ENZIMOLOGIA, 11

Autor: GRASA QUINTIN BIENVENIDA.
Año: 1988.
Universidad: ZARAGOZA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOMEDICINA Y SALUD PUBLICA.

Resumen: LA DETERMINACION DE LOS PARAMETROS QUE CARACTERIZAN A ESTA ENZIMA, TALES COMO PESO MOLECULAR, PUNTO ISOELECTRICO, CONSTANTE DE MICHAELIS(KM) RESPECTO A NEOMICINA, PH OPTIMO. FUERZA IONICA, Y CUANTIFICACION Y CUALIFICACION DE AMINOACIDOS NOS PERMITE PROFUNDIZAR EN EL COMPORTAMIENTO DE LA MISMA. ESTA ENZIMA MODIFICA KANAMICINA, NEOMICINA Y BUTIROSINA. DICHA MODIFICACION IMPLICA LA INACTIVACION DEL ANTIBIOTICO, MIENTRAS QUE AMIKACINA ES UN SUBSTRATO POBRE Y NO SUFRE INACTIVACION. LA TECNICA AUTORRADIOGRAFICA APORTA UNA NUEVA DIMENSION EN LA LECTURA DE LA REACCION ENZIMATICA AL PODER RELACIONAR LOS HIDROXILOS DIANA CON BANDAS (PRODUCTOS DE LA REACCION) DE PESOS MOLECULARES DIFERENTES. EL ANALISIS DE LOS COMPLEJOS, A LOS QUE LLAMAMOS PRODUCTOS DE LA REACCION, DEMUESTRA SU ESTABILIDAD, Y LA PRESENCIA DE PROTEINAS REACCIONANTES CON EL COFACTOR. ESTAS PROTEINAS NO SON LA ENZIMA YA QUE NO REACCIONAN CON EL ANTISUERO ESPECIFICO Y SU DISTRIBUCION DEPENDE DEL UNICO COMPONENTE VARIABLE, ES DECIR LOS AMINOGLICOSIDOS. LA EXISTENCIA DE ESTAS PROTEINAS PORTADORAS CONTRIBUYE A LOS MECANISMOS DE INACTIVACION ENZIMATICA.

Autor: MONTERO FERNANDEZ M. SOL.
Año: 1988.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: SE HA PURIFICADO LA GLUTACION REDUCTASA DE PHYCOMYCES BLAKESLEEANUS NRRL 1555 (-) A HOMOGENEIDAD ELECTROFORETICA; OBTENIENDOSE UNA PURIFICACION DE 7650 VECES, CON UN RENDIMIENTO DEL 36%. LA ENZIMA MUESTRA EL ESPECTRO DE ABSORCION TIPICO DE UNA FLAVOPROTEINA CON FAD COMO GRUPO PROSTETICO. LA GLUTATION REDUCTASA NATIVA ES UN DIMERO (MR 100.000) CONSTITUIDO POR DOS SUBUNIDADES IDENTICAS (MR 50.000), CON UNA MOLECULA DE FAD POR SUBUNIDAD. LA ENZIMA UTILIZA PREFERENTEMENTE NADPH COMO DONADOR DE ELECTRONES, EL PH OPTIMO CON ESTE NUCLEOTIDO DE 7.5. LOS PATRONES CINETICOS OBTENIDOS A PH 7.5 SON CONSISTENTES CON UN MECANISMO RAMIFICADO, QUE INCLUYE UN MECANISMO PING-PONG CON FORMACION DE UN COMPLEJO ABORTIVO F-NADPH, OPERATIVO A CONCENTRACIONES BAJAS DE GSSG, Y UN MECANISMO SECUENCIAL ORDENADO, PREDOMINANTE A CONCENTRACIONES ALTAS DE SUSTRATO. A VALORES DE PH INFERIORES A 7.5, LA ENZIMA MUESTRA ADEMAS INHIBICION POR GSSG, INDEPENDIENTE DE LA CONCENTRACION DE NADPH. EN EL RANGO DE PH ACIDOS, LA ENZIMA MUESTRA UN COMPORTAMIENTO APARENTEMENTE HISTERETICO, EXHIBIENDO UN LAG EN LAS CURVAS DE PROGRESO DE LAS REACCIONES ENZIMATICAS, QUE PARECE REQUERIR LA PRESENCIA DE LOS DOS SUSTRATOS. LA CONSTANTE DE VELOCIDAD DE LA TRANSICION (K) DISMINUYE AL INCREMENTARSE LA CONCENTRACION DE AMBOS SUSTRATOS Y AUMENTA A MEDIDA QUE SE INCREMENTA LA CONCENTRACION DE ENZIMA, EL PH Y LA FUERZA IONICA. A BAJAS CONCENTRACIONES, GSH Y NADP+ EJERCEN UN EFECTO ACTIVADOR MAS ACUSADO SOBRE LA VELOCIDAD INICIAL. LOS RESULTADOS SUGIEREN QUE ESTE APARENTE COMPORTAMIENTO HISTERETICO PUDIERA SER DEBIDO A UN FENOMENO DE ACTIVACION ORIGINADO POR LA ACUMULACION DE LOS PRODUCTOS DE LA REACCION CON EL TIEMPO.

Autor: OSPINA GIRALDO BLANCA.
Año: 1988.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.

Resumen: SE HAN IDENTIFICADO Y CARACTERIZADO POR PRIMERA VEZ EN DICTYOS TELIUM DISCOIDEUM DOS ACTIVIDADES TIPO CASEINA KINASA I (CKI-1 Y CKI-2) CUYA DIFERENCIA PRINCIPAL ES SU SENSIBILIDAD A HEPARINA. TAMBIEN MUESTRAN UN PATRON DIFERENTE DE FOSFORILACION SOBRE CASEINA. ESTAS ACTIVIDADES ESTAN PRESENTES TANTO EN LA FRACCION SOLUBLE DE LA CELULA COMO EN LA PARTICULADA. EN LA FRACCION SOLUBLE DE D. DISCOIDEUM SE HA PURIFICADO Y CARACTERIZADO UNA CASEINA KINASA TIPO II CON UN PESO MOLECULAR NATIVO DE APROXIMADAMENTE 150 KDA. MEDIANTE EXPERIMENTOS INMUNOLOGICOS Y DE AUTOFOSFORILACION, HEMOS PODIDO DETERMINAR QUE EL ENZIMA ESTA CONSTITUIDO POR UNA UNICA SUBUNIDAD DE 37 KDA A LA VEZ CATALITICA Y REGULADORA, CON CAPACIDAD DE AUTOFOSFORILARSE. LA ACTIVIDAD CASEINA KINASA II PURIFICADA DE LA FRACCION SOLUBLE SE HA COMPARADO CON OTRA ACTIVIDAD CASEINA KINASA II PURIFICADA DE NUCLEOS DEL MISMO ORGANISMO, ENCONTRANDOSE GRAN SIMILITUD TANTO A NIVEL ESTRUCTURAL COMO BIOQUIMICO; QUIZA PODEMOS RESALTAR COMO DIFERENCIA MAS LLAMATIVA LA DISTINTA RESPUESTA DE LA ACTIVIDAD DE ESTOS ENZIMAS A LA CONCENTRACION SALINA; MIENTRAS QUE EL ENZIMA SOLUBLE NECESITA SAL PARA SU ACTIVIDAD OPTIMA, LA NUCLEAR SE INHIBE A CUALQUIER CONCENTRACION DE SAL. EXISTE HOMOLOGIA ENTRE LOS DETERMINANTES ANTIGENICOS DE LAS CASEINA KINASAS II DE D. DISCOIDEUM Y LOS DE UNA CASEINA KINASA II DE MAMIFERO LO QUE SUGIERE QUE SE TRATA DE UN ENZIMA MUY CONSERVADO. OBSERVAMOS CAMBIOS EN ACTIVIDAD ESPECIFICA DE LAS KINASAS TIPO II ASOCIADOS A DIFERENCIACION, LO QUE SUGIERE QUE ESTOS ENZIMAS PUEDEN TENER UN PAPEL IMPORTANTE EN ESTE ORGANISMO.

Autor: PEREZ GRAU M. PILAR.
Año: 1988.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES BIOMEDICAS DEL C.S.I.C. .

