|
|
|
INHIBICION FUNCIONAL DE C-MYC EN CELULAS MIELOIDES: EFECTO SOBRE DIFERENCIACION Y APOPTOSIS.
Autor: CAÑELLES LOPEZ MATILDE. Año: 1996. Universidad: CANTABRIA. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: C-MYC ES UN PROTOONCOGEN QUE APARECE IMPLICADO EN
NUMEROSOS PROCESOS NEOPLASICO. SE HA ESTUDIADO EL EFECTO QUE PRODUCE SU INHIBICION SOBRE LOS PROCESOS DE DIFERENCIACION Y APOPTOSIS EN LA LINEA CELULAR K562, PROCEDENTE DE UNA LEUCEMIA MIELOIDE HUMANA EN FASE CRONICA. EN LA PRIMERA PARTE DEL TRABAJO
SE HA ESTUDIADO EL PATRON DE EXPRESION DE LOS GENES MAD DURANTE DIFERENCIACION Y APOPTOSIS DE K562, OBSERVANDOSE QUE EL PATRON DE EXPRESION DE LOS GENES MAD ES DISTINTO PARA LAS DIFERENTES LINEAS A LAS QUE SE PUEDE DIFERENCIAR K562. LA SEGUNDA PARTE
DEL TRABAJO SE HA DEDICADO A LA INHIBICION DE C-MYC MEDIANTE LA EXPRESION DE MAX Y DE DOS MUTANTES INHIBITORIOS DE C-MYC DISTINTOS. EL EFECTO OBTENIDO EN LOS TRES CASOS ES EL MISMO: DIFERENCIACION ERITROIDE ESPONTANEA SIN EFECTO SOBRE LA
DIFERENCIACION MIELOMONOCITICAE INHIBICION DE LA APOPTOSIS INDUCIDA POR ACIDO OKADAICO. DE ESTOS DATOS SE DEDUCE QUE C-MYC ES NECESARIO EN LA CELULA PARA MANTENERLA EN UN ESTADO INDIFERENCIADO Y PARA LA MEDIACION DE LA APOPTOSIS INDUCIDA POR ACIDO
OKADAICO. PAPEL DE NIFO Y NIFQ EN LA SINTESIS DEL COFACTOR FEMO DE LA NITROGENASA EN AZOTOBACTER
VINELANDII. Autor: CARNICERO MARQUEZ PILAR. Año: 1996. Universidad: POLITECNICA DE MADRID. Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE
DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y FORESTAL.
Resumen: AZOTOBACTER
VINELANDII ES UNA BACTERIA AEROBICA ESTRICTA, FIJADORA DE NITROGENO ATMOSFERICO. LA CAPACIDAD DE FIJACION DE NITROGENO POR ESTA BACTERIA ES REALIZADA A TRAVES DEL SISTEMA NITROGENASA, RESIDIENDO EL CENTRO ACTIVO DEL SISTEMA EN SU COMPONENTE I, LA
DINITROGENASA.
LA DINITROGENASA CONTIENE UN COFACTOR DENOMINADO COFACTOR FEMO, EL CUAL FORMA PARTE DE DICHO CENTRO DE REDUCCION DE SUSTRATO. LA SINTESIS DE ESTE COFACTOR METALICO ES UN PROCESO COMPLEJO EN EL QUE INTERVIENEN MUCHAS DE LAS PROTEINAS IMPLICADAS
EN FIJACION BIOLOGICA DE DINITROGENO. A TRAVES DE ESTA TESIS DOCTORAL SE HA ESTUDIADO EL PAPEL DE LA UNIDAD TRANSCRIPCIONAL NIFBQ DE AZOTOBACTER VINELANDII EN LA SINTESIS DE DICHO COFACTOR.
HEMOS DETERMINADO LA IMPLICACION DE FDXN, LA PROTEINA CODIFICADA POR EL SEGUNDO GEN DE DICHO OPERON, EN LA SINTESIS DE UN COFACTOR FE-S PRECURSOR DEL COFACTOR FEMO, ASI COMO LA IMPLICACION DE NIFO (TERCER GEN DEL OPERON) EN UN PROCESO DE
METABOLIZACION DE MO DIRIGIDO HACIA LA SINTESIS DEL COFACTOR FEMO DE LA DINITROGENASA. POR ULTIMO, HEMOS ESTABLECIDO LA IMPLICACION DIRECTA DE NIFQ, PRODUCTO DEL ULTIMO GEN DE LA UNIDAD TRANSCRIPCIONAL NIFBQ, EN UN PROCESO DE REDUCCION DE MO PARA SU
INCORPORACION AL COFACTOR FEMO, RECONSTITUYENDO MEDIANTE UN SISTEMA DE SINTESIS IN VITRO DEL COFACTOR, DICHO PAPEL CON LA PROTEINA NIFQ PURIFICADA. CON TODO ELLO, HEMOS RESUELTO EL PAPEL EN LA SINTESIS DEL COFACTOR FEMO DE LA NITROGENASA DE LOS
GENES FDXN, NIFO Y NIFQ DE A.
VINELANDII. CLONAJE DE LOS GENES QUE CODIFICAN PARA EL ENZIMA GA20-OXIDASA. ESTUDIO DE SU IMPLICACION EN EL
PROCESO DE TUEBRIZACION. Autor: CARRERA BERGUA ESTHER. Año: 1996. Universidad: BARCELONA. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA
.
Resumen: Las giberelinas están implicadas en
diversos fenómenos del desarrollo y recimiento de la planta. Se ha observado que la aplicación exógena de giberelinas en plantas de patata tiene un efecto inhibidor de la tuberización. Se han clonado los genes que codifican para el enzima
GA20-oxidasa en diversas especies vegetales.
En base a las secuencias aminoacídicas más conservadas, se han diseñado oligonucleótidos, que usándolos como cebadores en reacciones de PCR sobre DNA genómico de patata, han permitido aislar los clones de CDNA cuyos gnes codifican para 3
GA20-oxidasa en patata. El patrón de expresión de tejido para cada uno de los clones es diferencial, observándose que el clon stga20ox 1 se expresa de forma importante en ápices y hojas; el clon stGA20ox 2 lo hace en estolón y tubérculo, mientras
que el clon stGA20ox 3 se expresa en tallo, raiz, estolón, tubérculo y fruto. Para conocer la posible función de cada uno de estos genes se han obtenido plantas transgénicas portadoras de construcciones de sobre-expresión y antisentido. EL análisis
de las plantas transgéncias para el clon de cDNA stGA20ox 1, relacionan su función con el control de la elongoción del tallo y con el proceso de tuberización.
