BIOQUIMICA MOLECULAR, 67

Autor: COS GOMEZ M. TERESA DE.
Año: 1995.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: "APROXIMACION MOLECULAR AL ESTUDIO DE MICROORGANISMOS Y PLANTAS Y SUS INTERRELACIONES".

Resumen: APROVECHANDO LAS CARACTERISTICAS ANTIFUNGICAS QUE PRESENTA EL CALCOFLUOR SE HA ABORDADO EL ESTUDIO DE LA SINTESIS DE QUITINA EN S. CEREVISIAE SE HAN OBTENIDO MUTANTES RESISTENTES A DICHO FLUOROCROMO (CAL1, CAL2 Y CAL3). A PARTIR DEL MUTANTE CAL1 SE AISLO EL GEN CHS3. ESTE GEN, CODIFICA PARA UNA PROTEINA ASOCIADA A LA FRACCION DE MEMBRANAS Y MODIFICADA POSTRADUCCIONALMENTE POR N-GLICOSILACION Y OTRO MECANISMO DESCONOCIDO. POSEE UN DOMINIO DE 15 AMINOACIDOS EN SU REGION CARBOXITERMINAL ESENCIAL PARA SU FUNCION E IMPLICADO EN SU REGULACION FUNCIONAL, ASI COMO UN DOMINIO (SQRRRW) QUE PODRIA TENER TAMBIEN UN PAPEL REGULADOR MEDIANTE FOSFORILACION POR QUINASAS DEPENDIENTES DE AMPC. ESTE DOMINIO PODRIA ENTRAR A FORMAR PARTE DE OTRO ALGO MAS AMPLIO QUE HA SIDO PROPUESTO COMO POSIBLE CENTRO ACTIVO DE LA GLICOSIL TRANSFERASAS ENTRE ELLAS LAS QUITIN SINTASAS. SE ENCUENTRA REGULADA A NIVEL TRADUCCIONAL POR FACTOR ALFA Y POSTRADUCCIONALMENTE DURANTE LOS PROCESOS DE ESPORULACION Y TRATAMIENTO CON CALCOFLUOR. ESTE GEN SE ENCUENTRA MUY CONSERVADO A LO LARGO DE LA EVOLUCION EN HONGOS Y LEVADURAS, INDICANDO UNA SIMILITUD A NIVEL DE SU FUNCION EN LOS ORGANISMOS ESTUDIADOS.

Autor: DALLAGIOVANNA MUÑIZ BRUNO.
Año: 1995.
Universidad: GRANADA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA CARACTERIZADO UN GEN DE LA FAMILIA GLICOPROTEINA P DE TRYPANOSOMA CRUZI. EL GEN TIENE UN TAMAÑO DE 4602 PB Y CODIFICA PARA UNA PROTEINA DE 1.557 AMINOACIDOS. EL GEN TCPGP2 ES DE COPIA UNICA, SE LOCALIZA EN UN CROMOSOMA DE 900 KB Y TIENE UNA EXPRESION DIFERENCIAL A LO LARGO DEL CICLO DE VIDA DEL PARASITO. LAS FORMAS REPLICATIVAS PRESENTAN UN TRANSCRITO POLIADENILADO DE 5 KB MIENTRAS QUE, EN LAS FORMAS TRIPOMASTIGOTAS EL TRANSCRITO ES SUPERIOR A 10 KB Y NO ESTA POLIADENILADO. ANTICUERPOS POLICLONALES RECONOCEN EN EPIMASTIGOTES DE T. CRUZI UNA PROTEINA DE UN TAMAÑO MOLECULAR ENTRE 160 Y 180 KDA. LOS ENSAYOS DE TRANSFECCION EN L. TROPICA MUESTRAN QUE EL GEN TCPGP2 NO CONFIERE RESISTENCIA A FARMACOS INDUCTORES DE MULTIRESISTENCIA, METALES PESADOS O A LOS FARMACOS ANTICHAGASICOS. LOS ENSAYOS DE SENSIBILIDAD A CLOROQUINA Y LA REVERSION DE ESE FENOTIPO POR CLORURO DE AMONIO, SUGIEREN QUE TCPGP2 PODRIA ESTAR IMPLICADO EN MECANISMOS DE REGULACION DEL PH INTRACELULAR.

