PATOLOGIA EXPERIMENTAL, 2

Autor: BAYON LARA ANA M..
Año: 2001.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID.

Resumen: En los últimos años se ha observado un incremento en la incidencia del cáncer colorectal en los países más socioeconomicamente avanzados. Este hecho hace cada vez más urgente el concoer los factores etiológicos. Entre estos factores en las últimos años se ha considerado la acidez gastrica y su consecuencia hormonal, la hipergastrinemia. Nuestro objetivo es comprobar el papel de la hipergastrinemia en la génesis del cáncer de colon en las ratas vagotomizadas. Con esta finalidad utilizamos un total de 86 ratas Wistar a las que dividimos aleatoriamente en dos grupos. Un grupo control y un segundo grupo de ratas vagotomizadas. Como agente inductor de tumoraciones colonicas empleamos el DMH. En una primera etapa distribuimos a las ratas en tres grupos: Grupo A ratas a las que administramos DMH a dosis de 20 mg/Kg durante 10 semanas consecutivas. Grupo B, ratas a las que administramos 20mg/Kg de DMH durante 5 semanas consecutivas. Grupo C, ratas a las que administramos 5 mg/Kg de peso de DMH durante 5 semanas consecutivas. En un segunda fase realizamos a las ratas una vagotomia troncular con piloroplastia y miotomia de Heller, distribuyendo a los animales en distintos grupos: Grupo D ratas a las que previamente a la administración de 20 mg/Kg de peso de DMH, se las realiza 120 días antes la vagotomia anteriormente descrita. Grupo E ratas a las que previa a la administración de 20 mg/Kg de DMH se las realiza 7 días antes una vagotomia. Grupo F, ratas a las que se las administra 5 mg/Kg de peso de DMH 120 días despues de realizar la vagotomia. Grupo G ratas a las que se las administra 5 mg/Kg de peso 7 días después de realizar la vagotomia. Finalmente comparamos los grupos de ratas no vagotomozadas (controles) con los grupos de ratas vagotomizadas, en iguales condiciones de dosis recibidas de DMH, valorando la incidencia de tumores colorrectales provocados por el carcinogeno. Concluimos que no se observa una mayor incidencia de lesiones tumorales en las ratas vagotomizadas. Asi pues la hipergastrinemi no parece incrementar el riesgo de padecer cáncer de colón en ratas vagotomizadas.

Autor: CARRASCAL VELASCO M. TERESA .
Año: 2001.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSIDAD PAIS VASCO.

Resumen: La IL-18 es un nuevo miembro de la familia de la IL-1 que juega un papel central en la respuesta inmune por su acción sobre la diferenciación de los linfocitos Th1, la citotoxicidad mediada por celulas y la inflamación. Se ha descrito que la producción de IL-18 constitutiva o manipulada geneticamente puede mejorar la respuesta inmune y aumentar la supervivencia. Ademas, la IL-18 ha sido propuesta como una ayuda en las terapias contra el cáncer. Sin embargo, las células tumorales de humanos o de roedores pueden producir IL-18 y su concentración sérica puede incluso incrementarse durante la metástasis si lo comparamos con los niveles que muestran los pacientes en los primeros estadios de cáncer. Por tanto, el papel de la IL-18 en la progresión del cáncer y la metastasis permanece en controversia. La IL-18 comparte con la IL-1 la misma familia de receptores y varias etapas de la señal de transducción. Por tanto, la IL-18 tiene unos efectos proinflamatorios importantes, lo cual incluso puede contribuir al daño tisular, como por ejemplo durante la inflamación aguda del higado. Usando células de MB16, se ha descrito que la celulas del sinusoide hepatico tambien liberan IL-18 en respuesta a la interacción de las celulas de melanoma con la microvasculatura del higado, lo cual incrementa la adhesión dependiente de VCAM-1 de las celulas tumorales al ESH. Este paso es critico en la progresión metastatica como se demuestra por la reducción de la actividad metastatica que se observa en ratones knockout para el ICE y la IL-1beta inyectados con MB16. Esto parece estar regulado por una cascada inflamatoria por la cual productos solubles del MB16 hacen que el ESH secuencialmente libere TNF-alfa, IL-1beta e IL-18 la ultima citocina responsable de la regulación positiva de VCAM-1 via H2O2 por un mecanismo dependiente de NfkappaB. Además, ha sido descrito que las celulas de MB16 pueden promover su propio inmunoescape por la regulación del Fas-L dependiente de la expresión de intermediarios reactivos del oxigeno vía un mecanismo dependiente de IL-18. Por tanto, esta por dilucidar si la IL-18 constituye o no una gran herramienta contra la progresión del cancer. Para una mayor caracterización del balance pro-metastatico se estudiaron los niveles de IL-18 y TNF-alfa en sangre hepatica, ambas se incrementaban durante la colonizacion hepatica de las celulas del MB16. A continuación se comprobó que la producción de IL-18 inducida por la MB16 regulaba la expresion endotelial de VCAM-1 a traves de un ultimo paso en la cascada endotelian mediado por H2O2. El bloqueo del mismo con catalasa o NAC eliminaba lo incrementos en los porcentajes de adhesión de las celulas del MB16 al ESH, al igual que eliminaba la expresión de VCAM-1 por parte del ESH cuando este interaccionaba con celulas el MB16. Seguidamente tras observar que la incubación del MB16 con medio condicionados de ESH, activados con MC-MB16 aumentaba los niveles de adhesión del este melanoma a un ESH y que estos aumentos eran IL-18 y TNF-alfa dependientes se paso a estudiar el efecto directo de la L-18 y TNF-alfa recombinante murinas, asi se determino la acción proadhesiva de esta citocinas viendose que la IL-18 actuaba por un mecanismo dependiente de la interacción VCAM-1/VLA-4. La acción de la IL-18 hasta llegar a provocar un aumento en la expresión de VLA-4 era un mecanismo dependiente de H2O2 via TNF-alfa, que implicaba la translocación de NFKappaB. Todo este proceso estaba mediado por el estrés oxidativo cuando las celulas presentaron baja actividad proliferativa, pero independiente de estos cuando presentaron una alta actividad proliferativa. Habiendose visto la gran importancia que tiene la IL-18 tanto a nivel endotelial, como a nivel del MB16 en el desarrollo de las metastasis hepaticas, se estudiaron los efectos que se producian en el proceso de progresión tumoral al bloquear la acción de la IL-18, mediante el uso de la Il-18 Binding Protein (Proteina de union a la IL-18). Asi, se observo, la disminución en la implantación metastatica y crecimiento de las celulas de MB16 en ratones a los que se les había pre-tratado con IL-18BP a diferentes concentraciones. Para estudiar este mecanismo, se determino el arrestro en la microcirculación hepática in vivo de las celulas de MB16 y su adhesión in vitro a células del ESH aisladas 12 horas despues de la inyeccion de las celulas tumorales en ratones pre-tratados o con IL-18BP. Ya que, la adhesión de las celulas de MB16 al ESH esta mediada principalmente por VCAM-1, tambien se valoro la disminución en la expresión de VCAM-1, tras 12 horas de la inyección de las celulas tumorales en ratones pretratados o no con IL-18BP. Además desde que el tratamiento con IL-18BP una vez que las metástasis fueron establecidas reducia su volumen, se considero que la IL-18 podia funcionar como un factor de crecimiento para las celulas tumorales.

