BIOQUIMICA MOLECULAR, 55

Autor: BALTRONS SOLER M. ANTONIA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: UTILIZANDO CULTIVOS PRIMARIOS ENRIQUECIDOS EN ASTROGLIA DE LA RATA SE HA DEMOSTRADO QUE LA ESTIMULACION DE LA FORMACION DE GMP CICLICO (CGMP) DEPENDIENTE DE OXIDO NITRICO (NO) PRESENTA VARIACIONES REGIONALES. DE LOS DISTINTOS AGONISTAS ENSAYADOS SOLO LA NORADRENALINA (NA) PRESENTA EFECTOS SIGNIFICATIVOS EN LAS CUATRO REGIONES ESTUDIADAS (CEREBELO MUCHO MAYOR QUE HIPOCAMPO IGUAL A HIPOTALAMO MAYOR QUE CORTEX) MIENTRAS QUE, EL GLUTAMATO (GLU) LO HACE EN HIPOCAMPO E HIPOTALAMO. EL IONOFORO DE CALCIO, COMPUESTO A23187, MIMETIZA LA RESPUESTA DE LA NA EN CEREBELO Y DEL GLU EN LAS OTRAS REGIONES. ESTAS DIFERENCIAS NO PARECEN SER DEBIDAS A DIFERENCIAS EN EL NIVEL DE EXPRESION DE LA ACTIVIDAD GUANILIL CICLASA SOLUBLE (SGC) YA QUE LA ESTIMULACION DIRECTA DE LA SGC POR UN DONADOR DE NO (SNP) PRODUCE ACUMULACIONES DE CGMP MUY SUPERIORES A LAS DE LOS AGONISTAS EN TODAS LAS REGIONES ESTUDIADAS. EN LOS ASTROCITOS DE CEREBELO LA FORMACION DE CGMP DEPENDIENTE DE NO TAMBIEN ES ESTIMULADA POR LA ACTIVACION DE LOS RECEPTORES DE TIPO AMPA PERMEABLES AL CALCIO. EN ESTAS CELULAS, LOS MISMOS ESTIMULOS QUE INDUCEN LA SINTESIS DE NO DE FORMA DEPENDIENTE DE CALCIO, HACEN DISMINUIR EL CGMP FORMADO POR ESTIMULACION DIRECTA DE LA ACTIVIDAD SGC CON DONADORES DE NO DEBIDO A LA ESTIMULACION DE UNA ACTIVIDAD FOSFODIESTERASA DEPENDIENTE DE CALCIO-CALMODULINA (PDE1). TAMBIEN SE HA ESTUDIADO EL EFECTO DE VARIOS AGENTES CAPACES DE REGULAR LA EXPRESION DE LA NOS-II SOBRE LA FORMACION DE CGMP. LOS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE EL TRATAMIENTO DE LAS CELULAS CON DEXAMETASONA (DEX), QUE BLOQUEA LA INDUCCION DE LA NOS-II, POTENCIA DE 3 A 4 VECES LA ESTIMULACION POR NA Y POR A23187 DE LA FORMACION DE CGMP DEPENDIENTE DE NO. ESTE EFECTO REQUIERE TRANSCRIPCION Y SINTESIS DE PROTEINAS. EL TRATAMIENTO CON DEX NO INDUCE LA ACTIVIDAD SGC Y TAMPOCO LA ACTIVIDAD NOS-I QUE DISMINUYE UN 50%. SIN EMBARGO, NO SE PUEDE DESCARTAR QUE EL EFECTO DE LA DEX SE DEBA A UNA DISMINUCION DE LA EXPRESION DE LA ACTIVIDAD PDE1. POR OTRO LADO, SE HA DEMOSTRADO QUE LA EXPOSICION DE LOS ASTROCITOS CEREBELARES A LIPOPOLISACARIDO (LPS), QUE INDUCE LA EXPRESION DE LA NOS-II, PRODUCE UNA DISMINUCION DE LOS NIVELES DE CGMP ESTIMULADOS CON SNP CON LA MISMA DEPENDENCIA DEL TIEMPO Y CONCENTRACION QUE LA INDUCCION DE LA NOS-II. EL EFECTO DEL LPS SOBRE LA RESPUESTA AL SNP REQUIERE TRANSCRIPCION Y SINTESIS DE PROTEINAS. EL NO GENERADO POR LA ACTIVIDAD NOS-II NO ESTA INVOLUCRADO. EL LPS NO AFECTA A LA ACTIVIDAD PDE, LO QUE SUGIERE QUE ESTA DISMINUYENDO LA ACTIVIDAD SGC. EN LA INDUCCION DE LA ACTIVIDAD NOS-II ESTAN IMPLICADAS ACTIVIDADES TIROSINA Y SERINA-TREONINA QUINASAS, MIENTRAS QUE SOLO LAS SERINA-TREONINA QUINASAS LO ESTAN EN LA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD SGC. EL TRATAMIENTO DE LAS CELULAS CON IL-1BETA PRODUCE UN EFECTO SIMILAR AL DEL LPS SOBRE LA ACTIVIDAD SGC.

