BIOQUIMICA MOLECULAR, 57

Autor: ESCRIVA GARCIA HECTOR.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030A BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LOS RECEPTORES NUCLEARES SON FACTORES DE TRANSCRIPCION CUYA ACTIVIDAD ESTA MEDIADA POR LA UNION DE UN LIGANDO. SE HA REALIZADO UNA BUSQUEDA SISTEMATICA DE RECEPTORES NUCLEARES EN DIVERSOS PHYLA DEMETAZOOS Y NO METAZOOS PARA EL ESTUDIO DE LA SUPERFAMILIA, MEDIANTE LA TECNICA DE PCR CON OLIGONUCLEOTIDOS DEGENERADOS. SE HAN CLONADO 86 FRAGMENTOS DE DNA CON IDENTIDAD DE SECUENCIA CON RECEPTORES NUCLEARES INDICANDO LA PRESENCIA DE LOS MISMOS EN TODOS LOS PHYLA DE METAZOOS EXCEPTO EN ESPONJAS. ASIMISMO, SE HAN PODIDO LOCALIZAR LOS DOS MOMENTOS DE DUPLICACION GENICA QUE SE HAN PRODUCIDO EN LA EVOLUCION DE LA SUPERFAMILIA Y SE HA POSTULADO LA HIPOTESIS DE QUE EL RECEPTOR NUCLEAR ANCESTRAL DEBIO TRATARSE DE UN RECEPTOR HUERFANO. UNA SEGUNDA PARTE DEL TRABAJO HA SIDO LA CARACTERIZACION DE LOS RECEPTORES HALLADOS EN SCHISTOSOMA MANSONI. SE HAN AISLADO CLONES GENOMICOS DE LOS RECEPTORES TIPO TR4 Y RXR Y DOS CLONES DIFERENTES DE CDNA DE RXR. TAMBIEN SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION DE SMRXR DURANTE EL DESARROLLO DEL PARASITO Y LA LOCALIZACION DE LA MISMA MEDIANTE LA TECNICA DE HIBRIDACION IN SITU.

Autor: ESPIN DE GEA JUAN CARLOS.
Año: 1996.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR-A PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL SE HA ELABORADO UN METODO ESPECTROFOTOMETRICO CONTINUO, SENSIBLE Y PRECISO, APLICABLE EN UN AMPLIO INTERVALO DE PH, QUE HA POSIBILITADO LA CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD POLIFENOL OXIDASA (PPO) DE AGUACATE, ALCACHOFA, CHAMPIÑON, FRESA, MANZANA, NISPERO Y PERA. EL USO DE ESTE METODO HA SIDO CRITICO PARA LA CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD MONOFENOLASA DE PPO DE LAS ANTERIORES FRUTAS Y HORTALIZAS, PUESTO QUE ESTA ACTIVIDAD HA SIDO DESCRITA POR PRIMERA VEZ EN LA BIBLIOGRAFIA PARA LA MAYORIA DE ELLAS. ASIMISMO SE HA CARACTERIZADO LA ACCION DE PPO DE CHAMPIÑON (COMO ENZIMA COMERCIAL MODELO) SOBRE 4-HIDROXIANISOL (4HA), SUSTRATO UTILIZADO EN LA TERAPIA DEL MELANOMA MALIGNO. TRAS ESTE ESTUDIO SE DESPRENDE QUE EL MECANISMO DE ACCION DE PPO SOBRE ESTE MONOFENOL NO DIFIERE AL YA DESCRITO PARA OTROS MONOFENOLES. DADA LA ALTA CONSTANTE CATALITICA Y LA GRAN AFINIDAD DE PPO SOBRE ESTE SUSTRATO, LO HACEN IDONEO PARA EL ESTUDIO DE LA ACTIVIDAD MONOFENOLASA DE PPO DE DISTINTAS FUENTES BIOLOGICAS. CON EL USO DEL METODO DE MEDIDA Y TRAS EL ANALISIS DE ENSAYOS CINETICOS Y DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR (RMN), SE HA CARACTERIZADO LA ACTIVIDAD CATALITICA DE PPO SOBRE DIVERSOS MONOFENOLES Y DIFENOLES, ASI COMO SOBRE VARIOS ESTEREOISOMEROS. SE HA CONCLUIDO QUE LOS MEJORES SUSTRATOS MONOFENOLICOS SON AQUELLOS QUE POSEEN CADENAS LATERALES CON SUSTITUYENTES DONADORES DE ELECTRONES. EN CUANTO A LOS SUSTRATOS DIFENOLICOS, SE HA COMPROBADO QUE LA EFICACIA DE CATALISIS ESTA RELACIONADA CON EL TAMAÑO Y LA CARGA DE LOS SUSTITUYENTES DE LA CADENA LATERAL. EL ORDEN DE PREFERENCIA EN LA ACTUACION DE PPO SOBRE ESTEREOISOMEROS DE SUSTRATOS MONOFENOLICOS Y DIFENOLICOS FUE L- MAYOR QUE DL- MAYOR QUE D-. TODO ELLO HA CONTRIBUIDO A PROFUNDIZAR EN EL MECANISMO DE REACCION DE PPO, POSTULANDO LAS ETAPAS LIMITANTES PARA LA ACTIVIDAD MONOFENOLASA Y DIFENOLASA DE PPO.

Autor: ESTEBAN RUIZ PEDRO FELIPE.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: APROXIMACION MOLECULAR AL ESTUDIO DE MICROORGANISMOS Y PLANTAS Y SUS INTERRELACIONES.

Resumen: SE HAN AISLADO Y CARACTERIZADO MOLECULARMENTE CUATRO GENES QUE CODIFICAN B-GLUCANASAS, UNO EN CADA CASO, EN LAS LEVADURAS NO CONVENCIONALES HANSENULA POLYMORPHA, KLUYVEROMYCES LACTIS, SCHAWANNIOMYCES OCCIDENTALIS Y YARROWIA LIPYTICA. EL ESTUDIO DE LA EXPRESION DE ESTOS GENES EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE REVELA QUE EXCEPTO ELGEN AISLADO EN YARROWIA, LOS DEMAS SE EXPRESAN EN ESTA LEVADURA Y SUS PROTEINAS SON SECRETADAS. SE HAN CREADO CEPAS MUTANTES CARENTES DE ESTOS GENES EN KLUYVEROMYCES Y EN YARROWIA POR REEMPLAZAMIENTO GENICO Y SE HA DESCRITO LA REGULACION TRANSCRIPCIONAL DEL GEN EXG DE YARROWIA DEPENDIENTE DEL MEDIO DE CULTIVO. POR ULTIMO, SE HA LOGRADO EXPRESAR Y SECRETAR EN K.LACTIS LA HORMONA DE CRECIMIENTO, TGH-II, DE LA TRUCHA ARCOIRIS SALMO GAIRDNERI, USANDO EL PEPTIDO SEÑAL Y EL PROPEPTIDO DEL GEN EXG DE KLUYVEROMYCES.

Autor: FAYOS FEBRER JOAQUIN.
Año: 1996.
Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: DE BIOTECNOLOGIA.

