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BIOTECNOLOGIA



11 tesis en 1 páginas: 1
  • Adipose Cell Metabolism Modulation by Red Wine Procyanidins .
    Autor: Pinent Armengol Montse.
    Año: 2004.
    Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
    Centro de lectura: FACULTAT DE QUÍMICA.
    Centro de realización: Facultad de Química.
    Resumen: Flavonoids, and more specifically, red wine procyanidins, have many beneficial effects against pathologies such as cardiovascular heart disease and related illnesses. Although adipose tissue has a central role in some of these pathologies, including obesity and diabetes, there is a lack of information about the effects of procyanidins on this tissue. This thesis addresses this question. The effects of a grape seed procyanidin extract (GSPE) on the lipid and glucose metabolism of adipocytes were evaluated by taking the 3T3-L1 cell line as a model of study. Results show that the GSPE has insulinomimetic effects, stimulating glucose uptake, glycogen synthesis and trigliceride synthesis. To achieve this, the GSPE shares some of the mechanisms and intracellular mediators of the insulin-signalling pathways (such as GLUT-4 translocation, PI3K and p38 MAPK) but it must also use other, complementary, mechanisms. These results suggest that procyanidins have beneficial effects on diabetes and/or insulin resistance. This is partially proven by in vivo studies that show that GSPE has antihyperglycemic properties on streptozotozin-induced diabetic rats. Also analyzed in this thesis are the molecular mechanisms used by GSPE to explain the already described lipolytic effects. Protein kinase A and PPAR? are shown to be involved in these effects. Some of these results opened up another line of study into the effects of GSPE on the differentiation process of the 3T3-L1. These studies showed that procyanidins alter the differentiation of preadipocytes when added at the induction of differentiation. Since an increase in the number of adipocytes has a negative effect on obesity, this is a promising characteristic of GSPE that should be taken into account when its possible antiobesity properties are studied.
  • TOLERANCIA A DISOLVENTES ORGÁNICOS EN LA CEPA PSEUDOMONAS PUTIDA DOT-T1E (IMPLICACIÓN DE LA BOMBA DE EFLUJO TTGGHI) Y SU UTILIZACIÓN EN BIOTRANSFORMACIONES EN SISTEMAS DE DOBLE FASE .
    Autor: ROJAS MARTÍNEZ ANTONIA M..
    Año: 2003.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN (C.S.I.C).
    Resumen: Pseudomonas putida DOT-T1E, una cepa altamente tolerante a disolventes orgánicos, se asiló de la planta de tratamiento de aguas residuales de Granada. Los mecanismos que esta cepa sea extremadamente tolerante a estos compuestos tóxicos se basan en la disminución de la concentración de los disolventes en el interior celular. Ello se consigue, por un lado, limitando la entrada del disolvente mediante bombas de eflujo de la familia RND. En esta Tesis Doctoral se describe la caracterización de la bomba de eflujo TtgGHI, fundamental para la supervivencia de la cepa en presencia de tolueno y otros disolventes orgánicos. La expresión de esta bomba de extrusión de tóxicos está bajo el control transcripcional del regulador TtgV. Además se demuestra la idoneidad del empleo de este tipo de microorganismos en la biotransformación de tolueno y xilenos en compuestos tales como catecoles, en sistemas de doble fase alcohol alifático.agua.
  • Fitorremediación de arseniato. Distintas aproximaciones para una solución biotecnológica.
    Autor: Catarecha Zoido Pablo.
    Año: 2003.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: Centro Nacional de Biotecnología - CSIC.
    Centro de realización: Centro Nacional de Biotecnología - CSIC.
