BIOQUIMICA MOLECULAR, 61

Autor: NAVARRO CID JOSEFA.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR (I) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL ENDOTELIO VASCULAR DESEMPEÑA UN PAPEL ESENCIAL EN LA HOMEOSTASIS CARDIOVASCULAR, DEBIDO A LA PRODUCCION DE FACTORES VASOACTIVOS, ENTRE LOS QUE CABE DESTACAR EL OXIDO NITRICO (NO). LA INHIBICION DE LA SINTESIS DE NO PRODUCE HIPERTENSION. EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO FUE ESTUDIAR LOS MECANISMOS IMPLICADOS EN DICHA HIPERTENSION. LA HIPERTENSION EXPERIMENTAL INDUCIDA POR LA ADMINISTRACION DEL INHIBIDOR DE LA SINTESIS DE NO, LNAME, EN RATAS PARECE SER DEBIDA PRINCIPALMENTE A LA SUPRESION DE LA ACCION VASODILATADORA TONICA DEL NO. ESTO PRODUCIRIA UN DESEQUILIBRIO QUE PERMITIRIA LA SOBREEXPRESION DE LAS ACCIONES DE LOS SISTEMAS VASCONSTRICTORES, Y SERIA RESPONSABLE DEL AUMENTO DE LA PRESION ARTERIAL. DURANTE DICHA HIPERTENSION SE PRODUCE DAÑO RENAL, COMO SE MANIFIESTA POR LA ELEVADA PROTEINURIA. LA ANGIOTENSINA II Y UN FACTOR CONSTRICTOR DERIVADO DEL AC. ARAQUIDONICO POR LA VIA DE LA CICLOOXIGENASA PARECEN ESTAR IMPLICADOS EN DICHO DAÑO RENAL. LA ADMINISTRACION CRONICA DEL INHIBIDOR DE LA SINTESIS DE NO NO EMPEORA LA RELAJACION DEPENDIENTE DE ENDOTELIO EN VASOS DE RESISTENCIA, DEBIDO A UN AUMENTO COMPENSADOR DE LA PARTICIPACION DEL EDHF EN DICHA RESPUESTA. EL TRATAMIENTO CON UN INHIBIDOR DEL ENZIMA CONVERTIDOR DE ANGIOTENSINA Y UN BLOQUEANTE DE LOS CANALES DE CALCIO ATENUA LA HIPERTENSION Y PREVIENE EL DAÑO RENAL INDUCIDO POR LA INHIBICION CRONICA DE LA SINTESIS DE NO. ASIMISMO, DICHOS TRATAMIENTOS RESTABLECEN LA PARTICIPACION DEL NO Y LA PROSTACICLINA EN LA RELAJACION DEPENDIENTE DE ENDOTELIO.

Autor: NOVOA GARCIA ISABEL.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL VIRUS DE LA POLIO PRODUCE LA ROTURA DE LA P220 (EIF-4G) DEBIDO A LA ACCION DE LA PROTEINA 2A DEL VIRUS DE LA POLIO. ESTE TRABAJO SE HA CENTRADO EN: -OBTENER ANTICUERPOS POLICLONALES QUE RECONOZCAN LA PROTEINA P220 INTACTA COMO SUS PRODUCTOS DE ROTURA. -ANALIZAR EL EFECTO DE LA ROTURA DE LA P220 DE LISADOS DE RETICULOCITOS DE CONEJO SOBRE LA TRADUCCION DE MENSAJEROS SINTETIZADOS IN VITRO. SE HA ANALIZADO EL EFECTO SOBRE LA TRADUCCION DE MENSAJEROS CON CAP, SIN CAP, Y CON LA REGION 5' NO CODIFICANTE DEL VIRUS DE LA POLIO. -ANALIZAR DISTINTOS SISTEMAS DE INTRODUCCION DE LA PROTEINA 2A EN CELULAS DE MAMIFERO. UNA VEZ ESTABLECIDO UN SISTEMA EFICAZ QUE PERMITE LA ROTURA COMPLETA DE LA P220 DE CELULAS HELA SE HA ANALIZADO EL EFECTO SOBRE LA SINTESIS DE PROTEINAS GENERAL, ASI COMO SOBRE LA EXPRESION DE NOVO DE DISTINTOS MENSAJEROS.

Autor: NUÑEZ VILLAR MATILDE ISABEL .
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: CON OBJETO DE ESTUDIAR SU COMPORTAMIENTO, ASI COMO SU POSIBLE UTILIDAD COMO FACTORES PRONOSTICOS, HEMOS DETERMINADO LAS CONCENTRACIONES DE CD44S, CD44V5 Y CD44V6 EN 208 TEJIDOS PULMONARES (95 CARCINOMAS ESCAMOSOS, 59 ADENOCARCINOMAS Y 54 TEJIDOS NORMALES PROCEDENTE DE PACIENTES CON AMBOS TIPOS DE CARCINOMAS. TANTO EL TEJIDO TU MORAL COMO EL NO NEOPLASICO EXPRESARON LAS TRES MOLECULAS DE ADHESION. EN LOS CARCINOMAS ESCAMOSOS, LA EXPRESION DEL CD44S Y LAS ISOFORMAS VARIANTES SE ASOCIARON CON ALTAS CONCENTRACIONES DE PARAMETROS BIOLOGICOS DE MAL PRONOSTICO. LOS ADENOCARCINOMAS SIN EXPRESION DE CD44S NI CD44V5 PRESENTARON ALTAS CONCENTRACIONES DE ACIDO HIALURONICO DE MEMBRANA (AHM), LIGANDO DEL CD44, Y LA AUSENCIA DE LA EXPRESION DE CD44S SE ASOCIO CON UN MENOR TIEMPO LIBRE DE ENFERMEDAD. EL ANALISIS MULTIVARIANTE DEMOSTRO QUE SOLO EL ESTADIO Y EL AHM(DINTEL DE POSITIVIDAD: 855 NG/MG PRT.) FUERON FACTORES PRONOSTICOS INDEPENDIENTES PARA EL TIEMPO LIBRE DE ENFERMEDAD. DENTRO DE CADA ESTADIO CLINICO, LA POSITIVIDAD PARA EL AHM DETERMINO UN RIESGO RELATIVO 4 VECES SUPERIOR A CUANDO EL PROTEOGLICANO FUE NEGATIVO.

