BIOQUIMICA MOLECULAR, 62

Autor: PEÑARANDA DIAZ CARLOS.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE ESTUDIO LA EXPRESION Y PRODUCCION DEL FACTOR TRANSFORMANTE DEL CRECIMIENTO BETA (TGF-BETA) Y DE SUS RECEPTORES EN TUBULOS PROXIMALES Y CELULAS DE TUBULO PROXIMAL (CTP) DE CORTEZA RENAL DE CONEJO, TRAS LA ELIMINACION DE MASA RENAL MEDIANTE UNINEFRECTOMIA (UNX) LA RELACION PROTEINA/ADN AUMENTO DE FORMA SIGNIFICATIVA EN LOS TUBULOS PROXIMALES, ASI COMO EL CONTENIDO DE PROTEINA Y LA INCORPORACION DE (3H)LEUCINA EN LAS CTP, A LOS 14 DIAS TRAS LA UNX. A ESTE PERIODO DE TIEMPO TRAS LA UNX, SE OBSERVO UN AUMENTO SIGNIFICATIVO DEL TGF-BETA BIOACTIVO EN EL MEDIO CONDICIONADO DE TUBULOS PROXIMALES Y DE LAS CTP, ASOCIADO A UN INCREMENTO DE LA EXPRESION DEL ARNM DE TGF-BETA1. TAMBIEN SE OBSERVO UNA MAYOR TINCION INTRACELULAR CON UN ANTICUERPO MONOCLONAL ANTI-TGF-BETA1,BETA2,BETA3 Y CON UN ANTICUERPO POLICLONAL ANTI-TGF-BETA PANESPECIFICO, EN LOS TUBULOS DE LA CORTEZA RENAL Y EN LAS CTP, A LOS 14 DIAS TRAS LA UNX; COMPARADA CON LA DE ESTOS TUBULOS Y CELULAS PROCEDENTES DE RIÑON DE CONEJOS SOMETIDOS A OPERACION SIMULADA (SNX). EL ANALISIS DE SCATCHARD DE LA UNION DEL TGF-BETA1 A LOS TUBULOS PROXIMALES DE RIÑON CONTROL, PRESENTO DOS TIPOS DE SITIOS DE UNION, CON VALORES DE KD DE 21 Y 208 PM, Y DE BMAX DE 33 Y 104 FMOL/MG DE PROTEINA. A LOS 7 Y 14 DIAS TRAS LA UNX, LOS VALORES DE LA KD NO VARIARON SIGNIFICATIVAMENTE RESPECTO A LOS DE LOS ANIMALES SNX. SIN EMBARGO, LA BMAX AUMENTO EN PARALELO CON EL INCREMENTO DE LA RELACION PROTEINA/ADN OBSERVADO EN LOS TUBULOS PROXIMALES A LOS 14 DIAS TRAS LA UNX. LA UNION COVALENTE DEL (125I)TGF-BETA1 A LOS TUBULOS PROXIMALES UNX O SNX REVELO LA PRESENCIA DE TRES BANDAS DE PROTEINAS, CORRESPONDIENTES A PESOS MOLECULARES APARENTES DE 200, 85, Y 63 KDA. LA INCUBACION DE LAS CTP CON TGF-BETA1 EXOGENO RESULTO ANTIPROLIFERATIVO PARA ESTAS CELULAS, E INDUJO HIPERTROFIA EN PRESENCIA DEL FACTOR DE CRECIMIENTO EPIDERMICO (EGF). ADEMAS, EL AUMENTO DE PROTEINA EN LAS CTP A LOS 14 DIAS TRAS LA UNX, NO SE OBSERVO EN PRESENCIA DEL ANTICUERPO POLICLONAL ANTI-TGF-BETA DURANTE EL CRECIMIENTO CELULAR. ESTOS RESULTADOS INDICAN QUE LA HIPERTROFIA DEL TUBULO PROXIMAL DURANTE EL CRECIMIENTO RENAL COMPENSADOR TRAS LA UNX, SE ASOCIA A LA SOBREEXPRESION Y A UN AUMENTO DE PRODUCCION DE TGF-BETA, Y A UN INCREMENTO DE SUS RECEPTORES PARALELO A LA HIPERTROFIA EN ESTE SEGMENTO DE LA NEFRONA.

Autor: PIFARRE RUBBEI ALEX.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: CIENCIES MORFOLOGIQUES I ODONTOESTOMATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: ORGANOGENESI I ANATOMIA CLINICA APLICADA.

Resumen: En este estudio se han analizado las alteraciones acontecidas en secuencias microsatélite mapadas en los cromosomas 2p y 3p en una serie de 64 pacientes con cáncer de pulmón no microcítico pertenecientes a los estadios quirúrgicos I, II y IIIA. Las secuencias analizadas corresponden a repeticiones del tipo (CA)n y dicho examen se ha realizado mediante reacción en cadena de la polimerasa con el fin de detectar tanto errores de replicación como pérdidas de heterocigosidad en muestras tumorales y normales de los 64 pacientes. Se ha analizado también en dichas muestras la existencia de mutaciones en los genes K-ras y TP53. Todas estas valoraciones a nivel molecular han sido comparadas con las características clínicas y patológicas de los pacientes, así como su relación con el pronóstico de éstos. Un 66% de los pacientes mostró errores de replicación en alguno de los microsatélites analizados, mientras que un 36% mostró pérdidas de heterocigosidad. Los pacientes en estadio I con ER presentaron una supervivencia del 26% frente al 80% de aquellos que no mostraron ER (P=0.005). De estos pacientes, aquéllos que tenían un tamaño tumoral superior a 3 cm (T2) no sobrevivían al cabo de 36 meses (P=0.001). Este estudio muestra que los ER son frecuentes y constituyen un factor pronóstico importante en CP en estadio I.

