ENZIMOLOGIA, 6

Autor: PEREZ SUAREZ LUIS FERNANDO.
Año: 1995.
Universidad: SANTIAGO DE COMPOSTELA.
Centro de lectura: MEDICINA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR..

Resumen: SE DESARROLLO UNA METODICA DE INACTIVACION TERMICA DIFERENCIAL A PH CONTROLADO SIN PREDILUCION DE LA MUESTRA PARA LA DETERMINACION DE LAS ISOENZIMAS DE LA BETA-N-ACETILHEXOSAMINIDASA (HEX) EN SUERO UTILIZANDO EL SUBSTRATO CROMOGENICO 3,3'-DICLOROFENOLSULFONFTALEINIL-N-ACETIL-BETA-D-GLUCOSAMI NIDO (CPR-NAG). SE PUSO A PUNTO UNA TECNICA ELECTROFORETICA SENCILLA PARA LA SEPARACION DE LAS ISOENZIMAS DE LA HEX. SE DESARROLLO UN METODO TERMODINAMICO QUE PERMITE LA ESTIMACION DE LA COMPOSICION ISOENZIMATICA DE LA HEX EN DISTINTOS MEDIOS BIOLOGICOS A PARTIR DEL CALCULO DE LA ENERGIA DE ACTIVACION, ESTABLECIENDOSE UNA CORRECCION MATEMATICA PARA EL EFECTO INTERFERENTE DE LA UREA EN MUESTRAS DE ORINA. EL METODO ES MUY ADECUADO PARA EL ESTUDIO DE GRANDES GRUPOS POBLACIONALES PARA EL DIAGNOSTICO DE GANGLIOSIDOSIS GM2 Y DETECCION DE SUS PORTADORES. SE ESTUDIO EL COMPORTAMIENTO DE LA HEX Y SU COMPOSICION ISOENZIMATICA EN DISTINTOS MEDIOS BIOLOGICOS Y DIFERENTES SITUACIONES FISIOPATOLOGICAS: EN SUERO DE PACIENTES TRATADOS CON FARMACOS ANTIEPILEPTICOS INDUCTORES ENZIMATICOS HEPATOCITARIOS, EN PLASMA DE PACIENTES CON DISTINTAS HEPATOPATIAS, EN SUERO, SALIVA Y LEUCOCITOS DE EMBARAZADAS, EN ORINA DE RECIEN NACIDOS Y EN LCR Y SUERO DE PACIENTES CON ESCLEROSIS MULTIPLE.

Autor: PIERA VELAZQUEZ M. SONSOLES.
Año: 1995.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: AGROQUIMICA Y BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: INTENTANDO MIMETIZAR LAS CONDICIONES EN QUE SE ENCUENTRAN Y FUNCIONAN LAS PROTEINAS EN EL INTERIOR DE LAS CELULAS, SE DISOLVIO Y ESTUDIO EL COMPORTAMIENTO DE UNA ENZIMA HALOFILICA EN UN NUEVO MEDIO: LAS MICELAS INVERSAS. LA ENZIMA INVESTIGADA ES LA MALATO DESHIDROGENASA HALOFILICA Y COMO TAL NECESITA PARA SOBREVIVIR UN MEDIO CON ALTA CONCENTRACION SALINA. EL MEDIO MICELAS UTILIZADO FUE SURFACTANTE CTAB EN DISOLVENTE CICLOHEXANO CON 1-BUTANOL COMO COSURFACTANTE. SE INVESTIGARON LA INFLUENCIA DE FACTORES ESPECIFICOS DE LOS SISTEMAS MICELARES INVERSOS SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA. FACTORES COMO METODO DE INICIO DE LA REACCION, VALOR DE WO (RELACION ENTRE LAS CONCENTRACIONES MOLARES DE AGUA Y SURFACTANTE), CONCENTRACION DE SURFACTANTE Y CANTIDAD DE ENZIMA. SE REALIZO EL ESTUDIO CINETICO DE LA HMDH EN ESTE SISTEMA A VARIOS PHS Y TEMPERATURAS DE REACCION. Y POR ULTIMO SE COMPARO SU ESTABILIDAD EN MICELAS INVERSAS (DISUELTA EN TAMPON CON BAJA CONCENTRACION SALINA) CON LA ESTABILIDAD DE LA ENZIMA EN DISOLUCION ACUOSA A CONCENTRACION BAJA DE SAL.

Autor: ROBLEDO LUMBRERAS LAURA.
Año: 1995.
Universidad: ALCALA.
Centro de lectura: FARMACIA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA.