Autor: DAZA BERTRAN FRANCISCO JAVIER.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR III PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO HEMOS ESTUDIADO EL MECANISMO DE ACCION DE LAS HORMONAS TIROIDEAS EN EL CONTROL DE LA FUNCION DE LOS RECEPTORES ALFA1-ADRENERGICOS EN EL TEJIDO HEPATICO. PARA ELLO, HEMOS UTILIZADO UN MODELO EXPERIMENTAL DE HIGADO AISLADO Y PERFUNDIDO QUE PERMITE ANALIZAR DE FORMA CONTINUA DIVERSAS RESPUESTAS FUNCIONALES DE TIPO ENERGETICO, METABOLICO, IONOTROPICO Y VASCULAR. ESTE TIPO DE ESTUDIO NOS HA PERMITIDO DETERMINAR QUE EXISTEN PATRONES ESPECIFICOS DE RESPUESTAS ASOCIADAS A UNA DETERMINADA PERTURBACION HORMONAL. PARALELAMENTE, HEMOS DETERMINADO LA ACTIVIDAD FUNCIONAL DE LOS ALFA1-ADRENORRECEPTORES ANALIZANDO LA CAPACIDAD DE LOS AGENTES ALFA1-ADRENERGICOS DE INDUCIR UN AUMENTO EN LOS NIVELES DE CA2+ LIBRE CITOSOLICO, DE ESTIMULAR LA ACTIVIDAD DEL INTERCAMBIADOR NA+/H+ Y DE PROMOVER LA TRASLOCACION DE PROTEINA QUINASA C (PKC) HACIA LA MEMBRANA PLASMATICA EN SUSPENSIONES DE HEPATOCITOS. NUESTROS RESULTADOS INDICAN QUE LA FUNCION TIROIDEA MODULA LA SENSIBILIDAD TISULAR A LA ACTIVACION ALFA1-ADRENERGICA. SIN EMBARGO, NO TODAS LAS RESPUESTAS HEPATICAS MUESTRAN LA MISMA SUSCEPTIBILIDAD A VARIACIONES EN LOS NIVELES CIRCULANTES DE HORMONAS TIROIDEAS. MIENTRAS QUE LA ACTIVACION DE RESPIRACION Y EFLUJO SOSTENIDO DE CA2+ O LA ESTIMULACION DEL METABOLISMO DE HIDRATOS DE CARBONO DEPENDEN DE LA FUNCION TIROIDEA, EL EFECTO VASOPRESOR O LA ACTIVACION DE PKC O DEL INTERCAMBIADOR NA+/H+ NO SE VEN AFECTADOS POR EL ESTADO TIROIDEO. POR OTRA PARTE, HEMOS PODIDO COMPROBAR QUE LA HORMONA TIROIDEA L-T3 PUEDE JUGAR UN PAPEL FISIOLOGICAMENTE RELEVANTE MODULANDO, DE FORMA AGUDA, LA RESPUESTA HEPATICA A LA ACTIVACION ALFA1-ADRENERGICA. LA RAPIDEZ CON QUE SE INSTAURAN ESTOS EFECTOS DE L-T3 SUGIERE QUE LA HORMONA TIROIDEA ACTUA INTERACCIONANDO CON ELEMENTOS EXTRANUCLEARES. EL ANALISIS DE LAS ALTERACIONES EN LA RESPUESTA HEPATICA A LA ACTIVACION ALFA1-ADRENERGICA, INDUCIDAS TANTO POR LA ADMINISTRACION IN VITRO DE L-T3 COMO POR EL HIPOTIROIDISMO, INDICA QUE EXISTEN, AL MENOS, DOS RUTAS INDEPENDIENTES DE SEÑALIZACION INTRACELULAR ASOCIADAS A LA ACTIVACION ALFA1-ADRENERGICA. UNA DE ELLAS DEPENDE DE LA MOVILIZACION INTRACELULAR DE CA2+, EN TANTO QUE LA SEGUNDA ES INDEPENDIENTE DE LOS NIVELES DE CA2+ LIBRE CITOSOLICO, PERO REQUIERE LA ACTIVACION DE PKC.

Autor: DIAZ LOPEZ ANA.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: DE BIOQUIMICA.

Resumen: EN LAS ULTIMAS DECADAS SE HAN DESCRITO EN EL TRATAMIENTO CON LITIO DE LA PSICOSIS MANIACO-DEPRESIVA UNA SERIE DE EFECTOS SECUNDARIOS ENTRE LOS QUE SE INCLUYEN ALTERACIONES DEL METABOLISMO MINERAL, ALTERACIONES DEL METABOLISMO DEL AGUA Y OTRAS DISFUNCIONES ENDOCRINAS. EN LO QUE RESPECTA A LAS ALTERACIONES DEL METABOLISMO MINERAL, EN LA LITERATURA NO EXISTE UN ACUERDO UNIVERSAL. NOS PROPONEMOS POR TANTO EN UN GRUPO DE PACIENTES EN TRATAMIENTO CON LITIO DURANTE DOS AÑOS EN DOSIS TERAPEUTICAS ESTUDIAR LAS ALTERACIONES ENCONTRADAS EN EL METABOLISMO MINERAL Y OSEO. NO SE HAN ENCONTRADO ALTERACIONES SIGNIFICATIVAS A NIVEL ESTADISTICO EN LOS PARAMETROS BIOQUIMICOS QUE EXPLORAN LA FUNCION GLOMERULAR Y TUBULAR DE LOS PACIENTES. SIN EMBARGO, LAS ALTERACIONES ENCONTRADAS EN LAS ELIMINACIONES URINARIAS DE CALCIO PLANTEAN LA HIPOTESIS DE UNA POSIBLE DISFUNCION MEDIADA POR EL LITIO A NIVEL TUBULO PROXIMAL. EN EL ESTUDIO DE LAS ALTERACIONES OSEAS NO SE HAN EVIDENCIADO MODIFICACIONES DE LOS MARCADORES DE RESORCION OSEA.

Autor: DIEGO SANCHO JUANA LUISA DE.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: CARACTERIFICACION, PURIFICACION E IDENTIFICACION DE UNA MUCINA DE TRYPANOSOMA CRUZI EXPRESADA EN LOS TRES ESTADIOS CELULARES DE ESTE PROTOZOO PARASITO. LA MUCINA TIENE UN PESO MOLECULAR ENTRE 30/50 KDA, CON UN 65%(P/P) DE CARBOHIDRATOS UNIDOS POR ENLACE O-GLICOSIDICOS, ANCLADA A LA MEMBRANA POR ENLACE DE GLICOSILFOSFATIDIL INOSITOL. ESTA O-GLICOPROTEINA ESTA IMPLICADA EN VARIOS ASPECTOS DE LA INTERACCION DE T. CRUZI CON EL HOSPEDADOR, ENTRE LOS QUE DESTACAN: 1) INTERACION CON LA MEMBRANA DEL MACROFAGO, INDUCIENDO AGREGACION CELULAR Y ALTRACION EN EL MACROFAGO. 2) INDUCCION DE AUTOANTICUERPOS QUE DAN REACCION CRUZADA CON UNA GLICOPROTEINA DE CELULAS MONOCITICAS HUMANAS, CAUSANDO DISFUNCIONALIDAD DE LA RESPUESTA INMUNE DEL HOSPEDADOR.

