BIOQUIMICA MOLECULAR, 75

Autor: CABALEIRO SOBRINO CRISTINA .
Año: 1994.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y FORESTAL.

Resumen: EL ENROLLADO ES UNA DE LAS PRINCIPALES ENFERMEDADES DE ORIGEN VIRAL DE LA VID, PRESENTE EN TODAS LAS ZONAS VITICOLAS DEL MUNDO. SE COMPROBO QUE EL ELISAES UN METODO DE DIAGNOSTICO FIABLE PARA VITIS VINIFERA PERO NO PARA OTRAS ESPECIES DE VITIS; EL INDEXAJE ES IMPRESCINDIBLE, TAMBIEN PARA OTROS VIRUS RELACIONADOS CON LA ENFERMEDAD Y NOCARACTERIZADOS. EN GALICIA EL GLRAV-III ES LA PRINCIPAL VIROSIS DETECTADA CON INCIDENCIA SUPERIOR AL 40%; SE DETECTO TAMBIEN POR PRIMERA VEZ EN ESPAÑA EL SEROTIPO I CON PRESENCIA PUNTUAL (4%). LA AGREGACION DE PLANTAS ENFERMAS EN VIÑEDOS DE LA D:O. RIAS BAIXAS PUEDE INDICAR QUE SE HA PRODUCIDO ACTUACION DE VECTORES; EN UNA PARCELA SE COMPROBO QUE COCHINILLAS PSEUDOCOCCIDAE INDENTIFICADAS COMO PLANOCOCCUS CITRI RISSO SON RESPONSABLES DEL AVANCE DE LA ENFERMEDAD DE UN 33 A UN 83% EN 5 AÑOS; SE COMPRUEBA EN CONDICIONES CONTROLADAS QUE P. CITRI ES VECTOR DE GLRAV-III. EN VIÑEDOS DE LA VARIEDAD ALBARIÑO EL GLRAV-III INDUCE UNA DISMINUCION EN EL CONTENIDO EN AZUCAR DEL MOSTO EN TORNO A 1 BRIX Y TIENE EFECTOS VARIABLES EN PRODUCCION Y VIGOR; EN AÑOS DE CLIMATOLOGIA ADVERSA LOS EFECTOS EN LA CALIDAD DEL MOSTO SON MAS PATENTES.

Autor: CAMALLONGA MARIN CARMEN.
Año: 1994.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: ANATOMIA HUMANA PROGRAMA DE DOCTORADO: CURSOS MONOGRAFICOS .

Resumen: EL CRECIMIENTO ES UN PROCESO TAN COMPLEJO QUE ES IMPOSIBLE ESTUDIARLO CON PRECISION EN SU TOTALIDAD. POR ESTO EL ESTUDIO ANTROPOMETRICO INCLUYE MEDICIONES, QUE REPRESENTAN NUMERICAMENTE LA EXPRESION DE UN RASGO EN FUNCION DE UNA ESCALA DE GRADUACIONES FIJAS, E INDICES, QUE EXPRESAN NUMERICAMENTE LAS RELACIONES PROPORCIONALES ENTRE DOS O MAS MEDICIONES. ESTE ESTUDIO ANTROPOMETRICO SE HACE A TRAVES DE UN CONJUNTO DE TECNICAS BIOMETRICA APLICADAS AL ESTUDIO Y VALORACION DEL CRECIMIENTO. DADA LA IMPORTANCIA DE LOS DATOS BIOMETRICOS Y LAS POCAS REFERENCIAS EN LA COMUNIDAD VALENCIANA, SE PLANTEA EL PRESENTE TRABAJO. HAN SIDO ESTUDIADOS LOS ADOLESCENTES DE LA COMARCA DE VALL D'ALBAIDA, DE EDADES ENTRE 15 Y 18 AÑOS AMBAS INCLUSIVE EN LOS INSTITUTOS CORRESPONDIENTES. HIPOTESIS PRETENDEMOS DEMOSTRAR QUE LOS DATOS ANTROPOMETRICOS EN EL INTERVALO DE EDAD DE ESTE TRABAJO, EN LA COMARCA LA VALL D'ALBAIDA, NO SE CORRESPONDEN CON LAS TABLAS HABITUALMENTE UTILIZADAS PARA EL CALCULO DEL DESARROLLO ANTROPOMETRICO. LAS MEDIDAS BIOMETRICA HAN SIDO ESCOGIDAS TENIENDO EN CUENTA LOS TRATADOS ANTROPOLOGICOS DE MARTIN, SALLER Y OLIVIER. OBJETIVOS DEL ESTUDIO - APORTAR MODELOS DE CRECIMIENTO Y DESARROLLO EN BASE A UN ESTUDIO ESTADISTICO ACTUALIZADO QUE PERMITA CONTROLAR UN CORRECTO DESARROLLO SOMATICO Y CEFALICO EN LA POBLACION ESCOGIDA. - RESALTAR EN CADA MOMENTO LOS INCREMENTOS ANUALES DE CADA UNO DE LOS PARAMETROS MEDIDAS, HACIENDO HINCAPIE EN LAS DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS. - OBTENER LOS INDICES CORRESPONDIENTES A LA POBLACION EN ESTUDIO. - REPRESENTAR GRAFICAMENTE LAS MEDIAS DE LOS PARAMETROS E INDICES ANTROPOMETRICOS ESTUDIADOS. - COMPARAR LOS MODELOS DE CRECIMIENTO DE LOS JOVENES ADOLESCENTES DE DICHA COMARCA CON LOS EXISTENTES EN OTRAS COMARCAS DE LA COMUNIDAD VALENCIANA, NACIONALES E INTERNACIONALES.

Autor: CAMPILLO FERNANDEZ M. LUZ.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: MEDIANTE HIBRIDACION CON EL GEN QUE CODIFICA PARA LA TOXINA DEL COLERA (CTXAB) SE HA CLONADO UN FRAGMENTO DE 2,6 KB DEL CROMOSOMA DE LISTERIA MONOCYTOGENES. LA SECUENCIA DE DICHO FRAGMENTO DESVELO LA EXISTENCIA DE DOS SECUENCIAS DE LECTURA ABIERTAS. LA PRIMERA DE ELLAS NO MOSTRO HOMOLOGIAS DE AMINOACIDOS CON OTRAS PROTEINAS; SIN EMBARGO LA SEGUNDA, SEPA, ES MUY HOMOLOGA A SECUENCIAS DE E. COLI, M. TUBERCULOSIS Y P. AERUGINOSA. LA SECUENCIA DE P. AERUGINOSA ES UNA ALQUIL SULFATASA Y LAS OTRAS NO TIENE FUNCION CONOCIDA. SE DEMOSTRO QUE L. MONOCYTOGENES NO POSEE ACTIVIDAD CONDROITIN SULFATASA EN LAS CONDICIONES UTILIZADAS. SE CONSTRUYO UN MUTANTE CROMOSOMICO DE SEPA MEDIANTE SUSTITUCION ALELICA, ESTE MUTANTE SE DENOMINO LOMLC2. LA ESTIRPE MUTANTE PRESENTA PROBLEMAS DE CRECIMIENTO DE BHI, ASI COMO ALTERACIONES EN LA MORFOLOGIA (SE OBSERVAN FILAMENTOS Y CADENAS DE BACILOS, PERO LOS SEPTOS ESTAN BIEN FORMADOS; EXISTEN ABERRACIONES DE TAMAÑO, DE FORMA Y ESTRUCTURAS SEUDOVESICULOSAS EN LA ZONA DEL SEPTO). EN LA ESTIRPE MUTANTE LOMLC2 EXISTE REDUCCION EN LA ACTIVIDAD N-ACETILGLUCOSAMINIDASA, MAYOR SENSIBILIDAD A ANTIBIOTICOS BETALACTAMICOS, ESPECIALMENTE A CEFOTAXIMA. EN CULTIVOS DE CELULAS EPITELIALES INVADE BIEN PERO NO PROLIFERA. SU DL50 ES MAYOR QUE EN LA ESTIRPE SILVESTRE.