Resumen: LAS ENZIMAS EN MEDIOS ORGANICOS CON BAJO CONTENIDO EN AGUA PUEDEN ACTUAR TANTO EN REACCIONES DE HIDROLISIS COMO DE SINTESIS, CON GRAN SELECTIVIDAD. ES POR LO QUE, EN ESTE TRABAJO SE ESTUDIAN DE FORMA EXHAUSTIVA LOS ASPECTOS QUE REGULAN LA ACTIVIDAD DE LAS ISOLIPASAS A Y B DE CANDIDA RUGOSA Y DE LA LIPASA DE PSEUDOMONAS SP., TANTO CRUDA COMO PURIFICADA, EN SISTEMAS DE ESTAS CARACTERISTICAS -MICELAS INVERSAS-. LA CONCENTRACION DE SURFACTANTE, EL TAMAÑO DE LA MICELA (WO), EL PH, LA ENERGIA DE ACTIVACION Y LA HIDROFOBICIDAD SON ALGUNOS DE LOS ASPECTOS ESTUDIADOS. LA MAYOR INTERACCION CON LA INTERFASE DE LIPASAS HIDROFOBICAS FAVORECEN LA ACTIVIDAD HIDROLITICA DE ESTERES INSOLUBLES EN AGUA. LA MODIFICACION QUIMICA DE LA LIPASA MENOS HIDROFOBICA CON ACIDOS GRASOS AUMENTO LA HIDROFOBICIDAD DE LA PROTEINA Y POR CONSIGUIENTE SU EFICIENCIA CATALITICA EN PROCESOS HIDROLITICOS. EL FACTOR DE ACTIVACION ES DIRECTAMENTE PROPORCIONAL AL GRADO DE MODIFICACION. ESTE MISMO EFECTO SE OBSERVO CUANDO SE MODIFICO LA LIPASA DE PSEUDOMAS SP. CON POLIETILENGLICOL. UN EFECTO CONTRARIO APARECE EN LOS SISTEMAS MICELARES MIXTOS EN LOS QUE LA ADICION DE TWEEN-85 REDUCE LA EFICIENCIA CATALITICA APARENTE DE LA LIPASA NATIVA, PERO NO DE LA MODIFICADA, DADA LA MAYOR INTERACCION DEL POLIETILENGLICOL CON LA INTERFASE. POR OTRA PARTE, UNO DE LOS PRINCIPALES PROBLEMAS QUE OFRECEN LOS SISTEMAS MICELARES ES LA REDUCCION DE LA VIDA MEDIA DE LAS LIPASAS EN ESTOS SISTEMAS. EL ESTUDIO SISTEMATICO PERMITIO DETERMINAR QUE LA MAYOR INTERACCION ENTRE LA LIPASA Y LA INTERFASE DISMINUYE LA ESTABILIDAD DE ESTOS SISTEMAS. ES POR ELLO, QUE SE DISEÑARON ESTRATEGIAS QUE PERMITIERON MEJORAR LA ESTABILIDAD DE LAS LIPASAS EN MICELAS INVERSAS. LA MICROENCAPSULACION DE LAS LIPASAS EN MICELAS MEDIANTE POLIMERIZACION CON ACRILAMIDA Y POSTERIOR ENTRECRUZAMIENTO CON GLUTARALDEHIDO DIO RESULTADOS POSITIVOS.

Autor: SALGADO BENITO JESUS.
Año: 1995.
Universidad: VALENCIA .
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA INORGANICA.

Resumen: EL CENTRO METALICO DE LA AZURINA ES CARACTERIZADO A TRAVES DE LOS DERIVADOS DE NI (II) Y CO (II). ESTOS SE ESTUDIAN MEDIANTE ESPECTROSCOPIA UV-VIS EPR Y A PARTIR DE MEDIDAS MAGNETICAS, AUNQUE ES LA RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR DE PARAMAGNETICOS LA QUE PROPORCIONA MAYOR INFORMACION. LOS ESPECTROS DE RMN DE PROTON DE ESTOS DERIVADOS METALICOS PRESENTAN PATRONES CARACTERISTICOS SEGUN LAS PROPIEDADES DEL CENTRO METALICO. ASI LAS AZURINAS SILVESTRES DE NI (II) Y CO (II) DE LAS BACTERIAS PSEUDOMONAS AERUGINOSA Y ALCALIGENES DENITRIFICANS DAN LUGAR A ESPECTOS MUY SIMILARES, QUE SON A SU VEZ DIFERENTES DE LOS ESPECTROS CORRESPONDIENTES AL MUTANTE M121Q. LA ESTRUCTURA DE RAYOS X DE LA AZURINA DE NI (II) MUESTRA UN CENTRO METALICO TETRAEDRICO EN EL QUE LA GLY45 APARECE CLARAMENTE COORDINADA Y LA MET121 QUEDA POSIBLEMENTE FUERA DEL ENTORNO DE COORDINACION. SIN EMBARGO, LA MAGNITUD DE LOS DESPLAZAMIENTOS ISOTROPICOS DE LAS SEÑALES DE MET121 EN LAS AZURINAS DE NI (II) Y CO (II) PERMITE SUGERIR LA EXISTENCIA DE UNA DEBIL COORDINACION PARA ESTE RESIDUO.

Autor: SERRANO MORENO ANTONIO.
Año: 1995.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: CIENCIAS .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA CELULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR .

Resumen: EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL SE HA REALIZADO LA SOLUBILIZACION Y PURIFICACION A HOMOGENEIDAD DE DOS NADH-DESHIDROGENASAS A PARTIR DE MEMBRANA PLASMATICA DE RAIZ DE CEBOLLA (ALLIUM CEPA). LA DESHIDROGENASA I ES UN ENZIMA DE 27 KDA QUE PUEDE UTILIZAR NADH Y NADPH PARA REDUCIR DIVERSOS ACEPTORES, PRINCIPALMENTE QUINONAS. TAMBIEN REDUCE OXALACETATO, AUNQUE SOLO CON NADH. LA DESHIDROGENASA II, DE 31 KDA, ES ESPECIFICA PARA EL NADH, MOSTRANDO SU MAXIMA ACTIVIDAD CON FERRICIANURO. AMBAS DESHIDROGENASAS DIFIEREN EN CUANTO A SU PUNTO ISOELECTRICO Y SU SENSIBILIDAD A INHIBIDORES. SE DISCUTE LA POSIBILIDAD DE QUE LA DESHIDROGENASA I SEA UNA MALATA DESHIDROGENASA IMPLICADA EN PROCESOS DE ELONGACION CELULAR Y PROTECCION FRENTE A DIVERSOS IONES TOXICOS COMO EL ALUMINIO. LA DESHIDROGENASA II PUEDE ESTAR RELACIONADA CON LA REDUCCION DE HIERRO PREVIA A SU CAPTACION POR LAS RAICES.

