus cifras más altas, que presentaron relación con el intervalo libre de enfermedad y supervivencia global en las curvas de supervivencia. Se presentó como factor pronóstico independiente en el estudio multivariado. Por último c-erb-B2 se relacionó con significación estadística con factores de conocida importancia pronóstica, como el grado histológico, el tamaño tumoral y el número de ganglios afectados, pero sólo cuando se incluyen los valores intermedios (+- y 1+) entre los valores positivos. Además fue la variable de mayo impacto pronóstico independiente en los estudios multivariados, siempre considerando como casos positivos no sólo los casos 2+ y 3+, sino también los casos +-1 y 1+. La ploidia o contenido de DNA fue el otro factor pronóstico que presentó significación en los estudios multivariados. Las asociación de MIB1 negativo y c-erb-B2 negativo configura un subgrupo de buen pronóstico en este grupo que no precisa de tratamientos adicionales a los actualmente aplicados.

Autor: GÁNDARA PLAZA M. LUISA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FAC. MEDICINA AUTÓNOMA.

Resumen: Cot/tpl-2 quinasa es una MAP quinasa quinasa quinasa implicada en activación celular y proliferación. La deleción del extremo carboxi-terminal de Cot/tpl-2 desenmascara el potencial oncogénico de la proteína, sin embargo, por el momento se desconoce el mecanismo por cual se produce dicha transformación. En esta Tesis Doctoral, demostramos que la deleción del extremo carboxi-terminal de Cot wt incrementa la actividad Cot quinasa total mediante dos mecanismos diferentes. Cot truncada tiene una actividad quinasa específica 3,9 veces mayor que Cot wt. Además, la proteína Cot truncada, con una vida media de 95 min., tiene una expresión en estado estacionario 2,6 veces mayor que Cot wt, que muestra una vida media de 35 min. La combinación de estos dos sucesos, desencadena una actividad Cot quinasa específica total 10 veces mayor en las células transfectadas con Cot quinasa truncada comparadas con las transfectadas con Cot wt. En este trabajo además demostramos que tanto Cot wt como Cot truncada, son degradadas vías proteasoma en células intactas de un modo independiente de la ubiquitina. El proteasoma 20S degradada además, de forma más eficiente, a Cot wt que a Cot truncada traducidas y transcritas "in vitro", y lo que es más, el proteasoma también se encarga de la degradación de las formas inactivas de ambas quinasas. Por otro lado, la inserción del extremo carboxi-terminal de Cot wt en una proteína amarilla fluorescente (EYFP) confiere inestabilidad a la proteína y provoca la degradación de la proteína de fusión pEYFP-c-Cot 390-466 por el proteasoma. La proteína GST-c-Cot 390-466 es un sustrato para el proteasoma 20S "in vitro". Todos estos datos pueden explicar la capacidad transformante de Cot truncada.

Autor: MUÑOZ DE BENITO ROSA M..
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA, UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID.

Resumen: La Citometría de Flujo es una técnica dinámica que permite realizar un análisis multiparamétrico de células en suspensión. OBJETIVOS Realizar un análisis inmunofernotípico por C.F., de las subpoblaciones linfocitarias en biopsias ganglionares. Estudiar la ploidía y el ciclo celular. Analizar la Apoptosis y la expresión de bc-2, p53 y FAS. Estudio de la expresión del fenotipo MDR. Se han analizado 185 muestras (62 procesos benignos, 73 Linfomas No-Hodgkin (LNH), 28 Enfermedad de Hodgkin (EH) y 21 metástasis ganglionares. METODOLOGÍA Tras obtener la suspensión celular se incubaron las células con combinaciones de Anticuerpos monoclonales (Ac) marcados con fluorocromos ó con loduro de Propidio (IP). Panel con las combinaciones de Ac: CD45-CD14-HLADR; CD3-CD56/CD4-CD8; CD20-k-*; CD19-k-*; CD19-CD20-CD5; CD19-CD20-CD-10; CD5-CD23-CD10; CD3-CD-25-HLADR; CD3-alfa,beta-gamma*; CD3-CD4-CD8; CD45RA-CD45RO-CD4; CD45RA-CD45RO-CD8; CD15-CD30-CD45; CD16-CD56-CD3; CD3-CD95; CD19-CD95-CD5; MDR; bcL-2; p53; IP; Anexina. La adquisión se hizo en un citómero FACSort con los programas Lysis-II y Cell-Fit y el análisis con Paint-a-gate. RESULTADOS En muestras benignas la población mayoritaria está constituída por célula T no activada, predominando los linfocitos colaboradores vírgenes (CD4CD45RO). La mayoría de las células se hallan en fase G0-G1 del ciclo. Las Metástasis ganglionares se reconocen por la presencia de una población que no expresa CD45. Se halla aumentada la población de célula T activada CD3HLA-DR y las subpoblaciones Cd8 y CD3CD56. Se eleva el porcentaje de células en fase de Síntesis. En EH: Se observa un aumento de CD3CD25 y de la subpoblación de linfocitos colaboradores de memoria CD4D45RO, elevandose el porcentaje de CD3-TcRgamma*. Los LNH-B fueron identificados por restricción de cadenas ligeras de superficie con una sensibilidad del 87% y por un predominio de la población CD19. La población T reactiva presentaba mayor activación CD3HLA-DR, hallándose disminuído el porcentaje de CD4 y la subpoblación de linfocitos colaboradores de memoria, así como la población NL. La comparación de distintos grupos de riesgo del Indice Pronóstico Internacional demuestra un mayor porcentaje de linfocitos CD4 en los de bajo riesgo y un mayor porcentaje de células NK en los de Alto riesgo. El estudio del ADN en LNH demostró una mayor actividad proliferativa que en ganglios reactivos, y la comparación en distintos grados demuestra mayor el porcentaje de células en fase de síntesis en LNH Agresivos. El estudio de la Apoptosis, bcl-2, p53, CD95 y MDR no demostró diferencias significativas.