Autor: BARBACID ARRIBA M. MAR.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL OBJETIVO BASICO DE ESTE TRABAJO ES PROFUNDIZAR EN EL PAPEL QUE JUEGAN LAS DIFERENTES METALOPROTEASAS DE MATRIZ, DESTACANDO LA RECIENTEMENTE DESCRITA ST-3, YA QUE EL ESCLARECIMIENTO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES IMPLICADOS EN LA METASTASIS PERMITIRA EN UN FUTURO EL DISEÑO DE AGENTES CAPACES DE BLOQUEAR LA DISEMINACION TUMORAL. SE HA UTILIZADO EL SISTEMA DE BACULOVIRUS PARA LA EXPRESION RECOMBINANTE DE LAS METALOPROTEASAS MATRILISINA ST-1 Y ST-3 HUMANAS SIENDO PURIFICADAS DE LOS EXTRACTOS CELULARES CORRESPONDIENTES CON BUEN RENDIMIENTO. ASI MISMO, SE HAN PURIFICADO LAS GELATINASAS A Y B DEL MEDIO CONDICIONADO DE UNA LINEA CELULAR DE FIBROSARCOMA HUMANO HT 1080. LAS PROTEASAS RECOMBINANTES FUERON SOMETIDAS A CARACTERIZACION, PRESENTANDO LAS MISMAS CARACTERISTICAS DE PROCESAMIENTO Y EXPECIFICIDAD DE SUSTRATO QUE LAS PROTEASAS NATIVAS O QUE LAS EXPRESADAS EN OTROS SISTEMAS. SE HAN PUESTO A PUNTO ENSAYOS CUANTITATIVOS DE ACTIVIDAD DE METALOPROTEASAS EMPLEANDO SUSTRATOS FLUORESCENTES, QUE PERMITEN LA BUSQUEDA DE INHIBIDORES DE DICHAS PROTEASAS Y QUE PRESENTAN VENTAJAS SOBRE LOS ENSAYOS RADIACTIVOS ANALOGOS EMPLEADOS CON ESTE FIN.

Autor: BARCO GUERRERO ANGEL LUIS.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: LA INVESTIGACION SE HA CENTRADO EN LA EXPRESION DE LAS PROTEINAS NO ESTRUCTURALES DEL VIRUS DE LA POLIO EN LA LEVADURA SACCHAROMYCES CEREVISIAE. ESTE TRABAJO HA PERMITIDO PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS POR LOS CUALES UN VIRUS LOGRA APODERARSE DE LA MAQUINARIA CELULAR, Y HA DESVELADO ALGUNOS ASPECTOS BASICOS DE LA BIOLOGIA CELULAR COMPARTIDOS POR CELULAS ANIMALES Y LEVADURAS. EN PARTICULAR, SE HAN CARACTERIZADO LAS MODIFICACIONES CELULARES INDUCIDAS POR LA EXPRESION DE DOS DE LAS PROTEINAS ENSAYADAS: LA PROTEASA 2A Y LA 2BC. LAS VERSATILES TECNICAS GENETICAS DISPONIBLES EN LEVADURAS HAN PERMITIDO ADEMAS PROFUNDIZAR EN EL ENTENDIMIENTO DE LOS MECANISMOS DE ACCION Y ESTRUCTURA DE ESTAS PROTEINAS. ASI, HEMOS IDENTIFICADO UNA REGION DE LA PROTEASA 2A IMPLICADA EN EL RECONOCIMIENTO DE SUBSTRATOS, IGUALMENTE HEMOS COMPROBADO QUE LA 2BC ES LA PROTEINA VIRAL RESPONSABLE DE INDUCIR LA PROLIFERACION DE MEMBRANAS, BLOQUEO DE LA RUTA EXOCITICA Y PERMEABILIZACION DE LA MEMBRANA PLASMATICA OBSERVADOS DURANTE LA INFECCION DE CELULAS ANIMALES POR EL VIRUS DE LA POLIO.

Autor: BARRIENTOS RUBIO ANTONI.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: METODOS DE INVESTIGACION SOBRE TEJIDO MUSCULAR .

Resumen: SE CONTEMPLA, POR UNA PARTE, EL ESTUDIO BIOQUIMICO Y MOLECULAR REALIZADO SOBRE PACIENTES AFECTOS DE DIFERENTES ENFERMEDADES PROGRESIVAS DEGENERATIVAS CON IMPLICACION MITOCONDRIAL PRIMARIA O SECUNDARIA. POR OTRA PARTE, SE HA INVESTIGADO SI LA IMPLICACION MITOCONDRIAL OBSERVADA EN LAS ENFERMEDADES DEGENERATIVAS SE PRODUCE TAMBIEN SOBRE EL PROCESO DE ENVEJECIMIENTO HUMANO, ELABORANDOSE UNA TEORIA SOBRE ESTE HECHO.

Autor: BAS SANTACANA NEUS.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: LA ESTIMULACION DE LA HIDROLISIS DE FOSFOINOSITIDOS (PIS) POR AGONISTAS DEPENDIENTE DE NUCLEOTIDOS DE GUANINA EN MEMBRANAS DE CEREBRO HABIA SIDO DEMOSTRADA SOLO EN PRESENCIA DEL DETERGENTE DESOXICOLATO (DOC) EN EL MEDIO DE ENSAYO. EN ESTE TRABAJO SE HAN INVESTIGADO LOS EFECTOS DEL DOC SOBRE LOS DISTINTOS ENZIMAS DEL CICLO DE LOS PIS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS MUESTRAN QUE EL DOC PRODUCE UN AUMENTO DE LOS NIVELES BASALES DE PI 4-FOSFATO Y UNA MAYOR HIDROLISIS ESTIMULADA POR AGONISTAS DE PI-4,5-DIFOSFATO, PI Y ESPECIALMENTE DE PI 4-FOSFATO. POR OTRO LADO EL DOC ACTIVA LA INOSITOL TRIFOSFATO 5-FOSFATASA Y LA INOSITOL DIFOSFATO 1-FOSFATASA. EN PRESENCIA DE DOC LA POTENCIA DEL NUCLEOTIDO DE GUANINA ES MENOR MIENTRAS QUE EL AGONISTA PRODUCE UN MAYOR EFECTO MAXIMO. EN MEMBRANAS DE CELULAS, LA ESTIMULACION DE LA HIDROLISIS DE PIS POR NUCLEOTIDOS DE GUANINA ERA 5 VECES SUPERIOR EN NEURONAS QUE EN ASTROCITOS. TAMBIEN SE HA ESTUDIADO LA RELACION ENTRE LA HIDROLISIS DE PIS Y LOS CAMBIOS EN LA CONCENTRACION INTRACELULAR DE CALCIO INDUCIDOS POR AGONISTAS EN ASTROCITOS. LOS AGONISTAS QUE INDUCIAN CAMBIOS MONOFASICOS PRODUCIAN UNA MAYOR ACUMULACION DE INOSITOLES FOSFATO, ESPECIALMENTE DE LOS ISOMEROS DE DEGRADACION DEL INOSITOL TRIFOSFATO POR LA VIA DE LA 3-QUINASA. FINALMENTE, UTILIZANDO UN SISTEMA DE ANALISIS DE IMAGEN SE ESTUDIARON LOS CAMBIOS EN LA CONCENTRACION INTRACELULAR DE CALCIO INDUCIDOS POR BRADIQUININA EN ASTROCITOS INDIVIDUALES.

