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APROXIMACION AL CONCEPTO DE FENOTIPO OVINO RESISTENTE A LA GASTROENTERITIS PARASITARIA PRODUCIDA
POR TRICOSTRONGILIDOS EN RAZA CHURRA. Autor: PEREZ GARCIA JORGE. Año: 2003. Universidad: LEON. Centro de lectura: FACULTAD DE
VETERINARIA. Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
Resumen: El primer paso para poder selecionar animales más resistentes a los tricostrongílidos consiste en desarrollar un método que sea capaz de evaluar la enfermedad. Además es necesario
conocer los parámetros genéticos (heredabilidad y correlaciones genéticas) antes de incluir ese carácter en un programa de selección. Con estos objetivos se desarrollaron tres estudios de distinta naturaleza, de los que se obtuvieron las siguientes
conclusiones.
La mayoría de los parámetros utilizados para caracterizar fenotípicamente la resistencia genética a infecciones por tricostrongílidos en las condiciones de nuestro trabajo, han estado influidos por la época del año (MES) y el rebaño (REBAñO). El
hecho de que el intervalo entre la desparasitación y el siguiente muestreo (IF0F1) haya influido significativamente en muchos de los parámetros calculados, indica la elevada influencia que las variaciones metodológicas pueden tener en la selección
de caracteres.
De todos los parámetros estudiados, sólo los recuentos de huevos en heces (LHT0 y LHT1), el pepsinógeno, la eosinofilia periférica y los niveles IgA tienen importancia en el fenotipo asociado a esta parasitosis. Las heredabilidades obtenidas
para estos parámetros han sido bajas (0,12 para LHT0; 0,087 para LHT1 y 0,009 para la eosinofilia periférica ) o medias (pepsinógeno 0,21; IgA 0,19).
Cuando se realiza un estudio longitudinal a lo largo de 210 días, las mejores repetibilidades se obtienen para la mayoría de las variables en el intervalo 104-133 d.p.i. (0,29-0,42). Esto indica que éste es el mejor momento para obtener
información necesaria para caracterizar fenotípicamente animales por su grado de parasitación.
Se puede mejorar la discriminación entre los grupos parasitado y desparasitado mediante análisis de regresión logística binaria, obtenido una alta sensibilidad (99,5%) y especificidad (97,2%) entre el día 104 p.i. y el 166 p.i.
La selección de animales con altos y bajos recuentos de huevos en las heces en condiciones de campo sirve para diferenciar animales resistentes de susceptibles. Cuando posteriormente se someten a una infección experimental con Teladorsagia
circumcincta se puede confirmar que difieren significativamente en la eliminación de huevos en las heces, siendo 2,6 veces mayor en los animales que a priori fueron considerados susceptibles.
Se han encontrado diferencias estadísticamente significativas en la eliminación de huevos, los niveles de IgA, los valores de pepsinógeno y la eosinofilia entre los días 10-30 postinfección en animales resistentes y susceptibles. Las
principales características que han definido a los animales resistentes han sido: la prolongación de la prepatencia y la disminución del valor máximo de eliminación de huevos en heces; los títulos de la IgA específicas en sangre más altos; los
niveles de pepsinógeno más bajos y una marcada eosinofília periférica.
A pesar de las claras diferencias entre grupos, la probabilidad de predecir si un animal individualmente pertenece al grupo resistente o susceptible es muy baja. ENFERMEDADES INFECCIOSAS IMPORTADAS POR INMIGRANTES EN CATALUÑA . Autor: ROCA SAUMELL CARME. Año: 2003. Universidad: BARCELONA. Centro de lectura: MEDICINA.
Resumen: Durante los últimos treinta años, diversos colectivos de población africana se han establecido en Catalunya, y el Maresme ha sido una de las comarcas donde la inmigración ha sido cuantitativamente remarcable.
En 1982 se formó la "Unitat de Medicina de la Immigració i Tropical" (UMIT) del Hospital de Mataró, con el objetivo de dar respuesta a la creciente demanda de atención sanitaria de los inmigrantes de la zona, que al estar en situación jurídica
irregular no tenían acceso (en aquellas época) a la red sanitaria pública. La UMIT estuvo en funcionamiento hasta el año 2000.
Los trabajos presentados en esta tesis pretenden profundizar científicamente y metodológicamente en: las enfermedades importadas por los inmigrantes estudiados, en las diferencias clínicas entre la presentación de las mismas patologías
importadas por viajeros y por inmigrantes, y finalmente, en su impacto en la salud pública de la población receptora.
Durante el periodo 1984-1994 completaron el protocolo de estudio de la UMIT 1.321 inmigrantes africanos. Sus características principales fueron: mayoritariamente era hombres, jóvenes y originarios de países subsaharianos; en situación laboral
inestable, irregularidad administrativa y sanitaria y desonocimiento de los idiomas europeos. El dolor abdominal fue el motivo de consulta más frecuente. Las enfermedades más prevalentes: infecciones/parasitosis, patologías del aparato digestivo y
hematológicas.
También se estudian 285 casos de uncinariasis importada diagnosticados en el Hospital de Mataró durante el periodo 1984-1999.
Se compara la presentación clínica de una misma parasitosis importada, la esquistosomiasis por Schistosoma mansoni, entre viajeros e inimigrantes de zonas endémicas. Se resalta el distinto abordaje diagnóstico y terapéutico.
Se incluye el estudio de 23 casos de neurocisticercosis importada, tanto por viajeros como por inmigrantes procedentes de países endémicos, al percibir un aumento de los diagnósticos en nuestro medio, sobretodo a expensas de un incremento de
los inmigrantes procedentes de América Latina. Los casos fueron diagnosticados en el Hospital Clínic de Barcelona y en el Hospital Parc Taulí de Sabadell.
Finalmente se hace una aproximación a las repercusiones en la salud pública de las enfermedades importadas por inmigrantes. El estudio concluye que son las enfermedades de distribución cosmpolita y asociadas a situaciones de precariedad
económica y marginación social (es decir, las enfermedades derivadas de la pobreza) las que suponen un mayor riesgo de transmisión a la población del país receptor. Las políticas globales de ayuda a la inserción socioeconómica de la población
inmigrante y la colaboración sanitaria internacional repercutirán positivamente en la salud de la población general. EPITOPOS INMUNODOMINANTES DE TRICHINELLA . Autor: ESCALANTE GUZMÁN MARCELA. Año: 2003. Universidad: SANTIAGO DE
COMPOSTELA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: LABORATORIO DE PARASITOLOGÍA, FACULTAD DE FARMACIA.
Resumen: Este trabajo es la continuación de estudios sobre la caracterización
de los epitopos reconocidos por un panel de anticuerpos monoclonales anti-trichinella spiralis producidos en nuestro laboratorio. En primer lugar se determinó que los anticuerpos monoclonales US1 y US2 reconocen un epitopo del cual fosforilcolina
form a parte. En cuanto a los anticuerpos monoclonales US4 y US6, US7 y US10 se concluyó que reconocen un epitopo que contiene tivelosa.
La caracterización fina de los epitopos reconocidos por los anticuerpos monoclonales US5 y US9 demostró que el primero reconoce un epitopo proteico-conformacional y el US9 reconoce un epitopo compuesto por 8 aminoácidos.