Resumen: EN LA PRESENTE TESIS SE HAN ESTUDIADO ALGUNOS ALGUNOS ASPECTOS DE LA POSIBLE IMPLICACION DE LA MEMBRANA PLASMATICA EN LA RESPUESTA DEFENSIVA INDUCIDA EN LAS PLANTAS POR LA INFECCION VIROIDAL. SE HA TOMADO COMO MODELO DE ESTUDIO EL SISTEMA CEV-TOMATE (LYCOPERSICON ESCULENTUM). LOS RESULTADOS OBTENIDOS SON LOS SS: 1) LA INFECCION VIROIDAL ALTERA LA COMPOSICION LIPIDICA Y LAS PROPIEDADES FISICOQUIMICAS DE LA MEMBRANA PLASMATICA. LOS CAMBIOS DETECTADOS EN LO QUE RESPECTA A LA COMPOSICION LIPIDICA SON: UNA DISMINUCION DEL CONTENIDO EN LOS ACIDOS GRASOS INSATURADOS ENTRE LOS QUE CABE RESALTAR EL OLEICO, LINOLEICO Y LINOLENICO (18:1,18:2,18:3); Y UN INCREMENTO DE LISOFOSFATIDILCOLINA Y OTROS LISOFOSFOLIPIDOS; 2) AMBAS ALTERACIONES SON CONSISTENTES CON UN INCREMENTO ENCONTRADO EN CELULAS INFECTADAS DE UNA ACTIVIDAD FOSFOLIPASA A2; 3) ENTRE LAS CONSECUENCIAS DE LA INFECCION VIROIDAL SOBRE PROPIEDADES FISICAS DE LA MEMBRANA PLASMATICA, PODEMOS DESTACAR LA DISMINUCION DE LA FLUIDEZ Y DE LA PERMEABILIDAD PASIVA A IONES; 4) EL VIROIDE INDUCE UNA ELEVACION DE LOS NIVELES BASALES DEL CA2+ LIBRE EN EL CITOSOL DE PROTOPLASTOS DE MESOFILO FOLIAR (200NM) CON RESPECTO A LOS CONTROLES SANOS (90 NM). DICHO AUMENTO ES COMPATIBLE CON LA APERTURA PERMANENTE DE CANALES DE CA2+ DEPENDIENTES DE VOLTAJE Y CON EL ENLENTECIMIENTO EN LA EXTRUSION DE DICHO ION, ENCONTRADOS; 5) LA LIBERACION DE LOS ACIDOS OLEICO, LINOLEICO Y LINOLENICO DE LA MEMBRANA INDUCIDA POR LA INFECCION VIROIDAL ES COMPATIBLE CON LA ACTIVACION PATOGENICA DE LA RUTA DEL ACIDO JASMONICO PARA LA SINTESIS DE INHIBIDORES DE PROTEASAS I Y II (LOS MAS ABUNDANTES EN TEJIDOS DE TOMATE) NO HA PERMITIDO DETECTAR LA ACUMULACION DE DICHOS INHIBIDORES DE PROTEASAS; 6) POR EL CONTRARIO, LA INFECCION VIROIDAL INTERFIERE LA SINTESSIS DE LOS INHIBIDORES I Y II A NIVEL DE TRANSCRIPCION. ESTE EFECTO INHIBIDOR ESTA MEDIADO POR ETILENO Y SA. ESTA INHIBICION ES LA PRIMERA EVIDENCIA BIOLOGICA DE UNA INTERFERENCIA ENTRE LA RUTA DEFENSIVA A HERBIVOROS Y PATOGENOS.

Autor: FERNANDEZ GIL ANDRES.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA CLONADO, EXPRESADO Y PURIFICADO EN BACTERIA LA PROTEINA CI DEL VIRUS DE LA SHARKA, LA CUAL ES UNA RNA HELICASA. SE HA OBTENIDO DICHA PROTEINA CON ACTIVIDAD HELICASA IN VITRO. SE HAN EFECTUADO DELECIONES DE SU SECUENCIA Y ENSAYADO LAS PROTEINAS OBTENIDAS. SE HA PUESTO DE MANIFIESTO LA IMPORTANCIA DE LA REGION CARBOXILO TERMINAL DE LA PROTEINA EN EL MANTENIMIENTO DE SU ACTIVIDAD HELICASA. SE HAN LOCALIZADO DOS DOMINIOS DE UNION A RNA EN LA SECUENCIA DE LA CI, UNO DE ELLOS ASOCIADO AL DOMINIO VI DE HELICASAS, Y EL OTRO EN LA REGION AMINO, EN TORNO AL DOMINIO IA. ADEMAS SE HA MUTAGENIZADO LA REGION CORRESPONDIENTE AL DOMINIO V DE HELICASAS, Y SE HA DEMOSTRADO SU IMPLICACION EN LA ACTIVIDAD ATPASA DE LA PROTEINA. SE HAN INOCULADO PLANTAS Y PROTOPLASTOS CON TRANSCRITOS DE RNA DEL GENOMA COMPLETO DEL VIRUS, Y PORTANDO LAS MUTACIONES INTRODUCIDAS EN DICHA SECUENCIA DEL DOMINO V, LAS CUALES SE HA DETERMINADO QUE AFECTAN A LA CAPACIDAD DEL VIRUS DE ESTABLECER UNA INFECCION NORMAL EN LA PLANTA, DE MANERA QUE CUANDO LA PROTEINA CI PIERDE SU ACTIVIDAD HELICASA, TOTAL O PARCIALMENTE, EL GENOMA VIRAL NO PUEDE REPLICARSE CONVENIENTEMENTE EN LA CELULA INFECTADA, DE MANERA QUE SOLO SE OBSERVA REPLICACION A UN NIVEL MUY REDUCIDO, O NO SE OBSERVA EN ABSOLUTO. ASI, EL VIRUS NO ES CAPAZ DE INFECTAR LA PLANTA COMPLETA. ESTO DEMUESTRA LA IMPLICACION DE LA PROTEINA CI EN LA REPLICACION DEL GENOMA VIRAL, AUNQUE NO DESCARTE QUE PUEDA ESTAR IMPLICADA EN OTROS PROCESOS, COMO EL TRANSPORTE DEL VIRUS DE UNA CELULA INFECTADA A OTRA.

Autor: FERNANDEZ GONZALEZ M. CRISTINA.
Año: 1996.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA DE MICROORGANISMOS Y PLANTAS. DPTO. ECOLOGIA GENETICA Y MICROBIOLOGIA. UNIVERSIDAD DE LEON. 1989-1991..