Autor: SANJUAN PEREZ ALEX.
Año: 2001.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: UNIVERSITAT DE BARCELONA. FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCION Distintos tratamientos hormonales han sido utilizados para la sintomatología climatérica pero no todos ellos tienen el mismo perfil clínico. La enfermedad cardiovascular es un problema importante de salud, y la tibolona, el raloxifeno, los estrógenos y distintos progestágenos han sido estudiados para encontrar el que mejor proteja frente a la aterosclerosis con menores efectos adversos. OBJETIVOS Investigar los efectos de la tibolona, el raloxifeno, y el estradiol sólo o combinado con acetato de ciproterona en la aterogénesis aórtica y el peso uterino, en conejas suplementadas con una dieta hipercolesterolémica. MÉTODOS Se utilizaron 48 conejas blancas neozelandesas durante 16 semanas. Los animales fueron sometidos a una laparotomía y randomizados en 6 grupos. Cuarenta conejas fueron castradas, y las otras 8 no (grupo sham, S). Las conejas castradas fueron divididas en 5 grupos de 8 animales cada uno para recibir respectivamente tibolona (grupo T), raloxifeno (R), estradiol (E), y estradiol más acetato de ciproterona (EC). El grupo control (C) no recibió tratamiento hormonal. RESULTADOS A los 4 meses la extensión de la placa de ateroma aórtica ocupada en porcentaje un 30,4% en el grupo C, un 24,5% en el grupo S, un 10,2% en el grupo T, un 30,3% en el grupo R, un 17,9% en el grupo E y un 28,1% en el grupo EC. El contenido aórtico de colesterol respecto al peso aórtico fue de 8,55 ug/mg en el grupo C, 11,97 ug/mg en el grupo S, 1,86 ug/mg en el grupo T, 3,82 ug/mg en el grupo R, 2,86 ug/mg en el grupo E group y de 5,24 ug/mg en el grupo EC. Los pesos uterinos en gramos fueron; 1,89 (grupo C), 2,24 (S), 7,38 (T), 1,94 (R), 9,92(E), y 5,94 (EC). CONCLUSIONES Nuestro estudio muestra una disminución en la extensión de la placa de ateroma aórtica en conejas castradas sometidas a una dieta hipercolesterolémica tratadas con tibolona o estradiol, y una disminución del colesterol aórtico en las conejas tratadas con tibolona, raloxifeno y estadiol. Aunque las conejas con tibolona muestran un incremento del peso uteriono contrario a lo observado en humanos.

Autor: JIMÉNEZ FERNÁNDEZ ANA M..
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA DE LA UNIVERSIDAD AUTÓNOMA .

Resumen: En la presente tesis se realiza un estudio acerca de cuales son los mecanismos que se producen en la pared vascular y que dan lugar a la disfunción endotelial observada en la aterosclerosis. Para realizar este estudio se determinó la función endotelial así como la expresión de la enzima óxido nítrico sintasa endotelial (NOSe) y la presencia de la proteína EDIP que degrada el ARNm de la NOSe, en conejos hipercolesterolémicos. Observándose, que efectivamente, los conejos hipercolesterolémicos tienen disfunción endotelial, la cual se asocia con una disminución en la expresión de NOSe y una estimulación de la actividad de unión de EDIP al ARNm de la NOSe. Estos efectos fueron completamente prevenidos por el tratamiento con cerivastatina, simvastatina y atorvastatina, y sólo parcialmente prevenidos con el tratamiento con pravastatina o con la regresión a dieta normocolesterolémica. En la presente tesis se ha encontrado una correlación entre la expresión de NOSe, la estabilidad del ARNm de la NOSe y la proteína EDIP en las células mononucleares y en el endotelio de la pared vascular. Este hecho de que exista una asociación entre los cambios de expresión de la NOSe yla actividad de unión de EDIP en el endotelio y en células mononucleares, deja abierta la posibilidad de emplear la célula mononuclear como marcador de la función endotelial en la pared vascular. Se han analizado diferentes métodos hipocolesterolemiantes y habiendo obtenido reducciones de colesterol similares, en esta tesis se postula que la mejora de la función endotelial obtenida con algunas estatinas es debida a mecanismos colesterol-dependientes y colesterol-independientes. Con objeto de testar los mecanismos independientes de colesterol se realizaron una serie de experimentos en células endoteliales bovinas en cultivo estimuladas con TNF-alfa en condiciones fijas de colesterol. De manera que la cerivastatina previno el aumento de la presencia de EDIP por TNF-alfa, protegiendo así la expresión de la NOSe. Este efecto protector de la cerivastatina fue prevenido por el mevalonato, sugieriendo la importancia de los metabolitos implicados en la síntesis de colesterol. En estos mecanismos de regulación de la NOSe y la proteína EDIP no se encontró implicado el factor nuclear-kB. Esta tesis tiene una serie de hallazgos originales, pero quizás uno de los resultados más importantes sea la comprobación de que las modificaciones en la proteína EDIP, que se encuentra en las células mononucleares, se asocia con las modificaciones de esta misma proteína en la pared vascular. Así como que la mejora de estos parámetros por la acción de las estatinas no se debe a un efecto clase de esta familia de fármacos.