    Resumen: La presencia de arsénico (As) en el suelo es uno de los más importantes problemas de contaminación del medio ambiente, y pone en peligro la salud de más de 40 millones de personas en todo el mundo. La elevada toxicidad del As se explica por la similitud química con el fósforo (P), ya que la principal forma biodisponible de As es el arseniato (AsV), que se incorpora a las células a través de los transportadores de fosfato (Pi). La fitorremediación se ha revelado como una de las estrategias más adecuadas para recuperar suelos contaminados con metales o metaloides. Las plantas adecuadas para las estrategias de fitorremediación deben ser capaces de tolerar y acumular grandes cantidades del tóxico, cualidad que se llama hiperacumulación. Hoy día sólo se conocen especies hiperacumuladoras de As entre los helechos, de los que su fisiología es prácticamente desconocida. Por otra parte, se sabe que la hiperacumulación de metales pesados en otras especies depende del control transcripcional de determinados mecanismos de homeostasis presentes en especies afines no hiperacumladoras. La mayoría de las hiperacumuladoras de metales pesados pertenecen a la familia de las brasicáceas, como la planta modelo Arabidopsis thaliana, por lo que se decidió utilizar este sistema para estudiar la respuesta genética molecular a la presencia de AsV. En este Trabajo de Tesis se han identificado varios genes inducidos en presencia de AsV, llamados genes ASI, que son nuevos marcadores de la respuesta genética a la presencia de AsV. Asimismo, la presencia de AsV en el medio rebaja la expresión de los genes PHT1 e IPS1, característicos de la respuesta a carencia de Pi. PHT1 codifica el principal transportador de Pi y de AsV de A. thaliana. Esta respuesta sugiere que existen rutas separadas de señalización a AsV y a Pi, de modo que A. thaliana responda a presencia de AsV rebajando la expresión de PHT1 para evitar absorber el AsV, como activando rutas de tolerancia, representadas en los genes ASI. Por otra parte, se identificó y caracterizó el mutante pht1-1, que presenta tolerancia a AsV de manera dominante. La mutación pht1-1 codifica un transportador PHT1 mutante con un cambio de Gly por Glu. El mutante pht1-1 presenta simultáneamente una carencia de Pi interno y una elevada tolerancia a AsV. La sobreexpresión de la proteína mutante proporciona tanto tolerancia a AsV, como una menor capacidad de aprovechar el Pi del medio. El residuo mutado en el transportador mutante está altamente conservado, por lo que se mutageneizó el gen del transportador de Pi de Saccharomyces cerevisiae, PHO84, para que codificara el mismo cambio aminoacídico que pht1-1. La sobreexpresión del alelo mutante de PHO84 en S. cerevisiae PAM-1 recrea los fenotipos observados en pht1-1: dominancia, incapacidad para aprovechar el Pi y tolerancia a AsV, demostrándose con ello la universalidad e importancia del residuo mutado. La incorporación de As en el mutante pht1-1 se produce a una velocidad menor que en la línea silvestre a tiempos cortos, pero sorprendentemente llega a acumular el triple de As tras una exposición prolongada al tóxico. Esta hiperacumulación de As no se correlaciona con una superexpresión de los genes ASI, sino que en el mutante pht1-1 esta expresión es menor que en la línea silvestre. Esto da a entender que la menor velocidad de incorporación de AsV en pht1-1 respecto a la línea silvestre permite a otros mecanismos constitutivos de desintoxicación funcionar mejor. El principal de estos mecanismos sería la producción de fitoquelatinas (PC), que atraparían el AsV y lo acumularían en la vacuola como complejos As-PC, proporcionando así tolerancia e hiperacumulación de As. De este modo, la mutación pht1-1 se revela como un mecanismo positivo y universal para conferir tolerancia e hiperacumulación de As, susceptible de ser aplicado directamente mediante técnicas biotecnológicas, para el desarrollo de sistemas destinados a fitorremediar suelos contaminados con AsV.
  • AVALUACIO DE LA TOXICITAT DE METALLS PESANTS I ARSENIC EN DIFERENTS MODELS BIOLOGICS .
    Autor: FULLADOSA TOMAS ELENA.
    Año: 2003.
    Universidad: GIRONA.
    Centro de lectura: UNIVERSITAT DE GIRONA.
    Centro de realización: UNIVERSITAT DE GIRONA.