Autor: CASTRO CARPEÑO FRANCISCO JAVIER DE.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: En el presente estudio se ha analizado la expresión de la beta-catenina en 39 casos de carcinoma epidermoide de esófago que habían sido sometidos a un proceso diganóstico y terapéutico homogéneo, de acuerdo a un protocolo multidisciplinario entre los servicios de Oncología Médica, Anatomía Patológica y Cirugía general del hospital universitario de La Paz. Los patrones de expresión de la beta-catenina han sido correlacionados con parámetros clínicos como el estadio y localización del tumor, el consumo de alcohol y tabaco, el estado general y la respuesta a la quimioterapia; con parámetros patológicos, como el grado de diferenciación del humor y la expresión de las proteínas p53, cadherina-E, bcl-2 y ki-67. Además, todos los parámetros han sido analizados con respecto a la supervivencia y, en un grupo de casos, se ha secuenciado el exón 3 del gen de la beta-catenina (CTNNB1) donde se han descrito mutaciones que pueden ocasionar expresión anómala de la beta-catenina en diferentes tumores. Se ha encontrado expresión nuclear de la beta-catenina en 7 de los 39 casos analizados, lo que supone el primer carcinoma de tipo epidermoide donde se describe este patrón. Estos 7 casos de expresión nuclear tenían una asociación estadísticamente significativa con la expresión de la bcl-2 y la ausencia de la p53. Sin embargo, el estudio del exón 3 del gen CTNNB1 no evidenció mutaciones por lo que se sugiere que debe haber otros mecanismos implicados. Aunque no se ha alcanzado una significación estadística, en los pacientes con expresión nuclear de la beta-catenina se observaron una serie de rasgos clínicos y patológicos relevantes en cuanto a la localización del tumor, respuesta al tratamiento, supervivencia, expresión de la cadherina-E y de ki-67. Todo ello sugiere que la alteración de la expresión de la beta-catenina podría estar implicada en la carcinogénesis de un subgrupo de carcinomas epidermoides de esófago.

Autor: RODRÍGUEZ VILLALBA SILVIA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: MEDICINA.