Autor: PORRES CUBERO AMELIA.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA.

Resumen: LAS TALASEMIAS CONSTITUYEN UN GRUPO HETEROGENEO DE ENFERMEDADES HEREDITARIAS EN LAS QUE EXISTE UN DEFECTO DE SINTESIS DE UNA O MAS CADENAS POLIPEPTIDICAS QUE FORMAN LA HEMOGLOBINA. EN LA ALFA TALASEMIA EL DEFECTO DE SINTESIS CORRESPONDE A LAS CADENAS ALFA, COMPONENTES TANTO DE LA HEMOGLOBINA FETAL (HB F (GAMMA2 ALFA2)) COMO DE LA DEL ADULTO (HBA (ALFA2 BETA2)). LA SINTESIS REDUCIDA DE CADENAS ALFA, TANTO EN LA VIDA FETAL COMO EN LA ADULTA, ORIGINA UN EXCESO DE CADENAS GAMMA O BETA QUE FORMAN TETRAMEROS: HB BART (GAMMA4) Y HB H (BETA4). OBJETIVO: APLICAR LAS TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR AL DIAGNOSTICO DE LA ALFA TALASEMIA. MATERIAL Y METODOS: SE ESTUDIAN 240 SUJETOS, 120 CONTROLES Y 120 TALASEMICOS CLASIFICADOS DE LA SIGUIENTE FORMA: 61 CON GENOTIPO (-1ALFA/ALFA ALFA), 25 CON GENOTIPO (-ALFA/-ALFA), 21 CON RASGO TALASEMICO (--/ALFA ALFA) Y 13 CON ENFERMEDAD DE LA HEMOGLOBINA H (--/-ALFA). EN TODOS ELLOS SE APLICARON TECNICAS DE SOUTHERN BLOTTING DE BIOLOGIA MOLECULAR. RESULTADOS: SE COMPARAN LOS RESULTADOS HEMOCITOMETRICOS, ESTUDIO RETICULOCITARIO, ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA A2 Y F Y DE LA MASA FERRICA, DISTRIBUIDOS EN 5 GRUPOS SEGUN SU GENOTIPO, BUSCANDO DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS EN ALGUN PARAMETRO HEMATOLOGICO. ENCONTRAMOS 2 MUTACIONES, PREVIAMENTE DESCRITAS EN LA LITERATURA MUNDIAL (--CAL) Y (--SEA) Y OTRAS TRES PROPIAS DE LA ETNIA HISPANA (--SPAN), (--CANT) Y (--BR), PERTENECIENTES AL GRUPO DE TALASEMIAS ALFA0. CONCLUSION: SOLO SE LLEGA A UN DIAGNOSTICO DE CERTEZA DE LAS ALFA TALASEMIAS UTILIZANDO TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR.

Autor: POSAS GARRIGA FRANCESC.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LA FOSFORILACION REVERSIBLE DE PROTEINAS ES UNO DE LOS MECANISMOS MAS IMPORTANTES DE CONTROL DE LAS FUNCIONES CELULARES. EL GRADO DE FOSFORILACION DE UNA PROTEINA DEPENDE DE LAS ACTIVIDADES DE FOSFATASAS Y QUINASAS. NUESTRO GRUPO HA ESTADO INTERESADO EN EL ESTUDIO DE LAS PROTEINA FOSFATASAS, EN CONCRETO EN LAS SER/THR FOSFATASAS DE S. CEREVISIAE. EN UN INTENTO POR IDENTIFICAR NUEVAS PROTEINA FOSFATASAS EN LEVADURA SE UTILIZARON TECNICAS DE PCR QUE PERMITIERON AMPLIFICAR UN FRAGMENTO DE ADN QUE CODIFICABA UNA NUEVA PRESUNTA PROTEINA FOSFATASA. UTILIZANDO ESTE FRAGMENTO DE ADN COMO SONDA SE CLONO EL GEN COMPLETO, DENOMINADO PPZ1, EL CUAL CODIFICA UNA PROTEINA DE 692 AMINOACIDOS. ESTA PROTEINA PUEDE DIVIDIRSE EN DOS MITADES CLARAMENTE DIFERENCIADAS; LA MITAD AMINO-TERMINAL RICA EN SERINAS Y UNA MITAD CARBOXI-TERMINAL ESTRUCTURALMENTE RELACIONADA CON LAS PROTEINA FOSFATASA DE TIPO 1. LA CARACTERIZACION "IN VITRO" DE PPZ1 SE LLEVO A CABO MEDIANTE SU EXPRESION EN E. COLI COMO PROTEINA DE FUSION A LA GLUTATION-S-TRANSFERASA. SU POSTERIOR ESTUDIO CONFIRMO QUE A PESAR DE QUE PPZ1 ESTA RELACIONADA CON LAS PROTEINA FOSFATASAS DE TIPO 1, PRESENTA ALGUNAS CARACTERISTICAS ESPECIALES QUE LE PODRIAN VENIR DADAS POR SU MITAD AMINO-TERMINAL. TAMBIEN SE COMPROBO QUE PPZ1 ES FOSFORILABLE "IN VITRO" POR DIFERENTES PROTEINA QUINASAS. MEDIANTE TECNICAS DE PCR SE CLONO UN FRAGMENTO DE UN SEGUNDO GEN RELACIONADO ESTRUCTURALMENTE A PPZ1, LLAMADO PPZ2. EL ANALISIS FUNCIONAL DE LAS PROTEINA FOSFATASAS PPZ SE LLEVO A CABO MEDIANTE TECNICAS DE INTERRUPCION GENICA EN S. CEREVISIAE. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE ESTAS PROTEINAS ESTAN INVOLUCRADAS EN EL MANTENIMIENTO DE LA INTEGRIDAD CELULAR Y SON ELEMENTOS CLAVE EN LA TOLERANCIA A LA SAL EN CELULAS DE LEVADURA. LAS PROTEINA FOSFATASAS PPZ DETERMINAN LA SENSIBILIDAD A LA SAL GRACIAS AL CONTROL QUE EJERCEN SOBRE LA SALIDA DE IONES NA+ DE LA CELULA. ESTE CONTROL SE LOGRA MEDIANTE LA REGULACION TRANSCRIPCIONAL DEL GEN ENA1, QUE CODIFICA UNA ATPASA CLAVE EN LA ELIMINACION DE SODIO.