    Resumen: En este estudio, la toxicidad de diversos metales y arsénico fue evaluada utilizando diversos modelos biológicos. En la primera parte, el bioensayo de toxicidad Microtox, el cual está basado en la inhibición lumínica de la bacteria Vibrio fischeri, fue utilizado para establecer las curvas dosi-respuesta y determinar los parámetros de toxicidad EC50 y EC20 de diversos elementos tóxicos como el Zn(II), Cu(II), Pb(II), Cd(II), Co(II), Cr(VI), As(V) y As(III). Las interacciones entre los metales divalentes estudiados en mezclas binarias también fueron estudiadas. En la segunda parte, la toxicidad crónica concretamente del Cd(II), Cr(VI) y As(V) fue evaluada utilizando la misma bacteria pero analizando la inhibición de la viabilidad o el crecimiento. En general, se determinó una toxicidad muy baja de los elementos estudiados, que en el caso del Cr(VI) fue atribuida a la capacidad de ésta bacteria para reducir el Cr(VI) a la forma menos tóxica de Cr(III). En la tercera parte de este trabajo, dos modelos biológicos, la línia celular HT29 y cultivos primarios de células sanguínias de Sparus sarba, se utilizaron para evaluar la toxicidad de metales mediante la evaluación de la sobreexpresión de proteínas de estrés. Los dos modelos resultaron ser adecuados para detectar la toxicidad producida por metales.
  • RELACIÓN ENTRE EL CONTENIDO ENDÓGENO DE REGULADORES DE CRECIMIENTO, EL ESTADO ONTOGENÉTICO Y LA CAPACIDAD DE ENRAIZAMIENTO DE BROTES DE CASTAÑO Y ROBLE CULTIVADOS IN VITRO .
    Autor: VIDAL GONZÁLEZ NIEVES PILAR.
    Año: 2002.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: BIOLOGÍA.
    Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES AGROBIOLÓGICAS DE GALICIA .
    Resumen: El objetivo de este trabajo es la comparación, a nivel bioquímico, de brotes de castaño y roble del mismo genotipo pero distinto estado ontogenético para intentar bioquímicos del estado de maduración. Se utilizan varios clones de castaño y roble; los brotes de carácter adulto pertenecen a las ramas de la copa de un árbol adulto, y los de carácter juvenil a los renuevos basales del mismo árbol. Los análisis realizados son la determinación de los niveles endógenos de proantocianidinas, peroxidasas, citoquininas y auxinas. En general se estudia el contenido endógeno de estas sustancias en material establecido in vitro, y además en la determinación de proantocianidinas y citoquininas también se utiliza material recogido in vivo. La determinación de auxinas también se realiza durante el enraizamiento, comparando siempre los brotes de renuevos, que forman raíces fácilmente, con los de la copa, que no lo hacen. Los resultados indican que los niveles de proantocianidinas obtenidos en brotes de castaño cultivados in vitro son mayores en los cultivos procedentes de renuevos basales con respecto a los de la copa. Sin embargo, la tónica cambia de sentido cuando se consideran los niveles obtenidos tras la recogida de brotes in nivo, por lo que no se puede asumir la existencia de una relación directa y sencilla entre proantocianidinas totales y el estado ontogenético del material vegetal de castaño. En lo que respecta a las peroxidasas, dentro de cada clon, los niveles obtenidos en brotes de castaño cultivados in vitro son mayores en los cultivos procedentes de renuevos basales que en los de la copa. Sin embrago, esta correspondencia se pierde cuando se toma en consideración todos los clones analizados, de modo que el contenido en peroxidasas tampoco puede utilizar como criterio para averiguar si un determinado cultivo es de origen juvenil o adulto, ni para inferir su capacidad de enraizamiento. Cuando se analizan las citoquininas de brotes de castaño recogidos in vivo el contenido en los brotes de la copa es superior al de renuevos basales. Los niveles en brotes cultivados in vitro son superiores a las obtenidas in vitro son superiores a las obtenidas in vivo, principalmente en lo que atañe a las citoquininas tipo iPA. Las diferencias más apreciables entre copa y renuevos basales se encuentran en las tipo iPA del clon P2, que son superiores en los brotes de la copa. El resto de las diferencias no son consistentes entre los tres clones estudiados, por lo cual los niveles endógenos de citoquininas no pueden explicar las diferencias de comportamiento de los brotes de copa y renuevos basales, sobre todo en lo que respecta al enraizamiento de los mismos. Dentro de cada clon, los niveles de auxinas (AIA y AIA asparto) en las regiones basales de brotes de castaño y roble cultivados in vitro y recogidos al final de la etapa de multiplicación son superiores en los cultivos procedentes de la copa. Sin embargo, cuando se toman en cuenta todos los clones, las concentraciones de estas auxinas no están