Autor: OLANO DIEZ JOSEFA.
Año: 1996.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: ASPECTOS BASICOS EN BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA IDH-NADP DE C. ACREMONIUM ES UN DIMERO DE MASA MOLECULAR 135-140 KDA, FORMADA POR DOS SUBUNIDADES IDENTICAS. ES ESPECIFICA PARA NADP Y DS-ISOCITRATO. MUESTRA UN PH OPTIMO DE 8,5-9,25. LA ENZIMA MOSTRO UNA ACTIVIDAD MAXIMA A 60 GRADOS C. Y MOSTRO INACTIVACION POR TEMPERATURA, SIGUIENDO UNA CINETICA DE PRIMER ORDEN; LA PRESENCIA DE SUSTRATOS INCREMENTO LA ESTABILIDAD TERMICA. LA ENZIMA FUE INACTIVADA POR DEPC PONIENDO DE MANIFIESTO QUE AUNQUE DEBEN MODIFICARSE 6 RESIDUOS DE HISTIDINA POR SUBUNIDAD PARA LA COMPLETA INACTIVACION DE LA ENZIMA SOLO UNO DE ELLOS ES ESENCIAL PARA LA CATALISIS, ESTE RESIDUO PUEDE ESTAR LOCALIZADO EN UNA REGION DEL CENTRO DE UNION DEL SUSTRATO CERCANA A LA ZONA DE UNION DEL NADP. LA ENZIMA TAMBIEN FUE INACTIVADA PHMB, EL ANALISIS DE INACTIVACION Y PROTECCION PARCIAL POR HISTIDINA SUGIERE QUE ESTE REACTIVO MODIFICA RESIDUOS DE CISTEINA E HISTIDINA CONJUNTAMENTE. LA ENZIMA FUE ADEMAS INACTIVADA REVERSIBLEMENTE POR PLP EN DOS ETAPAS; LA INACTIVACION SE DEBIO A LA MODIFICACION DE RESIDUOS DE LISINA IMPLICADOS EN LA CATALISIS Y/O EN LA ORIENTACION DE LOS SUSTRATOS.

Autor: OLIVARES JIMENEZ LUIS.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO HEMOS ESTUDIADO LA LOCALIZACION DE LOS TRANSPORTADORES DE GLICINA GLYT1 Y GLYT2 EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL, MEDIANTE EL USO DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS. ASI, HEMOS DESCRITO UNA DISTRIBUCION GLIAL PARA GLYT1, MIENTRAS QUE GLYT2 SE LOCALIZA EN LOS TERMINALES SINAPTICOS. POR OTRO LADO, ESTE TRABAJO SUPONE EL PRIMER ESTUDIO EXPERIMENTAL DE LA TOPOLOGIA Y LAS RELACIONES ESTRUCTURA-FUNCION DE GLYT1. HEMOS DETERMINADO LA IMPORTANCIA DEL EXTREMO CARBOXILO TERMINAL Y DE LA N-GLICOSILACION DEL TRANSPORTADOR PARA EL CORRECTO PROCESAMIENTO E INSERCION EN MEMBRANA, RESPECTIVAMENTE. POR ULTIMO, MEDIANTE DOS ESTRATEGIAS BIOQUIMICAS INDEPENDIENTES, HEMOS CONFIRMADO LA TOPOLOGIA TEORICA PREVISTA PARA GLYT1, EXCEPTO PARA EL PRIMER TERCIO AMINO TERMINAL. ASI, PROPONEMOS UN NUEVO MODELO DE TOPOLOGIA TRANSMEMBRANA, CON EL PRIMER DOMINIO HIDROFOBICO FORMANDO UN BUCLE EN EL INTERIOR DE LA MEMBRANA, Y CON UN NUEVO DOMINIO TRANSMEMBRANA EN EL INICIO DEL BUCLE ENTRE LOS DOMINIOS HIDROFOBICOS 3 Y 4.

Autor: OLLERO OJEDA MARIO.
Año: 1996.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA HIPOTESIS DE PARTIDA DE ESTA TESIS DOCTORAL FUE LA POSIBLE UTILIZACION DE LA PARTICION EN SISTEMAS BIFASICOS ACUOSOS PARA EL ANALISIS DE LA HETEROGENEIDAD POBLACIONAL DEL SEMEN OVINO RELACIONADA CON LAS CARACTERISTICAS DE SUPERFICIE DE LOS ESPERMATOZOIDES. EL PRIMER ABORDAJE EXPERIMENTAL CONSISTIO EN EVALUAR EL EFECTO DE LA MADURACION ESPERMATICA ASOCIADA AL REGIMEN SEXUAL SOBRE LA DISTRIBUCION EN CONTRACORRIENTE Y DETERMINADOS PARAMETROS DE CALIDAD SEMINAL, OBTENIENDO QUE LOS SEGUNDOS EYACULADOS PRESENTAN MAYORES INDICES DE CALIDAD Y UN ALTO GRADO DE HETEROGENEIDAD. ASI MISMO, SE ANALIZO EL EFECTO DE LA CRIOPRESERVACION EN LA SUPERFICIE DE LOS ESPERMATOZOIDES OVINOS Y EL EFECTO PROTECTOR DE DETERMINADOS DILUYENTES Y ADITIVOS. SE OBSERVO COMO LA CONGELACION PROVOCA UNA HOMOGENEIZACION DE LA MUESTRA ESPERMATICA, CONDUCIENDO A LA MAYOR PARTE DE LAS CELULAS A UN MISMO ESTADO FUNCIONAL, RELACIONADO CON LA CAPACITACION. POR OTRA PARTE SE COMPROBO LA PROTECCION APORTADA FRENTE A LA CRIOPRESERVACION MEDIANTE LA ADICION DE FACTORES PROTEICOS, COMO LA LACTALBUMINA BOVINA, AL MEDIO DE DILUCION. OTRO OBJETIVO FUE EVALUAR EL EFECTO DEL PLASMA SEMINAL Y SUS FRACCIONES SOBRE LOS ESPERMATOZOIDES EN DETERMINADAS SITUACIONES. ASI, LA FRACCION SUPERIOR A 3 KDA DEL PLASMA SEMINAL OVINO ES CAPAZ DE REVERTIR PARCIALMENTE EL EFECTO NEGATIVO DEL CHOQUE TERMICO POR FRIO Y LA ACCION DETERGENTE DEL TWEEN 20, MEDIANTE ADSORCION ESPECIFICA DE MACROMOLECULAS A LA SUPERFICIE ESPERMATICA. SE PROCEDIO TAMBIEN A LA SEPARACION DE POBLACIONES ENRIQUECIDAS EN ESPERMATOZOIDES VIABLES, MEDIANTE LA PUESTA A PUNTO DE UNA METODOLOGIA DE SWIM UP-DEXTRANO, OBTENIENDO INCREMENTOS MUY MARCADOS EN VIABILIDAD EN MUESTRAS QUE INICIALMENTE PRESENTAN INDICES MUY BAJOS DE CALIDAD. POR ULTIMO, SE DESARROLLO UN METODO PARA CUANTIFICAR LA PROPORCION DE CROMOSOMAS X E Y EN UNA MUESTRA DADA, DE CELULAS SANGUINEAS O DE ESPERMATOZOIDES OVINOS, MEDIANTE DIGESTION CON SACI DE UN FRAGMENTO DEL GEN ZF, OBTENIENDO UNA REGRESION DE R2=0.995 TRAS COMPARAR LA DENSIDAD DE LAS BANDAS CON LAS PROPORCIONES TEORICAS DE UNO Y OTRO CROMOSOMA. COMO CONCLUSION FINAL, SE HA PROBADO LA CAPACIDAD DE LA PARTICION EN BIFASES ACUOSAS PARA ANALIZAR LA HETEROGENEIDAD POBLACIONAL ESPERMATICA Y PARA SEPARAR POBLACIONES DE ESPERMATOZOIDES EN VIRTUD DE DICHA HETEROGENEIDAD.