Resumen: La enfermedad metastásica cerebral constituye una de las situaciones de peor pronóstico vital en Oncología clínica. La práctica totalidad de los pacientes que no reciben tratamiento tras el diagnóstico de metástasis cerebrales fallecerán por compromiso neurológico con una supervivencia de entre 1 y 3 meses, dependiendo ó no de la instauración de terapia corticoidea. La radioterapia holocraneal extiende este tiempo a 6 meses, existiendo un grupo de pacientes seleccionados en los que la intensidad de tratamiento promueve control local intracraneal con tasas entre el 80 y el 100%, al año, con efecto variable en la supervivencia. La Radiocirugía (RC) es una técnica radioterápica de alta precisión dosimétrica en la que se administra una dosis alta de irradiación generalmente en una única fracción, empleándose un sistema de esterotaxia que asegura la inmovilización, referenciación anatómica y por tanto la correcta localización. El análisis retrospectivo de las características y evolución de 125 pacientes tratados con RC (262 metástasis) entre Agosto de 1991 y Diciembre de 1996 en la Unidad de Radiocirugía y Oncología Radioterápica del Sanatorio San Francisco de Asís con seguimiento (clínico y radiológico hasta Marzo de 1999) identifica los siguientes datos epidemiológicos mayores: Setenta y cuatro vanores y 51 mujeres, con una mediana de edad de 54 años (29-77); 37% adenocarcinomas, 18% carcinomas ductales infiltrantes de manera, 10% carcinomas epidermoides, carcinomas indeferenciados y mealnomas cutáneos, 6% oat cell, de origen pulmonar e hipernefroma; y en el restante 3% se incluyó 2 sarcomas de partes blandas y 1 carcinoma urotelial de vejiga. En el momento de la realización de la RC un 78% de los pacientes presentaban exclusivamente la diseminación cerebral tumoral, incluyéndose pacientes con control del tumor primario (74 pacientes), y enfermedad diseminada con respuesta completa a los tratamientos recibidos (23 pacientes). En 65 pacientes se trató una única metástasis, en 30 pacientes 2 y en los otros 30 casos 3 ó más. En el 76% la RC fue el tratamiento inicial de las metástasis cerebrales; 95 de los 125 pacientes habían recibido RT holocraneal, 50 pacientes con dosis

Autor: GRANADOS CARREÑO ROSARIO.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Existen muchos criterios citológicos importantes en el diagnóstico de masas hepáticas por punción-aspiración con aguja fina (PAAF), pero ninguno de ellos es patogenomónico de un diagnóstico de benignidad o de malignidad primaria o metastásica. En este estudio analizamos el valor diagnóstico y la reproducibilidad de 28 parámetros citológicos en una muestra de 140 casos que incluyen 29 lesiones benignas, 49 carcinomas hepatocelulares (CHCs) y 62 tumores metastásicos, 49 de ellos adenocarcinomas (ACAs). Cinco observadores distintos evaluaron cada muestra y se analizó el acuerdo interobservador e intraobservador. En 39 muestras (5 benignas, 9 CHCs y 25 metástasis) se estudió el contenido de DNA de forma prospectiva mediante citometría de flujo (CMF). El análisis multivariante de los datos citológicos seleccionó el contorno nuclear irregular, los grupos tridimensionales y los núcleos atípicos sueltos como los criterios más estrechamente asociados a malignidad. La presencia de capilares separando células tumorales y el citoplasma granular estaban fundamentalmente asociados al CHC, mientras que los núcleos excéntricos y la necrosis eran los dos criterios clave para el diagnóstico de carcinoma metastásico. Los acuerdos intraobservador e interobservador fueron excelentes para el diagnóstico citológico final. Los criterios arquitecturales eran menos reproducibles que los criterios citológicos clásicos. La variabilidad intraobservador no se vio afectada por los años de experiencia del observador. La sensibilidad y la especificidad del test citológico fue excelente (100 y 97% respectivamente). Todos los casos benignos eran diploides, mientras que el 55,6% de CHCs y el 36% de tumores metastásicos mostraban una distribución aneuploide. La ploidía no discriminaba entre benigno y maligno, pero la fracción S proliferativa sí. Los niveles séricos de alfa-fetoproteína (AFP) no mostraban correlación con el contenido de DNA en los CHCs. Ningún parámetro del DNA celular fue capaz de discriminar entre tumora primario o metastásico.

Autor: AZNAR BENITAH SALVADOR.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMEDICAS-UAM.