Autor: CARRERA FERRER ELENA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: ESTE TRABAJO SE HA CENTRADO EN EL ESTUDIO DE LA COMPOSICION Y ESTRUCTURA DE LOS CARBOHIDRATOS DE LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL Y LAS VARIACIONES QUE TIENEN LUGAR CON EL DESARROLLO Y EL ENVEJECIMIENTO. LOS RESULTADOS MAS INTERESANTES SE RESUMEN A CONTINUACION: - LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL CONTIENE NEU5GC, NEU5AC Y SUS DERIVADOS ACETILADOS EN POSICION9. LAS ESPECIES MAYORITARIAS SON NEU5GC Y SU DERIVADO ACEILADO EN 9. - LA MEMBRANA INTERNA CONTIENE N Y O GLICOPROTEINAS Y TAMBIEN UN GLICOLIPIDO NEUTRO QUE CONTIENE GALACTOSA TERMINAL. - CON EL ENVEJECIMIENTO SE DETECTAN ALTERACIONES MORFOLOGICAS Y FUNCIONALES Y PARALELAMENTE SE OBSERVA UN AUMENTO EN LA GLICOSILACION DE LA MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL. - LA DIFERENCIA MAS ACUSADA ES LA GLICOSILACION ABERRANTE DE 2 PROTEINAS EN ANIMALES MUY VIEJOS Y LA ALTERACION EN LA ESTRUCTURA DE UN GLICOLIPIDO QUE CONTIENE GALACTOSA TERMINAL.

Autor: CARRODEGUAS VILLAR JOSE ALBERTO .
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO LA ENPRESION DEL GENOMA MITOCONDRIAL DEL CRUSTACEO ARTEMIA FRANCISCANA A NIVEL DE LA TRANSCRIPCION, SIENDO EL PRIMER TRABAJO DE ESTE TIPO QUE SE REALIZA EN UN SISTEMA INVERTEBRADO. SE HAN REALIZADO ESTUDIOS EN DOS LINEAS DISTINTAS PERO RELACIONADAS. POR UN LADO, SE HAN IDENTIFICADO LOS PRINCIPALES SITIOS DE INICIACION DE LA TRANSCRIPCION IN VIVO USANDO LA TECNICA DEL MARCAJE DE EXTREMOS 5' NACIENTES DE RNA CON LA ENZIMA GUANILIL TRANSFERASA DEL VIRUS DE LA VACUNA Y (ALFA- 32P)GTP(CAPPING IN VITRO). ESOS INICIOS DE TRANSCRIPCION SE HAN MAPEADO A NIVEL DE NUCLEOTIDO EMPLEANDO LAS TECNICAS DE EXTENSION DEL CEBADOR, PROTECCION A NUCLEASA S1 Y PROTECCION A RNASA. POR OTRO LADO, SE HA CONSTRUIDO EL MAPA DE TRANSCRIPCION MEDIANTE LA TECNICA DE NORTHERN, PARA LO CUAL SE HAN REALIZADO HIBRIDACIONES CON DISTINTOS TIPOS DE SONDAS DERIVADAS DE REGIONES CONCRETAS DEL GENOMA MITOCONDRIAL. ASI, SE HAN USADO SONDAS DE DNA DE CADENA DOBLE, SONDAS DE RNA (RIBOSONDAS) Y OLIGONUCLEOTIDOS DE CADENA SENCILLA. EL PRINCIPAL SITIO DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION DEL GENOMA MITOCONDRIAL DE ARTEMIA SE LOCALIZA EN EL MISMO EXTREMO 5' DEL RNA RIBOSOMICO (RRNA)12S, EN UNO DE LOS EXTREMOS DE LA REGION NO CODIFICANTE, RICA EN A T. ESE INICIO DE TRANSCRIPCION ES HETEROGENEO, OCURRIENDO A LO LARGO DE VARIOS NUCLEOTIDOS CONSECUTIVOS. LA SECUENCIA QUE RODEA ESE INICIO SE PUEDE PLEGAR EN UNA ESTRUCTURA SECUNDARIA CRUCIFORME. TODOS NUESTROS DATOS SUGIEREN LA EXISTENCIA DE, AL MENOS, UN SEGUNDO SITIO DE INICIO DE LA TRANSCRIPCION, USADO CON MENOS FRECUENCIA, SITUADO A UNOS 250 NUCLEOTIDOS CADENA ARRIBA RESPECTO AL ANTERIOR. ESTOS DOS SITIOS DARIAN CUENTA DE LA TRANSCRIPCION DE LA CADENA PESADA (H) DEL GENOMA MITOCONDRIAL DE ARTEMIA. LA BUSQUEDA DE UN SITIO DE INICIO PARA LA TRANSCRIPCION DE LA CADENA LIGERA (L) USANDO LAS MISMAS TECNICAS HA PRESENTADO MAYORES DIFICULTADES. NO OBSTANTE, SE HA IDENTIFICADO AL MENOS UN POSIBLE CANDIDATO A INICIO DE LA TRANSCRIPCION EN ESA CADENA. LA CONSTRUCCION DEL MAPA DE TRANSCRIPCION DEL GENOMA MITOCONDRIAL DE ARTEMIA NOS HA PERMITIDO CONCLUIR QUE ESTE GENOMA SE TRANSCRIBE EN FORMA DE UNIDADES POLICISTRONICAS INICIADAS EN UNO O POCOS PROMOTORES EN CADA CADENA, COMO EN OTROS SISTEMAS MITOCONDRIALES ANIMALES. ESOS TRANSCRITOS POLICISTRONICOS PRIMARIOS SON PROCESADOS POSTERIORMENTE A TRANSCRITOS MADUROS MEDIANTE LA UTILIZACION DE LOS RNAS DE TRANSFERENCIA (TRNAS) COMO SEÑALES DE PROCESAMIENTO. EL PROCESAMIENTO ES MENOS EFICIENTE EN LAS REGIONES DEL GENOMA EN QUE NO EXISTEN TRNAS. LA CADENA PESADA DE MTDNA SE TRANSCRIBE EN SU TOTALIDAD, INCLUIDA LA REGION PRINCIPAL NO CODIFICANTE, EN LA CUAL SE HAN MAPEADO TRANSCRITOS ESTABLES. SE HAN OBTENIDO DATOS QUE SUGIEREN LA EXISTENCIA DE TERMINACION BIDIRECCIONAL DE LA TRANSCRIPCION A NIVEL DEL TRNA DE LEUCINA.ÑÐ

Autor: CASALS FARRE NURIA.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: UNIDAD BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR; DEPT. CIENCIAS FISIOLOGICAS, HUMANAS Y DE LA NUTRICION; FACULTAD DE FARMACIA; UNIV. BARCELONA.