relacionadas con la capacidad de enraizamiento de los brotes, por lo que no pueden ser considerados, a priori, como marcadores del nivel de juvenilidad o madurez de un cultivo. En las regiones apicales de los brotes de castaño y roble cultivados in vitro y recogidos al final de la fase de multiplicación los niveles más elevados de AIA corresponden, en general, a los cultivos procedentes de renuevos basales, aunque de nuevo los valores detectados no pueden relacionarse de modo directo con la capacidad rizogénica. Dentro de cada clon, los niveles de AIA aspartato son prácticamente iguales en las dos procedencias estudiadas (copa y renuevos basales). Cuando los brotes de castaño y roble se someten al enraizamiento in vitro sin auxina exógena, éste sólo tiene lugar en los renuevos basales del clon NL100 de roble. Sin embargo, los niveles endógenos de AIA y AIAsp cuantificados tanto en la región basal como en la apical durante los primeros días del proceso no presentan apenas variaciones con respecto a los valores iniciales en ninguno de los clones estudiados, por lo que la evolución de los niveles de auxinas durante el enraizamiento sin aplicación de AIB no puede considerarse marcador de la eficiencia del proceso. Cuando se les aplica AIB, tanto los cultivos de renuevos como los de la copa incrementan la división celular en la zona del cambium y presentan incrementos en sus niveles de auxina. Sin embargo, sólo los cultivos de renuevos basales (y los de la copa de NL100) forman raíces. La cuantificación de los niveles endógenos de AIB, AIA y AISsp durante el proceso indica que las concentraciones de AIB son similares en los cultivos que enraízan y en los que no lo hacen, mientras que estos últimos presentan mayores niveles de AIA y AIAsp, y los mantienen durante más tiempo que los que enraízan fácilmente. Por tanto, y contrariamente a lo esperado, el factor limitante para el enraizamiento no reside en la concentración interna de ninguna de estas auxinas, ni en la capacidad de las células para retomar la división celular, sino que más bien podría estar relacionado con alteraciones en el transporte auxínico, sensibilidad diferencial de los tejidos a la auxina o falta de receptores adecuados.
  • CONTROL FISIOLÓGICO DE LA RUTA DE DEGRADACIÓN DE ALCANOS DEL PLASMIDO OCT DE PSEUDOMONAS PUTIDA GPO1 .
    Autor: DINAMARCA TAPIA MIGUEL ALEJANDRO.
    Año: 2002.
    Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: CENTRO NACIONAL DE BIOTECNOLOGÍA.
    Resumen: La ruta de degradación de alcanos del plásmido OCT de Psudomonas putida GPo1, se encuentra regulado por un mecanismos específico de regulación conocido como "retroalimentación positiva". Además de este mecanismos se ha visto que la ruta esta sujeta a un control fisiológico o de represión catabólica. Para estudiar el mecanismo de regulación global, se diseñó un sistema para buscar cepas mutantes carentes de este control. Para esto se utilizó un sistema de mutagénesis con elementos transponibles, miniTn 5. Como resultado de la búsqueda de identificaron estirpes mutantes libres de este mecanismo de regulación y que expresan en diferentes condiciones la ruta de degradación de alcanos. La identificación de los genes interrumpidos mostró que estos codificaban para una oxidasa terminal llamada ubiquinol citocromo-oxidasa o. Este complejo enzimático forma parte de la cadena de transporte de electrones y como resultado de este trabajo se determinó que su expresión esta relacionada con los niveles de oxígeno y el tipo de fuente de carbono que Pseudomonas putida utiliza. Para estudiar en condiciones fisiológicamente estables la expresión de la ruta de degradación de alcanos de Pseudomonas putida, se utilizó el cultivo continuo. Como resultado de esta experiencia se observó que el succinato la represión catabólica por succinato es un importante mecanismo de regulación de la ruta de degradación de alcanos, no obsatente los resultados obtenidos indican que existen otrol mecanismos asociados con la mutación del complejo Cyo. Para conocer las señales ambientales que afectan la actividad del complejo Cyo, se cultivó a las células en condiciones de carencia de oxígeno en cultivos continuos limitados en succinato. Los resultados obtenidos indican que una carencia de oxígeno activa la expresión de la ruta alk. Como concluimos del trabajo se indica que la regulación de la ruta de degradación de alcanos esta controlada por un mecanismo fisiológico asociado a la actividad de la cadena de transporte de electrones. Dado que la actividad de la cadena de transporte de electrones es el reflejo del estado metabólico y fisiológico de la bacteria, se establece que la ruta de degradación de alcanos en Pseudomonas putida GPo1 esta acoplada a su fisiología.