En cuanto al análisis de molécula del parásito implicadas en la generación de inmunoglobulina E, se demostró que posiblemente su naturaleza es proteica y que entre ellas podrían estar algunas proteasas.
Finalmente se realizó un estudio sobre el ensayo de elisa como método de serodiagnóstico de la triquinelosis. Para ello se analizaron cuatro tipos de antígenos: el extracto larvario total, el extracto larvario total o-desglicosilado (ambos
analizados en ensayos de elisa indirecto)y los antígenos TSL-1 en Elisa indirecto y en Elisa capturada en el anticuerpo monoclonal US4. Los resultados indicaron que los antígenos TSL-1 en Elisa captura son los que mejores resultados dan en términos
de sensibilidad y especificidad.
TOXOCARA CANNIS: ESTUDIO DE FACTORES BIOLÓGICOS E INMUNOLÓGICOS RELACIONADOS CON SU MIGRACIÓN Y
DESARROLLO DE TÉCNICAS DE DIAGNÓSTICO MOLECULAR . Autor: OLLERO BACEIREDO MARÍA DOLORES
. Año: 2003. Universidad: SAN PABLO CEU. Centro de lectura: F. CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD
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Resumen: En este trabajo se ha realizado un estudio de migración larvaria ocular y cerebral de Toxocara canis en ratones de la cepa BALB/c. Se han
administrado diferentes dosis de huevos tanto en una única dosis como en varias dosis semanales. Las larvas fueron capaces de alcanzar estas localizaciones independientemente de la dosis de huevos administrada, detectándose un mayor número al
aumentar la dosis ingerida, sin embargo, la capacidad de migrar a ambas localizaciones es mayor en los ratones que recibieron un menor número de huevos. Las repetidas exposiciones al parásito no previenen en este modelo la llegada de las larvas a
las localizaciones estudiadas. La cinética similar observada en la migración ocular y cerebral parece confirmar una relación entre la llegada a ambas localizaciones. Por otro lado, se estudio la respuesta inmune humoral desarrollada detectándose un
nivel de anticuerpos elevado, que se mantuvo durante todo el estudio independientemente de la dosis de huevos ingerida y la pauta de administración. En aquellos ratones que recibieron menor número de huevos se observó un retraso en la aparición de
anticuerpos. Los niveles de Ig G y subtipos de Ig G se mantienen elevados durante todo el estudio, siendo la Ig G1 la subclase predominante detectándose hacia el final del estudio niveles muy bajos de Ig G2a. Por último, en el presente trabajo, se
planteó el diseño de cebadores específicos frente a Toxocara canis Se diseñaron dos parejas de cebadores una de ellas específica para el ADN genómico, mientras que la otra reconoce el ADN mitocondrial. ACTIVIDAD ANTIMICROSPORIDIA Y ANTIPROTOZOARIA DE DIFERENTES ACEITES ESENCIALES. ESTUDIOS IN VITRO
Y ESTABLECIMIENTO DE MODELO EXPERIMENTAL MURINO . Autor: BERNARDO RODRÍGUEZ MARÍA DEL ROSARIO
. Año: 2003. Universidad: SAN PABLO CEU. Centro de lectura: F.CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS EXPERIMENTALES Y DE LA SALUD
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Resumen: El objetivo de este trabajo fue el desarrollo de un sistema de cribado farmacológico in vitro y de un modelo de infección experimental murino a fin de poder establecer la capacidad antimicrosporidia de Allium
sativum, Thymus vulgaris, Syzygium aromaticum, Cinchona pubescens y Melaleuca viridiflora. Previamente se realizó el estudio in vitro en dos modelos claramente establecidos: Trypanosoma cruzi y Trichomonas vaginalis. Los resultados obtenidos
pusieron de manifiesto que los aceites esenciales no presentan actividad frente a E. intestinalis. Respecto al desarrollo del modelo murino se emplearon ratones BALB/c lactantes y ratones de las cepas C.B.17/IcrIco SCID y C57BL/6-Ifngtm1Ts. No fue
posible establecer una infección significativa con E. intestinalis en los ratones en este estudio, de modo que será necesario realizar nuevos ensayos con distintas dosis y distintas vías de inóculo, que nos permitan disponer de este modelo
experimental para ensayos posteriores. Por otro lado, dada la importancia que E. bieneusi tiene en la clínica humana, y la dificultad tanto para su cultivo como para el establecimiento de infecciones pusimos a punto un método de purificación de
esporas de muestras biológicas mediante separación inmunomagnética (SIM). El inóculo por vía oral de estas esporas a ratones de la cepa C57BL/6-Ifngtm1Ts, no tuvo como consecuencia el desarrollo de la infección significativa en estos animales.
VACUNA ANTI-ORNITHODOROS . Autor: GARCIA VARAS SUSANA. Año: 2003. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: FACULTAD DE FARMACI. Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.
Resumen: Un método alternativo al uso de acaricidas en la lucha contra Ornithodoros moubata es el desarrollo de una vacuna frente a este argásido transmisor del virus de la Peste porcina
africana. La administración a los cerdos de extractos de glándulas salivales del parásito (SGE-2) con adyuvantes de Freund induce una respuesta protectora que inhibe la alimentación y la fecundidad de las hembras hasta un 70%. Nuestro objetivo fue
identificar, purificar y caracterizar al componente salival responsable de la protección y también evaluar el valor vacunal de los antígenos ocultos del tubo digestivo y de las glándulas coxales de O. moubata.
La molécula salival responsable de la protección es un antagonista de la P-selectina gracias al cual pueden alimentarse hasta la repleción todas aquellas fases evolutivas del parásito que, por el tiempo que tardan en realizar la toma de sangre,
dan lugar a que se exprese la molécula de adhesión. Aunque el antagonista no es inmunogénico en condiciones naturales, sin embargo sí lo es cuando se administra con unos adyuvantes adecuados y la respuesta que genera inhibe la toma de sangre a
partir del momento en el que comienza a expresarse la P-selectina, lo que en el caso de las hembras se traduce en una caída en su fecundidad de hasta el 73%. El antagonista es un proteoglicano portador de heparina, o un heparinoide relacionado, y en
los animales en los que se induce su reconocimiento (por vacunación), los contactos naturales con el parásito actúan como dosis vacunales de recuerdo.
Por la serie de fenómenos que se desencadenan tras la expresión de la P-selectina por las células endoteliales y plaquetas, cabe pensar que las garrapatas duras, al ser organismos de alimentación lenta, también tienen que estar dotadas con
moléculas antagonistas de la P-selectina y que tales moléculas, como en el caso de O. moubata, pueden ser dianas adecuadas para la obtención de vacunas frente a ellas.
Frente a O. moubata, las vacunas basadas en antígenos ocultos no tienen ningún interés (caso de las glándulas coxales) o éste es muy reducido (caso del tubo digestivo), al limitarse a ejercer una acción (caída de la fecundidad) similar, aunque
menos intensa, a la que se obtiene con el antagonista de la P-selectina.
EPIDEMIOLOGÍA DE LA FASCIOLIASIS EN PERÚ, VENEZUELA Y EGIPTO. CARACTERIZACIÓN DE LAS ZONAS DE
ENDEMIA HUMANA . Autor: GONZÁLEZ RAMÍREZ LUISA CAROLINA. Año: 2003. Universidad: VALENCIA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA DE LA UNIVERSIDAD DE VALENCIA.