Resumen: SE HA ESTUDIADO LA EXPRESION DE LOS GENES HMG-COA SINTASA-1 (HMGS-1), HMG-COA SINTASA-2 (HMGS-2) Y HMG-COA REDUCTASA (HMGR) EN OVARIO Y CUERPO GRASO DE LA CUCARACHA "BLATTELLA GERMANICA" A LO LARGO DEL PRIMER CICLO GONADOTROFICO. SE HAN ANALIZADO LOS NIVELES DE MRNA Y PROTEINA DE LOS 3 GENES Y LOS NIVELES DE ACTIVIDAD HMG-COA SINTASA Y HMG-COA REDUCTASA. EL RESULTADO MAS INTERESANTE HA SIDO EL DESFASE OBSERVADO DE 2-4 DIAS ENTRE LOS MAXIMOS NIVELES DE MRNA Y LOS MAXIMOS NIVELES DE PROTEINA CORRESPONDIENTES A ESTOS 3 GENES A LO LARGO DEL CICLO GONADOTROFICO. LA VIA DE SINTESIS DE MEVALONATO EN CUERPO GRASO PROBABLEMENTE ESTE DIRIGIDA A LA GLICOSILACION VIA DOLICOL DE LAS VITELOGENINAS YA QUE SE HA OBSERVADO UN FUERTE PARALELISMO ENTRE LA VITELOGENESIS Y EL CICLO DE SINTESIS DE MEVALONATO EN CUERPO GRASO. TAMBIEN SE HA OBSERVADO QUE LA OVARIECTOMIA POR UN LADO Y LA ALATECTOMIA POR EL OTRO PROVOCAN UNA DESREGULACION DEL CICLO DE SINTESIS DE MEVALONATO EN CUERPO GRASO. PARECE QUE LA HORMONA JUVENIL ESTIMULA LA TRADUCCION DE LOS MRNAS DE LA HMGS-2 I HMGR EN CUERPO GRASO. LAS CELULAS EN CULTIVO UMBGE-1 DE "B. GERMANICA" NO EXPRESAN LA HMGS-2. EL TRATAMIENTO CON COMPACTINA INCREMENTA LA EXPRESION DE LA HMGR PERO NO LA DE LA HMGS-1 EN LAS CELULAS UM-BGE-1. FINALMENTE SE PROCEDIO AL AISLAMIENTO DEL GEN HMGS-1 DE "B. GERMANICA". LA HMGS-1 ES UN RETROGEN FUNCIONAL YA QUE ES UN GEN SIN INTRONES CON SECUENCIAS REPETIDA CORTAS EN AMBOS EXTREMOS DEL GEN. UN ESTUDIO FILOGENETICO DE LA DISTANCIA EVOLUTIVA PRESENTE ENTRE LAS 8 HMG-COA SINTASA DESCRITAS HASTA EL MOMENTO JUNTO CON EL ESTUDIO DEL PATRON DE UTILIZACION DE CODONES SINONIMOS (RSCU) SUGIEREN QUE EL GEN DE LA HMGS-1 SE INSERTO EN EL GENOMA DE "B. GERMANICA" MEDIANTE UNA TRANSFERENCIA HORIZONTAL.

Autor: CASANOVA HERNANDEZ BENITO.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA DISTROFIA MIOTONICA (DM) ES UNA ENFERMEDAD MULTISISTEMICA EN LA QUE APARECE AFECTADO EL SISTEMA ENDOCRINO, LA INCIDENCIA DE DIABETES MELLITUS Y DE INSULINORRESISTENCIA (IR) ES ALTA. DADO QUE EL PRIMER PASO PARA QUE LA INSULINA MEDIE SU ACCION ES LA UNION A SU RECEPTOR CELULAR (R1), Y QUE ESTE PARTICIPA POSTERIORMENTE EN LA TRANSMISION DE LA SEÑAL HORMONAL, EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO HA SIDO ESTUDIAR EL RI Y ASI DETERMINAR SI LA UNION DE LA INSULINA Y LOS POSTERIORES EVENTOS QUE TIENEN LUGAR ESTAN AFECTADOS POR FACTORES GENETICOS QUE PUDIESEN EXPLICAR ESA PROPENSION A LA IR QUE APARECE EN LA ENFERMEDAD. PARA ALCANZAR ESTE OBJETIVO HEMOS ESTUDIADO LAS CARACTERISTICAS CINETICAS DE UNION DE LA INSULINA A SU RECEPTOR, EL DESTINO QUE SIGUE LA INSULINA UNIDA A SUS RECEPTORES DE EBV-LONFOCITOS: Y LA CAPACIDAD DE LOS RI PARA MEDIAR LA TRANSMISION DE LA SEÑAL. HEMOS ENCONTRADO: 1) QUE EN EL GRUPO DE PACIENTES CON DM HAY UNA DISMINUCION EN LA ACCION DE LA INSULINA SOBRE LA AUTOFOSFORILACION DEL RI.2) QUE EN ESTE GRUPO DE PACIENTES CON DM LAS CARACTERISTICAS DE LA INTERACION INSULINA-RECEPTOR (CONSTANTES DE DISOCIACION, COOPERATIVIDAD, SENSIBILIDAD AL PH) NO MUESTRAN DIFERENCIAS CON LAS DEL GRUPO CONTROL. 3) QUE EL DESTINO QUE SIGUE LA INSULINA UNIDA A SUS RECEPTORES DE LOS EBV-LINFOCITOS DE LOS PACIENTES (DISOCIACION, ENDOCITOSIS DEL COMPLEJO INSULINA-RECEPTOR. DISOCIACION DEL COMPLEJO INTRACELULAR Y DEGRADACION DE LA INSULINA) ES SIMILAR AL GRUPO CONTROL. 4) QUE LA EXPRESION DEL GEN DE LA DM ES INDUCIBLE POR INSULINA EN SUJETOS NORMALES. EN LOS DOS PACIENTES CON CM ESTUDIADOS, EL AUMENTO DE EXPRESION OBSERVADO ES MENOR Y 5) RESALTAMOS LAS ALTERACIONES ENCONTRADAS EN UN PACIENTE CON DM Y CON IR QUE PODRIAN CONTRIBUIR A LA IR QUE SUFRE ESTE PACIENTE.

Autor: CASANOVA HERNANDEZ M. LLANOS.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HAN ANALIZADO LOS ELEMENTOS DE CONTROL EN CIS DEL GEN DE LA QUERATINA 8 HUMANA (GEN HK8) DURANTE LA EMBRIOGENESIS Y EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON. PARA ELLO SE HAN UTILIZADO DOS SISTEMAS MODELO: A) DIFERENCIACION IN VITRO DE LAS CELULAS STEM EMBRIONARIAS DE RATON A CUERPOS EMBRIONARIOS, QUE REPRODUCEN LOS ESTADIOS TEMPRANOS DE POSTIMPLANTACION DEL EMBRION DE RATON Y, B) RATONES TRANSGENICOS PARA EL ANALISIS DE ESTADIOS POSTERIORES DE LA EMBRIOGENESIS Y DE TEJIDOS ADULTOS. SE HA REALIZADO ADEMAS EL ESTUDIO FUNCIONAL DE LA QUERATINA 8 HUMANA, PARA ELLO SE HAN GENERADO RATONES EN LOS QUE SE FUERZA LA EXPRESION DE NIVELES ELEVADOS DE LA PROTEINA CODIFICADA POR EL GEN HK8. SE HAN COMPROBADO QUE EL FRAGMENTO GENOMICO DEL LOCUS DE HK8 DE 12 KB (HK8-12) QUE CONTIENE EL GEN ESTRUCTURAL Y SECUENCIAS 5' Y 3' FLANQUEANTES DE 1,1 Y 3,2 KB, SE EXPRESA DE FORMA ESPECIFICA DE TEJIDO EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS, ADEMAS CONFIERE EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON UN PATRON DE EXPRESION CON LA MISMA ESPECIFICIDAD TISULAR QUE LA QUERATINA 8 DE RATON, Y DETERMINA UN PATRON DE EXPRESION DURANTE EL DESARROLLO EMBRIONARIO SEMEJANTE AL DEL GEN ENDOGENO HOMOLOGO. EL ANALISIS DELECIONAL DEL GEN HK8 MOSTRO QUE LAS SECUENCIAS FLANQUEANTES DE 1,1 Y 2,5 KB NO CONFIEREN EXPRESION AL GEN LACZ DE E. COLI (QUE ES UTILIZADO COMO GEN MARCADOR) NI EN TEJIDOS ADULTOS DE RATONES TRANSGENICOS, NI EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS. EL PRIMER INTRON DEL GEN HK8 ES NECESARIO PARA CONFERIR ACTIVIDAD TRANSCRIPCIONAL AL GEN LACZ EN EL ENDODERMO EXTRAEMBRIONARIO DE LOS CUERPOS EMBRIONARIOS, AUNQUE DE MANERA INEFICIENTE, MIENTRAS QUE NO CONFIERE EXPRESION A LACZ EN TEJIDOS ADULTOS DE RATON. EN LA REGION COMPRENDIDA ENTRE LOS EXONES 5-8 DEL LOCUS DE HK8 EXISTE ALGUN ELEMENTO/S QUE FUNCIONA COMO ACTIVADOR DE LA EXPRESION GENICA. DE ESTOS RESULTADOS SE CONCLUYE QUE ES NECESARIA LA PRESENCIA DE LA REGION INTRAGENICA COMPLETA DEL GEN HK8 PARA QUE SE EXPRESE DE FORMA ESPECIFICA DE TEJIDO O QUE EL GEN MARCADOR LACZ DE E. COLI NO ES UN GEN NEUTRO PARA EL ESTUDIO DE REGULACION DEL GEN HK8, SINO QUE PUEDE INTERFERIR EN SU EXPRESION. LA SOBREEXPRESION DEL GEN HK8 CONDUCE A LA APARICION DE RATONES TRANSGENICOS CON UN FENOTIPO CARACTERISTICO: TAMAÑO PEQUEÑO Y PELO ERIZADO. ESTAS ALTERACIONES PUEDEN SER CAUSADAS POR LA INSUFICIENCIA PROTEOLITICA PANCREATICA O POR MODIFICACIONES HORMONALES COMO CONSECUENCIA DE LA ALTERACION MORFOLOGICA (Y PROBABLEMENTE FUNCIONAL) DE LA ADENOHIPOFISIS, QUE SE HA DEMOSTRADO QUE PRESENTAN ESTOS RATONES. ESTOS RESULTADOS INDICAN QUE ES NECESARIA LA EXPRESION DE LA QUERATINA 8 EN NIVELES FISIOLOGICOS EN LAS CELULAS, PARA EL BUEN FUNCIONAMIENTO DE UN TEJIDO.