Resumen: EL PBL 1 ES UN PLASMIDO CRIPTICO DE 4,4 KB DE BREVIBACTERIUM LACTOFERMENTUM AMPLIAMENTE UTILIZADO PARA LA CONSTRUCCION DE VECTORES DE CLONACION EN CORINEBACTERIAS. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PERMITEN ASIGNAR AL PBL1 EL MODELO DE REPLICACION DEL "CIRCULO RODANTE", DADO QUE SE HA AISLADO UN DERIVADO DEL PBL1 QUE ACUMULA MOLECULAS CIRCULARES DE CADENA SENCILLA, INTERMEDIARIOS REPLICATIVOS TIPICOS DEL MODELO DEL "CIRCULO RODANTE". SE HA IDENTIFICADO LA PROTEINA IMPLICADA EN EL INICIO DE LA REPLICACION DEL PBL1, PEPTIDO CODIFICADO POR LA ORF DE MAYOR TAMAÑO DEL MISMO, U ORF1. ESTA PROTEINA POSEE DENTRO DE SU SECUENCIA LOS TRES MOTIVOS TIPICOS DE LOS INICIADORES DE LA REPLICACION SIGUIENDO EL MODELO DEL "CIRCULO RODANTE". IGUALMENTE SE HAN DETERMINADO LAS DOS SECUENCIAS IMPLICADAS EN EL INICIO DE LAS DOS FASES DE LA REPLICACION DEL PBL1, SECUENCIAS DSO Y SSO. LA SEGUNDA FASE DE LA REPLICACION SE INICIA MEDIANTE LA SINTESIS DE UN PEQUEÑO PRIMER DE RNA SINTETIZADO POR UNARNA POLIMERASA CELULAR. POR OTRA PARTE HAN SIDO IDENTIFICADOS VARIOS TRANSCRITOS Y PEPTIDOS CODIFICADOS POR EL PBL1. SE HA DESARROLLADO UN SISTEMA DE INTRODUCCION DE DNA EN B. LACTOFERMENTUM.

Autor: FERNANDEZ USAC ELENA.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: CONOCIENDO QUE LA DESTINACION DE LAS PROTEINAS HACIA EL GRANULO SECRETOR REQUIERE UNA SEÑAL POSITIVO CODIFICADO EN LA MISMA ESTRUCTURA PROTEICA Y, BASANDONOS EN EL HECHO QUE DOS PROTEINAS, LA PC2 Y LA FURINA, DE LOCALIZACION SUBCELULAR DIFERENTE (GRANULO SECRETOR Y RED DEL TRANS-GOLGI, RESPECTIVAMENTE), PRESENTAN UNA ELEVADA HOMOLOGIA ESTRUCTURAL EN LOS DOMINIOS AMINO TERMINAL Y CATALITICO, PERO SON DIVERGENTES EN LOS DOMINIOS CARBOXITERMINALES, NUESTRA HIPOTESIS DE TRABAJO SUPONE QUE LA PC2 PODRIA CONTENER, EN SU DOMINIO CARBOXITERMINAL, INFORMACION PARA DETERMINAR LA DESTINACION DE LA PROTEINA HACIA LA VIA DE SECRECION REGULADA. PARA DICHO ESTUDIO SE CONSTRUYERON HIBRIDOS ENTRE LA PC2 Y LA FURINA, MEDIANTE LA INSERCION, EN SUS CDNA, DE UNA UNICA SECUENCIA DE RESTRICCION EN LA PARTE CARBOXI TERMINAL DE LOS DOMINIOS CATALITICO Y MEDIO. POSTERIORMENTE MEDIANTE SUBCLONAJE SE INTERCAMBIARON LOS DOMINIOS. ESTO RESULTO EN LA CONSTRUCCION DE CUATRO FORMAS HIBRIDAS DISTINTAS, COMPUESTAS POR DOMINIOS DE FURINA Y PC2. ADEMAS SE CONSTRUYO UNA FORMA TRUNCADA, DE FURINA Y PC2, FALTANDOLES SOLO EL DOMINIO CARBOXI TERMINAL. LAS EXPRESIONES DE LAS CONSTRUCCIONES FUERON, PRIMERAMENTE, ANALIZADAS EN EXPERIMENTOS DE TRANSFECCION TRANSITORIA EN LA LINEA CELULAR DE RIÑON DE MONO, COS-7. A CONTINUACION, LAS CONSTRUCCIONES SE USARON EN TRANSFECCIONES ESTABLES DE LA LINEA CELULAR DE PITUITARIA DE RATON, ALT-20. SE ESTUDIO, EN ESTAS LINEAS CELULARES, LA LOCALIZACION SUBCELULAR, SU BIOSINTESIS Y MODIFICACIONES POSTTRADUCCIONALES, ASI COMO SU SECRECION. PARA ELLO SE UTILIZARON TECNICAS DE INMUNOFLUORESCENCIA INDIRECTA, MICROSCOPIA ELECTRONICA, MARCAJE PROTEICO BREVE Y POSTERIOR SEGUIMIENTO (PULSE-CHASE), INMUNOPRECIPITACION, WESTERN BLOT, Y EL USO DE UN SECRETAGOGO PARA EL ESTUDIO DE LA SECRECION. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE LA ELIMINACION DE LOS ULTIMOS 50 AMINO ACIDOS DE LA PC2 IMPIDEN LA SALIDA DE LA PROTEINA DEL RETICULO ENDOPLASMATICO (RE), SUGIRIENDO QUE SECUENCIAS EN ESTA REGION SON CRITICAS PARA EL CORRECTO PLEGAMIENTO DE LA PROTEINA Y/O LA ACTIVACION DEL ENZIMA. EL INTERCAMBIO DE ESTA DOMINIO POR EL DE LA FURINA NO CONSIGUIO EVITAR LA RETENCION EN EL RE. LAS PROTEINAS HIBRIDAS RECIPROCAS, EN LAS CUALES EL DOMINIO CARBOXI TERMINAL DE LA PC2 FUE TRANSFERIDO EN LA PARTE AMINO TERMINAL DE LA FURINA, FUERON SELECCIONADAS DENTRO DE LOS GRANULOS DE SECRECION, MIENTRAS NO OCURRIA ESTO CON LA FURINA TRUNCADA, SIN EL DOMINIO CARBOXI TERMINAL. ESTO INDICA QUE ESTE SEGMENTO DE LA MOLECULA CONSTITUYE UN DOMINIO DE SELECCION AUTONOMO EL CUAL DEBE ACTUAR MEDIANTE LA INTERACCION CON OTRAS PROTEINAS EN EL RE Y EN EL APARATO DE GOLGI.

Autor: FERRER RODRIGUEZ CONSUELO.
Año: 1996.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LAS HALOBACTERIAS SE CARACTERIZAN POR PRESENTAR UN CRECIMIENTO OPTIMO A ALTAS CONCENTRACIONES SALINAS (2-4 M). SE CONOCE MUY POCO ACERCA DE LOS MECAMOS IMPLICADOS EN LA HALOADAPTACION. EN ESTE TRABAJO SE IDENTIFICAN QUE REGIONES DEL GENOMA DE LA ARCHAEA HALOFILA HALOFERAX VOLCANII SE ENCUENTRAN IMPLICADAS EN LA OSMORREGULACION, USANDO COMO TECNICA LA HIBRIDACION DE CDNA OBTENIDO A TRES CONCENTRACIONES SALINAS (12, 20, Y 30%). SE OBSERVA QUE LAS REGIONES IMPLICADAS EN LA OSMORREGULACION APARECEN AMPLIAMENTE DISTRIBUIDAS POR EL GENOMA, EXISTIENDO DOS REGIONES, UNA EN EL CROMOSOMA Y OTRA EN EL PLASMIDO DE MAYOR TAMAÑO, CON UNA FUERTE RESPUESTA A LA SALINIDAD DEL MEDIO. SE HAN ANALIZADO LAS REGIONES PROMOTORAS DE ALGUNOS DE LOS GENES OSMORREGULADOS, DETECTANDOSE SECUENCIAS CON ALTERNANCIA DE PURINAS-PRIMIDINAS SUSCEPTIBLES DE FORMAR Z-DNA QUE PODRIA ESTAR IMPLICADO EN LA REGULACION DE LA TRANSCRIPCION, ASI COMO SECUENCIAS DENOMINADAS STRE DESCRITAS HASTA EL MOMENTO UNICAMENTE EN GENES OSMORREGULADOS DE EUCARIOTAS. TAMBIEN SE DESCRIBE COMO VARIA LA SINTESIS PROTEICA DE H. VOLCANII EN FUNCION DE LAS VARIACIONES OSMOTICAS DEL MEDIO, EXISTIENDO DOS TIPOS DE RESPUESTA, UNA TRANSITORIA Y UNA ESTACIONARIA.