ESTUDIO DE LA INMUNOGENICIDAD DE LA GP63 Y SU IMPLICACION EN LAS ETAPAS INICIALES DE LA INFECCION
POR LEISHMANIA INFANTUM. Autor: CARRILLO ROSALES GRACIELA. Año: 1996. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO:
BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: DURANTE LA INFECCION NATURAL EN PERROS LA
RESPUESTA HUMORAL FRENTE A LA GP63 ESTA RESTRINGIDA A LA REGION CARBOXILO TERMINAL DE LA PROTEINA Y ES PREDOMINANTEMENTE DE TIPO TH1. ESTA PROTEINA, ADEMAS, ESTA IMPLICADA EN LOS PROCESOS DE UNION Y ENTRADA DEL PARASITO A LA CELULA HOSPEDADORA. LA
IMPLICACION SE DEMUESTRA MEDIANTE LA UTILIZACION DE DIFERENTES ANTICUERPOS ESPECIFICOS PARA LA GP63, CAPACES DE BLOQUEAR TANTO LA UNION COMO LA ENTRADA DEL PARASITO.
UTILIZANDO TANTO LA PROTEINA COMPLETA COMO FRAGMENTOS DE LA MISMA, ES POSIBLE INDUCIR EN ANIMALES INMUNIZADOS CON ESTOS ANTIGENOS, UNA RESPUESTA INMUNE CAPAZ DE REDUCIR LA PARASITOSIS EN EL MODELO DE INFECCION EN RATONES. ESTA REDUCCION ES DE
HASTA CUATRO ORDENES DE MAGNITUD CON RESPECTO A LOS CONTROLES NO VACUNADOS. LA RESPUESTA INMUNE ASOCIADA A ESTA REDUCCION, CONTRARIAMENTE A LO ESPERADO, NO ES NI PREDOMINANTEMENTE TH1 NI TH2.
LA INMUNIZACION DE ANIMALES DE EXPERIMENTACION CON FRAGMENTOS SOLAPANTES DE LA PROTEINA DEMUESTRA LA IMPORTANCIA DE LA CONFORMACION EN LA INMUNOGENICIDAD DE UN DETERMINADO EPITOPE. MECANISMOS DE ANTI-REPRESION MEDIAN LA ACTIVACION TRANSCRIPCIONAL DEL GEN DE LA PRODINORFINA EN
CELULAS NB69. Autor: CARRION RODRIGUEZ ANGEL MANUEL. Año: 1996. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE
DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: LA TRANSCRIPCION DE LA PRODINORFINA AUMENTA EN MEDULA ESPINAL
TRAS ESTIMULACION DOLOROSA. POR ELLO, SE LE HA POSTULADO UNA FUNCION EN EL CONTROL ENDOGENO DE LA SENSACION DOLOROSA. EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS MOLECULARES DE LA TRANSCRIPCION DE LA PRODINORFINA PODRIA PROPORCIONAR LA BASE PARA NUEVAS TERAPIAS
CONTRA EL DOLOR.
EL NEUROBLASTOMA NB69 REGULA LA EXPRESION DE PRODINORFINA VIA PROTEINA QUINASA A, LO QUE REMEDA EN PARTE A LO QUE OCURRE EN MEDULA ESPINAL. EN ESTE SISTEMA, ESTUDIOS A NIVEL DEL PROMOTOR DEL GEN DE LA PRODINORFINA REVELAN QUE EL ELEMENTO DRE,
SITUADO EN EL EXON 1, ES SUFICIENTE PARA QUE OCURRA LA EXPRESION REGULADA DE LA PRODINORFINA. EL ELEMENTO DRE ES UN SILENCIADOR A DONDE SE UNE LA PROTEINA REPRESORA DREAM. LA ACTIVACION TRANSCRIPCIONAL DE LA PRODINORFINA OCURRE POR PERDIDA DE
AFINIDAD DE DREAM POR SU DIANA CUANDO LA EXPRESION DE PRODINORFINA ESTA ELEVADA. ESTE FENOMENO ESTA MEDIADO POR LA INTERACCION DE DREAM CON LA PROTEINA REPRESORA ACREM. ESTE MECANISMO DE DESREPRESION ES LA PRIMERA VEZ QUE SE DESCRIBE PARA LA
REGULACION GENICA MEDIADA POR LA ACTIVACION DE LA PROTEINA QUINASA A. SEÑALIZACION DE LA INDUCCION DE OXIDO NITRICO EN MACROFAGOS PERITONEALES POR MECANISMOS
DEPENDIENTES DE INMUNOGLOBULINA-E. Autor: CARVALHO TAVARES JULIANA. Año: 1996. Universidad: VALLADOLID. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y
BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA.
Resumen: NUESTROS ESTUDIOS SE CENTRAN EN LAS
REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD INMEDIATA (TIPO I). ESTAS REACCIONES DEPENDEN DE LA UNION DEL ANTIGENO AL ANTICUERPO (IGE), QUE SE UNE FUERTEMENTE POR SU PORCION FC A RECEPTORES PRESENTES EN LA MEMBRANA DE MASTOCITOS Y BASOFILOS. TRAS LA UNION DEL
ANTIGENO AL ANTICUERPO OCURRE LA DESGRANULACION Y LIBERACION DE MEDIADORES QUIMICOS, COMO EL OXIDO NITRICO. EL OBJETIVO DE ESTA TESIS ES DEFINIR LOS MECANISMOS DE SEÑALIZACIONDE LA INDUCCION DEL OXIDO NITRICO TRAS EL CHOQUE ANAFILACTICO, ACLARAR EL
TIPO DE RECEPTORES IMPLICADOS EN ESTA INDUCCION, Y SUS CONSECUENCIAS PATOFISIOLOGICAS. EN RESUMEN, LOS RESULTADOS EXPUESTOS EN ESTE TRABAJO MUESTRAN QUE TRAS UNA ESTIMULACION "IN VITRO" CON INMUNOCOMPLEJOS IGE/DNP-BSA O UNA REACCION ANAFILACTICA
PASIVA "IN VIVO" SE INDUCE LA EXPRESION DE LA ENZIMA INOS, Y LA CONSIGUIENTE PRODUCCION DE NO. SIN EMBARGO, LA PRODUCCION DE NO ES UN PROCESO FINAMENTE REGULADO, PARA EL QUE SON PRECISOS UNA SERIE DE EVENTOS. EN ESTA CASCADA DE SEÑALES LA PRIMERA
FASE ES LA ACTIVACION DEL FCERII/CD23 PRESENTE EN LOS MACROFOGOS. POSTERIORMENTE SE DESENCADENA UNA COMPLEJA VIA DE SEÑALIZACION QUE ES DEPENDIENTE DE AMP CICLICO, EN LO QUE ADEMAS INTERVIENE EL FACTOR DE TRANSCRIPCION NUCLEAR NF-KB.
