BIOQUIMICA MOLECULAR, 65

Autor: ANDRES HERNANDEZ GERMAN.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA CARACTERIZADO DOS PROTEINAS DE 220 KDA CODIFICADAS POR EL VPPA: LA FOSFOPROTEINA HEXAMERICA P32 Y LA POLIPROTEINA PP220. LA POLIPROTEINA PP220 SE EXPRESA EN LAS FACTORIAS VIRALES E INTERACCIONA CON LA CARA PERIPLASMICA DEL RETICULO ENDOPLASMICO, SIENDO ESTE EL COMPARTIMENTO SUBCELULAR QUE PROPORCIONA AL VIRUS SU ENVUELTA INTERNA. LAS PROTEINAS ESTRUCTURALES DERIVADAS DEL PRECURSOR PP220 SON COMPONENTES INTERNOS DE LA PARTICULA VIRAL, CONSTITUYENDO EL DENOMINADO "DOMINIO ENTERMEDIO". UN DOMINIO ESTRUCTURAL QUE CUYA CARACTERIZACION HA PERMITIDO PROPONER UN NUEVO MODELO ESTRUCTURAL PARA EL VPPA. SE HA DEMOSTRADO QUE EL DOMINIO INTERMEDIO ES CAPAZ DE ASOCIAR CISTERNAS ADYACENTES DEL RETICULO ENDOPLASMICO, FORMADO LAS DENOMINADAS "CREMALLERAS VIRALES". ESTE FENOMENO PUEDE SER CLAVE EN EL ENSAMBLAJE DEL VPPA. SE HA IDENTIFICADO Y CARACTERIZADO LA PROTEINASA RESPONSABLE DEL PROCESAMIENTO DE POLIPROTEINAS DEL VPPA "IN VITRO". ESTA PROTEINASA ES DEL TIPO CATEPSINA L.

Autor: AÑIBARRO OLIVERI CAROLINA.
Año: 1995.
Universidad: CANTABRIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA IDENTIFICADO EL PROMOTOR DE APO AIV DE CYNOMOLGUS COMPRENDIDO EN LA REGION DE -300PB. LA SIMILITUD DE ESTE PROMOTOR Y EL HUMANO ES DEL 88%. SE BUSCARON NUEVOS POLIMORFISMOS EN LA REGIONPROMOTORA Y EN LA CODIFICANTE DEL GEN DE APO AIV DE UN GRUPO DE 50 INDIVIDUOS. SE IDENTIFICARON LOS POLIMORFISMOS HPHI, TC2005 Y DDEI CON FRECUENCIAS ALTAS. BUSCANDO ASOCIACIONES ENTRE RESPUESTA A LA DIETA Y LOS POLIMORFISMOS DE LA AGRUPACION GENICA APO AI/CIII/AIV, SE RELACIONARON HPHI Y TC2005 CON AUMENTO EN LOS NIVELES DE HDL-C, PVUII (A) CON DESCENSO, EN LOS NIVELES DE LDL-C Y G/A CON UN DESCENSO EN LOS NIVELES DE LDL-C. EXISTE UN DESEQUILIBRIO DE LIGAMENTO ENTRE LOS POLIMORFISMOS DE LA REGION INTERGENICA APO CIII/AIV Y LOS DE LA REGION CODIFICANTE DE APO AIV. EN LA REGION INTERGENICA SE ENCUENTRAN DOS INTESIFICADORES QUE SE HA VISTO QUE NO SON LOS RESPONSABLES DE LA ENFERMEDAD (HIPOALFALIPOPROTEINEMIA AISLADA) DE LA FAMILIA EN LA QUE SE HAN ESTUDIADO. PARECE HABER OTROS REGIONES DE CONTROL, AUN SIN IDENTIFICAR EN LA REGION INTERGENICA.

Autor: ARRECUBIETA LARRAÑAGA CARLOS.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA III PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA .

Resumen: SE HA CLONADO Y SECUENCIADO 14056 BP DE DNA DE S. PNEUMONIAE HABIENDOSE IDENTIFICADO LOS GENES IMPLICADOS EN LA SINTESIS DEL POLISACARIDO CAPSULAR DE SEROTIPO 3 DE NEUMOCOCO, Y LAS REGIONES ADYACENTES. SE HA DEMOSTRADO QUE ESTOS GENES SE AGRUPAN FORMANDO UNA UNIDAD DE TRANSCRIPCION, DENOMINADA OPERON CAP3, QUE CONSTA DE TRES GENES, AUNQUE UNICAMENTE LOS DOS PRIMEROS, CAP3A Y CAP3B, SON ABSOLUTAMENTE NECESARIOS PARA LA BIOSINTESIS CAPSULAR MIENTRAS QUE EL TERCERO DE ELLOS, CAP3C, AUNQUE NO ES IMPRESCINDIBLE, INTERVIENE TAMBIEN EN LOS PROCESOS QUE CONDUCEN A LA FORMACION DE LA CAPSULA. ASIMISMO, SE HA DETERMINADO LA POSICION QUE OCUPAN LOS GENES CAPSULARES EN EL CROMOSOMA DE NEUMOCOCO Y, POR ULTIMO, SE HA CARACTERIZADO LA FUNCION QUE DESEMPEÑA CADA UNA DE LAS PROTEINAS CODIFICADAS POR ESTOS GENES DURANTE LA BIOSINTESIS CAPSULAR.