Autor: ESTEVEZ GARCIA ANTONIO MANUEL.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA (FACULTAD DE MEDICINA).

Resumen: SE HAN AISLADO Y SECUENCIADO DOS FRAGMENTOS DE CDNA Y UNO DE DNA GENOMICO SOLAPANTES QUE, REUNIDOS, CODIFICAN LA SECUENCIA AMINOACIDICA COMPLETA DE LA FOSFOFRUTOKINASA (PFK) DE DICTYOSTELIUM DISCOIDEUM, UNA PROTEINA DE 804 AMINOACIDOS CON UNA MASA MOLECULAR DE 92,4 KDA. LA SECUENCIA DE CDNA INCLUYE UNA REGION 3' NO CODIFICANTE DE 63 PB QUE INCLUYE DOS SEÑALES DE POLIADENILILACION Y UNA COLA DE POLI (A). SE HA AISLADO TAMBIEN UNA REGION DE 1650 PB CADENA ARRIBA DEL CODON ATG INICIADOR EN LA QUE SE HA IDENTIFICADO UNA POSIBLE CAJA TATA Y VARIOS SITIOS DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION LA PROTEINA DEDUCIDA PRESENTA MAXIMA HOMOLOGIA CON LAS DE OTRAS PFKS Y CONTIENE DOS SITIOS DE FOSFORILACION PARA LA PROTEIN-KINASA DEPENDIENTE DE CAMP, EN CONSONANCIA CON SU FOSFORILACION IN VITRO POR ESTA KINASA. LA ALINEACION CON OTRAS SECUENCIAS DE PFKS REGULADORAS HA PUESTO DE MANIFIESTO QUE GRAN PARTE DE LOS RESIDUOS ASIGNADOS A SITIOS LIGANTES ESTAN CONSERVADOS EN ESTA ENZIMA, AUNQUE SE HAN LOCALIZADO CAMBIOS ESTRUCTURALES QUE PUEDEN RELACIONARSE CON SU FALTA DE MECANISMOS DE CONTROL ALOSTERICO. ESTA COMPARACION HA PERMITIDO ADEMAS CONSTRUIR UN ARBOL FILOGENETICO PARA LA FAMILIA DE LAS PFKS. HEMOS ENCONTRADO TAMBIEN QUE ESTA PFK ESTA CODIFICADA POR UN SOLO GEN, CUYA EXPRESION DISMINUYE GRADUALMENTE A LO LARGO DEL DESARROLLO. SE HA SOBREEXPRESADO EL ENZIMA EN UNA CEPA DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE DEFICIENTE EN PFK, MOSTRANDO CARACTERISTICAS SIMILARES A LAS DE LA PROTEINA SALVAJE Y SIN QUE SE AFECTE EL CRECIMIENTO DE LOS TRANSFORMADORES EN GLUCOSA.

Autor: FAGOAGA GARCIA CARMEN.
Año: 1995.
Universidad: POLITECNICA DE VALENCIA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: EN LOS ULTIMOS AÑOS, LOS CULTIVOS HORTICOLAS DE LA ZONA DE LEVANTE SE HAN VISTO AFECTADOS POR UN COMPLEJO DE ENFERMEDADES CUYA ETIOLOGIA EXACTA SE DESCONOCE.LOS RESULTADOS DE UNA PROSPECCION LLEVADA A CABO PARA EVALUAR LA INCIDENCIA DE RNAS TIPO VIROIDE EN CULTIVOS HORTICOLAS DE LA COMUNIDAD VALENCIANA, MOSTRARON UNA ALTA FRECUENCIA DE RNAS DE PEQUEÑO TAMAÑO EN LAS DISTINTAS ESPECIES HORTICOLAS ANALIZADAS. POR UN LADO, SE HAN DETECTADO RNAS SATELITES RELACIONADOS CON EL CMV EN CULTIVOS DE ACELGA, BERENJENA, CALABACIN, MELON, SANDIA Y TOMATE, Y POR OTRO LADO, RNAS TIPO VIROIDE. CON RESPECTO A ESTOS ULTIMOS SE HA IDENTIFICADO UN NUEVO VIROIDE EN LA VARIEDAD DE BERENJENA "SONJA". ADEMAS, SE HAN DETECTADO OTROS VIROIDES EN LOS CULTIVOS DE ZANAHORIA, BERENJENA, TOMATE, NABO Y HABA. TODOS ELLOS POSEEN UNA HOMOLOGIA DE SECUENCIA SUPERIOR AL 90% CON RESPECTO AL AISLADO CALIFORNIANO DEL VIROIDE DE LA EXOCORTIS DE LOS CITRICOS (CEVD-C), POR LO QUE HAN SIDO CARACTERIZADOS COMO VARIANTES DE ESTE VIROIDE. POR PRIMERA VEZ SE DESCRIBE LA DETECCION DEL CEVD EN LOS CULTIVOS DE NABO, BERENJENA, ZANAHORIA Y HABA, LO QUE SIGNIFICA UNA AMPLIACION NATURAL DE SU RANGO NATURAL DE HOSPEDADORES.