Resumen: LA ACTIVIDAD RIBONUCLEASA VI DE ARTEMIA SE INCREMENTA BRUSCAMENTE EN EL PASO DE GASTRULAS ENQUISTADAS (QUISTES) A NAUPLIAS, UN PERIODO DE BAJA ACTIVIDAD METABOLICA. EL OBJETIVO DE ESTE TRABAJO HA SIDO CONOCER SI LA ACTIVIDAD DE NAUPLIAS ESTABA YA PRESENTE EN QUISTES Y SE ENCONTRABA ENMASCARADA POR COMPUESTOS INHIBIDORES DE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA. HEMOS ENCONTRADO QUE EXTRACTOS DE QUISTES DE ARTEMIA CONTIENEN COMPUESTOS CON FUERTE PODER INHIBIDOR DE LA ACTIVIDAD RNASA VI. LA MAYOR PARTE SON COMPONENTES DE BAJO PESO MOLECULAR, DIALIZABLES Y SENSIBLES A FOSFATASA ALCALINA Y FOSFODIESTERASA DE VENENO DE SERPIENTE, SUGIRIENDO QUE SE TRATA DE COMPUESTOS DE CARACTER NUCLEOTIDICO. EN UNA EXPLORACION DE EFECTORES DE LA ENZIMA ENTRE NUCLEOTIDOS PRESENTES EN ARTEMIA HEMOS ENCONTRADO QUE GP4G ES UN INHIBIDOR (KI=75UM) NO COMPETITIVO DE LA RIBONUCLEASA. NI AP4A NI GP3G SON BUENOS INHIBIDORES DE LA ENZIMA. LOS PRODUCTOS DE HIDROLISIS DEL GP4G (GMP, GDP Y GTP) SON TAMBIEN INHIBIDORES, SIENDO EL MAS EFICAZ 5'-GMP (KI=5 UM). ENTRE LOS MONONUCLEOTIDOS DE ADENINA 5'-AMP ES EL INHIBIDOR MAS POTENTE (KI=10UM) DE LA ENZIMA, DESPUES DE 2'-CMP (KI=1 UM), CUYA PRESENCIA HEMOS DETECTADO, POR VEZ PRIMERA, EN EXTRACTOS PERCLORICOS DE QUISTES. LA ELIMINACION DE LOS INHIBIDORES PRESENTES EN EXTRACTOS DE QUISTES DE ARTEMIA POR DIGESTION DE FOSFATASA Y FOSFODIESTERASA TIENE COMO CONSECUENCIA UN NOTABLE INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD RNASA. LA ACTIVIDAD RESULTANTE EN QUISTES ES SOLO UNA PEQUEÑA FRACCION DE LA ENZIMA PRESENTE EN NAUPLIAS RECIEN EMERGIDAS. POR TANTO, EL FUERTE INCREMENTO DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA CONCOMITANTE CON LA EMERGENCIA DE LAS LARVAS NO SE DEBE A UN FENOMENO DE DESENMASCARAMIENTO Y DEBE IMPLICAR SINTESIS DE NOVO DE LA ENZIMA.

Autor: PEREZ GRIERA JAUME.
Año: 1988.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: SERVICIO ANALISIS CLINICOS, HOPITAL JUAN XXIII DE TARRAGONA..

Resumen: LOS ALCOHOLES PRODUCIDOS POR REACCIONES ENDOGENAS EN EL ORGANISMO SON METABOLIZADOS POR LOS ISOENZIMAS DE LA ALCOHOL DESHIDROGENASA (ADH). PERO TAMBIEN ACTUAN METABOLIZANDO EL ALCOHOL PROCEDENTE DE LA INGESTA. DESDE HACE TIEMPO SE CONOCE QUE EXISTE VARIABILIDAD EN EL PREDOMINIO DE DISTINTOS ISOENZIMAS SEGUN CADA INDIVIDUO Y SEGUN A LA RAZA A LA QUE PERTENEZCA. EL PROYECTO PRINCIPAL DE ESTA TESIS ES LA DETERMINACION DE LA CONSTANTE DE MICHAELIS (KM) DE LA ALCOHOL DESHIDROGENASA DEL TEJIDO HEPATICO PROCEDENTE DE BIOPSIAS, PARA DETERMINAR LA POSIBLE RELACION ENTRE EL TIPO DE ISOENZIMA PEDOMINANTE Y LA APARICION DE CIRROSIS HEPATICA. PARA ELLO SE DETERMINO LA ACTIVIDAD DE ADH DEL HOMOGENEIZADO DE LAS BIOPSIAS A DISTINTAS CONCENTRACIONES DE ETANOL. LAS MUESTRAS SE CLASIFICARON SEGUN EL CONSUMO ENOLICO Y EL DIAGNOSTICO ANATOMO-PATOLOGICO EN SEIS GRUPOS: 1) ALCOHOLICOS SANOS 2) ALCOHOLICOS HEPATOPATAS NO CIRROTICOS 3) ALCOHOLICOS CIRROTICOS 4) NO ALCOHOLICOS SANOS 5) NO ALCOHOLICOS HEPATOPATAS NO CIRROTICOS 5) NO ALCOHOLICOS CIRROTICOS. COMO CONCLUSION DE LOS RESULTADOS PODEMOS DECIR QUE LA MEDIA DE LOS GRUPOS DE NO ALCOHOLICOS ES SUPERIOR A LA MEDIA DE LOS ALCOHOLICOS. ASI TENEMOS: KM GRUPO 1 : 2.2, KM GRUPO 2 : 2.7, KM GRUPO 3 : 2.0, KM GRUPO 4 : 3.5, KM GRUPO 5 : 2.5, KM GRUPO 6 : 3.6.

Autor: RUA ALLER FRANCISCO JAVIER.
Año: 1988.
Universidad: LEON.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: FACULTAD DE BIOLOGIA.

Resumen: SE HA REALIZADO EL ESTUDIO DE LA REGULACION IN VIVO E IN VITRO DE LA ICL DE PHYCOMYCES BLAKESLEEANUS NRRL 1555(-), OBSERVANDO QUE EL ACETATO INDUCE O DESREPRIME ESTA ENZIMA, REGISTRANDOSE EN CULTIVOS CON ESTA FUENTE DE CARBONO UN INCREMENTO SUPERIOR AL 1500% EN LA ACTIVIDAD ESPECIFICA RESPECTO A CULTIVOS CONTROL CON GLUCOSA. LA PRESENCIA DE XILOSA, FRUCTOSA, SACAROSA Y GLUCOSA REDUJO LA ACTIVIDAD ESPECIFICA ICL, ALCANZANDOSE EL MENOR NIVEL DE ACTIVIDAD CUANDO LA GLUCOSA ESTABA PRESENTE EN EL MEDIO DE CULTIVO. ESTE AZUCAR PARECIO EJERCER UNA INACTIVACION CATABOLICA IN VIVO , CON DOS FASES: UNA REVERSIBLE Y OTRA IRREVERSIBLE. EL PRIMER PASO PARA EL ESTUDIO DE LA REGULACION IN VITRO DE ESTA ENZIMA LO CONSTITUYO EL DE SU PURIFICACION, OBTENIENDOSE UN RENDIMIENTO DEL 38% Y UNA PURIFICACION DE 38 VECES. EL PH OPTIMO FUE DE 6.8 Y 8 PARA LA REACCION DE ROTURA Y CONDENSACION RESPECTIVAMENTE A FUERZA IONICA BAJA Y 5 MM DE MG2+. LA ISOCITRATO LIASA PHYCOMYCES MOSTRO UNA CINETICA DE MICHAELIS-MENTEN CON RESPECTO A SU VERDADERO SUSTRATO (DS-ISOCITRATO). EN LA REACCION DE ROTURA EL MG2+ SE COMPORTO COMO UN ACTIVADOR NO ESENCIAL DE TIPO MIXTO HIPERBOLICO. ESTA REACCION FUE INHIBIDA POR LOS INTERMEDIARIOS METABOLICOS QUE SE CITAN A CONTINUACION ORDENADOS DE MAYOR A MENOR EFECTO: ITACONATO, MALEATO, OXALATO, FOFOENOLPIRUVATO, SUCCINATO, 6-FOSFOGLUCONATO, CITRATO, FUMARATO Y MALATO. EL MECANISMO CINETICO SEGUIDO POR LA ISOCITRATO LIASA DE PHYCOMYCES FUE DEL TIPO ORDENADO UNI-BI, EN EL QUE EL SUCCINATO ES EL PRIMER PRODUCTO LIBERADO. LOS VALORES OBTENIDOS DE LAS CONSTANTES DE VELOCIDAD DE LAS ETAPAS INDIVIDUALES DE LA REACCION, PARECEN INDICAR QUE LA LIBERACION DEL SEGUNDO PRODUCTO (GLIOXILATO) DEL COMPLEJO ENZIMA-GLIOXILATO ES LA ETAPA LIMITANTE DE LA REACCION DE ROTURA DEL ISOCITRATO.