  • UN ANÁLISIS COMPARATIVO DE LA INFORMÁTICA MÉDICA Y LA BIOINFORMÁTICA. APLICACIONES EN MEDICINA GENÓMICA .
    Autor: MAOJO GARCÍA VÍCTOR MANUEL.
    Año: 2002.
    Universidad: A CORUÑA.
    Centro de lectura: MEDICINA .
    Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD.
    Resumen: En este trabajo, se ha llevado a cabo una comparación de la Informática Medicina (IM) y la Bioinformática (BI). Este análisis se ha basado en comparar sus diferencias y ver su potencial para futuras colaboraciones en varias de las áreas de las que constan disciplinas. La IM y la BI se comparan en este trabajo considerando varias dimensiones, como son: 1,- Desarrollo histórico de ambas disciplinas. 2,- Fundamentos científicos, utilizando conceptos de la Filosofía de la Ciencia. 3,- Calidad de datos y análisis . 4,- Redes y bases de datos. 5,- Herramientas informáticas para apoyo a profesionales médicos. 6,- Procesamiento de señales, imágenes y visión. 7,- Educación continua de profesionales y pacientes. 8,- Educación y Formación. La IM y la BI difieren en su historia, fundamentos científicos y los enfoques metodológicos usados en investigación, aunque comparten métodos y herramientas, que pueden facilitar un intercambio ente ambas disciplinas. El conocimiento experto de los profesionales de la IM en el desarrollo de aplicaciones informáticas para la asistencia sanitaria y los éxitos de la BI en la investigación científica en biología se complementan de manera positiva. Una nueva disciplina, la Informática Biomédica, ofrece nuevos objetivos y promesas para el desarrollo de métodos informáticos, que serán cruciales en el desarrollo de la medicina genómica. El futuro de la Informática Biomédica estará determinado por la aparición de avances significativos en la práctica clínica e investigación biomédica. Estos podrán llegar de la IM o la BI, por separado, o de nuevos enfoques interdisciplinares. Como resultado de la investigación planteada y realizada se presentan dos propuestos diferentes: 1,- Un análisis de áreas de intercambio entre la IM y la BI, que podría conducir a una nueva agenda de I+D en Informática Biomédica y medicina genómica. 2,- Una propuesta de modificación de metodologías clásicas de Descubrimiento de Conocimiento en Baes de Datos (DCBD), adaptada a aplicaciones biomédicas. En este sentido, se propone que las lecciones aprendidas en varias décadas de trabajo en investigación en epidemiología, estadística médica y DCBD en medicina deberían ser aplicadas para el desarrollo de nuevos enfoques y metodologías para el análisis de datos biomédicos.
  • DESARROLLO DE SISTEMAS EMBRIOGÉNICOS EN OLMO Y CASTAÑO .
    Autor: CORREDOIRA CASTRO ELENA.
    Año: 2001.
    Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
    Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
    Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIÓN AGROBIOLÓGICAS.
