BIOQUIMICA MOLECULAR, 78

Autor: LOPEZ BARTOLOME RAFAEL.
Año: 1994.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS .

Resumen: ES BIEN CONOCIDO QUE LA ACTIVIDAD DE LOS INTERCAMBIADORES SODIO-PROTON Y CLORURO-BICARBONATO ESTA INCREMENTADA EN LOS LINFOCITOS Y OTRAS CELULAS SANGUINEAS DE PACIENTES CON HIPERTENSION ARTERIAL ESENCIAL. EN EL PRESENTE TRABAJO, HEMOS INVESTIGADO SI UN INCREMENTO EN LOS NIVELES DE LOS MRNA ESPECIFICOS DE ESTAS PROTEINAS EN LOS LINFOCITOS DE LOS PACIENTES HIPERTENSOS, PUDIERA EXPLICAR ESE INCREMENTO EN LA ACTIVIDAD OBSERVADO. VEINTIDOS PACIENTES HIPERTENSOS Y VEINTIUNO NORMOTENSOS FUE LA MUESTRA ESTUDIADA. EN LOS LINFOCITOS DE ESTOS SUJETOS SE REALIZARON MEDIDAS DEL PH BASAL, LA ACTIVIDAD MAXIMA DEL INTERCAMBIADOR SODIO-PROTON Y CLORURO-BICARBONATO (DEPENDIENTE E INDEPENDIENTE DE NA+), Y LA EXPRESION GENICA DE LAS ISOFORMAS NHE-1, AE1 Y AE2. EL PHI BASAL Y LA ACTIVIDAD MAXIMA SE REALIZARON POR TECNICAS DE CITOMETRIA DE FLUJO UTILIZANDO EL 2'-7'-BIS (2-CARBOXIETIL)-5(6)-CARBOXIFLUORESCEINA. EL NIVEL DE TRANSCRIPCION DE LOS GENES NHE-1, AE1 Y AE2 SE MIDIO UTILIZANDO LA TECNICA RT-PCR (TRANSCRICION REVERSA-REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA, COMPARANDOLA CON LA EXPRESION DE UN GEN CONSTITUTIVO DE REFERENCIA, LA BETA-ACTINA. EL PH INTRACELULAR ESTABA SIGNIFICATIVAMENTE DISMINUIDO EN LOS INDIVIDUOS HIPERTENSOS RESPECTO A LOS NORM,OTENSOS. LA ACTIVIDAD MAXIMA NA+/H+ ERA MAYOR EN HIPERTENSOS QUE EN LOS NORMOTENSOS Y EL MRNA ESTABA AUMENTADO EN LOS SUJETOS HIPERTENSOS RESPECTO DE LOS NORMOTENSOS. ESTOS DATOS SUGIOEREN QUE EL INCREMENTO OBSERVADO EN LA ACTIVIDAD NA+/H+ EN LOS LINFOCITOS DE SUJETOS HIPERTENSOS PUEDE ESTAR RELACIONADO CON PROCESOS DE CONTROL PRETRADUCCIONAL. POR OTRO LADO, NO SE OBSERVARON DIFERENCIAS SIGNIFICATIVAS NI EN LA ACTIVIDAD MAXIMA DE LOS INTERCAMBIADORES C1-/CO3H- (DEPENDIENTE E INDEPENDIENTE DE NA+) NI EN LA EXPRESION DE LOS GENES AE1 Y AE2 EN LOS LINFOCITOS DE LOS PACIENTES HIPERTENSOS RESPECTO A LOS NORMOTENSOS.

Autor: LOPEZ CARRANZA ANA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LOS GENES DE LOS FACTORES DE CRECIMIENTO PROINSULINA/INSULINA E IGF-I ESTAN EXPRESADOS DE FORMA REGULADA DURANTE EL DESARROLLO DE LA RETINA NEURAL DE POLLO. LOS GENES DE LOS RECEPTORES DE INSULINA Y DE IGF TIPO I SE EXPRESAN DE FORMA BASICAMENTE CONSTANTE EN TODAS LAS EDADES ESTUDIADAS DEL DESARROLLO DE LA RETINA NEURAL DE POLLO. EN LA RETINA PIGMENTARIA TAMBIEN SE EXPRESAN DURANTE EL DESARROLLO LOS GENES DE PROINSULINA/INSULINA, CON UN PATRON DIFERENTE AL DE LA RETINA NEURAL, Y DE IGF-I. EN EL ENTORNO DE LA NEURORRETINA, EN EL HUMOR VITREO DE E6 Y E8, SE DETECTA UN PEPTIDO CON LAS CARACTERISTICAS DE LA PROINSULINA. ESTOS DATOS MUESTRAN QUE LOS PRODUCTOS DE LOS GENES DE PROINSULINA/INSULINA Y DE IGF-I ESTAN ACCESIBLES A LA RETINA EN DESARROLLO. EN CULTIVOS ORGANOTIPICOS DE RETINA NEURAL LA ADICCION DE INSULINA, PROINSULINA E IGF-I ESTIMULAN LA SINTESIS DE DNA Y PROTEINAS DE FORMA DEPENDIENTE DE LA CONCENTRACION DE PEPTIDOS. FACTORES DE LA FAMILIA DE LOS FGFS, INCLUIDAS LAS VARIANTES FGF1-126, FGF1-139 Y FGF1-154, Y EL FGF-2, SON CAPACES DE ESTIMULAR LA SINTESIS DE DNA EN CULTIVOS ORGANOTIPICOS DE NEURORRETINA. LA PRESENCIA DEL EPITELIO PIGMENTARIO INHIBE LA SINTESIS DE DNA POR LA NEURORRETINA EN CULTIVO ORGANOTIPICO Y ESTIMULA LA DIFERENCIACION NEURAL DE LA MISMA. EL ESCENARIO QUE ESTE TRABAJO EMPIEZA A DILUCIDAR ES UN AMPLIO CONJUNTO DE SEÑALES AMBIENTALES, PROCEDENTES UNAS DE LA RETINA PIGMENTARIA Y OTRAS DE LA PROPIA RETINA NEURAL, QUE CONTROLAN LOS PRINCIPALES EVENTOS DE LA NEUROGENESIS, INCLUYENDO LA PROLIFERACION, LA SUPERVIVENCIA Y LA DIFERENCIACION DE LAS CELULAS NEUROEPITELIALES A NEURONAS Y GLIA.