ESTUDIO DE REORDENAMIENTOS DEL PROTO-ONCOGEN TRK EN TUMORES SOLIDOS HUMANOS. Autor: CASA ESPERON ELENA DE LA. Año: 1996. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: APROXIMACION MOLECULAR AL ESTUDIOS DE
MICROORGANISMOS..
Resumen: SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE REORDENAMIENTOS DEL GEN TRK EN TUMORES DE COLON Y
TIROIDES. LA FRECUENCIA DE REORDENAMIENTOS DE TRK EN TUMORES PAPILARES DE TIROIDES, PROCEDENTES TANTO DE ESPAÑA COMO DE FRANCIA, ES BAJA. LA CARACTERIZACION MOLECULAR DE LOS PUNTOS DE RUPTURA DE DOS REORDENAMIENTOS DE TRK, ORIGINADOS EN UN TUMOR DE
COLON Y EN UN CARCINOMA PAPILAR DE TIROIDES RESPECTIVAMENTE, HA MOSTRADO LA PRESENCIA DE INSERCIONES Y DELECIONES DE NUCLEOTIDOS EN LOS MISMOS, ASI COMO DE DIVERSOS MOTIVOS ASOCIADOS A FENOMENOS DE RECOMBINACION. EN AMBOS CASOS DE TRATA DE
REORDENAMIENTOS DE TRK CON EL GEN TPM3 DE TROPOMIOSINA, CUYOS PRODUCTOS TIENEN CAPACIDAD TRANSFORMANTE, DEMOSTRANDO SU EXPRESION ESPECIFICA DE CELULAS TUMORALES EN EL CASO DEL TUMOR DE TIROIDES.
ADEMAS, EL TUMOR DE COLON EN EL QUE SE AISLO EL ONCOGEN TRK PRESENTA FENOMENOS DE INESTABILIDAD DE MICROSATELITES E INACTIVACION DE AL MENOS UNO DE LOS ALELOS DEL GEN TGFBRII, LO CUAL SUGIERE UNA PARTICIPACION DE ALTERACIONES DEL "MISMATCH
REPAIR" EN LA GENESIS DEL MISMO. ANALISIS MOLECULAR DE LAS QUINASAS DE LA SUBFAMILIA JNK/SAPK EN RATON. Autor: CASANOVA HEVIA EMILIO M.. Año: 1996. Universidad: LEON. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ASPECTOS BASICOS EN BIOQUIMICA Y BIOLOGIA
MOLECULAR.
Resumen: LAS PROTEINAS QUINASAS JNK/SAPK PERTENECEN A LA FAMILIA DE LAS PROTEINAS ERK, ESTAS JNK/SAPK
SON QUINASAS INDUCIBLES EN RESPUESTA A ESTIMULOS DE ESTRES FISICO-QUIMICOS, Y GENERAN RESPUESTAS TALES COMO INHIBICION DEL CICLO CELULAR E INCLUSO APOPTOSIS. EN NUESTRO TRABAJO HEMOS ESTUDIADO LA EXPRESION DE ESTAS QUINASAS MEDIANTE HIBRIDACION IN
SITU Y ESTUDIOS DE NORTHERN BLOT VIENDO QUE LA EXPRESION DE LA ISOFORMA ALPHA ES PREFERENTEMENTE CEREBRAL.
SE HAN AISLADO CUATRO VARIANTES PARA ESTA ISOFORMA ALPHA MEDIANTE ESTUDIOS DE PCR Y BUSQUEDA EN BIBLIOTECAS DE CDNA. TAMBIEN HEMOS AISLADO EL GEN QUE CODIFICA LA PROTEINA QUINASA ALPHA JNK/SAPK Y HEMOS PROPUESTO UN MECANISMO PARA LA GENERACION
DE LAS CUATRO VARIANTES DE LA ISOFORMA ALPHA A PARTIR DE ESE GEN. POR OTRO LADO HEMOS PUESTO A PUNTO UN SISTEMA PARA MEDIR LA ACTIVIDAD DE ESTAS QUINASAS, ASI COMO PARA LA BUSQUEDA DE NUEVOS ESTIMULOS QUE ACTIVEN A ESTAS PROTEINAS.
ESTUDIO ESPECTROSCOPICO Y MICROCALORIMETRICO DE LA ACTIVIDAD FUSOGENICA DEL VIRUS DE LA ENFERMEDAD
DE NEWCASTLE. Autor: COBALEDA HERNANDEZ CESAR. Año: 1996. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: BIOLOGIA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ENZIMOLOGIA Y
REGULACION METABOLICA.
Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA CARACTERIZADO LA ACTIVIDAD FUSOGENICA DEL PARAMIXOVIRUS AVIAR
VIRUS DE LA ENFERMEDAD DE NEWCASTLE (NDV) FRENTE A MEMBRANAS BIOLOGICAS ERITROCITARIAS. USANDO TENICAS ESPECTROFLUORIMETRICAS SE HA COMPROBADO QUE EL VIRUS PRESENTA SU MAXIMA ACTIVIDAD DE FUSION A UN PH NEUTRO Y A UNA TEMPERATURA DE 37 C Y QUE LA
DESNATURALIZACION DE LAS PROTEINAS ABOLE LA FUSOGENICIDAD DEL VIRUS. MEDIANTE TECNICAS DE RECONSTITUCION EN PROTEOLIPOSOMAS SE HA DEMOSTRADO QUE LA INTERACCION FUNCIONAL ENTRE LA PROTEINA HN Y LA F ES NECESARIA PARA QUE EL VIRUS DESARROLLE SU MAXIMA
CAPACIDAD FUSOGENICA FRENTE A MEMBRANES BIOLOGICAS.