    Resumen: El objetivo general del trabajo fue la inducción de sistemas embriogénicos en olmo y en castaño. En el olmo, la inducción se logró en embriones cigóticos de dos especies U.minor y U.glabra. El estado de desarrollo de los embriones cigóticos tuvo una influencia determinante en la inducción de los embriones somáticos puesto que la respuesta embriogénica se produce entre la 2ª y 6ª semana postantesis cuando el embrión cigótico está en los estados de globular, torpedo y cotiledonar. La mayor respuesta embriogénica se obtiene en la 5ª y 6ª semana postantesis cuando los embriones cigóticos están en la etapa de expansión cotiledonar previamente a la acumulación masiva de proteínas. La presencia de 2,4-D fue necesaria durante la 2ª, 3ª y 4ª semana postantesis dado que todos los explantos reactivos fueron cultivados en medio adicionado con 2,4-D, mientras que en la 5ª y 6ª semana postantesis también se consiguió respuesta embriogénico se subcultivaron en medio sumplementado con 0,1 mg/L de BA. Los embriones somáticos son generalmente pequeños, de color verde y aspecto filamentoso, apareciendo individualizados o en grupos en los bordes del callo embriogénico. Una vez asegurada la producción de embriones somáticos se aplicaron diferentes tratamientos de germinación y desarrollo de planta completa donde se evaluó el efecto del soporte físico del medio (papel o agar), el efecto de la presencia de citoquininas (BA y TDZ), y el efecto de la presencia de GA3. De los diferentes tratamientos estudiados, se concluyó que los porcentajes de desarrollo de planta eran bajos, siendo el medio líquido adicionado con 0,05 mg/L de BA y en soporte de papel el tratamiento que obtiene los mejores resultados (11%). En castaño, la inducción de embriones somáticos se logró en hojas obtenidas a partir de brotes de castaño cultivados in vitro mediante la multiplicación de yemas axilares. El tratamiento inductor fue el medio adicionado con 1 mg/L de BA y 1 mg/L de ANA. La capacidad embriogénica se mantuvo mediante el subcultivo de callo embriogénico y la inducción de embriogénesis secundaria en medio sumplementado con 0,1 mg/L de BA y 0,1 mg/L de ANA. Para la maduración y germinación de los embriones somáticos se evaluó el efecto del carbón activo y el efecto osmótico causado por distintas concentraciones de sacarosa, maltosa y sorbitol, siendo el tratamiento con maltosa 3% seguido del almacenamiento en frío durante dos meses el que obtuvo los mejores porcentajes de germinación y desarrollo de planta completa.
  • CARACTERIZACIÓN MOLECULAR DE LOS ELEMENTOS REGUALDORES DE LA EXPRESIÓN DE LA RUTA DE DEGRADACIÓN DE ALQUILBENZOATOS CODIFICADA POR EL PLÁSMIDO TOL PWWO DE PSEUDOMONAS PUTIDA: LA PROTEINA REGUALDORA XYIS Y EL PROMOTOR PM.
    Autor: GONZÁLEZ PÉREZ M. MAR.
    Año: 2000.
    Universidad: GRANADA.
    Centro de lectura: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN.
    Centro de realización: ESTACIÓN EXPERIMENTAL DEL ZAIDÍN (CSIC).
    Resumen: El estudio de las bases moleculares de las rutas bioquímicas que permiten a los microorganismos degradar compuestos aromáticos sustituidos, es uno de los pilares fundamentales en los que se basa el diseño y la construcción de microorganismos mejorados genéticamente para su uso en el tratamiento de zonas contaminadas con disolventes orgánicos. En muchas ocasiones, las rutas bioquímicas responsables de la degradación de dichos compuestos se codifican en plásmidos. Uno de los plásmidos degradativos mejor estudiados es el plásmido TOL pWWo de Pseudomonas putida, responsable de la degradación de tolueno y xileno. En dicho plásmido los genes catabólicos se organizan en dos operones: el operón de la ruta upper, que codifica los enzimas que intervienen en la conversión del tolueno y derivados sustituidos de éste hasta benzoatos y alquibenzoatos; y el operón de la ruta meta, que codifica los enzimas necesarios para la oxidación de dichos compuestos hasta intermediarios del ciclo de Krebs. Este trabajo de Tesis Doctoral se ha centrado en el esudio de los elementos reguladores que permiten la expresión de la ruta meta y por tanto la integración de las rutas de degradación en el metabolismo central de la célula.
  • ESTUDI DE LA NITRIFICACIO EN UN SISTEMA DE BIOMASSA FIXADA INTEGRANT DADES FISICO-QUIMIQUES I DADES OBTINGUDES MITJANCANT TECNIQUES DE BIOLOGIA MOLECULAR.
    Autor: AMER MAISTRIAU ESTEFANIA .
    Año: 2000.
    Universidad: GIRONA.
    Centro de lectura: CIENCIAS.
    Centro de realización: UNIVERSIDAD DE GIRONA.