Autor: VILLAHERMOSA JAEN M. LUISA.
Año: 1995.
Universidad: NAVARRA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA CELULAR.

Resumen: HEMOS PURIFICADO MEDIANTE CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD POR IONES METALICOS LA TRANSCRIPTASA INVERSA, SILVESTRE Y MUTANTES, DEL VIRUS DEL SIDA. MEDIANTE ENSAYOS DE ACTIVIDAD ENZIMATICA CONFIRMAMOS QUE LA ACUMULACION DE MUTACIONES SOBRE UNA MOLECULA DE ENZIMA NO TIENE PORQUE PROVOCAR UNA MAYOR RESISTENCIA. LA SENSIBILIDAD DE LA ENZIMA FRENTE A LOS INHIBIDORES NO NUCLEOSIDICOS DEPENDE DEL PATRON-CEBADOR UTILIZADO. HEMOS DESARROLLADO UN METODO PARA EVALUAR LA INTERACCION EN MEZCLAS QUE CONTIENEN INHIBIDORES TOTALES. TAMBIEN HEMOS DESCRITO LA UTILIDAD Y LAS LIMITACIONES DE LOS METODOS TRADICIONALMENTE UTILIZADOS. NINGUNO DE ELLOS ES ADECUADO PARA EVALUAR INTERACCION EN MEZCLAS CON INHIBIDORES PARCIALES, POR ELLO HEMOS AMPLIADO EL METODO PARA ANALIZAR DICHAS INTERACCIONES. HEMOS EVALUADO LA INTERACCION ENTRE INHIBIDORES NUCLEOSIDICOS ENTRE SI, NO NUCLEOSIDICOS ENTRE SI Y MEZCLAS DE AMBOS. ESTUDIAMOS LOS FACTORES QUE AFECTAN A LA INHIBICION DE LA TRANSCRIPTASA INVERSA POR TERMINADORES DE CADENA MEDIANTE ESTUDIOS CINETICOS "IN VITRO", DEMOSTRANDO QUE LA MAYOR EFECTIVIDAD DE COMBINACIONES EN LA INHIBICION DE LA REPLICACION VIRAL NO ES DEBIDA A QUE MUESTRAN UN EFECTO SINERGICO EN LA INHIBICION DE LA TRANSCRIPTASA INVERSA.

Autor: AGUDO AZCONA ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: EXTREMADURA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR Y GENETICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR (BIENIO 91/93).

Resumen: EN AGUA Y METANOL O ETANOL LA NUCLEOTIDO-PIROFOSFATASA (NP) CATALIZO LA FORMACION DE AMP Y SU ESTER METILICO O ETILICO (AMP-OME O AMP-OET). LA EFICACIA DEL ALCOHOL (EA) FUE INDEPENDIENTE DEL GRADO DE PURIFICACION DE LA ENZIMA Y VARIABLE EN FUNCION DEL SUSTRATO, PH, TEMPERATURA Y ESTADO OLIGOMERICO. EL SUSTRATO DIADENOSINA-PIROFOSFATO (APPA) FUE ALCOHOLIZADO CON ALTA EA Y ATP CON BAJA EA, MIENTRAS QUE CON P-NITROFENIL-DTMP NO SE DETECTO ALCOHOLISIS. LOS EFECTOS DEL PH Y TEMPERATURA SOBRE EA SE DEBEN A QUE LOS PERFILES DE PH-ACTIVIDAD Y LAS ENERGIAS DE ACTIVACION DE LAS REACCIONES DE HIDROLISIS Y METANOLISIS SON DIFERENTES. UN TRATAMIENTO QUE DISOCIA LA NP TETRAMERICA A DIMEROS DISMINUYO EA. SE PRESENTA UN MODELO CATALITICO DE LA NP COMO RESULTADO DE DOS MECANISMOS CON DIFERENTES ENERGIAS DE ACTIVACION, ESPECIFICIDADES DE AGENTE SOLVOLITICO, DEPENDENCIA O NO DE UN GRUPO ACIDO-BASE DE PKA BASICO Y FUNCIONALIDAD EN DISTINTOS ESTADOS OLIGOMERICOS. EN CONTRASTE, LA EA DE LA FOSFODIESTERASA DE VENENO DE SERPIENTE ES INDEPENDIENTE DE LOS FACTORES ANTERIORES. ASIMISMO, SE HA ENCONTRADO EN TUBERCULOS OTRA ENZIMA QUE CATALIZA METANOLISIS DE APPA, ESTA CON EA INDEPENDIENTE DE LA TEMPERATURA. SE DISCUTE LA APLICACION PRACTICA DE AMBAS ENZIMAS.