Autor: VILLAMARIN CID JOSE ANTONIO.
Año: 1988.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR. FACULTAD DE FARMACIA: UNIVERSIDAD DE SANTIAGO DE COMPOSTELA. .

Resumen: LAS PEK DE MANTO Y, SOBRE TODO, DE MUSCULO ADUCTOR DE MYTILUS GALLOPROVINCIALIS LMK MUESTRAN UNA NOTABLE SENSIBILIDAD ANTE EL DESCENSO DE PH QUE SE PRODUCE COMO CONSECUENCIA DEL CIERRE DE LAS VALVAS DEL MOLUSCO. ESTA SENSIBILIDAD FRENTE AL PH ESTA EN FUNCION DE LA CONCENTRACION DE MGATP2-Y SOBRE TODO DE LA HATP3-. PUESTO QUE LA DISMINUCION DE UN PUNTO EN EL VALOR DEL PH, ALTERA EL EQUILIBRIO ENTRE LAS ESPECIES DE ATP LIBRE INCREMENTANDO EN UN ORDEN LA CONCENTRACION DE HATP3- SIN MODIFICAR LA DE ATP4-, SE SUGIERE QUE ES LA ESPECIE PROTONADA LA PRINCIPAL RESPONSABLE DE LA INHIBICION QUE SE PRODUCE COMO CONSECUENCIA DE LA BAJADA DEL PH. DEL ESTUDIO DE LA ACCION CONJUNTA DE LOS DISTINTOS MODULADORES DE AMBAS ENZIMAS, SE DEDUCE QUE NO EXISTE UN INCREMENTO SIGNIFICATIVO DE LA ACTIVIDAD PFK DURANTE LOS PERIODOS DE HIPOXIA. LA PFK DE MANTO DE MYTILUS GALLOPROVINCIALIS SIGUE UN MECANISMO CINETICO DE TIPO THEORELL-CHANCE, SIENDO EL MGATP2- EL SUSTRATO QUE SE UNE A LA ENZIMA LIBRE.

Autor: BELLO ESTEVEZ JOSE FELIPE .
Año: 1987.
Universidad: SALAMANCA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE QUIMICA FISICA. FACULTAD DE FARMACIA..

Resumen: EN VISTAS DE LA ASOCIACION QUE EXISTE IN VIVO ENTRE LAS ENZIMAS Y EL MATERIAL CELULAR NOS HEMOS PROPUESTO ESTUDIAR SISTEMATICAMENTE LAS CINETICAS DE ACCION DE ENZIMAS UNIDAS A SOPORTES HETEROGENEOS ES DECIR INMOVILIZADAS EN ESE AFAN DE APROXIMACION A LAS CONDICIONES IN VIVO . ESTE OBJETIVO A NIVEL DE CIENCIA FUNDAMENTAL PASA NECESARIAMENTE POR UN ESTUDIO FISICOQUIMICO SISTEMATICO DE LOS PRINCIPALES METODOS DE INMOVILIZACION (UNION COVALENTE ENTRECRUZAMIENTO ADSORCION FISICA ATRAPAMIENTO) DE ENZIMAS EN NUESTRO CASO FOSFATASA ALCALINA ALCOHOL Y LACTATO DESHIDROGENASAS CONTROLANDO LOS MAS IMPORTANTES ATRIBUTOS FISICOQUIMICOS RELATIVOS A LA CORRESPONDIENTE ENZIMA INMOVILIZADA ATRIBUTOS SIEMPRE DEPENDIENTES DEL TIPO DE METODO DE INMOVILIZACION EMPLEADO. ESTOS ATRIBUTOS ESTUDIADOS PARA LA MEJOR CARACTERIZACION FISICOQUIMICA DE LA ENZIMA INMOVILIZADA SON LA ACTIVIDAD ENZIMATICA (ESTUDIO CINETICO DE LA ENZIMA INMOVILIZADA) LA ESTABILIDAD OPERACIONAL Y EN ALMACENAMIENTO DE LA ENZIMA INMOVILIZADA LA INTENSIDAD DE LA UNION ENZIMA-SOPORTE LA DIFICULTAD MAYOR O MENOR DEL METODO DE OBTENCION DE LA CORRESPONDIENTE PREPARACION LA POSIBILIDAD DE REGENERACION DEL SOPORTE EL COSTE Y LA APLICABILIDAD GENERAL DE LA CORRESPONDIENTE ENZIMA INMOVILIZADA A DISTINTOS PROCESOS INDUSTRIALES ANALITICOS CLINICOS TERAPEUTICOS... ETC. ASI PUES EN ESTA MEMORIA SE ANALIZA EN PRIMER LUGAR EL PROCESO DE CONTROL Y OPTIMIZACION DE LOS CORRESPONDIENTES METODOS DE INMOVILIZACION DE LAS ENZIMAS FOSFATASA ALCALINA DE PLACENTA HUMANA ADH DE HIGADO DE CABALLO Y LDH DE MUSCULO DE CONEJO EN DISTINTOS SOPORTES (GEL DE POLIACRILAMIDA SEROALBUMINA TUBO DE NYLON Y MEMBRANA HIDROFOBICA DE PVDF). EN SEGUNDO LUGAR LA CARACTERIZACION FISICOQUIMICA DE DICHAS PREPARACIONES ENZIMATICAS EN CUANTO HACE REFERENCIA A SUS CARACTERISTICAS ANTES CITADAS. POR ULTIMO SE ANALIZA EL POTENCIAL DE ESTAS ENZIMAS ASI COMO DE CELULAS DE LEVADURA AMBAS INMOVILIZADAS EN EL DESARROLLO DE APLICACIONES BIOTECNOLOGICAS EN EL CAMPO DEL ANALISIS CLINICO Y DE LA OBTENCION DE ALCOHOL A PARTIR DE AZUCARES POR GLICOLISIS ANAEROBIA RESPECTIVAMENTE.

Autor: BOTELLA MESA JOSE RAMON.
Año: 1987.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA BIOLOGIA MOLECULAR Y QUIMICA ORGANICA. FACULTAD DE CIENCIAS UNIVERSIDAD DE MALAGA..