Autor: FERRANDIZ MAESTRE CRISTINA.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030 A "BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR".

Resumen: SE HAN CARACTERIZADO MORFOLOGICAMENTE VARIOS MUTANTES DEL DESARROLLO FLORAL DE PISUM SATIVUM L., HACIENDO UN ESTUDIO DETALLADO DE LA ONTOGENIA DE LA FLOR, ESTABLECIENDOSE MARCADORES MORFOLOGICOS DE LOS DISTINTOS ESTADIOS. POR OTRA PARTE, SE HAN AISLADO Y CARACTERIZADO SEIS MIEMBROS DE LA FAMILIA DE LOS GENES MADS DE GUISANTE, FACTOREWS TRANSCRIPCIONALES QUE PARTICIPAN EN LA IDENTIFICACION DE LOS MERISTEMOS Y DE LOS ORGANOS FLORALES. PM1 Y PM4 PUEDEN CONSIDERARSE HOMOLOGOS FUNCIONALES DE GENES HOMEOTICOS TIPO B Y A, DESCRITOS EN OTRAS PLANTAS. PM2 Y PM3 SE EXPRESAN TANTO EN ORGANOS VEGETATIVOS COMO EN FLORES. PM5 ES UN GEN ESPECIFICAMENTE FLORAL Y PM6 SE HA PODIDO RELACIONAR CON LA MUTACION VEG1. FINALMENTE, LA LOCALIZACION DE ALGUNOS DE ESTOS GENES EN EL MAPA GENETICO DEMUESTRA QUE, COMO EN OTRAS PLANTAS, LOS GENES MADS DE GUISANTE NO SE ENCUENTRAN LIGADOS EN REGIONES CONCRETAS DEL GENOMA SINO REPARTIDOS EN DIFERENTES CROMOSOMAS.

Autor: FERRAZ PENALVA LUIZ OTAVIO.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL GEN SEX-LETHAL (SXL) DE DROSOPHILA MELANOGASTER CONTROLA LOS PROCESOS DE COMPENSACION DE DOSIS GENICA Y DETERMINACION SEXUAL. SXL POSEE DOS MODOS DE EXPRESION (TEMPRANA Y TARDIA). LA EXPRESION TEMPRANA SE ENCUENTRA CONTROLADA A NIVEL DE TRANSCRIPCION, MIENTRAS QUE LA TARDIA A NIVEL DE SPLICING ALTERNATIVO. CON OBJETO DE COMPRENDER MEJOR LA REGULACION DE ESTOS DOS MODOS DE EXPRESION, DECIDIMOS REALIZAR UN ESTUDIO INTERESPECIFICO. HEMOS ASI, CLONADO Y CARACTERIZADO EL GEN SXL DE D. SUBBOSCURA. LA UNIDAD DE TRANSCRIPCION DEL GEN SXL DE D. MELANOGASTER HA SIDO COMPARADA CON LA DE D. SUBOBSCURA. HEMOS PODIDO IDENTIFICAR UNA SERIE DE SECUENCIAS QUE MUY POSIBLEMENTE ESTAN INVOLUCRADAS EN LA REGULACION DE SXL.

Autor: FERRER ALDEA MILAGROS.
Año: 1995.
Universidad: ALCALA .
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FISIOLOGIA Y FARMACOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA Y FARMACOLOGIA.

Resumen: ESTE TRABAJO HA CONSISTIDO EN LA CARACTERIZACION ESTRUCTURAL Y FUNCIONAL DEL COMPLEJO PLAQUETARIO GPIIB/IIIA (INTEGRINA ALFA IIB BETA 3) EN LA TROMBOASTENIA DE GLANZMANN. MEDIANTE EL ANALISIS CONFORMACIONAL DE DNA MONOCATENARIO Y ANALISIS POR RESTRICCION Y SECUENCIACION, DETECTAMOS LA PRESENCIA DE UNA TRANSICION DE G A A EN LA POSICION 1074 DEL CDNA DE LA GLUCOPROTEINA GPIIB, QUE CAUSA LA SUSTITUCION DE ARG 358 HIS EN UN FENOTIPO TROMBOASTENICO. TRANSFECTAMOS CELULAS CHO CON CDNA QUE CODIFICA LA FORMA MUTANTE DE GPIIB-HIS 358, DANDO LUGAR A UN DESCENSO EN LA EXPRESION EN SUPERFICIE DEL COMPLEJO ALFA IIB BETA 3 RESPECTO A LAS CELULAS TRANSFECTADAS CON CDNA SILVESTRE. EL ANALISIS DE INMUNOPRECIPITACION DEMOSTRO QUE LA SINTESIS, HETERODIMERIZACION Y MADURACION DE COMPLEJOS GPIIB/IIIA NO ESTAN IMPEDIDOS, SUGIRIENDO QUE LOS CAMBIOS CONFORMACIONALES DEPENDIENTES DE ARG 358 DEBEN JUGAR UN PAPEL ESENCIAL EN LA MADURACION Y/O TRANSPORTE DE HETERODIMEROS A LA MEMBRANA. MEDIANTE ESTUDIOS DE MUTAGENESIS DIRIGIDA, SE DEMOSTRO QUE EL FACTOR ETIOPATOGENICO DEL FENOTIPO TROMBOASTENICO NO VIENE DETERMINADO POR LA PERDIDA DE ARGININA, SINO POR LA PRESENCIA DE HISTIDINA. LA COTRANSFECCION DE CELULAS CHO CON CANTIDADES EQUIMOLARES DE CDNAS DE LAS FORMAS MUTANTE Y SILVESTRE DE GPIIB PRODUCE UNA MARCADA REDUCCION EN LA EXPRESION EN SUPERFICIE DE ALFA IIB BETA 3. ESTA OBSERVACION SUGIERE, EN CONSECUENCIA, LA EXISTENCIA DE UN EFECTO DOMINANTE NEGATIVO DE LA FORMA MUTANTE SOBRE LA EXPRESION DE LA FORMA SILVESTRE, LO CUAL PODRIA EXPLICAR LAS BASES MOLECULARES DEL REDUCIDO CONTENIDO DE LA INTEGRINA PLAQUETARIA, ALFA IIB BETA 3, EN LOS INDIVIDUOS HETEROCIGOTOS PARA DICHA MUTACION.