Autor: POZO BARRIUSO MIGUEL ANGEL DEL.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: La regulación funcional de las interacciones entre los lecucocitos y las células endoteliales es un proceso fundamental dentro de la respuesta inmune e inflamatoria. Las moléculas de adhesión leucocitarias y endoteliales desempeñan un importante papel en la migración leucocitaria hacia los focos de inflamación. Entre ellas, ICAM-3se expresa exclusiva y abudantemente en leucocitos, y su expresión se regula por un mecanismo de rotura proteolítica, existiendo una forma soluble en la sangre. ICAM-3 es un ligando de la integrina LFA-1 que regula las interacciones y la activación de las células T induciendo varios procesos, como adhesión homotípica, coestimulación de linfocitos T activados o no y modulación de la afinidad de las integrinas beta1 y beta2 por sus ligandos endoteliales o de matriz extracelular. ICAM-3 regula la morfología celular induciendo polarización linfocitaria y su redistribución al urópodo o polo posterior. Otra molécula de adhesión de leucocitos, CD43, induce también un aumento de la afinidad de las integrinas y polarización de linfocitos T. Las quimioquinas son las principales reguladoras de la extravasación leucocitaria hacia los tejidos inflamados, aunque no se conoce bien su mecanismo de acción. Las quimioquinas inducen la polarización celular y la redistribución de receptores de adhesión (ICAM-1,-3, CD43 y CD44) al urópodo durante la interacción de los linfocitos con el endotelio y con la matriz extracelular, y este fenómeno representa un mecanismo cooperativo en el reclutamiento linfocitario a los sitios de inflamación.

Autor: PUIG ROQUE OSCAR MIGUEL.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030A BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN SENTADO LAS BASES PARA REALIZAR EL DIAGNOSTICO GENETICA DE LA HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR (FH) EN ESPAÑA. HAN SIDO ANALIZADOS 5 POLIMORFISMOS DE DNA PRESENTES EN EL GEN DEL RECEPTOR DE LDL (LDLR) EN 194 INDIVIDUOS INDEPENDIENTES Y EN LAS FAMILIAS DE 21 DE ELLOS. HEMOS OBTENIDO EL ORDEN DE MAXIMA INFORMATIVIDAD DE MARCADORES EN EL GEN LDLR Y HEMOS DETECTADO UN NUEVO SISTEMA DE TRES ALELOS QUE PROPORCIONA EL MAYOR INDICE DE INFORMATIVIDAD DE LOS MARCADORES DESCRITOS HASTA AHORA EN DIAGNOSTICO DE FH. TAMBIEN HEMOS LOCALIZADO 5 GRANDES REORDENAMIENTOS EN EL GEN LDLR, CAUSANTES DE FH, CARACTERIZANDOSE DOS DE ELLOS A NIVEL DNA. HAN SIDO ANALIZADOS 4 EXONES DEL GEN LDLR, ENCONTRANDOSE DOS NUEVAS MUTACIONES EN EL EXON 8. UNA DE ELLAS, CYS358TYR, HA SIDO EXPRESADA EN CELULAS COS-1 Y LAS CARACTERISTICAS DEL RECEPTOR MUTANTE HAN SIDO ESTUDIADAS MEDIANTE TRANSFERENCIA WESTERN, PULSO Y CAZA CON MET RADIACTIVA Y MEDIDA DE LA ACTIVIDAD. LA PROTEINA MUTANTE TIENE BLOQUEADA SU MADURACION A PARTIR DE SU PRECURSOR, TIENE SU ESTRUCTURA ALTERADA Y TIENE LA CAPACIDAD DE UNION DE LAS LDL REDUCIDA A LA MITAD. ESTO EXPLICARIA EL FENOTIPO DE FH ENCONTRADO EN LOS PORTADORES DE LA MUTACION. CONCLUIMOS QUE EL ANALISIS GENETICO ES MUY UTIL PARA EL DIAGNOSTICO DE FH.