Autor: CENARRO LAGUNAS ANA.
Año: 1994.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LAS ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES SON UNA DE LAS PRINCIPALES CAUSAS DE MORTALIDAD EN LA POBLACION OCCIDENTAL. LAS DISLIPEMIAS SON UN FACTOR DE RIESGO PARA ESTAS ENFERMEDADES, PERO SE DESCONOCEN LAS CAUSAS GENETICAS DE MUCHAS DE ELLAS. EN ESTE TRABAJO SE ABORDA EL ESTUDIO DE LAS BASES GENETICAS DE LA HIPOALFALIPOPROTEINEMIA Y DISBETALIPOPROTEINEMIA, QUE SON DOS DISLIPEMIAS CON UN ALTO FACTOR DE RIESGO PARA LA ENFERMEDAD CARDIOVASCULAR. PARA ELLO SE ESTUDIAN DIVERSAS FAMILIAS CON ESTOS FENOTIPOS Y SE REALIZA UN ANALISIS DE LIGAMIENTO CON MARCADORES GENETICOS EN GENES CANDIDATOS, ASI COMO EL ESTUDIO DIRECTO DE OTROS GENES IMPLICADOS. SE ENCUENTRA QUE EL 20% DE LAS HIPOALFALIPOPROTEINEMIAS PUEDEN SER DEBIDAS A DEFECTOS EN LA AGRUPACON DE GENES DE APO AI-CIII-AIV, PERO NO SE OBSERVA NINGUNA MUTACION QUE PUEDA SER RESPONSABLE DE ESTA DISLIPEMIA. SIN EMBARGO, SE ENCUENTRAN DOS MUTACIONES EN EL GEN DE APO E: UN CAMBIO DE UNA GLY POR UN ASP EN EL CODON 127 Y UN CAMBIO DE UNA ARG POR UN SER EN EL CODON 136, QUE SE ASOCIAN DE FORMA DOMINANTES CON EL FENOTIPO DE DISBETALIPOPROTEINEMIA.

Autor: CLEMENTE DE ARRIBA CELIA .
Año: 1994.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE REALIZA UN ESTUDIO EN MEMBRANAS CELULARES DE TEJIDO PROSTATICO VALORANDO LAS MODIFICACIONES QUE PUEDE SUFRIR EL SISTEMA DE TRANSDUCCION DE LA ADENILIL CICLASA, CUANDO ES ESTIMULADO POR VIP EN RATAS DIABETICAS, Y SU POSTERIOR RECUPERACION CON INSULINA. SE DETERMINA QUE LA DIABETES PROVOCA UNA DISMINUCION EN EL NUMERO DE RECEPTORES DE VIP, Y UNA MENOR EFICACIA DE LA ADENILIL CICLASA, ASI COMO UNA MENOR ACTIVIDAD DE LAS PROTEINAS G QUE INTERVIENEN EN EL PROCESO DE TRANSDUCCION. EL NUMERO DE RECEPTORES ES RECUPERABLE PARCIALMENTE CON TRATAMIENTO INSULINICO, MIENTRAS QUE NO LO ES LA PERDIDA DE EFICACIA DE LA ADENILIL CICLASA, Y SOLO SE RECUPERA EN PARTE ALGUNAS DE LAS PROTEINAS G. CUANDO SE ACTIVA EL SISTEMA POR OTRO RECEPTOR COMO LOS BETA-ADRENERGICOS, EL COMPORTAMIENTO ES DISTINTO, DEBIDO, AL MENOS PARCIALMENTE, A UNA MAYOR RIGIDEZ DE LA MEMBRANA CELULAR.

Autor: CONDE MURO CARMEN.
Año: 1994.
Universidad: ZARAGOZA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR.

Resumen: LA INYECCION NEONATAL DE CELULAS ESPLENICAS SEMIALOGENICAS INDUCE UNA TOLERANCIA ESPECIFICA FRENTE A LOS ALOANTIGENOS DEL DONANTE Y UN SINDROME AUTOINMUNE DENOMINADO ENFERMEDAD DE HUESPED CONTRA INJERTO (HVGD). ESTA ENFERMEDAD AUTOLIMITADA SE DESENCADENA POR LA PERSISTENCIA DE CELULAS TH 2 ALORREACTIVAS DEL HUESPED QUE RECONOCEN LOS ALOANTIGENOS DE CLASE II DEL MHC EN LAS CELULAS B DEL DONANTE Y LAS ESTIMULAS POLICIONALMENTE. EN ESTE TRABAJO, SE EVIDENCIA QUE LAS CELULAS T ALORREACTIVAS PERSISTEN DESPUES DE LA AUTOLIMITACION DE LA HVGD, YA QUE ES POSIBLE REINDUCIR LAS MANIFESTACIONES AUTOINMUNES REINYECTANDO CELULAS DEL DONANTE. ESTA PERSISTENCIA PARECE INDEPENDIENTE DE LAS CARACTERISTICAS GENETICAS DE LAS CEPAS DE RATONES UTILIZADOS. ESTAS CELULAS T ALORREACTIVAS NO SON EXCLUSIVAS DEL PERIODO PERINATAL, YA QUE LA ELIMINACION DE LOS LINFOCITOS T ENTRE 3 Y 5 SEMANAS TRAS LA INYECCION NEONATAL NO EVITA LA POSTERIOR PRODUCCION DE MANIFESTACIONES AUTOINMUNES. SIN EMBARGO, LAS CELULAS T ALORREACTIVAS PRODUCIDAS EN LA PRIMERA SEMANA SON SUFICIENTES PARA CAUSAR LA HVGD, YA QUE ESTA NO SE ATENUA POR LA TIMECTOMIA A LOS 7 DIAS DE EDAD. EL TRATAMIENTO PRECOZ CON ANTICUERPOS MONOCLONALES ANTI-CD4, BLOQUEANTES O CITOLITICOS, PREVINO LA HVGD SIN INTERFERIR CON LA INDUCCION DE TOLERANCIA NEONATAL. SIN EMBARGO, ESTE EFECTO NO PARECE DEBERSE A UNA TOLERIZACION DE LAS CELULAS TH2 ALORREACTIVAS PUESTO QUE LA REINYECCION CON CELULAS DEL DONANTE DESENCADENO DE NUEVO LA ENFERMEDAD.