Autor: ARRESE PENACHO MARTA.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA NUCLEOPROTEINA (NP) DEL VIRUS DE LA GRIPE ES UNA PROTEINA DE 498 AMINOACIDOS QUE SE ENCUENTRA ENCAPSIDANDO CADA UNO DE LOS 8 SEGMENTOS DE RNA DE BANDA SIMPLE Y POLARIDAD NEGATIVA QUE CONSTITUYE EL GENOMA VIRAL. LA NP ES IMPRESCINDIBLE PARA LOS PROCESOS DE REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL RNA VIRAL Y ES LA UNICA PROTEINA DEL VIRUS QUE ESTA FOSFORILADA EN TODAS LAS CEPAS ESTUDIADAS. EL OBJETO DE ESTA TESIS CONSISTIO EN PRIMER LUGAR EN MAPEAR LOS SITIOS DE FOSFORILACION DE LA NP, Y EN SEGUNDO LUGAR EN AVERIGUAR LA IMPORTANCIA DE ESTA MODIFICACION POSTTRADUCCIONAL EN LOS PROCESOS DE REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL GENOMA DEL VIRUS. PARA LA CONSECUCION DEL PRIMER OBJETIVO, SE PUSO A PUNTO UN METODO DE PURIFICACION DE LA PROTEINA MARCADA CON (32P)-ORTOFOSFATO A PARTIR DE EXTRACTOS DE CELULAS INFECTADAS, Y UN METODO DE HIDROLISIS DE LOS ENLACES ASPARTICO.PROLINA. LOS FRAGMENTOS RESULTANTES DE DICHA HIDROLISIS SE LOCALIZARON EN LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE LA PROTEINA MEDIANTE ESTIMACION DE SU PESO MOLECULAR, REDIGESTION DE LOS MISMOS Y OBTENCION DE ANTISUEROS QUE RECONOCEN REGIONES ESPECIFICOS DE LA PROTEINA. SE IDENTIFICARON DOS DOMINIOS FOSFORILADOS, QUE CORRESPONDEN A LOS EXTREMOS AMINO (AMINOACIDOS 1-88) Y CARBOXILO TERMINAL (AMINOACIDOS 303-498) DE LA NP. EL EXTREMO AMINO TERMINAL CONTIENE EL 70% DE LA RADIACTIVIDAD INCORPORADA EN LA NP MARCADA CON (32P)-ORTOFOSFATO. LA IDENTIFICACION DEL RESIDUO/S MAYORITARIAMENTE FOSFORILADO/S EN LOS PRIMEROS 88 AMINOACIDOS, SE REALIZO MEDIANTE EL ANALISIS DE LA FOSFORILACION DE MUTANTES PUNTUALES, EN LOS QUE SE HABIA SUSTITUIDO INDIVIDUALMENTE CADA UNA DE LAS 7 SERINAS EXISTENTES POR RESIDUOS DE ALANINA. EL MUTANTE PUNTUAL SERINA 3-ALANINA CONTIENE UNICAMENTE EL 24% DE LA RADIACTIVIDAD RESPECTO A LA NP WT MARCADA CON (32P)-ORTOFOSFATO. PARA LA CONSECUCION DEL SEGUNDO OBJETIVO, CADA UNO DE LOS MUTANTES SE INCLUYO EN UN ENSAYO DE REPLICACION Y TRANSCRIPCION DEL GENOMA VIRAL IN VIVO, NO ENCONTRANDOSE CORRELACION ENTRE EL GRADO DE FOSFORILACION Y SU ACTIVIDAD EN EL ENSAYO.

Autor: ARTERO ALLEPUZ RUBEN DARIO.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA. UNIVERSIDAD DE VALENCIA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA MOLECULAR Y EVOLUTIVA .

Resumen: LA TECNICA DE ENHANCER-TRAP PERMITE PONER DE MANIFIESTO GENES NUEVOS EN DROSOPHILA EN BASE A SU PATRON DE EXPRESION ESPACIAL, SIN NECESIDAD DE UN FENOTIPO MUTANTE. SE HA UTILIZADO ESTA APROXIMACION PARA IDENTIFICAR UN GEN NUEVO, EN LA POSICION CITOGENETICA 54A, EL CUAL, DE ACUERDO CON SU PATRON DE EXPRESION PODRIA PARTICIPAR, ENTRE OTROS, EN LA DIFERENCIACION TERMINAL DE LOS MIOBLASTOS EN EL EMBRION DE DROSOPHILA Y EN LA ESPECIFICACION DE LOS FOTORECEPTORES DE LOS OMATIDIOS. SU CARACTERIZACION MOLECULAR PRELIMINAR MUESTRA QUE SE TRATA DE UN GEN MUY COMPLEJO, QUE SE EXTIENDE EN MAS DE 100 KB DE DNA GENOMICO Y CUYOS CDNAS ESTAN SUJETOS A MADURACION ALTERNATIVA. MUESTRA DE ESTA COMPLEJIDAD ES QUE EN UN NORTHERN BLOT, UNA SONDA PROCEDENTE DE LA REGION DE LA INSERCION DEL TRANSPOSON, DETECTA TRANSCRITOS DE 3 KB, 4.6 KB Y 7 KB. LA CARACTERIZACION DE UNO DE LOS CDNAS HA MOSTRADO LA EXISTENCIA DE UN INTRON DE 84 KB, EL MAS GRANDE DESCRITO HASTA ESTE MOMENTO EN DROSOPHILA Y CON POSIBLES IMPLICACIONES EN LA REGULACION DE LA ACTIVIDAD DEL GEN. FINALMENTE, MEDIANTE HIBRIDACION IN SITU EN CROMOSOMAS POLETENICOS SE HA CONSEGUIDO ORIENTAR LA UNIDAD DE TRANSCRIPCION EN EL CROMOSOMA.