Autor: CABELLO HURTADO FRANCISCO.
Año: 1994.
Universidad: CORDOBA.
Centro de lectura: INGENIEROS AGRONOMOS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: DE LAS REACCIONES DE DEFENSA DE LAS PLANTAS FRENTE A PATOGENOS DESCRITAS, NOS HEMOS CENTRADO EN EL ESTUDIO, BAJO UN ENFOQUE DE BIOQUIMICA CLASICA, DE DOS ACTIVIDADES ENZIMATICAS: BETA-1,3-GLUCANASAS Y QUITINASAS, INTENTANDO ESTABLECER CORRELACIONES ENTRE AMBAS ACTIVIDADES Y LA RESISTENCIA NO-HUESPED Y HUESPED ESPECIFICA DEL GARBANZO A AISLADOS DE FUSARIUM OXYSPORUM NO PATOGENOS Y A DIFERENTES RAZAS DE FUSARIUM OXYSPORUM F.SP. CICERIS, RESPECTIVAMENTE. ASI MISMO, TAMBIEN SE HAN LLEVADO A CABO ESTUDIOS DE INDUCCION DE DICHAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS EN RESPUESTA AL TRATAMIENTO POR TROCEADO DEL TEJIDO VEGETAL Y CON DISTINTOS INDUCTORES DE TIPO QUIMICO, ASI COMO LA SEPARACION Y CARACTERIZACION PARCIAL DE LAS DISTINTAS FRACCIONES OBTENIDAS. DE ESTOS ESTUDIOS SE PUEDE CONCLUIR QUE: - AMBAS ACTIVIDADES SE ENCUENTRAN PRESENTES DE FORMA CONSTITUTIVA EN RAICES, TALLOS Y HOJAS DE GARBANZO. - AMBAS HIDROLASAS RESULTAN INCREMENTADAS TANTO EN LA INTERACCION NO-HUESPED COMO EN LA HUESPED-ESPECIFICA, SIENDO EL INCREMENTO CUANTITATIVAMENTE MAYOR EN LA PRIMERA QUE EN LA SEGUNDA, Y EN ESTE ULTIMO CASO, MAYOR EN LA COMPATIBLE QUE EN LA INCOMPATIBLE. - AMBAS ENZIMAS RESULTAN INCREMENTADAS TRAS LA FRAGMENTACION E INCUBACION CON ETEFON. - AL MENOS SEIS ISOFORMAS DE BETA-1,3- GLUCANASAS Y CINCO DE QUITINASAS, SE ENCUENTRAN PRESENTES EN TALLOS DE GARBANZO.

Autor: CASTILLO OLIVARES BARBERAN ANTONIO FERNANDO DEL.
Año: 1994.
Universidad: MALAGA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA, BIOLOGIA MOLECULAR Y QUIMICA ORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: METODOS EXPERIMENTALES EN BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR.

Resumen: LA TRANSFERENCIA DE ELECTRONES A TRAVES DE LA MEMBRANA PLASMATICA HA SIDO COMPROBADA EN TODAS LAS CELULAS ESTUDIADAS. HA SIDO RELACIONADA CON DIVERSAS FUNCIONES CELULARES DE LA IMPORTANCIA DE LA PROTECCION CONTRA LA PEROXIDACION LIPIDICA, CONTROL DEL CRECIMIENTO CELULAR, TRANSLOCACION DE PROTONES O TRANSPORTE DE AMINOACIDOS ENTRE OTROS. EL PRESENTE TRABAJO CONSTA DE CUATRO CAPITULOS: I) CARACTERIZACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA FERRICIANURO REDUCTASA EN CELULAS DE TUMOR ASCITICO DE EHRLICH Y EN VESICULAS DE MEMBRANA PLASMATICA ES UNA ACTIVIDAD TRANSMEMBRANAR SENSIBLE A PROTEOLISIS POR TRIPSINA, DE NATURALEZA GLICOPROTEICA. RESIDUOS DE HISTIDINA Y CISTEINA SON ESENCIALES EN EL MANTENIMIENTO DE LA ACTIVIDAD. II) PURIFICACION DE UNA PROTEINA DE 117 KDA DE MASA MOLECULAR APARENTE, FORMADA POR SUBUNIDADES DE 32 KDA DE MASA MOLECULAR APARENTE, RESPONSABLE DE LA REDUCCION DEL FERRICIANURO Y OXIDACION DEL NADH Y SENSIBLE AL ZN++. SE REALIZA UNA CARACTERIZACION CINETICA Y MOLECULAR DE LA PROTEINA PURIFICADA. III) SE ESTUDIAN LOS MECANISMOS DE CONTROL DE LA ACTIVIDAD DEL SRMP EN CELULA COMPLETA. EN ESTE CONTROL ESTAN IMPLICADOS PROTEINAS G, NUCLEOTIDOS CICLICOS (AMPC Y GMPC), CA++, DIFERENTES MECANISMOS DE FOSFORILACION Y DEFOSFORILACION Y LA CONCENTRACION EN H+. IV) SE ESTUDIA LA CORRELACION EXISTENTE ENTRE LA ACTIVIDAD DE LOS SRMP Y LA MALIGNIDAD CELULAR EN DIFERENTES LINEAS TUMORALES.