Autor: CONEJERO ESPI CONCEPCION.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL AMINOACIDO TAURINA ES LIBERADO POR LAS CELULAS NERVIOSAS ANTE UNA PERTURBACION OSMOTICA DE FORMA QUE SE REDISTRIBUYE ENTRE LOS DIFERENTES COMPARTIMENTOS CELULARES. ANTE ESTA PERTURBACION LA CELULA AUMENTA SU VOLUMEN, PROCESO QUE SE HA DENOMINADO EDEMA CELULAR, PARA POSTERIORMENTE ALCANZAR EL VOLUMEN DE REPOSO MEDIANTE EL PROCESO DE REGULACION DE LA DISMINUCION DE VOLUMEN (RVD). DURANTE ESTE ULTIMO PROCESO LA TAURINA ES LIBERADA POR LA CELULA COMO UN OSMOLITO, DESCONOCIENDOSE EL SISTEMA DE TRANSPORTE IMPLICADO EN ESTA SALIDA DE TAURINA AL ESPACIO EXTRACELULAR. LOS INHIBIDORES DEL TRANSPORTE DE CLORURO INCLUYENDO AQUELLOS QUE INHIBEN EL INTERCAMBIADOR ANIONICO (CL/HCO3-) O BANDA-3 FUERON EFECTIVOS INHIBIENDO LA LIBERACION DE TAURINA POR LA CELULA EN LOS ESTUDIOS QUE SE REALIZARON EN EL HIPOCAMPO DE RATA IN VIVO MEDIANTE LA TECNICA DE MICRODIALISIS CEREBRAL. DADA LA HOMOLOGIA DEL 80% E IDENTIDAD DEL 70% EXISTENTE ENTRE LA PROTEINA BANDA-3 (AE1) DEL ERITROCITO Y LA ISOFORMA CEREBRAL DE BANDA-3 (AE3), LOS ESTUDIOS SE REALIZARON UTILIZANDO EN UN PRIMER MOMENTO EL MODELO ERITROCITARIO. ES CONOCIDO QUE EL ERITROCITO PRESENTA EN SU MEMBRANA UN ALTO NUMERO DE COPIAS DE BANDA-3, DEL ORDEN DE 10 6 COPIAS/CELULA. COMO PRIMER OBJETIVO TRAS COMPROBAR QUE EL ERITROCITO DE RATA ERA CAPAZ DE CAPTAR Y DE LIBERAR TAURINA, FUE CONFIRMAR LA PARTICIPACION DE LA PROTEINA DE MEMBRANA BANDA-3 EN ESTOS DOS PROCESOS. LOS EXPERIMENTOS DE ANTAGONISMO ENTRE TAURINA Y DIDS (INHIBIDOR POTENTE DEL INTERCAMBIO ANIONICO PROPIO DE LA BANDA-3) PERMITIERON SUGERIR QUE TAURINA SE CAPTABA AL INTERIOR DEL ERITROCITO COMO UN SUSTRATO PROPIO DE LA BANDA-3. EN UNA SEGUNDA ACTUACION TRAS LOS DATOS POSITIVOS OBTENIDOS EN EL MODELO ERITROCITARIO, SE REALIZARON LOS ESTUDIOS IN VIVO MEDIANTE LA UTILIZACION DE SONDAS DE DIALISIS IMPLANTADAS BILATERALMENTE EN LOS DOS HIPOCAMPOS DE LA RATA Y POSICIONADAS EN LA REGION CA1 GRACIAS AL REGISTRO DE LOS POTENCIALES PROVOCADOS CARACTERISTICOS DE LA ZONA. DISTINTOS INHIBIDORES DE LA BANDA-3 SE ADMINISTRARON POR DIFUSION DEL LIQUIDO PERFUNDIDO EN LAS SONDAS DE DIALISIS, ASI COMO EL INHIBIDOR DEL SISTEMA DE COTRANSPORTE CL/CATION (BUMETANIDA) CON LA FINALIDAD DE INHIBIR LA LIBERACION DE TAURINA PRODUCIDA POR EL ESTIMULO HIPOSMOTICO E IMPLICAR EN ESTE PROCESO A LA ISOFORMA CEREBRAL DE BANDA-3 (AE3), DESCARTANDO LA POSIBLE PARTICIPACION DEL SISTEMA DE COTRANSPORTE CL/CATION QUE TAMBIEN PARTICIPA CUANDO SE PRODUCE EL RVD DE LA CELULA. LA PARTICIPACION DE LOS DISTINTOS COMPONENTES CELULARES (NEURONAS Y GLIA) EN ESTE PROCESO DE LIBERACION DE TAURINA ANTE EL CHOQUE HIPOSMOTICO SE ESTUDIO MEDIANTE LA UTILIZACION DE LOS INHIBIDORES DE LA BANDA-3 EN CULTIVOS PRIMARIOS DE NEURONAS DE HIPOCAMPO Y CORTEZA, ASI COMO EN ASTROCITOS DE CORTEZA. LA UTILIZACION DE UNA NUEVA HERRAMIENTA DE TRABAJO, EL ANTICUERPO ANTI-BANDA-3 (OBTENIDO CONTRA EL DOMINIO TRANSMEMBRANA DE LA BANDA-3, LA ZONA EN QUE SE SITUA EL INTERCAMBIO DE ANIONES) TRATANDO DE INHIBIR LA LIBERACION DE TAURINA POR LA CELULA PERMITIO DIFERENCIAR DOS TIPOS DE MECANISMOS IMPLICADOS EN EL PROCESO: LA ISOFORMA CEREBRAL DE BANDA-3 EN NEURONAS Y OTRO MECANISMO QUE FUE SENSIBLE A LOS INHIBIDORES DE LA BANDA-3 PERO INSENSIBLE ANTE EL ANTICUERPO. ADEMAS, ESTOS DATOS SE CONFIRMARON CON TECNICAS INMUNOCITOQUIMICAS MEDIANTE EXPRESION DE LA ISOFORMA DE BANDA-3 EN LAS NEURONAS DE LOS CULTIVOS PRIMARIOS DE HIPOCAMPO Y CORTEZA, PERO NO ASI EN LOS CULTIVOS PRIMARIOS DE ASTROCITOS. POR ULTIMO, UNA ESTRATEGIA ALTERNATIVA FUE LA UTILIZACION DE ERITROCITOS HUMANOS DE ENFERMOS DE COREA-ACANTOCITOSIS QUE PRESENTAN UNA BANDA-3 CUYAS PROPIEDADES FUNCIONALES SE ENCUENTRAN COMPROMETIDAS, COMPROBANDO QUE LA CAPTACION DE TAURINA EN ESTOS ENFERMOS ES ANOMALA. LA PRESENCIA DE ACANTOCITOS (ERITROCITOS ESPICULADOS QUE EN LA ENFERMEDAD DE COREA-ACANTOCITOSIS CURSAN CON ALTERACIONES ESTRUCTURALES Y FUNCIONALES DE LA BANDA-3) EN OTROS DOS TIPOS DE PATOLOGIAS COMO SON LA ENFERMEDAD DE HUNTINGTON Y LA ATAXIA TELANGIECTASIA UNIDO A LOS TRASTORNOS NEUROLOGICOS, NOS LLEVARON A REALIZAR LOS EXPERIMENTOS DE CAPTACION DE TAURINA POR LOS ERITROCITOS, ENCONTRANDO CAPTACIONES DE TAURINA ANOMALAS SUGIRIENDO UNA POSIBLE PARTICIPACION DE LA ISOFORMA DE LA BANDA-3 CEREBRAL (DADA LA HOMOLOGIA QUE PRESENTA CON LA ERITROCITARIA) EN LA FISIOPATOLOGIA CEREBRAL DE ESTAS TRES ENFERMEDADES.

Autor: CORBALAN GARCIA M. SENENA.
Año: 1994.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR (A) PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HAN ESTUDIADO DIFERENTES ASPECTOS RELACIONADOS CON LA ESTRUCTURA Y FUNCION DE LA ATPASA, CONCRETAMENTE SE HA ESTUDIADO: -EL EFECTO DE CATIONES COMO ROJO RUTENIO SOBRE LA UNION DE CALCIO AL ENZIMA. -CARACTERIZACION DE LA PORCION TRANSMEMBRANAL DE LA PROTEINA. -MEDIDAS DE DIFERENTES DISTANCIAS INTRAMOLECULARES DE LA ATPASA. -EL EFECTO DE LA MODIFICACION QUIMICA CON FENILGLIOXAL. -LOCALIZACION DEL DOMINIO DE UNION DE CALCIO DE ALTA AFINIDAD. -MECANISMO DE AUTOINACTIVACION DE LA ATPASA EN ESTADO MONOMERICO.