Resumen: En los últimos
años, la fascioliasis ha pasado a ser considerada como de gran impacto en salud pública. Con la finalidad de contribuir al conocimiento de la epidemiología de la fasciolasis humana y llegar a caracterizar diferentes zonas endémicas se llevó a cabo
un estudio parasitológico en dos regiones de Perú (el Altiplano de Puno y el Valle de Cajamarca) y en una región de Venezuela (Estado Mérida), localizadas todas ellas a gran utilidad (1.863 a 3.910 m), así como en una gobernación de Egipto (Behera)
localizada a nivel del mar. La encuesta coproparastiológica fue realizada al azar, de manera que cada muestra fecal, una por persona, fue analizada por examen directo, Formol-Acetato modificado, Ziehl-Neelsen modificado y Kato-Katz. Se analizó 1957
muestras fecales (900 del sexo masculino y 1.057 del femenino), de edades entre 2 y 83 años: 828 de Perú (338 de Puno y 490 de cajamarca), 451 de Venezuela y 678 de Egipto. En Venezuela, además, se realizó un estudio serológico mediante ELISA
indirecto sobre un total de 187 pacientes (45 del sexo masculino y 142 del femenino, entre 2 y 76 años) que acudieron al Hospital de Mucuchíes. El espectro parasitario detectado en cada una de las regiones estudiadas fue muy semejante, quedando
conformado por 10-12 especies de protozoos y 6-10 de helmintos. La fascioliasis fue la hemintiasis más prevalente, con una prevalencia global del 24,0% en Perú (24,3% en Puno; 23,9% en Cajamarca; rango por comunidades entre 6,7% y 47,7%), del 0,7%
en Venezuela y en concreto en La Mucuchache (Páramo de Mucuchíes) del 12,8% en Egipto (rango por comunidades entre 5,2% y 19%).
El estudio serológico de fascioliasis realizado en Venezuela evidenció un 41,2% de positividad. Se detectó una mayor prevalencia de fascioliasis en las mujeres, en los escolares y adolescentes (6-18 años) y en las comunidades localizadas a mayor
altitud. Los resultados deintensidad de fascioliasis, medida en huevos por gramo de heces (h.g.h), mostraron un rango de 24-2.496 h.g.h., con una media artimética y geométrica de 181 h.g.h y 86 h.g.h, respectivamente, en Perú (si bien los individuos
de Puno eliminaron mayor cantidad de huevos que los de Cajamarca), de 24 h.g.h, en los tres casos de Venezuela, y de un rango entre 24-432 h.g.h y medias aritmética y geométrica de 72 y 51 h.g.h, respectivamente, en Egipto. Las mayores intensidades
de parasitación las mostraron las mujeres, los infantes y escolares (1-11 años) y las comunidades localizadas a mayor altitud. En la mayoría de los casos, Fasciola se encontró coexistiendo con otras especies y se detectó la asociación positiva de
Fasciola con Giardia intestinalis en Puno y con Schistosoma mansoni en Egipto. Se discutió las características epidemiológicas de las fascioliasis humana en cada una de las regiones estudiadas y se catalogó como de zonas hiperendémicas del altiplano
de Puno y el valle de Cajamarca en Perú; de zona hipoendémica la región andina de Venezuela; y de zona mesoendémica la región del Delta del Nilo en Egipto. Todo ello ha de servir para el establecimiento de las pertinentes medidas de control de la
fascioliasis adaptadas a las peculiaridades de cada una de las zonas de endemia humana. OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE ANTÍGENOS DE LARVAS Y ADULTOS DE UNCINARIA STENOCEPHALA. SU
APLICACIÓN AL INMUNODIAGNÓSTICO DE LA UNCINARIOSIS CANINA . Autor: POSTIGO RESA IDOIA
. Año: 2003. Universidad: PAIS VASCO. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA Y FACULTAD DE CIENCIAS.
Resumen: U. Stenocephala es el
anquilostómido más prevalente en la población canina del Territorio Histórico de Álava (21,9%). El tercer estadío Lavario (L3) de este nematodo es capaz de penetrar a través de la piel de diferentes mamíferos incluído el hombre, produciendo un
Síndrome de Larva Migrans Cutáneo y otras patologías. El diagnóstico rutinario de esta parasitosis se realiza por examen coproparasitario. Los incovenientes que plantea este método hacen necesario desarrollar métodos de inmunodiagnóstico
alternativos eficaces, sencillos y que permitan el procesamiento de un gran número de muestras. Previo al desarrollo de estas técnicas es necesario conocer en profundidad la composición antigénica del esadio adulto y de la larva L3 de U.
Stenocephala. En nuestro laboratorio hemos desarrollado un método de cultivo in vitro que permite la obtención de L3 sin la necesidad de realizar coprocultivos. Este método nos ha permitido obtener los antígenos somáticos de L3 (AgSML3), los
antígenos somáticos de adultos (AgSMA) y los antígenos de E-S del estadio adulto (AgE-SA). La caracterización inmunoquímica de estos extractos ha revelado resultados inéditos hasta el momento en la literatura, como es la presencia de 5 antígenos
mayores específicos de L3, la alta especificidad de los AgE-SA y la baja antigenicidad de los AgSMA. Los tres extractos cumplieron las normas de validación para ser utilizados en ELISA. Los resultados de sensibilidad, especificidad, valor predictivo
positivo, valor predictivo negativo y eficacia diagnóstica que se obtuvieron con cada antígeno utilizado en ELISA, indicaron que los productos de E-S de adultos son el mejor indicador de esta parasitosis en una población canina determinada. Estas
técnicas de inmunodiagnóstico son aplicables tanto a estudios epidemiológicos como al diagnóstico de casos individuales y pueden ser de gran importancia para los programas de control que se pueden establecer, ya que contribuyen al conocimiento de la
prevalencia real de esta zoonosis, un dato imprescindible para cualquier acción de Salud Pública. CLONADO, CARACTERIZACIÓN MOLECULAR Y EXPRESIÓN DE LA ADN TOPOISOMERASA I DE LEISHMANIA
DONOVANI . Autor: VILLA GONZÁLEZ HÉCTOR. Año: 2002. Universidad: LEON. Centro de lectura: VETERINARIA
. Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
Resumen: La leishmaniosis es una enfermedad parasitaria que afecta a unos doce millones de personas, distribuyéndose principalmente en países en desarrollo. Su agente etiológico, el protozoo Leishmania, posee dos formas totalmente diferenciadas
morfológica y fisiológicamente, el promastigote y el amastigote, que permiten su supervivencia en el mosquito vector en el hospedador vertebrado respectivamente. Biológicamente presenta ciertas peculiaridades, entre las que se encuentra un disco
situado en la única mitocondria existente y que se conoce como kinetoplasto.
Se trata de un orgánulo que posee ADN organizado en una serie de círculos de diferente tamaño unidos entre sí a modo de malla.
La leishmaniosis presenta diversas formas clínicas, desde procesos asintomáticos hasta otros con gran afectación visceral.
Existen diversos tratamientos para la enfermedad, pero presentan problemas de toxicidad para el paciente y la aparición de resistencias. Además no existe todavía una vacuna eficaz para el tratamiento preventivo, con lo que el desarrollo de
nuevos compuestos eficaces se plantea urgente para el futuro más inmediato.