Autor: FERRER MARTINEZ ANDREU.
Año: 1995.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA.

Resumen: A DIFERENCIA DEL SISTEMA A DE TRANSPORTE DE AMINOACIDOS NEUTROS, LA NA+, K+ -ATPASA PARECE ESTAR DEBILMENTE MODULADA IN VIVO POR LA INSULINA EN EL HIGADO DE RATAS SOMETIDAS AL CLAMP EUGLUCEMICO-HIPERINSULINEMICO. EN UN MODELO DE HIPERINSULINEMIA ASOCIADO A RESISTENCIA A LA HORMONA, LA RATA ZUCKER GENETICAMENTE OBESA, TANTO LA ACTIVIDAD COMO LA EXPRESION DE LA BOMBA SE ENCUENTRA UNICAMENTE ALTERADAS EN AQUELLOS TEJIDOS QUE PRESENTAN HIPERTROFIA CELULAR Y ESTAN LIGADOS A LA ABSORCION Y PROCESADO DE NUTRIENTES. EN EL CASO DEL HIGADO SE PRODUCE ADEMAS UNA COINDUCCION ESTABLE DE DIVERSOS SISTEMAS DE TRANSPORTE DEPENDIENTES DE SODIO. LA INDUCCION DE LA NA+, K+-ATPASA PROBABLEMENTE SE ENCUENTRA ASOCIADA A LA HIPERTROFIA CELULAR, YA QUE LA BOMBA ES UN TRANSPORTADOR OSMOTICAMENTE SENSIBLE. ESTO ES FACILMENTE EVIDENCIABLE EN LINEAS CELULARES RENALES SOMETIDAS A UN ESTRES OSMOTICO, AUNQUE EL INCREMENTO QUE OCURRE EN LA ACTIVIDAD DE LA BOMBA DESPUES DE 9 HORAS DE TRATAMIENTO NO ES DEPENDIENTE DE LA SINTESIS DE PROTEINAS. SIN EMBARGO, UN CLARO INCREMENTO EN LA CANTIDAD DE ARNM DE LA SUBUNIDAD ALFA1, QUE PARECE SER DEBIDO A UN INCREMENTO EN LA TASA DE TRANSCRIPCION, SE DA EN ESTAS CELULAS. POR LO TANTO LA SUBUNIDAD ALFA1, DE LA NA+, K+-ATPASA PUEDE SER CONSIDERADA COMO UNA PROTEINA OSMOTICAMENTE SENSIBLE. ESTE CONTROL A LARGO PLAZO NO ES EXCLUSIVO DE LA BOMBA DE SODIO YA QUE OTROS TRANSPORTADORES, COMO EL COTRANSPORTADOR NA+/K+/2C1- Y EL SISTEMA XAG- DE TRANSPORTE DE AMINOACIDOS ANIONICOS SE ENCUENTRAN TAMBIEN INDUCIDOS.

Autor: FORONDA VAQUERO MIGUEL DE.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIAMOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL FACTOR DE CRECIMIENTO DE HIGADO (LGF) ES UN MITOGENO COMPLETO, CON ACTIVIDAD IN VIVO, ESPECIFICO DE HIGADO, CAPAZ DE INDUCIR UN AUMENTO EN EL PESO SECO DEL HIGADO EN LA SINTESIS DE ADN Y PROTEINA, EN EL NUMERO DE FIGURAS MITOTICAS Y DE CELULAS PCNA POSITIVAS Y LA SINTESIS DE COMPUESTOS DE ALTA ENERGIA. ADEMAS, ES CAPAZ DE REGULAR DETERMINADAS FUNCIONES DIFERENCIADORAS DE LOS HEPATOCITOS COMO LA SINTESIS DE ALBUMINA. DE TODOS LOS FACTORES DE CRECIMIENTO CARACTERIZADOS HASTA EL MOMENTO, ES EL PRIMERO EN DETECTARSE ELEVADOS SUS NIVELES EN SUERO DESPUES DE HEPATECTOMIA PARCIAL. EL LGF ES CAPAZ DE INTERFERIR EN EL METABOLISMO DE LOS LIPIDOS PROVOCANDO UNA ALTERACION EN EL EQUILIBRIO LIPIDICO EXISTENTE ENTRE EL TEJIDO ADIPOSO Y EL HIGADO. EN LAS PRIMERAS 12 HORAS DESPUES DE SU ADMINISTRACION, DESPLAZA EL METABOLISMO HEPATOCELULAR DE LOS ACIDOS GRASOS HACIA RUTAS OXIDATIVAS MITOCONDRIALES: POSTERIORMENTE ES CAPAZ DE INDUCIR UN AUMENTO EN LOS NIVELES DE LA PROTEINA TRANSPORTADORA DE ACIDOS GRASOS EN CITOSOL (L-FABP) Y EN LA ACTIVIDAD B-OXIDATIVA EN PEROXISOMAS. EL MODELO DE RATAS TRATADAS CON EL LGF ES PERFECTAMENTE VALIDO PARA SU UTILIZACION EN EL ESTUDIO DEL CRECIMIENTO DEL HIGADO.