UTILIZANDO LIPOSOMAS DE COMPOSICION DEFINIDA SE HA COMPROBADO QUE EL VIRUS NECESITA DE LA PRESENCIA EN LA MEMBRANA DIANA DE UNA MEZCLA COMPLEJA DE LIPIDOS PARA SER CAPAZ DE FUSIONAR, DE FORMA QUE UNA COMPOSICION SENCILLA NO PERMITE QUE EL VIRUS
FUSIONE. USANDO UN ANALOGO SINTETICO DEL PEPTIDO DE FUSION DE LA PROTEINA F DEL VIRUS SE HA LOGRADO DETERMINAR QUE DICHO PEPTIDO INTERACCIONA CON MEMBRANAS BIOLOGICAS PERO CARECE DE EFECTOS HEMOLITICOS O FUSOGENICOS SOBRE LAS MISMAS PORQUE
INTERACCIONA CON LA BICAPA DE FORMA PARALELA A LA SUPERFICIE DE LA MISMA Y SIN PENETRAR PROFUNDAMENTE EN LA REGION HIDROFOBICA. LA INTERACCION DEL PEPTIDO CON LA MEMBRANA VIRICA PRODUCE UNA DISMINUCION DE LA CAPACIDAD FUSOGENICA DEL NDV,
POSIBLEMENTE POR UNA INTERACCION DEL PEPTIDO CON LA PROTEINA F QUE BLOQUEA EN ESTA EL CAMBIO CONFORMACIONAL QUE LLEVA A LA FORMACION DE UN PORO DE FUSION ESTABLE. MEDIANTE MICROCALORIMETRIA DIFERENCIAL DE BARRIDO (DSC) SE HAN CARACTERIZADO LAS
TRANSICIONES CORRESPONDIENTES A LA DESNATURALIZACION TERMICA DE LAS PROTEINAS DE LA MEMBRANA VIRICA Y DE LA ERITROCITARIA CON LA AYUDA DEL METODO DEL ANALISIS TERMICO EN GEL DE ACRILAMIDA. UNA VEZ CONOCIDAS LAS PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS SE HAN
ESTUDIADO LAS ALTERACIONES QUE LA FUSION INDUCE EN LAS MISMAS. LA FUSION DEL NDV CON LAS MEMBRANAS ERITROCITARIAS PROVOCA EN ESTAS CAMBIOS ESTRUCTURALES DEBIDOS A LA TENSION QUE LA EXPANSION DEL PORO DE FUSION GENERA EN LOS COMPONENTES DEL
CITOESQUELETO DE DICHAS MEMBRANAS Y LLEVA A LA PERDIDA DE LAS INTERACCIONES QUE SE ESTABLECEN ENTRE LAS PROTEINAS ESPECTRINA, BANDA 3 Y ANKIRINA, CON LO CUAL PROVOCA CAMBIOS EN COMPORTAMIENTO Y EN LA ESTRUCTURA DE LAS MEMBRANAS ERITROCITARIAS.
ESTUDIO DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C MEDIANTE PRUEBAS DE BIOLOGIA MOLECULAR.
Autor: CORDOBA CORTIJO JUAN GINES. Año: 1996. Universidad: VALENCIA. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA I ECOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 275A MICROBIOLOGIA
.
Resumen: LA INFECCION DEL VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC) ES UN
IMPORTANTE PROBLEMA DE SALUD PUBLICA YA QUE PRESENTA UNA PREVALENCIA DEL 0,1-2% EN LA MAYORIA DE LAS POBLACIONES DE EUROPA OCCIDENTAL, CRONIFICANDOSE ENTRE UN 70-80% DE LOS CASOS, CON RIESGO DE EVOLUCION HACIA CIRROSIS HEPATICA Y CARCINOMA
HEPATOCELULAR. POR OTRO LADO, LAS TERAPIAS ANTIVIRALES SON POCO EFECTIVAS Y CON UN ELEVADO COSTE PARA LOS SISTEMAS SANITARIOS. EN EL PRESENTE TRABAJO ESTUDIAMOS DISTINTOS ASPECTOS DE LA INFECCION POR EL VHC Y SELECCIONAMOS LOS METODOS MAS ADECUADOS
PARA LA DETERMINACION DEL GENOTIPO Y LA CARGA VIRAL DEL VHC, POSTULADOS COMO FACTORES PREDICTIVOS DE RESPUESTA A LAS TERAPIAS ANTIVIRALES. ASI, SE CONCLUYE QUE EN LA DETERMINACION DE LA DETECCION DE LOS GENOTIPOS DEL VHC LOS METODOS BASADOS EN LA
HIBRIDACION CON SONDAS DE DNA TRAS AMPLIFICACION POR PCR (LIPA Y D.E.I.A.), SON LOS MAS EFICACES. EXISTE UNA ELEVADA PREVALENCIA DEL VHC TIPO 1, PARTICULARMENTE DEL SUBTIPO 1B EN EL AREA DEL HOSPITAL UNIVERSITARIO " LA FE ". PARA DETERMINAR LA CARGA
VIRAL DEL VHC, EL QUANTIPLEX HCV RNA 2.0 PARECE EL MAS ADECUADO YA QUE NO ESTA CONDICIONADO POR EL GENOTIPO DEL VHC. EN PACIENTES CON INFECCION CRONICA POR EL VHC Y DISTINTOS NIVELES DE TRANSAMINASAS, NO SE HAN ENCONTRADO DIFERENCIAS RESPECTO A LA
CARGA VIRAL Y LA DISTRIBUCION DE LOS GENOTIPOS DEL VHC. POR ULTIMO, SOLAMENTE SE HA ENCONTRADO UNA BAJA CORRELACION ENTRE LA CARGA VIRAL DEL VHC Y EL NIVEL DE ALT DURANTE LA TERAPIA ANTIVIRAL. CARACTERIZACION CROMOSOMICA Y MOLECULAR DE DOS ESPECIES DEL GENERO HELIANTHUS. Autor: CUELLAR SANCHEZ M. TERESA. Año: 1996. Universidad: AUTONOMA DE MADRID. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA.
Resumen: SE HA CARACTERIZADO A NIVEL
CITOGENETICO Y MOLECULAR DOS ESPECIES DEL GENERO HELIANTHUS: H. ANNUUS Y H.
ARGOPHYLLUS. SE HAN CLASIFICADO, ATENDIENDO A LA POSICION DEL CENTROMERO, LOS CROMOSOMAS DEL COMPLEMENTO DE AMBAS ESPECIES. SE HA DETERMINADO LA DISTRIBUCION Y COMPOSICION DE LA HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA; MEDIANTE BANDEADO-C Y UTILIZACION DE
DIVERSOS FLUOROCROMOS ESPECIFICOS DE DETERMINADAS PARES DE BASES. ADEMAS SE HAN DIFERENCIADO DISTINTAS REGIONES EUCROMATICAS EN AMBAS ESPECIES MEDIANTE BANDEADO-OR. SE HA LOCALIZADO EL NUMERO, POSICION Y ACTIVIDAD DE LAS SECUENCIAS DE ADNR MEDIANTE
IMPREGNACION ARGENTICA E HIBRIDACION "IN SITU" (FISH), CON LAS SONDAS DE ADNR 18S-25S Y ADNR-5S. SE HAN ESTUDIADO LAS SECUENCIAS DE ADNR A NIVEL MOLECULAR POR MEDIO DE RFLPS, DETECTANDOSE UN POLIMORFISMO INTRA-INDIVIDUAL QUE PERMITE DIFERENCIAR
AMBAS ESPECIES.