Resumen: Las GTPasas Rho forman una familia de proteínas que en respuesta a diversos estímulos regulan aspectos esenciales de la estructura y la señalización de la célula. Estas proteínas están directamente involucradas en la remodelación del citoesqueleto de actina, y por lo tanto, de la morfología celular, en la adhesión celular, la señalización a través de componentes de la matriz extracelular, la motilidad celular, la regulación de la proliferación y de la apoptósis, la citoquinésis, el tráfico entre estructuras membranales intracelulares y la regulación de la transcripción. Además, en los últimos años un gran número de trabajos han descrito una implicación de varios miembros de la familia Rho en la transformación neoplástica y el desarrollo y progresión de diferentes tipos de tumores humanos. En este trabajo describimos que RhoA, Rac1 y Cdc42 regulan la actividad transcripcional de Stat3 y Stat5 en varias líneas celulares de origen fibroblástico y epitelial. RhoA induce la fosforilación en tirosina de Stat3 (Y705) y Stat5a (Y696), pero no Stat5 (Y699), lo que permite la homodimerización, translocación al núcleo y unión a DNA de ambos factores de transcripción. En el caso de Stat5 hemos comprobado que la fosforilación en tirosina de Stat5a se induce por LPA a través de RhoA. La fosforilación en tirosina de Stat3 y Stat5a inducida por RhoA es en ambos casos a traveés de la tirosina quinasa JAK2. Además, en el caso de Stat3 hemos observado que RhoA activa una ruta linear Lck-JAK2 que desemboca en su fosforilación en tirosina y posterior activación transcripcional. En cambio, el efecto de RhoA sobre la fosforilación en serina de Stat3 y Stat5a es completamente opuesto. RhoA induce la fosforilación de Stat3 en serina (S727) a través de la ruta MEKK1/JNK1, pero no de ERK1/2 o p38, lo que se traduce en una potenciación de la actividad transcripcional del factor de transcripción. Sin embargo, RhoA promueve la defosforilación de los resíduos de serina de Stat5a 726 y 780 que tiene como resultado un incremento de su actividad transcripcional. Si bien hemos observado que tanto ERK1/2 como p38 tienen un efecto sobre la fosforilación de Stat5a en serina y su actividad transcripcional, éstos efectos son independientes de RhoA. A su vez, la ruta de JNK no ejerce ningún efecto sobre la actividad transcripcional de Stat5a. Por lo tanto, RhoA regula la actividad de Stat5a mediante la defosforilación en serina a través de una ruta aún no identifica. Por último, hemos comprobado que la actividad transcripcional de Stat3 es esencial para el crecimiento independiente de anclaje inducido por RhoA en células humanas. Con respecto al papel de la regulación de la transcripción en la transformación celular inducida por las GRPasas Rho, también hemos comprobado que RhoA, Rac1 y Cdc42 inducen la expresión de la proteína ciclooxigenasa-2 a nivel transcripcional a través del factor de transcripción NFkB, pero no Stat3. La expresión de la proteína COX2 es importante para la proliferación celular inducida por RhoA, Rac1 y Cdc42 dado qu el tratamiento de células epiteliales que sobreexpresan versiones oncogénicas de las GTPasas con dos antiinflamatorios no esteroideos, sulindac y NS-398, inhibe la proliferación celular e inducen apoptósis, sin ningún efecto sobre la línea celular parental. Además, el fármaco NS-398 administrado intraperitonealmente a ratones un/un inhibe de forma muy significativa el crecimiento tumoral de células tranformadas por RhoA oncogénico. Por último, hemos comprobado que el efecto antiproliferativo y antitumoral de ambos fármacos no se debe exclusivamente a la inhibición de la COX2, ya que la ruta de NFkB también esta inhibida a las mismas dosis utilizadas. Por lo tanto, la ruta de NFkB/COX2 es esencial para el desarrollo tumoral promovido por RhoA y pueden constituir dianas terapéuticas en aquellos tumores en los que las GTPasas Rho sean importantes.

Autor: LÓPEZ BERMEJO ABEL.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE MADRID.

Resumen: El objetivo de este estudio fue investigar la expresión y regulación de las IGFBP-rP números 1, 2 y 3 en células prostáticas humanas en cultivo, normales y tumorales, y analizar las acciones biológicas de las IGFBP-rP números 1, 2 y 3 en estas células. Para tal fin se realizaron: A,- Estudios de expresión del IGFBP-rP 1, 2 y 3 en células epiteliales prostáticas humanas, normales (HPEC), inmortalizadas (P69) y tumorales (M12, LNCaP, DU145 y PC-3). B,- Estudios de regulación de la expresión de IGFBP-rP1, 2 y 3 por factores inhibidores (TGF-beta y ácido retinoico) y estimuladores (IGF-I). C,- Estudios de senescencia replicativa en células HPEC. D,- Estudios de proliferación de células epiteliales prostáticas humanas en respuesta a: 1,- Tratamiento con IGFBP-rP2 recombinante humana (IGFBP-rP2rh). 2,- Inducción de la expresión de IGFBP-rP2 mediante transfecciones no permanentes de su ADNc. Se concluye que: A,- Las células epiteliales prostáticas humanas expresan IGFBP-rP número 1, 2 y 3, por lo que dichas proteínas deben ejercer acciones autocrinas, paracrinas, o ambas en la próstata humana. B,- La IGFBP-rP1 y la IGFBP-rP2 parecen actuar como factores senescentes, pues su expresión aumenta marcadamente durante la senescencia replicativa de estas células. C,- La IGFBP-rP1 puede actuar adicionalmente como una proteína supresora del crecimiento tumoral, dada su expresión diferencial en células normales y su regulación positiva por factores inhibidores. D,- De manera similar, la IGFBP-rP2 puede actuar como un factor inhibidor de la proliferación de estas células. E,- La IGFBP-rP3 puede actuar como un protooncogén, dada su expresión diferencial en células tumorales y su regulación negativa por ácido retinoico. F,- Las IGFBP-rP1, 2 y 3 pueden acutar como mediadores de las acciones biológicas de conocidos factores reguladores del crecimiento celular. De manera alternativa, la expresión de estas proteínas deben ser silenciada para que los factores reguladores ejerzan sus acciones biológicas.