Las ADN topoisomerasas son enzimas que modifican el estado topológico del ADN, siendo clave en procesos como la replicación, la transcripción y la recombinación génica. Su uso como dianas terapéuticas en el tratamiento de procesos patológicos
de tipo proliferativo ha experimentado un gran desarrollo en los últimos años, ya que varios fármacos antitumorales y antibióticos tienen como mecanismo de acción la inhibición de este tipo de enzimas. En este contexto la potencial importancia de
las ADN topoisomerasas para el desarrollo de nuevos tratamientos frente a la leishmaniosis se relaciona en parte con la existencia del kinetoplasto y avala el esfuerzo realizado por la comunidad científica para su conocimiento.
Entre los resultados más destacables se encuentra el descubrimiento de que la enzima es codificada por dos genes situados en cromosomas diferentes, lo que constituye la primera descripción de una ADN topoisomerasa I formada por dos subunidades
proteicas. La expresión in vitro ha demostrado que la actividad enzimática necesita de las asociación de ambas subunidades para ser reconstituída. Además se comprobó que ambas se localizan en el núcleo de la forma promastigote del parásito, y que
son más abundantes en la fase de proliferación celular.
Se han creado cepas tanto que sobreexpresan como que carecen parcialmente de ambas subunidades para conocer la importancia de las mismas para la supervivencia del parásito. Las cepas sobreexpresante experimentan un retraso en su crecimiento como
consecuencia del exceso de la enzima, mientras que las cepas parcialmente deficientes presentan un crecimiento inferior al de la cepa salvaje.
Todos estos datos constituyen un aporte importante al conocimiento de esta enzima en Leishmania y suponen un paso adelante en la validación de la misma como posible diana terapéutica en el tratamiento de la enfermedad. De especial relevancia es
el descubrimiento de su estructura molecular, constituida por dos subunidades diferentes, que supone una importante diferencia con su homóloga en la especie humana. Este hecho promueve y anima al futuro desarrollo de nuevas investigaciones que
profundicen en su estructura y función dentro del parásito. NUEVAS ESTRATEGIAS EN EL DIAGNÓSTICO DE TENIASIS/CISTICERCOSIS . Autor: MONTERO CLEMENTE M. ESTRELLA. Año: 2002. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: BIOLOGÍA. Centro de realización: FACULTAD DE BIOLÓGICAS/FACULTAD DE FARMACIA.
Resumen: T.solium y T.saginata
producen teniasis intestinal en el hombre y cisticercosis en el ganado porcino y vacuno respectivamente. Además, los huevos de T.solium pueden infectar casualmente al hombre ocasionándole la cisticercosis, con la NCC como afección más grave y a
veces fatal. Aunque estas parasitotis son un problema de salud pública y veterinaria en áreas endémicas de Latinoamérica, Asía y África principalmente, además se la considera una enfermedad emergente que afecta a los países industrializados. Es
importante destacar que su diagnóstico en el laboratorio sigue presentando importantes limitaciones. Preocupados por el tema hemos querido mejorar los métodos actuales de detección de teniasis/cisticercosis mediante la caracterización profunda de
moléculas únicas de los ténidos, y utilización de las propiedades distintivas estudiadas en la puesta punto de nuevas pautas de trabajo a emplear como técnicas diagnósticas de rutina.
Así se han caracterizado dos nuevas moléculas de T.solium llamadas F18 y 17H. El gen F18 es de copia única, formado por cinco exones separados por cuatro intrones, con un tamaño aproximado de 6,1 Kb. Este gen, que se expresa en el cisticerco de
T.solium, codifica una proteína de 229 aminoácidos de posible naturaleza somática, con un sitio consenso de N-glicosilación, una masa molecular mínima de 26 kDa y un punto isoeléctrico de 6,35. La evaluación de las propiedades diagnósticas de la
proteína recombinante F18 frente a la cisticercosis, exhibió una buena sensibilidad (86%) empleando sueros de pacientes con NCC no clasificada, posiblemente inactiva, y una excelente especificidad (100%) frente a sueros de pacientes con hidatidosis
y fasciolasis, especificidad que disminuía con muestras de pacientes con esquistosomiasis (90%).
Por todo ello, se considera que G-F18 puede complementar el diagnóstico de laboratorio de la cisticercosis en conjunción con otros antígenos recombinantes, pruebas radiológicas y datos clínico-epidemiológicos del paciente.
La caracterización del gen 17H puso de manifiesto que al igual que F18 es de copia única, formado por siete exones separados por seis intrones y con un tamaño aproximado de 3 Kb. Dicho gen expresa en el cisticerco de T.solium una proteína con
una masa molecular teórica de 36,1 kDa y altamente básica.
A pesar de que el producto expresado por el gen 17H no resultó ser un buen antígeno para el diagnóstico de la NCC, el estudio detallado de su secuencia aminoacídica mostró que la molécula exhibía en su extremo amino terminal una región
hidrofóbica rica en alfa-hélices, y con un dominio CRAL_TRIO_N de asociación a la bicapa lipídica y en su extremo carboxi terminal una zona mixta, alfa-hélice/beta-lámina, también hidrofóbica y con el dominio SEC14, característico de proteínas que
son capaces de unir lípidos. La localización del producto 17H en las cisternas trans-Golgi de células eucriotas transfectadas sugiere que la molécula podría intervenir en el intercambio de lípidos a este nivel.
Para la detección diferencial de la teniasis causada por T.solium o T.saginata fue necesario la caracterización genómica de la sonda HDP2 de T.saginata. Posteriormente, los cebadores PTs7S35F1, PTs7S35F2 y PTs7S35R1, diseñados a partir de dicha
sonda, fueron utilizados en la puesta a punto de un nuevo protocolo de amplificación multiplex HDP2-PCR, que permite el diagnóstico simultáneo y específico, en un solo ensayo, de T.solium y T.saginata. El protocolo que es rápido, sencillo y seguro,
ha sido empleado con éxito en la identificación especie-específica de formas parasitarias, más o menos deterioradas y aisladas de los diferentes hospedadores, y el diagnóstico diferencial de la teniasis humanas en pacientes españoles, viajeros e
inmigrantes de las zonas endémicas, donde los dos parásitos coexisten. MARCADORES GENÉTICOS EN EL ESTUDIO DE POBLACIONES DE PLASMODIUM FALCIPARUM . Autor: BERZOSA DÍAZ PEDRO JAVIER. Año: 2002. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: BIOLOGÍA. Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS Y FARMACIA.
Resumen: El paludismo es una enfermedad parasitaria causada por el protozoo parásito del
género Plasmodium. Hay cuatro especies que afectan al hombre. Plasmodium vivax, P.ovale, P.malariae y P.falciparum. La incidencia del paludismo oscial entre 300 y 500 millones de casos clínicos al año, causando de 1,1 a 2,7 millores de muertes.
Hemos desarrollado una nueva técnica AFLP para el genotipado de aislados de Plasmodium falciparum. Mediante esta técnica se puede localizar genes de resistencia, de virulencia, incluso crear "huellas" genéticas para poder localizar la
procedencia de las infecciones.
En el trabajo de tesis también hemos estudiado dos genes, (DHFR y DHPS) que codifican dos enzimas que intervienen en la ruta del folato del parásito. Sobre estos dos enzimas actúa un medicamento (Fansidar®) que es una combinación de
Sulfadoxina + pirimetamina. Hemos estudiado las mutaciones puntuales de ambos genes para poder buscar una relación entre mutación y resistencia del parásito a dicha combinación.
