BIOQUIMICA MOLECULAR, 80

Autor: PEREZ MARTINEZ M. MAR.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA REGULACION DE GENES POR HORMONAS ESTEROIDEAS Y ESPECIFICA DE TEJIDO IMPLICA EN PARTE, RECEPTORES PARA HORMONAS QUE SON NECESARIOS, PERO NO SUFICIENTES PARA LA EXPRESION DE UN GEN EN PARTICULAR. LOS GENES TRANSCRITOS POR LA RNA POLIMERASA II SON REGULADOS POR MULTIPLES PROTEINAS QUE ACTUAN EN "TRANS" Y QUE INTERACCIONAN CON SUS ELEMENTOS REGULADORES EN EL DNA. LA TRANSCRIPCION DEL GEN DE UTEROGLOBINA EN UTERO ES ESTIMULADA ESPECIFICAMENTE POR PROGESTERONA. LA UTEROGLOBINA TAMBIEN SE SINTETIZA EN PULMON, DONDE SE REGULA POR GLUCOCORTICOIDES, Y EN EPIDIDIMO, DONDE SE REGULA POR TESTOSTERONA. LOS OBJETIVOS DE ESTA TESIS DOCTORAL FUERON DELIMITAR LAS SECUENCIAS DEL GEN DE UTEROGLOBINA QUE DETERMINAN SU EXPRESION ESPECIFICA EN UTERO Y CARACTERIZAR ALGUN FACTOR QUE SE UNIERA A UNA DE ESAS SECUENCIAS. DE ESTOS ESTUDIOS SE DERIVA LA EXISTENCIA DE UNO O DOS FACTORES ESPECIFICOS DE ENCOMETRIO QUE SE UNEN A LA REGION DE LA CAJA TATA Y CUYA CONCENTRACION NUCLEAR AUMENTA CONSIDERABLEMENTE POR LA ACCION DE LA PROGESTERONA.

Autor: PEREZ PEREZ JULIAN.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: UN MODO DE PRODUCIR PROTEINAS RECOMBINANTES EN ESCHERICHIA COLI ES DIRIGIRLAS AL PERIPLASMA EN VIRTUD DE SU FUSION A UN PEPTIDO SEÑAL. ALGUNAS PROTEINAS RECOMBINANTES SOBREPRODUCIDAS NO SE SECRETAN EFICAZMENTE, ACUMULANDOSE EN EL CITOPLASMA. ESTO PUEDE SER DEBIDO A QUE ALGUN ELEMENTO DE LA RUTA DE SECRECION SE CONVIERTE EN LIMITANTE. ESTO SE PODRIA EVITAR PROPORCIONANDO A LA BACTERIA COPIAS ADICIONALES DE LOS GENES IMPLICADOS EN EL PROCESO DE SECRECION DE PROTEINAS. SE HAN SUPLEMENTADO CEPAS DE E. COLI CON COPIAS DE ESTOS GENES, Y COMO RESULTADO SE HA MEJORADO LA PRODUCCION PERIPLASMICA DE DOS PROTEINAS RECOMBINANTES: A) SE HA MEJORADO LA SECRECION DE LA INTERLEUKINA 6 HUMANA INCIDIENDO EN EL PASO DE LA TRANSLOCACION DE LA PROTEINA A TRAVES DE LA MEMBRANA CITOPLASMICA CON AYUDA DE LOS GENES PR1A4 Y SECE. B) LA MEJORA DE LA SECRECION DEL FACTOR ESTIMULADOR DE COLONIAS GRANULOCITICAS HUMANO SE LOGRO AUMENTANDO LA SOLUBILIDAD DEL PRECURSOR, CON AYUDA DE LOS GENES DNAK Y DNAJ.

Autor: PINEDA LUCENA ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: ESTE TRABAJO PRESENTA UN ESTUDIO SOBRE LAS CONSECUENCIAS ESTRUCTURALES Y BIOLOGICAS DE LA UNION DEL FACTOR DE CRECIMIENTO PARA FIBROBLASTOS ACIDO (SFGF) A LA HEPARINA. PARA ELLO, SE HA RECURRIDO A UNA TECNICA DE ALTA RESOLUCION COMO ES LA RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR. ESTA INVESTIGACION SE HA REALIZADO CON UNA FORMA DEL AFGF HUMANO DE 132 AMINOACIDOS (CH-AFGF) QUE CONSERVA LAS PROPIEDADES FISICOQUIMICAS Y BIOLOGICAS DE LAS FORMAS DE MAYOR TAMAÑO QUE SE AISLAN NORMALMENTE DEL ORGANISMO. EN SUSTITUCION DE LA HEPARINA, SE HA EMPLEADO EL INOSITOL HEXASULFATO, UN COMPUESTO DE ESTRUCTURA QUIMICA DEFINIDA QUE LA REEMPLAZA DESDE EL PUNTO DE VISTA ESTRUCTURAL Y BIOLOGICO. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE SE PRODUCE UN INCREMENTO CONSIDERABLE EN LA DEFINICION DE LA ESTRUCTURA CUANDO EL CH-AFGF SE UNE AL INOSITOL HEXASULFATO. EL AUMENTO DE ORDEN ES ESPECIALMENTE SEÑALADO EN LOS RESIDUOS COMPRENDIDOS ENTRE LAS HEBRAS 1 Y 5, QUE ENGLOBAN UNA DE LAS REGIONES IMPLICADAS EN LA INTERACCION DEL FGF CON SU RECEPTOR CELULAR ESPECIFICO.

Autor: PIPAON GONZALEZ CARLOS.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA.