Autor: PUJOL ALTARRIBA ANNA.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR.

Autor: QUIÑONES MATEU MIGUEL EDUARDO .
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: MEDIANTE EL ANALISIS DE 142 AISLADOS DE VIH-1 SE PUDO ESTABLECER LAS RELACIONES FILOGENETICAS DE AISLADOS CONTEMPORANEOS DE VIH-1 EN VENEZUELA Y ESPAÑA. ADICIONALMENTE, ESTE AMPLIO ANALISIS DE SECUENCIAS DETERMINO QUE LA VARIABILIDAD GENETICA DEL VIH-1 ES MUY SIMILAR A LO LARGO DE TODO EL GENOMA. NUESTRO TRABAJO EVIDENCIO LA PRESENCIA DE VIRUS RESISTENTES A INHIBIDORES DE LA RT EN PACIENTES NO SUJETOS A TERAPIA ANTIVIRAL. TAMBIEN EVIDENCIAMOS LA RECOMBINACION INTRASUBTIPICA (SUBTIPO B) ENTRE AISLADOS DE VIH-1 EN VENEZUELA. POR ULTIMO, UN ANALISIS DE SECUENCIAS DE VIRUS PRESENTES EN PACIENTES NO PROGRESORES O PROGRESORES RAPIDOS, DEMOSTRO QUE NO EXISTE UNA RELACION EVIDENTE ENTRE LA VARIABILIDAD GENETICA DE LA REGION LTR Y EL GEN TAT, Y LA PROGRESION A LA ENFERMEDAD.

Autor: RECACHA CASTRO M. ROSARIO.
Año: 1996.
Universidad: POLITECNICA DE CATALUÑA.
Centro de lectura: INGENIEROS INDUSTRIALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: INGENIERIA QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR ESTRUCTURAL.

Resumen: SE HA CRISTALIZADO LA INSULINA CON CINCO PROTAMINAS Y CUATRO PEPTIDOS BASICOS SINTETICOS, RECOGIENDO EL ESPECTRO DE TRES CRISTALES DE INSULINA PROTAMINA Y TRES INSULINA-PEPTIDO BASICO, SIENDO LA RESOLUCION MEJOR OBTENIDA EN EL PRIMER CASO 1.9A, Y EN LOS CRISTALES DE PEPTIDO 2.2A. LOS ESPECTROS PROCESADOS FUERON ESTUDIADOS CON MODELOS CEDIDOS REFINANDO LAS ESTRUCTURAS CON EL PAQUETE XPLOR, ESTUDIANDOSE 5 ESTRUCTURAS. LA INSULINA CON PROTAMINA CRISTALIZA EN EL GRUPO ESPACIAL TETRAGONAL P43212 Y CON PEPTIDO EN EL MONOCLINICO P21, ORGANIZANDOSE LA INSULINA EN HEXAMEROS, PRESENTANDO CADA MOLECULA DE INSULINA UNA FLEXIBILIDAD INHERENTE EN DOS ESTRUCTURAS TETRAGONALES SE OBSERVO DENSIDAD EXTRA QUE PODRIA CORRESPONDER A LA PROTAMINA PERO SOLO EN UNA DE ELLAS SE COLOCO UN FRAGMENTO DE CINCO RESIDUOS.

Autor: REVERT ROS FERNANDO.
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y MEDICA .

Resumen: EL SINDROME GP ES UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE ORGANOESPECIFICA SOLO DESCRITA EN HUMANOS, QUE SE CARACTERIZA POR UNA GLOMERULONEFRITIS RAPIDAMENTE PROGRESIVA FRECUENTEMENTE ACOMPAÑADA DE HEMORRAGIA PULMONAR. EL ATAQUE INMUNOLOGICO SE LLEVA A CABO MEDIANTE ANTICUERPOS CIRCULANTES DIRIGIDOS CONTRA EL DOMINIO CARBOXITERMINAL, NO COLAGENOSO (NC1), DE LA CADENA ALFA 3 DEL COLAGENO IV, TAMBIEN LLAMADO ANTIGENO GP. LOS HALLAZGOS QUE SE PRESENTAN EN ESTA TESIS SUGIEREN QUE LA FOSFORILACION DEL EXTREMO AMINO DEL ANTIGENO GP HUMANO POR PROTEINA QUINASAS TIPO A ES UNA FUNCION REGULADA POR LA DIVERSIDAD ESTRUCTURAL QUE PRESENTA EL PROPIO ANTIGENO Y ES CENTRAL EN SU BIOLOGIA, PUDIENDO DESEMPEÑAR UN DESTACADO PAPEL ETIOPATOGENICO.