Autor: BECKER BARROSO M. ELENA.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA; BIOQUIMICA Y GENETICA MICROBIANA .

Resumen: HEMOS CLONADO Y CARACTERIZADO UN CDNA QUE CODIFICA EL RECEPTOR TRKC EN POLLO; CUYA EXPRESION ECTOPICA DA LUGAR A UNA PROTEINA DE TAMAÑO APARENTE 145 KDA, QUE SE AUTOFOSFORILA EN TIROSINA TRAS ESTIMULACION CON NT-3. HEMOS GENERADO UN ANTICUERPO POLICLONAL ANTI TRKC ESPECIFICO CON EL CUAL SE HA DETERMINADO LA EXPRESION DE ESTA PROTEINA EN LA MEDULA ESPINAL LUMBAR DE EMBRIONES E6-E10. LA EXPRESION VARIA ESPACIAL Y TEMPORALMENTE RESTRINGIENDOSE CONFORME AVANZA EL PROCESO DE MADURACION. HEMOS CARACTERIZADO LA RESPUESTA NEUROTROFICA A BDNF, NT-3 Y NT-4 DE LAS MOTONEURONAS EMBRIONARIAS ESPINALES IN VITRO, QUE ADQUIEREN LA CAPACIDAD DE SUPERVIVENCIA TRAS DOS O TRES DIAS EN CULTIVO EN PRESENCIA DE EXTRACTO MUSCULA. ESTA RESPUESTA ESTA MEDIADA POR TRKB Y TRKC, CUYA EXPRESION AUMENTA DURANTE EL TIEMPO EN CULTIVO.

Autor: BELL MARTINEZ BLANCA.
Año: 1996.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DPTO. ANATOMIA PATOLOGICA, TOXICOLOGIA Y LEGISLACION SANITAR PROGRAMA DE DOCTORADO: TOXICOLOGIA Y LEGISLACION SANITARIA.

Resumen: LA IDENTIFICACION GENETICA SE BASA EN LA VARIABILIDAD EXISTENTE EN EL GENOMA HUMANO DE LOS INDIVIDUOS. ESTA VARIABILIDAD GENERA UN ALTO GRADO DE POLIMORFISMO QUE PUEDE DETECTARSE MEDIANTE EL ANALISIS DE LOCI ALTAMENTE DISCRIMINATIVOS. LA CARACTERIZACION GENETICA DE LA POBLACION ES UN REQUISITO INDISPENSABLE PARA LA APLICACION DE LOS POLIMORFISMOS DEL ADN EN EL DIAGNOSTICO DE LA INDIVIDUALIDAD BIOLOGICA EN GENETICA FORENSE. HEMOS ANALIZADO MEDIANTE PCR Y LA TECNICA DE DOT-BLOT REVERSA A 328 INDIVIDUOS RESIDENTES EN LA COMUNIDAD AUTONOMA DE ARAGON PARA EL FENOTIPADO DEL LOCUS HLA-DQA1 Y 338 PARA LOS LOCI LDLR, GYPA, HBGG, D7S8 Y GC. EL FENOTIPADO DEL D1S80 SE REALIZO MEDIANTE ELECTROFORESIS EN MINIGELES DE POLIACRILAMIDA EN PHAST-SYSTEM, EN 126 INDIVIDUOS. SE HAN OBTENIDO LAS FRECUENCIAS ALELICAS Y GENOTIPICAS DE LOS DIFERENTES MARCADORES COMPROBANDOSE QUE LA POBLACION SE ENCUENTRA EN EQUILIBRIO HARDEY-WEINBERG. ASI MISMO SU ELEVADA HETEROCIGOSIDAD, ALTO PODER DE DISCRIMINACION ENTRE INDIVIDUOS Y LA POSIBILIDAD DE OBTENER RESULTADOS A PARTIR DE VESTIGIOS BIOLOGICOS CON ADN ESCASO O DEGRADADOS LOS HACEN PARTICULARMENTE UTILES EN LA IDENTIFICACION GENETICA HUMANA. NUESTROS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE ESTOS MARCADORES POSEEN UN ENORME RENDIMIENTO EN GENETICA FORENSE (CRIMINALISTICA E INVESTIGACION BIOLOGICA DE LA PATERNIDAD) Y ADEMAS PERMITEN PROFUNDIZAR EN EL CONOCIMIENTO DE LAS CARACTERISTICAS GENETICAS DE LA POBLACION ARAGONESA.