Autor: FREIRE BETANCOR RAIMUNDO.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN EL TRABAJO PRESENTADO SE HA ABORDADO LA CARACTERIZACION DEL DOMINIO DE UNION AL DNA DE LA PROTEINA P6 DEL BACTERIOFAGO 029, ASI COMO EL MECANISMO POR EL CUAL ESTA PROTEINA ACTIVA LA INICIACION DE LA REPLICACION DEL FAGO 029.EN LA CARACTERIZACION DEL DOMINIO AL DNA, SE COMPROBO, POR ANALISIS DE PROTEINAS MUTANTES, QUE LOS AMINOACIDOS EN POSICIONES 2,5,6,9,10 Y 17 ESTABAN IMPLICADOS EN LA UNION A DNA. EL ESTUDIO DE UN PEPTIDO CON EL EXTREMO N-TERMINAL DE LA PROTEINA INDICABA QUE ESTA REGION FORMA UN ALFA-HELICE Y SE UNE A TRAVES DEL SURCO MENOR, CONSTITUYENDO UN NUEVO MOTIVO DE UNION AL DNA. ESTUDIOS DE UNION A DNA Y DE ACTIVACION DE LA INICIACION DE LA REPLICACION POR PROTEINAS HOMOLOGAS A LA P6 EN LOS BACTERIOFAGOS NF Y GA-1, RELACIONADOS CON 029, HAN PERMITIDO CONCLUIR QUE PARALA ACTIVACION DE LA REPLICACION POR LA PROTEINA P6 ES NECESARIO UN POSICIONAMIENTO ADECUADO DE ESTA RESPECTO AL ORIGEN DE REPLICACION, ASI COMO UN RECONOCIMIENTO ESPECIFICO POR PARTE DEL COMPLEJO PROTEINA TERMINAL-DNA POLIMERASA.

Autor: GARCIA CANTALEJO JESUS MANUEL.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA SECUENCIADO VARIOS FRAGMENTOS DEL GENOMA DE SACCHAROMYCES CEREVISIAE, QUE COMPRENDEN 12.0 Y 8.8 KILOBASES DE LOS CROMOSOMAS XI Y XIV, RESPECTIVAMENTE. MEDIANTE ANALISIS INFORMATICO DE ESTAS SECUENCIAS SE HAN IDENTIFICADO 14 FAES DE LECTURA ABIERTA MAYORES DE 300 NUCLEOTIDOS. CINCO DE ELLAS CORRESPONDEN A LOS GENES MTD1, PTR2, HBS1, NUP133 Y UBI, ANALIZADOS POR OTROS GRUPOS. LAS FASES DE LECTURA ABIERTA RESTANTES, YKRO81C,YKRO83C, YKRO89C, YKRO9OW E YKR091W EN EL CROMOSOMA XI YN2219, N2223, N2227 Y M2231 EN EL CROMOSOMA XIV, CORRESPONDERIAN A GENES NO DESCRITOS PREVIAMENTE. EN ELLAS Y SUS REGIONES PROMOTORAS SE HAN ENCONTRADO SECUENCIAS QUE PUEDEN APORTAR DATOS SOBRE SU FUNCION. YKR090W CODIFICARIA UNA PROTEINA CON DOS DOMINIOS LIM EN SU EXTREMO CARBOXITERMINAL. ESTE GEN NO ES ESENCIAL PARA EL CRECIMIENTO DE S. CEREVISIAE EN UNA AMPLIA VARIEDAD DE CONDICIONES NI EN LOS PROCESOS DE FUSION Y ESPORULACION. EL GEN N2223 CODIFICA UNA PROTEINA DEL GRUPO DE PEQUEÑAS PROTEINAS DE UNION A GTP Y NO ES ESENCIAL EN S. CEREVISIAE. EL GEN N2231 CODIFICA UNA PROTEINA CON UN DOMINIO ACIDO/BASICO Y SU DELECION NO AFECTA AL CRECIMIENTO DE S. CEREVISIAE.

Autor: GARCIA ESCUDERO RAMON.
Año: 1995.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN EL DESARROLLO DE ESTA TESIS DOCTORAL SE HAN CONSTRUIDO UNA SERIE DE PLASMIDOS QUE FACILITAN LA MANIPULACION GENETICA DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA (VPPA).SE DESCRIBEN PLASMIDOS QUE PERMITEN OBTENER VIRUS RECOMBINANTES LOS CUALES EXPRESEN EFICIENTEMENTE GENES EN LA FASE TARDIA DE LA INFECCION. ASIMISMO, SE DESCRIBEN PLASMIDOS PARA LA GENERACION DE VIRUS MUTANTES DE DELECION DE GENES VIRALES NO ESENCIALES PARA LA INFECCION EN CULTIVOS CELULARES. FINALMENTE, MEDIANTE LA TRANSFERENCIA AL VPPA DEL SISTEMA DE EXPRESION INDUCIBLE DEL OPERON LACTOSA DE ESCHERICHIA COLI, SE PRESENTAN PLASMIDOS QUE PERMITEN OBTENER VIRUS RECOMBINANTES QUE EXPRESEN, DE FORMA INDUCIBLE, GENES VIRALES EN LA FASE TARDIA DE LA INFECCION. LA EFICACIA DE ESTOS ULTIMOS PLASMIDOS FUE COMPROBADA MEDIANTE LA OBTENCION Y CARACTERIZACION DE UN VIRUS RECOMBINANTE QUE EXPRESA INDUCIBLEMENTE LA PROTEINA ESTRUCTURAL P72.