Autor: RIESCO GARCIA DE LA TORRE AMPARO .
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ENDOTELINA-1 (ET-1) Y EL OXIDO NITRICO (NO) SON DOS AGENTES VASOACTIVOS LIBERADOS POR EL ENDOTELIO CON UN PAPEL CONOCIDO EN EL MANTENIMIENTO DEL TONO Y LA ESTRUCTURA DE LA PARED VASCULAR. EN ESTA TESIS ESTUDIAMOS EL PAPEL DE ESTOS AGENTES EN LA REGULACION DE LA ACTIVIDAD DE LOS NEUTROFILOS HUMANOS Y EN LA INTERACCION DE ESTOS CON EL ENDOTELIO VASCULAR. LA ET-1 ES CAPAZ DE ACTIVAR LOS NEUTROFILOS INDUCIENDO UN AUMENTO EN EL CALCIO CITOSOLICO ((CA2+)I), POLIMERIZACION DE LOS FILAMENTOS DE ACTINA Y LIBERACION DE BETA-GLUCURONIDASA, PERO NO PRODUCE LIBERACION DE ANION SUPEROXIDO (O- 2). LA ACTIVACION DE LOS NEUTROFILOS POR ET-1 ES REGULADA POR EL SISTEMA NO/GMPC YA QUE EL AMINOACIDO DADOR DE NO, L-ARGININA, Y EL 8-BR-GMPC INHIBEN EL EFECTO DE LA ET-1 EN EL AUMENTO DE (CA2+)I. ESTE EFECTO INHIBITORIO ESTA MEDIADO POR LA FORMACION DE NO. LA ET-1 INDUCE EL METABOLISMO DE L-ARGININA A L-CITRULINA Y NO Y COMO CONSECUENCIA GMPC A TRAVES DE UN MECANISMO DEPENDIENTE DE LA DISPONIBILIDAD DE L-ARGININA EN EL NEUTROFILO. LA ET-1, EN CONDICIONES BASALES NO ESTIMULA EL TRANSPORTADOR DE L-ARGININA DEL NEUTROFILO QUE TIENE DOS COMPONENTES UNO DEPENDIENTE DE NA+ Y OTRO INDEPENDIENTE, SINO QUE SOLO SE ESTIMULA POR ET-1 EN CONDICIONES EN LAS QUE ESTA BLOQUEADA LA FORMACION DE NO MEDIANTE UN INHIBIDOR DE LA SINTESIS DE NO, L-NMMA(L-NITRO-MONOMETIL-L-ARGININA); REVIRTIENDOSE EL EFECTO POR 8-BR-GMPC, LO QUE SUGIERE QUE LA ET-1 Y EL SISTEMA NO/GMPC EN EL NEUTROFILO INTERACCIONAN MEDIANTE UN MECANISMO DE RETROREGULACION NEGATIVO COMO YA HA SIDO DEMOSTRADO EN OTROS TEJIDOS. LA ET-1 INDUCE LA ADHESION DE NEUTROFILOS A CELULAS ENDOTELIALES EN CULTIVO MEDIANTE LA EXPRESION DE MOLECULAS DE ADHESION DE LA FAMILIA DE LAS BETA2-INTEGRINAS EN LA SUPERFICIE DEL NEUTROFILO. ESTE EFECTO TAMBIEN SE OBSERVO EN CORAZONES AISLADOS DE CONEJO Y EN EXPERIMENTOS IN VIVO MEDIANTE LA INFUSION DE ET-1 A CORAZONES DE CONEJO. EN CONCLUSION, LA ET-1 ES CAPAZ DE ACTIVAR LOS NEUTROFILOS HUMANOS, ESTA ACTIVACION ES REGULADA POR EL SISTEMA NO/GMPC. EL EFECTO DE LA ET-1 EN LOS NEUTROFILOS ESTA MAS RELACIONADO CON LOS EFECTOS ADHESIVOS O DE ACTIVACION PARCIAL DEL NEUTROFILO, SIN LLEGAR A PRODUCIR UNA ACTIVACION MASIVA INCLUYENDO "RESPIRATORY BURST" ("ESTALLIDO RESPIRATORIO") Y PRODUCCION DE RADICALES LIBRES DE OXIGENO. POR OTRA PARTE ESTOS HALLAZGOS TIENEN UNA POTENCIAL IMPORTANCIA EN LOS PROCESOS FISIOPATOLOGICOS EN LOS QUE SE ENCUENTRAN IMPLICADOS TANTO LOS NEUTROFILOS COMO NIVELES ELEVADOS DE ET-1 EN PLASMA, COMO POR EJEMPLO LOS PROCESOS DE ISQUEMIA-REPERFUSION DE DIVERSOS ORGANOS.

Autor: RIOS GARCIA GABINO .
Año: 1996.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 0-30-A (BIOLOGIA MOLECULAR).