Autor: OLMOS CASTELLO ANTONIO.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y ECOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 275 A MICROBIOLOGIA.

Resumen: DURANTE UN PERIODO DE DOS AÑOS (1994-1995) SE SELECCIONARON 96 CEPAS DE STAPHYLOCOCCUS AUREUS METICILIN-RESISTENTES (MRSA) CORRESPONDIENTES A 51 PACIENTES CON INFECCION NOSOCOMIAL POR MRSA, AISLADAS EN EL SERVICIO DE MICROBIOLOGIA DEL HOSPITAL DR. PESET DE VALENCIA. SE PROCEDIO A LA CARACTERIZACION MEDIANTE BIOTIPIFICACION, ANTIBIOTIPIFICACION ELECTROFORESIS EN CAMPO PULSANTE (PFGE) Y DNA AMPLIFICACION CON PRIMERA INESPECIFICOS (AP-PCR) CUYA VALORACION EN CONJUNTO MUESTRA COMO LA ANTIBIOTIPIFICACION COMO METODO DE DETECCION INCICIAL Y POSTERIOR CONFIRMACION DEL ORIGEN CLONAL POR AP-PCR CON OPA11, PUESTA A PUNTO EN ESTE ESTUDIO, OBTIENE CONCLUSIONES SIMILARES A PFGE. EL ESTUDIO TEMPORO-ESPACIAL MUESTRA LA EXISTENCIA DE UN CLON CIRCULANTE Y MANTENIDO, CUYO PROBABLE ORIGEN ESTA LOCALIZADO EN AREAS DE ALTO RIESGO (UNIDAD DE CUIDADOS INTENSIVOS), CON CARACTERISTICAS GENOTIPICAMENTE EPIDEMICAS DEMOSTRADAS POR RFLPS DEL GEN DE LA PROTEINA A (PCR-RESTRICCION CON RSAL), PRESENTANDO DIFERENTES ALELOS DEL GEN DE LA COAGULASA DEMOSTRADOS TRAS LA APLICACION DE RFLPS (PCR-RESTRICCION CON ALU1) EN ESTE GEN.

Autor: ORBE LOPATEGUI JOSUNE .
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: HEMATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA SINTESIS ENDOTELIAL DE PAI-1 PUEDE SER MODIFICADA POR GRAN VARIEDAD DE ESTIMULOS FISIOLOGICOS Y PATOLOGICOS, COMO ENDOTOXINA Y CITOQUINAS, ASI COMO POR DIFERENTES DROGAS. HEMOS ANALIZADO LA EXPRESION DLE GEN DE PAL-1 EN CELULAS ENDOTELIALES DE CORDON UMBILICAL HUMANO (HUVEC) UTILIZANDO NORTHERN BLOT Y TRANSCRIPCION INVERSA-REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA (RT-PCR) CON PRIMERS BIOTINILADOS. LA CONCENTRACION DE PAI-1 ANTIGENICO SE DETERMINO EN LOS SOBRENADANTES MEDIANTE TECNICA DE ELISA. LOS CULTIVOS SE ESTIMULARON CON LPS (50NG/ML), TNFALFA (500 U/ ML) E IL-1 ALFA (500 U/ML), HNF (1-10 U/ML) HBMP(1-10 U/ML) E HIRUDINA (20-100 U/ML). SE RECOGIERON LAS CELULAS Y LOS SOBRENADANTES DE LOS CULTIVOS, ANTES DE LA ESTIMULACION, A LAS 2, 6 Y 24 HORAS. EL TRATAMIENTO DE HUVEC CON ENDOTOXINA, TNF E IL-1 INCREMENTO LOS NIVELES DE MRNA DEL PAI-1. EN TODOS LOS CASOS SE OBSERVO UN EFECTO MAXIMO CON LA IL-1 A LAS 6 H (12 VECES EL VALOR BASAL). EL PAI-1 ANTIGENICO AUMENTO SIGNIFICATIVAMENTE A LAS 24 H DE LA ESTIMULACION, ESPECIALMENTE EN LOS CULTIVOS ESTIMULADOS CON IL-1. NO SE OBSERVO NINGUN EFECTO SOBRE LA EXPRESION DEL PAI-1 CON LAS DOSIS TERAPEUTICAS DE HNF, HBPM E HIRUDINA. SIN EMBARGO, DOSIS ALTAS DE HNF Y HBPM REDUJERON LA EXPRESION DEL PAI-1 Y ELLO CORRELACIONO CON UN DESCENSO EN LA SECRECION PROTEICA DEL INHIBIDOR. ESTOS DATOS INDICAN QUE ENDOTOXINA Y CITOQUINAS INDUCEN UN AUMENTO EN LA EXPRESION ENDOTELIAL DE PAI-1, QUE PODRIA CONTRIBUIR A LA APARICION DE TROMBOSIS IN VIVO. ENTRE LOS ANTICOAGULANTES, UNICAMENTE LA HNF REDUJO SIGNIFICATIVAMENTE LA CONCENTRACION DE MRNA DEL PAI-1 EN HUVEC, INDICANDO UNA ACCION PROFIBRINOLITICA.

Autor: ORIOL ROCAFIGUERA ESTHER.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA BASICA.