Autor: FORTEA BUSQUETS JOSEP.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DIVISIÓ DE CIÉNCIES DE LA SALUT (U. DE BARCELONA).

Resumen: Trabajo experimental que parte de la hipótesis que el antibiotic-lock es un método útil para el tratamiento local de la infección de catéter. Para esclarecer algunas dudas existentes con esta forma de tratamiento, se definen los objetivos siguientes: Estandarizar un modelo animal de infección asociada a catéter que permita valorar diversas pautas de tratamiento sin la retirada del catéter, evaluar la utilidad de la heparina en el tratamiento antibiótico local de la infección de catéter y evaluar la eficacia de diferentes pautas antibióticas en el tratamiento local de la infección de catéter. La tesis estudia en cepas de S.aureus aisladas de pacientes afectos de sepsis por catéter de los Hospitales Vall d'Hebron de Barcelona: la sensibilidad a heparina, vancomicina, ciprofloxacino y rifampicina en fase de crecimiento exponencial, estacionario y adherido a catéter, es decir, formando biocapas bacterianas; la eficacia in vitro de las combinaciones de vancomicina o ciprofloxacino con heparina o rifampicina con el método de las curvas de letalidad. También analiza la estabilidad de vancomicina a la concentraciónd e 2000 ug/mL (V2000) y ciprofloxacino a 1000 ug/mL (C1000) con heparina a 2500 Ul/mL (H2500); así como de V2000, ciprofloxacino a 2000 ug/mL (C2000) y rifampicina a 3000 ug/mL (R3000) solas y las combinaciones de V2000 y C2000 con R3000 hasta las 75h. Todas las determinaciones se hacen por triplicado. Así mismo, aporta un nuevo modelo animal de infección de catéter con conejos New Zealand a los que se les inserta un catéter de silicona en la vena cava inferior a través de la vena yugular, se tuneliza hasta la zona interescapular y se infecta con un inóculo de S.aureus del orden de 10(8)ufc/mL por medio de una inyección intraluminal. A las 18 horas(h) se inician los diferentes grupos de tratamiento: H2500, V2000 y C1000 solas y las combinaciones V2000 y C1000 con H2500; y V2000, C2000 y R3000 solas y las combinaciones de V2000 y C2000 con R3000, en administración intraluminal única en grupos de tratamiento de 24 ó 72 h, de duración. La evaluación de los grupos de tratamiento se hace por medio del lavado, el rodaje y el sonicado de los 4 cm distales del segmento de catéter. Finalmente, estudia la aparición de cepas mutantes resistentes a ciprofloxacino y/o rifampicina. Se encuentra que heparina a concentraciones iguales o menores a 6000 Ul/mL no tiene actividad antibacteriana frente a las cepas de S.aureus estudiadas; que vancomicina, ciprofloxacino y rifampicina cuando se evaluan frente a bacterias formando biocapas presentan incrementos poco importantes de la concentración inhibitoria mínima pero un aumento muy considerable de su concentración bactericida mínima; en los estudios de las combinaciones, heparina no representa ninguna potenciación del efecto antibacteriano de vacomicina o ciprofloxacino, y la combinación de vancomicina o ciprofloxacino con rifampicina no demuestra mayor actividad que rifampicina sola. En relación a la estabilidad, vancomicina y ciprofloxacino se mantienen estables al menos 72h cuando se combinan con heparina o rifmapicina a las concentraciones estudiadas. En relación a los estudios in vivo: se ha estandarizado un nuevo modelo animal de infección de catéter que permite el tratamiento local de la infección de catéter con la técnica del antibiotic-lock. Los experimentos terapéuticos han permitido concluir que heparina por si misma no tiene ningún valor en el tratamiento local de la infección de catéter, ni sola ni combinada con los antibióticos del estudio. De los antibióticos estudiados, el más eficaz ha sido rifampicina y al menos vancomicina; es posible esterilizar la superficie externa de un catéter infectado por medio de la administración únicamente endoluminal de antibióticos; el tratamiento de la infección de catéter por S.aureus con rifampicina durante 24h facilita la aparición de cepas resistentes y esto no sucede si el tratamiento se prolonga por espacio de 72h o se combina rifampicina con vancomicina o ciprofloxacino.

Autor: BLANCO CANO SANDRA.
Año: 2001.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: ESCUELA DE DOCTORADO Y DE FORMACIÓN CONTINUADA.