Autor: AYMERICH CALVET M. TERESA.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: PROGRAMA BASE DE BIOTECNOLOGIA 097.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN AISLADO, IDENTIFICADO Y PURIFICADO SUSTANCIAS ANTAGONISTAS TIPO BACTERIOCINA PROCEDENTES DE DIVERSAS BACTERIAS LACTICAS. LAS TRES BACTERIOCINAS PURIFICADAS HAN SIDO DENOMINADAS SAKACINA K, PLANTARICINA D Y ENTEROCINA A. LA ENTEROCINA A ES UNA NUEVA BACTERIOCINA, ANTERIORMENTE NO DESCRITA, ASOCIADA A LA ESPECIE ENTEROCOCCUS FAECIUM. TODAS SON PEQUEÑOS PEPTIDOS DE NATURALEZA HIDROFOBICA, TERMOESTABLES. SU ESPECTRO DE ACTIVIDAD INCLUYE DIVERSOS PATOGENOS ALIMENTARIOS. LOS DETERMINANTES GENETICOS DE LAS MISMAS SE SITUAN EN EL CROMOSOMA PARA LA PLANTARICINA D Y LA ENTEROCINA A Y EN UN PLASMIDO DE 60 KB PARA LA SAKACINA K. EL ESTUDIO GENETICO DE LA ENTEROCINA A HA ESTABLECIDO QUE ESTA ES PREVIAMENTE SINTETIZADA COMO UN PREPEPTIDO DE 65 AMINOACIDOS, CON UNA SECUENCIA LIDER DE 18. EL PEPTIDO ACTIVO CONSTA DE 47 AMINOACIDOS. ADEMAS MUESTRA LA POSIBILIDAD DE UN SEGUNDO MARCO DE LECTURA RELACIONADO POSIBLEMENTE CON LA INMUNIDAD. POR ULTIMO, DIFERENTES ESPECIES DE LACTOBACILOS CARNICOS HAN SIDO TRANSFORMADOS POR ELECTROPORACION Y DIFERENTES PARAMETROS QUE AFECTAN A LA EFICIENCIA DE LAS MISMA VALORADOS.

Autor: BALLESTEROS JAREÑO M. LUISA.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: PARA ESTUDIAR LAS BASES MOLECULARES DEL TROPISMO DEL VIRUS DE LA GASTROENTERITIS PORCINA TRANSMISBLE (VGPT) SE GENERO UNA COLECCION DE RECOMBINANTES ENTRE UNA CEPA ENTERICA Y UNA RESPIRATORIA. LA FRECUENCIA DE AISLAMIENTO FUE DE 10-9 RECOMBINANTES POR NUCLEOTIDO, MUY INFERIOR A LA DEL CORONAVIRUS MURINO. LA FRECUENCIA DE AISLAMIENTO FUE 3.5 VECES SUPERIOR EN EL EXTREMO 5' DEL GEN S QUE EN OTRAS AREAS DEL GENOMA. LOS RECOMBINANTES SE CLASIFICARON EN 3 GRUPOS DEPENDIENDO DE LA LOCALIZACION DEL SOBRECRUZAMIENTO. SE ANALIZO EL TROPISMO DE LOS RECOMBINANTES, LOS DE LOS BRUPOS 1 Y 2 TENIAN TROPISMO ENTERICO Y RESPIRATORIO, RESPECTIVAMENTE. LOS VIRUS DE AMBOS GRUPOS SOLO SE DIFERENCIABAN EN UN CAMBIO DE NUCLEOTIDO ESPECIFICO DE LOS AISLADOS RESPIRATORIOS, QUE SE LOCALIZABA EN LA POSICION 655. SE CONCLUYO QUE ESTE UNICO CAMBIO, QUE PRODUCIA UNA SUSTITUCION ALANINA POR SERINA EN EL AMINOACIDO 219 DE LA PROTEINA S, ERA EL RESPONSABLE DE LA PERDIDA DEL TROPISMO ENTERICO EN EL GRUPO DE VIRUS RELACIONADO CON EL PUR46. LOS DATOS DISPONIBLES INDICAN QUE PARA QUE EL VGPT INFECTE EL TRACTO ENTERICO SE NECESITAN 2 DOMINIOS DIFERENTES DE LA PROTEINA S, QUE SE LOCALIZAN ENTRE LOS AMINOACIDOS 522 Y 744, Y ALREDEDOR DEL 219, RESPECTIVAMENTE. EL PRIMER DOMINIO SE UNE A LA AMINOPEPTIDASA N, EL RECEPTOR DESCRITO, Y EN EL OTRO SE LOCALIZA OTRO FACTOR, QUE PUEDE SER UN CORRECEPTOR.

Autor: BAÑUELOS RODRIGUEZ SONIA.
Año: 1995.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HAN CARACTERIZADO ASPECTOS ESTRUCTURALES DE LA INTERACION LIPIDOPROTEINA EN DOS SISTEMAS DIFERENTES: LA ASOCIACION DE UNA PROTEINA HIDROSOLUBLE (LA ALFA-LACTALBUMINA) CON MEMBRANAS MODELO Y LA ESTRUCTURA DE LA PROTEINA APO B-100 DE LA LIPOPROTEINA DE BAJA DENSIDAD (LDL). PARA ELLO, SE HAN UTILIZADO TECNICAS BIOFISICAS SENSIBLES A LA CONFORMACION DE LAS PROTEINAS, COMO LA ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO. LOS RESULTADOS INDICAN QUE LA FLUCTUACION DE LA ESTRUCTURA TERCIARIA DE LA ALFA-LACTALBUMINA PERMITE SU INTERACCION CON VESICULAS EN CONDICIONES ELECTROSTATICAS DESFAVORABLES. LA CONFORMACION QUE ADOPTAN DIFERENTES INTERMEDIARIOS DE LA PROTEINA UNA VEZ INSERTADOS ES COMUN, Y SE PARECE AL ESTADO "GLOBULO FUNDIDO". EL ANALISIS CUANTITATIVO DEL ESPECTRO IR DE LA PROTEINA APO-B-100 REVELA QUE ESTA CONTIENE UNA ELEVADA PROPORCION DE ESTRUCTURA EXTENDIDA, PARTE DE LA CUAL INTERACCIONA CON LOS LIPIDOS DE LA LDL. EN AMBOS CASOS (ALFA-LA Y APO B-100), LA CONFORMACION DE LA PROTEINA ESTA MODULADA POR EL ENTORNO LIPIDICO CON EL QUE INTERACCIONA.