Resumen: MUCHOS GENES ESTRUCTURALES DE LA RUTA DE BIOSINTESIS DE HISTIDINA DE ESPECIES DIVERSAS SON CAPACES DE COMPLEMENTAR CEPAS AUXOTROFAS DE ESCHERICHIA COLI, INCLUSO SIN ESTAR FILOGENETICAMENTE RELACIONADAS. BASANDONOS EN ESTE FENOMENO HEMOS PODIDO AISLAR POR COMPLEMENTACION DE MUTANTES CARACTERIZADOS DE E. COLI, OCHO DE LOS DIEZ GENES DE BIOSINTESIS DE HISTIDINA DE LA BACTERIA FOTOTROFICA RHODOBACTER SPHAEROIDES. SE HA PROCEDIDO A SU SECUENCIACION Y AL POSTERIOR ANALISIS DE LA SECUENCIA. LA COMPARACION ENTRE LAS SECUENCIAS DE AMINOACIDOS DEDUCIDAS HA PERMITIDO LOCALIZAR LAS REGIONES MAS CONSERVADAS Y CONSTRUIR ARBOLES FILOGENETICOS. POR OTRA PARTE, SE HA ESTUDIADO LA REGULACION DE LA EXPRESION DE ESTOS GENES MEDIANTE LA CONSTRUCCION DE FUSIONES HIS::LACZ Y LA VALORACION DE LA ACTIVIDAD B-GALACTOSIDASA. ASI, HEMOS COMPROBADO QUE LA TRANSCRIPCION DE LOS GENES DE SINTESIS DE HISTIDINA EN R. SPHAEROIDES NO SE VE AFECTADA POR LA PRESENCIA DEL AMINOACIDO EN EL MEDIO. SE HA LLEVADO A CABO TAMBIEN LA CONSTRUCCION DE MUTANTES AUXOTROFOS EN LOS GENES HISA, HISI I HISG DE R. SPHAEROIDES, COSA QUE HA PROPORCIONADO UN FONDO GENETICO MAS ADECUADO PARA LOS ESTUDIOS DE COMPLEMENTACION. POR ULTIMO, SE HA DETERMINADO LA LOCALIZACION DE LOS GENES EN EL CROMOSOMA DE R. SPHAEROIDES MEDIANTE LA TECNICA DE ELECTROFORESIS DE CAMPO PULSADO. ASI, LOS GENES HISBD, HISH, HISA, HISF Y HISE SE ENCUENTRAN AGRUPADOS EN UN UNICO CLUSTER, MIENTRAS QUE, A DIFERENCIA DE LA DISPOSICION QUE PRESENTA E. COLI, LOS GENES HISI Y HISG SE ENCUENTRAN EL LUGARES DIFERENTES DEL CROMOSOMA.

Autor: ORTEGA CASAMAYOR EMILIO.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA I MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA BASICA .

Resumen: SE HA REALIZADO UNA CARACTERIZACION QUIMIOTAXONOMICA DE CULTIVOS DE BACTERIAS FOTOSINTETICAS DEL AZUFRE Y DE LAS COMUNIDADES NATURALES DONDE SE DESARROLLAN. LA TECNICA UTILIZADA CONSISTIO EN EL AISLAMIENTO NO SELECTIVO DE LAS MOLECULAS DE RNA DE BAJO PESO MOLECULAR (LMWRNA=RRNA 5S Y TRNAS) Y SU SEPERACION MEDIANTE ELECTROFORESIS DE ALTA RESOLUCION. EL ANALISIS DE CLUSTERS A PARTIR DEL PATRON DE BANDAS, PERMITIO LA IDENTIFICACION DE LOS MICROORGANISMOS Y SE CORRESPONDIO CON LA CLASIFICACION FILOGENETICA DESCRITA A PARTIR DE LA SECUENCIACION DEL GEN DEL RRNA 16S. EL PATRON LMWRNA DE LAS COMUNIDADES NATURALES SE COMPARO CON EL DE LAS CEPAS AISLADAS, PARA IDENTIFICAR LOS ORGANISMOS MAS ABUNDANTES Y REFLEJO QUE LAS ESPECIES CON LAS QUE MAS ESTUDIOS ECOFISIOLOGICOS SE HAN REALIZADO NO SON LAS QUE DOMINAN EN EL CAMPO. EL ANALISIS DE CLUSTERS AGRUPO DE MANERA COHERENTE LAS DIFERENTES COMUNIDADES SIN NECESIDAD DE AISLAR NI IDENTIFICAR SUS COMPONENTES INDIVIDUALES. LAS COMUNIDADES MICROBIANAS TENDERIAN A ESTRUCTURARSE A PARTIR DE POCAS ESPECIES QUE FORMARIAN LA MAYOR PARTE DE LA BIOMASA. EL RESTO DE LA COMUNIDAD LO CONSTITUIRIAN MUCHAS ESPECIES, PERO CON UN NUMERO BAJO DE INDIVIDUOS. ESTAS ULTIMAS NO CONTRIBUIRIAN SIGNIFICATIVAMENTE AL FUNCIONAMIENTO DEL ECOSISTEMA, PERO PODRIAN SELECCIONARSE EN LOS MEDIOS DE CULTIVO O CRECER EXPONENCIALMENTE AL MODIFICARSE LAS CONDICIONES DEL MEDIO NATURAL.

Autor: ORTEGA MOSQUERA NELY.
Año: 1996.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOTECNOLOGIA (BIOQUIMICA) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y FORESTAL.

Resumen: SE HAN DESCRITO DOS GENES, DENOMINADOS STMADS11 Y STMADS16, EN LA ESPECIE SOLANUM TUBEROSUM, QUE REPRESENTAN DOS NUEVOS MIEMBROS DE LA FAMILIA DE GENES MADS-BOX. ESTOS DOS NUEVOS GENES DEFINEN UN GRUPO DE HOMOLOGIA QUE INCLUYE A AGL15 Y AGL17 DE ARABIDOPSIS. NUESTROS DATOSSON COMPATIBLES CON LA EXISTENCIA DE, AL MENOS, DOS LOCI CROMOSOMICOS PARA STMADS16, AMBOS CON PROBABLEMENTE LA MISMA FUNCION. LAS PROTEINAS CODIFICADAS POR ESTOS GENES TIENEN UNA DISTRIBUCION DE DOMINIOS SIMILARES A LOS YA DESCRITOS ANTERIORMENTE EN OTROS FACTORES MADS, Y CONTIENEN POTENCIALES SITIOS DE FOSFORILACION Y GLICOSILACION QUE LOS CONVIERTE EN POSIBLES DIANAS PARA SU MODIFICACION POSTERIOR. EL PATRON DE EXPRESION DE AMBOS ES SIMILAR, CON ALTOS NIVELES DE EXPRESION EN HOJAS, TALLOS, RAICES, ESTOLONES Y TUBERCULOS EN DESARROLLO. LA DISTRIBUCION DEL TRANSCRITO DE STMADS16 SUGIERE QUE NO SE ENCUENTRA ESPECIFICAMENTE IMPLICADO EN PROCESOS DE TUBERIZACION. LOS ANALISIS DE HIBRIDACION "IN SITU" REVELAN UNA DISTRIBUCION UNIFORME DEL TRANSCRITO EN TODOS LOS TIPOS CELULARES. EL ANALISIS DE LOS FENOTIPOS DE PLANTAS TRANSGENICAS QUE EXPRESAN DE FORMA ECTOPICA EL TRANSCRITO DE STMADS16, SUGIERE QUE SU PRODUCTO ESTA IMPLICADO EN EL MANTENIMIENTO DE LA ACTIVIDAD MERISTEMATICA DURANTE EL DESARROLLO DE DISTINTOS TEJIDOS U ORGANOS VEGETATIVOS, EN DONDE SE EXPRESA DE FORMA HABITUAL. FINALMENTE, HEMOS DETECTADO ORTOLOGOS DE STMADS16 EN OTRAS ESPECIES SOLANACEAS RELACIONADAS PERTENECIENTES AL GENERO SOLANUM, LYCOPERSICON, CAPSICUM Y NICOTIANA. SE HA ENCONTRADO UNA GRAN CONSERVACION Y UN ELEVADO NIVEL DE EXPRESION EN LAS DISTINTAS ESPECIES CONSIDERADAS. LA VARIACION ENTRE ESPECIES ENCONTRADA EN EL CASO DE STMADS11 RESPECTO DE ESTOS NIVELES DE EXPRESION, SUGIEREN UNA DIFERENCIA FUNCIONAL ENTRE ESTOS DOS GENES MADS-BOX ALTAMENTE RELACIONADOS.