Resumen: Uno de los elementos que influyen en el desarrollo de la glomerulosclerosis es la alteración de los lípidos que junto a factores de riesgo como la hiperglucemia, la hipertensión y la hiperinsulinemia modulan el curso o evolución de ésta a lo largo del tiempo. El objetivo de este trabajo consiste en elucidar los mecanismos patológicos que provocan el desarrollo de una glomerulosclerosis incipiente en un modelo experimental espontáneo de diabetes mellitus tipo II, hiperlipidemia, obesidad, e insuficiencia renal: la rata Zucker obesa a diferentes edades. Asimismo, intentamos averiguar el papel que tienen las alteraciones del metabolismo lipídico utilizando dos fármacos que están introducidos ampliamente en la clínica. Uno de ellos es un inhibidor del enzima de conversión de la angiotensina II, el quinapril fármaco que en estudios previos en nuestro laboratorio demostró que era capaz de reducir y/o prevenir la nefropatía. El segundo fármaco que utilizamos fue la atorvastatina, inhibidor del enzima hidroxi-coenzima A reductasa, principal enzima implicado en la regulación de la síntesis del colesterol. Para ello se estudiaron diferentes parámetros bioquímicos, el área glomerular (estudios de morfometría), el número de lesiones glomerulares focales, la ultraestructura glomerular (microscopía electrónica), la expresión de diferentes citocinas (RT-PCR-competitiva e hibridación in situ), factores de transcripción (southwetern inmunohistoquímico) y diferentes marcadores de lesión renal (estudios inmunohistoquímicos) que pudieran ayudarnos a definir mejor el desarrollo de la glomerulosclerosis en la rata Zucker obesa. Se utilizaron como controles negativos los homológos heterocigotos Fa/fa, que nos permitieron discernir si la causa de las lesiones observadas correspondía al colesterol y/o al genotipo de las ratas Zucker obese. Como conclusión general el presente estudio propone al colesterol como el factor metabólico más importante en la inducción de la lesión renal en la RZO. Se observa un discreto protagonismo de las citocinas glomerulares en el desarrollo de la GLS y destaca, sin embargo, un papel determinante la presencia de la lesión podocitaria y la inflamación tubulointersticial.

Autor: MARTINEZ RODRIGUEZ M. LUISA.
Año: 2000.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: La hipertrofia ventricular izquierda es una respuesta adaptiva del corazón a una sobrepresión crónica, que aunque en un principio permite mantener la función cardiaca, a lo largo plazo se asocia a un aumento de mortalidad. Es un hecho probado, que el corazón hipertrófico muestra diversas alteraciones tales como fibrosis, dipersión de la refractoriedad y cambios electrofisiológicos, que hacen al mismo más susceptible a las arritmias. Por otro lado, también se ha demostrado que el desarrollo de hipertrofia cardiaca, se caracteriza por una vuelta a patrones embrionarios, mediante la reexpresión de genes fetales y protooncogenes en el miocito adulto. Él canal de calcio tipo T (IcaT)se asocia a procesos de crecimiento y su mayor densidad en el tejido especializado en la conducción y en células automáticas, hace que se relacione a su vez, con la función marcapasos cardiaca. Por todo lo expuesto anteriormente realizamos un estudio en ratas, a las cuales se las indujo una hipertrofia cardiaca mediante estenosis aórtica abdominal. En las células ventriculares aisladas de corazones controles a hipertróficos disociados enzimáticamente, tratamos de analizar la presencia de IcaT, profundizando en su caracterización y modulación farmacológica. Los resultados mostraron que la corriente IcaT, únicamente está presente en corazones hipertróficos de rata, y no así en situación control. Esta corriente se caracterizó por su cinética, su dependencia de voltaje, su similar selectividad al bario frente al calcio y su potente bloqueo por niquel y mibefradilo. Además presento una corriente ventana entre el intervalo de potenciales de- 60mV a -20 mV, lo que supone una corriente de entrada fluyendo en la fase final de meseta del potencial de acción, lo que favorecería la aparición de arritmias por postdespolarizaciones tempranas, en el corazón hipertrófico. Por último, IcaT se mostró susceptible a la modulación farmacológica por diversos agentes, tales como dihidroporidinas, estimulación adrenérgica y péptidos internos.

Autor: FERNANDEZ LOMBARDIA JESUS.
Año: 2000.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DPTO. DE CIRUGIA-UNIVERSIDAD DE SALAMANCA.

Resumen: Los factores de crecimiento son polipéptidos que se producen a raíz de la activación de protooncogenes y que regulan el desarrollo y crecimiento de los tejidos en general. Las neurotrofinas son una subfamilia de factores de crecimiento que actuan fundamentalmente sobre algunos tipos específicos de neuronas y alguna células no nerviosas. Presentan dos tipos de receptores, los de baja afinidad(p75) y los de alta afinidad (Trk). El objetivo del presente trabajo es contribuir en la medida de lo posible al conocimiento de la biología de las neurotrofinas y sus receptores en el desarrollo del cartílago articular. Se observó una disminución en la densidad de fibras de colágeno tipo II y de proteoglicanos y glicoproteínas en los animales deficientes en receptores p75 y TrkA.

Autor: MEDINA VILLANUEVA ALBERTO.
Año: 2000.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FAC. DE MEDICINA DE OVIEDO.