Se han estudiado también dos genes que codifican las Proteínas de Superficie del Merozoíto 1 y 2, (MSP-1 y MSP-2) que nos permiten conocer la variabilidad genética o poblacional de las infecciones causadas por Plasmodium falciparum.
EVALUACIÓN DE LA RESPUESTA INMUNE HUMORAL INDUCIDA POR ANTÍGENOS DE KUDOA SP. Autor: MARTÍNEZ DE VELASCO JUAN GONZALO. Año: 2002. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
Resumen: Para evaluar la posible repercusión sobre la salud humana de la
ingesta de pescado parasitado por Kudoa sp., un mixosporidio, se estudió la respuesta inmune humoral inducida por varios extractos de Kudoa sp. -correspondientes a distintos estadios del parásito- en ratones BALB/c mediante las técnicas de ELISA y
de "Western-blot", de forma que permitiese el conocimiento de la respuesta que se produce tras una infección natural en condiciones controladas. Además,se examinó, mediante las mismas técnicas, la relación antigénica entre Kudoa sp., y su
hospedador, la merluza chilena -Merluccius gayi gayi (Guichenot, 1848)-, y entre Kudoa sp., y otro mixosporidio, Myxobolus aeglefini (Auerbach, 1906).
Se determinó mediante ELISA la prevalencia de anticuerpos anti-Kudoa sp., en población española presuntamente sena y se investió la posible relación entre la aparición de manifestaciones alérgicas tras la ingesta de pescado y la respuesta
humoral a los antígenos de Kudoa sp., así como los niveles de anticuerpos específicos frente a los antígenos de Kudoa sp., en sueros de pacientes diagnosticados de patologías digestivas, estudiando su posible relación con la alteración de variables
clínicas en estos pacientes.
Se estudiaron por "Western-Blot" los patrones de inmunorreconocimiento de todos los sueros humanos que resultaron positivos por ELISA a los antígenos de Kudoa sp.
Finalmente, se determinó la viabilidad de los extractos de Kudoa sp., para delatar mediante pruebas cutáneas "Prick test" a pacientes sensibilizados a los antígenos de este parásito. EPIDEMIOLOGÍA DE LA ASCARIOSIS PORCINA EN EXTREMADURA . Autor: SÁNCHEZ MURILLO JOSE MARÍN. Año: 2002. Universidad:
EXTREMADURA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: FACULTAD DE VETERINARIA.
Resumen: El cerdo ibérico es un animal perfectamente adaptado a las difíciles condiciones medioambientales de la dehesa. Sin embargo, no se puede olvidar que el protagonismo de los procesos parasitarios es, en general,
mucho más acusado en las explotaciones de carácter extensivo o semiextensivo por la mayor dificultad de controlar algunas de las fases parasitarias.
En este trabajo y haciendo uso de la técnica ELISA, se ha realizado un estudio seroepidemiológico sobre la infestación natural por Ascaris suum del cerdo ibérico explotado en extensividad en la región de Extremadura. Para ello, se han
analizado un total de 5060 sueros sanguíneos de porcino ibérico, de los cuales, 1988 pertenecieron a la edad de recrío, 2614 a animales en cebo y 458 a reproductores.
Se establecieron dos puntos de corte, en el 20 y 40%, considerando como negativos aquellos sueron que obtienen valores por debajo del 20%, y como positivos, lo que obtienen valores por encima del 40%. El grupo de sueros con reactividades entre
el 20 y el 40% se catalogó como dudosos o de positividad débil.
El número de sueros con valores inferiores al 20%, es decir, valores claramente negativos, fue de 3678 (73%). Aquellos sueros con reactividad entre el 20 y el 40%, fueron un total de 491 (10%). Los sueros más reactivos, con porcentajes
superiores al 40%, es decir, sueros correspondientes a animales claramente positivos, fueron un total de 891 (17%).
Respecto a la seroprevalencia obtenida, los índices más altos los poseen los animales reproductores y en edad de cebo, y dependiendo del límite diagnóstico elegido, los resultados por edades para la región de Extremadura se cifran entre un 17,6
y un 27,3%. La cifra más baja de las registradas corresponde al recrío (7,4-14,3), seguida muy de lejos, por los datos procedentes del cebo (23,8-35,0) y reproductores (26,4-40,2).
Por provincias, respecto a la reactividad media de los sueros, el valor obtenido en la provincia de Badajoz (13,7) es claramente superior al obtenidos en la provincia de Cáceres, cuya media del % EIA para el total de sueros se mantiene en
niveles muy cercanos al control negativo (1,0).
El análisis, por explotaciones, considerando positivas, aquellas en las que al menos se ha diagnosticado un animal con reactividad superior al 40%, revela que más de la mitad de las mismas, se han mostrado positivas, un 55% de las
estudiadas. ENDOCARDITIS EXPERIMENTAL POR ENTEROCOCCUS FAECIUM MULTIRRESISTENTE. ANÁLISIS DE LA EFICACIA DEL
FÁRMACO QUINUPRISTINA-DALFOPRISTINA SOLO O EN COMBINACIÓN CON GENTAMICINA, TEICOPLANINA, IMIPENEM O LEVOFLOXACINO . Autor: PÉRZ SALMERÓN JERÓNIMO. Año: 2002. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: UNIVERSIDAD DE MURCIA.
Resumen: El objetivo principal del presente estudio
fue comparar la eficacia terapéutica in vitro de quinupristina-dalfopristina (QD) sola o combinada con gentamicina, teicoplanina, impipenen o levofloxacino, mediante pautas antibióticas de 5 días, en un modelo de endocarditis experimental en conejos
por Enterococcus faecium multirresistente. Igualmente se procedió al estudio in vitro mediante curvas de letalidad bacteriana buscando fenómenos de sinergia para las combinaciones que mostraran mejor comportamiento in vivo.
Fueron analizados un total de 110 conejos de la raza New Zealand, de los que finalmente, tras la exclusión de 30, fueron incluidos 80. La sensibilidad de la cepa empleada frente a los antibióticos utilizados fue: intermedio para QD, resistente
frente a teicoplanina e imipenem, sensible frente a levofloxacino y no encontramos resistencia de alto nivel frente a gentamicina.
Para la valoración de la respuesta terapéutica se utilizó como paràmetro la concentración bacteriana en las vegetaciones cardiacas, expresada como log10 de las unidades formadoras de colonias por gramo (UFC/g).
Los resultados in vivo fueron: Grupo control 9,49; QD en monoterapia 7,31; QD + gentamicina 7,16; QD + teicoplanina 7,06; QD + imipenem 4,38 y QD + levofloxacino 4,04.
Todos los grupos redujeron los niveles de UFC/g,, de manera estadísticamente significativa, respecto del grupo control.
No se encontraron diferencias al comparar los grupos QD en monoterapia, QD + gentamicina y QD + teicoplanina.
Los grupos QD + imipenen y QD + levofloxacino no mostraron diferencias entre ellos y fueron los más eficaces en reducir el número de UFC/g de vegetación cardiaca en nuestro modelo experimental.