Autor: LOPEZ FERNANDEZ LUIS ANDRES.
Año: 1994.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: GENETICA.

Resumen: LA ESPERMATOGENESIS ES UN PROCESO POCO ESTUDIADO A NIVEL GENICO Y MOLECULAR. CON EL FIN DE PROFUNDIZAR EN LOS MECANISMOS QUE REGULAN ESTE PROCESO SE CONSTRUYO UNA GENOTECA DE SUSTRACCION, UTILIZANDO TECNOLOGIA PARAMAGNETICA, ENRIQUECIDA EN GENES EXPRESADOS DIFERENCIALMENTE EN TESTICULO DE RATON PREPUBER. TRAS UN DOBLE ANALISIS DIFERENCIAL SE SELECCIONARON DIECISIETE CLONES EXPRESADOS PREFERENTEMENTE EN TESTICULO DE DIEZ DIAS POSTNATAL Y ADULTO FRENTE A TESTICULO DE NEONATO, Y UNA MEZCLA DE TEJIDOS SOMATICOS. LA SECUENCIACION PARCIAL DE LAS REGIONES 5' Y 3' REVELO QUE SEIS DE ELLOS MOSTRARON HOMOLOGIAS SIGNIFICATIVAS CON GENES DESCRITOS EN LAS BASES DE DATOS GENEBANK Y EMBL: TCP-1, RAB-1, AHD-2, PABP, RNA HELICASA P68, Y EXTENSION CARBOXILO TERMINAL DE LA UBICUITINA. EL RESTO DE LOS CLONES SELECCIONADOS FUERON CONSIDERADOS GENES NOVELES E INTRODUCIDOS EN LAS BASES DE DATOS MENCIONADAS ANTERIORMENTE BAJO EL NOMBRE GENERICO DE TEG SEGUIDO DEL NUMERO DE CLON INICIAL. LA CARACTERIZACION DE ESTOS CLONES MOSTRO MECANISMOS DIFERENTES DE REGULACION DE LA EXPRESION GENICA PARA ALGUNOS DE ELLOS DURANTE LA ESPERMATOGENESIS TEMPRANA EN RATON. SE DISCUTE LA POSIBLE IMPLICACION DE LOS MISMOS EN PROCESOS DE DIFERENCIACION CONCRETAMENTE EN NUESTRO CASO, EN LA ESPERMATOGENESIS TEMPRANA.

Autor: LORA CALVO JOSE MANUEL.
Año: 1994.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR Y CELULAR .

Resumen: EL GEN QID3 DE TRICHODERMA HARZIANUM, ABUNDANTEMENTE EXPRESADO EN CONDICIONES SIMILARES A LAS DE MICOPARASITISMO, CODIFICA, PROBABLEMENTE, UNA PROTEINA DE PARED DE LA FAMILIA DE LAS HIDROFOBINAS. LA PROTEINA RIBOSOMICA L32 DE TRICHODERMA HARZIANUM MUESTRA GRAN SEMEJANZA DE ESTRUCTURA PRIMARIA A LAS CORRESPONDIENTES DE EUCARIOTAS SUPERIORES. LA BETA-1,6-GLUCANASA-II DE TRICHODERMA HARZIANUM, SUJETA A REPRESION CATABOLICA Y CON SIGNIFICATIVA HOMOLOGIA CON OTRAS BETA-GLUCANASAS, PUEDE SER EXPRESADA DE FORMA ENZIMATICAMENTE ACTIVA COMO PROTEINA HETEROLOGA EN SACCHAROMYCES CEREVISIAE.

Autor: LORENZO LOZANO PALOMA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: AISLAMIENTO Y CARACTERIZACION DE UN MICROORGANISMO AISLADO DE MUESTRAS PROCEDENTES DE UNA MINA DE URANIO. ESTE MICROORGANISMO RESULTO SER UNA BACTERIA CON FORMA DE BACILO, GRAM NEGATIVA, MESOFILA, ACIDOFILA, QUIMIOLITOTROFA, QUE CRECE UTILIZANDO LA ENERGIA DE LA OXIDACION DE AZUFRE O DERIVADOS DEL MISMO. SE HA INCLUIDO EN EL GENERO THIOBACILLUS Y SE HA DEFINIDO COMO DISTINTO A LAS ESPECIES EXISTENTES EN EL. EL ANALISIS DE SU DNA EXTRACROMOSOMICO PERMITIO DEFINIR LA PRESENCIA DE TRES PLASMIDOS CON DIFERENTES PESOS MOLECULARES. EL CLONAJE Y EL ANALISIS ESTRUCTURAL DE SECUENCIAS PLASMIDICAS HAN CONDUCIDO A LA DETERMINACION DEL MAPA DE RESTRICCION DEL PLASMIDO MAS PEQUEÑO Y A LA SECUENCIACION DE MAS DE 3KB DEL MISMO.

Autor: LORENZO ROMO ISABEL.
Año: 1994.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR. PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOMEDICINA Y BIOCATALISIS.

Resumen: LA LACTATO DESHIDROGENASA, LDH, ENZIMA QUE SE ELEVA DE FORMA INESPECIFICA EN MUCHAS PATOLOGIAS, HA SIDO ESTUDIADA JUNTO CON SUS ISOENZIMAS EN DETERMINADOS GRUPOS DE TUMORES MALIGNOS: TUMORES DIGESTIVOS, GINECOLOGICOS, DE PULMON, VEJIGA Y TIROIDES, COMPARANDO CON DOS GRUPOS CONTROL: UNO DE PERSONAS SANAS, EXENTAS DE TUMORACION Y OTRO DE PERSONAS CON TUMORES BENIGNOS; TOMANDO DE CADA PACIENTE 5 TIPOS DE MUESTRAS: UN SUERO PREOPERATORIO, POSTOPERATORIO INMEDIATO Y TARDIO Y DOS MUESTRAS TISULARES: DE TEJIDO SANO Y TUMORAL. EN ESTE ESTUDIO SE OBSERVA EL EFECTO DE LA CIRUGIA COMO NORMALIZADORA DEL PATRON ISOENZIMATICO Y LA NATURALEZA ANAEROBICA DE LAS CELULAS TUMORALES SUBYACENTE EN EL CANCER QUE VIENE EXPRESADA POR UNA ELEVACION DE LAS ISOENZIMAS LD4 Y LD5, ASI COMO TAMBIEN UNA RELACION DE CADA TIPO DE TUMOR CON LA HOJA BLASTODERMICA DE DONDE PROCEDA. DE ESTE ESTUDIO DE INVESTIGACION SE EXTRAJERON CONCLUSIONES DE APLICABILIDAD CLINICA, COMO SON SU IMPORTANCIA COMO MARCADOR TUMORAL Y COMO POSIBLE TECNICA DE SCREENING PRECOZ EN TUMORES DE CORTA SUPERVIVENCIA.