Resumen: LA FALTA DE HORMONA TIROIDEA DURANTE EL PERIODO PERINATAL PROVOCA DAÑOS MUY GRAVES E IRREVERSIBLES EN EL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL. ESTA HORMONA LLEVA A CABO SUS FUNCIONES A TRAVES DE UN RECEPTOR QUE ES UN FACTOR DE TRANSCRIPCION DEPENDIENTE DE LIGANDO. LA EXPRESION EN EL ENCEFALO DE UN GEN TEMPRANO CONOCIDO COMO NGFI-A/EGR-1 ES DEPENDIENTE DEL ESTADO TIROIDEO DURANTE EL DESARROLLO. LA RESPUESTA DE ESTE GEN A LA ADMINISTRACION DE T3 ES MUY RAPIDA: 1 HORA DESPUES DE LA ADMINISTRACION DE T3 A ANIMALES HIPOTIROIDEOS LOS NIVELES DE EXPRESION DE ESTE GEN SE INCREMENTAN SIGNIFICATIVAMENTE, LO CUAL SUGIERE UN EFECTO DIRECTO DE ESTA HORMONA SOBRE LOS NIVELES DE TRANSCRIPCION DE NGFI-A. EL EFECTO DE T3 SOBRE LA EXPRESION DEL GEN NGFI-A ES DIFERENTE SEGUN EL AREA ENCEFALICA ESTUDIADA Y LA EDAD DEL ANIMAL: EL ESTRIADO ES SENSIBLE AL ESTADO TIROIDEO EN TODAS LAS EDADES ESTUDIADAS, INCLUSO EN EDADES TAN TEMPRANAS COMO EL MISMO DIA DEL NACIMIENTO. OTRAS REGIONES COMO EL GIRO DENTADO SON INSENSIBLES A LA HORMONA O BIEN VAN PERDIENDO PROGRESIVAMENTE SU RESPUESTA A T3 A MEDIDA QUE AVANZA EL DESARROLLO, COMO ES EL CASO DE LAS ZONAS CA1, CA2 Y CA3 DEL HIPOCAMPO Y LA CORTEZA PIRIFORME. EL CLONAJE Y POSTERIOR SECUENCIACION DE 1'3 KB DE LA ZONA 5' PROMOTORA DEL GEN NGFI-A, HA MOSTRADO VARIOS MOTIVOS SIMILARES A ELEMENTOS CONSENSO DE RESPUESTA A HORMONA TIROIDEA (TRE). SIN EMBARGO, ESTUDIOS DE TRANSFECCION EN CELULAS DE NEUROBLASTOMA N2A NO INDICAN REGULACION POR T3 Y SOLO SE OBSERVA UNA INDUCCION MODERADA POR DOS ISOFORMAS DEL RECEPTOR DE T3, ALFA 1 Y B1, PERO INDEPENDIENTE DE LA UNION DEL LIGANDO. ESTA FALTA DE RESPUESTA A T3 SE PODRIA DEBER A LA PRESENCIA DE SECUENCIAS ATENUADORAS DE LA ACCION DE ESTA HORMONA. ESTUDIOS REALIZADOS CON OLIGONUCLEOTIDOS COMPLEMENTARIOS DEL MRNA-NGFI-A DEMUESTRAN QUE LA ADICION DE ESTOS A CELULAS DE NEUROBLASTOMA IMPIDE EL PROCESO DE NEURITOGENESIS Y LA REDISTRIBUCION DE LA PROTEINA ASOCIADA A MICROTUBULOS MAP1B QUE TIENE LUGAR DURANTE ESTE PROCESO. ESTOS DATOS SUGIEREN QUE EL GEN NGFI-A ES PARTE ESENCIAL DE LAS RUTAS QUE CONDUCEN A LA DIFERENCIACION NEURAL Y QUE POR TANTO PODRIA SER UN MEDIADOR DE LA ACCION DE LA HORMONA TIROIDEA EN EL CONTROL QUE ESTA EJERCE EN LOS PROCESOS DE DIFERENCIACION DURANTE EL DESARROLLO ENCEFALICO IN VIVO.

Autor: PLOVINS GOMILA ANTONIA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA II PROGRAMA DE DOCTORADO: MICROBIOLOGIA.

Resumen: EN ESTA TESIS DOCTORAL, SE CARACTERIZA LA REGION REGULATORIA 5' DEL GEN SLT2, UNA MAP GUINASA ESENCIAL PARA LA INTEGRIDAD CELULAR. PARA ELLO, SE HA ANALIZADO LA SECUENCIA DE ESTA ZONA Y LOCALIZADO POSIBLES ELEMENTOS DE REGULACION, ASI COMO ESTUDIADO LA EXPRESION UTILIZANDO UN GEN MARCADOR Y RELACIONANDO LA EXPRESION DEL GEN SLT2 CON LA CAPACIDAD DE COMPLEMENTACION DEL FENOTIPO MUTANTE SLT2. UTILIZANDO TANTO TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR COMO BIOQUIMICAS, SE HA DETERMINADO: - QUE LA TRANSCRIPCION DEL GEN SLT2 SE INICIA EN LA A-58 Y QUE EL ELEMENTO TATA COMPLETO ES NECESARIO PARA LA TRANSCRIPCION DEL GEN; - QUE EL GEN SLT2 NO PRESENTA REGULACION TRANSCRIPCIONAL NI POR FACTORES SEXUALES NI A 37 GRADOS C; - QUE TODOS LOS FRAGMENTOS DE PROMOTOR ESTUDIADOS DESDE 1.500 PB A 210 PB, PROMUEVEN UNA EXPRESION CAPAZ DE COMPLEMENTAR EL FENOTIPO MUTANTE Y PRODUCIR UNOS NIVELES DE ACTIVIDAD -GALACTOSIDASA MUY SIMILARES EN TODOS LOS CASOS. SIN EMBARGO, LA ELIMINACION DE UN FRAGMENTO INTERNO DE 607 PB, PORTADOR DE UNA SECUENCIA ACTIVADORA, PROVOCA LA PERDIDA DE ACTIVIDAD ENZIMATICA. -QUE LOS NIVELES DE TRANSCRIPCION DEL GEN SLT2 AUMENTAN EN LA FASE G2; -QUE EL DOMINIO CATALITICO DE SLT2P ES SUFICIENTE PARA SU ACTIVIDAD, MIENTRAS QUE EL DOMINIO CARBOXILOTERMINAL ES DISPENSABLE.