Autor: DELGADO MORAN M. BEGOÑA.
Año: 1994.
Universidad: SEVILLA.
Centro de lectura: BIOLOGIA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA VEGETAL Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: HEMOS ESTUDIADO EL EFECTO QUE LA ASIMILACION DE N Y EL ESTRES SALINO PRODUCE SOBRE EL TRANSPORTE FOTOSINTETICO DE E- Y LA ASIMILACION DE C EN HOJAS DE CEBADA Y GUISANTE. SE HAN ANALIZADO LAS MODIFICACIONES EN LA ACTIVIDAD FOTOSINTETICA PRODUCIDAS TRAS EL SUMINISTRO DE DISTINTAS FUENTES DE N A TRAVES DE LA CORRIENTE DE TRANSPIRACION DE LAS HOJAS ASI COMO LA INFLUENCIA DEL CULTIVO EN DISTINTAS FUENTES DE NITROGENO Y EN ESTRES SALINO SOBRE EL DESPRENDIMIENTO NETO DE O2, LA FIJACION NETA DE CO2 Y LA ACTIVIDAD FOSFOENOLPIRUVATOCARBOXILASA. LOS RESULTADOS OBTENIDOS PONEN DE MANIFIESTO QUE: 1) EL SUMINISTRO DE NITRATO, PERO NO DE AMONIO, ESTIMULA EL DESPRENDIMIENTO DE O2 A CO2 Y LUZ SATURANTES, LO CUAL INDICA QUE LA ASIMILACION DE NITRATO UTILIZA PODER ASIMILATORIO FOTOSINTETICO Y ESTIMULA EL FLUJO NO-CICLICO DE E-. 2) EL SUMINISTRO DE NITRATO (O AMONIO) A LA HOJA, ESTIMULA LA FIJACION DE CO2 A LUZ SATURANTE Y DISMINUYE LA SENSIBILIDAD A MALATO DE LA PEPC, INDICANDO UN AUMENTO EN LA CAPACIDAD FOTOSINTETICA POR ESTIMULACION DEL FLUJO DE CARBONO HACIA LA VIA GLUCOLITICA. 3) EL CULTIVO EN AMONIO O NITRATO AMONICO COMO FUENTE DE N AUMENTA LA FIJACION DE CO2, RESPECTO AL CULTIVO CON NITRATO. LAS PLANTAS CULTIVADAS CON AMONIO, PRESENTAN ASIMISMO, MENOR ACTIVIDAD PEPC. EL AUMENTO EN LA FIJACION DE CO2 OBSERVADO, SE DEBE PROBABLEMENTE AL AUMENTO EN LA TRANSLOCACION DE CARBOHIDRATOS DESDE LA HOJA HACIA LA RAIZ, LIBERANDO A LA FIJACION DE CO2 DE LA INHIBICION POR PRODUCTOS FINALES. 4) EL CULTIVO EN ESTRES SALINO DISMINUYE LA CAPACIDAD FOTOSINTETICA POR DISTINTOS FACTORES. ASI, EN LA VAR. "ATHOS" QUE ES MAS SENSIBLE AL ESTRES SALINO QUE LA VAR. "HASSAN", LAS LESIONES SE MANIFIESTAN PRIMARIAMENTE A NIVEL DE LOS FOTOSISTEMAS, MIENTRAS QUE EN LA VAR. "HASSAN" NO PARECE EXISTIR DAÑO A ESTE NIVEL.

Autor: FERRER CASANOVA JUAN.
Año: 1994.
Universidad: ALICANTE.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: AGROQUIMICA Y BIOQUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: LA GLUTAMATO DESHIDROGENASA NADP-DEPENDIENTE DEL HALOFILO EXTREMO HF. MEDITERRANEI ESTRUCTURALMENTE ES UN HEXAMERO, CON ALTO CONTENIDO DE AMINOACIDOS ACIDOS Y BAJO EN CUANTO A AMINOACIDOS BASICOS CON RESPECTO A SUS CONTRAPARTIDAS NO HALOFILICAS, PRESENTANDO UNA GRAN HOMOLOGIA EN EL EXTREMO N-TERMINAL CON OTRAS GLUTAMATO DESHIDROGENASAS NADP DEPENDIENTES. DESDE EL PUNTO DE VISTA CINETICO, SE PROPONE QUE EL ORDEN DE ACTUACION DE LA ENZIMA CON SUS SUSTRATOS ES SECUENCIAL ORDENADO EN LA REACCION DE AMINACION REDUCTORA EN AUSENCIA DE SAL, EN BASE A ESTUDIOS DE LA VARIACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA RESPECTO AL PH SE POSTULA UN MECANISMO CATALITICO DE ACTUACION DE LOS GRUPOS CATALITICOS POSIBLEMENTE IMPLICADOS EN EL CENTRO ACTIVO DE LA ENZIMA.

Autor: GIL DEL CASTILLO M. LUISA.
Año: 1994.
Universidad: MURCIA.
Centro de lectura: QUIMICA .
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR A PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EXISTEN MULTIPLES FACTORES QUE PUEDAN EFECTUAR LA FORMACION DE LOS GAMETOS, SU TRANSPORTE A TRAVES DEL TRACTO GENITAL, LA FERTILIZACION, POR LO TANTO ES DIFICIL EVALUAR LA FUNCION FERTILIZADORA DEL VARON.HASTA HOY, NO EXISTE EN EL EXAMEN BASICO DEL SEMEN UN PARAMETRO RELACIONADO CON LA MADUREZ SEXUAL Y SEA ESPECIFICO DEL TEJIDO GERMINAL. NUESTRO OBJETIVO ES EL ESTUDIO Y EVALUACION DE LA ACTIVIDAD LACTATO DESHIDROGENASA-C4 EN PLASMA SEMINAL, ESPERMATOZOIDES, POBLACIONES ESPERMATICAS Y BIOPSIAS TESTICULARES, COMPARANDO UN GRUPO CONTROL DE VARONES FERTILES FRENTE A UN GRUPO DE PACIENTES INFERTILES, ESTOS ULTIMOS CLASIFICADOS SEGUN CRITERIOS DE LA OMS (1992) EN FUNCION DE SU CONCENTRACION ESPERMATICA EN NORMOZZOSPERMICOS Y OLIGOZOOSPERMICOS. EL INCREMENTO DE ACTIVIDAD EN LOS PACIENTES INFERTILES (MUCHO MAS EVIDENTE EN LAS PACIENTES OLIGOZOOSPERMICOS) SUGIERE QUE LA ISOENZIMA LDH-C4 ES UN BUEN INDICE DE LA CALIDAD ESPERMATICA Y MARCADOR DEL ESTADO DE LA FUNCION GERMINAL, EVITANDO EN OCASIONES LA BIONSIA TESTICULAR.