Resumen: TRAS PURIFICAR LAS ENZIMAS GLUTAMINA SINTETASA Y GLUTAMATO SINTASA DE HOJAS VERDES DE TOMATE SE INMUNIZARON CONEJOS PARA OBTENER ANTICUERPOS. ESTOS ANTICUERPOS SE SOMETIERON A DIVERSAS PRUEBAS PARA COMPROBAR SU MONO ESPECIFICIDAD. CON LOS ANTICUERPOS ANTI-CLUTAMINA SINTETASA SE REALIZO UN ESTUDIO COMPARATIVO POR METODOS INMUNOQUIMICOS DE ESTA ENZIMA FRENTE A LA MISMA ENZIMA EXTRAIDA DE OTRAS FUENTES. SE SOMETIERON A LOS ANTICUERPOS ANTI-GLUTAMINASINTETASA A UNA PURIFICACION POR CROMATOGRAFIA DE INMUNOAFINIDAD. CON LOS ANTICUERPOS CONTRA AMBAS ENZIMAS SE PROCEDIO A LA LOCALIZACION INTRACELULAR DE ESTAS A NIVEL DE MICROSCOPIA ELECTRONICA. PARA ELLO SE INCLUYERON LOS TEJIDOS EN UNA RESINA DE CARACTER HIDROFILICO (L.R. WHITE) REALIZANDOSE DE AMBAS ENZIMASRESULTO CIRCUNSCRITO TAN SOLO EN LOS CLOROPLASTOS. DENTRO DE ESTOS ORGANULOS SE APRECIO CIRCUNSCRITO TAN SOLO EN LOS CLOROPLASTOS. DENTRO DE ESTOS ORGANULOS SE APRECIO UNA MAYOR DENSIDAD DE MARCAJE EN LAS ZONAS DONDE NO EXISTIA ACUMULACION DE MEMBRANAS TILACOIDALES ESTA OBSERVACION ES MUCHO MAS MARCADA EN EL CASO DE LA GLUTAMATO SINTASA. TAMBIEN SE PROCEDIO A LA LOCALIZACION DE ESTAS DOS PROTEINAS UTILIZANDO LA TECNICA DE ULTRACRIOTOMIA POR LA CUAL SE CONGELAN LOS TEJIDOS A -120 GRADOS ANTES DE PROCEDER AL CORTE DE LAS SECCIONES. MEDIANTE ESTATECNICA SE CONSIGUIO UN MARCAJE MAS INTENSO PERO SE OBTUVO UNA MAS POBRE PRESERVACION DE LA ULTRAESTRUCTURA CELULAR. LOS RESULTADOS OBTENIDOS ASI CONFIRMARON PLENAMENTE LOS ANTERIORMENTE LOGRADOS POR LA TECNICA DE INCLUSION ENRESINA DESCARTANDO LA POSIBILIDAD DE RESULTADOS ARTEFACTUALES. DE TODO ESTO SE PUEDE CONCLUIR QUE TANTO LA ENZIMA GLUTAMINA SINTETASA COMO LA GLUTAMATO SINTASAFERREDOXINA-DEPENDIENTE ESTAN LOCALIZADAS EN LOS CLOROPLASTOS.

Autor: ESTEVE CAIRETA M. ASUNCION.
Año: 1987.
Universidad: BARCELONA.
Centro de lectura: FARMACIA .
Centro de realización: DEPT. DE FARMACOLOGIA Y PSIQUIATRIA FAC. MEDICINA UNIVERSIDAD AUTONOMA DE BARCELONA..

Resumen: EN LA ULTIMA DECADA SE HAN PUBLICADO INTERESANTES ESTUDIOS SOBRE LA CAPACIDAD PROMOTORA DE LA CARCINOGENESIS HEPATICA DEL FENOBARBITAL SODICO (FB) Y COMPUESTOS RELACIONADOS, SIN QUE SE CONOZCA EL MECANISMO EXACTO DE ACCION DE ESTE TIPO DE SUSTANCIAS. PARECE QUE SUS PROPIEDADES SON LAS DE INDUCIR LA ACTIVIDAD DEL SISTEMA MICROSOMAL HEPATICO (SMH) Y LA PROLIFERACION CELULAR, SABIENDOSE MUY POCO SOBRE EL MECANISMO POR EL QUE SE PRODUCE DICHA INDUCCION ENZIMATICA. EN 1980, POLAND Y COLS., SINTETIZARON UNA MOLECULA DENOMINADA ABREVIADAMENTE TCPOBOP* QUE RESULTO SER UN POTENTE INDUCTOR DEL TIPO DEL FB, DETECTANDOSE DICHA PROPIEDAD EN EL RATON PERO NO EN LA RATA. DRAGANI Y COLS., EN 1985 DEMOSTRARON QUE EL TCPOBOP ES UN PROMOTOR DE LA CARCINOGENESIS HEPATICA. EN VISTA DE LAS CARACTERISTICAS ESPECIALES DE ESTE COMPUESTO, HEMOS PLANTEADO NUESTRO ESTUDIO, EN EL QUE UTILIZANDO LAS DOS ESPECIES ANIMALES ANTES MENCIONADAS, HEMOS QUERIDO HACER UNA AMPLIA CARACTERIZACION BIOQUIMICA DEL COMPUESTO A NIVEL HEPATICO, DETERMINANDO SUS EFECTOS A CORTO Y MEDIO PLAZO SOBRE EL SMH (P-450 Y MONOOXIGENASAS) Y SOBRE LA ENZIMA EPOXIDO HIDROLASA; ASIMISMO SOBRE LA MICROVISCOSIDAD DE LA MEMBRANA MICROSOMAL Y FINALMENTE, SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA CITOSOLICA ORNITINA DESCARBOXILASA (ODC) Y SOBRE EL CONTENIDO Y SINTESIS DE DNA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN ESTE ESTUDIO NOS HAN PERMITIDO APORTAR INTERESANTES CONCLUSIONES SOBRE LA ACCION DE ESTE COMPUESTO A NIVEL HEPATICO EN LAS DOS ESPECIES ESTUDIADAS (GRAN DIFERENCIA ENTRE ESPECIES) Y ESTABLECER RELACIONES ENTRE LA CAPACIDAD INDUCTORA DEL TCPOBOP Y SU CAPACIDAD PARA ALTERAR OTROS PARAMETROS COMO LA MICROVISCOSIDAD DE MEMBRANA O LA ACTIVIDAD DE LA ODC. POR OTRA PARTE, NUESTRO ESTUDIO PRESENTA UN MODELO DE PROMOTOR PURO (NO INICIADOR) CON CARACTERISTICAS SIMILARES AL FB, DESVELANDO LO QUE OCURRE A NIVEL HEPATICO TRAS LA ADMINISTRACION DEL MISMO, A DISTINTOS INTERVALOS DE TIEMPO DESPUES DEL TRATAMIENTO. TCPOBOP: 1,4-BIS ]2-(3,5-DICLOROPIRIDILOXI] BENCENO.

Autor: FLORES SANCHEZ DALP FABIOLA.
Año: 1987.
Universidad: NAVARRA .
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: FACULTAD DE CIENCIAS. UNIVERSIDAD DE NAVARRA DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA.

Resumen: LOS RESULTADOS OBTENIDOS REFLEJAN LA EXISTENCIA EN LA ATPASA MITOCONDRIAL DE TRES CENTROS REDOX N=2 CON DIFERENTES VALORES DE POTENCIAL ESTANDAR (EM). LOS VALORES DETERMINADOS A PH 7,4 SON +210, +40 Y -230 MV, Y ESTAN LOCALIZADOS DENTRO DE LAS TRES CAIDAS DE POTENCIAL DE LA CADENA RESPIRATORIA MITOCONDRIAL. LA TITULACION ESTEQUIOMETRICA DE LA ENZIMA INDICO QUE LA F1-ATPASA ES CAPAZ DE INTERCAMBIAR SEIS EQUIVALENTES DE REDUCCION POR MOL DE COMPLEJO ENZIMATICO. LOS VALORES DE EM DE LOS TRES CENTROS REDOX PRESENTAN UNA DEPENDENCIA RESPECTO DEL PH QUE INDICA LA UNION DE DIEZ PROTONES O LA LIBERACION DE DIEZ GRUPOS HIDROXILO POR CADA DOS ELECTRONES ACEPTADOS POR LA PROTEINA. LOS ACTIVADORES 2,4-DINITROFENOL Y BICARBONATO DISMINUYEN LOS VALORES DE EM DE LOS TRES CENTROS REDOX. EL INHIBIDOR TIOCIANATO AUMENTA ESOS VALORES. TODOS ESTOS COMPUESTOS COMPITEN CON LOS GRUPOS OH-EN SU EFECTO SOBRE LOS POTENCIALES ESTANDAR DE LA F1-ATPASA, LO QUE APOYA LA INTERPRETACION DE LA DEPENDENCIA DEL PH COMO DEBIDA, AL MENOS EN PARTE, A LA UNION DE GRUPOS OH- COMO LIGANDOS DE LA PROTEINA. EL HECHO DE QUE ESTOS COMPUESTOS, AL UNIRSE COMO LIGANDOS DE LA ATPASA, IMPIDAN LAS FLUCTUACIONES DE POTENCIAL DARIA UNA EXPLICACION FISIOLOGICA A LA ALTERACION DE LOS PROCESOS FISIOLOGICOS QUE PRODUCEN. EL ATP PRODUCE UN AUMENTO DE LOS VALORES DE EM DE LOS TRES CENTROS, MANIFESTANDO UNA RELACION DE TIPO NO COMPETITIVO RESPECTO A LOS GRUPOS OH-. ESTA CAPACIDAD DEL ATP PERMITIRIA LAS FLUCTUACIONES DE POTENCIAL ESTANDAR DE LA ATPASA MITOCONDRIAL NECESARIAS PARA EL ACOPLAMIENTO DE LA FOSFORILACION OXIDATIVA, SEGUN EL MODELO PROPUESTO POR SANTIAGO Y LOPEZ-MORATALLA.