Autor: POBLET ICART MONTSERRAT.
Año: 1994.
Universidad: ROVIRA I VIRGILI.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOTECNOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA INDUSTRIAL.

Resumen: EN 280 CEPAS DE LEUCONOSTOC OENOS AISLADAS DEL VINO SE DETERMINO, MEDIANTE MITOMICINA C, UN 45% DE LISOGENIA. LAS CONDICIONES OPTIMAS PARA LA MULTIPLICACION DE LOS FAGOS UNA VEZ AISLADOS FUERON DE 25 MM DE CACL2 EN EL MEDIO, PH 4.5 A 5.0, TEMPERATURA DE 25 C, Y INFECCION DE LAS BACTERIAS EN FASE EXPONENCIAL. SE CARACTERIZARON LOS FAGOS INDUCIDOS, MEDIANTE ESTUDIO DE LOS PERFILES DE RESTRICCION DE SUS ADN, OBSERVANDOSE DIFERENTES FAGOS EN LAS CEPAS DE L. OENOS.. A PARTIR DEL ADN FAGICO SE CONSTRUYERON SONDAS (MARCADAS CON 32-P, Y NO-ISOTOPICAS) QUE PERMITIERON DETECTAR LOS FAGOS Y LOS PROFAGOS INTEGRADOS, MEDIANTE HIBRIDACION. SE VERIFICO QUE TODOS LOS FAGOS DE L. OENOS HIBRIDABAN ENTRE ELLOS, Y CON ESTA TECNICA SE ENCONTRO UN 90% DE CEPAS LISOGENICAS. ESTAS SONDAS PERMITEN DIFERENCIAR ADEMAS L. OENOS DE OTRAS ESPECIES YA QUE LOS ADN DE SUS FAGOS NO HIBRIDAN CON LOS DE OTRAS. SE HA COMPROBADO TAMBIEN QUE LA INDUCCION ESPONTANEA DE LOS FAGOS DE CEPAS LISOGENICAS NO REPRESENTA UN PELIGRO PARA LA FERMENTACION MALOLACTICA (FML) DEBIDO A LAS CONDICIONES HOSTILES DEL VINO PARA EL DESARROLLO DE LOS FAGOS. SU PRESENCIA ESTA SIEMPRE LIGADA AL DESARROLLO BACTERIANO, Y NO ES UN INDICIO DE PROBLEMAS EN LA REALIZACION DE LA FML. EL NUMERO DE FAGOS QUE SE ENCUENTRAN NORMALMENTE EN EL VINO DURANTE LA FML ES DE UNAS 10 ELEVADA A 2 UFP/ML.

Autor: PRIETO SANTOS M. ISABEL.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR II PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LA ESTIRPE RC26 DEL GENERO AZOTOBACTER, HA SIDO AISLADA DEL SUELO POR SU CAPACIDAD PARA UTILIZAR ACIDO MONOCLOROACETICO COMO SUSTRATO DE CRECIMIENTO. A PARTIR DE LOS EXTRACTOS CELULARES, PURIFICAMOS Y CARACTERIZAMOS UNA HALOACIDO DESHALOGENASA ACTIVA SOBRE LOS ACIDOS MONOCLOROACETICO Y 2-MONOCLOROPROPIONICO. LA ENZIMA ES ESPECIFICA PARA LA FORMA L DEL ACIDO 2-MONOCLOROPROPIONICO DANDO COMO RESULTADO DE LA REACION UN PRODUCTO CON LA CONFIGURACION INVERTIDA. HEMOS ESTUDIADO LA POSIBILIDAD DE DESARROLLAR UN SISTEMA BASADO EN LA INMOVILIZACION DE LA ENZIMA EN UNA MATRIZ SOLIDA PARA UTILIZARLO EN PROCESOS DE ELIMINACION DE PRODUCTOS TOXICOS Y EN LA OBTENCION DE MOLECULAS OPTICAMENTE ACTIVAS, COMO D Y L-LACTATO Y D-MONOCLOROPROPIONICO. LA ENZIMA PURIFICADA FUE INMOVILIZADA SOBRE DEAE-SEPHACEL RESULTANDO SER MAS ESTABLE QUE LA ENZIMA SOLUBLE. EL COMPORTAMIENTO DEL COMPLEJO DESHALOGENASA/DEAE- SEPHACEL EN UN REACTOR DE FLUJO CONTINUO, MUESTRA QUE LA ENZIMA ES ACTIVA INCLUSO CUANDO FLUYE A SU TRAVES CONCENTRACIONES DE SUSTRATO QUE DAN LUGAR A LA INHIBICION DE LA ENZIMA SOLUBLE. DE FORMA PARALELA SE REALIZO UN ESTUDIO COMPARATIVO CON LA ENZIMA HOMOLOGA PROCEDENTE DE OTRA ESTIRPE BACTERIANA AISLADA DEL SUELO Y PERTENECIENTE AL GENERO PSEUDOMONAS.

Autor: QUERALT MONTAÑOLA ROSA.
Año: 1994.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: GRUPO DE GENETICA MOLECULAR Y GENOMA HUMANO. FACULTAD DE MEDICINA. UNIVERSIDAD DE BARCELONA. DIAGONAL 643 08028 BARCELONA.