Autor: GUBERN OLIVELLA GEMMA.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA CLINICA Y PATOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EL OBJETIVO DEL TRABAJO ERA LA PREPARACION Y CERTIFICACION DE UN MATERIAL DE REFERENCIA DE LA AMILASA INCLUIDO EN EL PROGRAMA DEL COMMUNITY BUREAU OF REFERENCE. ESTE MATERIAL PERMITIRA ARMONIZAR LAS MEDICIONES DE LA CONCENTRACION CATALITICA DE LA AMILASA EN LOS LABORATORIOS EUROPEOS. SE PURIFICARON 30 MG DE AMILASA CON UNA ACTIVIDAD ESPECIFICA DE 52,9 KU/G A PARTIR DE PANCREAS HUMANO. LA MASA MOLECULAR RELATIVA DE LA ENZIMA PURIFICADA ERA DE 57800 CON UN PUNTO ISOELECTRICO DE 7,1. SE SELECCIONO UNA MATRIZ EN LA QUE LA ENZIMA FUESE ESTABLE. SE PREPARO EL MATERIAL DE REFERENCIA DILUYENDOLO EN LA MATRIZ QUE CONTENIA TAMPON PIPES 25 MMOL/L, PH 7,0, NACL 50 MMOL/L, EDTA 0,5 MMOL/L, CACl2 1,5 MMOL/L Y ALBUMINA HUMANA 30 G/L Y SE LIOFILIZO. EL MATERIAL DE REFERENCIA ERA HOMOGENEO Y CONMUTABLE CON EL ENZIMA PRESENTE EN SUERO HUMANO. LA PERDIDA ANUAL DE ACTIVIDAD CATALITICA SE ESTIMO EN 0% A -20 GRADOS C. AL NO EXISTIR METODO DE REFERENCIA, SE SELECCIONO EL METODO QUE USA COMO SUSTRATO 2-CLORO-4-NITROFENIL-MALTOTRIOSIDO PARA LA ASIGNACION DEL VALOR AL MATERIAL DE REFERENCIA. SE OPTIMIZO ESTE METODO DE MEDIDA. EL VALOR CERTIFICADO A 37 GRADOS C DE CONCENTRACION CATALITICA OBTENIDO EN UN ESTUDIO INTERLABORATORIO CORRESPONDE A 555 U/L +- O U/L O 9,25 KAT/L+- O,17 KAT/L.

Autor: JUNCOSA GINESTA MIQUEL.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA I BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA.

Resumen: LA BETA-GLUCANASA DE BACILLUS LICHENIFORMIS ES UNA ENZIMA GLUCOHIDROLITICADE MARCADA ESPECIFICIDAD POR SU SUBSTRATO: EL BETA-GLUCANO DE CEBADA. ESTA PROTEINA PUEDE SER APLICADA EN DISTINTOS PROCESOS BIOTECNOLOGICOS IMPORTANTES: INDUSTRIA CERVECERA Y LA DE PIENSOS. EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA REALIZADO UN ESTUDIO DE ESTRUCTURA/FUNCION CONSISTENTE EN UNA SERIE DE MUTACIONES EN LOS RESIDUOS E Y D (YA QUE SUELEN SER LOS IMPLICADOS EN EL MECANISMO CATALITICO) POR SUS EQUIVALENTES ISOESTERICOS Y SIN CARGA (Q Y N). ELLOS HAN PERMITIDO DESTACAR EL PAPEL DE LOS RESIDUOS E138 Y E134, RESPECTIVAMENTE ACIDO GENERAL Y NUCLEOFILO DEL CENTRO ACTIVO. ESTOS RESULTADOS SON APLICABLES AL CONJUNTO DE ISOZIMAS DEL GENERO BACILLUS Y TAMBIEN A UN GRUPO DE BETA-1,3-GLUCANASAS (LAMINARINASAS) DEL MISMO GENERO.

Autor: LIZCANO DE VEGA JOSE MIGUEL.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOQUIMICA Y BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN LA PRESENTE TESIS DOCTORAL SE HA CARACTERIZADO BIOQUIMICAMENTE LA ACTIVIDAD AMINO OXIDASA SENSIBLE A LA SEMICARBAZIDA (SSAO) PRESENTE EN MICROSOMAS DE PULMON BOVINO. POR PRIMERA VEZ, SE HA DESARROLLADO UN METODO DE PURIFICACION QUE PERMITE OBTENER UNA PREPARACION PURA DE SSAO. ESTE ENZIMA POSEE UN PESO MOLECULAR DE 400 KD., ESTA CONSTITUIDO POR 3 SUBUNIDADES DE 100, 130 Y 170 KD., Y PRESENTA UNA GRAN HETEROGENEIDAD DE FORMAS DE DIFERENTE GRADO DE GLUCOSILACION. POSEE COFACTOR DE TIPO QUINONA Y 2 MOLES DE COBRE POR MOL DE ENZIMA, AUNQUE ESTE METAL NO PARECE INDISPENSABLE PARA EL MANTENIMIENTO DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA. ASI MISMO, LA DIGESTION TRIPTICA DEL ENZIMA, PREVIAMENTE DERIVATIZADO CON FENILHIDRAZINA, Y LA POSTERIOR CROMATOGRAFIA EN FASE REVERSA EN HPLC, PERMITIO OBTENER 2 PEPTIDOS QUE PRESENTARON EL COFACTOR DERIVATIZADO. DE SU COMPARACION CON LAS SECUENCIAS DE LOS BANCOS DE DATOS GENETICOS, ASI DE SU CARACTERIZACION MOLECULAR SE CONCLUYO QUE LA SSAO PARECE SER UNA PROTEINA ORIGINAL Y GENUINA.