Autor: GUADALAJARA OLMEDA ANA M..
Año: 1987.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CITOLOGICAS DE LA CAJA DE AHORROS DE VALENCIA.

Resumen: LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA MITOCONDRIAL DE HIGADO DE RATA ES INACTIVADA POR LA ELASTASA CON CINETICA DE PRIMER ORDEN. LA ADICION DE ATP (UNO DE LOS SUSTRATOS) MG ELEVADO 2+ Y ACETILGLUTAMATO (EL ACTIVADOR ALOSTERICO DEL ENZIMA)PROTEGEN COMPLETAMENTE DE ESTA INACTIVACION MIENTRAS QUE EL ACETILGLUTAMATO SOLO ACELERA LA INACTIVACION. MEDIANTE ESTOS CAMBIOS HEMOS DETECTADO LA UNION DEL ACETILGLUTAMATO AL ENZIMA EN AUSENCIA DE OTROS LIGANDOS CON UN K SUB D DE 0.365 MM QUE ES APROXIMADAMENTE 600 VECES MAYOR QUE EN PRESENCIA DE ATP HCO- SUB 3 K+ Y MG ELEVADO A 2+. EL ADP Y EL AMPPNP (UN ANALOGO INERTE DEL ATP)REEMPLAZAN PARCIALMENTE AL ATP EN LA PROTECCION Y POR TANTO LA UNION DEL NUCLEOTIDO SIN POSTERIOR REACCION ES SUFICIENTE PARA PROTEGER. CON OTRAS PROTEASAS LA INACTIVACION TAMBIEN SE ACELERO POR ACETILGLUTAMATO Y SE RETRASO POR MEZCLAS DE ATP MG ELEVADO A 2+ Y ACETILGLUTAMATO INDICANDO QUE ESTOS CAMBIOS DE SUSCEPTIBILIDAD REFLEJAN CAMBIOS EN LA CONFORMACION DEL ENZIMA. ELLO HA SIDO DEMOSTRADO DIRECTAMENTE AQUI UTILIZANDO UNA COMBINACION DE PROTEOLISIS LIMITADA Y DE ELECTROFORESIS. ASI HEMOS ESTABLECIDO QUE LA CARBAMIL FOSFATO SINTETASA (UN UNICO POLIPEPTIDO DE 160 KDA) ESTA CONSTITUIDA POR 4 DOMINIOS COMPACTOS DE 40 43 60 Y 17 KDA EN ESTE ORDEN DESDE EL EXTREMO N-TERMINAL. ESTOS DOMINIOS SON ALTAMENTE RESISTENTES AL ATAQUE PROTEOLITICO Y ESTAN UNIDOS POR 3 SEGMENTOS DE CADENA DESESTRUCTURADA QUE SE EXPONEN AL ATAQUE PROTEOLITICO EN PRESENCIA DE ACETILGLUTAMATO Y DOS DE LOS CUALES SE PROTEGEN CON LA UNION SIMULTANEA DE ATP Y ACETILGLUTAMATO. TAMBIEN DEMOSTRAMOS QUE EL DOMINIO C-TERMINAL DE 17 KDA ES ESENCIAL PARA LA ACTIVIDAD ESTA SUJETO A DRAMATICOS CAMBIOS CONFORMACIONALES Y PROBABLEMENTE PARTICIPA EN EL CENTRO CATALITICO. NUESTROS RESULTADOS SUGIEREN FUERTEMENTE QUE EL ACETILGLUTAMATO SE UNE A ESTE DOMINIO Y TAMBIEN PERMITEN PROPONER LA LOCALIZACION DE LOS PUNTOS DE UNION DE LAS DOS MOLECULAS DE ATP USADAS EN LA REACCION.

Autor: GUASCH MITJANS ALICIA.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: INSTITUT DE BIOLOGIA FONAMENTAL VICENT VILLAR PALASI Y DEPARTAMENT DE BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR DE LA FACULTAT DE CIENCIES UNIVERSITAT AUTONOMA.

Resumen: SE HAN REALIZADO DETERMINACIONES CINETICAS SIMULTANEAS EN EL ESTADO ESTACIONARIO DE LAS RELACIONES DE SINTESIS E HIDROLISIS CATALIZADAS POR LA RIBONUCLEASA A DE PANCREAS DE BUEY, UTILIZANDO COMO SUSTRATO EL NUCLEOTIDO CICLICO DE PIRIMIDINA (C P), MEDIANTE TECNICAS CROMATOGRAFICAS DE INTERCAMBIO ANIONICO POR HPLC. SE HA OBSERVADO UNA RELACION SIGMOIDAL ENTRE LA VELOCIDAD DE SINTESIS Y LA CONCENTRACION DE SUSTRATO TANTO PARA LA FORMA ENZIMATICA MONOMERICA COMO PARA LA FORMA DIMERICA INDUCIDA CON ACIDO ACETICO AL 50% Y POSTERIOR LIOFILIZACION. EL TIPO DE RELACION ENTRE LA VELOCIDAD DE HIDROLISIS Y LA CONCENTRACION DE SUSTRATO ES FUNCION DEL INTERVALO DE CONCENTRACIONES CONSIDERADO. PARA UN INTERVALO ENTRE Y 0-20 MM SE OBSERVA UNA RELACION HIPERBOLICA, A PH 5.5 Y FUERZA IONICA DE 0.2. EN EL INTERVALO 20-25 MM SE OBSERVA UN INCREMENTO DE LA VELOCIDAD DE HIDROLISIS, QUE SE HA ASOCIADO A UN FENOMENO DE TIPO COOPERATIVO, EN LA INTERACCION DE UNA MOLECULA DE SUSTRATO CON UN SEGUNDO SUBSITIO DE FIJACION B2R2P2. EL MISMO FENOMENO SE OBSERVA EN LA CINETICA REALIZADA A UNA CONCENTRACION DE SUSTRATO CONSTANTE DE 15 MM Y EN PRESENCIA DE CONCENTRACIONES CRECIENTES DE ADENOSINA. ESTUDIOS ESTRUCTURALES CONFIRMAN LA FIJACION DE ESTE NUCLEOSIDO EN B2R2. EN EL INTERVALO 25-27 MM HAY UNA DISMINUCION DE LA ACTIVIDAD HIDROLITICA QUE PUEDE SER CORRELACIONADA CON LA APARICION DE UN LAG EN LAS CORRESPONDIENTES CURVAS DE PROGRESO. A PARTIR DE 27 MM LA RELACION VUELVE A SER HIPERBOLICA. EN REFERENCIA A LA CINETICA DE LA FORMA DIMERICA INDUCIDA NO SE OBSERVA NINGUNA DE ESTAS TRANSICIONES. LAS DIFERENTES FORMAS ENZIMATICAS IMPLICADAS EN CADA UNO DE ESTOS INTERVALOS SE HAN ANALIZADO MEDIANTE: - DIGESTION CON SUBTILISINA EN PRESENCIA DE C P EN LAS MISMAS CONDICIONES EN QUE SE REALIZO EL ENSAYO CINETICO, OBSERVANDOSE UNA DISMINUCION EN LA PROTEOLISIS A MEDIDA QUE LA CONCENTRACION DE C P AUMENTA, ALCANZANDOSE UN MAXIMO DE PROTECCION A 40 MM. - CROMATOGRAFIA DE FILTRACION EN GEL POR HPLC Y DETERMINACION DEL PERFIL DE ELUCION POR ACTIVIDAD CON RNA Y ALTERNATIVAMENTE POR ENSAYO INMUNOENZIMATICO UTILIZANDO ANTICUERPOS POLICLONALES.