Las curvas de letalidad bacteriana efectuadas para QD e imipenem o levofloxacino no mostraron fenómenos de sinergia in vitro. APLICACIÓN DE LA TÉCNICA DE RAPD PARA LA CARACTERIZACIÓN DE ESPECIES DEL GÉNERO ACANTHAMOEBA
. Autor: ORTEGA RIVAS ANTONIO. Año: 2002. Universidad: LA LAGUNA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA. ULL..
Resumen: Acanthamoeba, es
uno de los géneros de amebas de vida libre, que en determinadas circunstancias es capaz de infectar al hombre y provocarle una serie de patologías, relacionadas principalmente con la zona del organismo que invade y con el estado de salud del
individuo. Entre las patologías que se le asocian cabe destacar las infecciones diseminadas, las úlceras cutáneas, la encefalitis amebiana primaria, relacionadas principalmente con pacientes inmunodeprimidos; y las queratitis oculares, relacionadas,
normalmente, con usuarios de lentes de contacto.
La identificación de Acanthamoeba a nivel de especie, empleando únicamente criterios morfológicos, puede llegar a ser una tarea algo subjetiva, ya que son muchos, y variados, los trabajos publicados que hacen referencia a la inconsistencia de
éstos métodos de clasificación a nivel de especie, de muchos de su integrantes. Estudios de RFLP de AND genómico o mitocondrial y trabajos de PCR-RFLP de la subunidad pequeña ribosomal 18S, demuestran ese hecho.
La Amplificación del Azar de Fragmentos Polimórficos de ADN (RAPD), es un método simple que no necesita el conocimiento previo de secuencia de ADN, que nos permite analizar una gran variedad de lugares del genoma simultáneamente, mostrándose las
diferencias existentes entre las cepas o especies, como patrones de amplificación de AND distintos.
Se trabajó con 40 cebadores RAPD distintos, para estudiar a las especies A.astronysis, A.castellanii, A.divionensis y A.polyphaga, encontrando en los amplificados obtenidos con los cebadores denominados OPC-14 y OPC-20, patrones de amplificación
que nos permitían identificar a las especies.
Se aislaron los fragmentos característicos, y se estudió su secuencia y especificidad, siendo seleccionados aquellos que eran capaces de identificar a las especies incluidas en el estudio. A partir de ellos se diseñaron cebadores específicos,
para las especies A.astronysis, A.divionensis y A.polyphaga, que fueron capaces de identificarlas mediante una reacción de PCR.
Una vez comprobada la especificidad de los cebadores, se procesó todoa una serie de aislados, procedentes de aguas, lentes de contacto, estuches portalentes, raspados corneales, además de un aislado procedente de una necropsia pulmonar y otro
procedente de un ganglio linfático. Se analizó también directamente muestras biológicas, más concretamente líquidos cefalorraquídeos. Comprobando la presencia de las especies estudiadas en toda esta variedad de muestras.
FASCIOLIASIS HUMANA Y ANIMAL EN EGIPTO E IRÁN. CARACTERIZACIÓN BIOLÓGICA Y MOLECULAR DE LAS
ESPECIES PARÁSITAS Y DE SUS MOLUSCOS HOSPEDADORES INTERMEDIARIOS . Autor: KHOUBANNE MESSAOUD
. Año: 2002. Universidad: VALENCIA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA - UNIVERSITAT DE VALÈNCIA.
Resumen: En la presente
memoria se realiza por vez primera la caracterización y biofenotípica de los Fasciólidos y Lymanaeidos implicados en la Fasciolisasis humana en dos zonas de endemia humana: el Delta del Nilo en Egipto y la provincia de Gilan en Irán. Los moluscos
analizados (de acuerdo con las clasificaciones preliminares de los mismos) fueron: Lymnaea truncatula, Lymnaea caillaudi y Biomphalaria, procedentes de Egipto; Lymnaea truncatula, Lymnaea gedrosiana y Lymnaea palustris, procedentes de Irán; y como
moluscos control, Lymnaea trunctaula de l'Albufera-España y Lymnaea sp de Venezuela. El material parásito consistió en 3 aislados diferentes de Fasciola hepática y Fasciola gigantica (vacuno, búfalo y humano) de Egipto y otros 3 aislados (vacuno,
ovino y humano) de Irán. Las experiencias realizadas incluye: seguimiento de la embrionación de huevos de los diferentes aislados de Fasciola hepática y Fasciola gigántica a 20ºC y a 25ºC; ensayos de susceptibilidad de los Lymnaeidos de Egipto y de
Irán a diferentes infestaciones con Fasciola hepática y Fasciola gigántica; determinación del porcentaje de supervivencia de los moluscos al comienzo de la emisión, porcentaje de emisores, período prepatente, duranción de la emisión, supervivencia
al fin de la emisión, longevidad de emisores y de los no emisores, etc., y caracterización molecular mediante la secuenciación del TS-2 r-ADN de los moluscos Lymnaeidos y de los diferentes aislados de Fasciola hepática y Fasciola gigántica de Egipto
y de Irán. La embrionación de los huevos de Fasciola hepática y de Fasciola gigántica de origen animal sigue un
patrón similar en Egipto y en Irán con la aparición del primer HMD a los 15-18 d.p.e., para Fasciola hepática y a los 21-29 d.p.e., para Fasciola gigántica y en el caso de Fasciola de aislado humano a los 15-23 d.p.e. Sólo se consiguieron
emisiones cercarianas en las experiencias (con Lymnaeidos de Egipto) correspondientes al binomio Lymnaea caillaudi/Fasciola gigántica de los aislados vacuno (infestación monomiracidial) y de búfalo (mon, tri y pentamiricidial) con una muy elevada
producción de metacercarias: 3205, 17384, 9290 y 14486 respectivamente, siendo de destacar la elevada producción de metacercarias flotantes (7,67%-18,20%, media 23,04%). La caracterización de Fasciólidos y Lymnaeidos en base a las secuencias del
ITS-2 delrADN permitió constar la existencia en ambas zonas de endemia de las dos especies, F.hepática y F.gigántica y de Lymnaeidos originarios de Africa, Europa y América, siendo algunas denominaciones específicas iniciales erróneas. La
coexistencia de ambas especies de Fasciola, tanto en Egipto como en Irán, conlleva una gran problemática en epidemiología y control, dada la imposibilidad de diferenciar ambas especies en el diagnóstico tanto coprológico como inmonológico hasta la
fecha.
PALABRAS CLAVE
Fascioliasis, Fasciola hepática, Fasciola gigántica Delta del Nilo-Egipto, Gilan-Irán, embriogénesis de huevos, infestaciones miracidiales, desarrollo larvario intramoluscal, emisiones cercarianas, secuenciación del ITS-2 del-ADN,Lymnaea
truncatula, Lymnaea caillaudi, Lymnaea gedrosiana, Lymnaea palustris, Lymnaea sp., Biomphalaria alexandrina, adaptación, susceptibilidad, supervivencia a la infestación, secuenciación del ITS-2 rADN. CONTRIBUCIONES A LA CARACTERIZACIÓN DE LA FASCIOLIASIS EN PAÍSES ANDINOS. TRANSMISIÓN, PARÁSITOS
Y VECTORES EN VENEZUELA, PERU Y ECUADOR . Autor: PÉREZ MATA ARLETT MARIELA. Año: 2002. Universidad: VALENCIA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA, UNIVERSIDAD DE VALENCIA.