Resumen: PARA PODER DETECTAR SECUENCIAS DE DNA CONSERVADAS, REGULADORAS DE LA EXPRESION DEL GEN DE PROTAMINA P1, HEMOS SECUENCIADO LA REGION PROMOTORA DEL GEN P1 DE DOS ROEDORES Y DE CUATRO PRIMATES QUE FUERON COMPARADOS CON LA REGION HOMOLOGA DEL GEN DE PROTAMINA P1 HUMANA, DE RATON, DE TORO Y DE JABALI. NOSOTROS HEMOS DEMOSTRADO LA PRESENCIA DE UNA SECUENCIA CONSENSUS, HSMCYTCAYAAT (PROT1C: PROTAMINE 1 CONSENSUS) DE LA POSICION -64 A LA POSICION -53 EN TODOS LOS GENES DE PROTAMINA P1 CONOCIDOS HASTA LA FECHA. OTRA SECUENCIA ALTAMENTE CONSERVADA TGTGAGG HA SIDO IDENTIFICADA 20+-3 NT EN EL EXTREMO 5' DE LA REGION PROT1C. ESTA SECUENCIA FORMA UN PALINDROME PERFECTO CON EL CENTRO DE SIETE NUCLEOTIDOS DE LA SECUENCIA PROT1C Y QUE SE ENCUENTRA AUSENTE EN LA REGION HOMOLOGA DE OTROS GENES. EN EL EXTREMO 5', EN LA POSICION -113 A -132, UNA TERCERA REGION ALTAMENTE CONSERVADA ES LA (MATGCCCATATWTGGRCAYG) LA CUAL ES ALTAMENTE SIMILAR CON EL SRE (SERUM-RESPONSE ELEMENT) DEL PROTO- ONCOGEN C-FOS Y CONTIENE LA REGION CENTRAL COMUN A TODOS LOS SRE'S (R. QUERALT AND R. OLIVA. (1993) GENE. 133, 197- 204). CON LA TECNICA DE RETARDACION EN GEL SE HAN IDENTIFICADO DISTINTAS PROTEINAS ESPECIFICAS DE DISTINTA MOVILIDAD CON LOS EXTRACTOS NUCLEARES DE TESTICULO MADURO, RIÑON, CEREBRO, BAZO E HIGADO DE RATA QUE SE UNEN A LAS SECUENCIAS PROT1C Y SRE. IN VITRO DNASE I FOOTPRINTING DEMUESTRA PROTECCION EN LA REGION DEL SRE EN LA POSICION -124 A -115. ADEMAS, HEMOS DETECTADO PROTECCION EN DOS NUEVAS REGIONES ADYACENTES AL SRE QUE HEMOS LLAMADO SAP (SRE ADJOINING PROTECTION; -153 A -141) Y SEP (SRE EXTENDED PROTECTION; DE -114 A -100) RESPECTIVAMENTE. EN ADICION HEMOS DETECTADO OTRAS DOS NUEVAS REGIONES EN LAS POSICIONES +27 A +46 Y +61 A +30, LA PRIMERA DE LAS CUALES CONTIENE LA SECUENCIA +42 TCGNNNNNGCCAA +30 RECONOCIDA POR EL FACTOR NUCLEAR I (NFI) (QUERALT R. AND OLIVA R. (1995) BBRC. 208, 802-812).

Autor: REAL COLLADO JOSE TOMAS.
Año: 1994.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y MEDICA 30B.

Resumen: LA ATEROSCLEROSIS ES LA PRINCIPAL CAUSA DE MORTALIDAD Y MORBILIDAD EN LAS SOCIEDADES OCCIDENTALES Y EN NUESTRO PAIS. UN FACTOR FUNDAMENTAL EN EL INICIO Y DESARROLLO DE LA ATEROSCLEROSIS ES LA ELEVACION DEL COLESTEROL. UN MODELO EXPERIMENTAL HUMANO QUE MUESTRA DICHA RELACION LO CONSTITUYEN LAS HIPERLIPIDEMIAS FAMILIARES CON FENOTIPO IIA. HEMOS APLICADO LAS TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA CON EL FIN DE CONSEGUIR LOS SIGUIENTES OBJETIVOS: - SENTAR LAS BASES DEL DIAGNOSTICO GENETICO DE LA HIPERCOLESTEROLEMIA FAMILIAR (HF) EN ESPAÑA. - COMPARAR EL DIAGNOSTICO CLINICO-BIOQUIMICO CON EL GENETICO PARA OPTIMIZAR LOS CRITERIOS DIAGNOSTICOS CLASICOS. - CONOCER LA REPERCUSION CARDIOVASCULAR DE LA HF EN NUESTRO PAIS. TRAS REALIZAR NUESTRO TRABAJO DE INVESTIGACION HEMOS LLEGADO A LAS SIGUIENTES CONCLUSIONES: 1) SE HAN ANALIZADO LAS FRECUENCIAS, HETEROCIGOSIDAD Y VALOR PIC DE 7 RFLPS DEL GEN DEL RECEPTOR DE LDL, SIENDO NCOI, HINCII, AVAII Y PVUII LOS DE MAYOR INDICE DE HETEROCIGOSIDAD. 2) LAS COMBINACIONES DE LOS MARCADORES GENETICOS MAS INFORMATIVAS DE NUESTRO ESTUDIO SON NCOI Y PVUII JUNTO CON AVAII O HINCII. 3) LAS TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR PERMITEN DIAGNOSTICAR Y CLASIFICAR CORRECTAMENTE A 15 FAMILIAS CON HIPERLIPIDEMIAS FAMILIARES IIA. 4) EN NINGUN CASO INDICE ESTUDIADO HEMOS DETECTADO LA MUTACION 3500. 5) EL ESTUDIO CLINICO-BIOQUIMICO DE LOS INDIVIDUOS HF Y NO HF DIAGNOSTICADOS GENETICAMENTE Y LA COMPARACION ENTRE LOS CRITERIOS DIAGNOSTICOS INICIALES Y EL DIAGNOSTICO GENETICO HA PERMITIDO ESTABLECER NUEVOS CRITERIOS DIAGNOSTICOS. 6) LAS CARACTERISTICAS DIFERENCIALES MAS IMPORTANTES ENTRE EL GRUPO DE HETEROCIGOTOS Y EL GRUPO CONTROL SON: LA PRESENCIA DE XANTOMAS, XANTELASMAS, ARCO, CARDIOPATIA ISQUEMICA Y ELEVACION DEL COLESTEROL TOTAL, LDL-COLESTEROL Y APOB. 7) LA REPERCUSION CARDIOVASCULAR EN EL GRUPO DE HETEROCIGOTOS ES INFERIOR A LA PRESENTADA EN OTROS PACIENTES HF DE OTRAS POBLACIONES.