Autor: GUILLEN MAESTRO ALBERTO.
Año: 1987.
Universidad: COMPLUTENSE DE MADRID.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR I. FACULTAD DE C. BIOLOGICAS. UNIVERSIDAD COMPLUTENSE DE MADRID..

Resumen: AL TRATARSE LA ADENILATO CICLASA DE UNA ENZIMA DE MEMBRANA, SE HA ESTUDIADO LA INTERRELACION ENTRE LA FLUIDEZ DE LA MEMBRANA Y DEL ENTORNO LIPIDICO DEL SISTEMA CON LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA, COMPARANDO LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON LOS DESCRITOS PARA ANIMALES SUPERIORES. POR OTRA PARTE, SE HA CARACTERIZADO LA MODULACION DE LA ENZIMA POR DIFERENTES AGENTES REGULADORES, ALGUNOS DE LOS CUALES, COMO FORSKOLINA Y FLUORURO Y ALUMINIO, PODRIAN MIMETIZAR, AL IGUAL QUE EN OTROS SISTEMAS, LA ACCION DE MODULADORES FISIOLOGICOS ENDOGENOS AUN NO IDENTIFICADOS. TAMBIEN SE HA ESTUDIADO LA POSIBLE EXISTENCIA DE UNA VIA INHIBIDORA MEDIADA POR RECEPTORES DE PROSTAGLANDINAS, CUYO PAPEL COMO NEUROMODULADORES EN INSECTOS NO HA SIDO TODAVIA ESTUDIADO. FINALMENTE SE HA PROCEDIDO A LA CARACTERIZACION DE LA ACTIVACION DE LA ADENILATO CICLASA DE SISTEMA NERVIOSO VIA RECEPTOR DE OCTOPAMINA, COMPUESTO QUE ES EL NEUROTRANSMISOR, NEUROMODULADOR Y NEUROHORMONA MAS IMPORTANTE EN INVERTEBRADOS. YA QUE NO SE HA DESCRITO LA PRESENCIA DE ADENILATO CICLASA ACTIVADA POR OCTOPAMINA EN VERTEBRADOS, ESTE TIPO DE ESTUDIOS PODRIA CONTRIBUIR AL DESARROLLODE NUEVOS PESTICIDAS SELECTIVOS CON BAJA TOXICIDAD, SOBRE TODO SI SE CONSIDERA QUE EL DIPTERO C. CAPITATA CONSTITUYE UNA PLAGA DE LOS FRUTALES MEDITERRANEOS.

Autor: MARQUES MARTIN SILVIA.
Año: 1987.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR. FACULTAD DE BIOLOGIA. UNIVERSIDAD DE SEVILLA Y CSIC.

Resumen: SE HA PURIFICADO Y CARACTERIZADO EN SYNECHOCOCCUS 6301, CIANOBACTERIAS UNICELULAR NO FIJADORA DE NITROGENO, LA GLUTAMATO SINTASA, SEGUNDA ENZIMA DE LA RUTA DE INCORPORACION DE AMONIO A ESQUELETOS CARBONADOS. PREVIAMENTE SE HA PUESTO A PUNTO UN METODO PARA EL ENSAYO DE SU ACTIVIDAD QUE EMPLEA HPLC. LA ENZIMA SE PURIFICA EMPLEANDO COMO PASOS DETERMINANTES PRECIPITACION FRACCIONADA CON ETANOL Y CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD EN FERREDOXINA-SEFAROSA. SE OBTIENE UNA PREPARACION DE GLUTAMATO SINTASA PURA, CON UN RENDIMIENTO DEL 40% Y UNA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE 30 UNIDADES/MG PROTEINA. LA ENZIMA CONSTA DE UNA UNICA SUBUNIDAD DE 158 KDA, CON UN ESPECTRO DE ABSORCION CARACTERISTICO DE FLAVOPROTEINA. EL GRUPO PROSTETICO FLAVINICO SE HA IDENTIFICADO COMO UNA SOLA MOLECULA DE FMN. LA ENZIMA ES ESTRICTAMENTE DEPENDIENTE DE FERREDOXINA REDUCIDA COMO DONADOR DE ELECTRONES. AZASERINA Y DON, ANALOGOS DE GLUTAMINA, A CONCENTRACIONES DE 1 Y 0,1 MM RESPECTIVAMENTE INHIBEN TOTALMENTE LA ACTIVIDAD. LA INCUBACION CON 0,5 MM DE PHMB PRODUCE UNA INHIBICION DEL 60%. SE HA ESTUDIADO IGUALMENTE LA REGULACION POR LUZ-OSCURIDAD DE LA GLUTAMINA SINTASA, PRIMERA ENZIMA DE LA RUTA. LA ENZIMA PRESENTA ALTOS NIVELES DE ACTIVIDAD EN CELULAS CRECIENDO A LA LUZ Y CON NITRATO COMO FUENTE DE NITROGENO, QUE CAEN A UN 5% AL PASAR LAS CELULAS A OSCURIDAD, CON UN T1/2 DE 60 MINUTOS. LA BAJADA SE DEBE A UN FENOMENO DE INACTIVACION Y NO A DEGRADACION PROTEICA, RECUPERANDOSE LOS NIVELES INICIALES DE ACTIVIDAD AL REILUMINAR LAS CELULAS. LA INACTIVACION SE PUEDE CONSEGUIR EN LA LUZ INTERRUMPIENDO EL FLUJO DE ELECTRONES ENTRE LOS DOS FOTOSISTEMAS, MIENTRAS QUE COMPUESTOS QUE IMPIDEN LA SINTESIS DE ATP NO AFECTAN AL PROCESO. LA REACTIVACION SE PREVIENE POR LA PRESENCIA DEL INHIBIDOR DCMU Y ES INSENSIBLE A DCCD Y CCCP. EN LA REGULACION PARECEN ESTAR IMPLICADOS MECANISMOS DE TIPO REDOX.

Autor: MIÑANA GIMENEZ M. DOLORES.
Año: 1987.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: INSTITUTO DE INVESTIGACIONES CITOLOGICAS..

Resumen: EL TEMA DE ESTA TESIS HA SIDO EL ESTUDIO DE LOS MECANISMOS IMPLICADOS EN LA PATOGENIA DEL SINDROME DE LESCH-NYHAN, MEDIANTE EL USO DE UN MODELO ANIMAL. DICHO MODELO HA CONSISTIDO EN LA ADMINISTRACION GRADUAL DE DOSIS CRECIENTES DE CAFEINA A LA RATA ADULTA DURANTE APROXIMADAMENTE 12 DIAS, TIEMPO NECESARIO PARA REPRODUCIR EN EL ANIMAL EL COMPORTAMIENTO AUTOMUTILATIVO DESEADO, RASGO NEUROLOGICO MAS SORPRENDENTE DEL SINDROME. DADO QUE ESTA ENFERMEDAD ESTA ASOCIADA A UNA VIRTUAL COMPLETA DEFICIENCIA DE LA ENZIMA DEL METABOLISMO PURICO HIPOXANTINA-GUANINA FOSFORIBOSILTRANSFERASA (HGPRT) JUNTO A UNA DISFUNCION DEL SISTEMA NERVIOSO CENTRAL, HEMOS ESTUDIADO EL METABOLISMO PURICO Y PIRIMIDINICO EN EL CEREBRO, ORGANO MAS AFECTADO, ASI COMO LA FUNCION DOPAMINERGICA Y NORADRENERGICA TANTO A NIVEL DEL SNC COMO DEL SNP. DE ENTRE LOS RESULTADOS OBTENIDOS CABE DESTACAR UNA MAYOR ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS DE LA VIA DE RECUPERACION DE LAS PURINAS, HABIENDOSE APRECIADO UNA CORRELACION ENTRE CONCENTRACION DE CAFEINA EN CEREBRO Y ACTIVIDAD HGPRT Y SOLO EN EL CASO DE LA ADENOSINA FOSFORIBOSILTRANSFERASA UNA MENOR ACTIVIDAD, ESTANDO ASOCIADOS ESTOS CAMBIOS A UN MENOR CONTENIDO CEREBRAL DE ATP Y DE LOS GUANIN-NUCLEOTIDOS. EN CUANTO A LA FUNCION CATECOLAMINERGICA CENTRAL Y PERIFERICA, HEMOS OBSERVADO UN MAYOR CONTENIDO DE CATECOLAMINAS EN EL HIPOTALAMO Y ESTRIADO JUNTO A UNA MAYOR ACTIVIDAD DOPAMINA-B-HIDROXILASA EN SUERO LOS RASGOS MAS IMPORTANTES, NO ESTANDO MEDIADOS ESTOS EFECTOS A NIVEL CENTRAL POR CAMBIOS EN EL NIVEL DE NUCLEOTIDOS CICLICOS.