Resumen: APROXIMACION AL FUNCIONAMIENTO MOLECULAR DE LA PROTEINA CODIFICADA POR EL GEN HAL1 DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE Y SU RELACION CON TOLERANCIA A NACL Y LICL EN LEVADURA. LA SOBREEXPRESION DE HAL1 DA LUGAR A UN DOBLE EFECTO, SOBRE EL CONTENIDO DE SODIO Y LITIO POR UN LADO Y SOBRE EL DE POTASIO POR OTRO EN CELULAS TRATADAS CON SAL. EL PRIMER EFECTO ES MEDIADO POR LA NA+-ATPASA CODIFICADA POR ENA1, CUYA EXPRESION TRANSCRIPCIONAL ES DEPENDIENTE DE LA DOSIS GENICA DE HAL1. NO SE HAN HALLADO GENES HOMOLOGOS A HAL1 EN PLANTAS, SI BIEN LA EXPRESION HETEROLOGA DEL GEN EN ALGUNAS PLANTAS, REALIZADA POR EL GRUPO DE VICENTE MORENO Y LUIS ROIG DE CULTIVOS CELULARES, DA LUGAR A UN LIGERO INCREMENTO DE TOLERANCIA. FINALMENTE SE HAN OBTENIDO Y CARACTERIZADO PARCIALMENTE NUEVOS GENES HAL QUE OFRECEN TOLERANCIA A SAL EN LEVADURA MEDIANTE SOBREEXPRESION.

Autor: RIVERA SABIO EUSEBI.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA BASICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN REALIZADO DIFERENTES ESTUDIOS ENCAMINADOS A PROFUNDIZAR EN EL ESTUDIO DE LA REGULACION SOS EN EL GRUPO ALFA DE LAS PROTEOBACTERIAS Y A DEFINIR EL MOTIVO SOS PRESENTE EN RHODOBACTER SPHAEROIDES. SE PROCEDIO AL AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DEL GEN RECA DE RHODOBACTER CAPSULATUS. EL ANALISIS COMPARATIVO DE SU ZONA PROMOTORA Y LOS RESULTADOS DE REGULACION INTERESPECIFICA DEMOSTRARON LA EXISTENCIA DE, COMO MINIMO, 3 CAJAS SOS DIFERENTES DENTRO DEL GRUPO ALFA. UNA DE ELLAS SERIA LA COMUN A LAS RHIZOBIACEAS Y LAS OTRAS DOS SERIAN LAS DE R. SPHAEROIDES Y LA DE R. CAPSULATUS. EL ESTUDIO DIRECTO DE LA ZONA PROMOTORA DEL GEN RECA DE R. SPHAEROIDES NOS HA PERMITIDO IDENTIFICAR EL MOTIVO GTTC-N35-GAAC COMO LA POSIBLE SECUENCIA SOS DE ESTE MICROORGANISMO. SE CONFIRMO LA PRESENCIA DE ESTE MOTIVO EN EL GEN UVRA DE R. SPHAEROIDES, COMPROBANDOSE ASIMISMO SU INDUCIBILIDAD FRENTE A LA RADIACION UV. ADEMAS, EL MOTIVO PRESENTE EN LA ZONA PROMOTORA DEL GEN UVRA ERA CAPAZ DE COMPETIR CON EL HALLADO EN EL GEN RECA POR LA UNION DE LA PROTEINA REPRESORA, POR LO QUE SE PUEDE DEDUCIR QUE AMBOS GENES ESTAN REGULADOS NEGATIVAMENTE POR EL MISMO REPRESOR. DURANTE EL DESARROLLO DE ESTE TRABAJO SE ESTUDIO EL SISTEMA DE REPARACION POR ESCISION DE PSEUDOMONAS AERUGINOSA. SE OBSERVO QUE NI EL GEN UVRA NI EL UVRB PRESENTAN EN SUS ZONAS PROMOTORAS UNA SECUENCIA SOS COMO LA DE E. COLI, Y QUE LA EXPRESION DE AMBOS NO SE INDUCE COMO RESPUESTA A LESIONES EN EL DNA. POR LO TANTO, SE CONCLUYE QUE UN PROCESO TAN IMPORTANTE EN LA REPARACION DEL DNA COMO ES EL LLEVADO A CABO POR LA ENDONUCLEASA UVRABC, NO FORMA PARTE DEL SISTEMA SOS DE P. AERUGINOSA, A DIFERENCIA DE LO QUE OCURRE TANTO EN E. COLI COMO EN BACILLUS SUBTILIS.

Autor: ROCA PUIG RAMON.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.

Resumen: En el presente estudio se ha utilizado z. mays como modelo para la descripción de los patrones de expresión de algunos mRUAS representativos de diferentes programas de expresión génica durante el desarrollo. Los resultados obtenidos han permitido la clasificación de los marcadores disponibles en función de su patron de expresión "in situ". 1.- Relativo a cDNAS relacionados con funciones generales de la célula como una ACP, una GAPC o una CCAP-AP17. 2.- Incluye genes que se expresan con elevadas tasas de proliferación y división celular como una VDAC, un EFI-K y dos PRPK. 3.- Compuesto por genes inducidos por ABA durante la Embriogénesis tardia. 4.- Lo forman genes que codifican para proteinas de reserva en el endospermo. 5.- Son genes específicos de tipo celular. Finalmente se han analizado los patrones de expresión de marcadores representativos de diferentes procesos activos durante el desarrollo en embriones bloqueados en estadios anteriores a la organogenesis para observar las alteraciones producidas por la mutación.