Autor: BENITO HERNANDEZ ADALBERTO .
Año: 1996.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: BCL-2 Y BCL-X SON GENES CELULARES QUE INHIBEN LA APOPTOSIS Y QUE SON EXPRESADOS EN DIFERENTES TIPOS CELULARES. EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION Y FUNCION DE AMBOS GENES EN EL PROCESO DE DIFERENCIACION MIELOERITROIDE HUMANA. SE DEMUESTRA QUE AMBOS GENES SON REGULADOS DURANTE LA DIFERENCIACION MIELOIDE (BCL-2) Y ERITROIDE (BCL-X). LA PERDIDA DE EXPRESION DE AMBOS GENES SE CORRELACIONA CON UNA PERDIDA DE VIABILIDAD. SE ESTUDIA TAMBIEN EL EFECTO DE LA SOBREEXPRESION DE AMBOS GENES EN EL PROCESO DE DIFERENCIACION CELULAR Y SE DEMUESTRA QUE SON CAPACES DE INHIBIR LA APOPTOSIS ASOCIADA A LA DIFERENCIACION PERO SIN MODIFICAR EL PATRON DE DIFERENCIACION EN LAS CELULAS QUE LO SOBREEXPRESAN. SE ESTUDIA EL EFECTO DE LA SOBREEXPRESION DE BCL-2 EN CELULAS TRATADAS CON INHIBIDORES DE LA SINTESIS DE MACROMOLECULAS Y SE OBSERVA QUE CONFIERE PROTECCION SOLO EN ALGUN TIPO CELULAR Y NO EN OTROS. SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION DE BCL-2 Y BCL-X EN PACIENTES CON LEUCEMIA MIELOBLASTICA AGUDA DE NOVO OBSERVANDOSE UN AUMENTO EN EL PORCENTAJE DE CELULAS BCL-2 POSITIVAS Y BCL-X POSITIVAS CON RESPECTO A LOS CONTROLES. SE ESTUDIA SI EXISTE ALGUN TIPO DE CORRELACION ENTRE EL PORCENTAJE DE CELULAS BCL-2 O BCL-X POSITIVAS Y LA RESISTENCIA A LOS TRATAMIENTOS QUIMIOTERAPICOS TANTO IN VIVO COMO IN VITRO. SE DEMUESTRA UNA CORRELACION ENTRE EL MAYOR PORCENTAJE DE CELULAS BCL-X POSITIVAS Y LA RECAIDA TRAS TRATAMIENTO QUIMIOTERAPICO INTENSIVO, NO SE ENCUENTRA TAL CORRELACION CON RESPECTO A BCL-2. ESTE RESULTADO DEMUESTRA QUE LA DETERMINACION DE LOS PORCENTAJES DE CELULAS BCL-X POSITIVAS EN PACIENTES CON LMA DE NOVO PUEDEN SER UTILES A LA HORA DE DETERMINAR UNA POSIBLE RESISTENCIA DE UN PACIENTE AL TRATAMIENTO QUIMIOTERAPICO CONVENCIONAL.

Autor: BERNALES PUJANA IRANTZU.
Año: 1996.
Universidad: CANTABRIA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN ESTE TRABAJO DEMUESTRAN QUE LA FRECUENCIA DE TRANSPOSICION IS91 DEPENDE DEL NIVEL DE TRANSPOSASA. HEMOS DEMOSTRADO QUE LA TRANSPOSASA DE IS91 ES ACTIVA EN TRANS, LO QUE LA DIFERENCIA DE LAS TRANSPOSASAS DE ISS. ASIMISMO, DEMOSTRAMOS QUE EL INICIO DE LA TRANSPOSICION DE IS91 SOLO SE REQUIERE LA REGION DEL IRR JUNTO CON LA SECUENCIA BLANCO, Y LA TRANSPOSASA, MIENTRAS QUE EN EL RESTO DE LOS TRANSPOSONES SE REQUIERE LA SINAPSIS PREVIA AMBOS EXTREMOS. HEMOS DETERMINADO QUE EL 87% DE LOS PRODUCTOS DE TRANSPOSICION DE IS91 SON INSERCIONES SIMPLES DEL TRANSPOSON, Y EL RESTANTE 13% SON COINTEGRADOS Y FUSIONES. LA TRANSPOSASA DE IS91 NO ES CAPAZ DE COMPLEMENTAR EFICIENTEMENTE LOS EXTREMOS DE IS801 EISI294 A PESAR DE LA HOMOLOGIA EXISTENTE EN SUS SECUENCIAS TERMINALES; ESTOS RESULTADOS INDICAN QUE EXISTEN DETERMINANTES DE ESPECIFICIDAD EN DICHOS EXTREMOS QUE PERMITEN SU DISCRIMINACION POR PARTE DE LAS DISTINTAS TRANSPOSASAS. LA APORTACION MAS INTERESANTE DEL PRESENTE ESTUDIO ES LA DETECCION DE CIRCULOS DE CADENA SENCILLA DEL TRANSPOSON QUE SON PRODUCTO DE LA ACTIVIDAD DE LA TRANSPOSASA DE IS91. ESTE TIPO DE ESTRUCTURAS NO HA SIDO DESCRITO PARA NINGUN TRANSPOSON, Y ES UNA PRUEBA DE LA IMPLICACION DE UN MECANISMO DE CIRCULO RODANTE EN LA TRANSPOSICION IS91, COMO SE PROPONIA.

Autor: BILBAO CORTES DANIEL.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA LINEA CELULAR ESTROMAL ADIPOSOENDOTELIAL DERIVADA DE MEDULA OSEA DE RATON 14F1.1 MANTIENE LA HEMATOPOYESIS "IN VITRO". LOS CULTIVOS "IN VITRO" A LARGO PLAZO DE CELULAS DE MEDULA OSEA CON ESTA LINEA CELULAR, TANTO EN CONDICIONES QUE FAVORECEN LA LINFOPOYESIS COMO EN AQUELLAS QUE FAVORECEN LA MIELOPOYESIS, ESTAN CONTROLADOS POR UNA SERIE DE FACTORES SOLUBLES, ASOCIADOS A MEMBRANA O A LA MATRIZ EXTRACELULAR. LA IMPORTANCIA RELATIVA DE ESTOS FACTORES DIFIERE EN AMBOS TIPOS DE CULTIVOS. EN LOS CULTIVOS DEXTER (MIELOPOYETICOS) LOS FACTORES SOLUBLES SON SUFICIENTES PARA UNA EXPANSION EFECTIVA DE LAS CELULA MIELOIDES A PARTIR DE POBLACIONES "STEM". EN LOS CULTIVOS WHITLOCK-WITTE EL CONTACTO CON EL ESTROMA ES IMPRESCINDIBLE. EN ESTAS CONDICIONES LINFOPOYETICAS, LAS CELULAS 14F1.1 GENERAN EL MICROAMBIENTE NECESARIO PARA EL MANTENIMIENTO Y PROLIFERACION DE UNA UNICA CELULA PROGENITORA INMADURA. ENTRE LOS EFECTOS SOLUBLES SECRETADOS POR LAS CELULAS 14F1.1 EXISTE UNA ACTIVIDAD ESTIMULADORA DE LA PROLIFERACION DE CELULAS PRE-B INMORTALIZADAS Y UN FACTOR QUIMIOTACTICO O QUIMIOCINETICO DE CELULAS HEMATOPOYETICAS. OTROS EFECTORES SOLUBLES, EN ESTE CASO SISTEMICOS E INHIBIDORES DE LA PRODUCCION CELULAR LINFOIDE DE LA SERIE B, SON LAS HORMONAS CORTICOIDES. ENTRE LOS MECANISMOS REGULADORES IMPLICADOS EN LAS INTERACCIONES CELULA HEMATOPOYETICA CON EL ESTROMA FORMADO POR LAS CELULAS 14F1.1 Y LA MATRIZ QUE SECRETAN, ESTAN LAS INTEGRINAS Y PROBABLEMENTE OTRAS MOLECULAS CARACTERIZADAS EN ESTE SISTEMA COMO SON: LA FIBRONECTINA, MOLECULAS DE ADHESION, CD44, FACTORES DE CRECIMIENTO Y PROTEASAS. CON EL OBJETIVO DE IDENTIFICAR OTRAS MOLECULAS IMPLICADAS EN ESTE TIPO DE INTERACCIONES SE HAN GENERADO UNOS ANTICUERPOS MONOCLONALES CONTRA ANTIGENOS DE MEMBRANA DE LAS CELULAS 14F1.1.