Autor: PAEZ JUAN GUILLERMO.
Año: 1996.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA DEL GEN QUE CODIFICA EL RECEPTPR DE RETINOIDES HUMANO RXR ALFA. SE AISLARON CLONES GENOMICOS ESPECIFICOS BIEN A PARTIR DE UNA GENOTECA GENOMICA EN COSMIDO PWE15, BIEN UTILIZANDO EL SISTEMA PROMOTERFINDER. EL GEN POSEE UN TAMAÑO MINIMO DE 35 KPB Y CONTIENE AL MENOS DIEZ EXONES Y NUEVE INTRONES. EL TAMAÑO DE LOS EXONES VARIA ENTRE 92 Y 543 PB MIENTRAS QUE EL TAMAÑO DE LOS INTRONES ESTA ENTRE 0,6 Y 8 KPB. LA ESTRUCTURA GENOMICA DEL RECEPTOR ES SIMILAR A LA DE LOS RARS PERO CON DOS DIFERENCIAS IMPORTANTES: EL SITIO DE INSERCION ATIPICO DEL ITRON QUE INTERRUMPE EL DOMINIO DE UNION AL DINA EN MEDIO DEL PRIMER DEDO DE ZINC, Y LA PRESENCIA DE UN INTRON MAS EN LAS SECUENCIAS QUE CODIFICAN EL DOMINIO DE UNION AL LIGANDO. LA ESTRUCTURA GENOMICA DEL HRXRA PERMITE PREDECIR CON UN ALTO GRADO DE FIABILIDAD LA ESTRUCTURAEXON-INTRON DE LOS GENES HOMOLOGOS EN OTRAS ESPECIES ASI COMO TAMBIEN LA ESTRUCTURA DE LOS OTROS MIEMBROS DE LA SUBFAMILIA EN EL HOMBRE, A SABER EL RXRB Y EL RXRG.

Autor: PALACIOS DE CASTRO ISABEL.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL TRANSPORTE DE MOLECULAS ENTRE EL NUCLEO Y EL CITOPLASMA ES UN PROCESO PRINCIPAL EN LA CELULA EUCARIOTICA. DOS TIPOS DE MOLECULAS SE TRANSPORTAN DEL CITOPLASMA AL NUCLEO: PROTEINAS NUCLEARES Y LAS PARTICULAS PEQUEÑAS NUCLEARES DE RIBONUCLEOPROTEINAS IMPLICADAS EN LA MADURACION DEL MRNA (U SNRNPS). EN ESTA TESIS SE HA ESTUDIADO EL TRANSPORTE DE U SNRNPS MEDIANTE EL USO DE UN SISTEMA IN VITRO. EN ESTE TRABAJO HE MOSTRADO QUE EL TRANSPORTE DE SNRNPS REQUIERE RANTC4, UNA GTPASA IMPLICADA EN EL TRANSPORTE DE PROTEINAS, Y REQUIERE IMPORTIN BETA, FACTOR QUE PARTICIPA EN EL PROCESO DE ANCLAJE DE LA PROTEINA NUCLEAR AL PORO NUCLEAR. IMPORTIN ALFA, EL RECEPTOR DE LA SEÑAL DE LOCALIZACION NUCLEAR (NLS) EN PROTEINAS, NO PARTICIPA EN EL TRANSPORTE DE U SNRNPS AL NUCLEO.

Autor: PALACIOS LOPEZ ITZIAR.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL RECLUTAMIENTO CELULAR ES UNO DE LOS PROCESOS CARACTERISTICOS DE LA INFLAMACION ARTICULAR. LOS PMN Y LOS MONOCITOS MIGRAN EN RESPUESTA AL GRADIENTE DE CONCENTRACIONES DE DISTINTOS FACTORES QUIMIOTACTICOS. EN DISTINTOS MODELOS ANIMALES HEMOS ESTUDIADO LA PARTICIPACION DE LA IL-8, DEL MCP-1 Y DEL PAF EN EL RECLUTAMIENTO CELULAR QUE SE PRODUCE EN LA INFLAMACION ARTICULAR. EN LA FASE AGUDA DE LA ARTRITIS POR ANTIGENO HEMOS OBSERVADO UN INCREMENTO EN LA EXPRESION Y SINTESIS DE IL-8 Y MCP-1, EL TRATAMIENTO CON TENIDAP DISMINUYO LA EXPRESION Y SINTESIS DE AMBAS QUIMIOQUINAS. EL PAF ACTUA AMPLIFICANDO LA RESPUESTA INFLAMATORIA INDUCIENDO LA EXPRESION DE IL-8 Y MCP-1 Y DE LA COLAGENASA INTERSTICIAL EN CELULAS EN CULTIVO. EL TRATAMIENTO CON BN 50730 REDUJO LA INFLAMACION ARTICULAR EN RATONES CON ARTRITIS POR COLAGENO TIPO II. EN DEFINITIVA EL ESTUDIO DE DISTINTAS ESTRATEGIAS QUE PERMITAN CONTRIBUIR AL CONTROL DE LOS FACTORES QUIMIOTACTICOS, PUEDE CONDUCIR A UN MEJOR CONTROL DE LAS ENFERMEDADES INFLAMATORIAS ARTICULARES.