Autor: LOSADA VALIENTE ANA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA CARACTERIZACION DE LOS YACS AISLADOS DE UNA GANOTECA DE D. MELANOGASTER USANDO COMO SONDA EL DNA DE UN MINICROMOSOMA FUNCIONAL HA LLEVADO A LA IDENTIFICACION DE VARIOS CLONES CON SECUENCIAS HETEROCROMATICAS QUE PODRIAN ESTAR IMPLICADAS EN EL COMPORTAMIENTO CROMOSOMICO. EN PRIMER LUGAR, SE HA CLONADO UN NUEVO SUBTIPO DE DNA SATELITE 1.688 PRESENTE EN LA HETEROCROMATINA DEL CROMOSOMA 3, DONDE OCUPA UN BLOQUE DE 50 KB. EN LA HIBRIDACION IN SITU CON EL YAC YW20D5, QUE CONTIENE DICHO BLOQUE, SE DETECTAN SECUENCIAS HOMOLOGAS EN LA EUCROMATINA DE TODOS LOS CROMOSOMAS. ESTA DISTRIBUCION Y LA CAPACIDAD DEL DNA SATELITE 1.688 DE UNIRSE A LA MATRIZ NUCLEAR SUGIEREN SU PARTICIPACION EN LA ORGANIZACION DEL CROMOSOMA EN DOMINIOS ESTRUCTURALES. EN SEGUNDO LUGAR, EL ANALISIS DE CLONES DE LAS REGIONES CENTROMERICAS HA PERMITIDO CONOCER LAS SECUENCIAS PRESENTE EN ESTAS REGIONES Y COMENZAR A ENTENDER SU ORGANIZACION MACHOMOLECULAR. ASI, EN LA REGION CENTROMERICA DEL CROMOSOMA 3 EXISTEN DOS BLOQUES GRANDES DE DODECASATELITE, CON UN TAMAÑO ENTRE 250 Y 400 KB Y VARIOS BLOQUES ADICIONALES, MENORES DE 100 KB, SEPARADOS ENTRE SI POR SECUENCIAS MODERADAMENTE REPETIDAS. LA CARACTERIZACION DE LAS SECUENCIAS FLANQUEANTES DEL DODECASATELITE EN UNO DE LOS NES, EL YAC YW14G7, HA LLEVADO AL DESCUBRIMIENTO DE UN NUEVO TRANSPOSON TIPO LINE DE D. MELANOGASTER, EL ELEMENTO. GRACIAS A ESTA SECUENCIA SE HAN OBTENIDO CLONES DE LA REGION CENTROMERICA DEL CROMOSOMA Y, HASTA AHORA DESCONOCIDA, EN LOS QUE APARECEN COPIAS EN TANDEM DEL ELEMENTO JUNTO A OTROS ELEMENTOS TIPO LINE: EN CONJUNTO, ESTOS RESULTADOS INDICAN QUE LA HETEROCROMATINA CENTROMERICA DE D. MELANOGASTER ES SIMILAR, EN CUANTO A LA NATURALEZA DE LAS SECUENCIAS Y LA ORGANIZACION DE LAS MISMAS, A LA PRESENTE EN LOS CROMOSOMAS HUMANOS, POR LO QUE D. MELANOGASTER PUEDE CONSIDERARSE UN MODELO APROPIADO PARA EL ESTUDIO DE LA FUNCION CENTROMERICA.

Autor: LUMBRERAS RUIZ VICTORIA.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA 91/92 92/93.

Resumen: LA ENZIMA 3-HIDROXI-3-METILGLUTARIL COENZIMA A REDUCTASA CATALIZA LA SINTESIS DE MEVALONATO A PARTIR DE HMG-COA. ESTA REACCION ESTA CONSIDERADA COMO EL PRIMER PUNTO DE REGULACION DE LA RUTA DE SINTESIS DE ISOPRENOIDES EN PLANTAS. EN ESTA MEMORIA SE PRESENTA LA CARACTERIZACION MOLECULAR DEL GEN HMG1 QUE CODIFICA PARA LA HMGR. EL ANALISIS DE LA REGION 5' DEL GEN HMG1 HA PERMITIDO IDENTIFICAR UN MRNA MAS LARGO DERIVADO DEL GEN HMG1 QUE SE ORIGINARIA COMO RESULTADO DE LA UTILIZACION DEL UN PROMOTOR ALTERNATIVO. ESTE MRNA MAS LARGO DENOMINADO, HMG1L, CODIFICA UNA NUEVA ISOFORMA MICROSOMAL DE LA HMGR CON UNA SECUENCIA N-TERMINAL ADICIONAL DE 50 AAS. LA CARACTERIZACION DE ELEMENTOS IMPLICADOS EN LA REGULACION DE LA EXPRESION DEL GEN HMG1 SE HA LLEVADO A CABO UTILIZANDO DOS SISTEMAS MODELO, EXPERIMENTOS DE EXPRESION TRANSITORIA EN PROTOPLASTOS Y TRANSFORMACION ESTABLE EN PLANTAS TRANSGENICAS. ESTOS ESTUDIOS HAN PERMITIDO ACOTAR UN ELEMENTO DE CONTROL EN LA REGION LIDER DEL GEN HMG1 NECESARIO PARA SU EXPRESION, DENOMINADO ELEMENTO CT. ESTE ELEMENTO PARECE MEDIAR LA REGULACION DEL GEN HMG1 A DOS NIVELES DISTINTOS, A NIVEL TRASCRIPCIONAL Y A NIVEL TRADUCCIONAL. POR ULTIMO, EL ANALISIS DE PLANTAS TRANSGENICAS PORTADORAS DE CONSTRUCCIONES QUIMERICAS HMG1GUS HA PERMITIDO DEFINIR CON MAYOR PRECISION EL PATRON DE EXPRESION DEL GEN HMG1 EN LA PLANTA. LOS RESULTADOS INDICAN QUE EL HMG1 ESTA BAJO MECANISMOS COMPLEJOS DE REGULACION Y DEFINIR CUALES SON ESTOS MECANISMOS CONSTITUYE UN PASO IMPORTANTE PARA CONOCER EL PAPEL DE CADA ISOFORMA QUE CODIFICA PARA LA HMGR SOBRE LA REGULACION GLOBAL DE LA VIA.