Autor: FERREZUELO MUÑOZ FRANCISCO.
Año: 1996.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: EXPERIMENTACION BIOLOGICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN USADO 2 APROXIMACIONES EXPERIMENTALES PARA EL ESTUDIO DE LA MUTAGENICIDAD DE DIVERSOS AGENTES ALQUILANTES EN E. COLI. UNA HA SIDO LA OBTENCION DE CURVAS DOSIS-RESPUESTA CON EL FIN DE EVALUAR LA POTENCIA MUTAGENICA DE LOS COMPUESTOS Y EL PAPEL DE LA REPARACION. LA SEGUNDA APROXIMACION HA CONSISTIDO EN EL ANALISIS MOLECULAR DE LA SECUENCIA NUCLEOTIDICA DEL BLANCO GENETICO EMPLEADO PARA CONOCER LA NATURALEZA Y DISTRIBUCION DE LOS CAMBIOS PRODUCIDOS, LO QUE HA PERMITIDO EVALUAR LA IMPORTANCIA DE LAS LESIONES IMPLICADAS EN LA MUTAGENESIS Y LAS ESPECIFICIDADES DE SECUENCIA EN LA REACCION DE LOS COMPUESTOS Y EN LOS MECANISMOS DE REPARACION. LA ALQUILTRANSFERASA OGT Y EL SISTEMA NER REPARAN LOS DAÑOS INDUCIDOS POR PNU Y BNU. EL ADUCTO 06-ALQUILGUANINA ES PRIMORDIAL EN LA MUTAGENESIS DE LOS AGENTES ALQUILANTES EMPLEADOS, LOS CUALES DIFIEREN EN LA LONGITUD DE LA CADENA ALQUILICA (PNU VS. BNU) Y EN EL CARACTER MONO- (PNU Y BNU) O BIFUNCIONAL (CCNU Y BCNU) DE LOS GRUPOS REACTIVOS. PNU Y BNU REACCIONARON DE FORMA SIMILAR CON EL DNA, MIENTRAS QUE CCNU LO HIZO DE FORMA DISTINTA. LOS MECANISMOS DE REPARACION MUESTRAN DIFERENTES ESPECIFICIDADES DE SECUENCIA FRENTE A LOS DISTINTOS AGENTES UTILIZADOS.

Autor: FRAILE RAMOS ALBERTO.
Año: 1996.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA, BIOQUIMICA Y GENETICA MICROBIANA .

Resumen: La Espondilitis Anquilosante (EA) es una patología relativamente frecuente, que presenta una de las asociaciones más fuertes con especificidades HLA, en concreto con el antígeno HLA-B27. Existen evidencias que llevan a pensar que otros factores genéticos distintos a HLA-B27 están implicados en la patogénesis de la EA. Debido a su localización en el MHC y a su función en la presentación antigénica y en la respuesta inmune, los genes LMP, TAP, HSP70 Y TNF son ideales candidatos como factores que podrían contribuir en la susceptibilidad a la EA. El objetivo de nuestro trabajo fue analizar la posible influencia del polimorfismo de genes implicados en la respuesta inmune (HLA-B27, TAP, LMP, HSP70 Y TNF) en la susceptibilidad a la espondilitis anquilosante. Además del diseño y desarrollo de nuevos métodos para el tipaje de estos genes. Se seleccionaron 57 pacientes diagnosticados de EA, 35 controles B*27+ y 102 controles seleccionados al azar, sobre los cuales se llevo a cabo el estudio del polimorfismo de estos genes. Encontramos que: 1) los alelos B*2705, B*2702 y B*2707 estaban asociados a la EA, siendo la primera vez que se describe B*2707 en población caucasoide; 2) el gen LMP7 influye, conjuntamente con B*27, en la susceptibilidad a la EA; 3) los genes LMP2, TAP, HSP70 Y TNF no desempeñan un papel relevante en la susceptibilidad a la EA y 4) la estrategia basada en PCR-RFLP+ACRS ha resultado un método adecuado para el análisis del polimorfismo conocido de genes del MHC.

Autor: FRESNO VARA JUAN ANGEL.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: LOS RECEPTORES DE CITOQUINAS INDUCEN DIVERSAS RUTAS DE SEÑALIZACION MEDIANTE LA ASOCIACION Y ACTIVACION DE VARIAS MOLECULAS SEÑALIZADORAS ADEMAS DE LAS JAKS. SE HA DESCRITO QUE LOS RECEPTORES DE CITOQUINAS PUEDEN ASOCIAR Y ACTIVAR LA FAMILIA DE TIROSINA QUINASAS SRC. LOS OBJETIVOS FUNDAMENTALES DEL PRESENTE TRABAJO HAN SIDO ESTUDIAR LOS MECANISMOS DE ESTA ASOCIACION Y ACTIVACION, Y ANALIZAR EL PAPEL DE LA ACTIVIDAD QUINASA DE JAK2 EN LA FOFORILACION DEL RECEPTOR DE PROLACTINA. NUESTROS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE LA ESTIMULACION DE SRC POR EL PRLR ES INDEPENDIENTE DE LA ACTIVIDAD DE JAK2, QUE LA ASOCIACION DE SRC CON EL RECEPTOR PUEDE ESTAR MEDIADA POR EL DOMINIO UNICO DE SRC, PERO NO POR SUS DOMINIOS SH2 Y SH3, Y QUE SRC NO FOSFORILA EL PRLR. LA FOSFORILACION DEL RECEPTOR ESTA MEDIADA POR LA ACTIVIDAD QUINASA DE JAK2 Y NO POR OTRA QUINASA ASOCIADA AL RECEPTOR. ESTOS DATOS SUGIEREN QUE SRC PUEDE FUNCIONAR DE MANERA COMPLEMENTARIA, PERO INDEPENDIENTE, DE JAK2 PARA TRANSDUCIR ALGUNA DE LAS SEÑALES QUE PARTEN DEL RECEPTOR DE PROLACTINA.