Autor: REGUERO ZABALA M. ASUN.
Año: 1994.
Universidad: PAIS VASCO.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO COMPARATIVAMENTE LA INTERACCION DE LOS ACIL-COA Y LAS ACILCARNITINAS CON FOSFOLIPIDOS. PARA ELLO SE HAN EMPLEADO UNA VARIEDAD DE TECNICAS BIOFISICAS: LA BALANZA DE LANGMUIR, LA TURBIDOMETRIA, LA ESPECTROSCOPIA DE INFRARROJO Y LA CALORIMETRIA DIFERENCIAL DE BARRIDO. EN TODOS LOS CASOS EXCEPTO EL ULTIMO, LOS ACIL-COA Y LAS ACILCARNITINAS SE COMPORTAN DE MANERA DIFERENTE EN SU INTERACCION CON BICAPAS DE FOSFATIDILCOLINA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS SE CORRELACIONAN CON EL REQUERIMIENTO FISIOLOGICO DEL DOBLE INTERCAMBIO DE COENZIMA A-CARNITINA- COENZIMA A DURANTE LA ENTRADA DE LOS ACIDOS GRASOS A LA MITOCONDRIA Y CON LA APARICION DE UNA SERIE DE TRASTORNOS CLINICOS ASOCIADOS A LA FALTA DE LOS ENZIMAS IMPLICADOS EN ESTE INTERCAMBIO.

Autor: REYES RAMIREZ FRANCISCA .
Año: 1994.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: TECNICAS DE INVESTIGACION EN BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL SISTEMA REDUCTOR DEL NITRATO DE RHODOBACTER SPHAEROIDES DSM 158 ESTA COMPUESTO POR TRES PROTEINAS, NAPA, NAPB Y NAPC, CODIFICADAS POR TRES GENES LOCALIZADOS EN LA UNIDAD TRANSCRIPCIONAL NAPABC. EL OPERON NAP NO SE REPRIME POR OXIGENO Y SE EXPRESA PARCIALMENTE EN AUSENCIA DE NITRATO, PERO AUN NO SE HA IDENTIFICADO EL PROMOTOR. LAS PROTEINAS NAPA Y NAPB SON PERIPLASMICAS, MIENTRAS QUE NAPC ESTA ANCLADA A LA MEMBRANA PLASMATICA. NAPA Y NAPB SON LAS DOS SUBUNIDADES DE LA NITRATO REDUCTASA: LA PRIMERA, DE 90 KDA, POSEE UN CENTRO (4FE-4S) Y UN COFACTOR CONSTITUIDO POR UN DINUCLEOTIDO DE MOLIBDOPTERINA Y GUANINA; Y LA SEGUNDA, DE 14,5 KDA, ES UN CITOCROMO CON DOS GRUPOS HEMO DE TIPO C. NAPC ES UNA PROTEINA DE 25,5 KDA ANCLADA A LA MEMBRANA QUE POSEE CUATRO GRUPOS HEMO DE TIPO C. LA DISPOSICION DE ESTAS PROTEINAS Y EL ANALISIS GENETICO MEDIANTE MUTACIONES EN CADA UNO DE ESTOS GENES, CONSISTENTES EN LA INSERCION DE FRAGMENTOS DE DNA QUE CODIFICAN RESISTENCIA A GENTAMICINA O KANAMICINA, REVELA QUE LA REDUCCION DEL NITRATO TIENE LUGAR MEDIANTE LA TRANSFERENCIA DE ELECTRONES DE FORMA SECUENCIAL DESDE EL CITOPLASMA A LA PROTEINA NAPC DE MEMBRANA Y DE ESTA A LOS COMPONENTES PERIPLASMICOS NAPB Y NAPA. LOS ENLACES HIDROFOBICOS PUEDEN JUGAR UN PAPEL IMPORTANTE EN LA INTERACCION MUTUA DE ESTAS PROTEINAS. LA REDUCCION DEL NITRATO IN VIVO REQUIERE DE FORMA ABSOLUTA LAS TRES PROTEINAS, MIENTRAS QUE IN VITRO, CON DONADORES DE ELECTRONES ARTIFICIALES, NO SE REQUIERE UN PRODUCTO NAPC FUNCIONAL.

Autor: REYES ROSA JOSE CARLOS.
Año: 1994.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: LAS CIANOBACTERIAS ASIMILAN AMONIO MEDIANTE LA ACCION SECUENCIAL DE LA GLUTAMINA SINTETASA (GS) Y LA GLUTAMATO SINTASA (GOGAT), EN EL CICLO CONOCIDO COMO GS-GOGAT. EN LA CIANOBACTERIA SYNECHOCYSTIS SP. PCC 6803 HEMOS DEMOSTRADO LA EXISTENCIA DE DOS GENES QUE CODIFICAN ENZIMAS CON ACTIVIDAD GLUTAMINA SINTETASA, DENOMINADOS GLNA Y GLNN, QUE CODIFICAN PARA UNA GS TIPO I Y GS TIPO III RESPECTIVAMENTE. LA EXPRESION DE AMBOS GENES ESTA REGULADA A NIVEL TRANSCRIPCIONAL, LO CUAL SE DEMOSTRO EN EXPERIMENTOS DE NORTHERN BLOT Y MEDIANTE FUSIONES TRANSCRIPCIONALES DE LAS REGIONES PROMOTORAS DE AMBOS GENES CON UN GEN TESTIGO. LA MAXIMA EXPRESION SE OBTUVO EN AMBOS CASOS EN CONDICIONES DE DEFICIENCIA DE NITROGENO. OTROS FACTORES AMBIENTALES COMO LA LUZ INCIDENTE Y LA DEFICIENCIA EN OTROS NUTRIENTES TAMBIEN AFECTARON A LA TRANSCRIPCION DE AMBOS GENES. LA ACTIVIDAD GS ESTA TAMBIEN REGULADA A NIVEL POSTTRANSCRIPCIONAL. EN EFECTO AMBAS ENZIMAS (GSI Y GSIII) SE INACTIVAN EN PRESENCIA DE AMONIO.