Autor: GARCIA MARTINEZ CONCEPCION.
Año: 1995.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EN ESTE TRABAJO HEMOS ENCONTRADO QUE LA UNION DEL REOVIRUS AVIAR AL RECEPTOR CELULAR INDUCE CAMBIOS CONFORMACIONALES EN LA PROTEINA VIRAL RESPONSABLE DE DICHA UNION. A CONTINUACION, HEMOS VISTO QUE, A PESAR DE QUE EL REOVIRUS AVIAR SE ADSORBE DE FORMA SIMILAR A CELULAS DE AVE Y A CELULAS DE MAMIFERO, LA PENETRACION DEL VIRUS ES MUCHO MENOS EFECTIVA EN ESTAS ULTIMAS. ESTO PARECE SUGERIR QUE LA EFICIENCIA DE PENETRACION DE LOS REOVIRUS EN LA CELULA DEPENDE DE ALGO MAS QUE DEL NUMERO DE RECEPTORES VIRALES QUE CONTIENE LA CELULA. TAMBIEN HEMOS PODIDO DEMOSTRAR QUE LOS REOVIRUS, TANTO AVIARES COMO DE MAMIFERO, PENETRAN EN LA CELULA POR ENDOCITOSIS, Y QUE LA ACIDIFICACION DE LOS ENDOSOMAS POR LA PROTON-ATPASA VACUOLAR ES NECESARIA PARA QUE SE PUEDA PRODUCIR LA DECAPSIDACION VIRAL. ADEMAS, NUESTROS RESULTADOS DEMUESTRAN QUE LA INHIBICION DE LA ACTIVIDAD DE ESTA ENZIMA BLOQUEA LA REPLICACION REOVIRAL Y PRODUCE UNA ACUMULACION DE PARTICULAS VIRALES EN EL INTERIOR DE LOS ENDOSOMAS, INDICANDO QUE LA DECAPSIDACION VIRAL ES UNA ETAPA ESENCIAL EN EL CICLO REPLICATIVO DE LOS REOVIRUS. ASIMISMO, SE COMPROBO QUE TANTO LOS REOVIRIONES COMO LAS PARTICULAS SUBVIRALES PARCIALMENTE DECAPSIDADAS IN VITRO (ISVPS), ALTERAN LA PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR A TIEMPOS TEMPRANOS, YA QUE SON CAPACES DE PROMOVER LA TRANSLOCACION DE LA TOXINA ALFA-SARCINA AL CITOPLASMA CELULAR. CUANDO SE BLOQUEA LA PROTON-ATPASA VACUOLAR ESTA TRANSLOCACION SE VE INHIBIDA SI LAS CELULAS SE INFECTAN CON REOVIRIONES, PERO NO SI SE INFECTAN CON ISVPS. ESTOS RESULTADOS JUNTO CON LOS OBTENIDOS POR MICROSCOPIA ELECTRONICA, SUGIEREN QUE LAS ISVPS PENETRAN EN LA CELULA ATRAVESANDO DIRECTAMENTE LA MEMBRANA CITOPLASMATICA.

Autor: GARCIA MARTINEZ JESUS.
Año: 1995.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA Y MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: ESCHERICHIA COLI ES EL PRINCIPAL AGENTE CAUSANTE DE INFECCIONES NOSOCOMIALES DEL TRACTO URINARIO. APLICANDO TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR AL ESTUDIO DE UNA POBLACION DE AISLADOS CLINICOS, JUNTO A DIVERSAS CEPAS DE REFERENCIA, SE HA DETERMINADO LA PRESENCIA DE DOS GRUPOS MAYORITARIOS DENTRO DE LA ESPECIE E. COLI, UNO DE LOS CUALES PARECE ESTAR MAS INTIMAMENTE RELACIONADO CON LA APARICION DE PATOLOGIAS DEL TRACTO URINARIO SUPERIOR SIN FACTORES CONDICIONANTES. ASI MISMO, DATOS DE DISTRIBUCION DE LA PRESENCIA DE ADHESINAS G PARECEN INDICAR QUE EXISTE ALGUN TIPO DE BARRERA DE INTERCAMBIO GENETICO ENTRE AMBOS GRUPOS. ESTOS RESULTADOS VIENEN A SER CONFIRMADOS POR DATOS DE BIOTIPO, DONDE SE APRECIA UNA CLARA DIFERENCIA EN LA ASIMILACION DE CIERTOS AZUCARES PARA LAS CEPAS DE UNO DE ESOS DOS GRUPOS.

Autor: GARCIA VILANOVA RUIZ JAVIER.
Año: 1995.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA.