ESTE POLIMORFISMO ES PARCIALMENTE COMPARTIDO POR LAS DOS ESPECIES. LOS RESULTADOS CITOGENETICOS PONEN DE MANIFIESTO LA ESTRECHA PROXIMIDAD ENTRE AMBAS ESPECIES. IDENTIFICACION DE NUEVOS GENES GCD: ESTUDIO MOLECULAR Y FUNCIONAL DEL GEN GCD14 DE SACCHAROMYCES
CEREVISIAE. Autor: CUESTA SANCHEZ RAFAEL M.. Año: 1996. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: BIOLOGIA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: APROXIMACION MOLECULAR AL
ESTUDIO DE MICROORGANISMOS Y PLANTAS Y SUS INTERRELACIONES.
Resumen: LOS GENES GCD CODIFICAN REGULADORES
NEGATIVOS DE LA TRADUCCION DE GCN4, EL ACTIVADOR TRANSCRIPCIONAL DE UNA SERIE DE GENES QUE CODIFICAN ENZIMAS DE DIVERSAS RUTAS DE BIOSINTESIS DE AMINOACIDOS DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE LA MAYORIA DE ESTOS GENES GCD CODIFICAN SUBUNIDADES DE FACTORES
DE INICIACION. PARA IDENTIFICAR NUEVOS GENES GCD QUE CODIFIQUEN COMPONENTES DE LA MAQUINARIA TRADUCCIONAL, SE CARACTERIZARON 65 MUTANTES GCD. SE IDENTIFICARON DOS NUEVOS GENES: GCD14 Y GCD15, QUE CODIFICAN REGULADORES NEGATIVOS DE LA TRADUCCION DE
GCN4. A CONTINUACION SE LLEVO A CABO LA CLONACION Y CARACTERIZACION MOLECULAR DEL GEN GCD14. ESTE GEN ES ESENCIAL PARA EL CRECIMIENTO CELULAR Y CODIFICA UNA PROTEINA DE 44KDA QUE PARTICIPA, JUNTO CON GCD10, UNA SUBUNIDAD DEL FACTOR DE INICIACION
ELF-3, EN EL PROCESAMIENTO DEL ARNT INICIADOR EN EL NUCLEO. TAMBIEN PARTICIPA EN EL TRANSPORTE DE ESTE ARNT AL CITOPLASMA, DONDE SE UNE AL FACTOR DE INICIACION ELF-2 Y GTP PARA FORMAR COMPLEJOS TERNARIOS, NECESARIOS PARA EL INICIO DE LA
TRADUCCION. ENCAPSULACION DE DOXORRUBICINA EN LIPOSOMAS. DESARROLLO DE METODOS DE OBTENCION A ESCALA
INDUSTRIAL. Autor: DELGADO GONZALEZ RAQUEL. Año: 1996. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA I
BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: LA DOXORRUBICINA (DXR) ES UNO DE LOS AGENTES MAS
EMPLEADOS EN LA PRACTICA CLINICA PARA EL TRATAMIENTO DE NUMEROSAS MANIFESTACIONES NEOPLASICAS: SU ADMINISTRACION ESTA SERIAMENTE LIMITADA POR LAS MANIFESTACIONES TOXICAS QUE PROVOCA, SIENDO LA CARDIOMIOPATIA EL EFECTO IRREVERSIBLE Y ACUMULATIVO QUE
SE DERIVA DE ESTE TRATAMIENTO, PROVOCANDO FALLOS CARDIACOS CAUSADOS POR REACCIONES RADICOLARIAS EN QUE SE VE INVOLUCRADO EL FARMACO Y QUE AFECTAN A LOS LIPIDOS DE LAS MEMBRANAS DEL CORAZON. EN LA PRESENTE TESIS SE HA REALIZADO UN ESTUDIO DE
REFORMULACION DEL FARMACO, DISEÑANDOSE UN LIPOSOMA PATENTABLE CON UNA ELEVADA EFICACIA DE ENCAPSULACION DEL PRINCIPIO ACTIVO, CARACTERIZADO POR INCORPORAR UN POTENTE AGENTE ANTIOXIDANTE EN SUS BICAPAS. SE HAN DESARROLLADO METODOS DE OBTENCION DE
ESTOS POSOMAS A ESCALA LABORATORIO, CARACTERIZADOS POR EVITAR LA UTILIZACION DE DISOLVENTES ORGANICOS, LOS CUALES HAN PODIDO ADAPTARSE A PROCESOS DE ESCALA INDUSTRIAL. LOS ESTUDIOS IN VIVO REALIZADOS (DE TOXICIDAD Y FARMACOCINETICA) HAN EVIDENCIADO
LOS EFECTOS BENEFICIOSOS DE LA ENCAPSULACION DE LA DXR, POR CUANTO SE HA CONSEGUIDO AUMENTAR SU INDICE TERAPEUTICO (MENOR TOXICIDAD Y MAYORES NIVELES PLASMATICOS, SIN PERDIDA DE CAPACIDAD TERAPEUTICA. CLONACION Y CARACTERIZACION DE GENES HOMOLOGOS AL GEN HOMEOBOX HOX11. Autor: DELGADO ROMERO PETRA DELFINA. Año: 1996. Universidad: SALAMANCA. Centro de lectura: MEDICINA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: AVANCES EN MEDICINA INTERNA.
Resumen: EL GEN HOX11 ES UN GEN
HOMEOBOX AISLADO POR SU IMPLICACION EN LA T(10;14) DE LLA-T. EXISTEN GENES RELACIONADOS CON HOX11, CUYA CARACTERIZACION HA SIDO EL OBJETO DE ESTE TRABAJO.
SE HAN AISLADO LOS GENES HOX11L1 Y HOX11L2 TANTO EN EL GENOMA HUMANO COMO EN RATON. EL GEN HOX11L1 SE LOCALIZA EN 2P12 Y EL GEN HOX11L2 EN 5Q. AMBOS GENES POSEEN REGION HOMEOBOX.
EL GEN HOX11L1 SE EXPRESA DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO HUMANO Y DE RATON. EN RATONES DE 17 DIAS DE GESTACION, SE DETECTA EXPRESION MEDIANTE ISH EN EPIDERMIS, ESPESOR PARPEBRAL, CRISTALINO Y SISTEMA NERVIOSO CENTRAL.