Autor: FRIAS SANCHEZ JOSE ENRIQUE.
Año: 1996.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DPTO. BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LAS CIANOBACTERIAS SON CAPACES DE ASIMILAR DIFERENTES FUENTES DE NITROGENO, COMO NITRATO, NITRITO Y AMONIO. ALGUNAS ESTIRPES, COMO ANABAENA SP. PCC 7120, SON CAPACES DE FIJAR NITROGENO ATMOSFERICO. EL AMONIO ACTUA COMO REPRESOR NUTRICIONAL DE LA ASIMILACION DE FUENTES DE NITROGENO ALTERNATIVAS. EL PRODUCTO DEL GEN NTCA ACTUA COMO UN REGULADOR POSITIVO TRANSCRIPCIONAL DE GENES REGULADOS POR AMONIO EN CIANOBACTERIAS. SE HA CLONADO UNA REGION DEL GENOMA DE ANABAENA SP. PCC 7120 EN LA QUE SE SITUA EL AGRUPAMIENTO GENETICO NIR-NRT-ABC IMPLICADO EN LA ASIMILACION DE NITRATO POR TAL CIANOBACTERIA. DICHO AGRUPAMIENTO SE COMPORTA COMO OPERON (OPERON NIR), EXPRESANDOSE EN AUSENCIA DE AMONIO DESDE UN PROMOTOR SITUADO DELANTE DEL GEN NIR CUYA UTILIZACION ES REGULADA POR LA PROTEINA NTCA. POR OTRA PARTE, SE OBSERVO QUE LAS PROTEINAS NTCA ESTAN MUY CONSERVADAS Y QUE EL GEN NTCA ESTA ALTAMENTE DISTRIBUIDO ENTRE LAS IANOBACTERIAS. LA PROTEINA NTCA DE ANABAENA ACTUA COMO REGULADOR POSITIVO TRANSCRIPCIONAL DE LA EXPRESION DE GENES REPRIMIBLES POR AMONIO Y ADEMAS PARTICIPA EN EL PROCESO DE DESARROLLO DE LOS HETEROCISTOS (CELULAS ESPECIALIZADAS EN LA FIJACION DE DINITROGENO), EN UN ESTADIO MUY TEMPRANO DEL MISMO. NIVELES INCREMENTADOS DE EXPRESION DE NTCA NO SUPONIAN EXPRESION EN PRESENCIA DE AMONIO DE LOS GENES QUE REGULA.

Autor: GAITAN ARROYO M. JESUS.
Año: 1996.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA; BIOLOGIA MOLECULAR Y QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y PATOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA DETERMINACION DEL NUMERO Y EXPRESION DE LOS RECEPTORES ESPECIFICOS AT1 DE LA AII EN DISTINTOS TEJIDOS DE RATA Y COMO SE VEN REGULADOS POR DISTINTOS TRATAMIENTOS QUE AFECTAN AL SRA. EXPRESION DEL GEN EN LAS CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA EN LOS GRUPOS EXPERIMENTALES, CON OBJETO DE ASIGNAR UN PATRON DE REGULACION DEL RECEPTOR EN ESTAS CELULAS. LA INHIBICION DE LA FORMACION DE AII MEDIANTE DIFERENTES TRATAMIENTOS CONDUCE A UNA MODULACION EN EL NUMERO Y EXPRESION DE RECEPTORES AT1 EN DIFERENTES TEJIDOS. LA REGULACION ES MAS EVIDENTE CUANTO MAS INHIBIDA SE ENCUENTRE LA SINTESIS DE AII. ASI EL TRATAMIENTO DE DOCA-SAL PROVOCO MAYORES EFECTOS QUE EL TRATAMIENTO CON CAPTOPRIL. EL MECANISMO REGULATORIO OBSERVADO PARA LA AII PARECE AFECTAR EXCLUSIVAMENTE A LA TRANSCRIPCION, DEBIDO A LA EXISTENCIA DE CORRELACION ENTRE EL NUMERO DE RECEPTORES OBTENIDOS POR ENSAYOS DE UNION Y LA CONCENTRACION DE ARNM EN LOS TEJIDOS ESTUDIADOS. LA SOBRECARGA DE SODIO EJERCE UNA INFLUENCIA SOBRE LA MODULACION DEL AT1 EN LOS DIFERENTES TEJIDOS INDEPENDIENTEMENTE DEL SRA. EL MECANISMO REGULATORIO PROVOCADO POR EL SODIO PARECE SER TAMBIEN EXCLUSIVAMENTE TRANSCRIPCIONAL. MEDIANTE TECNICAS DE RT-PCR ES POSIBLE CUANTIFICAR LA EXPRESION DEL GEN DEL RECEPTOR AT1 EN CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA, LO QUE POSIBILITA EL ESTUDIO DE SU VARIABILIDAD EN LOS DIFERENTES TRATAMIENTOS UTILIZADOS. LA INHIBICION DE LA GENERACION AII EN LOS DIFERENTES TRATAMIENTOS EMPLEADOS CONDUJO A UNA DISMINUCION EN LA EXPRESION DEL RECEPTOR AT1 EN CELULAS MONONUCLEADAS DE SANGRE PERIFERICA, TAL COMO OCURRE EN GLANDULA ADRENAL. EL ESTUDIO DEL RECEPTOR AT1 EN CELULAS MONONUCLEARES DE SANGRE PERIFERICA EN HUMANOS POSIBILITARIA EL ESTUDIO DE LA PATOGENESIS DE LA HIPERTENSION ESENCIAL HUMANA, POCO VIABLE ACTUALMENTE POR OTROS METODOS. DICHO ANALISIS PODRIA RESULTAR DE INTERES EN EL DIAGNOSTICO, PRONOSTICO Y TRATAMIENTO DE LA HIPERTENSION ARTERIAL HUMANA.

Autor: GALLARDO POSADA SOLEDAD.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL SINDROME DEL ACEITE TOXICO ES UNA ENFERMEDAD MULTISISTEMICA QUE OCURRIO EN ESPAÑA EN 1981; QUE CURSO CON CARACTERISTICAS INMUNOTOXICOLOGICAS. EL OBJETIVO DE ESTA TESIS ES ESTUDIAR LA IMPLICACION DEL SISTEMA INMUNE EN EL DESARROLLO DE LA ENFERMEDAD. SE HAN ENCONTRADO ALTOS NIVELES DE SIL-2R EN SUEROS DE PACIENTES. TAMBIEN SE HA ENCONTRADO UN PATRON TH2 EN TEJIDOS PARAFINADOS DE PULMON. FINALMENTE SE HA ENCONTRADO INDUCCION DE APOPTOSIS EN LINFOCITOS EN CULTIVO CON LINOLENILANILIDA. TODO ELLO DEMUESTRA UN MECANISMO INMUNOLOGICO EN EL SINDROME DEL ACEITE TOXICO.

Autor: GAMBOA JAIMES FREDY OMAR.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA- OPCION B- 12600.