Autor: PELLIN MIRA M. CRUZ.
Año: 1987.
Universidad: VALENCIA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE NEUROQUIMICA FACULTAD DE MEDICINA UNIVERSIDAD DE ALICANTE.

Resumen: MANIFESTACIONES DE CIERTOS BROTES DE POLINEUROPATIAS OCUPACIONALES PROPORCIONARON EVIDENCIAS QUE SUGERIAN INTERACCIONES ENTRE ORGANOFOSFORADOS Y HEXACARBONADOS. ESTE TRABAJO SE ORIENTO AL ESTUDIO EN AVES DE ESTA INTERACCION ENTRE LOS DOS AGENTES XENOBIOTICOS N-HEXANO Y TRIORTOCRESILFOSFATO. PARA ELLO SEDISEÑARON 3 TIPOS DE ENSAYOS: CLINICOS MORFOLOGICOS Y BIOQUIMICOS. SE COMPARARON GALLINAS TRATADAS SIMULTANEAMENTE CON N-HEXANO Y TOCP CON OTRAS TRATADAS SOLO CON N-HEXANO O SOLO CON TOCP. LOS ANIMALES TRATADOS CON AMBOS PRESENTARON UNA ATAXIA SEVERA Y DE EVOLUCION RAPIDA Y FRECUENTES HINCHAMIENTOS PARANODALES MIENTRAS QUE EL TRATAMIENTO DE N-HEXANO PRODUJO SOLO EFECTOS LEVES DE TIPO SEDACION Y EL TRATAMIENTO CON LA DOSIS DE TOPC PRODUJO UNAATAXIA LEVE ESTOS DOS GRUPOS MOSTRARON UNICAMENTE RARAS ALTERACIONES MORFOLOGICAS. SE ESTUDIO SI LAS ESTERASAS IMPLICADAS EN LAS ACCIONES PRIMARIAS DE LOS ORGANOFOSFORADOS LO ESTABAN TAMBIEN EN EL MECANISMO DEL PROCESO DE POTENCIACION. EL PLANTEAMIENTO FUE QUE SI EL N-HEXANO INTERACCIONASE CON EL SISTEMA METABOLICO DEL TOCP PODRIA MODIFICAR LA CONCENTRACION Y LA DISTRIBUCION Y ACCESO DEL METABOLITO TOXICO. EL TRATAMIENTO CON DOSIS DE 200 MG/KG DE TOCP QUE ES UNA DOSIS NEUROPATICA Y CERCANA AL UMBRAL DE INHIBICION DE NTE NO MANIFESTO DIFERENCIAS EN LA VELOCIDAD NI EN LA INTENSIDAD DE LA INHIBICION EN CHE DE SUERO Y ACHE BUCHE Y NTE DE SISTEMA NERVIOSO ENTRE LOS ANIMALES TRATADOS SOLO CON TOCP Y LOS PRETRATADOS CON N-HEXANO. SI SE HAN OBSERVADO DIFERENCIAS EN LA INHIBICION DE NTE CUANDO SE HAN UTILIZADO DOSIS DE TOCP BAJAS NO NEUROPATICAS. EL ESTUDIO DE LA INFLUENCIA DEL N-HEXANO EN EL ENVEJECIMIENTO DEL COMPLEJO ENZIMA-ORGANOFOSFORADO NO PRESENTO EVIDENCIAS DE QUE SE ALTERASE EL PROCESO DE FORMA DIFERENTE CUANDO SE HABIA REALIZADO EL PRETRATAMIENTO CON N-HEXANO. POR ELLO SALVO PARA LAS SITUACIONES CRITICAS EN LAS QUE EL EFECTO DEL HEXANO DETERMINASE QUE LA INHIBICION DE NTE CRUZASE EL LIMITE UMBRAL MINIMO DEL 80% LA EXPLICACION DEL MECANISMO DE POTENCIACION DEBE DIRIGIRSE AL ESTUDIO DE POSIBLES INTERACCIONES EN LOS PROCESOS MOLECULARES POSTERIORES A LAS ACCIONES BIOQUIMICAS PRIMARIAS.

Autor: PEREZ RIBA MERCE.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPT. BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR. FAC. CIENCIES. UNIV. AUTONOMA DE BARCELONA..

Resumen: L'OBJECTIU PRINCIPAL D'AQUEST TREBALL HA ESTAT L'ESTUDI DE LES CASEINA QUINASES 1 (CK-1) I 2 (CK-2) EN FETGES DE RATA EN EL DESENVOLUPAMENT FETAL, POSTNATAL I EN LA REGENERACIO, ON ELS HEPATOCITS NO ES TROBEN EN ESTAT DE QUIESCENCIA, PER TAL DE VEURE SI AQUESTS ENZIMS INFLUEIXEN EN LA INICIACIO O REGULACIO DE LA PROLIFERACIO CEL.LULAR. AMBDUES ACTIVITATS CASEINA QUINASES VARIEN EN TOTS DOS PROCESSOS, ESSENT LA RELACIO D'ACTIVITATS CK-1-CK-2 MES ELEVADA EN EL DESENVOLUPAMENT FETAL QUE EN EL POSTNATAL I L'ADULT. PER CONTRA, EN EL PERIODE PREREPLICATIU DE LA REGENERACIO HEPATICA, L'ACTIVITAT DE LA CK-2 S'INCREMENTA RESPECTE EL CONTROL, MENTRE QUE LA DE LA CK-1 MOSTRA VALORS INFERIORS ALS DEL CONTROL ENTRE LES 8 I 16 H DE LA L'HEPATECTOMIA PARCIAL. L'AFINITAT D'AMBDUES CASEINA QUINASES PER CASEINA VARIA EN EL PERIODE FETAL I EN LA REGENERACIO HEPATICA. LES VARIACIONS EN AQUEST PARAMETRE ES RELACIONAREN AMB ELS CANVIS EN LA RELACIO INSULINA-GLUCAGO PLASMATICA QUE ES PRODUEIXEN EN EL DESENVOLUPAMENT FETAL I EN LA REGENERACIO DEL FETGE DE RATA, FET QUE FA PENSAR QUE AQUESTS ENZIMS ESTAN CONTROLATS PER HORMONES. D'ALTRA BANDA, AQUESTA HIPOTESI ES CORROBORA EN ADMINISTRAR INSULINA A RATES D'UN DIA D'EDAT, ON ELS NIVELLS D'INSULINA SON MOLT BAIXOS. EN EL PERIODE FETAL I EN EL PERIODE PREREPLICATIU DE LA REGENERACIO HEPATICA TAMBE VARIA L'ESTAT D'ACTIVACIO DE LA GLICOGEN SINTASA. ELS CANVIS EN L'ACTIVITAT D'AQUEST ENZIM PRESENTEN UNA ESTRETA CORRELACIO AMB LES VARIACIONS OBSERVADES EN L'AFINITAT DE LA CK-2 PER LA PROTEINA SUBSTRAT. QUAN S'ESTUDIAREN ELS SUBSTRATS CITOSOLICS DE LA CK-2 EN EL DESENVOLUPAMENT FETAL, POSTNATAL I EN LA REGENERACIO DEL FETGE DE RATA, L'AUTORADIOGRAFIA REVELA LA PRESENCIA DE PROTEINES DE PES MOLECULAR DE 28000, 34000, 37000, 45000 I 48000 DALTONS EN AMBDOS PROCESSOS. LA INTENSITAT DE FOSFORILACIO IN VITRO D'AQUESTES PROTEINES VARIA EN AMBDOS PROCESSOS. A MES, S'OBSERVA UNA PROTEINA DE 73000 DALTONS, PRESENT SOLAMENT A LES POQUES HORES DE VIDA DEL NOU NAT, I UNA DE 39000 DALTONS, VISUALITZADA EN LA REGENERACIO HEPATICA, TANT EN MOSTRES DE RATES CONTROL COM D'HEPATECTOMITZADES, POSSIBLEMENT COM A RESPOSTA AL STRESS AL QUAL ESTIGUEREN SOTMESOS ELS ANIMALS. PER TANT, ES POSTULA QUE L'AFINITAT DE LES CASEINA QUINASES 1 I 2 ESTA CONTROLADA PER HORMONES, I EN CONCRET ELS CANVIS D'AQUEST PARAMETRE EN LA CK-2 PODRIEN AFECTAR L'ESTAT D'ACTIVACIO DE LA GLICOGEN SINTASA. A MES D'AQUEST ENZIM, S'HAN DESCRIT GRAN DIVERSITAT DE SUBSTRATS PER AMBDUES CASEINA QUINASES, QUE JUNTAMENT AMB ELS OBSERVATS PER A LA CK-2 EN EL CITOSOL DE FETGE DE RATA EN EL DESENVOLUPAMENT I EN LA REGENERACIO HEPATICA, FAN PENSAR QUE AQUEST ENZIMS PODEN NO SOLAMENT INTERVENIR EN EL CONTROL DEL METABOLISME DEL GLICOGEN, SINO TAMBE EN ALTRES PROCESSOS CEL.LULARS.