Autor: BLASCO URPINELL FRANCESC.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FISIOLOGIA.

Resumen: SE PREPARARON DOS GENOTECAS COMBINATORIALES DE FRAGMENTOS DE ANTICUERPO FV DE CADENA UNICA, UNA MURINA Y OTRA HUMANA, MEDIANTE LA AMPLIFICACION DE LOS GENES DE LAS REGIONES VARIABLES DE LAS INMUNOGLOBULINAS Y SU POSTERIOR ENSAMBLAJE CON UNA CADENA QUE CODIFICABA PARA QUINCE AMINOACIDOS. EL CLONAJE SE REALIZO EN UN VECTOR TIPO FAGUEMIDO QUE INCORPORABA LA PROTEINA DEL GEN III DEL FAGO FILAMENTOSO FD Y, OPCIONALMENTE, SE OBTUVIERON FRAGMENTOS COMO PROTEINAS DE FUSION UNIDAS A ESTA PROTEINAS EN CEPAS SUPRESORAS DE E. COLI QUE NO DETENIAN LA SINTESIS EN EL STOP AMBAR PREVIO A LA SECUENCIA DE LA PROTEINA DEL GEN III, O COMO FRAGMENTOS SOLUBLES EN CEPAS NO SUPRESORAS. EL PROCESO DE INMUNIZACION IN VITRO LLEVADO A CABO PARA GENERAR LA GENOTECA MURINA ACORTO EL NUMERO DE CICLOS DE ENRIQUECIMIENTO FRENTE AL RECEPTOR DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDERMICO. LOS QUINCE FRAGMENTOS AISLADOS DE TRES CICLOS MOSTRARON UNA HOMOLOGIA NO INFERIOR AL 95% CUANDO SE DIVIDIERON EN DOS GRUPOS. LA AFINIDAD FRENTE AL RECEPTOR MEDIDA EN UN EQUIPO BIACORE ESTUVO COMPRENDIDA ENTRE 10 7 I 3 X 10 8 M1. CUANDO FUERON CONJUGADOS A RICINA A MOSTRARON SU CAPACIDAD PARA INTERNALIZARLA EN LAS LINEAS A-431 Y NP-18. LA PREPARACION DE LA GENOTECA HUMANA, A PARTIR DE LINFOCITOS B DE BAZO, DIO COMO RESULTADO LA OBTENCION DE 2X10 7 RECOMBINANTES INDIVIDUALES.

Autor: BORONAT LLOP SUSANNA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL PROMOTOR DEL MMTV, INDUCIBLE POR GLUCOCORTICOIDES, TIENE UN COMPORTAMIENTO DIFERENCIADO DURANTE UN TRATAMIENTO CONTINUADO CON DEXAMETASONA RESPECTO A OTROS GENES ENDOGENOS HORMONO-REGULADOS COMO LOS DE LA METALOTIONEINA, LA ALFA B-CRISTALINA O LA TIROSIN AMINOTRANSFERASA. LA TRANSCRIPCION DESDE EL PROMOTOR DEL MMTV DISMINUYE PROGRESIVAMENTE DURANTE EL TRATAMIENTO HORMONAL, CINCO DIAS, MIENTRAS QUE LA DE LOS OTROS GENES REGULADOS POR GLUCOCORTICOIDES SE MANTIENE ESTABLE. ESTE FENOMENO SE OBSERVA EN DIFERENTES LINEAS CELULARES. LA DESACTIVACION DEL PROMOTOR DEL MMTV SE CORRELACIONA TEMPORALMENTE CON UNA DISMINUCION EN EL CONTENIDO NUCLEAR DEL RECEPTOR DE GLUCOCORTICOIDES (GR) Y CON UNA DISMINUCION CONCOMITANTE EN LA HIPERSENSIBILIDAD A LA DNASAL, QUE SE INTERPRETA COMO UN CIERRE EN LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA DEL PROMOTOR. ASI MISMO SE HA OBSERVADO QUE LAS FORMAS DEL PROMOTOR MMTV TRANSFECTADAS TRANSITORIAMENTE MANTIENEN ESTABLE SU EXPRESION DURANTE TODO EL TIEMPO DEL TRATAMIENTO CON HORMONA. LA MENOR AFINIDAD DEL PROMOTOR MMTV POR EL GR QUE HEMOS OBSERVADO PODRIA EXPLICAR SU DESACTIVACION EN UN CONTEXTO DE PERDIDA DE GR PUES UN MENOR NIVEL DE GR NO SERIA SUFICIENTE PARA MANTENER ABIERTA SU CROMATINA Y SI BASTARIA PARA MANTENER ACTIVOS LOS DEMAS GENES HORMONO-REGULADOS. LA PARTICULAR ESTRUCTURA DE LA CROMATINA DEL PROMOTOR MMTV INTEGRADO EN EL GENOMA DE LAS CELULAS Y SU INACTIVIDAD EN AUSENCIA DE HORMONA SUGIEREN QUE EL FACTOR QUE DETERMINA LOS REQUERIMIENTOS DE GR PARA MANTENER ACTIVADA LA TRANSCRIPCION ES PRECISAMENTE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA DE CADA PROMOTOR.