Resumen: En la presente memoria
se realiza la caracterización biológica de los lymnaeidos y fasciólidos implicados en la Fascioliasis humana y animal en las zonas de Cajamarca (Perú), Mérida y Falcón (Venezuela) y Machachi y Cayambe (Ecuador). Los moluscos analizados de acuerdo a
la clasificación preliminar fueron Lymnaea truncatula, Lymnaea columella, Lymnaea cubensis y Lymnaea sp.en Venezuela, Lymnaea sp., en Perú y Lymnaea sp., en Ecuador. El material parasitológico consistió en aislados bovinos ovinos y porcinos de
Fasciola hepática procedentes de los 3 países, y aislados provenientes de infestaciones experimentales con el parásito en ratas Wistar. Se realizó el seguimiento de la embrionación de huevos de los diferentes aislados del parásito a 20ºC,
comprobación de la presencia de infestaciones naturales con el parásito en las poblaciones de moluscos recolectadas y ensayos de susceptibilidad a la infestación experimental. Se determinó el porcentaje de supervivencia de los moluscos alinicio de
la emisión, porcentaje de emisores, período prepatente, período de emisión, cronobiología de emisión cercariana y producción cercariana por día y por emisor. Se realizó la caracterización morfométrica de las diferentes poblaciones de lymnaeidos en
base a los parámetros longitud total (SL), ancho total (SW), longitud de la apertura (AL), ancho de la apertura (AW), longitud de la espira mayor (LSL) y ángulo de la espira menor (SSA), así como las relaciones de AL, SW, LSL y SSA con respecto a
SL. La embrionación de los huevos de Fasciola hepática de aislado bovino alcanzó el máximo procentaje de huevos con miracidio desarrollado (HMD) a los 15-18 días postembrionación (dpe) en los aislados de Venezuela, a los 16-20 dpe en los aislados de
Perú y 21-22 dpe en los aislados de Ecuador. Para los aislados ovinos al máximo porcentaje de HMD se obtuvo a los 16-20 dpe (Perú) y 21-24 dpe (Ecuador). Para el aislado porcino (Perú) este máximo se alcanza alos 19 dpe. Se observaron emisiones
cercarianas en las infestaciones experimentales correspondientes al binomio Lymnaea truncatula-Fasciola hepatica (Venezuela). Se observaron redias con cercarias maduras enlas experiencias correspondientes al binomio Lymnaea cubensis
(Venezuela)-Fasciola hepatica (Ecuador) y Lymnaea sp. (Perú)-Fasciola hepática (aislado bovino, Perú). Se comprobó la presencia de infestaciones naturales en las poblaciones de lumnaeidos de San Isidro. Aparatadero (Mérida, Venezuela), Yanamango
(Cajamarca, Perú) y Sta Tosa de Chaquil (Cajamarca, Perú), en este último caso en un porcentaje excepcionalmente elevado (20,56%) con relación a infestaciones previas y con una producción superior a las 14000 metacercarias, coincidiendo con las
referencias de altísimas prevalencias de la enfermedad en humanos y animales en esa zona. Se realizó la caracterización molecular (determinación de la secuencia del ITS-2 del rDNA) de la población de lymnaeidos y fasciólidos de Tucacas, Falcón,
Venezuela, determinándose que pertenecen al "grupo cubensis", con diferencias nucleotídicas importantes con relación a Lymnaea cubensis (especie tipo) de Cuba. El análisis mortométrico sugiere similitudes entre las poblaciones de Apartaderos
(Mérida, Venezuela( y Lymnaea sp.de Cajamarca (Perú) con Lymnaea truncatula de Europa Lymnaea truncatula podría estar implicada en la transmisión de Fasciola hepática en Mérida (Venezuela). MECANISMOS DE RESISTENCIA A QUINOLONAS Y MACRÓLIDOS EN CORYNEBACTERIUM SPP. ACTIVIDAD DE NUEVOS
ANTIMICROBIANOS . Autor: MORA PERIS BEGOÑA. Año: 2002. Universidad: MURCIA. Centro de lectura: MEDICINA
. Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.
Resumen: INTRODUCCION
Dentro del género Corynebacterium, C.amycolatum y C.jeikeium son las especies aisladas con mayor frecuencia en muestras clínicas. En los últimos años, hemos asistido a un aumento del número de infecciones producidas por estos microorganismos.
Una de las principales características de esta especies es su multirresistencia, permanenciendo desconocidas sus bases moleculares.
OBJETIVOS
1,- Determinar la actividad in vitro de diferentes quinolonas, macrólidos y otros antimicrobianos (clindamicina, glucopéptidos, cetólidos, quinupristina-dalfopristina y linezolide) frente a 57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium.
2,- Caracterizar los mecanismos de resistencia a quinolonas de diferentes cepas de cultivos tipo y 22 muestras clínicas mediante la amplificación y secuenciación de la QRDR de los genes gyrA y parC.
3,- Intentar establecer relaciones filogenéticas entre las distintas especies mediante la comparación de la QRDR de los genes gyrA y parC.
4,- Caracterizar los mecanismos de resistencia fenotípicos y genotípicos a macrólidos de la s57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium mediante la técnica de doble disco eritromicina-clindamicina y la amplificación del gen erm(X).
MATERIAL Y MÉTODOS
Aislamiento de muestras clínicas (57 cepas de C.amycolatum y 36 cepas de C.jeikeium). Caracterización morfológica y bioquímica de los microorganismos. Clasificación de las cepas de C.amycolatum en multirresistentes y multisensibles. Estudio de
la sensibilidad bacteriana in vitro de 23 antimicrobianos, determinando la CMI mediante técnica de dilución en agar. Estudio de los mecanismos de expulsión activa en la resistencia a quinonolas y macrólidos. El diseño de los cebadores se realizó
sobre secuencias conservadas de la QRDR de S.aureus para la amplificación de los genes gyrA y parC, y sobre la secuencia descrita de C.jeikeium para el gen erm(X). Fenotipo de resistencia a MLSB mediante prueba de doble difusión en disco e inducción
de dicho fenotipo con incubación de las cepas a concentraciones subinhibitorias.
RESULTADOS
Las fluorquinolonas más clásicas, las denominadas de 2a generación, aparecen menos activas que las nuevas fluorquinolonas, de 3a y 4a generación, tanto para C.amycolatum como para C.jeikeium, aunque en esta especie la diferencia de actividad
entre ambos grupos es menor. Sitafloxacino es, prácticamente, la unión fluorquinolona que es activa frente a las cepas multirresistentes de C.amycolatum (sensibilidad a sitafloxacino del 43% de las cepas). Las mutaciones encontradas en la QRDR de
gyrA y parC en las especies de corinebacterias son las mismas encontradas en otros grampositivos y que aparecen como las responsables de la resistencia a las quinolonas en estos microorganismos. No existe correlación entre las mutaciones presentes
en gyrA y parC y la resistencia a quinolonas. Entre los aislamientos con alto nivel de resistencia o resistencia intermedia a quinolonas encontramos perfiles genéticos que varían desde gyrA/parC silvestre a la presencia de una única mutación en gyrA
o parC. No existe correlación entre sensibilidad y ausencia de mutaciones en las topoisomerasas, encontrando doble mutación gyrA/parC en cepas con CMI por debajo del punto de corte que determina sensibilidad. La comparación entre las secuencias de
nucleótidos de la ARDR de los genes gyrA y parC de las diferentes especies del género Corynebacterium no permite establecer relaciones filogenéticas entre ellas. Las cepas estudiadas de C.amycolatum y C.jeikeium presentan una alta resistencia a
todos los macrólidos. El porcentaje de cepas resistentes a eritromicina entre las cepas de C.amycolatum estudiadas es de un 77.2% aumentando este porcentaje de resistencia en las cepas de C.jeikeium al 83,3%. Los cetólidos se muestran mucho más
activos que los macrólidos frente a las bacterias corineformes, siendo sensibles a telitromicina un 52,3% y un 70% de las cepas de C.amycolatum y C.jeikeium resistentes a eritromicina.