Autor: PASCUAL SASTRE JAIME.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ELASTICIDAD CELULAR SE HALLA DETERMINADA A NIVEL MOLECULAR POR LAS PROPIEDADES DEL ESQUELETO DE MEMBRANA CUYO PRINCIPAL COMPONENTE ES ESPECTRINA: DICHA PROTEINA SE HALLA FORMADA POR MULTIPLES DOMINIOS SIENDO EL DENOMINADO SEGMENTO REPETIDO SU PRINCIPAL COMPONENTE. LA ESTRUCTURA DE DICHO DOMINIO HA SIDO RESUELTA POR RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR EMPLEANDO TECNICAS TRIDIMENSIONALES USANDO UNA PROTEINA DOBLEMENTE MARCADA EN EL NITROGENO Y CARBONO. LA ESTRUCTURA OBSERVADA EN DISOLUCION ESTA CONSTITUIDA POR TRES HELICES ALPHA SEPARADAS POR DOS REGIONES EN LOOP: LA ESTRUCTURA TERCIARIA ES DE HAZ SUPERENROLLADO A IZQUIERDAS. A PARTIR DE DICHA INFORMACION ESTRUCTURAL SE HAN DEDUCIDO POSIBLES MECANISMOS DE ELASTICIDAD CELULAR EN LOS LAS PROPIEDADES MOLECULARES DE LA ESPECTRINA INTACTA.

Autor: PASTOR GARCIA CONXITA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR (UNITAT DE MEDICINA) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL, LAS NEURONAS NORADRENERGICAS TIENEN SUS CUERPOS NEURONALES SITUADOS PRINCIPALMENTE EN EL LOCUS CERULEUS PROYECTANDO SUS AXONES HACIA DIVERSAS ZONAS CEREBRALES ENTRE LAS CUALES ESTAN EL CORTEX Y EL HIPOCAMPO. EL ESTUDIO DE LOS CANALES DE CA2+ DEPENDIENTES DE VOLTAGE L Y N, Y DE LOS ALFA1-ADRENOCEPTORES PRESENTES EN LAS TERMINALES NERVIOSAS (SINAPTOSOMAS) NORADRENERGICOS DEL CORTEX Y DEL HIPOCAMPO FUERON LOS OBJETIVOS INVESTIGADOS EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL. EN ESTA SE DESCRIBE QUE LA DISTRIBUCION DE LOS DISTINTOS TIPOS DE CANALES DE CA2+ ES DISTINTA PARA LAS DOS REGIONES CEREBRALES ESTUDIADAS Y QUE LOS ALFA1-ADRENOCEPTORES PUEDEN HALLARSE SITUADOS PRESINAPTICAMENTE EN EL CORTEX Y HIPOCAMPO CEREBRAL DE RATA PERO LA DENSIDAD TOTAL LOS DIFERENTES SUBTIPOS (ALFA1A, ALFA1B), ASI COMO LA RESPUESTA FUNCIONAL DE ESTOS ERA DISTINTA EN ESTAS DOS REGIONES CEREBRALES.

Autor: PEDRAZA TORRES PABLO ENRIQUE.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LAS HORMONAS TIROIDEAS SON ESENCIALES PARA EL DESARROLLO DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL DURANTE EL EMBARAZO. EN LOS ESTUDIOS REALIZADOS EN ESTA TESIS HEMOS PODIDO DETERMINAR HASTA QUE UMBRAL DEJAN DE SER EFECTIVOS LOS MECANISMOS QUE MANTIENEN LA HOMEOSTASIS DE LA T3 EN DIFERENTES TEJIDOS, YA QUE ESTOS SE MANTIENEN ANTE UNA DEFICIENCIA DE YODO, LO QUE NO OCURRE CON LOS NIVELES DE T4. LOS TEJIDOS QUE MANTIENEN NORMALES NIVELES DE T3 ANTE UNA DEFICIENCIA DE YODO SON: EL CORAZON, MUSCULO Y EN EL OVARIO INCLUSO SE ENCUENTRAN AUMENTADOS EN RATAS ADULTAS. EN RATAS PREÑADAS A 21 DIAS DE GESTACION DEFICIENTES EN YODO Y EN SUS FETOS SE OBSERVO UNA DISMINUCION EN LOS NIVELES DE T3 EN EL CORAZON Y EL MUSCULO, Y EN LOS NEONATOS AUMENTA UN POCO LA CONCENTRACION DE T3 DEBIDO AL POCO YODO QUE PASA A TRAVES DE LA LECHE MATERNA. LOS TEJIDOS QUE MANTIENEN MUCHO PEOR LA HOMEOSTASIS DE LA T3 EN RATAS ADULTAS, ANTE UNA DEFICIENCIA DE YODO SON: EL TIROIDES, EL ENCEFALO, LA HIPOFISIS Y LAS SUPRARRENALES. EN LA MAYORIA DE LOS TEJIDOS DE LOS NEONATOS DE 13 DIAS DE EDAD, PERO NO EN TODOS SE MANTIENE LA HOMEOSTASIS DE LA CONCENTRACION DE T3 A PESAR DE LAS MARCADAS DISMINUCIONES EN LA INGESATA DE YODO Y QUE SE MANTIENEN DE FORMA MAS EFICAZ EN LOS FETOS DE 21 DIAS. LA DEFICIENCIA DE YODO DE LAS MADRES, AFECTA LA MADURACION DE LAS GLIAS RADIALES DE LA REGION CA1 DEL HIPOCAMPO DE LOS FETOS DE 21 DIAS, Y AFECTA LA DENSIDAD DE LOS HACES DE AXONES QUE CONTIENE LA PROTEINA BASICA DE MIELINA EN LA CAPSULA INTERNA (ESTRIADO) DE NEONATOS DE 13 DIAS.