Autor: BARRASA RODRIGUEZ M. INMACULADA.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO EL/LOS MECANISMOS DE RESISTENCIA AL ANTIBIOTICO AMINONUCLEOSIDICO A201A EN EL ORGANISMO PRODUCTOR STREPTOMYCES CAPREOLUS NRRL3817.SE HA ESTUDIADO SI LA DIANA DE ACCION DEL ANTIBIOTICO (LOS RIBOSOMAS) ERA SENSIBLE O RESISTENTE AL A201A, OBSERVANDOSE QUE ES SENSIBLE A DICHO ANTIBIOTICO. POR OTRO LADO, SE HAN AISLADO Y EXPRESADO EN STREPTOMYCES LIVIDANS DOS GENES DE RESISTENCIA A DICHO ANTIBIOTICO, ARD1 Y ARD2, PROCEDENTES DE S. CAPREOLUS. EL PRODUCTO CODIFICADO POR ARD1 PERTENECE A LA FAMILIA DE TRANSPORTADORES ABC Y PODRIA CONFERIR RESISTENCIA A201A MEDIANTE UN MECANISMO DE EXPULSION DEL ANTIBIOTICO AL EXTERIOR CELULAR, EL GEN ARD2 CODIFICA UNA FOSFOTRANSFERASA CAPAZ DE INACTIVAR EL A201A, FOSFORILANDOLO EN EL GRUPO HIDROXILO DEL CARBONO 2 DE LA HEXOFURANOSA INSATURADA QUE FORMA PARTE DEL A201A. LA EXPRESION DE AMBOS GENES ESTA REGULADA A LO LARGO DE LA CURVA DE CRECIMIENTO. ADEMAS SE HAN AISLADO Y SECUENCIADO VARIOS GENES QUE PROBABLEMENTE FORMEN PARTE DEL "CLUSTER" DE BIOSINTESIS DEL A201A.

Autor: BATANERO CREMADES EVA.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BUIOQIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: EL POLEN DE OLIVO CONTIENE UNA GRAN VARIEDAD DE ALERGENOS ENTRE LOS QUE CABE DESTACAR OLE EL COMO ALERGENO PRINCIPAL. SE TRATA DE UNA GLICOPROTEINA ACIDA MUY POLIMORFICA EN SU ESTRUCTURA PRIMARIA QUE PRESENTA 2 VARIANTES PRINCIPALES QUE DIFIEREN EN SU GRADO DE GLICOSILACION. SE HA DETERMINADO SU ESTRUCTURA PRIMARIA COMPLETA Y SE HACLONADO Y EXPRESADO EN E. COLI COMO PROTEINA EN FUSION. EL OLIGOSACARIDO DE OLE E IPRESENTA VARIAS GLICOFORMAS, RICAS EN MANOSAS Y COMPLEJAS. SE HA DETERMINADO SU ESTRUCTURA PRIMARIA Y SU RELEVANCIA CLINICA. EXISTEN PROTEINAS HOMOLOGAS A OLE E 1 EN OTROS POLENES. SE HAN AISLADO Y CLONADO LAS CORRESPONDIENTES HOMOLOGAS A OLE E 1 DE LILA Y ALIGUSTRE. SE HA AISLADO Y CARACTERIZADO MOLECULAR E INMUNOLOGICAMENTE UN ALERGENO MENOR DEL POLEN DE OLIVO, OEL E 3. SE TRATA DE UNA PROTEINA ACIDA CONSTITUIDA POR UNA CADENA POLIPEPTIDICA DE 9.2 KDA. ESTA PROTEINA SE HA IDENTIFICADO COMO UNO DE LAS RESPONSABLES DE LA REACTIVIDAD CRUZADA ENTRE POLENES DE ESPECIES RELACIONADAS Y NO RELACIONADAS FILOGENETICAMENTE.

Autor: BAYES COLOMER MONICA.
Año: 1995.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA 91/93.