Resumen: LOS AVANCES TECNOLOGICOS EN LA AMPLIFICACION Y DETECCION DE REGIONES ESPECIFICAS DE DNA Y RNA HAN FACILITADO Y MEJORADO EL DIAGNOSTICO DE LABORATORIO DE LA TUBERCULOSIS Y OTRAS MICOBACTERIOSIS. EN LA PRESENTE TESIS "APLICABILIDAD DE LOS METODOS DE AMPLIFICACION GENETICA EN EL DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS" SE HAN ESTUDIADO Y OPTIMIZADO LAS CONDICIONES DE PRETRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS CLINICAS PARA SU POSTERIOR USO EN LA EXTRACCION, AMPLIFICACION Y DETECCION DE DNA Y RNA MICOBACTERIANO, BUSCANDO TAMBIEN MUY ESPECIFICAMENTE LA NEUTRALIZACION DE LOS ELEMENTOS INHIBIDORES DE LOS PROCESOS DE AMPLIFICACION GENETICA. ADEMAS FUERON EVALUADOS DIFERENTES METODOS DE AMPLIFICACION DE DNA Y RNA QUE PERMITEN LA DETECCION DIRECTA DE LOS COMPLEJOS M. TUBERCULOSIS Y M.AVIUM-M.INTRACELLULARE EN DIFERENTES TIPOS DE MUESTRAS CLINICAS, COMPARANDO LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LOS METODOS MOLECULARES CON LOS OBTENIDOS CON LAS TECNICAS DE EXAMEN MICROSCOPICO Y CULTIVO EN MEDIOS SOLIDOS CONVENCIONALES Y EN EL SISTEMA BACTEC. EN ESTE TRABAJO SE DEMUESTRA QUE CONCENTRACIONES DE LAURIL SULFATO DE SODIO (SDS) SUPERIORES A 3.2 MG/ML INHIBEN LAS REACCIONES DE AMPLIFICACION DE RNAR EN LA DETECCION DE M. TUBERCULOSIS DIRECTAMENTE DE MUESTRAS CLINICAS DESCONTAMINADAS CON LA TECNICA DE TACQUET Y TISSON. EL POSTERIOR LAVADO DE LAS MUESTRAS CLINICAS CON 30 ML DE AGUA DESTILADA ESTERIL ELIMINA EL SDS A NIVELES SUFICIENTES COMO PARA NO INTERFERIR EN LAS REACCIONES DE AMPLIFICACION. REALIZANDO ESTE PROCEDIMIENTO (DESCONTAMINACION CON TACQUET-TISSON Y POSTERIOR LAVADO CON 30 ML DE AGUA DESTILADA) A LAS MUESTRAS CLINICAS, DECIDIMOS EVALUAR LA APLICABILIDAD DE LAS TECNICAS DE AMPLIFICACION GENETICA EN EL DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS PULMONAR Y EXTRAPULMONAR. LA TECNICA DE AMPLIFICACION DE RNA (AMPLIFIED MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS DIRECT TEST; AMTDT) ES UNA TECNICA CON UNA BUENA SENSIBILIDAD (80 Y 90%, RESPECTIVAMENTE, EN MUESTRAS EXTRARRESPIRATORIAS Y RESPIRATORIAS) Y EXCELENTE ESPECIFICIDAD PARA LA DETECCION RAPIDA DE M.TUBERCULOSIS EN TODO TIPO DE MUESTRAS CLINICAS. LAS TECNICAS DE AMPLIFICACION DE DNA (LCX MTB ASSAY, AMPLICOR MTB TEST Y COBAS AMPLICOR MTB TEST) TIENEN UNA ACEPTABLE SENSIBILIDAD (ENTRE 51 Y 59%) Y EXCELENTE ESPECIFICIDAD EN MUESTRAS RESPIRATORIAS. EL TRATAMIENTO DE LAS MUESTRAS CLINICAS PARA ELIMINAR LOS INHIBIDORES DE LA AMPLIFICACION PRESENTES EN ESTAS ES MAS PRECISO Y EFICAZ EN LAS TECNICAS AMTDT Y LCX MTB ASSAY. ESTO LES HACE SER TECNICAS DE MEJOR RENDIMIENTO DIAGNOSTICO EN LAS FORMAS DE TUBERCULOSIS EXTRAPULMONAR (78 Y 80%, RESPECTIVAMENTE, PARA AMTDT Y LCX MTB ASSAY). EN CONCLUSION, EL MEJOR PROCESO DE AMPLIFICACION GENETICA PUEDE VERSE MERMADO EN SUS POSIBILIDADES REALES SI LA PREPARACION DE LAS MUESTRAS CLINICAS, ANTES DE PROCEDER A LA EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS Y A LA AMPLIFICACION DE LAS SECUENCIAS DIANA, NO SE REALIZA DE FORMA ADECUADA. ES MUY IMPORTANTE SEÑALAR QUE TODO SISTEMA DE AMPLIFICACION GENETICA DEBE INCORPORAR EN SU SISTEMA CONTROLES INTERNOS DE AMPLIFICACION CON EL FIN DE DETECTAR LA PRESENCIA DE INHIBIDORES Y ASI PODER ASEGURAR LA VALIDEZ DE LOS RESULTADOS NEGATIVOS OBTENIDOS.

Autor: GARCIA AMIGOT FERMIN.
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: LA ESTRUCTURA DEL GEN DE LA P44 MAPK ESTA MUY CONSERVADA A LO LARGO DE LA EVOLUCION. LA ESTRUCTURA DEL GEN HUMANO ES IDENTICA A LA DESCRITA PARA EL GEN DE RATON. EL GEN CONTIENE NUEVE EXONES Y OCHO INTRONES. EL SITIO PRINCIPAL DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION DETERMINADO POR "PRIMER EXTENSION" SE ENCUENTRA EN UNA ADENOSINA LOCALIZADA 415 NUCLEOTIDOS 5' CON RESPECTO AL CODON INICIADOR ATG. ESTA ADENOSINA ESTA LOCALIZADA EN UN ELEMENTO INR. ESTOS RESULTADOS PREDICEN UN TAMAÑO DE 2,2 KB PARA EL MRNA. EL ANALISIS DE LA SECUENCIA DE 1100 PB 5' CON RESPECTO AL CODON ATG REVELA LA PRESENCIA DE MULTIPLES SECUENCIAS CONSENSO PARA LA INTERACCION CON PROTEINAS REGULADORAS DE LA TRANSCRIPCION DE LAS QUE CABE DESTACAR UNA CAJA TATA SITUADA A 131 PB 5' DEL SITIO PRINCIPAL DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION. SEIS CAJAS G/C LOCALIZADAS EN SECUENCIAS TRANSCRITAS.