Resumen: Los estudios desarrollados sobre modelos experimentales de fracaso renal agudo(FRA) isquémico se han realizado utilizando animales adultos. Es previsible que la respuesta de los animales jóvenes a la agresión isquémica sea distinta a la observada en animales adultos. Considerando que un modelo de FRA isquémico en animales de experimentación jóvenes permitiría una mejor aproximación a los mecanismos fisiopatológicos del FRA que se presenta habitualmente en lactantes y niños de corta edad, el primer objetivo de este estudio fue caracterizar en detalle la evolución del FRA en animales en fase de crecimiento rápido inducido por diferentes periodos de isquemia (60,75 y 90 minutos). Se analizó la mortalidad, la evolución diaria del nitrógeno uréico sérico, la creatinina y el paso corporal y se valoró el daño renal y la proliferación celular a las 48 horas y a los 7 días de la isquemia-reperfusión. En la actualidad se discute la utilidad del tratamiento del FRA con distintos factores de crecimiento, en especial el IGF-I. Dado que no existen datos bibliográficos a cerca de efecto del IGF-I en la evolucion del FRA en animales jóvenes sometidos a isquemia renal, el segundo objetivo planteado en este trabajo fue verificar si el tratamiento con IGF-I mejora la evolución del FRA en estos animales. Para ello se estudiaron ratas jóvenes sometidas a 75 minutos de isquemia renal sometidas a tratamiento con IGF-I o placebo. Además de caracterizar la mortalidad, la función renal y el daño histológico, se valoro:infiltración de neutrófilos a las 48 horas y a los 7 dias. El pinzamiento bilateral de los pedículos renales durante 60.75 y 90 minutos permitió caracterizar tres modelos diferentes de FRA en base a criterios clínico-patológicos. El tratamiento con IFG-I no produjo ningún efecto beneficioso en el modelo de FRA de 75 minutos de isquemia renal.

Autor: ROJO MANAUTE JOSE MANUEL .
Año: 2000.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA-UNIVERSIDAD DE OVIEDO.

Resumen: El trabajo de la Tesis Doctoral ha investigado los efectos patológicos del bloqueo farmacológico del Sistema Renina Angiotensina: SRA(mediante un inhibidor del enzima conversor de Angiotensina, enalpril y un antagonista del receptor tipo I de la Angiotensina II, telmisartan) en ratas gestantes y en crias, durante las dos primeras semans postnatales. En ratas gestantes los receptores tipo I, AT1 de la Angiotensina II, Ang. II son importantes para un desarrollo normal tanto somático como renal de los neonatos. Durante las dos primeras semanas postnatales el SRA es primordial para el desarrollo de la papila renal y el crecimiento y maduración glomerular. Además los AT1 estarían implicados en el crecimiento somático. La administración concomitante de desoxicorticosterona+C1Na y Enalpril previno la atrofia papilar inducida por el enalpril, pero no modificó los cambios en la maduración y crecimiento glomerulares. Estos datos indican que durante las dos primeras semans postnatales la Ang II, por su acción sobre el balance de sodio y/o perfusión renal, es necesaria para un desarrollo normal de la papila. Sin embargo, la Ang II por sus efectos tróficos, participaría en el desarrollo normal glomerular.

Autor: ANDRES PAULS INMACULADA.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA Y ODONTOLOGIA DE VALENCIA.

Resumen: Este estudio se inició con el objeto de determinar el efecto de la naranja y del zumo de naranja en la carciongénesis colónica inducida con 1,2-dimetilhidrazina (DMH) en ratas. Se utilizaron 115 ratas Sprague-Dawley machos. Se destetaron a las tres semanas de vida y se distribuyeron aleatoriamente en tres grupos, tras lo cual se introdujeron las diferentes dietas experimentales que fueron adminsitradas desde este momento hasta el sacrificio de los animales. El grupo control recibió dieta estándar para rata-ratón, el grupo Naranja recibió dieta estándar suplmentada en un tercio de supeso con gajos de naranjza y el grupo Zumo de naranja recibió dieta estándar suplementada con zumo de naranja añadido al agua de bibida (1/3 zumo, 2/3 agua). La inducción tumoral se realizó con DMH (20 mg/Kg peso corporal/semana, vía subcutánea durante 10 semanas) empezando a las 11 semanas de edad. Los animales se sacrificaron a las 43 semanas de vida. La incidencia tumoral fue la siguiente: control, 94,1%; Naranja, 58,5%; Sumo, 55,6%; encontrando una diferencia significativa entre los tres grupos (p=0,0005) no siendo así entre el grupo naranja y el grupo zumo (p=0,793) El número medio de tumores/rata fue: en el grupo control 2,91; en el grupo naranja 1,09 zumo 0,86. La naranja mostró una protección frente al cáncer colorrectal (RR=0,62) así como el zumo de naranja (RR=0,59) al compararlos con el grupo control.Estos resultados demuestran que la naranja ya sea entera o en forma de zumo tiene un efecto protector frente al desarrollo del cáncer colorrectal y no se encunetran diferencias entre una y otro forma de administración de la naranja. Queda por aclarar cuál de los componentes de la naranja es el que actúa en la prevención del desarrollo del cáncer colorrectal, si se debe a una actuación sinérgica de todos ellos, o a sus efectos mecánicos sobre la motilidad intestinal.

Autor: MAINAR LATORRES LUIS JOAQUÍN.
Año: 2000.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA.

Resumen: INTRODUCCION La realización de lesiones auriculares con radiofrecuencia RF o mediante cirugía en zonas cercanas al nodo sinusal, puede afectar a dicha estructura. No está establecida la relación entre lesiones realizadas con RF a nivel auricular y los patrones de activación auricular. OBJETIVOS Evaluar la función sinusal tras realizar lesiones con RF a lo largo del sulcus terminales. Estudiar los patrones de conducción auricular tras realizar lesiones con RF en la pared libre de aurícula izquierda. MATERIAL Y MÉTODOS Se utilizan preparaciones de corazón de conejo aislado y perundido según la técnica de Langerdoff. Tras realizar lesiones con dos intensidades distintas aplicando RF a lo lardo del sulcus terminales se determina en cada estadio el ciclo simusal, el tiempo de recuperación sinusal, el tiempo de recuperación sinusal corregido, el tiempo de conducción sino auricular determinado mediante el test de Narula y por medición directa y la zona del nodo sinusal que presenta una activación más precoz antes y después de efectuar las lesiones. Se analizan los patrones de activación auricular, los electrogramas y las características anatómicas de las lesiones efectuadas con RF en la pared libre de aurícula izquierda, tras realizar las mismas en varios estadíos hasta hacer totalmente confluente la línea de lesiones. RESULTADOS Y CONCLUSIONES Los distintos parámetros analizados de la función sinusal se alteran significativamente con lesiones seversa a lo largo del sulcus terminalis y la zona de primoactivación se desplaza cadualmente en el nodo sinusal. Para bloquear la conducción a través de la línea de lesiones realizadas con RF es necesario solapar las mismas. Los electrogramas de la zona no lesionada suelen ser simples y disminuyen de amplitud y predomina los electrogramas dobles tras realizar las lesiones con RF. Las lesiones son transmurales y presentan necrosis por coagulación