Resumen: LA RETINITIS PIGMENTOSA ES UNA ENFERMEDAD HEREDITARIA QUE PROVOCA CEGUERA TOTAL O PARCIAL EN LA EDAD ADULTA. EN ESTE TRABAJO SE HA PROFUNDIZADO EN EL CONOCIMIENTO DE LA FORMA AUTOSOMICA RECESIVA DE LA RETINITIS PIGMENTOSA, TANTO A NIVEL GENETICO COMO MOLECULAR. SE HAN ESTUDIADO UN TOTAL DE 48 FAMILIAS CON LA ENFERMEDAD. EL TRABAJO INCLUYE LA EVALUACION DE 7 GENES CANDIDATOS EN ESTAS FAMILIAS Y COMO RESULTADO SE HAN IDENTIFICADO 3 MUTACIONES RESPONSABLES DE LA ENFERMEDAD EN EL GEN QUE CODIFICA LA SUBUNIDAD BETA DE LA FOSFODIESTERASA DE GMPC. EN PARALELO SE HAN REALIZADO ESTUDIOS PARA LA LOCALIZACION GENETICA Y LA CARACTERIZACION DE POLIMORFISMOS EN ALGUNOS DE LOS GENES CANDIDATOS ANALIZADOS. POR ULTIMO, SE HA LLEVADO A CABO UNA BUSQUEDA GENOMICA SISTEMATICA QUE NOS HA PERMITIDO IDENTIFICAR UN NUEVO LOCUS PARA LA FORMA AUTOSOMICA RECESIVA DE LA RETINITIS PIGMENTOSA EN EL CROMOSOMA 2, EN 2Q31-Q33. EN RESUMEN, NUESTROS RESULTADOS PONEN DE MANIFIESTO UNA VEZ MAS LA ELEVADA HETEROGENEIDAD GENETICA DE LA RETINITIS PIGMENTOSA.

Autor: BELLSOLELL ARCE LUIS.
Año: 1995.
Universidad: POLITECNICA DE CATALUÑA.
Centro de lectura: INGENIEROS INDUSTRIALES.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE INGENIERIA QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR ESTRUCTURAL.

Resumen: SE DESCRIBE EL ESTUDIO POR CRISTALOGRAFIA DE RAYOS X DE LA PROTEINA CHEY, DEL SISTEMA DE QUIMIOTAXIS BACTERIANO, Y DE VARIOS MUTANTES QUE HAN SIDO DISEÑADOS DENTRO DE UN PROYECTO DE INGENIERIA DE PROTEINAS QUE PRETENDE EN IMPLANTAR EN CHET LA FUNCION DE UNION DE GTP/GDP DE LA PROTEINA P21 RAS.EN PRIMER LUGAR SE HA DETERMINADO LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE CHEY UNIDA A MG (MG.CHEY), QUE PRESENTA CAMBIOS IMPORTANTES EN EL COMIENZO DE LA HELICE ALFA4 RESPECTO LA ESTRUCTURA DE APO-CHEY, PUES TIENE SOLO 2 VUELTAS EN VEZ DE 3.LAS ESTRUCTURAS DE CHEM1 Y MG.CHEM2 MUESTRAN QUE LA HELICE ALFA4, CON VUELTAS, SE EMPAQUETA CON DIFERENTE ORIENTACION QUE EN APO-CHEY. ESTE CAMBIO SE HA RELACIONADO CON EL PROCESO DE ACTIVACION DE CHEY. LA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL DE CHEM4 PRESENTA UN CAMBIO CONFORMACIONAL EN EL LAZO BETA1-ALFA1, QUE TIENE 8 MUTACIONES PARA INTRODUCIR LA SECUENCIA CONSENSO DE P21 Y PROTEINAS RELACIONADAS. LA IGUALDAD DE SECUENCIAS NO ES SUFICIENTE PARA QUE ESTE LAZO ADQUIERA LA ESTRUCTURA QUE TIENE EN P21, DEBIDO A QUE NO SE HAN REPRODUCIDO LAS INTERACCIONES TERCIARIAS CON OTROS LAZOS.

Autor: BERLANGA CHIQUERO JUAN JOSE.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LA PROLACTINA ES UNA HORMONA POLIPEPTIDICA PRODUCIDA EN LA ADENOHIPOFISIS, QUE HA SIDO IMPLICADA EN GRAN VARIEDAD DE FUNCIONES RELACIONADAS CON REPRODUCCION Y LACTANCIA, METABOLISMO, ETC., ADEMAS DE CONSIDERARSE UN FACTOR DE CRECIMIENTO Y DIFERENCIACION CELULAR.EN ESTA TESIS SE HAN ESTUDIADO DISTINTOS ASPECTOS DE LA SEÑALIZACION INTRACELULAR INDUCIDA POR LA HORMONA PROLACTINA A TRAVES DE SUS RECEPTORES CELULARES. DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE HAN EXTRAIDO LAS SIGUIENTES CONCLUSIONES: 1) LA PROLACTINA EN HIGADO INICIA SU ACCION CELULAR ESTIMULANDO LA ASOCIACION A SU RECEPTOR Y LA ACTIVIDAD DE LA TIROSINA QUINASA PP60 C-SRC; 2) LA PROLACTINA EN HIGADO INDUCE LA EXPRESION DE LOS PROTOONCOGENES NUCLEARES C-FOS Y C-JUN, Y DEL PROTOONCOGEN C-SRC; 3) EN FIBROBLASTOS 293 DONDE SE SOBREEXPRESAN LOS RECEPTORES DE PROLACTINA, ESTA INDUCE LA FOSFORILACION EN TIROSINA DE LAS PROTEINAS SEÑALIZADORAS IRS-1 Y FOSFATIDILINOSITOL 3-QUINASA Y SU ASOCIACION AL RECEPTOR DE PROLACTINA; 4) FINALMENTE, EN CELULAS EPITELIALES DE GLANDULA MAMARIA LA COEXPRESION DE LA ISOFORMA CORTA CON LA ISOFORMA LARGA DEL RECEPTOR DE PROLACTINA DE RATA SILENCIA EL EFECTO DE LA PROLACTINA SOBRE LA INDUCCION DE LA RESPUESTA LACTOGENICA MEDIADA POR LA ISOFORMA LARGA DEL RECEPTOR.