Autor: BECERRA GARCÍA DIEGO.
Año: 2001.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMETNO DE RADIOLOGÍA Y MEDICINA FÍSICA.

Resumen: En la actualidad, los datos disponibles sobre el momento de inicio del tratamiento clínico con tamoxifeno y sus efectos sobre la supervivencia son tan limitados que impiden el dilema sobre su administración previa, simultánea o posterior a la iniciación del tratamiento con radiación ionizante. Además, los resultados de laboratorio que han examinado este posible efecto son contradictorios sin que se haya podido establecer una secuencia de tratamiento más favorable que otras. Por ello, utilizando como modelo para el estudio de tumores humanos las líneas celulares tumorales establecidas MCF8 BUS, MCF7 BB, T47D B8 y EVSA-T, se plantea este trabajo de investigación, orientado al estudio del efecto de la radiación ionizante sobre el comportameinto de la cinética de proliferación celular y la supervivencia, estimada mediante el ensayo clonogénico, de líneas celulares de cáncer de mama tratadas de forma única, simultánea o sucesiva con estrógenos y antiestrógenos; investigar los efectos que a nivel molecular representan los tratamientos secuenciales y combinados de radiación ionizante y hormonas/antihormomas, estudiando tanto el daño producido sobre el ADN como los mecanismos de control de ciclo celular tras el tratamiento. El análisis y discusión del conjunto de las observaciones experimentales nos permite concluir que las células de cáncer de mama MCF7 BUS, paradigma de sensibilidad y dependencia hormonal, enlentecen su crecimiento celular cuando son cultivadas en el medio carente de estrógenos, lo cual resulta en un aumento del tiempo de duplicación y se corresponden con un acúmulo de células en fases no proliferativas del ciclo celular. Este fenómeno se caracteriza por su reversibilidad, dado que la adición de estradiol al medio supone un estímulo proliferativo, con incremento del ritmo de crecimiento, disminución del tiempo requerido para la duplicación del número celular y entrada celular en el ciclo proliferativo. En las células MCF7 que contienen p53 en su forma nativa, el cultivo en medio carente de estrógenos no se acompaña de incremento de los niveles de la proteína, lo cual sugiere que la proteína p53 no está implicada en la parada del ciclo celular producida por la ausencia de estradiol. Por el contrario, el tratamiento con hidroxi-tamoxifeno induce un incremento en los niveles de la proteina p53 asociado a la parada en el ciclo celular en fase GO/G1, lo cual sugiriere la implicación de este mecanismo en la acción del antiestrogeno. La ausencia de estradiol o la presencia de OH-TMX en el medio completo no conduce, en ninguna de las estirpes de células MCF7 estudiadas, a la muerte por apoptosis. La sensibilidad a la radiación de la línea celular MCF7, estimada como FS 2Gy mediante el ensayo clonogénico, es significativamente mayor cuando las células son cultivadas en medio que contiene estrógenos que cuando son cultivadas en un medio carente de estradiol, lo que sugiere un efecto radioprotector a la privación estrogénica. Por el contrario, no se han observado cambios significativos en la radiosensibilidad celular tras el tratamiento por el antiestrógeno, a pesar de que el hidroxi-tamoxifeno produce cambios en la morfología celular, en la capacidad de adherencia al soporte y en la cinética de proliferación. La linealidad de la relación entre dosis de radiación y número de roturas dobles de cadena de ADN, expresión del daño inicial radioinducido, se mantiene para cada línea celular irradiada ya sea en presencia o en ausencia de estradiol o con tratamiento antihormonal. En el caso de las células de cáncer de mama de probada dependencia hormonal, el tratamiento con estradiol (inducción de proliferación) da lugar a un aumento de las roturas dobles de cadena de ADN respecto a aquellas otras que se cultivan e irradian en ausencia de la hormona (estado quiescente). Por el contrario, durante el tratamiento con el antiestrógeno hidoxi-tamoxifeno no se observan diferencias significativas en el daño inicial radioinducido cuando se compara con células no sometidas a tratamiento antihormonal. Las modificaciones en la cinética de proliferación celular, la expresión génica y los cambios metabólicos inducidos por los estrógenos, pueden ser condicionantes de la sensibilidad a la radiación. La ausencia/presencia de estrógenos se ha manifestado en nuestro trabajo y modelo experimental, como el factor más importante modulador de la radiosensibilidad, circunstancia de indudable valor clínico, que debería ser considerada en los protocolos de irradiación tumoral. Dentro de este contexto, el tratamiento concomitante de las pacientes afectadas de cáncer de mama con tamoxifeno y radiación ionizante debe tener en cuenta la acción del antiestrógeno per se dado que no se evidencia ninguna interacción entre ambos tratamientos.