Autor: PENADES CASANOVA JOSE RAFAEL.
Año: 1996.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL SINDROME DE GOODPASTURE (GP) ES UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE, SOLO DESCRITA EN HUMANOS, QUE SE CARACTERIZA POR LA PRESENCIA DE ANTICUERPOS CONTRA LA REGION CARBOXITERMINAL DE LA CADENA ALFA3 DEL COLAGENO TIPO IV (ANTIGENO GP), Y SE CARACTERIZA POR UNA GLOMERULONEFRITIS RAPIDAMENTE PROGRESIVA. DADO QUE ESTA CADENA DE COLAGENO ALFA3(IV) TAMBIEN EXISTE EN OTRAS ESPECIES ANIMALES, Y QUE EN HUMANOS PODEMOS ENCONTRAR SEIS CADENAS ALFA DE COLAGENO IV, CUALQUIER PECULIAREDAD BIOLOGICA O ESTRUCTURAL DE LA CADENA ALFA3(IV) HUMANA PODRIA SER IMPORTANTE PARA EL DESARROLLO DEL SINDROME AUTOINMUNE. LOS RESULTADOS QUE SE PRESENTAN EN ESTA TESIS DEMUESTRAN COMO, Y COMO UN FENOMENO EXCLUSIVO DE LA CADENA DE ALFA3(IV) HUMANA, EL GEN QUE CODIFICA EL ANTIGENO GP GENERA 6 TRASCRITOS MEDIANTE PROCESAMIENTO ALTERNATIVO. UNA DE LAS FORMAS TRUNCADAS DEL ANTIGENO GP, ADEMAS DE LA FORMA COMPLETA, ES CAPAZ DE REACCIONAR CON LOS ANTICUERPOS GP. ADEMAS, SE HA ENCONTRADO EN LA SECUENCIA DEL ANTIGENO GP UNA REGION ALTAMENTE DIVERGENTE, HIDROFILICA, QUE PRESENTA UNA SECUENCIA CONSENSO PARA LA FOSFORILACION POR DISTINTAS PROTEINAS-QUINASA. EL ESTUDIO DE LA MISMA DEMOSTRO COMO LA PKA (PROTEINA QUINASA AMPC DEPENDIENTE) ERA CAPAZ DE FOSFORILAR EL ANTIGENO GP EN ESTA REGION DIVERGENTE Y EXCLUSIVA DEL ANTIGENO GP, FOSFORILACION QUE OCURRIA TANTO "IN VIVO" COMO "IN VITRO". ES MAS, SE HA PODIDO LOCALIZAR EN LA MEMBRANA PLASMATICA RENAL HUMANA DOS PROTEINAS QUINASA DEL TIPO DE LA PKA QUE ERAN CAPACES DE FOSFORILAR EL ANTIGENO, LO QUE SUGERIA QUE ESTAS DOS QUINASAS PUDIESEN ESTAR IMPLICADAS EN LA FOSFORILACION "IN VIVO" DEL ANTIGENO GP. POR TODO ELLO PODEMOS DECIR QUE LOS RESULTADOS PRESENTES EN ESTA TESIS HAN SERVIDO PARA CARACTERIZAR, POR PRIMERA VEZ, RASGOS BIOLOGICOS ESENCIALES DEL ANTIGENO GP QUE NO TIENEN LOS ANTIGENOS HOMOLOGOS DE OTRAS ESPECIES SUPERIORES PROXIMAS, DONDE LA ENFERMEDAD NO HA SIDO DESCRITA. ESTOS HALLAZGOS TAMBIEN HAN SENTADO LAS BASES DE UNA NUEVA FORMA DE ABORDAR EL ESTUDIO MOLECULAR DE UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE GENUINAMENTE HUMANA.

Autor: PENDON MELENDEZ CARLOS.
Año: 1996.
Universidad: CADIZ.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOG.MOLEC.,MICROBIOLOG.,MED.PREV. Y SALUD PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA SOBREEXPLOTACION DE LOS RECURSOS MARINOS ES UN GRAVE PROBLEMA QUE ATAÑE TANTO A LOS PAISES COMO AL ECOSISTEMA EN GENERAL DEL PLANETA.LA ACUICULTURA ES UNA PRACTICA QUE PUEDE EN GRAN MEDIDA PALIAR ESTOS PROBLEMAS YA QUE PERMITE PROTEGER LAS EXISTENCIAS NATURALES EN EL MAR Y AL MISMO TIEMPO SUPLEMENTAR NUESTRA ALIMENTACION.EN LOS ULTIMOS AÑOS SE HA POTENCIADO ESTA INDUSTRIA, CONSIDERANDOSE EN LA ACTUALIDAD UNA DE LAS INDUSTRIAS CON MAS FUTURO EN ESPECIAL EN LA ZONA DE LA BAHIA DE CADIZ.AL AVANCE EN ESTE SECTOR HAN CONTRIBUIDO, POR UNA PARTE EL DESARROLLO DE NUEVAS TECNOLOGIAS Y POR OTRA LA INVESTIGACION BASICA REALIZADA EN LAS ESPECIES CULTIVADAS.EN ESTE SENTIDO TODOS LOS AVANCES CONSEGUIDOS EN ASPECTOS TAN IMPORTANTES COMO LA REPRODUCCION Y EL CRECIMIENTO SON PRIMORDIALES PARA LA MEJORA DEL RENDIMIENTO. EN TODOS LOS VERTEBRADOS, TANTO EL CRECIMIENTO COMO LA REPRODUCCION ESTAN CONTROLADOS, EN GRAN MEDIDA, POR DISTINTOS FACTORES HORMONALES SECRETADOS POR LA HIPOFISIS, COMO LA HORMONA DEL CRECIMIENTO. SE HAN CONSTRUIDO VARIAS GENOTECAS DE EXPRESION EN EL VECTOR LANDAGT11 A PARTIR DEL ARN TOTAL Y EL ARNM AISLADOS DE HIPOFISIS DE LENGUADO. AL UTILIZAR ARNM SE OBTUVO UNA EFICIENCIA DE 1,1 X 10 7 RECOMBINANTES/GAMMAG DE ARNM, MIENTRAS QUE AL UTILIZAR ARN TOTAL SE OBTUVO UNA EFICIENCIA DE 2,75 X 10 6 RECOMBINANTES/GAMMAG DE ARN TOTAL. TRAS LA AMPLIFICACION DE UNA DE ESTAS GENOTECAS EL NUMERO TOTAL DE UFP OBTENIDAS ES 2,33 X 10 9, DE LOS CUALES EL 66,4% SON RECOMBINANTES. A PARTIR DE ESTAS GENOTECAS SE HAN CLONADO Y SECUENCIADO LOS ADNSC DE LAS PROTEINAS HIPOFISARIAS HORMONA DEL CRECIMIENTO (GH) Y HORMONA SOMATOLACTINA (SL) DE LA ESPECIE SOLEA SENEGALENSIS. LOS ADNSC DE LA GH Y DE LA SL DEL LENGUADO SE HAN EXPRESADO EN ESCHERICHIA COLI EN EL SISTEMA PET7, Y SE HAN PURIFICADO GH RECOMBINANTE (RSGH) Y SL RECOMBINANTE (RSSL). LA RSSL SE UTILIZO PARA PRODUCIR SUEROS ANTI-RSSL (ABSL) ALTAMENTE ESPECIFICOS, DE ALTO TITULO Y SENSIBILIDAD. EL SUERO ABSL-2 SE HA UTILIZADO PARA TEÑIR LAS CELULAS PRODUCTORAS DE SL EN LA PARS INTERMEDIA DE VARIAS ESPECIES. SE HA DESARROLLADO UN RIA HOMOLOGO Y ESPECIFICO PARA LA SL DEL LENGUADO UTILIZANDO EL SUERO ABSL-2 Y LA PROTEINA RSSL. ESTUDIOS PRELIMINARES, SOBRE LA LIBERACION DE SL POR HIPOFISIS EN CULTIVO MUESTRAN QUE LA VIA DE LA ADENIL CICLASA Y LA VIA DEL FOSFOINOSITIDO ESTAN IMPLICADAS EN LA TRANSDUCCION DE SEÑAL QUE PERMITE LA LIBERACION DE ESTA HORMONA.