Autor: LOPEZ DE LACEY ANTONIO.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE MADRID.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: BIOLOGIA MOLECULAR PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOLOGIA MOLECULAR.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HAN SINTETIZADO DISTINTOS DERIVADOS ASIMETRICOS FUNCIONALIZADOS DE VIOLOGENOS. ESTOS DERIVADOS SE HAN CARACTERIZADO ELECTROQUIMICAMENTE PARA COMPROBAR SI REUNIAN LAS PROPIEDADES NECESARIAS PARA ACTUAR COMO MEDIADORES REDOX DE REDUCTASAS. SE HAN PUESTO A PUNTO TRES METODOS DE INMOVILIZACION DE ESTOS VIOLOGENOS SOBRE ELECTRODOS. EN CADA UNO DE ESTOS METODOS SE HA ESTUDIADO LA COMPATIBILIDAD DEL METODO CON LA INCORPORACION DE ENZIMAS, LA TRANSFERENCIA ELECTRONICA ENTRE ELECTRODO Y ENZIMA A TRAVES DE LOS VIOLOGENOS INMOVILIZADOS Y LA DETECCION DEL SUSTRATO POR PARTE DEL ELECTRODO ENZIMATICO. LOS RESULTADOS OBTENIDOS INDICAN QUE SE HAN DESARROLLADO BIOSENSORES DE LAS FORMAS OXIDADAS DE PIRIDIN-NUCLEOTIDOS.

Autor: MANJABACAS TENDERO M. CARMEN.
Año: 1994.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FISICA E INGENIERIA QUIMICA.

Resumen: EN ESTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO UN MODELO GENERAL DE ACTIVACION DE ZIMOGENOS, QUE PUEDE CONSIDERARSE SUFICIENTEMENTE GENERAL COMO PARA INCLUIR UNA O MAS ETAPAS DE ACTIVACION DE ZIMOGENOS, ADEMAS DE POSIBLES ETAPAS DE INHIBICION (REVERSIBLE O IRREVERSIBLE). SE HAN OBTENIDO LAS ECUACIONES GENERALES APROXIMADAS CONCENTRACION-TIEMPO Y EL RESULTADO SE HA APLICADO A LA OBTENCION DE LAS CORRESPONDIENTES ESPECIES INVOLUCRADAS EN DOS EJEMPLOS CONCRETOS DE ACTIVACION DE ZIMOGENOS, QUE SE AJUSTAN DIRECTAMENTE O DESPUES DE ALGUNA MODIFICACION AL MODELO GENERAL ESTUDIADO. POR OTRO LADO SE HA ESTUDIADO UNA AUTOACTIVACION DE ZIMOGENOS DONDE EL ZIMOGENO Y EL INHIBIDOR COMPITEN POR EL SITIO ACTIVO DE LA PROTEASA. EL MODELO SE PRESENTA EN AUSENCIA Y EN PRESENCIA DE REACCION ACOPLADA, LA CUAL NOS PERMITE FACILITAR EL SEGUIMIENTO DEL PROCESO. PROCESOS COMO ESTOS SON DE GRAN INTERES FISIOLOGICO, PUESTO QUE ESTAN INVOLUCRADOS EN LA REGULACION DE LAS ENZIMAS DEL TRACTO GASTROINTESTINAL, COAGULACION SANGUINEA Y FIBRINOLISIS ENTRE OTROS.

Autor: MARTINEZ FERRER M. JOSE.
Año: 1994.
Universidad: VALENCIA .
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA INORGANICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA INORGANICA.

Resumen: EN EL PRESENTE TRABAJO SE HA ESTUDIADO LA FORMACION DE DIVERSOS COMPLEJOS ENZIMA-INHIBIDOR DE LAS ANHIDRASAS CARBONICAS DE COBALTO (II) Y DE NIQUEL (II) CON LOS ANIONES INORGANICOS Y SULFONAMIDAS. EN ESTE SENTIDO, SE HA ESTUDIADO LA INTERACCION DE COBCAII CON EL ANION PERCLORATO EN FUNCION DEL PH DETERMINANDOSE LAS CONSTANTES DE ESTABILIDAD DE LOS COMPLEJOS FORMADOS POR LAS FORMAS ACUO DEL ENZIMA. DEL ESTUDIO DE LA INTERACCION DE COBCAII CON LOS ANIONES SULFATO Y CLORURO, SE HAN OBTENIDO LAS CONSTANTES DE AFINIDAD. EN BASE A LA DEPENDENCIA DE LOS DESPLAZAMIENTOS ISOTROPICOS CON LA TEMPERATURA, VALORES DE T1 Y ABSORBANCIAS MOLARES, SE HAN ANALIZADO LAS GEOMETRIAS DE COORDINACION DE LOS COMPLEJOS FORMADOS. EL ESTUDIO DE NIBCA MEDIANTE ESPECTROSCOPIA 1H NMR Y UV-VIS HA PUESTO DE MANIFIESTO QUE EL ION NIQUEL SE ENCUENTRA UNIDO A TRES RESTOS DE HISTIDINA COMO EN EL ENZIMA NATIVO. LA NIBCA FORMA CON LOS ANIONES NITRATO, ACETATO, CIANATO, AZIDA Y DIVERSAS SULFONAMIDAS, COMPLEJOS DE ESTEQUIOMETRIA 1:1. SE HAN ASIGNADO LOS PROTONES DE LAS HISTIDINAS COORDINADAS AL ION METALICO POR 1H NOE.

Autor: MARTORELL PENA DANIEL.
Año: 1994.
Universidad: AUTONOMA DE BARCELONA.
Centro de lectura: CIENCIAS.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA PROGRAMA DE DOCTORADO: BIOTECNOLOGIA, BIOQUIMICA I DESENVOLUPAMENT DE PROCESSOS..