Autor: COSGAYA MANRIQUE JOSE MIGUEL .
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: EL NGF Y EL ONCOGEN RAS INDUCEN LA DIFERENCIACION NEURONAL DE LAS CELULAS PC12. SE HA ANALIZADO LA INTERACCION DE ESTOS FACTORES CON LOS RECEPTORES NUCLEARES DE ACIDO RETINOICO (RA), HORMONAS TIROIDEAS (T3) Y VITAMINA D3. LA ADICION DE RA, PERO NO T3 O VITAMINA D3, A LAS CELULAS PC12 PRODUCE UN PROFUNDO BLOQUEO DE LA PROLIFERACION CELULAR, ASI COMO LA FORMACION DE ACUMULOS CELULARES GLOBULARES SIN EXTENSION DE NEURITAS. ESTOS EFECTOS VAN ACOMPAÑADOS DE CAMBIOS EN LA EXPRESION DE DIFERENTES GENES IMPLICADOS EN LA PROLIFERACION Y DIFERENCIACION NEURONAL. ASI, EL RA INDUCE UN AUMENTO EN LA EXPRESION DE P75 Y TIROSINA HIDROXILASA Y LA INDUCCION TRANSCRIPCIONAL DE TRANSINA. BIOQUIMICAMENTE, ESTOS EFECTOS SON SIMILARES A LOS OBTENIDOS EN LA DIFERENCIACION NEURONAL INDUCIDA POR NGF O RAS. ADICIONALMENTE, EL RA MODULA LA RESPUESTA DE DIFERENTES GENES, COMO NGFI-A Y NGFI-B AL NGF Y AL ONCOGEN RAS. TAMBIEN SE HA DEMOSTRADO QUE LAS CELULAS PC12 SECRETAN AL MEDIO DIFERENTES FACTORES DE CRECIMIENTO CAPACES DE ALTERAR LA PROLIFERACION DE OTROS TIPOS CELULARES. ENTRE ELLOS SE ENCUENTRA TGF-B1. TANTO EL RA COMO EL NGF INDUCE UN AUMENTO EN LA EXPRESION DEL GEN DE TGF-B1. ESTE EFECTO OCURRE A UN NIVEL TRANSCRIPCIONAL Y EN EL CASO DEL NGF REQUIERE LA PRESENCIA DE RAS FUNCIONAL EN LA CELULA.

Autor: COSTA VALLES CRISTINA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA DIABETES MELLITUS ES LA ENFERMEDAD METABOLICA MAS FRECUENTE EN HUMANOS. TODAS LAS FORMAS DE DIABETES MELLITUS SE CARACTERIZAN POR HIPERGLUCEMIA, LA FALTA RELATIVA O ABSOLUTA DE INSULINA, ASI COMO, POR EL DESARROLLO DE PATOLOGIA MICROVASCULAR EN RETINA Y GLOMERULO RENAL. LA MAYOR PARTE DE LA POBLACION DIABETICA SE INCLUYE EN LA CLASIFICACION DE DIABETES TIPO II. LA ETIOLOGIA DE ESTA ENFERMEDAD ES HETEROGENEA Y EN LA MAYORIA DE LOS CASOS AUN DESCONOCIDA. EL TRABAJO EXPERIMENTAL PRESENTADO EN ESTA TESIS DOCTORAL SE HA DIVIDIDO EN DOS PARTES: UNA CENTRADA EN EL ESTUDIO DEL EFECTO DE LA SOBREEXPRESION DE LA HORMONA DE CRECIMIENTO (GH) EN HIGADO DE CONEJOS TRANSGENICOS Y OTRA, EN EL PAPEL DE LA SOBREEXPRESION DEL FACTOR DE CRECIMIENTO SEMEJANTE A LA INSULINA I (IGF-I) EN CELULAS BETA DEL PANCREAS DE RATONES TRANSGENICOS. LA GH EJERCE EFECTOS PROMOTORES DEL CRECIMIENTO EN ANIMALES Y SE HA CONSIDERADO DE INTERES BIOTECNOLOGICO EN PRODUCCION ANIMAL. SIN EMBARGO, NIVELES CRONICAMENTE ELEVADOS DE GH, COMO EN EL CASO DE PACIENTES ACROMEGALICOS, TIENEN UNA MARCADA ACCION DIABETOGENICA CARACTERIZADA POR EL DESARROLLO DE UN CUADRO DE RESISTENCIA A LA INSULINA. LOS CONEJOS TRANSGENICOS QUE EXPRESAN HORMONA DE CRECIMIENTO BOVINA (BGH) NO PRESENTARON UNA MEJORA EN EL CRECIMIENTO, SINO UN CLARO PROCESO DIABETICO, CUYA EVOLUCION ESTABA DIRECTAMENTE RELACIONADA CON EL NIVEL DE EXPRESION DE BGH Y EL TIEMPO DE EXPOSICION A ESTA HORMONA. POR OTRO LADO, SE HA DESCRITO QUE LA INFUSION DE IGF-I INHIBE LA SECRECION DE INSULINA ACTUANDO EN LAS CELULAS BETA A TRAVES DE SU PROPIO RECEPTOR. RECIENTEMENTE, SE HA DETECTADO LA PRESENCIA DE IGF-I INMUNOREACTIVO EN LAS CELULAS ALFA DEL PANCREAS. PROBABLEMENTE EL IGF-I PRODUCIDO EN EL ISLOTE PODRIA REGULAR LA SECRECION DE INSULINA. CON EL FIN DE ESTUDIAR EL POSIBLE PAPEL DEL IGF-I EN LA PATOGENIA DE LA DIABETES, HEMOS OBTENIDO RATONES TRANSGENICOS QUE EXPRESAN IGF-I MURINO ESPECIFICAMENTE EN LAS CELULAS BETA DEL PANCREAS, BAJO EL CONTROL DEL PROMOTOR DE LA INSULINA DE RATA I. ESTOS ANIMALES SON HIPERINSULINEMICOS, HIPERGLUCEMICOS Y PRESENTAN UN TEST DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA ALTERADO. LA RESPUESTA INSULINOSECRETORA A ELEVADAS CONCENTRACIONES DE GLUCOSA ES DEFICIENTE EN ISLOTES OBTENIDOS DE LOS RATONES TRANSGENICOS. ADEMAS, LOS RATONES TRANSGENICOS QUE EXPRESAN EL GEN QUIMERICO RIP/IGF-I DESARROLLAN RETINOPATIA, GLAUCOMA Y CATARATAS, Y CONSTITUYEN EL UNICO MODELO DE DIABETES MELLITUS QUE DESARROLLA ESPONTANEAMENTE LAS COMPLICACIONES OCULARES DE LOS PACIENTES HUMANOS. POR TANTO, LA SOBREEXPRESION DE IGF-I EN LAS CELULAS BETA PUEDE TENER UN PAPEL ETIOLOGICO EN LA PATOGENIA DE LA DIABETES MELLITUS Y EN EL DESENCADENAMIENTO DE LAS COMPLICACIONES SECUNDARIAS DE LA ENFERMEDAD