Autor: ESPARZA MARTÍN JOSÉ LUIS.
Año: 2000.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE MEDICINA URV (REUS).

Resumen: Se efectua un análisis comparativo de la efectividad de un grupo de quelantes de la familia de las hdiroxipiridonas, donde se incluye la deferiprona (L1),para movilizar el alumnio acumulado en diversos tejidos de ratas previamente expuestas al metal. La efectividad del tratamiento oral de estos compuestos para quelar el aluminio, se compara con la eficacia parenteral de la desferroxiamina (DFO). A lo largo del proceso experimental se evalúa la vía de administración, el tiempo de exposición al aluminio, la edad y la presencia de insuficiencia renal. Se concluye que la terapia con L1 o con la terapia combinada con DFO+L1 se muestra efectiva para incrementar la excreción urinaria del aluminio asi como la movilización del metal en diversos tejidos de los animales previamente expuestos a dicho metal.

Autor: MENDOZA GÓMEZ M. ENCARNACIÓN .
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: En sistemas fisiológicos y patológicos pueden aparecer alteraciones en la síntesis de ácidos biliares, dando lugar a moléculas inusuales como los allo-ácidos biliares. Estos aparecen en humanos durante la vida fetal y en adultos con determinadas patologías hepáticas (cirrosis, metástasis y hepatocarcinoma). El primer objetivo de esta Tesis Doctoral fue obtener una herramienta que permitiese estudiar el comportamiento biológico de los allo-ácidos biliares, para ello se sintetizó el ácido allo-cólico. A continuación se llevaron a cabo estudios de transporte hepatobiliar en ratones "in vivo", e "in vitro" en modelos de expresión de proteínas transprotadoras de ácidos biliares utilizando una línea celular de ovario de hamster chino CHO y oocitos de Xenopus laevis. También se estudió si la hepatocarcinogénesis experimental tenía repercusiones en la cantidad y proporción de las diferentes especies moleculares de ácidos biliares presentes en el núcleo de las células hepáticas y la vectorialización hacia el núcleo de este ácido biliar plano comparándolo con el ácido cólico. Por último se estudió si el ácido allo-cólico afecta a procesos de apoptosis, diferenciación y proliferación de las células del parénquima hepático. El ácido allo-cólico presenta un comportamiento colefílico similar al de otros ácidos biliares. Se diferencia de ellos por su marcada capacidad para traslocarse al núcleo de las células hepáticas e inducir apoptosis, lo que sugiere que puede jugar un papel en el concierto de señales que participan en los procesos de remodelación tisular durante la organogénesis y la regeneración hepática. Los resultados de esta Tesis Doctoral abre una interesante vía de investigación que deberá abordar el estudio de esta hipótesis, así como el posible papel del ácido allo-cólico en situaciones patológicas como la hepatocarcinogénesis.

Autor: BRIZ SÁNCHEZ OSCAR.
Año: 2000.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPTO. DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: El desarrollo de resistencia de las células tumorales al cisplatino es una de las causas del fracaso de la quimioterapia basada en este fármaco. OBJETIVOS Investigar la utilidad de los Bamet, derivados de cisplatino y ácidos biliares, para superar la resistencia al cisplatino de tumores hepáticos, y si su encapsulación en liposomas mejora su captación y actividad citostática. RESULTADOS Se han puesto a punto métodos de encapsulación de Bamet en liposomas de forma eficaz, lo que aumentó considerablemente su solubilidad en agua. Combinando la exposición a concentraciones crecientes de cisplatino de líneas celulares tumorales con una solección colonal doble, se obtuvieron células resistentes, con capacidad de reducir los niveles intracelulares del fármaco. La captación del compuesto aumentó cuando el cisplatino se unió a un ácido biliar, lo que pudo ser determinante para superar parte de la resistencia al fármaco. La inclusión de Bamet en liposomas incrementó aún más la cantidad acumulada en las células, lo que se tradujo en un mayor efecto citostático. En comparación con el cisplatino, el Bamet-UD2 presentó una marcada vectorialidad hacia el hígado en ratones. El uso de modelos experimentales de expresión de proteínas trasnportadoras en oocitos de rana Xenopus laevis y células CHO trasnfectadas demostró que los Bamet pueden alcanzar el interior de lo hepatocitos mediante los sistemas de transporte típicos de los ácidos biliares. El cisplatino fue ineficaz en el tratamiento de ratones portadores de un tumor hepático de células resistentes al fármaco. El Bamet-UD2 aumentó considerablemente su superivencia. Este efecto beneficioso fue aún más fuerte cuando el Bamet UD2 se encapsuló en liposomas. CONCLUSIÓN La unión del cisplatino a un ácido biliar para obtener los compuestos Bamet y su inclusión en liposomas, constituye una estrategia farmacológica que aumenta la eficacia y supera la resistencia tumoral a la quimioterapia.

Autor: CRUZ MUÑOZ ADOLFO.
Año: 1999.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DPTO BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR. U. DE CORDOBA.