Autor: LUQUE ROMERO IGNACIO.
Año: 1994.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HA CLONADO UNA REGION DEL GENOMIO DE LA CIANOBACTERIA SYNECHOCOCCUS SP. PCC 7942 QUE CONTIENE UN AGRUPAMIENTO DE GENES IMPLICADO EN LA ASIMILACION DE NITRATO. SE HA COMPROBADO QUE EL PRODUCTO DEL GEN NTCA, QUE MEDIA LA REGULACION POR FUENTE DE NITROGENO EN DICHO ORGANISMO, TIENE CAPACIDAD DE UNION ESPECIFICA AL DNA, HABIENDOSE IDENTIFICADO LA SECUENCIA GTAN8TAC COMO SU DIANA. SE HA COMPROBADO QUE LA SECUENCIA GTAN8TACN22TAN3T ES LA SECUENCIA CARACTERISTICA DE LOS PROMOTORES REGULADOS POR LA PROTEINA NTCA.

Autor: MANCHEÑO GOMEZ JOSE MIGUEL.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA. MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: LA X-SARCINA ES UNA TOXINA PROTEICA SINTETIZADA POR EL HONGO ASPERGILLUS GIGANTEUS QUE PARA EJERCER SU ACCION CITOTOXICA HA DE PENETRAR EN EL INTERIOR CELULAR, EN DONDE INHIBE LA SINTESIS DE PROTEINAS MEDIANTE LA MODIFICACION ESPECIFICA E IRREVERSIBLE DE LOS RIBOSOMAS. SI BIEN EL MECANISMO MOLECULAR DE INACTIVACION DE LOS RIBOSOMAS SE CONOCE EN GRAN DETALLE, EL MODO MEDIANTE EL CUAL LA PROTEINA ACCEDE AL INTERIOR CELULAR NO SE HA CARACTERIZADO. HASTA HOY DIA, NO SE HAN ENCONTRADO RECEPTORES DE MEMBRANA PARA LA PROTEINA, AUNQUE SI SE HA DEMOSTRADO LA CAPACIDAD DE LA X-SARCINA DE INTERACCIONAR CON MEMBRANAS MODELO COMPUESTAS POR FOSFOLIPIDOS ACIDOS. EN ESTE TRABAJO DE INVESTIGACION SE HAN EXTENDIDO LOS ESTUDIOS DE LA INTERACCION ALFA-SARCINA-MEMBRANAS MODELO, FORMADAS POR UN NUEVO TIPO DE FOSFOLIPIDO: FOSFATIDILSERINAS. ASIMISMO, SE HA CARACTERIZADO LA CAPACIDAD QUE TIENE ESTA PROTEINA DE ACCEDER AL INTERIOR VESICULAR EN AUSENCIA DE AGENTES PERMEABILIZANTES, CONCLUYENDOSE QUE, EFECTIVAMENTE, ESTA PROTEINA ES CAPAZ DE ALCANZAR EL INTERIOR DE VESICULAS MODELO. OTRO PUNTO ABORDADO EN ESTE TRABAJO HA SIDO LA CARACTERIZACION CINETICA DE LOS PROCESOS DE AGREGACION Y DESESTABILIZACION DE MEMBRANAS INDUCIDOS POR LA TOXINA. LA ESCALA DE TIEMPO EN LA QUE TRANSCURREN AMBOS PROCESOS, DEL ORDEN DE MILISEGUNDOS, HIZO NECESARIO EL EMPLEO DE TECNICAS DE FLUJO DETENIDO. UN ASPECTO QUE SE HA ANALIZADO TAMBIEN HA SIDO LAS BASES ESTRUCTURALES EN LAS QUE RESIDE LA CAPACIDAD DE LA PROTEINA DE INTERACCIONAR CON MEMBRANAS. EN PRIMER LUGAR, SE HA PROPUESTO UN MODELO DE LA CONFORMACION DE LA ALFA-SARCINA CONSIDERANDO LA SIMILITUD DE SECUENCIA QUE POSEE CON OTRAS RIBONUCLEASAS FUNGICAS CUYA ESTRUCTURA TRIDIMENSIONAL HA SIDO RESUELTA A GRAN RESOLUCION. ESTE ESTUDIO PREDICE LA EXISTENCIA DE UN NUCLEO HIDROFOBICO FORMADO POR CUATRO HEBRAS BETA, NUCLEO SIMILAR AL QUE APARECE EN EL RESTO DE LA RIBONUCLEASAS ANTERIORES. ASIMISMO, LA ALFA-SARCINA DESNATURALIZADA MEDIANTE REDUCCION Y CARBOXIAMIDOMETILACION, QUE POSEE ELEMENTOS DE ESTRUCTURA BETA Y GIROS BETA, SEGUN SE DERIVA DE ESTUDIOS DE DICROISMO CIRCULAR, INTERACCIONA CON MEMBRANAS MODELO DE UN MODO ANALOGO AL DE LA ALFA-SARCINA NATIVA. LA CAPACIDAD DE LA ALFA-SARCINA DESNATURALIZADA DE INTERACCIONAR HIDROFOBICAMENTE CON MEMBRANAS PODRIA DEBERSE, ENTRE OTRAS POSIBILIDADES, A LA CONSERVACION DEL NUCLEO BETA, ANTERIORMENTE PREDICHO. POR OTRO LADO, LA HIPOTESIS DE QUE ESTA REGION INTERACCIONA CON MEMBRANAS, ES REFORZADA POR EL HECHO DE QUE EL PEPTIDO SINTETICO QUE CORRESPONDE A LA REGION 116-139 DE LA SECUENCIA DE LA ALFA-SARCINA, QUE ENGLOBARIA DOS DE LAS CUATRO HEBRAS CONSTITUYENTES DEL NUCLEO 116-139 DE LA SECUENCIA DE LA ALFA-SARCINA, QUE ENGLOBARIA DOS DE LAS CUATRO HEBRAS CON UN ELEVADO CONTENIDO EN ESTRUCTURA BETA, TRAS INTERACCIONAR CON MEMBRANAS. POR TODO ELLO, ESTA REGION HA SIDO PROPUESTA COMO RESPONSABLE DEL COMPONENTE HIDROFOBICO DE LA INTERACCION ENTRE ALFA-SARCINA Y BICAPAS MODELO.