Autor: POLANCO GARCIA M. JESUS.
Año: 1987.
Universidad: VALLADOLID.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR Y FISIOLOGIA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS DE LA UNIVERSIDAD DE VALLADOLID..

Resumen: SE HA REALIZADO UN AMPLIO ESTUDIO SOBRE EL ENZIMA DE CONVERSION DE ANGIOTENSINA (ACE) EN AVES. LOS RESULTADOS QUE EN ELLA SE EXPRESAN RESPONDEN A TRES DIRECTRICES FUNDAMENTALES: 1. ESTUDIO SOBRE LA DISTRIBUCION DE LA ACTIVIDAD DEL ACE EN DIFERENTES ORGANOS DE POLLO. 2. DESARROLLO DE UN SISTEMA DE CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD ESPECIFICO PARA EL AISLAMIENTO DEL ACE DE AVE. COMO LIGANDO SE HA UTILIZADO UN INHIBIDOR DEL ACE, EL 2-D-METIL-3-MERCAPTOPROPANOIL-L-PROLINA O CAPTOPRIL, QUE FUE INMOVILIZADO EN EL GEL, SEPHAROSA 4B, A TRAVES DE UN BRAZO ESPACIADOR DE SEIS ATOMOS DE CARBONO. LA CAPACIDAD DE LA MATRIZ DE AFINIDAD RESULTANTE FUE DE 5 MOLES DE CAPTOPRIL ACOPLADO POR ML DE GEL. 3. PURIFICACION DEL ACE DE PULMON DE POLLO HASTA HOMOGENEIDAD ELECTROFORETICA. SE HA ELABORADO UN PROTOCOLO DE PURIFICACION EN DOS ETAPAS: EN LA PRIMERA SE REALIZO LA EXTRACCION DEL ACE PARTICULADO POR DOS PROCEDIMIENTOS DISTINTOS QUE FUERON DIGESTION CON TRIPSINA Y SOLUBILIZACION CON DETERGENTE, EN LA SEGUNDA SE INCLUYO UN PASO DE CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD COMO PRINCIPAL ETAPA DE PURIFICACION. EL FACTOR DE PURIFICACION PARA EL ENZIMA TRIPTICO (ACE-TP) FUE DE 320 VECES Y UN RENDIMIENTO DE UN 28%, PARA EL ENZIMA SOLUBILIZADO CON DETERGENTE (ACE-DT) FUE DE 252 VECES Y UN RENDIMIENTO DE UN 45%. REALIZADA LA CARACTERIZACION MOLECULAR Y ESTUDIOS CINETICOS DE AMBAS FORMAS DEL ENZIMA ENCONTRAMOS PARA EL ACE-TP UN PESO MOLECULAR DE 270000 D. Y PUNTO ISOELECTRICO DE 4,7 MIENTRAS QUE PARA EL ACE-DT ENCONTRAMOS UN PESO MOLECULAR DE 690000 D. YPUNTO ISOELECTRICO DE 5,2, INDICANDO QUE LA SECUENCIA POLIPEPTIDICA UNIDA A LA MEMBRANA CONTRIBUYE EN GRAN MEDIDA EN EL TAMAÑO Y EN LA CARGA DEL EZIMA. LOS PARAMETROS CINETICOS DETERMINADOS CON SUSTRATO ARTIFICIAL, HIP-HIS-LEU, Y CON UN SUSTRATO NATURAL, ANGIOTENSINA I, REVELA QUE AMBAS FORMAS DEL ENZIMA MUESTRAN MAYOR AFINIDAD POR SU SUSTRATO NATURAL Y ADEMAS EL ACE-DT MUESTRA MAYOR AFINIDAD HACIA SUS SUSTRATOS QUE EL ACE-TP INDICANDO QUE LA SECUENCIA UNIDA A LA MEMBRANA INFLUYE EN LA ACTIVIDAD CATALITICA DEL ENZIMA.

Autor: RICHARDSON MICHELER RICARDO.
Año: 1987.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO DE BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR, FACULTAD DE CIENCIAS, UNIVERSIDAD AUTONOMA DE..

Resumen: LA RIBONUCLEASA A (RNASA A) REACCIONA CON 6-CLOROPURINA RIBOSA 5'MONOFOSFATO (CL6RMP) PARA DAR LUGAR A UN SOLO DERIVADO MAYORITARIO, O-II, MONOSUSTIUIDO EN LA LYS-1. LOS ESTUDIOS REALIZADOS CON EL O-II PERMITIERON POSTULAR UN MODELO DE INTERACCION ENTRE LA RNASA A Y EL RNA. LA PRESENCIA DE NUCLEOTIDOS NATURALES EN LA MEZCLA DE REACCION PRODUCE UNA INHIBICION DE LA TASA DE REACCION DEL CL6RMP SEGUN EL SIGUIENTE ORDEN: 3'AMP MAYOR QUE 5'AMP = 5'CMP MAYOR QUE 3'CMP, INDICANDO EL CARACTER DE MARCAJE POR AFINIDAD DE LA REACCION. EL ESTUDIO COMPARATIVO DE LA INTERACCION DE KA RNASA A, O-II Y D-E (ANALOGO DEL O-II SIN EL FOSFATO DEL MARCADOR) CON LOS NUCLEOTIDOS 3'AMP Y 5'AMP DEMUESTRAN QUE LOS PORCENTAJES DE INHIBICION OBSERVADOS PUEDEN SER INTERPRETADOS SEGUN EL GRADO DE OCUPACION DEL SUBCENTRO FIJADOR DEL FOSFATO P2, DONDE INTERACCIONA EL FOSFATO DEL CL6RMP PARA REACCIONAR CON LA LYS-1 (PARES ET AL 1980). EL PIRIDOXALFOSFATO (PLP) REACCIONA CON LA RNASA A PRODUCIENDO 3 DERIVADOS MODIFICADOS EN LAS LISINAS 1, 7 Y 41 RESPECTIVAMENTE. LOS ESTUDIOS DE INHIBICION Y CINETICOS REALIZADOS CON LOS DERIVADOS APOYAN TANTO EL MODELO DE INTERACCION RNASA A-RNA PROPUESTO COMO LA POSIBLE PRESENCIA DE LA LYS-7 EN P2. EL ESTUDIO POR HPLC DE LA REACCION ENTRE LA RNASA A Y CDH (1,2C-CLOHEXANODIONA) EN PRESENCIA Y AUSENCIA DE 3'AMP Y 5'AMP TAMBIEN APOYAN LA POSIBLE PRESENCIA DE LA ALG-10 EN P2 JUNTO CON LA LYS-7.