Autor: BORROTO REVUELTA ALDO.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL TRABAJO RESUMIDO EN LA MEMORIA HA CONSISTIDO EN EL ESTUDIO ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL DE LA SUBUNIDAD CD3-E DEL RECEPTOR PARA EL ANTIGENO DE CELULAS T. SE HA DEFINIDO MEDIANTE MUTAGENESIS LA REGION DE CD3-E QUE ES RESPONSABLE DE LA FORMACION DE DIMEROS TANTO CON CD3-G COMO CON CD3-D. LA SECUENCIA IMPLICADA CONTIENE DOS CISTEINAS SITAS EN UNA SECUENCIA DE 5 AMINOACIDOS QUE ESTA PRESENTE EN, Y QUE PARTICIPA EN LA INTERACCION ENTRE, OTRAS PROTEINAS COMO SON 1CK Y CD4-CD8. LA SECUENCIA RESPONSABLE DE LA FORMACION DE ETERODIMEROS DE CD3-E CON CD3-G Y CD3-D TAMBIEN ESTA IMPLICADA EN LA FORMACION DE HOMODIMEROS, LO CUAL NO ES DE EXTRAÑAR ATENDIENDO AL ALTO GRADO DE CONSERVACION DE LA SECUENCIA EXISTENTE ENTRE LAS SUBUNIDADES CD3-G, CD3-D Y CD3-E EN TODAS LAS ESPECIES ESTUDIADAS. SE HA DEFINIDO, LA ESTRUCTURA ADOPTADA POR LA SECUENCIA CITOPLASMICA DE CD3-E EN SOLUCION, MEDIANTE PROCEDIMIENTOS DE RMN. FINALMENTE, SE HA ESTABLECIDO QUE CD3-E PUEDE SER ENDOCITADO EN AUSENCIA DE LOS OTROS COMPONENTES DEL RECEPTOR PARA EL ANTIGENO, Y DESPUES, DE QUE CD3-E TIENE AL MENOS DOS SEÑALES DE ENDOCITOSIS.

Autor: BOSCH RODRIGUEZ MARTA.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA .
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CEL. LULAR I ANATOMIA PATOLOGICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA I PATOLOGIA CEL. LULAR.

Resumen: Lacalmodulina (CaM), proteína receptora de Calcio, a través de su interacción con proteínas de unión a la CaM, participa en la regulación de numerosos procesos celulares, entre ellos la reguación del ciclo celular. Nuestros resultados demuestran que la activación proliferativa comporta un aumento en la expresión de los tres genes que codifican para la CaM. La proteína quinasa C y el AMPc, participan en la regulación de la expresión de la CaM durante el ciclo celular, PKC regulando los niveles de transcripción y AMPc controlando los nivels de traducción. También estudiamos el papel de la CaM en la vía de traducción de señal de las MAPKs. La importáncia de la CaM en el inicio del ciclo celular es debido a su participación en el proceso de inactivación de la vía una vez producido el estímulo. La CaM interviene en la inactivación de la quinasa RaF, regulandola vía negativamente, lo cual permite una respuesta proliferativa.

Autor: CABEZON NAVARRO ELENA.
Año: 1996.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL PRESENTE TRABAJO NOS HA PROPORCIONADO DATOS SUFICIENTES PARA DETERMINAR QUE TRWB Y EL RESTO DE PROTEINAS PERTENECIENTES A ESTA FAMILIA REALIZAN UN PAPEL ESENCIAL EN LA TRANSFERENCIA CONJUGATIVA DEL DNA, A TRAVES DE SU INTERACCION CON EL RELAXOSOMA Y CON LA ESTRUCTURA DEL SISTEMA DE TRANSPORTE, ACOPLANDO AMBOS COMPONENTES. A ESTE RESPECTO, LA DEMOSTRACION DE SU ACTIVIDAD DE UNION A TRWA O AL ORIT EN PRESENCIA DE ESTA PROTEINA, NOS PROPORCIONAN UNA EVIDENCIA DIRECTA DE LA INTERACCION DE ESTA PROTEINA ACOPLADORA CON EL RELAXOSOMA. SIN EMBARGO, LA NATURALEZA DE LAS CONEXIONES A TRAVES DE LAS CUALES OCURRE EL POSTERIOR TRANSPORTE DEL DNA DURANTE LA CONJUGACION Y LA IDENTIDAD DEL RESTO DE LOS COMPONENTES QUE PODRIAN PARTICIPAR EN EL MISMO SON AUN DESCONOCIDOS. PENSAMOS QUE TRWB JUEGA UN IMPORTANTE PAPEL EN ESTE PROCESO A TRAVES DE LA OBTENCION DE ENERGIA POR HIDROLISIS DE NTPS Y AUNQUE NO HAYAMOS PODIDO COMPROBAR POR MUTAGENESIS DIRIGIDA QUE ESTA ACTIVIDAD ES ESENCIAL EN EL PROCESO CONJUGATIVO. ESTE HECHO PODRIA DEBERSE A QUE EN CONDICIONES FISIOLOGICAS, TRWB NO PUEDE SER ACTIVA PERMANENTEMENTE Y QUIZAS SOLO LO SEAN EN LA TRANSFERENCIA DEL DNA CUANDO SE NECESITE UN APORTE EXTRA DE ENERGIA A TRAVES DE LA INTERACCION CON ALGUN OTRO COMPONENTE DEL SISTEMA DE CONJUGACION. PUESTO QUE LA PROTEINA TRWBAN70 PUEDE SER FACILMENTE PURIFICADA SEGUN EL PROTOCOLO ESTABLECIDO Y NO NECESITA LA PRESENCIA DE DETERGENTES EN LOS MEDIOS DE ENSAYO IN VITRO, LA BUSQUEDA DE COMPONENTES CON LOS QUE PUEDE INTERACCIONAR ESTA PROTEINA RESULTA MUCHO MAS SENCILLA. PENSAMOS QUE FUTUROS EXPERIMENTOS ENFOCADOS A LA BUSQUEDA DE POSIBLES MODULADORES, COMPONENTES DEL SISTEMA DE CONJUGACION CON LOS QUE INTERACCIONA TRWB, NOS PERMITIRA RECONSTITUIR LAS CONDICIONES FISIOLOGICAS EN LAS QUE TIENE LUGAR LA ACTIVIDAD DE LA PROTEINA.