Autor: MARTIN GONZALEZ MANUEL M..
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MEDICINA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE ANALIZA, MEDIANTE EXPERIMENTOS DE TRANSACTIVACION DE GENES INDICADORES, LA ACTIVIDAD DE DERIVADOS NATURALES DE LA VITAMINA A (ACIDO TODOTRANS RETINOICO Y ACIDO 9-CIS RETINOICO) Y DE RETINOIDES SINTETICOS (ETRETINATO Y ACITRETIN) MEDIADA POR TRECEPTORES NUCLEARES DE LOS DOS PRIMEROS (RARS Y RXRS, RESPECTIVAMENTE). SE DESCRIBE LA ACCION DEL ACITRETIN A TRAVES DE AMBOS TIPOS DE RECEPTORES, PLANTEANDO EN CONSECUENCIA EL POSIBLE PAPEL MODULADOR DE ESTE RETINOIDE EN DIVERSAS VIAS HORMONALES. SE CONFIRMA A NIVEL MOLECULAR LA AUSENCIA DE ACTIVIDAD INTRINSECA DEL ETRETINATO. TAMBIEN SE HACEN OBSERVACIONES ACERCA DE LA SELECTIVIDAD DE LOS CITADOS COMPUESTOS POR ELEMENTOS DE RESPUESTA AL ACIDO RETINOICO (RARES) Y DE CIERTAS INTERACCIONES EXISTENTES ENTRE DISTINTOS RECEPTORES.

Autor: MARTIN LLUCH MERCEDES.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL OBJETIVO PRINCIPAL DE ESTE TRABAJO HA SIDO ANALIZAR EN PROFUNDIDAD EL MODO DE EVOLUCION DEL VIRUS RESPIRATORIO SINCITIAL HUMANO (VRS), QUE ES EL PRINCIPAL AGENTE CAUSAL DE ENFERMEDADES RESPIRATORIAS EN NIÑOS MENORES DE DOS AÑOS. PARA LLEVAR A CABO ESTE ESTUDIO, NOS HEMOS CENTRADO EN ANALIZAR LA VARIABILIDAD GENETICA Y ANTIGENICA DE LA PROTEINA G DEL VRS DE CUARENTA Y UN VIRUS AISLADOS EN MADRID ENTRE 1988-1993, DE 8 VIRUS HISTORICOS AISLADOS EN MADRID Y EN SUECIA ENTRE 1974-1984; POR ULTIMO, REALIZAR UN ANALISIS ESTADISTICO CON LAS SECUENCIAS DEL GEN G, DE LOS 23 VIRUS MAS REPRESENTATIVOS DE ESTE TRABAJO, JUNTO CON OTRAS SECUENCIAS YA PUBLICADAS EN NUESTRO Y EN OTROS LABORATORIOS, PROCEDENTES DE DISTINTOS LIGARES GEOGRAFICOS Y DE DISTINTAS EPIDEMIAS CON EL FIN DE INTENTAR DEFINIR EL MODO DE EVOLUCION DEL VRS. SE PUDIERON SACAR LAS SIGUIENTES CONCLUSIONES: - EL MODO DE EVOLUCION DEL VIRUS SE CARACTERIZA POR PRESENTAR VARIAS LINEAS EVOLUTIVAS COCIRCULANTES DENTRO DE LA POBLACION HUMANA. - VRS TIENE UNA GRAN CAPACIDAD DE DISEMINARSE DE UN LUGAR A OTRO, LO CUAL SUGIERE QUE ESTE SEA UN FACTOR DETERMINANTE DE SU EVOLUCION. - EXISTE UNA GRAN CORRELACION ENTRE LOS CAMBIOS GENETICOS Y ANTIGENICOS ENCONTRADOS EN LA PROTEINA G DEL VIRUS. ESTO, JUNTO CON LA ACUMULACION DE CAMBIOS DE AMINO-ACIDOS EN UNA REGION DE LA PROTEINA G SUGIERE QUE LA SELECCION INMUNE SEA OTRO FACTOR QUE INFLUYA EN LA EVOLUCION DE VRS. - LA DIVERSIFICACION DE LA PROTEINA G DE VRS ES DEBIDA A LA ACUMULACION CON EL TIEMPO DE CAMBIOS SINONIMOS Y NO SINONIMOS. PARECE SER QUE, A MEDIDA QUE LAS CAPAS DEL VIRUS PRESENTAN MAYOR DISTANCIA GENETICA AL ORIGEN EVOLUTIVO, HAY UNA CIERTA SATURACION DE LAS MUTACIONES NO SINONIMAS, RESPECTO DE LAS SINONIMAS.

Autor: MARTINEZ DE ILARDUYA RUIZ DE LARRAMENDI OSCAR.
Año: 1994.
Universidad: POLITECNICA DE MADRID.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DPTO. DE BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA AGRARIA Y FORESTAL.