Autor: DAROS ARNAU JOSE ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: 030A: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LOS ARNS DE TIPO VIROIDAL SON AGENTES PATOGENOS DE PLANTAS SUPERIORES CONSTITUIDOS POR UNA MOLECULA DE ARN CIRCULAR. LA PRESENTE INVESTIGACION SE HA CENTRADO EN DOS MIEMBROS DE ESTE GRUPO. EN PRIMER LUGAR SE HAN CARACTERIZADO UNA SERIE DE INTERMEDIARIOS DE LA REPLICACION DEL VIROIDE DEL MANCHADO SOLAR DEL AGUACATE (DOS ARNS SUBGENOMICOS DE DISTINTA POLARIDAD, UN ARN SUPRAGENOMICO DE POLARIDAD POSITIVA Y EL ARN MONOMERICO CIRCULAR DE POLARIDAD NEGATIVA), QUE HAN PERMITIDO CONCLUIR QUE ESTE VIROIDE SE REPLICA A TRAVES DE UN MECANISMO DE CIRCULO RODANTE SIMETRICO CON INTERMEDIARIOS DE ARN Y EN EL QUE LAS RIBOZIMAS DE CABEZA DE MARTILLO PRESENTES EN LAS CADENAS DE AMBAS POLARIDADES ACTUAN EN EL PROCESAMIENTO IN VIVO DE LOS OLIGOMEROS. POR OTRO LADO SE HA CARACTERIZADO MOLECULARMENTE UN ARN DE TIPO VIROIDAL PRESENTE EN ALGUNAS PLANTAS DE CLAVEL. SUS CADENAS DE AMBAS POLARIDADES PRESENTAN ESTRUCTURAS RIBOENZIMATICAS DE CABEZA DE MARTILLO QUE SON FUNCIONALES IN VITRO. UN ESTUDIO DE LOS ARNS CON LOS QUE SE PRESENTA ASOCIADO IN VIVO HA LLEVADO A CONCLUIR QUE SE REPLICA A TRAVES DE UN MECANISMO DE CIRCULO RODANTE SIMETRICO CON INTERMEDIARIOS DE ARN CON LA INTERVENCION AL MENOS DE LA RIBOZIMA DE CABEZA DE MARTILLO DE POLARIDAD NEGATIVA; EN EL CURSO DE LA REPLICACION OCURREN NUMEROSOS FENOMENOS DE RECOMBINACION DE SECUENCIA PROBABLEMENTE A TRAVES DE UN MECANISMO DE CAMBIO DE MOLDE. SE HA COMPROBADO QUE EL ARN DE TIPO VIROIDAL DE CLAVEL TIENE PROPIEDADES PARTICULARES, PUESTO QUE NO SE TRANSMITE HORIZONTALMENTE Y COEXISTE CON SECUENCIAS EN FORMA DE ADN INTEGRADAS EN UN ELEMENTO EXTRACROMOSOMICO DEL QUE TAMBIEN FORMAN PARTE SECUENCIAS DERIVADAS DEL PARARRETROVIRUS DEL ANILLO GRABADO DEL CLAVEL. POR ESTA RAZON HA SIDO CLASIFICADO COMO UN ELEMENTO RETROVIROIDAL.

Autor: DIAZ GARCIA ANTONIO RAFAEL.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA RIBONUCLEASA VI DE ARTEMIA ES UN ENZIMA INHIBIDO FUERTE Y ESPECIFICAMENTE POR EL NUCLEOTIDO 2'-CMP, PERO NO SE SABIA SI EXISTIAN EN ARTEMIA ENZIMAS CAPACES DE SINTETIZAR ESTE COMPUESTO. HEMOS REALIZADO UN ESTUDIO SOBRE LA PRESENCIA DE ENZIMAS CAPACES DE SINTETIZAR 2'-CMP EN ARTEMIA Y OTROS ORGANISMOS, HACIENDO USO DE LA GRAN Y ESPECIFICA SENSIBILIDAD DE LA RIBONUCLEASA VI A INHIBICION POR ESTE NUCLEOTIDO. HEMOS ENCONTRADO EN ARTEMIA UNA ACTIVIDAD QUE SINTETIZA 2'-CMP Y OTROS NUCLEOSIDOS 2'-MONOFOSFATOS A PARTIR DE LOS CORRESPONDIENTES NUCLEOSIDOS 2'3'-MONOFOSFATO CICLICOS. EL ENZIMA SE ENCUENTRA EN GASTRULAS ENQUISTADAS Y SU ACTIVIDAD ESPECIFICA AUMENTA 10-15 VECES DURANTE EL DESARROLLO LARVARIO. EL ENZIMA SE HA PURIFICADO A PARTIR DEL CITOSOL DE QUISTES (ALREDEDOR DE 2.000 VECES, EN TERMINOS DE ACTIVIDAD ESPECIFICA) Y DE NAUPLIAS (ALREDEDOR DE 100 VECES). EL ENZIMA PURIFICADO ES UNA PROTEINA DE PESO MOLECULAR DE 55.000-60.000, QUE SE PUEDE DISOCIAR EN SUBUNIDADES ACTIVAS DE PESO MOLECULAR ALREDEDOR DE 25.000. TIENE UN PH OPTIMO DE 7,5, NO REQUIERE METALES DIVALENTES PARA SU ACTIVIDAD, ES INHIBIDA POR ZN2+ E INACTIVADA POR CU2+. LA ACTIVIDAD DEPENDE DE LA INTEGRIDAD DE GRUPOS -SH PERO NO DE LOS -SS-. EL ENZIMA HIDROLIZA NUCLEOSIDOS 2',3'- MONOFOSFATO CICLICOS DE PURINAS CON MAYOR EFICIENCIA QUE LOS DE LAS PIRIMIDINAS. LOS VALORES DE KM APARENTES PARA 2',3'-CGMP, 2',3'-CAMP, 2',3'-CCMP, 2',3'-CUMP, SON RESPECTIVAMENTE 2, 2, 5 Y 14 MM, Y LA KM PARA EL 2',3'-CNADP, ES 0,2 MM. EL ENZIMA ES INHIBIDO COMPETITIVAMENTE POR LOS PRODUCTOS DE REACCION: LOS VALORES DE KI PARA 2'-AMP, 2'-GMP, 2'-CMP, 2'-UMP, SON RESPECTIVAMENTE 0,9; 0,8; 2 Y 2 MM. OTROS ANALOGOS ESTRUCTURALES (NUCLEOSIDOS 3'-MONOFOSFATO, NUCLEOSIDOS 5'-MONO, DI Y TRIFOSFATO, NUCLEOSIDOS 3',5'-MONOFOSFATO CICLICOS, Y NUCLEOSIDOS) TIENEN POCO EFECTO SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. EL ENZIMA NO ES ACTIVO SOBRE NUCLEOSIDOS 3',5'- MONOFOSFATO CICLICOS. EN UNA BUSQUEDA DE LA PRESENCIA DE ESTA ACTIVIDAD EN OTROS ORGANISMOS, HEMOS ENCONTRADO QUE EL HONGO FILAMENTOSO FUSARIUM CULMORUM CONTIENE TAMBIEN UN ENZIMA ACTIVO SOBRE NUCLEOSIDOS 2',3'-MONOFOSFATO CICLICOS, DANDO COMO PRODUCTO DE REACCION EL NUCLEOSIDO 2'-MONOFOSFATO. ESTA ACTIVIDAD NO ESTA PRESENTE EN ESCHERICHIA COLI, SACCHAROMYCES CEREVISIAE, DICTYOSTELIUM DISCOIDEUM Y DROSOPHILA MELANOGASTER, AUNQUE ESTOS SISTEMAS CONTIENEN ENZIMAS ACTIVOS SOBRE NUCLEOSIDOS 2',3'-MONOFOSFATO CICLICOS QUE DAN, COMO PRODUCTOS DE REACCION, LOS CORRESPONDIENTES NUCLEOSIDOS 3'-MONOFOSFATO O EL NUCLEOSIDO (E. COLI).

Autor: DIAZ JULLIEN CRISTINA.
Año: 1994.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA PROTIMOSINA ALFA ES UN POLIPEPTIDO CUYA FUNCION, APARENTEMENTE RELACIONADA CON LA PROLIFERACION CELULAR, ES EJERCIA EN EL NUCLEO. CON EL PROPOSITO DE CARACTERIZAR BLANCOS INTRACELULARES DE PROTIMOSINA ALFA QUE PERMITAN ESCLARECER SU FUNCION, LLEVAMOS A CABO EL AISLAMIENTO DE COMPONENTES CELULARES CON AFINIDAD POR PROTIMOSINA ALFA MEDIANTE CROMATOGRAFIA SOBRE SEPHAROSA-PROT ALFA. EN ESTA INVESTIGACION ENCONTRAMOS QUE LA PROTIMOSINA ALFA SE UNE ESPECIFICAMENTE A ALGUNAS PROTEINAS CITOSOLICAS Y NUCLEARES, ENTRE LAS QUE SE ENCUENTRAN LAS HISTONAS Y UNA PROTEINA QUINASA CON ALTA AFINIDAD POR PROTIMOSINA ALFA. LA PROTIMOSINA ALFA INTERACCIONA CON TODAS LAS HISTONAS, AUNQUE CON MAYOR AFINIDAD POR LAS H3 Y H4; EN ESTA INTERACCION PARTICIPAN TANTO SU REGION N-TERMINAL COMO LA REGION ACIDICA CENTRAL. LA PROTIMOSINA ALFA, EN COOPERACION CON COMPONENTES CELULARES DE TIMOCITOS SEPARADOS POR CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD, Y ATP, TIENE LA CAPACIDAD PARA PROMOVER EL ENSAMBLAJE DE NUCLEOSOMAS IN VITRO. LA ENZIMA QUE FOSFORILA A PROTIMOSINA ALFA SE ENCUENTRA PREFERENTEMENTE EN EL CITOSOL.