RETRASO MENTAL HEREDITARIO Y SINDROME X FRAGIL. ESTUDIO DE AFECTOS Y PORTADORES POR ANALISIS DE
ADN. Autor: DIEGO OTERO M. YOLANDA DE. Año: 1996. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura: MEDICINA
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA MEDICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA
CELULAR Y MOLECULAR.
Resumen: EL SINDROME X FRAGIL O DE
MARTIN-BELL ES EL RETRASO MENTAL HEREDITARIO MAS FRECUENTE, APARECIENDO EN LA POBLACION 1 INDIVIDUO AFECTADO POR CADA 1500 VARONES Y 1 POR CADA 2000 MUJERES. PRESENTA VARIABILIDAD CLINICA Y ARTICIPACION. EL DIAGNOSTICO DE CERTEZA SE PONE A PUNTO EN
1991 CUANDO SE DESCUBRE LA MUTACION EN EL GEN FMR-1 SITUADO EN LA ZONA FRAXA QUE PROVOCA ALA APARICION DEL FENOTIPO. LA MUTACION SE DEBE A LA EXPANSION DEL TRIPLETE CGG EN LA ZONA NO TRADUCIDA DEL PRIMER EXON. EN LOS INDIVIDUOS AFECTADOS EL RANGO DE
LA EXPANSION SUPERA LOS 200 TRIPLETES LO QUE INDUCE LA HIPERMETILACION DE LA ISLA CPG REGULADORA DE LA EXPRESION DE GEN FMR-1, POR LO QUE LA TRANSCRIPCION DEL GEN ESTA INHIBIDA.
LA FALTA DE LA PROTEINA FMRP CODIFICADA POR ESTE GEN ES LA CAUSA DEL SINDROME X FRAGIL.
UN RANGO DE EXPANSION ENTRE 52 Y 200 TRIPLETES NO PROVOCA LA APARICION DEL RETRASO PERO LA ZONA SERA INESTABLE AL PASAR DE UNA GENERACION A LA SIGUIENTE. EN LA POBLACION NORMAL EL NUMERO DE TRIPLETES VARIA ENTRE 6 Y 52 POR LO QUE EL LOCUS FRAXA
ES POLIMORFICO.
EN ESTE TRABAJO SE PRESENTAN LOS RESULTADOS DEL ESTUDIO DEL SINDROME X FRAGIL EN LA POBLACION RETRASADA DE ANDALUCIA. SE HAN ESTUDIADO 357 MUESTRAS CON TECNICAS DE SOUTHERN-BLOT, PCR Y SECUENCIACION.
ENCONTRANDOSE EN 32 INDIVIDUOS EXPANSION EN EL RANGO DE MUTACION COMPLETA CON HIPERMETILACION, POR LO QUE SU RETRASO MENTAL SE DEBIA AL SINDROME X FRAGIL. TAMBIEN SE HAN ENCONTRADO INDIVIDUOS ASINTOMATICOS QUE ERAN PORTADORES DE PREMUTACIONES O
EN MUJERES DE MUTACIONES COMPLETAS EN UNO DE LOS DOS CROMOSOMAS X. SE HA OBSERVADO EL FENOMENO DE MOSAICISMO CELULAR.
EL ESTUDIO DE LAS MUESTRAS NO X FRAGILES POR PCR PERMITE CALCULAR LAS FRECUENCIAS OLELICAS DEL LOCUS FRAXA EN LA POBLACION ENCONTRANDOSE QUE EN ANDALUCIA EL ALELO MAS FRECUENTE ES EL DE 29 REPETICIONES, HABIENDOSE ENCONTRADO EN OTRAS POBLACIONES
EUROPEAS EL DE 30 TRIPLETES EL MAS FRECUENTE.
SE HA OBSERVADO ESTUDIANDO LAS FRECUENCIAS HAPLOTIPICAS DEL LOCI FRAXA Y DXS548 QUE EXISTE UN DESEQUILIBRIO DE LIGAMIENTO ENTRE LOS CROMOSOMAS MUTADOS Y UN ALELO DEL LOCUS DXS548, LO QUE APOYA LA HIPOTESIS DEL CROMOSOMA FUNDADOR EN EL X FRAGIL.
SE CALCULA UNA PREVALENCIA EN LA POBLACION ANDALUZA DE 1 INDIVIDUO AFECTO POR CADA 1300 VARONES, LO QUE CONFIRMA LA ALTA FRECUENCIA DEL SINDROME.
EL ESTUDIO DEL LOCUS FRAXE EN EL QUE SE OBSERVA TAMBIEN EXPANSION DE TRIPLETES EN EL GEN FMR-2 QUE DETERMINA UN RETRASO MENTAL LEVE, NO HA PERMITIDO ENCONTRAR EN LA POBLACION RETRASADA ANDALUZA NINGUN EJEMPLO DE ESTE TIPO DE RETRASO LEVE, LO QUE
INDICARIA UNA BAJA FRECUENCIA DE ESTE SINDROME EN LA POBLACION ANDALUZA. THE ANALYSIS OF HYPERVARIABLE DNA REGIONS FOR THE STUDY OF THE ECOLOGY AND GENETIC STRUCTURE OF
WILD MAMMALIAN POPULATIONS: APPLICATIONS TO CONSERVATION BIOLOGY. Autor: DOMINGO ROURA
XAVIER. Año: 1996. Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA. Centro de lectura: CIENCIAS. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: ESTA TESIS DOCTORAL EXPLORA EL
ANALISIS DE REGIONES HIPERVARIABLES DE DNA EN MAMIFEROS SALVAJES. SE DESCRIBEN LOS PERFILES DE DNA MINISATELITE DE 27 BOBCATS (FELIS RUFUS) UTILIZANDO LA SONDA 33.6 Y EL ENZIMA HAEIII.
UN 30% DE LAS BANDAS OBTENIDAS ERAN LIGADAS AL SEXO, HEMIZIGOTICAS Y PRESUMIBLEMENTE LOCALIZADAS EN LA REGION NO-RECOMBINANTE DEL CROMOSOMA Y. DICHAS BANDAS SON UTILES COMO MARCADORES GENETICOS PARA EL ESTUDIO Y LA GESTION DE ESTA ESPECIE
FELINA.
EN LA SEGUNDA PARTE DE LA TESIS SE DESCRIBEN 7 NUEVAS REGIONES MICROSATELITE EN EL MACACO JAPONES (MACACA FUSCATA) CON VALORES DE HETEROZIGOSIS ENTRE 0.56 Y 0.89.