Resumen: OBJETIVOS:El objetivo del presente estudio fue en primer lugar compara los efectos de la vitamina E y melatonina sobre los marcadores de estrés oxidativo (lipoperósidos, medidos como malonildialdehído (MDA), glutatión reducido (GSH) y glutación oxidado (GSSG) y sobre las alteraciones bioquímicas asociadas a la ictericia obstructiva experimental (biblittubina, FA, GGT, ALT y AST); en segundo lugar, evaluar la actividad de las enzimas antioxidantes tras la adminsitración de los antioxidantes (cartalasa, superóxido dismutasa (SOD),glutación reductasa (GSH-Rd), glutación peroxidasa (GSH-Px) y glutación transferasa (GSH-Tr). METODO:La colestasis experimental fue conseguida en ratas Wistar macho mediante doble ligadura y secciñon de la vía biliar principal que fue mantenida durante 7 días. Tanto la vitamina E (15 mg/kg/48h IP) como la malatonina (500 microg/kg/24h IP) fueron administradas desde un día antes de su intervención hasta el día de su sacrificio. RESULTADOS:La ligadura de la vía biliar se acompañó de un significativo incrememto de las cifras de MDA y de GSSG así como de un significativo descenso tanto en los valores de GSH como en la actividad de las enzimas antioxidantes excepto para la GSH-Px.La administración de antioxidantes determinaron un significativo descenso en las cifras de MDA así como una elevación significativa del GSH, aunque el efecto de la melatonina fue superior en relación a la vitamina E. La actividad de las enzimas antioxidantes experimentaron un significativo incremeneo bajo la acción de la melatonina; por el contrario, la vitamina E apenas tuvo efecto sobre la actividad de dichos enzimas. Los antioxidantes disminuyeron significativamente las cifras de bilirrubinas, aunque sólo la melatonina descendió las cifras de ALT y AST. CONCLUSIONES: En nuestro estudio la melatonina ha sido más eficaz que la vitamina E en reducir los parámetros de colestasis y el grado de estrés oxidativo, comportándose como mólecula hepatoprotectora frente a la lesión hepática causada por la ictericia obstruvtiva. PALABRAS CLAVE: ictericia obstructiva; radicales libres; vitamina E; melatonina.

Autor: MARTINEZ CABAÑAS ISABEL.
Año: 1999.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: HOSPITAL PUERTA DE HIERRO DE MADRID.

Resumen: Introducción. La encefalomielitis alérgica experimental (EAE) es una enfermedad autoinmune mediada por células T que constituye el mejor modelo experimental de la enfermedad humana esclerosis múltiple. La EAE se induce en animales susceptibles genéticamente mediante la inoculación con tejido nervioso completo, o determinados antígenos como la proteína básica de mielina. Materiales y Métodos. EAE aguda monofásica en ratas Lewis. Tratamiento de la EAE con Rolipram (5 mg/kg de peso corporal s.c. desde el día IPI a el día 17 PI) ó con aminoguanidina (400mg/kg de peso corporal i.p. Desde el día 1 PI al 17 PI). Estudios patológicos en SNC con tinción de hematoxilina-eosina. Análisis semicuantitativo de expresión de ARNm de genes supuestamente implicados en la enfermedad. Experimentos de proliferación. Determinación de NO en plasma. Análisis por citometría de flujo intracelular. Tinción con Anexina-V. Resultados. La expresión clínica de la EAE aguda monofásica de ratas Lewis se acompaña de un aumento en el SNC de la síntesis de ARNm de las citocinas proinflamatorias IL-1, IL-2, IFN-Y, TNF, LT, del enzima iNOS y de la gelatinasa b. En la periferia, la enfermedad provoca un aumento de la síntesis de ARNm de IFN-y, IL-10 e iNOs así como de NO en plasma. -El tratamiento de la EAE con un inhibidor de fosfodiesteras IV (Rolipram), aminora y retrasa los signos clínicos de la enfermedad, reduciéndose el número de células inflamatorias presentes en el SNC de los animales tratados. Este tratamiento no altera el perfil de expresión de ARNm de citocinas proinflamatorias y reguladoras de las células inflamatorias que acceden al SNC. Tampoco se ve afectada la expresión de ARNm de moléculas de adhesión ICAM-1 y VCAM-1. Por otra parte el tratamiento con Rolipram induce in vivo un aumento de la expresión de ARNm de iNOS y de la síntesis de NO en plasma. El tratamiento con Rolipram incrementa la tasa de apoptosis de los linfocitos T infiltrados en el SNC, lo que unido al efecto inhibidor sobre la entrada de células encefalitógenas retrasa y reduce los síntomas de la EAE. Las funciones inmunoreguladoras atribuidas al óxido nítrico podrían contribuir a la consecución de los efectos beneficiosos observados en la EAE. -El tratamiento con un inhibidor selectivo de iNOs (aminoguanidina), agrava la EAE y reduce el número de animales capaces de recuperarse espontáneamente de la enfermedad, lo que se correlaciona en los días 15 y 17 PI con un incremento del número de células encefalitógenas presentes en el SNC y con un aumento de la expresión de ARNm de IFN-y y TNF. El tratamiento con aminoguanidina in vitro e in vivo induce un aumento de la proliferación de linfocitos T, lo que posiblemente esté facilitando la expansión clonal de células encefalitógenas en la periferia. Por otra parte, la inhibición de la síntesis de óxido nítrico podría estar reduciendo, tal y como sugieren nuestros datos, la retirada de células inflamatorias por apoptosis. Ambos resultados explicarían el efecto perjucial de la administración de fármacos inhibidores de iNOs en la EAE.

Autor: MARTIN-MERINO ACERA M. ROSARIO.
Año: 1999.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.