Resumen: SE DETECTA EXPRESION DE RECEPTORES SCAVENGER EN CELULAS MONONUCLEADAS DE SANGRE PERIFERICA, OBSERVANDOSE UNA VARIABILIDAD EN LA EXPRESION DEL RECEPTOR SCAVENGER TIPO I EN RELACION A VARIACIONES DE LAS CONSTANTES BIOQUIMICAS DE LOS SUJETOS DE ESTUDIO.EL RECEPTOR SCAVENGER TIPO II PRESENTA UNA EXPRESION CONSTANTE EN LOS PBMC DE LOS SUJETOS DE ESTUDIO.SE HA PODIDO COMPROBAR UNA BAJA EXPRESION GENICA EN LA LINEA CELULAR YT (CELULAS NK) Y EN LA LINEA U937 (LINEA MONOCITICA), NO DETECTADA HASTA LA FECHA.SE HA DESARROLLADO UN METODO DE CUANTIFICACION DE MRNA BASADO EN LA OBTENCION Y POSTERIOR VALORACION DE UN PATRON INTERNO DE RNA ESPECIFICO DEL GEN. EL NUEVO METODO ESTA BASADO EN LA ADICION DEL PATRON INTERNO A LAS MUESTRAS PROBLEMAS Y SU METODOLOGIA LO HACE MAS PRACTICO, EXACTO, SENSIBLE Y REPRODUCIBLE QUE LOS RT-PCR PROPUESTOS HASTA AHORA.

Autor: GINE DOMINGUEZ ELENA.
Año: 1995.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR III PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA ESTUDIADO LA CONTRIBUCION DE LA PRODUCCION DE LACTATO Y OXIDACION DE GLUCOSA A SU VELOCIDAD DE UTILIZACION. LA PRODUCCION DE LACTATO SE INCREMENTA CON LA CONCENTRACION DE GLUCOSA HASTA 3 MM MIENTRAS QUE LA OXIDACION SE INCREMENTA 4 VECES CUANDO LA CONCENTRACION DE GLUCOSA AUMENTA DE 3 A 20 MM. LOS RESULTADOS INDICAN QUE LA PRODUCCION DE LACTATO ES EL PRINCIPAL PRODUCTO FINAL DE LA GLICOLISIS CATALIZADA POR LA HEXOQUINASA DE BAJO KM. SE ESTUDIO LA CAPACIDAD DE REGULAR LA FOSFORILACION DE GLUCOSA POR DIFERENTES SUSTRATOS MITOCONDRIALES. UNOS SUSTRATOS (D-GLICERALDEHIDO Y METILPIRUVATO) PRODUCEN UN DESCENSO DE UN 30% DE LA FOSFORILACION DE LA GLUCOSA, PROBABLEMENTE POR LA PRODUCCION MITOCONDRIAL DE ATP, A TRAVES DE LA INHIBICION EN CADENA DE LA PFK Y HEXOQUINASA. OTROS SUSTRATOS (PIRUVATO, GLUTAMINA, LEUCINA) NO MODIFICAN LA VELOCIDAD DE FOSFORILACION DE LA GLUCOSA. EL ESTUDIO DE LA DEPENDENCIA DE SU VELOCIDAD DE OXIDACION MITOCONDRIAL (SENSIBILIDAD A ROTENONA) CON RESPECTO A LA FOSFORILACION OXIDATIVA (SENSIBILIDAD A LA INHIBICION POR OLIGAMICINA) NOS LLEVO A CONCLUIR QUE EL ACOPLAMIENTO ENTRE AMBOS PROCESOS ES SELECTIVO, DEPENDE DEL SUSTRATO OXIDADO POR LAS CELULAS B. ESTA SELECTIVIDAD DE LA OLIGOMICINA SOBRE LA OXIDACION DE DIFERENTES SUSTRATOS PODRIA SER LA ESTRATEGIA UTILIZADA POR LAS CELULAS B PARA LLEGAR A SER EXCLUSIVAMENTE SENSIBLES A LA ESTIMULACION POR GLUCOSA.

Autor: GOMEZ ANGELATS MIREIA.
Año: 1995.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA .

Resumen: EL SISTEMA A SE ENCUENTRA PLENAMENTE ACTIVO DURANTE EL PERIODO NEONATAL DE MAMIFEROS, CON UNA ACTIVIDAD SUPERIOR AL ADULTO. LA SENSIBILIDAD A FACTORES HORMONALES ESTA DISMINUIDA EN LOS PRIMEROS ESTADIOS Y SE RECUPERA PROGRESIVAMENTE EN LA TRANSICION LACTANCIA-DESTETE. LA CORRELACION ENTRE EL ACUMULO INTRACELULAR DE AMINOACIDOS NEUTROS Y LA INDUCCION DEL SISTEMA A POR CAMBIOS DE OSMOLARIDAD, ES CONSISTENTE CON LA HIPOTESIS DE QUE EL SISTEMA A SUBMINISTRA SUSTRATOS AMINOACIDICOS COMO OSMOLITO INTRACELULARES. EL AUMENTO DEL SISTEMA A POR HIPEROSMOLARIDAD SE PRODUCE POR MECANISMOS QUE NO IMPLICAN LA MODIFICACION DEL NUMERO DE TRANSPORTADORES EN MEMBRANA, Y ES CONSISTENTE CON LA IDEA DE LA EXISTENCIA DE UN GEN O GRUPO DE GENES OSMOTICAMENTE SENSIBLES RESPONSABLES DE LA ACTIVACION DEL SISTEMA. LA INTEGRIDAD DEL CITOESQUELETO ES FUNDAMENTAL PARA LA INDUCCION DEL SISTEMA A DURANTE EL ESTRES HIPERTONICO, PERO EL GRADO DE IMPLICACION DE LAS DISTINTAS ESTRUCTURAS DEPENDE DEL GRADO DE POLARIDAD CELULAR. LA INDUCCION DEL SISTEMA A POR HIPEROSMOLARIDAD, NO ES UN FENOMENO RESTRINGIDO SINO CELULARMENTE UNIVERSAL.