Autor: BARCO SÁNCHEZ ANTONIO.
Año: 2001.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: OBJETIVOS Determinar el comportamiento individual y conjunto de tres parámetros biológicos que se alteran de un modo sistemático con la actividad del cáncer de mama (CM): ceruloplasmina (Cer.), alfa-1-antitripsina (A1AT) y colesterol (Col.). MATERIAL Y MÉTODOS Es un estudio de casos y controles en el que se comparan los resultados obtenidos por las tres variables en 142 enfermas postmenopáusicas con CM., confirmado histológicamente, de las cuales 60 están en remisión clínica completa prolongada (R.C.P.) y 82 en actividad clínica (AC). La Cer., y la A1AT se determinan por nefelometría y el Col. Por fotocolorimetría enzimática. Se eligieron estas tres variables porque las tres se modifican por el CM y no están relacionadas entre sí. Se emplearon los programas estadísticos SPSS y EXCEL. Con este último se construyó la ecuación de regresión logística multivariable (RLMV). RESULTADOS Las medidas de Cer., A1AT y Col., son 308.95, 205.35 y 169.87 (mg/dl) respectivamente en mujeres sanas; 409.81, 457.73 y 196.60 (mg/dl) en enfermas en remisión completa; y 617.95, 605.92 y 207.86 (mg/dl) en enfermas en actividad cínica (p

Autor: FERNÁNDEZ AMURGO YOLANDA.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Autor: MOLDES BOULLOSA JULIO.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Este trabajo de investigación aporta nuevas perspectivas celulares, histologicas e inmunohistioquímicas en el conocimiento de los diferentes tumores trioideos. Se realiza un estudio retrospectivo de 155 casos correspondientes a las siguientes categorías anatomopatologicas, nidos de células solidas, hiperplasia difusa, hiperplasia nodular, adenoma folicular, adenoma oxifilico, carcinoma papilar, carcinoma folicular, carcinoma medular, carcinoma indiferenciado, y carcinoma trabacular hialinizante, todos del archivo de Anatomía Patológica de Hospital Clinico Universitario. Se estudiaron los siguientes anticuerpos en todos los grupos: Tiroglobulina, Calcitonina, Cromatogramina, Citoqueratina, CEA, MIB-1, p53 y bcl-2. Los resultados obtenidos se le aplico un estudio estadístico del programa informático SPSS. Se demostró que los Nidos celulares solitarios tienen una actividad proliferativa y es un fenotipo de cálula multipotencial. La existencia de una relación directa entre la agresividad biológica reconocida para los diferentes tumores tiroideos y la actividad proliferativa. La baja expresión del bcl-2 y p53 y la expresión del MIB-1 es estadísticamente significativa en los tumores diferenciados del trioides. La expresión de la P53 en tumores más agresivos puede ser útil en el diagnóstico diferencial de los tumores pobremente diferenciados y los tumores indiferenciados de la glándula tiroides.