Autor: CABRERA POCH NOEMI.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA.

Resumen: EL RECEPTOR TRKA SUFRE UN PROCESAMIENTO PROTEOLITICO EN LA PORCION YUXTAMEMBRANAL EXTRACELULAR GENERANDO UN FRAGMENTO SOLUBLE DE UN PESO MOLECULAR APROXIMADO DE 100 KDA Y UNA PORCION ANCLADA A MEMBRANA CUYOS PESOS MOLECULARES VARIAN ENTRE 38 Y 41 KDA. EL FRAGMENTO QUE PERMANECE ANCLADO A MEMBRANA ESTA FOSFORILADO EN TIROSINA. ESTE PROCESAMIENTO ESTA ALTAMENTE REGULADO Y ES ACTIVABLE POR DISTINTAS VIAS, SIENDO LA VIA DE TRANSDUCCION DE SEÑALES DE LA PKD LA MAS UNIVERSAL. LA PROTEASA ENCARGADA DEL PROCESAMIENTO DE TRKA ES DEL TIPO METALOPROTEASA, ESTA FUERTEMENTE ANCLADA A LA MEMBRANA PLASMATICA Y SOLO ES TOTALMENTE ACTIVA CUANDO SE ENCUENTRA EN ESTA. TAMPOCO TIENE ACTIVIDAD SI SE ENCUENTRA SOLUBLE O SOLUBILIZADA EN EL MEDIO DE CULTIVO. EL MECANISMO DE CORTE DE TRKA ES DIFERENTE SEGUN SEA EL TEJIDO, ORGANO, ESPECIE O TIPO CELULAR QUE SE UTILICE COMO MODELO DE ESTUDIO. EL PROCESAMIENTO DE TRKA INHIBE E INTERRUMPE LA SEÑALIZACION DEL HOLORRECEPTOR EN RESPUESTA A NGF. EL RECEPTOR DE BAJA AFINIDAD POR NEUROTROFINAS, P75LNTR TAMBIEN SUFRE PROCESAMIENTO PROTEOLITICO REGULADO LIBERANDO SU ECTODOMINIO, PERO SOLO CUANDO LA EXPRESION DE ESTE RECEPTOR EN LA MEMBRANA PLASMATICA ES MUY ELEVADA.

Autor: CALVO GARRIDO M. VISITACION.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: DEL DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LAS LIPASAS CONSTITUYEN UN GRUPO DE ENZIMAS HIDROLITICOS DE GRAN INTERES, PRESENTES EN TODOS LOS SERES VIVOS Y CON NUMEROSAS APLICACIONES (DETERGENTES, ALIMENTACION, QUIMICA FINA, ETC.). EL OBJETIVO PRINCIPAL DE ESTA TESIS DOCTORAL HA SIDO EL DE TRATAR DE CONSEGUIR LA ESTABILIZACION OPTIMA DE LAS ISOENZIMAS A Y B DE LA LIPASA DE CANDIDA RUGOSA. ASI, LA INVESTIGACION DESARROLLADA ABARCA LOS SIGUIENTES ASPECTOS: 1. PUESTA A PUNTO DE UN METODO AUTOMATIZADO DE PURIFICACION POR FPLC, DE LAS ISOLIPASAS A Y B DE C. RUGOSA. 2. CARACTERIZACION DE AMBAS ISOENZIMAS: HIDROFOBICIDAD, ACTIVIDAD HIDROLITICA CON DISTINTOS SUSTRATOS Y CONDICIONES, ENATIO Y REGIOESPECIFICIDAD, ACTIVIDAD EN PRESENCIA DE TENSIOACTIVOS. 3. MODIFICACION QUIMICA DE LAS LIPASAS A Y B, UTILIZANDO POLIETILENGLICOL (PEG) Y ACIDOS GRASOS. 4. ESTUDIO DEL EFECTO DE ESTOS DOS TIPOS DE MODIFICACION EN DIVERSAS PROPIEDADES DE LAS LIPASAS: ACTIVIDAD CATALITICA EN MEDIOS ACUOSOS Y ORGANICOS. ESTABILIDAD FRENTE A TEMPERATURA, PH Y PRESENCIA DE TENSIOACTIVOS.

Autor: CALVO MUÑOZ DOMINICA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS SE DESCRIBE LA IDENTIFICACION Y CARACTERIZACION ESTRUCTURAL, GENETICA Y BIOQUIMICA DE CLA-1, UN NUEVO MIEMBRO EN HUMANOS DE LA FAMILIA DE CD36. SE CONCLUYE QUE CLA-1 ES UNA GLICOPROTEINA DE MEMBRANA PLASMATICA DE 85 KD RICA EN AZUCARES TIPO N. EL GEN QUE CODIFICA PARA ESTA GLICOPROTEINA EN HUMANOS SE LOCALIZA EN EL CROMOSOMA 12. SE HA DETERMINADO TAMBIEN QUE EL GEN QUE CODIFICA PARA LIMPII, EL TERCER MIEMBRO CONOCIDO DE ESTA FAMILIA EN HUMANOS, SE ENCUENTRA EN EL CROMOSOMA 4. SE PRESENTA UN ANALISIS FILOGENETICO DE LOS MIEMBROS DE ESTA FAMILIA QUE INDICA QUE DIVIERGIERON TEMPRANAMENTE EN LA EVOLUCION. POR ULTIMO, SE DESCRIBE UN ANALISIS COMPARATIVO DE LA CAPACIDAD DE LAS GLICOPROTEINAS HUMANAS CD36 Y CLA-1 DE ACTUAR COMO RECEPTORES PARA LIPOPROTEINAS. LOS RESULTADOS DEL MISMO HAN PUESTO DE MANIFIESTO LA CAPACIDAD DE AMBAS MOLECULAS DE INTERACCIONAR TANTO CON LIPOPROTEINAS NATIVAS (LDL, HDL Y VLDL) COMO MODIFICADAS (OXLDL Y ACLDL). POR OTRA PARTE, EL ESTUDIO DE LA DISTRIBUCION TISULAR DE LOS MRNAS CORRESPONDIENTES A CD36 Y CLA-1 HA REVELADO SU EXPRESION PREFERENCIAL EN TEJIDOS MUY ACTIVOS EN EL METABOLISMO DE LIPIDOS.