Autor: RIVAS CABAÑERO LINA.
Año: 1994.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: FISIOLOGIA Y FARMACOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR. BIENIO 1991-93 .

Resumen: LOS EXPERIMENTOS REALIZADOS DEMUESTRAN QUE LA SINTESIS Y LIBERACION LOCAL DE NO JUEGAN UN PAPEL MODULADOR DE LA LESION RENAL INDUCIDA POR EL TRATAMIENTO CON ALTAS DOSIS DE GENTAMICINA EN RATAS. ESTA CONCLUSION SE DEDUCE DEL HECHO DE QUE LA INHIBICION CRONICA DE SU SINTESIS AGRAVA EL DAÑO RENAL INDUCIDO POR GENTAMICINA, MIENTRAS QUE LA ESTIMULACION DE LA MISMA MEJORA LA ALTERACION DE LA FUNCION RENAL INDUCIDA POR EL ANTIBIOTICO. ESTA CONCLUSION SE RATIFICA POR EL HECHO DE QUE LOS GLOMERULOS PROCEDENTES DE RATAS TRATADAS CON GENTAMICINA PRESENTAN UNA PRODUCCION AUMENTADA DE NO. ESTE AUMENTO EN LA PRODUCCION GLOMERULAR DE NO SE OBSERVA TAMBIEN EN GLOMERULOS PROCEDENTES DE ANIMALES CON INSUFICIENCIA RENAL INDUCIDA POR OTROS MECANISMOS (ISQUEMIA, OTROS TOXICOS), ASI COMO EN GLOMERULOS DE RATAS CONTROL INCUBADOS CON GENTAMICINA. TODO ESTO PERMITE AFIRMAR QUE LA CAUSA DEL AUMENTO DE PRODUCCION GLOMERULAR DE NO ES TANTO EL EFECTO DE LA GENTAMICINA COMO LA INSUFICIENCIA RENAL QUE CONLLEVA EL TRATAMIENTO CRONICO CON EL ANTIBIOTICO.

Autor: RIVAS VAZQUEZ CARMEN.
Año: 1994.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MARINA Y ACUICULTURA .

Resumen: EL FIN FUNDAMENTAL DE ESTE ESTUDIO FUE EL CONOCIMIENTO DEL CICLO VITAL DEL AQUAREOVIRUS AISLADO DEL RODABALLO, TRV, TANTO IN VIVO COMO IN VITRO. MEDIANTE EL ESTUDIO IN VITRO DETERMINAMOS QUE EL VIRUS PENETRA EN LA CELULA MEDIANTE UN PROCESO DE ENTRADA DIRECTO, REPLICANDO POSTERIORMENTE EN EL INTERIOR DE VIROPLASMAS CITOPLASMATICOS. EN LA SALIDA AL EXTERIOR DE LA CELULA PARTICIPAN VESICULAS CITOPLASMATICAS QUE LO TRANSPORTAN PROXIMO A LA MEMBRANA PLASMATICA. TRANSCRIPCION Y TRADUCCION PARECEN SIMULTANEA. EL ESTUDIO IN VIVO MUESTRA QUE LA ENTRADA DEL VIRUS EN EL RODABALLO OCURRE VIA ORAL O A TRAVES DE LAS AGALLAS, DISPERSANDOSE POR TODO EL ORGANISMO EN EL INTERIOR DE UNA CELULA SANGUINEA. EL ORGANO DIANA ES EL RIÑON. ESTRES O LA INFECCION SIMULTANEA CON UN AGENTE BACTERIANO FAVORECEN LA REPLICACION VIRAL. EL TRV ES ALTAMENTE ESTABLE EN EL MEDIO AMBIENTE. EL ISOPROPANOL Y LA FORMAMIDA SON ACTIVOS EN LA REDUCCION DE LA INFECTIVIDAD VIRAL. DURANTE LA REPLICACION OCURREN PROCESOS DE RECOMBINACION GENETICA.

Autor: ROA ARRANZ ANA M..
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HAN ESTUDIADO LAS BASES MOLECULARES IMPLICADAS EN DETERMINAR LA ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO DE LA PGA DE KLUYVERA CITROPHILA. ASI, SE HAN OBTENIDO MUTANTES CON DIFERENTE ESPECIFICIDAD DE SUSTRATO, MEDIANTE UN PROCESO DE PRESION SELECTIVA, SIENDO LOCALIZADOS LOS RESIDUOS AMINOACIDICOS RESPONSABLES. LA COMPARACION DE LA SECUENCIA DE ESTA ENZIMA CON OTRAS DE LA MISMA FAMILIA HA PERMITIDO REALIZAR EL DISEÑO TEORICO DE POTENCIALES RESIDUOS ESTRUCTURAL O FUNCIONALMENTE IMPORTANTES. POR OTRA PARTE, SE HA INVESTIGADO LA POSIBILIDAD DE EMPLEAR SUSTRATOS A LOS DESCRITOS CLASICAMENTE, DETERMINANDO LA CAPACIDAD DE LA PGA DE HIDROLIZAR ESTERES DE FENOL. ESTE HECHO HA PERMITIDO REALIZAR EL ESTUDIO CINETICO EN EL ESTADO PRE-ESTACIONARIO, DE LA PGA NATIVA Y DE LA MUTANTE ADL, CARACTERIZANDO EL INTERMEDIO COVALENTE ACILENZIMA QUE SE FORMA DURANTE EL PROCESO DE CATALISIS. ASIMISMO, SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE LA REGULACION Y EXPRESION DEL GEN PAC QUE CODIFICA POR LA PGA. CON ESTE OBJETIVO, SE HA ANALIZADO EL CONTROL QUE EJERCEN SOBRE LA ACTIVIDAD PGA DIFERENTES FACTORES, TALES COMO: LA TEMPERATURA, LA REPRESION CATABOLICA Y LA INDUCCION POR ACIDO FENILACETICO, A NIVEL DE TRANSCRIPCION Y POSTRADUCIONAL. SE HA IDENTIFICADO EL PROMOTOR Y DEMAS ELEMENTOS QUE PARTICIPAN EN LA REGULACION DE LA EXPRESION DEL GEN PAC DE K. CITROPHILA, Y SE HAN COMPARADO CON LOS RESPONSABLES DE CONTROLAR LA EXPRESION DEL GEN PAC DE ESCHERICHIA COLI.