LOS MARCADORES SON UTILES PARA IDENTIFICAR INDIVIDUOS, REALIZAR PRUEBAS DE PATERNIDAD Y ESTUDIAR LA VARIABILIDAD GENETICA EN MACACOS Y ESPECIES PROXIMAS EVOLUTIVAMENTE.
LA PARTE FINAL DEL ESTUDIO DESCRIBE Y DISCUTE EL AISLAMIENTO NO -INVASIVO DE DNA A PARTIR DEL SEMEN DE MACACO JAPONES DE POBLACIONES SALVAJES. PRUEBAS GENETICAS Y MORFOLOGICAS INDICAN UN ALTO GRADO DE PROMISCUIDAD EN LAS POBLACIONES DE
YAKUSHIMA. APLICACION DE TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR EN EL ESTUDIO DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA
HEPATITIS C. Autor: DOMINGO SANZ M. JESUS. Año: 1996. Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID. Centro de lectura: QUIMICA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE
DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.
Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO ME PROPUSE ESTUDIAR, MEDIANTE
TECNICAS DIAGNOSTICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR, LA INCIDENCIA DE LA INFECCION POR EL VIRUS DE LA HEPATITIS C (VHC) EN POBLACIONES DONDE LA INFECCION POR DICHO VIRUS DEBIA SER TRASCENDENTE (RECEPTORES DE TRASPLANTE HEPATICO, RTH, O RENAL, RTRY ADULTOS,
CON HEPATITIS CRONICA POR VIRUS C).TAMBIEN SE EVALUO LA DISTRIBUCION DE LOS GENOTIPOS DEL VIRUS EN DIFERENTES POBLACIONES DE NUESTRO MEDIO (NIÑOS CON INFECCION POR VHC Y DONANTES DE SANGRE, ADEMAS DE LOS GRUPOS YA CITADOS) Y SE ANALIZO LA RELACION
DE DICHO GENOTIPO CON LA CARGA VIRAL, LA LESION HISTOLOGICA Y LA RESPUESTA AL INTERFERON (IFN).LOS RESULTADOS OBTENIDOS MOSTRARON UNA PREVALENCIA DE INFECCION POR VHC DEL 22% EN RTH, 16% EN RTR, 56% EN ENFERMOS CON HEPATOCARCINOMA Y 45% EN AQUELLOS
CON CIRROSIS HEPATICA. EL GENOTIPO 1B FUE EL PREDOMINANTE EN TODAS LAS POBLACIONES SIN QUE SE ENCONTRARA NINGUNA RELACION ENTRE LA CARGA VIRAL Y LOS DIFERENTES TIPOS EN RTH Y EN ADULTOS CON HEPATITIS CRONICA C. POR EL CONTRARIO, SE ASOCIO A LAS
FORMAS MAS SEVERAS DE ENFERMEDAD HEPATICA EN TODOS LOS GRUPOS Y A PEOR RESPUESTA AL TRATAMIENTO CON IFN. PROTEOLISIS DURANTE EL DESARROLLO Y LA GERMINACION DE TRIGO (TRITICUM AESTIVUM).
Autor: DOMINGUEZ DEL TORO FERNANDO. Año: 1996. Universidad: SEVILLA. Centro de lectura: BIOLOGIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA
MOLECULAR.
Resumen: SE HA PUESTO A PUNTO UN METODO DE DETECCION DE ENDOPROTEASAS POR
TINCION DE ACTIVIDAD EN GEL. CON ESTE METODO SE HAN IDENTIFICADO MAS DE 30 ENDOPROTEASAS QUE PARTICIPAN EN LOS PROCESOS DE DESARROLLO Y GERMINACION DE LA SEMILLA DE TRIGO. LA MAYOR PARTE DE LAS ENDOPROTEASAS QUE PARTICIPAN DURANTE EL DESARROLLO SON
SERIN-PROTEASAS NEUTRAS, Y NO SE LOCALIZAN EN EL ENDOSPERMO DE RESERVA.
LAS QUE PARTICIPAN EN LA GERMINACION SE SINTETIZAN EN EL ESCUTELO Y LA CAPA DE ALEURONA Y SE SECRETAN AL ENDOSPERMO DE RESERVA. ENTRE ESTAS HAY UN GRUPO DE TIOL-PROTEASAS ACIDAS CUYA SINTESIS EN CAPAS DE ALEURONA ESTA REGULADA POR GIBERELINAS.
LAS GIBERELINAS COORDINAN EN EL ESPACIO Y EN EL TIEMPO LA SINTESIS Y SECRECION DE PROTEASAS CON LA ACIDIFICACION DEL ENDOSPERMO, LA DEGRADACION DE RESERVAS Y LA MUERTE CELULAR DE LA CAPA DE ALEURONA. TRES TIOL-PROTEASAS, DENOMINADAS EP28, EP55 Y
EP33, PURIFICADAS DE SEMILLAS DE TRIGO EN GERMINACION, PARTICIPAN EN LA DEGRADACION DE LAS GLIADINAS (PROTEINAS DE RESERVA DE TRIGO) A UN PH ACIDO Y EN PRESENCIA DE AGENTES REDUCTORES. DOS GENES CUYA EXPRESION ES PROPIA DE LA GERMINACION, LA
CARBOXIPEPTIDASA III Y LA TIOL-PROTEASA ANALOGA A LA CATEPSINA B DE MAMIFEROS, SE EXPRESAN DURANTE EL DESARROLLO EN EL TEJIDO NUCELAR DE LA SEMILLA DE TRIGO, Y NO EN LA ALEURONA. SISTEMA DE AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE PROTEINAS ANTIGENICAS DE PLASMODIUM FALCIPARUM
MIMETICAS A PROTEINAS DEL HOSPEDADOR HUMANO. Autor: DURAN CHICA ISABEL. Año: 1996. Universidad: GRANADA. Centro de lectura: FARMACIA. Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIAS
MORF.-BIOQUIMICA Y BIOL. MOLECULAR.FAC. DE MEDICINA PROGRAMA DE DOCTORADO: INMUNOLOGIA BASICA.