Autor: MAIZ BESCANSA JACOBO.
Año: 2001.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: Los dermatofibrosarcomas protuberan (DFSP), son tumores fibrohistocitarios de la piel y tejidos blandos superficiales, cuyo comportamiento biológico es difícil de predicir con los estudiso histopatológicos de rutina. La utilización de marcadores de biología tumoral en tumores malignos tales como los índices de proliferación celular o la determinación del oncogén p53 pueden proporcionar una mayor información cerca del probable curso clínico y también en la elección del tratamiento a seguir. Se realiza una revisión de las técnicas inmunohistoquímicas utilizadas y una puesta al día del tumor (DFSP) objeto del estudio. ESTABLECIMIENTO DE LA HIPÓTESIS 1,- Probable comportamiento clínico del DFSP y su capacidad metastizante en relación con el índice de proliferación celular. 2,- Una mayor malignidad biológica en relación con la expresión de oncogén p53. Siendo esto cierto se podría establecer como una definida y objetivable correlación de estos dos factores con el comportamiento biológico y pronóstico de los DFSP. MATERIAL Y MÉTODOS Se utilizan 72 DFSP y anticuerpos Anti-Ki67 y Anti PCNA (para valorar el índice de proliferación celular), monoclonal MIB-1 (para el antígeno nuclear Ki67), monoclonal PC 10 (para valoración del PCNA) y el anticuerpo monoclonal MU 195 (para determinar el oncogén p53), con controles cualitativos y cuantitativos para las técnicas inmunohistoquímicas realizadas. La obtención de datos clínicos se lleva a cabo en esos 72 pacientes revisados en relación a la presencia de recidivas, desarrollo de metástasis, fecha de la última revisión y tiempo de seguimiento clínico. El análisis estadístico fue referenciado por resultados en frecuencias absolutas y %, así como el estudio de la supervivencia. RESULTADOS Se describen los resultados de los datos clínicos y de seguimiento (diangóstico, tratamiento, y evolución), en un período de 28 años y también los resultados obtenidos con las técnicas de inmunohistoquímicas de proliferación celular y de la expresión de oncongén p53. Estos últimos son los siguientes: se consideran resultados valorables el 83,5% de los 72 DFSP para las tinciones MIB-1 y PCNA, de los que sólo el 10% dan un índice alto de proliferación celular, mientras que en las 13 recidivas recogidas ese índice alto de proliferación asciende al 69% y en las 3 metástasis el 100%. En relación a la tinción del oncogén p53 son valorables también el 83,5% para la totalidad de los 72 DFSP con una positividad del 26,5%, que asciende al 61,5% en las 13 recidivas y al 67% en las 3 metástasis. Estadísticamente la posibilidad de desarrollar recidivas en relación a un índice de proliferación elevado (MIB-1) es 4,8 veces superior a los grados bajos y la posibilidad de desarrollar metástasis es 2,3 veces superior. En relación al oncogén p53, su positividad da un riesgo relativo de aparición de recidivas 10,8 superior a los casos negativos, y 10,1 veces superior en la aparición de metástasis. Las curvas de supervivencia acumuladas son más elevadas en los p53 negativos (Test de Long. Rangk, p:0,0110). DISCUSIÓN La utilización de técnicas inmunohistoquímicas para la cuantificación del índice de proliferación y la cuantificación de la expresión del oncogén p53, abre mayores perspectivas para establecer el comportamiento biológico de lso DFSP, relacionando una mayor expresión de los mismos con un mayor riesgo de agresividad tumoral. CONCLUSIÓN El pronóstico de los DFSP tiene directa relación con la cuantificación inmunohistoquímica del índice de proliferación celular y la expresión del oncogén p53.