Resumen: EL TRABAJO DESCRITO EN LA MEMORIA DE ESTA TESIS CONTRIBUYE A LA MEJORA DE DISPOSITIVOS ANALITICOS A TRAVES DE UNA CONSTRUCCION ECONOMICA Y SIMPLE DE BIOSENSORES ELECTROQUIMICOS. EN UNA PRIMERA PARTE SE DESCRIBE LA FABRICACION Y EVALUACION DE SENSORES Y BIOSENSORES POTENCIOMETICOS. LA UTILIZACION DE "COMPOSITES" CONDUCTORES PERMITE LA CONSTRUCCION DE ELECTRODOS EN MULTIPLES CONFIGURACIONES (CONVENCIONAL, PARA SISTEMAS FIA, ETC.) Y SU UTILIZACION EN DISTINTAS POSICIONES (VERTICAL, HORIZONTAL, INVERTIDA, ETC.) Y SITUACIONES (VIBRACION, ROTACION, MICROGRAVEDAD, ETC.). CONJUNTAMENTE CON LA TECNOLOGIA DE MEMBRANAS SELECTIVAS DE IONES SE HAN CONSTRUIDO BIOSENSORES DE UREA Y DE PH. EL BIOSENSOR DE UREA SE HA ESTUDIADO EN UN SISTEMA CONVENCIONAL Y EN UN SISTEMA FIA. EL SENSOR DE PH DESARROLLADO CON ESTA TECNOLOGIA SE HA UTILIZADO COMO TRANSDUCTOR INTERNO PARA LA CONSTRUCCION DE UN BIOSENSOR DE ACETILCOLINESTERASA. EL INTERES EN LOS BIOSENSORES DE COLINESTERASA SE CENTRA PRINCIPALMENTE EN LA DETECCION INDIRECTA DE PESTICIDAS ORGANOFOSFORATOS Y CARBAMATOS, AMBOS INHIBIDORES IRREVERSIBLES DE DICHOS ENZIMAS. EN UNA SEGUNDA PARTE SE DESCRIBE EL DESARROLLO Y EVALUACION DE BIOSENSORES AMPEROMETRICOS DE COLINESTERASA BASADOS EN MATERIALES "BIOCOMPOSITES", RIGIDOS Y SUSCEPTIBLES DE SER PULIDOS. LOS BIOSENSORES DE ACETILCOLINESTERASA Y BUTIRILCOLINESTERASA CONSTRUIDOS SE UTILIZAN EN LA DETERMINACION DE PESTICIDAS. LOS MATERIALES UTILIZADOS PARA LA CONSTRUCCION DE DICHOS BIOSENSORES PERMITEN EL USO PROLONGADO DEL BIOSENSOR REALIZANDO UN LIGERO PULIDO DE SU SUPERFICIE. ESTA CARACTERISTICA EVITA EL REQUERIMIENTO DE REACTIVAR O DE REEMPLAZAR LA MEMBRANA ENZIMATICA DESPUES DE LA DETERMINACION DE PESTICIDAS.

Autor: MOLINA ALARCON MILAGROS.
Año: 1994.
Universidad: CASTILLA-LA MANCHA.
Centro de lectura: QUIMICA.
Centro de realización: DEPARTAMENTO: QUIMICA FISICA PROGRAMA DE DOCTORADO: QUIMICA FISICA E INGENIERIA QUIMICA.

Resumen: EN ESTA MEMORIA SE HA REALIZADO EL ANALISIS CINETICO CORRESPONDIENTE A TODO EL CURSO DE LA REACCION DE DOS MODELOS REPRESENTATIVOS DE CASCADAS ENZIMATICAS BICICLICAS CORRESPONDIENTES A LAS ABIERTAS Y A LAS CERRADAS. SE HAN OBTENIDO POR PRIMERA VEZ, LAS ECUACIONES QUE DAN LAS CONCENTRACIONES INSTANTANEAS DE LAS ESPECIES INVOLUCRADAS, VALIDAS PARA TODO EL CURSO DE LA REACCION, ES DECIR, DESDE SU INICIO HASTA QUE SE ALCANZA EL ESTADO ESTACIONARIO. ASI MISMO, EL ANALISIS ANTERIOR PERMITE OBTENER LAS EXPRESIONES DE LAS MODIFICACIONES FRACCIONALES INSTANTANEAS DE LAS ENZIMAS INTERCONVERTIBLES. SE HAN PROPUESTO Y DEFINIDO NUEVAS PROPIEDADES REGULADORAS (TIEMPO DE TRANSICION Y CAPACIDAD REGULADORA TOTAL) DE LAS ENZIMAS INTERCONVERTIBLES, ESTABLECIENDO LA INFLUENCIA DE LA CONCENTRACION DE LOS EFECTORES EN LAS ANTERIORES PROPIEDADES. POR OTRA PARTE, SE HA REALIZADO UN ANALISIS CINETICO MAS RIGUROSO QUE LOS YA EXISTENTES DEL ESTADO ESTACIONARIO DE LAS CASCADAS BICICLICAS CERRADAS, COMPROBANDOSE LA BUENA CONCORDANCIA DE NUESTROS RESULTADOS Y LOS OBTENIDOS MEDIANTE SIMULACION. FINALMENTE SE HA EXTRAPOLADO EL ANALISIS CINETICO REALIZADO PARA LAS CASCADAS BICICLICAS CERRADAS A LA CASCADA QUE MODULA LA ACTIVIDAD DE LA GLUTAMINA SINTETASA DE "ESCHERICHIA COLI".