Autor: CAMPOS CARO ANTONIO.
Año: 1996.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: NEUROQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: NEUROCIENCIAS.

Resumen: LOS RECEPTORES NICOTINICOS DE ACETILCOLINA PERTENECEN A UNA FAMILIA DE RECEPTORES REGULADOS POR LIGANDOS QUE FORMAN CANALES IONICOS. EN LA CELULA CROMAFIN BOVINA, AL IGUAL QUE SUCEDE EN VARIAS ZONAS DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y PERIFERICO, SE HAN DETECTADO DOS TIPOS DE RECEPTORES NICOTINICOS FARMACOLOGICAMENTE DIFERENCIABLES; UN RECEPTOR QUE NO POSEE AFINIDAD POR LA TOXINA DE SERPIENTE DENOMINADA ALFA-BUNGAROTOXINA Y QUE ES EL PRINCIPAL RESPONSABLE DE LA ACTIVACION DE LA RESPUESTA SECRETORA DE CATECOLAMINAS AL TORRENTE SANGUINEO, Y OTRO TIPO DE RECEPTOR QUE POSEE ALTA AFINIDAD POR LA ALFA-BUNGAROTOXINA Y CUYA FUNCION PERMANECE SIN ACLARAR. UN PRIMER OBJETIVO DE ESTA TESIS DOCTORAL HA CONSISTIDO EN EL CLONAJE MOLECULAR Y ESTUDIO FUNCIONAL DE LAS SUBUNIDADES NICOTINICAS QUE PODRIAN FORMAR EL RECEPTOR QUE ES RESPONSABLE DE LA SECRECION DE CATECOLAMINAS. SE HAN CLONADO ASI LAS SUBUNIDADES ALFA5 Y BETA4, QUE JUNTO CON LA SUBUNIDAD ALFA3 PREVIAMENTE CLONADA, SON CAPACES DE FORMAR RECEPTORES DE TIPO NICOTINICO CON FARMACOLOGIA SIMILAR A LOS QUE NO UNEN ALFA-BUNGAROTOXINA Y QUE SERIAN LOS RESPONSABLES DE LA SECRECION DE CATECOLAMINAS EN LA CELULA CROMAFIN BOVINA. POR OTRO LADO, EXISTEN MUCHOS DATOS SOBRE LOS DOMINIOS Y AMINOACIDOS CON IMPORTANCIA FUNCIONAL EN EL SITIO DE UNION DE AGONISTAS Y EN EL CANAL IONICO DEL RECEPTOR, PERO NO SE SABE CASI NADA SOBRE COMO SE CONECTAN AMBOS ELEMENTOS. TRATAR DE ARROJAR ALGUNA LUZ SOBRE ESTE TEMA HA CONSTITUIDO UN SEGUNDO OBJETIVO DE ESTE TRABAJO. MEDIANTE LA CONSTRUCCION DE PROTEINAS QUIMERICAS FORMADAS POR LAS SUBUNIDADES ALFA7 Y ALFA3 DEL RECEPTOR NICOTINICO NEURONAL DE ACETILCOLINA, SE HA DETERMINADO QUE UNA POSICION AMINOACIDICA (UN RESIDUO CON CARGA NEGATIVA) PODRIA JUGAR UN PAPEL FUNDAMENTAL EN EL MECANISMO DE TRANSDUCCION ENTRE LA UNION DEL AGONISTA Y LA APERTURA DEL CANAL IONICO.

Autor: CANOSA PEREZ FRAGERO INES.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN ANALIZADO DIVERSOS ASPECTOS MOLECULARES DE LA REACCION DE RECOMBINACION ESPECIFICA DE SITIO CATALIZADA POR LA RECOMBINASA BETA DEL PLASMIDO PSM19035 DE BACTERIAS GRAM-POSITIVAS. LOS LOGROS MAS SIGNIFICATIVOS HAN SIDO: - DETERMINACION DE LA SECUENCIA MINIMA DE ADN NECESARIA Y SUFICIENTE PARA LA REACCION, ASI COMO LOCALIZACION DE LOS PUNTOS EXACTOS DE CORTE Y RELIGACION DEL ADN. - IDENTIFICACION DE LAS REGIONES DE LA PROTEINA BETA QUE PARTICIPAN EN LA FORMACION DEL CENTRO ACTIVO. - CARACTERIZACION DE LA REACCION DE INVERSION ENTRE SECUENCIAS DE RECOMBINACION EN ORIENTACION INVERSA. - PAPEL DE LA PROTEINA HBSU EN LA FORMACION DEL COMPLEJO SINAPTICO. - ANALISIS DEL EFECTO DE MUTACIONES EN EL SITIO DE INTERCAMBIO DE CADENAS ASI COMO LA TOPOLOGIA DE LOS PRODUCTOS DE LAS REACCIONES DE RESOLUCION DE INVERSION. SE HA LLEGADO A LA CONCLUSION DE QUE EL INTERCAMBIO DE CADENAS PUEDE DESCRIBIRSE MEDIANTE EL MODELO DE ROTACION SIMPLE, DESCRITO PARA OTRAS RECOMBINASA DE SU MISMA FAMILIA. - SE HA AMPLIADO EL RANGO DE MOLECULAS SUSTRATO SOBRE LAS QUE LA RECOMBINASA BETA ES CAPAZ DE ACTUAR.