Autor: RODRIGUEZ CONCEPCION MANUEL.
Año: 1994.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN EL GUISANTE (PISUM SATIVUM L.) LAS GIBERELINAS ESTAN IMPLICADAS EN LA TRANSFORMACION DEL OVARIO DE LA FLOR EN FRUTO EN DESARROLLO. LOS OVARIOS NO POLINIZADOS PUEDEN SER INDUCIDOS A FRUCTIFICAR MEDIANTE LA APLICACION EXOGENA DE ACIDO GIBERELICO (GA3), DANDO LUGAR A FRUTOS PARTENOCARPICOS, SIN SEMILLAS. EL OBJETIVO PRINCIPAL DEL TRABAJO HA SIDO EL ESTUDIO DE LOS CAMBIOS EN LA EXPRESION GENICA DURANTE LA FRUCTIFICACION INDUCIDA POR GA3. EL ESCRUTINIO DIFERENCIAL DE UNA GENOTECA DE CDNA DE OVARIOS TRATADOS CON GA3 CON SONDAS + (PROCEDENTES DEL MRNA DE OVARIOS TRATADOS) Y - (DE NO TRATADOS) HA PERMITIDO AISLAR 4 CLONES DIFERENCIALES CUYA EXPRESION ERA REPRIMIDA (LOXG) O ACTIVADA (G14, G17 Y G19) POR EL TRATAMIENTO CON GA3. LOXG ES UNA LIPOXIGENASA (LOX). SU EXPRESION ES CONSTANTE EN OVARIOS NO INDUCIDOS PERO ES PARCIALMENTE REPRIMIDA TRAS INDUCIRSE LA FRUCTIFICACION. LA ACTIVIDAD LOX TAMBIEN DECRECE EN OVARIOS DE GUISANTE Y TOMATE TRATADOS CON GA/, SUGIRIENDO QUE ESTE ES UN FENOMENO EXTENDIDO EN PLANTAS DURANTE LA FRUCTIFICACION. EXISTE UN PATRON DE EXPRESION SIMILARES TODOS LOS ORGANOS ESTUDIADOS QUE IMPLICA LA REPRESION DE LOXG A LO LARGO DEL DESARROLLO: EL MAYOR NIVEL DE EXPRESION SE OBSERVA DURANTE LOS PRIMEROS ESTADIOS DEL CRECIMIENTO DE CADA ORGANO Y LUEGO DISMINUYE PROGRESIVAMENTE HASTA QUE DEJA DE EXPRESARSE CUANDO EL TEJIDO DEJA DE CRECER. LA EXPRESION DE LOXG ESTA ASOCIADA AL POTENCIAL DE CRECIMIENTO DE LOS TEJIDOS DONDE SE EXPRESA. G14 PODRIA SER UNA PROTEINA ESTRUCTURAL DE LOCALIZACION GENERALIZADA EN LA PLANTA DEL GUISANTE. G17 Y G19 PARECEN SER PROTEINAS DE PARED CELULAR CUYA FUNCION SE EJERCE CASI EXCLUSIVAMENTE EN EL CRECIMIENTO DEL OVARIO Y EL FRUTO.

Autor: RODRIGUEZ FRANCO MARTA.
Año: 1994.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA VEGETAL I PROGRAMA DE DOCTORADO: FISIOLOGIA VEGETAL.

Resumen: SE HA PUESTO A PUNTO UN NUEVO METODO PARA LA OBTENCION DE MUTANTES ALTERADOS EN LA RESPUESTA A LUZ AZUL EN N.CRASSA. MEDIANTE LA FORMACION DE UNA NUEVA CEPA DE N.CRASSA. CAPAZ DE CRECER EN DISTINTOS SISTEMAS DE SELECCION EN OBSCURIDAD O EN PRESENCIA DE LUZ, HA SIDO POSIBLE REALIZAR UNA MUTAGENESIS POR IRRADIACION UV Y OBTENER TRES TIPOS DE MUTANTES: MUTANTES ESTRICTAMENTE CIEGOS ("WHITE COLLAR"); MUTANTES ATENUADOS (BLR), Y UN MUTANTE CONSTITUTIVO QUE ES CAPAZ DE ACUMULAR CAROTENIODES EN OBSCURIDAD. DICHOS MUTANTES SE HAN CARACTERIZADO AL NIVEL DE LA EXPRESION DE DISTINTOS GENES FOTOINDUCIBLES CONOCIDOS. LA IMPORTANCIA DEL METODO ESTRIBA EN LA FACILIDAD DE OBTENER LOS DISTINTOS MUTANTES EN UN NUMERO MUY ELEVADO DE CELULAS GRACIAS A LA SELECCION INMEDIATA DE LAS CEPAS QUE MUESTRAN ALTERACION EN LA PERCEPCION Y TRANSMISION DEL ESTIMULO LUMINOSO. ADEMAS, GRACIAS A LOS SISTEMAS DE SELECCION, LA POSIBILIDAD DE CLONAR EL GEN MUTADO PUEDE SER FACTIBLE DE UNA FORMA RELATIVAMENTE SIMPLE POR COMPLEMENTACION CON UNA GENOTECA DE NEUROSPORA.