Resumen: SACAROSA SINTASA ES UN ENZIMA VINCULADO A LA DEGRADACION DE LA SACAROSA IMPORTADA DEL FLOEMA EN EL ENDOSPERMO EN DESARROLLO. AQUI SE DESCRIBE EL CLONAJE Y SECUENCIACION DEL CDNA DE UNA VARIANTE NO ALELICA DEL GEN EN CEBADA. SE HA REALIZADO UN ESTUDIO DE LA EXPRESION DIFERENCIAL DE LOS DOS GENES EN DIFERENTES TEJIDOS: SS1 SE EXPRESA EN ENDOSPERMO Y, EN MENOR MEDIDA, EN HOJAS, RAICES, ENVUELTAS DE LA SEMILLA Y EMBRION EN DESARROLLO. SS1 SE INDUCE FUERTEMENTE POR TRATAMIENTO CON FRIO Y EN RESPUESTA A ACIDO SALICILICO. SS2 SE EXPRESA MAYORITARIAMENTE EN ENDOSPERMO EN DESARROLLO. SE HA CARACTERIZADO FUNCIONALMENTE EL PROMOTOR DE SS1 POR ESTUDIOS DE EXPRESION TRANSITORIA EN PROTOPLASTOS, RETARDOS DE ELECTROFORESIS EN GEL Y "FOOTPRINTING". SE HA IDENTIFICADO UN MOTIVO ACGACAACTGTCGT EN ESTE PROMOTOR, QUE ES RECONOCIDO POR FACTORES PROTEICOS DEL NUCLEO DE CELULAS DE ENDOSPERMO. SE HA CLONADO Y SECUENCIADO UN CLON GENOMICO DE SS2 QUE PRESENTA EL PROMOTOR Y LOS PRIMEROS EXONES E INTRONES DEL GEN. SE HAN IDENTIFICADO DIFERENTES REPETICIONES Y MOTIVOS DE OTROS PROMOTORES.

Autor: MARTINEZ PICADO FRANCISCO JAVIER.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA AMBIENTAL Y BIOTECNOLOGIA.

Resumen: LA DETECCION DE V. ANGUILLARUM, PRINCIPAL AGENTE CAUSAL DE VIBRIOSIS EN ACUICULTURA, HA REQUERIDO HASTA AHORA SU AISLAMIENTO Y POSTERIOR CARACTERIZACION FENOTIPICA. EL ADVENIMIENTO DE LAS TECNICAS MOLECULARES HA PERMITIDO, ENTRE OTRAS POSIBILIDADES, LA UTILIZACION DE SECUENCIAS 16S RRNA PARA GENERAR NUEVAS FORMAS DE ABORDAR LA IDENTIFICACION, ECOLOGIA Y FILOGENIA BACTERIANA. EN EL PRESENTE TRABAJO SE DETERMINO LA SECUENCIA PARCIAL 16S RDNA DE 39 CEPAS MAYORITARIAMENTE PERTENECIENTES AL GENERO VIBRIO, QUE FUERON ALINEADAS JUNTO CON OTRAS 20 SECUENCIAS PREVIAMENTE PUBLICADAS. SE ESTUDIARON LAS AGRUPACIONES DE SIMILITUD ENTRE TODAS ELLAS COMO UNA APROXIMACION A SUS RELACIONES FILOGENETICAS. DE LA COMPARACION DE LAS 59 SECUENCIAS ALINEADAS SE DEFINIO UN OLIGODESOXIRRIBONUCLEOTIDO (VAV3) DE 24 BASES COMPLEMENTARIO AL 16S RRNA (POSICIONES 454 A 477 DE E. COLI) QUE FUE USADO COMO SONDA ESPECIFICA EN LA DETECCION DE V. ANGUILLARUM. FUERON PROBADOS DIFERENTES SISTEMAS DE DETECCION DE V. ANGUILLARUM EN SUSPENSION: MEDIANTE HIBRIDACION DEL DNA GENOMICO TOTAL EXTRAIDO Y PURIFICADO DE LAS CELULAS CONTENIDAS EN LA MUESTRA (CON Y SIN AMPLIFICACION POR PCR), HIBRIDACION DEL RNA DE LAS CELULAS TRATADAS SOBRE MEMBRANAS O "IN SITU", E HIBRIDACION DEL RNA DE CELULAS PREVIAMENTE CULTIVADAS. LA SENSIBILIDAD DE LAS DIFERENTES TECNICAS VARIO ENTRE 4X10 AL CUBO Y 10 A LA SEXTA CELULAS. EL USO COMBINADO DE UN MEDIO SELECTIVO RECIENTEMENTE DESCRITO (VAM), JUNTO CON LA SONDA VAV3 PERMITIO LA IDENTIFICACION DE V. ANGUILARUM CON UNA CERTEZA TOTAL. LA METODOLOGIA FUE, POR ULTIMO, VALORADA EN MUESTRAS DE AGUA, TEJIDOS ANIMALES (DORADAS Y RODABALLOS) Y ALIMENTO VIVO (ARTEMIA Y ROTIFEROS) DE TRES AMBIENTES DIFERENCIADOS POR SU CRECIENTE COMPLEJIDAD: INFECCION EXPERIMENTAL EN UNA INSTALACION CONTROLADA, "HATCHERIES" Y LAGUNAS LITORALES DEL DELTA DEL EBRO. EN TODOS LOS CASOS PUDO DETERMINARSE LA PRESENCIA O AUSENCIA DE V. ANGUILLARUM SIN TENER QUE RECURRIR A CULTIVOS PUROS, INCLUSO EN POBLACIONES CON ELEVADOS NIVELES DE OTRAS ESPECIES DEL GENERO VIBRIO. LA METODOLOGIA PROPUESTA ABRE NUEVAS POSIBILIDADES EN EL DIAGNOSTICO Y CONTROL DE LA VIBRIOSIS EN ACUICULTURA MARINA, Y EN EL ESTUDIO DE LA ECOLOGIA DE V. ANGUILLARUM EN AMBIENTES NATURALES.

Autor: MARTINEZ ROMERO NATALIA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: UN GEN DE STREPTOMYCES FRARIAE ES CAPAZ DE ACTIVAR LA PRODUCCION DE ACTINORODINA EN STREPTOMYCES LIVIDANS. ESTE GEN DA LUGAR A UN RNA DE 132 NUCLEOTIDOS QUE PROBABLEMENTE ACTUA COMO UN RNA ANTIMENSAJERO PARA LA EXPRESION DEL GEN ORF1. LA ORF1 CODIFICA 99 AMINOACIDOS PARA LOS CUALES NO SE HAN ENCONTRADO PROTEINAS HOMOLOGAS. SE REALIZO UNA LIBRERIA GENOMICA DE STREPTOMYCES LIVIDANS Y SE DETECTO UN CLON QUE TENIA LA MISMA ORGANIZACION GENETICA QUE EL ACTIVADOR DE STREPTOMYCES QUE HABIA.