Autor: BERRA RAMIREZ MIREN EDURNE.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: 1. LA SOBREEXPRESION DE PC-PLC ES SUFICIENTE Y NECESARIA PARA INDUCIR Y MANTENER EL EL FENOTIPO TRANSFORMADO DE NIH-3T3. EL POTENCIAL ONCOGENICO DE PLC ES SEMEJANTE AL DEL ONCOGEN V-H-RAS. 2. PKC3Y C-RAF SON ETAPAS CRITICAS EN LA TRANSMISION DE LA CASCADA MITOGENICA ACTIVADA POR RAS Y PC-PLC. 3. 3PKC INTERACCIONA A TRAVES DE SU DOMINIO REGULADOR IN VITRO E IN VIVO CON RAS. LA ACTIVACION DE RAS ES NECESARIA PARA LA ESTIMULACION MITOGENICA DE 3PKC. 4. 3PKC ES ACTIVADA IN VITRO POR CERAMIDAS E IN VIVO POR ESTIMULACION CON SMASA. 5. 3PKC ES NECESARIA Y SUFICIENTE PARA LA ACTIVACION DE MAPK. POR EL CONTRARIO, NO PARTICIPA EN LA ACTIVACION DE SAPK NI DE P70S6K. 6. MEK ES UNA ETAPA INTERMEDIA EN LA ACTIVACION DE MAPK POR 3PKC. 7. MAPK ES ESENCIAL PARA LA ACTIVACION DE UN PROMOTOR DEPENDIENTE DE ELEMENTOS KB.

Autor: BLANCO DOLADO LAURA.
Año: 1995.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE ESTUDIA EL EFECTO DE LA DIABETES EXPERIMENTAL INDUCIDA POR ESTREPTOZOTOCINA (STZ) Y DE LA GESTACION DE 20 DIAS EN LA RATA SOBRE LA ACTIVIDAD Y EL ARNM DE LA LIPOPROTEINA LIPASA (LPL) Y DE LA LIPASA SENSIBLE A LAS HORMONAS (HSL) EN VARIOS TEJIDOS: ADIPOSO BLANCO, GLANDULA MAMARIA, CORAZON, MUSCULO ESQUELETICO (DE FIBRA ROJA Y BLANCA), PULMON, HIGADO Y PLACENTA. PARA ELLO RATAS WISTAR FUERON INYECTADAS I.V. CON 20, 30 Y 40 MG DE STZ/KG P.C. TAMBIEN SE ESTUDIA LA SENSIBILIDAD DEL METABOLISMO LIPIDICO A LA INSULINA MEDIANTE LA DETERMINACION DE PARAMETROS RELACIONADOS CON EL MISMO. RESUMIENDO LAS CONCLUSIONES MAS IMPORTANTES DEL TRABAJO, SE HA OBSERVADO QUE HAY EXPRESION DE ARNM DE LA HSL EN LA GLANDULA MAMARIA POR LO QUE ESTA ENZIMA SE SINTETIZA EN ESTE TEJIDO, DE LO QUE NO HABIA DATOS EN LA LITERATURA. LA REGULACION A LARGO PLAZO DE AMBAS ENZIMAS, LPL Y HSL, ES ESPECIFICA DE TEJIDO Y ES INTERESANTE DESTACAR LA EXISTENCIA DE REGULACION A LARGO PLAZO (A NIVEL DEL ARNM) EN EL CASO DE LA HSL, YA QUE ESTA MUY POCO ESTUDIADA EN LA LITERATURA.

Autor: BLANCO GASCON ANA.
Año: 1995.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA AMBIENTAL.

Resumen: LA CEPA BACILLUS SP. BP-23 FUE AISLADA A PARTIR DE UN CULTIVO DE ENRIQUECIMIENTO REALIZADO A PARTIR DE UNA MUESTRA DE SUELO DE ARROZAL. DICHA CEPA MUESTRA UNA ELEVADA ACTIVIDAD XILANASA EXTRACELULAR, ASI COMO UNA NOTABLE ACTIVIDAD SOBRE POLIGALACTURONATO Y CMC. EL SISTEMA XILANOLITICO DE LA CEPA CONSTA, AL MENOS, DE CUATRO BANDAS PROTEICAS DETECTADAS EN GELES DE SDS-PAGE. UNA DE ESTAS PROTEINAS, LA XILANASA A, FUE PURIFICADA A HOMOGENEIDAD Y CARACTERIZADA. SU TEMPERATURA Y PH OPTIMOS SON DE 50 GRADOS C Y 5,5 RESPECTIVAMENTE. MUESTRA UNA ELEVADA ESTABILIDAD FRENTE A PH ALCALINO Y UNA BUENA ESTABILIDAD A TEMPERATURAS DE HASTA 55 GRADOS C. LA SECUENCIA DE LOS CUARENTA PRIMEROS AMINOACIDOS DEL EXTREMO AMINO-TERMINAL FUE DETERMINADA Y LA XILANASA MOSTRO HOMOLOGIA CON XILANASAS DE LA FAMILIA F. LA XILANASA A FUE UTILIZADA EN ESTUDIOS DE BLANQUEO DE LA PASTA DE PAPEL, MOSTRANDO UNA ELEVADA EFECTIVIDAD EN ESTE PROCESO. EL TRATAMIENTO CON LA XILANASA PROVOCO EN LA PASTA TRATADA INCREMENTOS DE MAS DE UNA UNIDAD ISO DE BLANCURA RESPECTO AL CONTROL. SE REALIZO TAMBIEN UNA GENOTECA DE LA CEPA BACILLUS SP. BP-23 EN ESCHERICHIA COLI Y SE OBTUVIERON CINCO CLONES RECOMBINANTES QUE CODIFICABAN ACTIVIDADES DEGRADADORAS DE POLIMEROS VEGETALES: DOS XILANASAS, DOS CELULASAS Y UNA PECTINASA. LAS XILANASAS CLONADAS, XILANASA X20 Y XILANASA X31, FUERON CARACTERIZADAS A NIVEL BIOQUIMICO.