El fenotipo de resistencia MLSB es de tipo constitutivo. No se encontró ningún aislamiento con fenotipo M. El gen erm(X) fue detectado en el 100% de las cepas resistentes a los macrólidos, pero también, de forma sorprendente, en un porcentaje
alto de cepas sensibles con CMIs de 0.12 y 0.25 ug/ml. En estas últimas, este gen presentó cuatro mutaciones que podrían explicar la ausencia de actividad de la proteína Erm(X). Linezolide, al igual que los glucopéptidos, es activo frente al 100%
de las cepas estudiadas de C.amycolatum y C.jeikeium. Ambos antimicrobianos pueden ser utilizados en el tratamiento empírico de infecciones graves ocasiondas por microorganismos del género Corynebacterium. Quinupristina-dalfopristina también es
activo frente a la mayoría de las cepas de C.amycolatum (87.7% de cepas sensibles) y C.jeikeium (77.8% de cepas sensibles), teniendo una actividad superior a la de telitromicina, pero inferior a la presentada por linezolide. PARASITOFAUNA EN RAYAS DE LA PLATAFORMA CONTINENTAL DE LA RÍA DE MUROS Y NOYA . Autor: ARAGORT FERNÁNDEZ WALKIRIA COROMOTO. Año: 2001. Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.
Resumen: El estudio parasitológico de 132 elasmobranquios pertenecientes a la familia
Rajidae: Raja brachyura, R. Microocellata, R. Undulata y dos especies identificadas como Raja spp., capturadas en la plataforma continental gallega, frente a la Ría de Muros-Noya, durante el período comprendido entre marzo 1999 a marzo 2000, ha
permitido evidenciar que dichos peces se encuentran parásitos por cinco grandes grupos: Protoxoa, Monogenea, Cestoda, Nematoda y Crustacea.
Se realizó un estudio taxonómico, morfométrico y estadístico de cada una de las especies halladas, así como un análisis dentro de cada hospedador.
Se encontraron un total de 32 especies distribuidas así:
2 Protoxoarios: uno intracelular, Haemogregarina delagei y otro extracelular, Trypanosoma rajae.
5 Monogeneos: cuatro ectoparásitos, Rajonchocotyle emarginata, Acanthocotyle sp., Merizocotyle undulata, Empruthotrema raiae, y un enteroparásito, Calicotyle Kröyeri.
18 Cestodos: Echinobothrium brachysoma, Grillotia erinaceus, Grillotia sp., Nybelinia lingualis, Onchobothrium uncinatum, Acanthobothrium tripartitum, A. Dujardini, Acanthobothrium sp. Tipo 1, Acanthobothrium sp. Tipo 2, Phyllobothrium lactuca,
Crossobothrium sp., Tritaphros retzii, Echeneibothrium fallax, E. Macultum. E. Variable, Echeneibothrium sp. Tipo 1, Echeneibothrium sp. Tipo 2 y Lecanicephalum sp. Todos se hallaronparasitando la válvula o intestino en espiral, excepto Nubelinia
lingualis, la cual se encuentra además en estómago.
6 Nematodos; Piscicapillaria freemani, Anisakis simplex, Pseudanisakis rotundata, Hysterothylacium sp., Proleptus sp., Historceta microocellatus, los cuales son, en su mayoría enteroparásitos, excepto Historceta microocellatus, especie
encontrada en vísceras.
1 Copépodo: Holobomolochus sp., se encontró en tejido branquial.
Los cestodos son la comunidad parasitaria que presenta el mayor efecto sobre los hospedadores, con un índice de importancia relativa de 89%, dicho grupo de helmintos se localizó casi exclusivamente en la región anterior del intestino en
espiral.
La abundancia de la parasitofauna (sin incluir los protozoarios) fue de 16.381 parásitos, de los cuales la frecuencia se distribuyó así: 51% cestodos, 38% monogeneos, 10% copépodos y 1% nematodos.
El coeficiente de similaridad de Sorensen, aplicado a los hospedadores con mayor abundancia parasitaria, demostró que R. Brachyura y R. Microocellat presentan una semejanza, en su parasitofauna de 88%.
En el grupo de los nematodos se describen un nuevo género y especie Historceta microocellatus, con una prevalencia de 9% y una intensidad media de 2. PRESENCIA DE LARVAS DE ANISÁKIDOS (NEMATODA: ASCARIDOIDEA) EN PESCADO DE COSNUMO CAPTURADO EN LA
ZONA PESQUERA DE TARRAGONA. Autor: OSANZ MUR ANA CRISTINA. Año: 2001. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: VETERINARIA. Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.
Resumen: Se
investiga la presencia de larvas de anisákidos por los métodos de disección y digestión en 1960 especímenes de pescado fresco capturados durante diferentes periodos en la zona pesquera de Tarragona (España), al noroeste del mar Mediterráneo.
Las ocho especies sometidas a estudio son sardinas (Sardina pilchardus) (160 ejemplares), boquerones (Engraulis encrasiocholus) (153 ejemplares), baladillas (Micromesistius poutassou) (166 ejemplares), merluza (Merluccius merluccius) (267
ejemplares), brótolas (Phycis blennoides ) (123 ejemplares) fanecas (Trisopterus minutus capelanus) (84 ejemplares), caballas (Scomber scombrus) (456 ejemplares) y jureles (Trachurus trachurus) (155 ejemplares).
No se hallan larvas en sardinas ni en boquerones. La presencia de anisákidos se detecta en bacaladillas con prevalencia entre 18,7% y 28,4% según el periodo, merluza (14,2%-19%),caballa (9,5-18,5%) y en menor proporcioón en brótola (4,7%-8,4%),
jurel (7,1%) y faneca (1,2%).La intensidad media de infección más elevada corresponde a las caballas con 6,3 larvas y a las brótolas con 5, mientras que el resto de especies, presentan entre 1 y 3,3 larvas.
Las localizaciones preferenes de las larvas de anisákidos en el pesacado son sobre todo la cavidad pertoneal, el hígado (principalmente en merluza y bacaladilla) y las serosa digestiva (Caballa, jurel y brótola). Se presentan en mucha menor
proporción en la musculatura.
El género Anisakis es el más común y frecuente identificado mientras que los géneros Contracaecum e Hysterothylacium se observaron en porcentajes menores. Además, el género Hysterothylacium es el único que se presenta en brótolas y fanecas.
Se confirma que en algunas especies de pescado estudiadas (merluza), la presencia de anisákidos varía proporcionalmente con la edad del pez, la edad se deduce mediante las variables de la longitud y del peso.
En algunas especies de pescado (bacaladilla y caballa) también se parecian fluctuaciones debidas a factores temporales a lo largo de los periodos de los que se realiza el estudio.
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