Autor: RODRIGUEZ GONZALEZ FERNANDO.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR .

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA CARACTERIZADO UN GEN DEL VIRUS DE LA PESTE PORCINA AFRICANA, EL QUE CODIFICA POR LA PROTEINA P54 DE 25 KDA DE PESO MOLECULAR. EL GEN SE HA LOCALIZADO EN EL EXTREMO DERECHO DEL GENOMA TRANSCRIBIENDOSE HACIA LA IZQUIERDA DE ESTE A PARTIR DE LA CADENA COMPLEMENTARIA, DANDO LUGAR A UN RNA MENSAJERO TARDIO CON UN TAMAÑO APROXIMADO DE 1.45 KB. EL INICIO DE TRANSCRIPCION DEL GEN SE LOCALIZA A UNOS 14-15 NUCLEOTIDOS DEL CODON DE INICIACION. LA PROTEINA P54 SE LOCALIZA ASOCIADA A LAS FACTORIAS VIRICAS Y SE INCORPORA A LA MEMBRANA EXTERNA DE LOS VIRIONES MADUROS, LA PROTEINA P54 ES ESENCIAL PARA LA VIABILIDAD DEL VIRUS. DURANTE LA PROPAGACION DEL VIRUS EN CULTIVO CELULAR, LA PROTEINA P54 SUFRE MODIFICACIONES, SIENDO UN MARCADOR DE LA APARICION DE SUBPOBLACIONES VIRICAS DIFERENCIABLES POR EL TAMAÑO DE LA PROTEINA P54 QUE CODIFICAN. LAS BASES MOLECULARES DE ESTOS CAMBIOS CONSISTEN EN ADICIONES Y DELECCIONES DE UNIDADES REPETIDAS DE NUCLEOTIDOS DENTRO DEL GEN. LA PROTEINA P54 SE HA CARACTERIZADO COMO INDUCTORA DE ANTICUERPOS NEUTRALIZANTES. SE HAN ADAPTADO ADEMAS DIFERENTES SISTEMAS DE DIAGNOSTICO CON LA PROTEINA P54 EXPRESADA EN E. COLI Y EN BACULOVIRUS.

Autor: RODRIGUEZ IÑIGO ELENA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO HEMOS ANALIZADO MEDIANTE EL EMPLEO DE DIVERSAS TECNICAS CITOGENETICAS Y MOLECULARES LAS CARACTERISTICAS DE LA HETEROCROMATINA PRESENTE EN CUATRO ESPECIES DE ACRIDIDOS PERTENECIENTES AL GENERO DOCIOSTAURUS Y QUE COMPARTEN UN CARIOTIPO EN APARIENCIA IDENTICO.LOS RESULTADOS OBTENIDOS REFLEJAN LA EXISTENCIA DE DIFERENCIAS MUY SIGNIFICATIVAS ENTRE LAS ESPECIES ESTUDIADAS, Y QUE SE REFIEREN PRINCIPALMENTE A LAS SIGUIENTES CARACTERISTICAS: -MORFOLOGIA CROMOSOMICA; -NUMERO Y LOCALIZACION DE NORS ACTIVOS; -CANTIDAD Y DISTRIBUCION DE LA HETEROCROMATINA CONSTITUTIVA; -CONTENIDO Y DISTRIBUCION DE DISTINTAS FAMILIAS DE SECUENCIAS DE DNA ALTAMENTE REPETIDAS.ESTOS RESULTADOS SE DISCUTEN EN CONJUNTO PARA CONTRASTAR LOS OBTENIDOS POR EL ANALISIS CITOGENETICO Y MOLECULAR Y SUGERIR POSIBLES MECANISMOS DE CAMBIO CROMOSOMICO QUE HAN PODIDO INCIDIR EN LA EVOLUCION DE LAS CUATRO ESPECIES.

Autor: ROGERO MARIN OSCAR.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: SE HAN PREPARADO ANTISUEROS CONTRA PROTEINAS RECOMBINANTES PREPARADAS A PARTIR DE LOS CDNAS DEL GEN SHAKER DE DROSOPHILA MELANOGASTER, QUE ES EL GEN ESTRUCTURAL PARA LAS SUBUNIDADES ALFA DE ALGUNOS DE LOS CANALES DE POTASIO DEPENDIENTES DE VOLTAJE DE LA MOSCA. LA UTILIZACION DE ESTOS ANTISUEROS HA PERMITIDO DEMOSTRAR QUE A PARTIR DEL GEN ORIGINAN DIVERSAS ISOFORMAS DE PROTEINA, COMO SE HABIA PROPUESTO A PARTIR DE LA ESTRUCTURA DEL GEN. LA DETECCION INMUNOHISTOQUIMICA DEL CANAL, MUESTRA QUE ES EXPRESADO EN MUY DIVERSOS LUGARES DENTRO DEL SISTEMA NERVIOSO Y DE LOS MUSCULOS, LO QUE SUGIERE QUE ASUME MULTIPLES FUNCIONES. MEDIANTE WESTERN-BLOT SE HA DETERMINADO QUE LA VARIEDAD DE ISOFORMAS PRODUCIDA A PARTIR DEL GEN ES UTILIZADA DE FORMA DIFERENCIAL DEPENDIENDO DE LA LOCALIZACION ANATOMICA Y DEL ESTADIO DE DESARROLLO. LA CUANTIFICACION DE LAS CANTIDADES DE CANAL SHAKER EXPRESADAS EN MUTANTES HIPEREXCITABLES HAN MOSTRADO QUE EXISTE UN SISTEMA QUE MODULA ESTAS CANTIDADES EN FUNCION DE LA EXCITABILIDAD CELULAR PROBABLEMENTE ACTUANDO SOBRE LA TRANSCRIPCION.