Resumen: PLASMODIUM ES EL PARASITO INTRACELULAR CAUSANTE
DE LA ENFERMEDAD DE LA MALARIA. LA ANEMIA SEVERA, LA DEBIDA A P. FALCIPARUM, ES UNA DE LAS COMPLICACIONES MAS IMPORTANTES Y AFECTA SOBRE TODO A NIÑOS QUE VIVEN EN AREAS ENDEMICAS. EL TRABAJO SE HA ENFOCADO CONSIDERANDO LA POSIBILIDAD DE QUE LA
ANEMIA SEVERA ESTE CAUSADA POR AUTOINMUNIDAD DIRIGIDA CONTRA ERITROCITOS Y CELULAS PRECURSORAS DE LA MEDULA OSEA. EN UNA PRIMERA ETAPA, SE SELECCIONARON PROTEINAS INMUNOGENICAS DE P. FALCIPARUM QUE ERAN DETECTADOS TANTO POR SUEROS MALARICOS COMO POR
ANTI-ERITROCITICOS, YA QUE SE PRETENDIA ANALIZAR LA EXISTENCIA DE PROTEINAS O DE SECUENCIAS COMPARTIDAS ENTRE PARASITO Y HOSPEDADOR. DOS CLONES DE ESTA SELECCION LLAMADOS 18B Y 15 SE ELIGIERON Y CARACTERIZARON PARA CONFIRMAR EL MIMETISMO MOLECULAR Y
DETERMINAR ASI CON QUE PROTEINAS DE ERITROCITOS DEBEN COMPARTIR LOS DETERMINANTES ANTIGENICOS SIMILARES. SE CONSIGUIO UN ANTICUERPO MONOCLONAL (ACM) CONTRA EL CLON 15 CON EL FIN DE DETECTAR LA (S) PROTEINA (S) DE PLASMODIUM QUE COMPARTIERA EL
EPITOPO CON LA CELULA HOSPEDADORA. EL ACM G12 OBTENIDO DETECTA UNA PROTEINA DE P. FALCIPARUM DE 50 KDA EN TODOS LOS ESTADIOS DEL CICLO ERITROCITICO, INCLUSO EN EL GAMETOCITO, Y DOS PROTEINAS DEL CITOESQUELETO DEL GLOBULO ROJO. EL EPITOPO RECONOCIDO
SE ENCUENTRA EN OTRAS LINEAS CELULARES COMO K562, DAUDI, Y CELULAS DE GLIOMA.
LA EXISTENCIA EN SUEROS MALARICOS DE AUTOANTICUERPOS CONTRA LAS PROTEINAS DEL ERITROCITO, QUE PREVIAMENTE HABIAN SIDO DETECTADAS POR EL ANTICUERPO MONOCLONAL G12, NOS LLEVA A ESPECULAR SI ESTA INDUCCION DE AUTOANTICUERPOS CONTRA PROTEINAS DEL
HOSPEDADOR PUDIERA SER UNA DE LAS CAUSAS QUE PROVOCAN LA INMUNOPATOLOGIA DE LA ANEMIA SEVERA DE LA MALARIA. TRANSFORMACION GENETICA MEDIADA POR AGROBACTERIUM TUMEFACIENS DE FRAGARIA SPP. Y LYCOPERSICON
ESCULENTUM MILL. Autor: EL MANSOURI IMAN. Año: 1996. Universidad: MALAGA. Centro de lectura: CIENCIAS
. Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL PROGRAMA DE DOCTORADO: ANALISIS MEDIOAMBIENTAL Y ORDENACION
DEL TERRITORIO (DEPARTAMENTO DE ECOLOGIA Y GEOLOGIA).
Resumen: ESTA TESIS SE OCUPA,
PRINCIPALMENTE, DE LA TRANSFORMACION GENETICA MEDIADA POR AGROBACTERIUM TUMEFACIENS DE LA ESPECIE DE FRESA SILVESTRE FRAGARIA VESCA Y DEL HIBRIDO ESTABLE FRAGARIAXANNANASA, ASI COMO DEL TOMATE CULTIVAR PERA. EN EL PRIMER Y SEGUNDO CASO SE TRABAJO
CON EL VECTOR BINARIO MODELO PBI121 Y EN EL TOMATE CON EL VECTOR PKYLX71 EN EL QUE SE HABIA INSERTADO EL GEN DE INTERES TPX1. ESTE GEN SE CORRESPONDE CON UNA PEROXIDASA CONSTITUTIVA DE RAIZ, AISLADA EN ESTE MISMO CULTIVAR. EN EL CASO DE FRAGARIA
VESCA SE OPTIMIZO UN MEDIO DE REGENRACION QUE INCLUIA BENCILADENINA 17.7 MICROM E INDOLBUTIRICO 1.2 MICROM Y POSTERIORMENTE, EL PROTOCOLO DE TRANSFORMACION QUE GENERO, UNA VEZ OPTIMIZADO, UNA FRECUENCIA DE TRANSFORMACION EN BASE A LA RESISTENCIA A
KANAMICINA 13%. EN EL CASO DEL CULTIVAR CHANDLER DE FRAGARIAXANANASSA, EL PRINCIPAL ENFASIS SE REALIZO EN LA UTILIZACION DE LA FUENTE DE EXPLANTO, SIENDO LA UTILIZACION DE UN PRETRATAMIENTO CON QUINETINA DEL MATERIAL IMPRESCINDIBLE PARA QUE EL
PROTOCOLO DE TRANSFORMACION FUNCIONE ADECUADAMENTE. LA FRECUENCIA DE TRANSFORMACION CON EL PROTOCOLO DE TRANSFORMACION OPTIMIZADO FUE DEL 4.2% EN BASE A LA RESISTENCIA A KANAMICINA.
EN EL CASO DEL TOMATE, SE PROCEDIO A LA TRANSFORMACION DEL MATERIAL UTILIZANDO UN MEDIO DE REGENERACION PREVIAMENTE OPTIMIZADO QUE INCLUIA BENCILADENINA 8.9 MICROM Y EL PROTOCOLO DE TRANSFORMACION ESTABLECIDO EN FRAGARIA VESCA, LIGERAMENTE
MODIFICADO. LAS PLANTAS OBTENIDAS SOBREEXPRESABAN EL GEN EN HOJAS Y TENIAN DE 4 A 5 VECES MAS ACTIVIDAD PEROXIDASA EN LA FRACCION PROTEICA IONICAMENTE UNIDA A PARED CELULAR. ESTE INCREMENTO DE ACTIVIDAD SE DEBIA A LA PRESENCIA DE UNA ISOENZIMA DE PI
8.5 Y MASA MOLECULAR ESTIMADA DE 41 KD. ESTOS RESULTADOS CONFIRMAN EN BUENA MEDIDA LAS CARACTERISTICAS PREDICHAS PARA TPX1 EN BASE A SU SECUENCIA. LA BIOMASA RADICULAR ERA MENOR QUE LA DE PLANTAS TESTIGOS.
|
|
|