Autor: NOHALES TAURINES M. GLORIA .
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Los tumores vesicales superficiales constituyen un interesante grupo de estudio dado que poseen un comportamiento biológico y potencial maligno muy dispar, al que se une la problemática de la subjetividad y baja reproductibilidad intra e interobservador, inherentes ambos al diagnóstico anatómo-patológico sobre el que asienta el pronóstico y tratamiento del enfermo. Todo ello hace imprescindible la búsqueda de nuevas técnicas y marcadores que aporten reproductibilidad y objetividad a dicho diagnóstico. En nuestro estudio, además de valorar la importancia de los factores pronósticos clásicos, se valora la utilidad de los datos aportados por la citometría de imagen en un intento de subsanar las deficiencias antes mencionadas. Hemos realizado un estudio retrospectivo sobre una serie de 82 pacientes diagnosticados de tumor vesical superficial entre los años 1989 y 1993. Los pacientes fueron seleccionados bajo estrictos criterios de inclusión que incluyen, la presencia de muestra histológica representativa con un seguimiento mínimo de 3 años y ausencia de Carcinoma. "In situ" en las muestras analizadas. Sobre la muestra tumoral de cada pacientes se realizó el estudio anatómo-patológico clásico (grado histológico y nivel de infiltración), así como, el análisis de ploidía del ADN por medio de citometría de imagen. El estudio citométrico se realizó con el programa de análisis de imagen Ploidy 4.1 diseñado en el entorno del procesador SAMBA 2005 (Alcatel-TITN, Grenoble, France), que permitió cuantificar la cantidad global del ADN de los núcleos teñidos según el método de Feulgen. En nuestra serie predominó el sexo masculino (72:10), 8 pacientes fueron clasificados como carcinoma transicional grado I, 58 fueron clasificados como grado II y 16 fueron grado III. Cuando se valoró el nivel de infiltración tumoral, 50 pacientes presentaron nivel de infiltración a tejido conectivo subepitelial (pT1) y 32 se limitaron a la mucosa vesical (pTa), predominaron los tumores mayores de 3 cm (42), múltiples y papilares (76). Con respecto a los tipos de ploidía obtenidos tras el análisis de nuestra serie, 16 (19,5%) fueron diploides, 6 (7,3) hiperdiploides, 23 (28%) tetraploides y 37 (45,2%) hipertetraploides. Para el tratamiento estadístico de los datos se realizó un análisis univariante de los factores pronósticos clásicos y citométricos seguido de un análisis multivariante en forma de Regresión Logística dado el carácter predictivo de nuestro estudio. En el estudio univariante de los factores clásicos solo el tamaño tumoral superior a 3 cm tuvo valor de p con significación estadística (p=0,046). Entre los parámetros citométricos morfométricos destacó el área media nuclear (AMN) obteniéndose que los tumores recidivados y pT1 muestran AMN superiores a los no recidivados y pTa. Los tumores grado III mostraron AMN superiores a la de los grado II y I. El AMN de los tumores aneuploides fue superior a la de los tumores diplodes. En el análisis multivariante de los parámetros clásicos se seleccionaron como variables independientes, la edad del paciente, el tamaño tumoral y la multiplicidad tumoral. La introducción en el modelo matemático de las variables explicativas correspondientes a los parámetros citométricos obtuvo como variables indpendientes, el índice de proliferación y el grado de hiperploidía. Por último, se realizó un análisis multivariante con una combinación de ambos tipos de parámetros resultando como variables independientes, la edad del pacientes, el índice de proliferación y la multiplicidad tumoral, consiguiéndose un rendimiento predictivo del modelo superior al obtenido con los dos modelos previos. Estos resultados nos permitieron crear grupos de riesgo de recidiva. El grupo de riesgo de recidiva bajo estaba constituido por pacientes con 1-2 tumores y/o índice de proliferación inferior a 10%, indpendientemente de la edad. El grupo de riesgo medio lo formaban los pacientes con mas de 2 tumores, ó índice de proliferación superior al 10%, de forma que la edad del enfermo superior a 75 años multiplica por 4 el riesgo de recidiva. El grupo de riesgo elevado estaba representado por pacientes con más de 2 tumores, índice la proliferación superior al 10% y la edad superior a 75 años multiplicaba por 9 la probabilidad de recidiva tumoral. Consideramos que la citometría de imagen constituye una herramienta de ayuda adicional al estudio anatomopatológico sin que por el momento pueda sustituirla.

Autor: GUILLOT MORALES MÓNICA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Los objetivos de esta tesis son determinar la posibilidad de detectar ADN tumoral sérico en pacientes intervenidos de CANM estadio I-IIIA y estudiar las mutaciones del gen de la Beta-Tubulina en el ADN genómico como posibles factores pronósticos. Se estudió una serie de 52 pacientes intervenidos de CPNM estadio I-IIIA en el MUGTIP. Se aisló sangre periférica d elos 52 pacientes y de 112 individuos sanos utilizados como control. Se procedió a: 1,- Aislar y cuantificar ADN sérico mediante un espectrofotómero. 2,- Amplificación del gen de la buturina mediante PCR para estudiar mutaciones de ARHO gen por secuenciación directa de los productos de la PCR. Se detectó ADN tumoral en el suero de todos los pacientes con una concentración media de 7,4 ug/mL frente a una concentración media de 3,6 mg/mL en individuos sanos (p=0,0001). El estudio de mutaciones de la btublina mostró la presencia de mutaciones en 21/52 pacientes (40%). Todas las mutaciones se localizaron en el exón 4 y localizadas en dos regiones principales, región 1 (casones 102-264) y región 2 (codones 277-425). Las mutaciones en la región 1 mostraban una tendencia hacia una peor supervivencia, frente a las mutaciones en la región 2 que tenían tendencia a una mejor supervivencia.