Resumen: Tesis experimental en la que empleamos 288 ratas Wistar y 75 Hamster (Dorado Sirius) para el estudio de lesiones traumáticas en hígado, bazo y pancreas tratadas con cola de fibrina y anastomosis en intestino delgado y grueso reforzadas con la misma. Se establecieron grupos control en cada uno de los órganos estudiados. Los animales se sacrificaron el 1º, 3º y 6º días postoperatorios. Se realizaron observaciones macroscópicas intraoperatorias y necrópsicas y un estudio microscópico sobre la existencia o no de necrosis y el grado de las misma y el tipo de densidad de la reacción inflamatoria (polimorfonucleares, fibroblastos y células gigantes de cuerpo extraño), comparando los datos obtenidos entre los grupos tratados en cola de fibrina y los controles. Como conclusiones de nuestro estudio se establecieron las siguientes conclusiones: 1- Las colas de fibrina presentan una alta eficacia hemostática. 2- Poseen una buena tolerancia local y sistémica. 3- Presentan una buena capacidad de sellado de los conducjtos biliares intrahepáticos. 4- Son eficaces en la protección de las anastómosis digestivas. 5- Su capacidad de sellado se extiende a la repación de lesiones pancreáticas. 6- Reducen la zona de necrosis. 7- Actúan estimulando a los fibrolastos, favoreciendo el proceso separativo. 8- No se obseraron reacciones de cuerpo extraño a la fibrina.

Autor: NIETO MASA ANA ISABEL.
Año: 1999.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: FACULTAD DE FARMACIA.

Resumen: Ketoprofeno es un AINE quiral cuyo enantiómero S es el activo frente a COX, si bien levoketoprofeno no está exento de provocar reacciones adversas, por lo que recientemente se ha comercializado dexketoprofeno puro. Nos propusimos valorar la influencia de la quiralidad en la incidencia y severidad del daño gastrointestinal inducido por ketoprofeno racémico y sus enantiómeros en modelos de ulcerogénesis aguda y crónica en ratas, así como tratar de dilucidar los mecanismos implicados en la gastroenteropatía. El estudio experimental se realizó invivo con animal entero, y las determinaciones bioquímicas se llevaron a cabo principalmente por técnicas espectrofotométricas e inmunológicas. Los resultados obtenidos inducen a confirmar las ventajas de la utilización de enantiómeros puros de AINE quirales, al observarse una menor gastrolesividad tras el tratamiento con dexketoprofeno en relación al compuesto racémico, en todos los modelos experimentales. Además el levoisómero presentó una mayor toxicidad gastrointestinal que su antípoda óptica. Las lesiones gástricas inducidas por las moléculas en estudio parecen tener un origen isquémico estando implicados los radicales libres derivados del oxígeno. Por el contrario, las lesiones intestinales provocadas por los compuestos más enterotóxicos(racemato y enantiómero R) poseen un componente inflamatorio con la participación de neutrófilos. Además dichas moléculas provocan la reducción de los mecanismos antioxidantes celulares, hecho que puede contribuir a la etipopatogenia del daño.

Autor: MENDOZA ARTECHE LOREA.
Año: 1999.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD DEL PAÍS VASCO.

Resumen: La activación experimental del endotelio por factores proinflamatorios conlleva un aumento en la expresión endotelial de VCAM-1, que facilita la formación de metástasis por las células circulantes de algunos tumores malignos humanos y de animales de laboratorio. Numerosos estudios han pretendidocomprender cómos e activa este mecanismo prometastásico durante la diseminación tumoral en ausencia d euna inflamción experimetnal prvia. Algunos trabajos han demostrado que las células en cultilvo de algunos tumores metastásicos, pueden producir constitutivamente las principales citocinas proinflamatorias que actiarían directamente la adhesividad del endotelio capilar para células metastásicas. Sin embargo, también se ha constatado que le potencial metastásico persiste en tumores sin expresión génica de dichas citocinas.Sobre esta base, el presente trabajo pretendió investigar el mecanismo proinflamatorio que regula el proceso de adhesión capilar de un melanoma murino con elevado poder metastásico -elmelamnoma B16- , y su valor como pasado regulador del proceso de metástasis, analizando en detalle la respueta endotelial inducida por el propio tumor,y buscando los factores turmorales responsables y su regulación. Los resultados obtenidos demuestran que la infiltración hepática del melanoma B16 indujo la expresión endotelial de VCAM-1 facilitando la formación de metástasis tras la adhesión a la pared snusoidal de sus células con expresiónd e la integrina VLA-4. In vitro, dicho tumor produjo factores solubles que indujeronunproceso de activación endotelial en cascada, donde la producicónd e TNF-a indujo al del IL-1b, la cual incrementó la adhesividad endotelial dependiente de VACAM-1 por mediación de IL-18.El potencial estimulante endotelial del melonoma B16 estuvo regulado por un mecanismo de expresióng énica dependietne del factor nuclear de transcripción kappaB, inducible por TNF-a y mediado por el estrés oxidativo cuando sus células presentaron baja actividad proliverativa, pero independiente de e´stos cuando presentaron una alta actividad proliferativa. La molécula de adhesión intercelular-1 (ICAM-1) fue la responsable de la producción endotelial de TNF-a , y determinó el potencial estimulante endotelial del melanoma B16 -estuviera en estado de baja o de alta actividad proliferativa-, a través de un mecanismo de acción determinado por la producicón tumoral de factor(es) activadores de LFA-1, con un peso molecular mayor de 10 kDa. La determinación del potencial estimulante endotelial podría constituir una propiedad del fenotipo metastásico con interés diagnóstico, y la inhibición de su producción en el tumor o de sus efectos sobre el enotelio podría representar una vía innovadora enla terapéutica anti-metastásica.