Autor: BLANCO SANTAMARIA ALICIA.
Año: 1995.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: SE HA ESTUDIADO LA CAPACIDAD DE LA BIOMASA NO VIABLE DE LA CIANOBACTERIA TERMOFILA NO FIJADORA DE N2 PHONMIDIUM LAMINOSUM PARA ADSORBER FE(II), CU(II), NI(II) Y ZN(II) DISUELTOS EN AGUAS MODELO. LA ADSORCION DE IONES METALICOS A LAS ENVUELTAS CELULARES ES MUY RAPIDA Y EMPLEANDO BLOQUEANTES ESPECIFICOS SE HA COMPROBADO QUE LOS GRUPOS CARBOXILO SON LOS QUE TIENEN UN PAPEL MAS IMPORTANTE EN LA ADSORCION DE METAL. DESPUES DE SU ACONDICIONAMIENTO ALCALINO, LA BIOMASA HA SIDO INMOVILIZADA POR ATRAPAMIENTO EN EL INTERIOR DE ESFERAS OBTENIDAS POR POLIMERIZACION DE RESINA EPOXI O INSOLUBILIZACION DE POLISULFONA. SE HA CARACTERIZADO EL TAMAÑO DE LAS ESFERAS POR ANALISIS DE IMAGEN Y SE HA OBSERVADO SU ESTRUCTURA POR MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO. LAS ESFERAS DE RESINA EPOXI MOSTRABAN UNA DISTRIBUCION INTERNA DE LOS AGREGADOS DE BIOMASA MAS HOMOGENEA Y ERAN MENOS POROSAS QUE LAS OBTENIDAS CON POLISULFONA. LA BIOMASA INMOVILIZADA EN AMBOS SOPORTES ES CAPAZ DE ADSORBER IONES METALICOS, PERO LA CAPACIDAD Y CINETICA DE ADSORCION ES DISTINTA EN AMBOS CASOS Y DEPENDE DEL TAMAÑO, GRADO DE HIDRATACION Y CONCENTRACION DE BIOMASA EMPLEADA. SE HA CARACTERIZADO LA CINETICA DE ADSORCION DE LOS DIVERSOS IONES METALICOS POR BIOMASA ATRAPADA EN AMBOS TIPOS DE RESINA, TANTO EN ENSAYOS DISCONTINUOS COMO EN REACTORES DE LECHO FIJO Y AGITADO POR AIRE. DESPUES DE SATURAR LA BIOMASA DE METAL, ESTE PUEDE SER ELUIDO CASI CUANTITATIVAMENTE POR LAVADO CON ACIDO, LO QUE PERMITE REUTILIZAR LA BIOMASA INMOVILIZADA EN ESFERAS DE POLISULFONA AL MENOS DURANTE 10 CICLOS DE ADSORCION-DESORCION SIN PERDIDA DE EFICACIA.

Autor: BLESA BLESA JOSE RAFAEL.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: PATOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: 285A "CANCEROLOGIA ESTRUCTURAL: EXPERIMENTAL Y HUMANA" .

Resumen: ESTUDIAMOS LA PRESENCIA DE MUTACIONES EN LA SEGUNDA BASE DEL COD'ON 12D DEL GEN K-RAS EN MUESTRAS PRETUMORALES Y TUMORES HEPATICOS OBTENIDOS POR INTOXICACION DE RATAS WISTAR CON EL CARCINOGENO 2'AAF Y EN TUMORES HEPATICOS HUMANOS. PARA ELLO UTILIZAMOS LA TECNICA DE LA PCR 3'"MISMATCHED" E HIBRIDACION ASO. OBSERVAMOS QUE NO SE PRESENTA NINGUNA MUTACION TANTO EN LOS TUMORES COMO EN LAS MUESTRAS PRETUMORALES DE LA SERIE EXPERIMENTAL. EN LOS TUMORES HUMANOS HEPATICOS ENCONTRAMOS UNA FRECUENCIA DE MUTACION DEL 23,6% CONSISTIENDO MAYORITARIAMENTE EN UNA TRANSVERSION G--T. POR OTRO LADO ESTUDIAMOS LA PRESENCIA DE MUTACIONES EN EL GEN P53 A LO LARGO DE LOS EXONES 5 A 9 EN HEPATOCARCINOMAS HUMANOS. UTILIZAMOS LA TECNICA DE LA SSCP. LAS MUTACIONES ENCONTRADAS SE DISTRIBUYEN ENTRE LOS EXONES 5(5%), 6(2,2%), 7(3,2%) Y 8(2%). NO EXISTE UNA ESPECIFICIDAD DE LOCALIZACION DE LAS MUTACIONES. LOS POCOS CASOS QUE PRESENTAN MUTACION CORRESPONDEN MAYORITARIAMENTE CON HEPATOCARCINOMAS POCO DIFERENCIADOS. ESTO EXPRESA UNA RELACION ENTRE LA PRESENCIA DE MUTACION CON UN PEOR PRONOSTICO DEL TUMOR. ESTUDIAMOS LA PROTEINA MEDIANTE LA INMUNOHISTOQUIMICA. EL 50% DE LOS HEPATOCARCINOMAS POCO DIFERENCIADOS PRESENTAN ALGUNA MUTACION Y TODOS LOS QUE LA PRESENTAN SON POSITIVOS A LA INMUNO ASOCIANDOSE UN PEOR PRONOSTICO.