Autor: DUFOUR SAVE FRANCIS.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: -CENTRE NATIONAL UNIVERSITAIRE SUD CALCUL-(CNUSC) MONTPELLIER (FRANCIA)..

Resumen: HERRAMIENTAS EFICACES EN SISTEMAS SIMPLIFICADOS SON MENOS PRODUCTIVOS EN SIMULACION DE MODELOS MOLECULARES POCO RESTRINGIDOS, AÑADIENDO ASI CONDICIONES EN SUS ELECCIONES. VARIABLES PUEDEN VENIR A SER POCO CUALIFICADAS PARA INTERPRETAR UNA FORMA, AUN MAS UNA ACTIVIDAD. LA EFICACIA DE LOS DESCRIPTORES DISMINUYE CUANDO CRECE LA COOPERATIVIDAD, QUE EVIDENCIA, AL EQUILIBRIO DEL REPLIEGUE DE LA PROTEINA, LA DISPROPORCION ENTRE CAMBIOS ESTRUCTURALES Y ENERGETICOS. VARIABLES DE ESTADO DE FUNCIONES TERMODINAMICAS DIFERENCIAN DIFICILMENTE LAS INTERPRETACIONES, SIN PRECOPILACION PREVIA ESPECIFICA DE PDBS. INTRODUCIMOS UN COMPLEMENTO AL ANALISIS CONFORMACIONAL CLASICO, CON METODOS MULTIVARIANTES, ADECUADOS AL VOLUMEN DE LOS DATOS Y ROBUSTOS A SU DISTRIBUCION. CON UN MODELO DE TRABAJO DE LA CALMODULINA, SE ITERA UN PROTOCOLO, QUE EN UN PRIMER TIEMPO GENERA SERIES DE CONFIGURACIONES DINAMICAS Y SUS 3D VECTORES DE AUTOCORRELACION (ACVS). UN FILTRO MULTI-OBJETIVOS SIENDO AUSENTE, EL ACV SE MUESTRA COMO UN DESCRIPTOR BIEN EQUILIBRADO ENTRE PRECISION CONCISION Y SENSITIVIDAD/COMPLEJIDAD, REDUCIENDO EL VOLUMEN IMPORTANTE DE DATOS. ESTE PROTOCOLO DE CALCULOS PERMITE EN LAS DINAMICAS: -DAR REPRESENTACIONES SINTETICAS, QUE FAVORECEN EL ANALISIS MULTIVARIANTE EN LA BASE COMPLETA, DIFERENCIANDO ASI CONJUNTOS DE PS-CONFIGURACIONES QUE SON PROXIMOS, EVIDENCIANDO LA ESTABILIDAD O LA COORDINACION DE RASGOS BASICOS, O CAMBIOS SIGNIFICATIVOS; -AGRUPAR, POR CLASIFICACION JERARQUICA O ANALISIS FACTORIAL EN EL TIEMPO (?CONFORMACIONES?) O DISTANCIAS INTERATOMICAS (?DOMINIOS?), MOSTRANDO PARTICULARMENTE EFECTOS DE MODIFICACIONES FISICO-QUIMICAS INTRODUCIDAS A PRIORI; -PROYECTAR TRAYECTORIAS EN UN ESPACIO DE DIMENSION 2 DONDE SE GRADUA EL EFECTO DE LA RETIRADA DE CADA ION CA++ POR LINEALIZACION, O DE DIMENSION1 DONDE SE COMPARAN SERIES O SE BUSCAN EN EL ESPECTRO MOVIMIENTOS COLECTIVOS CICLICOS POR ANALISIS FACTORIAL O FT. CON UNA PROPIEDAD QUIMICA, LOS ACVS, SIENDO VECTORES, PERMITEN CALCULOS EXTRINSECOS, POR SIMPLE EXTENSION ANALITICA CROMATIZANDO LA FORMA EN UN INDICE VALORADO EN LOS ATOMOS, PARA DETECTAR CUANDO O DONDE, Y CUANTIFICAR CUANTO LA PROPIEDAD NO PARECE DEDUCTIBLE DE LA GEOMETRIA. TAL PROTOCOLO DE CALCULO, PARAMETRADO, INICIADO SOLO EN TRES FICHEROS (CONECTIVIDAD, PDB, Y POTENCIALES), ACELERA LA CONVERGENCIA BIEN CONTROLADA DE LOS DATOS, A PARTIR DE UN SISTEMA MOLECULAR POCO RESTRINGIDO. AL HACER RAPIDAMENTE QUE EMERGEN RASGOS ESTRUCTURALES O QUIMICOS, APARECE COMO UNA META COHERENTE DE RETROACCION PARA PRECOZMENTE COMPROBAR DATOS EXPERIMENTALES Y ENFOCAR 'BUENOS' INTERROGANTES. DE MOMENTO, FALTAN UN REFERENCIAL CRITICO DE CONJUNTOS DE ACVS Y EXPLICITAMENTE PROCESAR VARIABLES DE ENERGIA.

Autor: ELDUQUE PALOMO CARMEN.
Año: 1994.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: VETERINARIA.
Centro de realización: PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA Y DESARROLLO.

Resumen: EN ESTA MEMORIA, SE HAN UTILIZADO SONDAS HETEROLOGAS (HUMANAS) DE OCHO LOCITO- AMINALSA (AMY1), ABUMINA (ALB), ANHIDRASA CARBONICA2 (CA2), -HEMOGLOBINA (HBB), NUCLEOSIDO FOSFORILASA (NP), TRASFERRINA (TF), PROTEINA ACTIVADORA DE ESFINGOLIPIDOS2 (SAP2) Y LA SUBUNIDAD DEL FACTOR DE CRECIMIENTO NERVIOSO (NGFB)- CON EL OBJETIVO GENERAL DE APORTAR NUEVA INFORMACION EN EL DESARROLLO DEL MAPA GENICO BOVINO SE HAN UTILIZADO SIETE ENZIMAS DE RESTRICCION (BAMHI, BGIII, ECORI, HINDIII, MSPI, PSTI Y TAGI) EN LA BUSQUEDA DE POLIMORFISMOS DE LA LONGITUD DE LOS FRAGMENTOS DE RESTRICCION O RFLPS. EN TODOS LOS CASOS, A EXCEPCION DE LA SONDA CA2, SE HAN ENCONTADO RFLPS SE HA ESTUDIADO LA SEGREGACION DE LOS DISTINTOS FRAGMENTOS POLIMORFICOS EN FAMILIAS DEMADIO HERMANOS Y, CUANDO HA SIDO POSIBLE, SE HAN DESCRITO LAS RELACIONES ALELICAS ENTRE ELLOS. ASIMISMO SE HAN CALCULADO LAS FRECUENCIAS ALELICAS, LOS VALORES DE CONTENIDO EN INFORMACION POLIMORFICA O PIC, Y LA HETEROCIGOSIDAD OBSERVADA EN LAS POBLACIONES ESTUDIADAS UTILIZADO LA TECNICA DE SOUTHERN BLOTTING SE HA ANALIZADO UN PANEL DE CELULAS SOMATICAS HIBRIDAS BOVINO-ROEDOR Y SE HA ASIGNADO EL LOCUS SAP2 AL GRUPO DE SINTENIA U29 (BTA 28) Y EL LOCUS NGFB AL GRUPO DE SINTENIA U6 (BTA3) ESTE ESTUDIO NOS INDICA QUE EXISTEN FUERTES CORRELACIONES ENTRE ALGUNOS RFLPS Y LOS ALELOS DE LAS PROTEINAS ALBUMINA Y -HEMOGLOBINA