Autor: RODES SOLDEVILA BERTA.
Año: 1996.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: La sífilis es una enfermedad de transmisión sexual causada por la bacteria Treponema pallidum subsp. pallidum. Este trabajo describe la construcción de una biblioteca genómica del T. pallidum (Nichols) y su uso en la identificación de nuevos componentes proteicos de este patógeno. Varios genes del T. pallidum han sido identificados. Entre ellos: 1) un gen que codifica para una proteina acídica que presenta una serie de repeticiones de aminoácidos, 2) un gen que codifica para una posible alanina racemasa, 3) un gen homólogo a la familia nifs, 4) un gen homólogo a precursores Octaprenil difosfato sintasa, y 5) un gen que codifica para una DNA polimerasa I. La DNA polimerasa I de T. pallidum identificada aquí presenta dos características diferenciales con respecto a las otras DNA polimerasa I bacterianas conocidas. Estas son: dos secuencias adicionales de 30 aminoácidos y un alto contenido en cisteinas, un 2,4% del total de aminoácidos. Además, también se describe el desarrollo de un nuevo método de PCR para sífilis.

Autor: RODRIGUEZ BELMONTE M. ESTHER.
Año: 1996.
Universidad: A CORUÑA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA AMBIENTAL.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA SECUENCIADO UNA REGION DE 5KB DE DNA DEL CROMOSOMA SEIS DE LA LEVADURA KLUYVEROMYCES LACTIS, EN LA QUE SE HAN IDENTIFICADO DOS PAUTAS DE LECTURA ABIERTA, LAS CUALES SE HAN SUBCLONADO Y SE HA REALIZADO SU ANALISIS FUNCIONAL. LA PREDICCION DE FUNCION BASADA EN HOMOLOGIAS RESPECTO A SECUENCIAS RECOPILADAS EN LAS BASES DE DATOS PUSO DE MANIFIESTO QUE UNO DE LOS GENES (KLPDCB), DE BAJO NIVEL DE EXPRESION, POSEE UNA GRAN SIMILITUD CON PIRUVATO DESCARBOXILASAS DE DISTINTOS ORIGENES, MIENTRAS QUE EL OTRO (KLGSK-3) PERTENECE A UNA FAMILIA DE PROTEIN-QUINASAS. SE HAN INTERRUMPIDO AMBOS GENES SIENDO LOS FENOTIPOS MAS CARACTERISTICOS MOSTRADOS POR LOS MUTANTES NULOS: EN EL PRIMER CASO, DISMINUCION DRASTICA DEL CRECIMIENTO EN MEDIOS CARENTES DE TIAMINA, EN EL SEGUNDO, AUSENCIA DE CRECIMIENTO EN GLUCOSA Y ETANOL A 37 GRADOS C. Y DISMINUCION DEL ALMACENAMIENTO DE GLUCOGENO. TAMBIEN SE HAN REALIZADO ANALISIS DE LA SECUENCIA DE LOS PROMOTORES ASI COMO ANALISIS DE EXPRESION MEDIANTE NORTHERN-BLOT, RT-PCR Y FUSIONES A GENES MARCADORES, TODO ELLO ACOMPAÑADO DE UNA EXHAUSTIVA REVISION BIBLIOGRAFICA.

Autor: RODRIGUEZ GABRIEL MIGUEL ANGEL.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA PROTEINA RIBOSOMICA P0 DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE ES UNO DE LOS COMPONENTES DEL TALLO RIBOSOMICO, Y ES EL UNICO QUE HA DEMOSTRADO SER ESENCIAL PARA LA VIABILIDAD CELULAR. EN EL PRESENTE TRABAJO SE PRESENTAN DIFERENTES ESTUDIOS EN LOS QUE SE PROFUNDIZA EN EL CONOCIMIENTO DE LAS FUNCIONES DE ESTA PROTEINA ASI COMO EN LOS DOMINIOS ESTRUCTURALES DE LA MISMA QUE LAS LLEVAN A CABO. ENTRE OTROS RESULTADOS, SE DEMUESTRA QUE ESTA PROTEINA SE FOSFORILA EN LA POSICION 302 DE SU SECUENCIA AMINOACIDICA, Y QUE ESTA FOSFORILACION AFECTA A LA RESISTENCIA CELULAR A ALTAS TEMPERATURAS O CONDICIONES SALINAS. TAMBIEN SE HAN PODIDO IDENTIFICAR ALGUNOS DE LOS DOMINIOS IMPORTANTES PARA LA FUNCIONALIDAD DE ESTA PROTEINA, AL COMPLEMENTAR LA FALTA DE LA PROTEINA P0 ENDOGENA CON PROTEINAS P0 DE OTROS ORGANISMOS Y COMPROBAR EL FENOTIPO OBTENIDO.