Autor: PENELA MARQUEZ PETRONILA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA CARACTERIZADO LA EXPRESION DE BARK1 Y B-ARRESTINA1 EN DISTINTAS SITUACIONES DEL DESARROLLO, EN EL PERIODO PERINATAL, DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO Y EN SITUACIONES EN LAS QUE EL SISTEMA DE TRANSDUCCION ADRENERGICO SE HALLA ALTERADO COMO ES EL HIPOTIROIDISMO. LOS NIVELES POSTNATALES DE ESTAS PROTEINAS EN CEREBRO AUMENTAN EN LA SEGUNDA -TERCERA SEMANA DE VIDA, SUGIRIENDO SU PARTICIPACION EN PROCESOS DE SINAPTOGENESIS, Y SIENDO YA SUS NIVELES APRECIABLES EN EL CEREBRO NEONATAL Y FETAL. DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO, BARK1 Y B-ARRESTINA1 SE EXPRESAN INTENSAMENTE EN EL SISTEMA NERVIOSO, EN ESTRUCTURAS DERIVADAS DE LA CRESTA NEURAL Y EN LAS MOTONEURONAS DE LA MEDULA ESPINAL. AMBAS PROTEINAS SE DETECTAN EN CUERPOS NEURONALES Y AXONES DE NEURONAS LO CUAL SUGIERE UN PAPEL EN DIFERENCIACION Y/O PROLIFERACION NEURONAL ASI COMO EN PROCESOS DE MIGRACION AXONAL. BARK1 Y B-ARRESTINA1 TAMBIEN ESTAN PRESENTES DESDE ESTADIOS EMBRIONARIOS TEMPRANOS EN DISTINTOS ORGANOS (CORAZON, PULMON, HIGADO) CON NIVELES DE EXPRESION ELEVADOS, LO CUAL PODRIA REFLEJAR LA PARTICIPACION DE ESTAS PROTEINAS EN MORFOGENESIS CARDIACA (COHERENTE CON LA MUERTE EMBRIONARIA POR HIPOPLASIA VENTRICULAR DE RATONES A LOS QUE SE LES HA INTERRUMPIDO GENICAMENTE BARK1), ASI COMO EN PROCESOS HEMATOPOYETICOS LOCALIZADOS EN EL HIGADO EMBRIONARIO. EN EL MOMENTO DEL NACIMIENTO LOS NIVELES DE BARK1 Y B-ARRESTINA1 SON EN EL NEONATO MUY SUPERIORES A LOS DEL ADULTO EN DISTINTOS TEJIDOS PERIFERICOS (CORAZON, HIGADO Y PULMON), EXPERIMENTANDO CAMBIOS RAPIDOS Y TRANSITORIOS, TANTO A NIVEL DE PROTEINA COMO DE MRNA, EN LAS PRIMERAS 6 HORAS DE VIDA, COHERENTE CON SU PARTICIPACION EN PROCESOS DE DESENSIBILIZACION DE RECEPTORES ACOPLADOS A PROTEINAS G, DETECTADOS DURANTE EL PERIODO EMBRIONARIOS Y QUE GLOBALMENTE CONTRIBUIRIAN A LA ADAPTACION METABOLICA Y FUNCIONAL DE DISTINTOS TEJIDOS A LA VIDA EXTRAUTERINA. LOS CAMBIOS OBSERVADOS EN LOS NIVELES DE EXPRESION DE BARK1 RESPONDERIAN EN PARTE A CAMBIOS EN LA EFICACIA DE TRANSCRIPCION, DADO QUE SE HAN DETECTADO DIFERENTES FACTORES NUCLEARES ESPECIFICOS DE HIGADO Y CEREBRO QUE INTERACCIONARIAN CON EL PROMOTOR DE LA QUINASA BARK1 SIGUIENDO ADEMAS UN PATRON ESPECIFICO DE DESARROLLO. EL HIPOTIROIDISMO INDUCE ASIMISMO CAMBIOS EN LOS NIVELES DE BARK1 Y B-ARRESTINA1 DURANTE EL DESARROLLO POSTNATAL EN CEREBELO, CORTEZA CEREBRAL, HIGADO, PULMON Y CORAZON. EL SIGNO DE ESTOS CAMBIOS ES ESPECIFICO DE TEJIDO Y CONTRIBUIRIAN A LA PERDIDA DE RESPUESTA B-ADRENERGICA, O GANANCIA EN ALGUNOS CASOS COMO EL HIGADO, DESCRITA EN SITUACIONES DE HIPOTIROIDISMO. FINALMENTE, SE HA CARACTERIZADO LA ESTABILIDAD DE LAS PROTEINAS BARK1 Y B-ARRESTINA1, HALLANDO QUE EXPERIMENTAN UNA RAPIDA DEGRADACION LO CUAL POSIBILITA UNA RAPIDA MODULACION DE SUS NIVELES DE EXPRESION. BARK1 ES DEGRADA A TRAVES DE LA PROTEINASA MULTICATALITICA O PROTEASOMA HABIENDO DISTINGUIDO UNA VIA DE DEGRADACION BASAL APARENTEMENTE INDEPENDIENTE DE UBIQUITINACION Y UNA VIA ESTIMULADA POR ACTIVACION DEL SISTEMA DE TRANSDUCCION B-ADRNERGICO. EN AMBOS CASOS SE GENERA UNA PRODUCTO PROTEOLITICO QUE EXHIBE UNA MENOR CAPACIDAD PARA FOSFORILAR RECEPTORES. ASIMISMO, LA PROPIA ACTIVIDAD DE LA QUINASA MODULA LA ESTABILIDAD DE LA PROTEINA, YA QUE UN MUTANTE DOMINANTE NEGATIVO NO SE DEGRADA EN EL PERIODO ESTUDIADO. EN DEFINITIVA LA EXISTENCIA DE MULTIPLES NIVELES DE REGULACION DE BARK1, Y DE B-ARRESTINA1, SUGIEREN QUE ESTAS PROTEINAS SON ESENCIALES EN LA TRANSDUCCION DE SEÑALES, REGULANDO LA CAPACIDAD DE RESPUESTA DE NUMEROSOS RECEPTORES ACOPLADOS A PROTEINAS G IMPLICADOS EN DISTINTOS PROCESOS FISIOLOGICOS (PROLIFERACION, NEUROTRANSMISION, HOMEOSTASIS, METABOLISMO). EL HALLAZGO DE QUE ESTAS PROTEINAS EXHIBEN UN PATRON DE DISTRIBUCION EN EL EMBRION MUY DIFERENTE AL DESCRITO EN EL ADULTO SUGIERE NUEVAS IMPLICACIONES FUNCIONALES.