Autor: BLESA JARQUE DAVID.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA. UNIVERSIDAD DE VALENCIA.

Resumen: EL RESULTADO DE ESTE TRABAJO HA DIO EL AISLAMIENTO DE UN NUEVO MODEL TRANSPONIBLE DENOMINADO GENERICAMENTE BILBO, DE DROSOPHILA SUBOBSCURA. EL ELEMENTO SE ASOCIA POR COMPARACION DE SECUENCIA, CON LS RETROTRANSPOSONES SIN LTRS QUE PERTENECEN A LA CLASE I ESTABLECIDA POR FINNEGAN. LA EXISTENCIA DE ESTE ELEMENTO, JUNTO CON OTROS YA CARACTERIZADOS, MUESTRA QUE LOS ELEMENTOS DE ESTA CLASE SE PUEDEN SEPARAR EN DOS GRUPOS, QUE SE DIFERENCIAN EN SU CAPACIDAD CODIFICANTE. EL ELEMENTO 1 DE LA FAMILIA BILBO SE INSERTO EN LO QUE PODRIA SER LA ZONA PROMOTORA DE UN GEN REGULADOR DE D. SUBOBSCURA. LA FUNCIONALIDAD DE ESTE ELEMENTO 1 ESTA COMPROMETIDA POR UNA DELECION DE DOS PARES DE BASES QUE AFECTA A LA ORF MAYOR. LOS RESULTADOS INDICAN QUE ESTA COPIA CONCRETA PUDO QUEDAR INACTIVADA RECIENTEMENTE. LA COMPLEJIDAD DE LA FAMILIA BILBO DENTRO DE D. SUBOSCURA ES SIMILAR A LA QUE SE PUEDE ENCONTRAR PARA OTROS ELEMENTOS DE SU CLASE. ESTA FAMILIA DE ELEMENTOS SE HA DETECTADO EN 42 ESPECIES RELACIONADAS CON D. SUBOBSCURA DE LAS 56 ANALIZADAS Y SU DISTRIBUCION PARECE PRODUCTO DE LA TRANSMISION DESDE UN ANCESTRO COMUN.

Autor: BOGA RIVEIRO JOSE ANTONIO.
Año: 1995.
Universidad: OVIEDO.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA FUNCIONAL PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ENFERMEDAD HEMORRAGICA DE LOS CONEJOS FUE DESCRITA POR PRIMERA VEZ EN CHINA EN 1984 COMO UN PROCESO AGUDO, LETAL Y CARACTERIZADO POR UN SINDROME HEMORRAGICO. LAS PARTICULAS DEL AGENTE CAUSAL, EL VIRUS DE LA ENFERMEDAD HEMORRAGICA DE LOS CONEJOS (RHDV), SON ICOSAEDRICAS, POSEEN UN DIAMETRO DE 25 A 30 NM Y CARECEN DE ENVOLTURA LIPIDICA. LOS VIRIONES ESTAN FORMADAS POR COPIAS DE UNA UNICA PROTEINA DE 60 KDA (VP60) Y CONTIENE UN GENOMA DE RNAMC DE 7,5 KB Y POLARIDAD POSITIVA. LA SECUENCIA DE LOS 2483 NUCLEOTIDOS DEL EXTREMO 3' MOSTRO QUE LA VP60 DEL RHDV ESTA CODIFICADA EN EL EXTREMO 3' DE UNA GRAN PAUTA ABIERTA DE LECTURA QUE SE EXTIENDE A LO LARGO DE LA MAYORIA DEL GENOMA. A PESAR DE ESTO, EL RHDV PRODUCE UN RNAM SUBGENOMICO DE 2.4 KB, ENCAPSIDADO, COTERMINAL POR EL EXTREMO 3' CON EL GENOMA, Y QUE CODIFICA LA VP60. POR TANTO, LA VP60 VIRAL ES PRODUCIDA POR PROCESAMIENTO PROTEOLITICO DE UN PRECURSOR O POR TRADUCCION DEL RNAM SUBGENOMICO. LA SECUENCIACION DEL EXTREMO N-TERMINAL DE LA VP60 APOYA SU ORIGEN SUBGENOMICO. POR OTRA PARTE, LA VP60 HA SIDO PRODUCIDA EN ESCHERICHIA COLI COMO PROTEINA DE FUSION CON LA BETA-GALACTOSIDASA, OBSERVANDO QUE LA PROTEINA QUIMERICA RESULTANTE MOSTRABA IMPORTANTES DIFERENCIAS ANTIGENICAS CON LA PROTEINA NATIVA. SIN EMBARGO, LA VP60 RECOMBINANTE OBTENIDA EN UN SISTEMA BASADO EN LA RNA POLIMERASA DE T7 ERA ANTIGENICAMENTE SIMILAR A LA VP60 VIRAL COMO SE DETERMINO USANDO UN SUERO POLICLONAL Y ANTICUERPOS MONOCLONALES. ESTA VP60 RECOMBINANTE ERA CAPAZ DE INDUCIR PROTECCION CONTRA UNA DOSIS LETAL DEL VIRUS A LOS CONEJOS INMUNIZADOS CON ELLA. CUANDO LA VP60 ES PRODUCIDA EN SACCHAROMYCES CEREVISISAE BAJO EL PROMOTOR DEL GEN DE LA FOSFOGLICERATO QUINASA SE AUTOENSAMBLABA FORMANDO PARTICULAS SIMILARES MORFOLOGICAMENTE A VIRIONES.