Autor: GARCIA BALLESTEROS OLGA.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR III PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: EL OBJETIVO FUNDAMENTAL DEL PRESENTE ESTUDIO HA SIDO LA SINTESIS DE NUEVOS HIDROGELES PARA SU APLICACION A LA LIBERACION CONTROLADA DE 5-FLUOROURACILO (5-FU), ANTINEOPLASICO DE USO MUY EXTENDIDO EN LA QUIMIOTERAPEUTICA CLINICA FRENTE A TUMORES SOLIDOS. SE HAN SINTETIZADO DERIVADOS MONOSUSTITUIDOS DEL ACIDO ITACONICO, QUE SE HAN COPOLIMERIZADO CON ACRILAMIDA, ENTRECRUZANDOLOS CON N,N'-METILENBISACRILAMIDA. LOS HIDROGELES RESULTANTES PRESENTAN GRADOS DE HINCHAMIENTO EN SUERO SALINO MUY ELEVADOS, PROXIMOS AL 80%P. LAS CONDICIONES DE SINTESIS HAN PERMITIDO INCLUIR UN MAXIMO DE 16 MG DE 5-FU POR PASTILLA DE HIDROGEL, MEDIANTE SU INCORPORACION EN LA MEZCLA DE POLIMERIZACION. EL FARMACO SE LIBERO TOTALMENTE SIGUIENDO UNA CINETICA ACORDE A LA SEGUNDA LEY DE DIFUSION DE FICK, EN UN TIEMPO MAXIMO DE 100+-3 HORAS. POR OTRO LADO SE HAN SINTETIZADO COPOLIMEROS FORMADOS POR ACRILAMIDA Y METACRILATO DE 2-HIDROXIETILO, ENTRECRUZADOS CON DIMETACRILATO DE ETILENGLICOL. LOS GRADOS DE HINCHAMIENTO VARIARON DESDE 66%P HASTA 24%P. LA LIBERACION TOTAL DE 5-FU SE PRODUJO ENTRE 7 HORAS Y 9 DIAS, DEPENDIENDO DE LA COMPOSICION MONOMERICA Y DEL GRADO DE ENTRECRUZAMIENTO. ASI MISMO, SE HAN REALIZADO LOS CORRESPONDIENTES ENSAYOS EMPLEANDO HIDROGELES DE POLI(METACRILATO DE 2-HIDROXIETILO), ENTRECRUZADOS TANTO CON DIMETACRILATO DE ETILENGLICOL COMO CON TRIMETACRILATO DE TRIMETILPROPANO. LA LIBERACION COMPLETA SE PRODUJO ENTRE 35 HORAS Y 9 DIAS. LOS RESULTADOS IN VIVO INDICAN QUE LOS IMPLANTES FUERON BIEN TOLERADOS, NO GENERANDOSE CAPSULA FIBROSA ALREDEDOR DE AQUELLOS CON MAYOR GRADO DE HIDRATACION. LA LIBERACION DEL FARMACO DESDE LOS GELES IMPLANTADOS DILATA LA PRESENCIA DE 5-FU EN SANGRE ENTRE 1 Y 5 DIAS, A PESAR DE LA CORTA VIDA MEDIA QUE POSEE ESTE FARMACO EN PLASMA, OBTENIENDOSE PERIODOS DE LIBERACION CONSTANTE DEL MISMO A BAJAS CONCENTRACIONES.

Autor: GARCIA CALATAYUD SALVADOR.
Año: 1996.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIAS MEDICAS Y QUIRURGICAS PROGRAMA DE DOCTORADO: CIENCIAS MEDICAS Y QUIRURGICAS.

Resumen: LOS ACIDOS LINOLEICO Y ALFA-LINOLENICO SON NUTRIENTES QUE DEBEN SER INCORPORADOS A LA DIETA PUES LOS MAMIFEROS CARECEN DE LOS ENZIMAS NECESARIOS PARA SINTETIZARLOS, POR ELLO SON DENOMINADOS ACIDOS GRASOS ESENCIALES (AGE). ESTOS AGE SON PRECURSORES DE LAS FAMILIAS W6 Y W3, Y SUS RESPECTIVOS DERIVADOS, ACIDOS ARAQUIDONICO (AA) Y DOCOSAHEXENOICO (DHA), SON PARTE IMPORTANTE DE LOS LIPIDOS ESTRUCTURALES DE LAS MEMBRANAS CELULARES. EL APORTE SE REALIZA INTRAUTERINAMENTE A TRAVES DE LA PLACENTA Y TRAS EL NACIMIENTO, A TRAVES DE LA LECHE MATERNA. SIN EMBARGO, MUCHOS RECIEN NACIDOS POR SU NACIMIENTO PREMATURO O RECIBIR LACTANCIA ARTIFICIAL RECIBEN UN APORTE INFERIOR EN ESTOS AGE Y SUS DERIVADOS. EL SISTEMA NERVIOSO DEBIDO A SU ELEVADA DENSIDAD CELULAR Y RIQUEZA EN MEMBRANAS CELULARES CONSTITUYE UN LUGAR PREFERENCIAL DE APOSITO DE LOS ACIDOS AA Y DHA. LOS EICOSANOIDES, SINTETIZADOS A PARTIR DEL AA, REALIZAN DIFERENTES FUNCIONES CELULARES MIENTRAS QUE EL DHA, ABUNDANTE EN NEURONAS DE GRAN ACTIVIDAD, SE HA RELACIONADO CON UN ADECUADO DESARROLLO NEUROLOGICO Y VISUAL. EL ESTUDIO DE LAS CONSECUENCIAS BIOQUIMICAS Y NEUROFUNCIONALES DERIVADAS DEL USO DE DIFERENTES FORMULAS INFANTILES EN EL RECIEN NACIDO HUMANO PRESENTA LIMITACIONES ETICAS Y TECNICAS. POR ELLO, SE HACE NECESARIO ESTABLECER UN MODELO ANIMAL EXPERIMENTAL QUE PERMITA, UN CONTROL DE LOS FACTORES CONFUSIONALES PRESENTES EN EL SER HUMANO, QUE PERMITA INTRODUCIR DIFERENTES MODIFICACIONES DIETETICAS Y QUE PERMITA ESTUDIAR SUS CONSECUENCIAS BIOQUIMICAS, NEUROQUIMICAS Y FUNCIONALES EN LOS ANIMALES. RATAS WISTAR HEMBRA ADULTAS RECIBIERON UNA DIETA DEFICIENTE EN AGE, O UNA DIETA CONTROL. A LOS TRES MESES DE RECIBIR LAS DIETAS, SE ANALIZARON EN AMBOS GRUPOS LA REPERCUSION CLINICA, EL ACIDOGRAMA PLASMATICO Y DIFERENTES PARAMETROS CONDUCTUALES. POSTERIORMENTE, LOS ANIMALES FUERON APAREADOS Y SE ANALIZARON, LAS CARACTERISTICAS DE SU REPRODUCCION Y LA COMPOSICION EN ACIDOS GRASOS DE LA LECHE MATERNA. LA PROGENIE FUE ESTUDIADA TANTO AL DESTETE, COMO EN LA EDAD ADULTA (6 MESES). EN EL DESTETE, SE REGISTRARON DIFERENTES PARAMETROS DEL DESARROLLO Y SE ANALIZO, LA COMPOSICION EN ACIDOS GRASOS DE DIFERENTES TEJIDOS. ADEMAS, SE REALIZARON ENSAYOS DE FIJACION DEL RADIOLIGANDO 3H-N-METIL-ESCOPOLAMINA AL RECEPTOR COLINERGICO MUSCARINICO DE LAS MEMBRANAS DE CORTEZA CEREBRAL E HIPOCAMPO. EN LA PROGENIE TANTO AL DESTETE COMO EN LA EDAD ADULTA, SE ESTUDIARON, LA ACTIVIDAD LOCOMOTORA (MEDIANTE ACTIMETRO), LA EMOTIVIDAD (PRUEBAS DEL CAMPO ABIERTO Y LABERINTO ELEVADO EN CRUZ) Y LA MEMORIA (PRUEBA DE EVITACION PASIVA). LA ADMINISTRACION DE UNA DIETA DEFICIENTE EN AGE PRODUCE EN RATAS HEMBRA ADULTAS UN PERFIL PLASMATICO CARACTERISTICO DE DEFICIENCIA EN AGE, CON AFECTACION DE LOS PARAMETROS REPRODUCTIVOS PERO SIN ALTERACIONES CONDUCTUALES NI FISICAS SIGNIFICATIVAS. LA LECHE DE ESTE GRUPO EXPERIMENTAL ES DEFICIENTE TANTO EN AGE COMO EN SUS DERIVADOS ELONGADOS Y DESATURADOS, Y SU PROGENIE PRESENTA CARACTERISTICAS DE DEFICIENCIA EN AGE COMO UN MENOR PESO CORPORAL AL NACER, DERMATITIS EN LA COLA, RETRASO EN LA ADQUISICION DE DETERMINADOS HITOS DEL DESARROLLO Y UN MENOR PESO RELATIVO DEL HIPOCAMPO. EN EL MOMENTO DEL DESTETE, PLASMA, TEJIDO ADIPOSO, HEMATIES E HIGADO DE LAS CRIAS DE ESTE GRUPO PRESENTAN PERFILES BIOQUIMICOS DE DEFICIENCIA MAS COMPLETOS Y, POR TANTO, SON MAS SENSIBLES A LOS CAMBIOS DIETETICOS QUE EL TEJIDO CEREBRAL. EL AA ES EL ACIDO GRASO MENOS AFECTADO POR LA DEFICIENCIA DIETETICA, ESPECIALMENTE EN LAS FRACCIONES DE FOSFOLIPIDOS DE LAS MEMBRANAS CEREBRALES. LA DENSIDAD DE RECEPTORES MUSCARINICOS DE LAS MEMBRANAS DE LA CORTEZA CEREBRAL Y DEL HIPOCAMPO NO SE MODIFICA EN LA PROGENIE DEL GRUPO DEFICIENTE, PERO LA AFINIDAD DEL RADIOLIGANDO 3H-N-METIL-ESCOPOLAMINA POR DICHO RECEPTOR ES MAYOR EN ESTE GRUPO. LA PROGENIE DE LOS ANIMALES CON DEFICIENCIA PRESENTA AL DESTETE, UNA TENDENCIA A PRESENTAR MAYOR ACTIVIDAD LOCOMOTORA ESPONTANEA Y UN MARCADO EMPEORAMIENTO DE LA MEMORIA. SIN EMBARGO, EN LA EDAD ADULTA NO PERSISTEN LAS ALTERACIONES OBSERVADAS EN LA MEMORIA.