    Resumen: Para realizar el estudio de los procesos de nitrificacion de aguas residuales y de las poblaciones asociadas a estos, se ha utilizado un sistema de biomasa fijada de 422 litros en total, y el efluente secundario de una estacion depuradora de aguas residuales como alimento. El porcentaje de oxidadores de amonio de la biopelicula se determino por hibridacion in situ con la sonda fluorescente Nso190, especifica para los oxidadores de amonio de agua dulce, respecto al total, teñido con DAPI. La inoculacion del sistema tuvo lugar a partir de los microorganismos del efluente secundario dela estacion depuradora. Durante la puesta en marcha de la planta piloto se ha estudiado los procesos de colonizacion de la biopelicula. La evolucion de la velocidad de oxidacion de amonio y de las concentraciones de nitrito y nitrato, junto a los datos obtenidos con la sonda Nso 190, muestran que la colonizacion se completo en menos de tres meses. Se estudio el efecto de la concentracion de amonio, de oxigeno disuelto, temperatura y pH sobre la velocidad de oxidacion de amonio y sobre el porcentaje de oxidadores de amonio en la biopelicula. La concentracion de amonio solo afecta a estos dos parametros a concentraciones de unos pocos miligramos de nitrogeo amoniacal por litro, mientras que la concentracion de oxigeno disuelto tiene un efecto importante sobre ambos. Un aumento de la concentracion de 2 a 7,5 mg O2.1-1 puede duplicar la velocidad de oxidacion de amonio. Los porcentajes de oxidadores de amonio a 4-6 mg O2.1-1 eran tambien significativamente superiores que a 2-3 mg O2.1-1. La temperatura y el pH, dentro de los rangos 11.0-26.5ºC y 6.3-7.9, respectivamente, no afectaron ni la velocidad ni el porcentaje de oxidadores de amonio. Tambien se evaluo el efecto de cinco dias de falta de amonio sobre la planta piloto y la biopelicula. Cinco dias de falta de amonio no afectan a la composicion de la biopelicula de manera significativa. Ademas, los resultados obtenidos con Nso190 demuestran que despues de cinco dias de falta de sustrato los oxidadores de amonio aun tienen un contenido ribosómico significativo, es decir, una actividad potencial sustancial. Estos resultados son coherentes con la rapida recuperacion de la planta piloto despues de los cinco dias de falta de amonio. La velocidad de oxidacion de amonio era, al cabo un dia y una semana de restaurar el aporte de amonio, el 87% y 97% del valor anterior a los cinco dias, respectivamente. Finalmente,se evaluo la capacidad de la hibridacion in situ con la sonda Nso 190 de reflejar la actividad de los oxidadores amonio en estaciones depuradoras de aguas residuales, utilizando dos sistemas nitrificantes de biomasa fijada. Los resultados demostraron que esta tecnica solo es capaz de medir la actividad potencial pero no la actividad real, de los oxidadores de amonio. Por tanto, solo refleja la actividad real de los oxidadores de amonio cuando el sistema de tratamiento esta en estado estacionario.
  • ANALISIS FUNCIONAL Y APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS DE LAS METALOTIONEINAS .
    Autor: VALLS MATHEU MARC.
    Año: 1999.
    Universidad: BARCELONA.
    Centro de lectura: BIOLOGIA.
    Resumen: ESTE TRABAJO CONTIENE UN ESTUDIO DE LA CAPACIDAD COORDINANTE DE METALOTIONEINAS DE ARTROPODO (HOMARUS AMERICANUS Y D. MELANOGASTER), ASI COMO UN ESTUDIO DE EXPRESION DE METALOTIONEINAS EN LA SUPERFICIE DE BACTERIAS CON FINALIDADES BIOREPARADORAS. SE HA AISLADO EL CDNA DE LA METALOTIONEINA DE HOMARUS Y SE HA EXPRESADO MEDIANTE UN SISTEMA HETEROCOGO. TAMBIEN SE HA OBTENIDO LA PROTEINA DE DROSOPHILA DEL MISMO MODO A PARTIR DE CDNA DESCRITO ANTERIORMENTE POR OTROS AUTORES LA OBTENCIÓN DE CEPAS BACTERIANAS CON CAPACIDAD BIOACUMULADORA INCREMENTADA ABRE LAS PUERTAS A SU USO PARA BIOREMEDIAR CONTAMINACIONES DE METALES PESADOS.
11 tesis en 1 páginas: 1
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