Autor: MARTINEZ TORRECUADRADA JORGE LUIS.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EL OBJETIVO DE ESTA TESIS DOCTORAL FUE EL DESARROLLO DE VACUNAS DE SEGUNDA GENERACION FRENTE AL VIRUS DE LA PESTE EQUINA AFRICANA. COMO PRIMERA ESTRATEGIA, SE PLANTEO LA SINTESIS DE CAPSIDAS VIRALES VACIAS UTILIZANDO LA CAPACIDAD DE AUTOENSAMBLAJE DE LAS PROTEINAS ESTRUCTURALES VP2, VP3, VP5 Y VP7 DEL VIRUS CUANDO SE EXPRESAN SIMULTANEAMENTE EN EL SISTEMA DE EXPRESION DE BACULOVIRUS. PARA ELLO, SE CLONARON, SECUENCIARON Y EXPRESARON EN CELULAS DE INSECTO LOS GENES QUE CODIFICAN PARA LA VP2 Y VP3. SIN EMBARGO, LA IMPOSIBILIDAD DE EXPRESAR CORRECTAMENTE LA VP3 HIZO INVIABLE ESTA ESTRATEGIA INICIAL, POR LO QUE NOS CENTRAMOS EN LA CARACTERIZACION ANTIGENICA DE LA VP2 Y VP5 Y EN LA IDENTIFICACION DE EPITOPOS NEUTRALIZANTES EN LA VP2. ADEMAS ESTUDIAMOS LA INMUNIDAD CONFERIDA POR DIVERSAS COMBINACIONES DE LAS PROTEINAS VP2, VP5 Y VP7 EN CABALLOS. MEDIANTE FRAGMENTACION DEL GEN DE LA VP2, SE IDENTIFICO LA ZONA MAS INMUNOGENICA DE LA PROTEINA, SITUADA ENTRE LOS AMINOACIDOS 200 Y 413 Y ADEMAS SE OBSERVO QUE TODOS LOS FRAGMENTOS QUE CONTIENEN LA REGION ENTRE LOS AA 285 Y 413, Y EXPRESADOS EN E. COLI, FUERON CAPACES DE INDUCIR ANTICUERPOS NEUTRALIZNATES EN RATONES Y CONEJOS. POR OTRA PARTE, LA COMBINACION DE LAS PROTEINAS VP2, VI5 Y VP7 EXPRESADAS EN CELULAS DE INSECTO PROTEGIERON A LOS CABALLOS FRENTE A UN DESAFIO CON VIRUS INFECTIVO.

Autor: MATO MATUTE M. EUGENIA.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y FISIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y FISIOLOGIA.

Resumen: LA GLANDULA PINEAL SE DEFINE COMO UN TRANDUCTOR NEUROENDOCRINO, MEDIADOR ENTRE EL AMBIENTE Y EL ORGANISMO, ESTANDO SU ACTIVIDAD CICLICA ACOPLADA AL CICLO LUZ: OSCURIDAD MEDIANTE UNA VIA MULTISINAPTICA, QUE PARTIENDO DE LA RETINA LLEGA A LA PINEAL. ESTA GLANDULA POSEE GRAN ACTIVIDAD METABOLICA HABIENDOSE DETECTADO INDOLES (MELATONINA), ENZIMAS NEUROTRANSMISORES Y PEPTIDOS; SUS CONCENTRACIONES VARIAN EN SU GRAN MAYORIA DE FORMA CICLICA ACOPLADAS AL FOTOPERIODO. MEDIANTE RADIOINMUNOANALISIS E INMUNOHISTOQUIMICA SE HA DEMOSTRADO LA PRESENCIA DE SOMATOSTATINA EN EL PINEAL DE DIVERSOS ROEDORES, CUYO ORIGEN ERA MOTIVO DE DEBATE. LA PUESTA A PUNTO DE UNA TECNICA DE RT-PCR PERMITIO DEMOSTRAR LA PRESENCIA DEL TRANSCRITO EN EL GL.PINEAL "IN VIVO" E "IN VITRO" ESTANDO CONDICIONADA POR LA EDAD DEL ANIMAL, ASI COMO POR LA ESTACION DEL AÑO EN AMBOS SEXOS, LOCALIZANDOSE EL ARNM EN LA PERIFERIA, DE UNA FORMA LOCAL. ESTUDIOS DE REGULACION DEL PEN, DEMUESTRAN ASIMISMO SU SEMEJANZA CON OTROS SISTEMAS CELULARES CLASICOS YA DESCRITOS. ADEMAS DE LA DETECCION DEL PEPTIDO HEMOS DEMOSTRADO LA PRESENCIA DEL RECEPTOR, QUE NO PARECE ESTAR CONDICIONADA NI POR LA EDAD, NI POR LA ESTACION DEL AÑO.