Autor: GARCIA CUELLAR M. PAZ.
Año: 1996.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA (FACULTAD DE BIOLOGIA) PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA, BIOQUIMICA Y GENETICA MICROBIANA.

Resumen: LA MAYOR PARTE DE LAS CEPAS DE LABORATORIO DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE LLEVAN EN SU CITOPLASMA UNA MOLECULA DE RNA MONOCATENARIO DE 2,5 KB DENOMINADA "20S RNA". 20S RNA HA SIDO CLONADA EN FORMA DE CDNA, SECUENCIADA EN CASI SU TOTALIDAD Y CARACTERIZADA A NIVEL MOLECULAR. CONTIENE INFORMACION PARA LA SINTESIS DE UNA PROTEINA DE 91 KDA (P91) QUE CONTIENE SECUENCIAS DE AMINOACIDOS CARACTERISTICAS DE RNA POLIMERASAS DEPENDIENTES DE RNA VIRALES, CON GRAN PARECIDO A LAS DE COLIFAGOS, SOBRE TODO A LA REPLICASA DE QBETA. CON ANTICUERPOS ESPECIFICOS CONTRA UNA PARTE DE P91, EXPRESADA EN E. COLI, HEMOS DETECTADO ESTA PROTEINA EN EXTRACTOS DE S. CEREVISIAE PROCEDENTES DE CEPAS CRECIDAS EN DIFERENTES CONDICIONES DE CULTIVO. P91 NO SUFRE PROCESAMIENTO PROTEOLITICO POSTRADUCCIONAL. ESTA PROTEINA ESTA ASOCIADA CON 20S RNA FORMANDO UN COMPLEJO RIBONUCLEOPROTEICO. ESTOS COMPLEJOS P91/20S RNA HAN SIDO UTILIZADOS COMO FUENTE DE ACTIVIDAD ENZIMATICA Y DE RNAS MOLDE EN ENSAYOS DE REPLICACION IN VITRO Y EL PRODUCTO PRINCIPAL DE LOS MISMOS ES 20S RNA DE TAMAÑO COMPLETO, AUNQUE TAMBIEN EXISTE SINTESIS DE SU CADENA COMPLEMENTARIA. HEMOS COMPROBADO, ADEMAS QUE P91 ES LA RNA POLIMERASA DEPENDIENTE DE RNA (O UNA SUBUNIDAD DE LA MISMA) ENCARGADA DE LA REPLICACION DE 20S RNA.

Autor: GARCIA FERNANDEZ LUIS FRANCISCO.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: EL TRABAJO DESCRIBE LA REGULACION DEL GEN DE LA PROSTAGLANDINA D2 SINTETASA DE CEREBRO DE RATA POR HORMONAS TIROIDEAS, ACIDO RETINOICO Y GLUCOCORTICOIDES. ESTA ENZIMA CATALIZA LA SINTESIS DE PROSTAGLANDINA D2 EN SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y ES LA PROTEINA MAYORITARIA DEL LIQUIDO CEFALORAQUIDEO. ADEMAS, PERTENECE A LA FAMILIA DE LAS LIPOCALINAS, TRANSPORTANDO SU PROPIO PRODUCTO A TRAVES DE TODO EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. EL ESTUDIO MINUCIOSO DEL PROMOTOR DEL GEN HA REVELADO LA EXISTENCIA DE UN ELEMENTO DE RESPUESTA A HORMONAS TIROIDEAS (TRE) ASI COMO UNA UNIDAD COMPLEJA DE RESPUESTA A GLUCOCORTICOIDES (GRU). AMBOS ELEMENTOS COOPERAN SINERGICAMENTE EN LA ACTIVACION TRANSCRIPCIONAL DEL GEN EN RESPUESTA A HORMONAS TIROIDEAS Y DEXAMETASONA. MEDIANTE HIBRIDACION IN SITU E INMUNOHISTOQUIMICA SE HA DEFINIDO E. PATRON DE EXPRESION DEL GEN ASI COMO LA DISTRIBUCION DE SU PROTEINA. EL HIPOTIROIDISMO REDUCE LOS NIVELES DE EXPRESION Y DE PROTEINA ESPECIFICAMENTE EN EL CEREBELO Y EN MENOR MEDIDA EN CORTEZA CEREBRAL. ADEMAS, SE HAN PODIDO DEFINIR CAMBIOS EN LA LOCALIZACION DE LA INMUNOREACTIVIDAD A CAUSA DEL HIPOTIROIDISMO NEONATAL INDUCIDO A TODAS LAS EDADES POSTNATALES ESTUDIADAS.