Autor: RODRIGUEZ PASCUAL FERNANDO.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: LAS CELULAS CROMAFINES DE LA MEDULA ADRENAL CONSTITUYEN UNA PREPARACION BIOLOGICA DE GRAN UTILIDAD COMO MODELO NEUROSECRETOR EN EL QUE REALIZAR CUALQUIER TIPO DE ESTUDIO BIOQUIMICO COMO LA MODULACION DE LA SECRECION DE CATECOLAMINAS POR LA RUTA DE 2 MENSAJEROS DEL OXIDO NITRICO / GMP CICLICO.ESTE TRABAJO DE INVESTIGACION DEMUESTRA LA EXISTENCIA EN ESTAS CELULAS DE LOS ELEMENTOS QUE CONSTITUYEN ESTA VIA DE SEÑALIZACION INTRACELULAR: LAS ENZIMAS OXIDO NITRICO SINTASA, GUANILATO CICLASA SOLUBLE Y PROTEINA QUINASA DEPENDIENTE DE GMPC.ESTA RUTA DE 2 MENSAJEROS ES RESPONSABLE DE UNA MODULACION NEGATIVA DE LA RESPUESTA SECRETORA DE CATECOLAMINAS, ADRENALINA Y NORADRENALINA, DICHA MODULACION SE BASA EN UNA PRODUCCION DE GMPC, ACTIVACION DE LA PROTEINA QUINASA DEPENDIENTE DE GMPC Y POSTERIOR REDUCCION DE LA ENTRADA DE CALCIO ASOCIADA AL PROCESO SECRETOR.

Autor: ROMERO ARANCE IGNACIO.
Año: 1996.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL TRABAJO REALIZADO EN ESTA TESIS HA PERMITIDO CARACTERIZAR CLONES CDNA Y/O GENOMICOS CORRESPONDIENTES A 78 GENES R2R3-MYB DISTINTOS EN ARABIDOPSIS THALIANA Y SE HA ESTIMADO QUE EXISTEN APROXIMADAMENTE 100 GENES DE ESTA FAMILIA EN DICHA ESPECIE VEGETAL. ESTE NUMERO DE GENES DEFINE LA FAMILIA DE GENES REGULADORES DE MAYOR TAMAÑO HASTA AHORA CONOCIDA EN PLANTAS, QUE REPRESENTA UN 0,2-0,6% DEL TOTAL DE LOS GENES DE ARABIDOPSIS THALIANA. ASIMISMO, SE HA ESTUDIADO LAS PROPIEDADES DE UNION A DNA DE VARIAS PROTEINAS CODIFICADAS POR ESTE TIPO DE GENES HABIENDO CONSTATADO EL CONSIDERABLE PARECIDO ENTRE PROTEINAS R2R3-MYB EN CUANTO A LA ESPECIFICIDAD DE UNION A DNA. POR ULTIMO, SE HAN ENSAYADO DOS ESTRATEGIAS PARA INHIBIR LA ACTIVIDAD DE VARIOS GENES R2R3-MYB A LA VEZ, SI BIEN LOS RESULTADOS HAN SIDO NEGATIVOS. NO OBSTANTE LOS GENES IDENTIFICADOS EN ESTA TESIS ESTAN PERMITIENDO EL USO DE TECNICAS DE GENETICA INVERSA PARA LA IDENTIFICACION DE MUTANTES DE GENES PERTENECIENTES A ESTA FAMILIA QUE PODRAN ACLARAR MAS SOBRE LA DIVERSIDAD FUNCIONAL Y LAS RELACIONES ENTRE LOS DISTINTOS MIEMBROS DE ESTA FAMILIA.

Autor: ROMERO PAREDES JULIAN.
Año: 1996.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LOS CANNABINOIDES SON UN GRUPO DE SUSTANCIAS QUIMICAS PRESENTES EN LA PLANTA CANNABIS SATIVA RESPONSABLES DE LOS EFECTOS PSICOTROPICOS DE LOS PREPARADOS DE ESTA PLANTA (MARIHUANA, HACHIS). UNO DE LOS PRINCIPALES EFECTOS DE ESTOS COMPUESTOS ES EL DE ALTERAR EL PATRON DE ACTIVIDAD MOTORA EN HUMANOS Y EN ANIMALES DE EXPERIMENTACION CUANDO SON ADMINISTRADOS EN FORMA EXOGENA, PROBABLEMENTE ACTUANDO A TRAVES DE LOS RECEPTORES PARA ESTAS SUSTANCIAS PRESENTES EN AREAS EXTRAPIRAMIDALES DEL CEREBRO (ESTRIADO, GLOBO PALIDO, SUSTANCIA NIGRA, ETC). EL RECIENTE AISLAMIENTO DEL LIGANDO ENDOGENO DE ESTOS RECEPTORES PARA CANNABINOIDES HACE NECESARIO EL AMPLIAR LOS DATOS QUE HASTA EL MOMENTO EXISTEN ACERCA DE LOS EFECTOS MOTORES DE LOS CANNABIONOIDES Y DE LA PARTICIPACION DE SUS RECEPTORES SITUADOS EN AREAS EXTRAPIRAMIDALES EN PROCESOS COMO EL ENVEJECIMIENTO Y EN EL DESARROLLO DE TOLERANCIA A ESTOS COMPUESTOS TRAS SU ADMINISTRACION CRONICA. EL TRABAJO DE INVESTIGACION PRESENTADO ABORDA ESTOS ASPECTOS DESDE DISTINTOS PUNTOS DE VISTA, COMPLEMENTARIOS ENTRE SI: COMPORTAMENTAL, NEUROQUIMICA Y MOLECULAR.