Autor: MENDEZ ZUNZUNEGUI JUAN RAMON.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: 1. SE HA ESTUDIADO LA INTERACCION ENTRE LA DNA POLIMERASA DE 029 Y EL DNA UTILIZANDO LAS TECNICAS DE RETRASO EN GEL Y ENTRECRUZAMIENTO CON LUZ ULTRAVIOLETA. SE HA DEMOSTRADO QUE EL CATION MG2+ AUMENTA LA AFINIDAD DE LA DNA POLIMERASA POR EL DNA Y PARTICIPA EN LA ORIENTACION DEL EXTREMO DE LA CADENA INICIADORA EN EL SITIO ACTIVO DE POLIMERIZACION. 2. EL ANALISIS MUTACIONAL DEL MOTIVO TX2GR EN LA DNA POLIMERASA DE 029 HA PERMITIDO CONCLUIR QUE LOS AMINOACIDOS THR434 Y ARG438 SON CRITICO PARA LAS ACTIVIDADES SINTETICAS DEL ENZIMA. LOS DEFECTOS DE SINTESIS DNA POLIMERASS MUTANTES EN ESTOS RESIDUOS SE HAN PODIDO RELACIONAR CON UNA DISMINUCION DE SU CAPACIDAD DE UNION AL DNA Y A LA PROTEINA TERMINAL. EL ANALISIS DEL EQUILIBRIO ENTRE LAS ACTIVIDADES DE POLIMERIZACION Y EXONUCLEOLISIS HA LLEVADO A PROPONER PARA ESTE MOTIVO UN PAPEL EN LA ESTABILIZACION DEL EXTREMO DEL DNA INICIADOR EN EL CENTRO ACTIVO DE POLIMERIZACION. 3. SE HA DEMOSTRADO QUE EL COMPLEJO DNA POLIMERASA-PROTEINA TERMINAL PUEDE RECONOCER EL ORIGEN DE REPLICACION EN FORMA DE DNA DE CADENA SENCILLA, Y QUE LA REACCION DE INICIACION (FORMACION DEL COMPLEJO TP-DAMP) ES DIRIGIDA POR EL SEGUNDO NUCLEOTIDO DEL EXTREMO 3' DEL DNA. DURANTE LA POLIMERIZACION, TODAS LAS BASES DEL MOLDE (INCLUIDA LA TERMINAL) PARECEN SER REPLICADAS. SE HA PROPUESTO UN NUEVO MODELO (SLIDING-BACK) PARA LA TRANSICION ENTRE LA INICIACION CON PROTEINA Y LA ELONGACION, BASADA EN UNA TRANSLOCACION DEL COMPLEJO TP DAMP DESDE LA SEGUNDA BASE DEL MOLDE HASTA LA PRIMERA. DE ESTE MODO SE RECUPERA EL NUCLEOTIDO TERMINAL Y POSIBLEMENTE SE CONTRIBUYE A LA FIDELIDAD DE LOS PRIMEROS PASOS DE LA REPLICACION. EL HECHO DE QUE TODOS LOS GENOMAS DE DNA LINEAL CON PROTEINAS TERMINAL TENGAN ALUN TIPO DE REITERACION EN LOS EXTREMOS SUGIER QUE EL MECANISMO DE SLIDING-BACK PUEDA SER GENERALIZABLE A TODOS LOS SISTEMAS QUE UTILIZAN PROTEINA COMO INICIADOR DE LA REPLICACION.

Autor: MENOSSI TEIXEIRA MARCELO .
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GENETICA .

Resumen: EL GEN HRGP DE MAIZ CODIFICA UNA GLICOPROTEINA RICA EN HIDROXIPROLINA QUE ESTA PRESENTE EN LA PARED CELULAR Y SU EXPRESION ES ALTA EN TEJIDOS MERISTEMATICOS Y ESTA ASOCIADA A VASOS. EL OBJETIVO DE ESTA TESIS ES EL ANALISIS DEL PATRON DE EXPRESION DEL GEN HRGP Y LA CARACTERIZACION DE SECUENCIAS REGULADORAS MEDIANTE TRANSGENESIS EMPLEANDO EL BOMBARDEO CON MICROPROYECTILES COMO METODO DE TRANSFERENCIA DE DNA. LA PUESTA A PUNTO DE ESTA METODOLOGIA PERMITIAN LA OBTENCION DE RESULTADOS HOMOGENEOS Y REPRODUCIBLES. LA ACTIVIDAD DEL PROMOTOR HRGP ESTA MODULADA POR FACTORES ESPECIFICOS DE TEJIDO Y DE DESARROLLO. EMPLEANDO CONSTRUCCIONES QUIMERICAS SE OBSERVA QUE LAS REGIONES -719/-510 Y -297/-160 (POSICIONES DEFINIDAS CON RESPECTO AL ATG) Y LA REGION MAS CERCANA A LA CAJA TATA Y EL LIDER SON LAS MAS RELEVANTES PARA LA EXPRESION GENICA. SE DEMUESTRA QUE UN INTRON SITUADO EN LA REGION 3' NO TRADUCIDA DEL GEN PRODUCE UN INCREMENTO EN LA EXPRESION DIRIGIDA POR EL PROMOTOR HRGP Y POR UN PROMOTOR HETEROLOGO (35S). SE VERIFICA MEDIANTE EXPRESION TRANSITORIA Y EN CELULAS TRANSGENICAS DE MAIZ QUE EL PROMOTOR HRGP ES INDUCIDO POR ETILENO E INHIBIDO POR LA HORMONA METIL JASMONATO, SUGIRIENDO QUE LA INDUCCION DEL GEN HRGP POR HERIDA MECANICA ESTARIA MEDIADA POR ETILENO.

Autor: MINGUEZ GARRIDO ANA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR (INTERFACULTATIVO).

Resumen: LA MATRIZ NUCLEAR CONSTITUYE LA ESTRUCTURA COMPLEJA QUE PROPORCIONA EL SOPORTE FISICO PARA LOS PROCESOS DE REPLICACION, PROCESAMIENTO Y TRANSPORTE DEL RNA EN EUCARIOTAS. LA EXISTENCIA EN CELULAS DE A. CEPA DE UNA MATRIZ NUCLEAR ANALOGA A LA DE OTROS EUCARIOTAS, CON SU LAMINA, MATRIZ INTERNA Y MATRIZ NUCLEOLAR, NOS LLEVO A REALIZAR UN ESTUDIO DETALLADO DE LOS COMPONENTES DE SUS DIFERENTES DOMINIOS. GRACIAS AL USO DE ANTICUERPOS ESPECIFICOS, HEMOS IDENTIFICADO DISTINTAS PROTEINAS QUE FORMAN PARTE DE LAS MATRICES, LLEGANDO A LA CONCLUSION, EN LINEAS GENERALES DE QUE LA MATRIZ NUCLEAR DE A. CEPA PRESENTA UNA ORGANIZACION Y FUNCIONALIDAD SEMEJANTE A LA DE OTROS EUCARIOTAS. ASI MISMO, LA EXISTENCIA DENTRO DE EUCARIOTAS DE UN GRUPO DE ORGANISMOS QUE CARECEN DE NUCLEOSOMAS E HISTONAS, LOS DINOFLAGELADOS, DE LOS QUE SIN EMBARGO HEMOS OBTENIDO MATRICES NUCLEARES, INDICA QUE SU ORGANIZACION NUCLEAR ES SEMEJANTE A LA DEL RESTO DE EUCARIOTAS, QUE LA MA- NUCLEAR ES UNA ADQUISICION EVOLUTIVA TEMPRANA DEL NUCLEO EUCARIOTA, Y QUE ES INDEPENDIENTE DE LA PRESENCIA DE NUCLEOSOMAS E HISTONAS.